Cucurbita Pepo L. Seeds का एक एथेनॉलिक अर्क क्रोनिक स्ट्रेस्ड चूहों में न्यूरोएंडोक्राइन व्यवधान को संशोधित करता है और सूजन मार्करों और HSP70 के अधिवृक्क अभिव्यक्ति को संशोधित करता है।

हैला एम. अलमोहाइमीद1, शेरीन हमीद2, हनन एस. सलीम3,4, अश्वाक एच. बटावी 5, जुहैर एम. मोहम्मदसालेह6, महा जमील बालगून7, सोद एस अली 8,9, सोद अल जौनी 9,10 और नसरा अयूब11*

1डिपार्टमेंट ऑफ बेसिक साइंस, कॉलेज ऑफ मेडिसिन, प्रिंसेस नूरा बिंत अब्दुलरहमान यूनिवर्सिटी (पीएनयू), रियाद, सऊदी अरब,

2 चिकित्सा ऊतक विज्ञान और कोशिका जीव विज्ञान विभाग, चिकित्सा संकाय, मंसौरा विश्वविद्यालय, मंसौरा, मिस्र,

3हिस्टोलॉजी विभाग, मेडिसिन के संकाय, मेनोफिया विश्वविद्यालय, शेबिन एलकौम, मिस्र,

4 बेसिक मेडिकल साइंसेज विभाग, उनैज़ा कॉलेज ऑफ मेडिसिन एंड मेडिकल साइंसेज, कासिम यूनिवर्सिटी, बुरादाह, सऊदी अरब,

5 जैविक विज्ञान विभाग, विज्ञान संकाय, किंग अब्दुलअज़ीज़ विश्वविद्यालय, जेद्दा, सऊदी अरब,

6 चिकित्सा प्रयोगशाला प्रौद्योगिकी विभाग, अनुप्रयुक्त चिकित्सा विज्ञान संकाय, तबुक विश्वविद्यालय, ताबुक, सऊदी अरब,

7 जैव रसायन विभाग, विज्ञान संकाय, किंग अब्दुलअज़ीज़ विश्वविद्यालय, जेद्दा, सऊदी अरब,

8विभाग, ऊतक विज्ञान और कोशिका जीव विज्ञान, चिकित्सा संकाय, असुइट विश्वविद्यालय, अस्युत, मिस्र,

9यूसेफ अब्दुल्लातिफ जमील भविष्यवाणी चिकित्सा अनुप्रयोगों के अध्यक्ष (YAJCPMA), चिकित्सा संकाय, किंग अब्दुलअज़ीज़ विश्वविद्यालय, जेद्दा, सऊदी अरब,

10हेमेटोलॉजी / बाल चिकित्सा ऑन्कोलॉजी विभाग, किंग अब्दुलअज़ीज़ विश्वविद्यालय अस्पताल (केएयूएच), चिकित्सा संकाय, किंग अब्दुलअज़ीज़ विश्वविद्यालय, जेद्दा, सऊदी अरब,

11 चिकित्सा ऊतक विज्ञान विभाग, चिकित्सा संकाय, डेमिएट्टा विश्वविद्यालय, दमिएटा, मिस्र

अधिक जानकारी के लिए: ali.ma@wecistanche.com

पार्श्वभूमि:कद्दू (कुकुर्बिता पेपो एल।) को एंटीऑक्सीडेंट, विरोधी भड़काऊ, विरोधी थकान, और एंटीड्रिप्रेसेंट जैसे प्रभाव होने के लिए वर्णित किया गया था।एड्रिनल ग्रंथिएक महत्वपूर्ण तनाव-प्रतिक्रियात्मक अंग है जो तनाव के दौरान होमोस्टैसिस को बनाए रखता है।

उद्देश्य:इस अध्ययन का उद्देश्य कुकुर्बिता के प्रशासन की प्रभावकारिता का आकलन करना हैपेपो एल। (सीपी) में व्यवहार, जैव रासायनिक, और संरचनात्मक परिवर्तनों को राहत देने में अर्कएड्रिनल ग्रंथिक्रोनिक अनपेक्षित माइल्ड स्ट्रेस (सीयूएमएस) के संपर्क में आने और इस प्रभाव के पीछे के तंत्र का पता लगाने के लिए प्रेरित किया। सामग्री और तरीके: चालीस नर एल्बिनो चूहों को 4 समूहों (एन -10) में विभाजित किया गया था: नियंत्रण, सीयूएमएस, फ्लूक्साइटीन-उपचार, और सीपी-उपचार समूह। प्रयोग के अंत में सीरम में व्यवहार परिवर्तन, कॉर्टिकोस्टेरोन स्तर, प्रो-इन्फ्लैमेटरी साइटोकिन्स टीएनएफ- और आईएल -6, और ऑक्सीडेंट / एंटीऑक्सीडेंट प्रोफाइल का मूल्यांकन किया गया था।अधिवृक्कग्रंथियों को हिस्टोपैथोलॉजिकल और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल मूल्यांकन के लिए संसाधित किया गया था। कस्पासे -3 और Ki67 और हीट शॉक प्रोटीन 70 (HSP70) की जीन अभिव्यक्ति का मूल्यांकन RT-PCR का उपयोग करके अधिवृक्क ग्रंथियों में किया गया था।

परिणाम:सीपी अर्क ने कॉर्टिकोस्टेरोन के स्तर को काफी कम कर दिया (पी < 0.001),गतिहीनता का समय (पी < 0.001),="" और="" अनुपचारित="" समूह="" की="" तुलना="" में="" सीयूएमएस-प्रेरित="" अवसाद="" से="" जुड़े="" सूजन="" और="" ऑक्सीडेटिव="" परिवर्तन।="" cp="" अर्क="" ने="" cums-="" प्रेरित="" को="" कम="">अधिवृक्कहिस्टोपैथोलॉजिकल परिवर्तन और काफी कम एपोप्टोसिस (पी < 0.001) और सीरम में काफी हद तक अपग्रेड किए गए एंटीऑक्सीडेंट स्तर।

निष्कर्ष:Cucurbita pepo L. ने पुराने तनाव-प्रेरित को प्रभावी ढंग से ठीक कियाव्यवहार, जैव रासायनिक, औरअधिवृक्कसंरचनात्मक परिवर्तन ज्यादातर इसके एंटीऑक्सिडेंट और विरोधी भड़काऊ प्रभाव के माध्यम से होते हैं।

कीवर्ड:कद्दू, तनाव, अवसाद, कस्पासे-3, ki67, Hsp70, एपोप्टोसिस

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परिचय

पूरी दुनिया में सभी उम्र के 264 मिलियन से अधिक लोग अवसाद से पीड़ित हैं (WHO, 2020)। उदास व्यक्ति का प्रदर्शन आमतौर पर स्कूल में, काम पर और परिवार में खराब होता है। अवसाद आत्महत्या का कारण बन सकता है; इसलिए, इसे 15- से 29- वर्ष के बच्चों (WHO, 2020) में मृत्यु का दूसरा प्रमुख कारण माना जाता है। इन घटनाओं के लिए उपयुक्त शारीरिक प्रतिक्रियाओं को सक्रिय करके स्तनधारी तनावपूर्ण घटनाओं से बच सकते हैं। अधिवृक्क ग्रंथि हाइपोथैलेमिक-पिट्यूटरी-एड्रेनोकोर्टिकल (एचपीए) अक्ष और सहानुभूति-एड्रेनोमेडुलरी अक्ष का हिस्सा है जो तनाव के दौरान होमोस्टैसिस को बनाए रखता है (उलरिच-लाई एट अल।, 2006)। यह बताया गया कि थर्मल तनाव के संपर्क में आने से अधिवृक्क प्रांतस्था (हुआंग एट अल।, 2001) में एचएसपी 70 की तीव्र अभिव्यक्ति होती है। ये प्रोटीन इंट्रासेल्युलर ट्रैफिकिंग, एंटीजन प्रेजेंटेशन, एपोप्टोसिस और कई अन्य क्रियाओं (खार एट अल।, 2001) को साझा करते हैं। यह वर्णित किया गया है कि बहिर्जात हार्मोन या अंतर्जात हार्मोन के साथ हस्तक्षेप, विकास की महत्वपूर्ण अवधि के दौरान, हाइपोथैलेमिक न्यूरोएंडोक्राइन सर्किट (गोर और पटिसौल, 2010) द्वारा विनियमित शारीरिक और व्यवहारिक मार्गों पर स्थायी प्रभाव डाल सकते हैं। एकीकृत शरीर विज्ञान की पूरी चौड़ाई को शामिल करने के लिए अंतःस्रावी व्यवधान की अवधारणा का विस्तार करने के लिए न्यूरोएंडोक्राइन व्यवधान का भी वर्णन किया गया था; इसलिए, यह हार्मोनल अपसेट (वे और ट्रूडो, 2011) से अधिक है। न्यूरोएंडोक्राइन विनियमन, चयापचय, और आहार / माइक्रोबायोटा में परिवर्तन को सूजन और अवसाद विकसित करने की प्रवृत्ति के लिए ट्रिगर माना जाता है (हुआंग एट अल।, 2019)। यह माना गया था कि अवसाद - न्यूरोसाइकिएट्रिक विकारों में से एक - और सूजन का दो-तरफ़ा संबंध है। जबकि अवसाद भड़काऊ प्रतिक्रियाओं को बढ़ावा देता है, सूजन अवसाद सहित न्यूरोसाइकिएट्रिक विकारों को बढ़ावा देती है (बाउर और टेक्सीरा, 2019)। फ्लुओक्सेटीन, एक क्लासिक एंटीडिप्रेसेंट, अवसाद के इलाज के लिए बाजार में उपलब्ध दवाओं में से एक है। इसे अब एक उभरता हुआ न्यूरोएंडोक्राइन विघटनकर्ता माना जाता है।

स्तनधारियों में मुख्य चिकित्सीय लक्ष्य के बजाय फ्लुओक्सेटीन का यह प्रभाव एक साइड इफेक्ट है (लियोन-ओलिया एट अल।, 2014)। इसलिए, न्यूरोएंडोक्राइन स्थिति पर बिना किसी दुष्प्रभाव के सुरक्षित एंटीडिप्रेसेंट की आवश्यकता है। कद्दू (कुकुर्बिता पेपो एल.) दुनिया भर में खेती की जाने वाली आर्थिक रूप से महत्वपूर्ण प्रजातियां हैं। उनके पास पोषण और स्वास्थ्य लाभ हैं क्योंकि वे फेनोलिक्स, फ्लेवोनोइड्स, अमीनो एसिड, कार्बोहाइड्रेट और विटामिन (वांग एट अल।, 2002) में समृद्ध हैं। कई शोध अध्ययनों से पता चला है कि कद्दू में व्यापक जैव-सक्रियताएं होती हैं, जैसे कि एंटीडायबिटिक, एंटीकैंसर, एंटीऑक्सिडेंट, एंटी-इंफ्लेमेटरी, एंटी-थकान, और एंटीडिप्रेसेंट जैसे प्रभाव (वांग एट अल।, 2012; झांग एट अल।, 2012; नाविरस्का-ओल्सज़ांस्का एट। अल।, 2013; किम एनआर एट अल।, 2016)। पारंपरिक चिकित्सा मुख्य रूप से आयुर्वेदिक प्रणाली और चीनी चिकित्सा में कद्दू के विभिन्न भागों का उपयोग किया जाता है, जिसमें फलों और बीजों का मांस भी शामिल है (पेरेज़ गुटिरेज़, 2016)। Sweetme Sweet कद्दू (SSP) और Cucurbita moschata Duch की अवसादरोधी प्रभावकारिता का पहले विवो अध्ययन में एक मजबूर तैराकी परीक्षण (FST) का उपयोग करके अवसाद के पशु मॉडल का परीक्षण किया गया था और इसकी तुलना फ्लुओक्सेटीन (किम एनआर एट अल।, 2016) से की गई थी। . अपेक्षाकृत हालिया समीक्षाओं में से एक ने संक्षेप में बताया कि कद्दू के बीज जैसे अवसादरोधी खाद्य पदार्थों को 47 प्रतिशत का एक अवसादरोधी भोजन स्कोर बताया गया था, जो इसके अवसादरोधी जैसा प्रभाव प्रदान करता है (लाचेंस और रैमसे, 2018)। हाल ही में, डॉटो और चाचा ने अवसाद पर कद्दू के बीजों के सुधारात्मक प्रभाव की पुष्टि करने के लिए अधिक पशु- और नैदानिक परीक्षण-आधारित शोध अध्ययन आयोजित करने का समर्थन किया (डोटो और चाचा, 2020)। ये रिपोर्ट एड्रेनल ग्रंथियों पर पुराने तनाव के प्रभाव को कम करने में कद्दू की प्रभावकारिता का परीक्षण करने के लिए उत्साहजनक थीं। इसलिए, यह अध्ययन कुकुर्बिता पेपो एल (सीपी) अर्क के मौखिक प्रशासन के प्रभाव का आकलन करने के लिए क्रोनिक अप्रत्याशित हल्के तनाव (सीयूएमएस) से प्रेरित व्यवहार, जैव रासायनिक और अधिवृक्क संरचना से राहत देने और इस प्रभाव के पीछे के तंत्र का पता लगाने के लिए किया गया था। .

सामग्री और तरीके

कद्दू का निष्कर्षण और खुराक

Cucurbita pepo L. (वाउचर नमूना: AQJ_95) सऊदी अरब के जेद्दा में स्थानीय बाजार से खरीदा गया था। किंग अब्दुलअज़ीज़ यूनिवर्सिटी के हर्बेरियम में हर्बेरियम और केएसए की वनस्पतियों के नमूनों का उपयोग करके उनकी पहचान की गई (चौधरी, 2001)। वाउचर के नमूने हर्बेरियम में जमा किए गए थे। CP की पहचान लेखकों द्वारा की गई थी और इसे किंग अब्दुलअज़ीज़ विश्वविद्यालय के विज्ञान संकाय के एक वनस्पतिशास्त्री द्वारा सत्यापित किया गया था। सीपी का निष्कर्षण पिछले अध्ययनों (वांग एट अल।, 2012) के अनुसार किया गया था। छिलके वाले कच्चे फलों को एक स्लाइसर का उपयोग करके काटा गया और एक लियोफिलाइज़र (FD5508; इलशिनबायोबेस कं, लिमिटेड, कोरिया) का उपयोग करके सुखाया गया और फिर एक विद्युत पीसने वाली मशीन का उपयोग करके कुचल दिया गया। पाउडर को एक 40-जाली वाली छलनी से गुजारा गया ताकि महीन पाउडर प्राप्त किया जा सके और एक एयरटाइट कंटेनर में रखा जा सके। सूखे पाउडर (50 ग्राम) को 80 प्रतिशत इथेनॉल के 450 मिलीलीटर के साथ मिलाया गया था और 1 दिन के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एक प्रकार के बरतन (जेएसआई -100 टी; जेएस रिसर्च इंक, कॉम्पैक्ट शेकिंग इनक्यूबेटर। कोरिया) में छोड़ दिया गया था और फिर दूसरे दिन रुई और फिल्टर पेपर से छान लिया। इथेनॉल निकालने के लिए इस निष्कर्षण प्रक्रिया को 37 डिग्री पर दो बार दोहराया गया था।

सीपी के घटकों की पहचान

पीई की रासायनिक संरचना का विश्लेषण गैस क्रोमैटोग्राफी GC-TSQ Evo 8 0 0 0 मास स्पेक्ट्रोमीटर (थर्मो साइंटिफिक, ऑस्टिन, TX, यूनाइटेड स्टेट्स) का उपयोग करके किया गया था, जिसमें प्रत्यक्ष केशिका स्तंभ TG-5MS ( 30 मीटर × 0.25 मिमी × 0.25 माइक्रोन फिल्म मोटाई)। कॉलम ओवन का तापमान शुरू में 50 डिग्री पर सेट किया गया था और फिर 5 डिग्री सेल्सियस/मिनट से 250 डिग्री सेल्सियस तक बढ़ा दिया गया था और 2 मिनट के लिए आयोजित किया गया था और फिर 25 डिग्री/मिनट तक 300 डिग्री के अंतिम तापमान में वृद्धि हुई और 2 मिनट के लिए आयोजित किया गया। इंजेक्टर और एमएस ट्रांसफर लाइन तापमान क्रमशः 270 और 260 डिग्री सेल्सियस पर रखा गया था; हीलियम का उपयोग वाहक गैस के रूप में 1 मिली/मिनट की निरंतर प्रवाह दर पर किया गया था। विलायक की देरी 4 मिनट थी, और 3 μl के पतला नमूनों को स्वचालित रूप से एक पीटीवी इंजेक्टर में स्प्लिटलेस मोड में जीसी के साथ युग्मित एक ऑटोसैम्पलर AS1300 का उपयोग करके इंजेक्ट किया गया था। EI मास स्पेक्ट्रा को पूर्ण स्कैन मोड में m/z 50-650 की सीमा से अधिक 70 eV आयनीकरण वोल्टेज पर एकत्र किया गया था। आयन स्रोत का तापमान 250 डिग्री पर सेट किया गया था। घटकों की पहचान उनके मास स्पेक्ट्रा की तुलना WILEY 09 और NIST 14 मास स्पेक्ट्रल डेटाबेस के साथ की गई थी, जिनका उपयोग किसी भी अर्क में अज्ञात घटकों की रासायनिक संरचना की पहचान और अध्ययन करने के लिए किया जाता है (विले, 2006; मिकाया एट अल।, 2014)। थर्मो साइंटिफिक™ Xcalibur™ 2.2 सॉफ्टवेयर का उपयोग करके गुणात्मक प्रकार में विश्लेषण किया गया था, और सभी मूल्यों को सापेक्ष प्रतिशत (अब्द अल-करीम एट अल।, 2016) में सूचित किया गया था।

प्रयोगात्मक परिरूप

इस अध्ययन को चिकित्सा संकाय, किंग अब्दुलअज़ीज़ विश्वविद्यालय, जेद्दा, केएसए (संदर्भ संख्या {0}}) में बायोमेडिकल रिसर्च एथिक्स कमेटी द्वारा अनुमोदित किया गया था। इस अध्ययन में, किंग फहद मेडिकल रिसर्च सेंटर (KFMRC) से 15 0-200 ग्राम वजन और 2-3 महीने की उम्र के चालीस नर अल्बिनो चूहों को प्राप्त किया गया था। प्रयोग शुरू करने से पहले, चूहों को 1 सप्ताह के लिए प्रयोगशाला स्थितियों के अनुकूल होने के लिए छोड़ दिया गया था। दस चूहों को नियंत्रण समूह के रूप में सौंपा गया था जिसे सीयूएमएस के संपर्क में नहीं छोड़ा गया था। अन्य तीस चूहों को 4 सप्ताह के लिए सीयूएमएस की प्रक्रिया के अधीन किया गया था जिसमें तनाव की आदत को रोकने के लिए दिन के दौरान अलग-अलग समय पर विभिन्न प्रकार के तनाव शामिल थे। CUMS प्रक्रिया को पिछले कार्यों (Ayuob et al।, 2016; Ali et al।, 2017) में पूरी तरह से वर्णित किया गया था और तालिका 1 में दिखाया गया था। CUMS के संपर्क में आने वाले चूहों को 3 समूहों (n 10) में विभाजित किया गया था। अनुपचारित समूह (सीयूएमएस) ने 2 सप्ताह के लिए वाहन 0.03 प्रतिशत कार्बोक्सिमिथाइल सेलुलोज (सीएमसी-ना) को गैवेज द्वारा प्राप्त किया। एफएलयू-उपचारित समूह को एफएलयू (डार अल दावा फार्मास्युटिकल्स कं, लिमिटेड, अम्मान, जॉर्डन) प्राप्त हुआ, जो औषधीय सत्यापन के लिए इस्तेमाल किया जाने वाला एक एंटीडिप्रेसेंट है, जो गैस्ट्रिक गैवेज (ली) द्वारा 20 मिलीग्राम / किग्रा की खुराक पर सीएमसी-ना 0.03 प्रतिशत में घुल जाता है। एट अल।, 2014)। सीपी-उपचारित समूह ने वांग एट अल के अनुसार 2 सप्ताह के लिए गैवेज द्वारा 100 मिलीग्राम / किग्रा की खुराक पर आसुत जल में भंग सीपी अर्क प्राप्त किया। (2012)।

व्यवहार परिवर्तन आकलन

चूहों पर सीयूएमएस के प्रभाव की पुष्टि करने के लिए 4 सप्ताह के बाद एफएसटी किया गया था (अली एट अल।, 2017)। इस परीक्षण के दौरान, प्रत्येक चूहे को 25 ± 2 डिग्री सेल्सियस पर 15 सेमी पानी के साथ एक कांच के बेलनाकार कंटेनर (ऊंचाई 20 सेमी, व्यास 14 सेमी) में रखा गया था। चूहे को व्यवहार सॉफ्टवेयर (नोल्डस सूचना प्रौद्योगिकी, एथोविज़न) का उपयोग करके 6 मिनट के लिए वीडियो टेप किया गया था। XT®), और 6 मिनट के दौरान गतिहीन बिताए गए कुल समय को एक तकनीशियन द्वारा प्रयोगात्मक समूहों के लिए नेत्रहीन मापा गया था। कुल समय, सेकंड में, बिना अंग आंदोलन के चूहों द्वारा बिताया गया, माउस को बचाए रखने के लिए आवश्यक मामूली आंदोलन को छोड़कर, 6 मिनट के दौरान "गतिशीलता समय" निर्धारित किया गया था।

Acteoside of Cistanche

जैव रासायनिक तकनीक

व्यवहार परीक्षण खत्म करने के चौबीस घंटे बाद, चूहों के इंट्रा-ऑर्बिटल साइनस से रक्त के नमूने लिए गए थे, जिन्हें 100 प्रतिशत ऑक्सीजन में 4 प्रतिशत आइसोफ्लुरेन (SEDICO फार्मास्युटिकल्स कंपनी, काहिरा, मिस्र) के साथ संवेदनाहारी किया गया था। उसके बाद, गर्भाशय ग्रीवा की अव्यवस्था से चूहों को इच्छामृत्यु दी गई। सीरम प्राप्त करने के लिए रक्त के नमूनों को 3, 000 आरपीएम पर 15 मिनट के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर सेंट्रीफ्यूज किया गया और जैव रासायनिक मूल्यांकन के लिए −18 डिग्री सेल्सियस पर रखा गया। निर्माता के निर्देशों के अनुसार एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख किट का उपयोग करके कॉर्टिकोस्टेरोन (एएलपीसीओ डायग्नोस्टिक्स, ऑरेंजबर्ग, एनवाई, संयुक्त राज्य अमेरिका) के स्तर का मूल्यांकन किया गया था। निर्माता के निर्देशों के अनुसार, TNF- और IL -6 (क्वांटकिन आर एंड डी सिस्टम, यूएसए किट) का मूल्यांकन एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख का उपयोग करके किया गया था। प्रत्येक नमूने का ऑप्टिकल घनत्व 450 एनएम पर सेट एक माइक्रोप्लेट एलिसा रीडर के साथ डुप्लिकेट में निर्धारित किया गया था। थियोबार्बिट्यूरिक एसिड रिएक्टिव पदार्थ (टीबीएआरएस) परख किट (बायोडायग्नॉस्टिक; मिस्र) का उपयोग 535 एनएम (गमाल एट अल।, 2018) पर malondialdehyde (एमडीए) स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से स्तर को मापने के लिए किया गया था। सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज (एसओडी) का स्तर एसओडी परख किट (बायोडायग्नोस्टिक; मिस्र) (पैकर, 2002) का उपयोग करके मापा गया था। ग्लूटाथियोन पेरोक्सीडेज (GPX) स्तर का आकलन GPX किट (रैंडॉक्स लैब्स, क्रुमलिन, यूनाइटेड किंगडम) का उपयोग करके किया गया था। उत्प्रेरित (कैट) की गतिविधि की मात्रा निर्धारित करने के लिए, परख किट (बायोडायग्नोस्टिक; मिस्र) का उपयोग करके परख और सभी नमूनों के लिए एक अंशांकन वक्र उत्पन्न किया गया था। विधि पहले वर्णित है (जमाल एट अल।, 2018)।

मात्रात्मक वास्तविक समय पीसीआर

ऊतक के नमूनों से आरएनए निष्कर्षण TriFast ™ अभिकर्मक (PeqLab, जर्मनी, कैट नंबर: {0}}) का उपयोग करके किया गया था, जैसा कि निर्माता के प्रोटोकॉल में वर्णित है। शुद्ध आरएनए की सांद्रता का अनुमान नैनोड्रॉप 2000c स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (थर्मो साइंटिफिक, यूनाइटेड स्टेट्स) का उपयोग करके लगाया गया था। प्रत्येक नमूने से निकाले गए आरएनए को निर्माता के निर्देश का पालन करते हुए RT-qPCR (बायोलिन यूएसए इंक, यूनाइटेड स्टेट्स, कैट नंबर: BIO -65053) के लिए SensiFAST ™ cDNA सिंथेसिस किट का उपयोग करके रिवर्स ट्रांसकोड किया गया था। संश्लेषित सीडीएनए को क्यूआरटी-पीसीआर के उपयोग तक -80 डिग्री पर संग्रहीत किया गया था। क्यूआरटी-पीसीआर प्रतिक्रियाओं को एप्लाइड बायोसिस्टम्स 7500 रीयल-टाइम पीसीआर डिटेक्शन सिस्टम (लाइफ टेक्नोलॉजी) पर SensiFAST ™ SYBR लो-आरओएक्स किट (बायोलिन यूएसए इंक, यूनाइटेड स्टेट्स, कैट नंबर: बीआईओ -94002) का उपयोग करके किया गया था। , संयुक्त राज्य अमेरिका)। इस अध्ययन में प्रयुक्त चूहों के लिए जीन-विशिष्ट प्राइमरों को प्राइमर3 सॉफ्टवेयर (v.0.4.0) द्वारा डिजाइन किया गया था, और एनसीबीआई/प्राइमर-ब्लास्ट प्रोग्राम का उपयोग करके उनकी विशिष्टता की जांच की गई थी। प्राइमर तब विलोफोर्ट ™ (यूनाइटेड किंगडम) से खरीदे गए थे। प्राइमर थे GAPDH (5′-TGCACCACCAACTGCTTAGC-3′, 5′-GGC ATGGACTGTGGTCATGAG-3′), कस्पासे-3 (आगे 5- TGT ATGCTTACTCTACCGCACCCG -3, रिवर्स 5-GCGCAAAGT GACTGGATGAACC-3), HSP70 (5′-ACGAGGGTCTCAAGG GCAAG-3′, 5′-CTCTTTCTCAGCCAGCGTGTTAG-3′)। Ki67 (आगे 5-AGAAGAGCCCACAGCACAGAGAA-3, उल्टा 5-AGAAGAGCCCACAGCACAGAGAA 3)। पीसीआर मिश्रण निम्नानुसार तैयार किया गया था: 10 μl SensiFASTTM SYBR लो-आरओएक्स मिश्रण, 0.8 μl आगे प्राइमर, 0.8 μl रिवर्स प्राइमर, 2 μl टेम्पलेट सीडीएनए, और 6.4 μl न्यूक्लियस-मुक्त पानी। प्रतिक्रिया मिश्रण को एक थर्मल साइक्लर में स्थानांतरित किया गया था जिसे पहले 2 मिनट के लिए 95 डिग्री पर रखने के लिए प्रोग्राम किया गया था, उसके बाद 15 एस के लिए 95 डिग्री के 40 चक्र और फिर 30 एस के लिए 60 डिग्री। प्रत्येक प्रयोग में बिना किसी टेम्पलेट वाली एक नकारात्मक नियंत्रण प्रतिक्रिया चलाई गई। पीसीआर उत्पादों की विशिष्टता को साबित करने के लिए पिघलने की अवस्था का विश्लेषण किया गया था, और प्रत्येक प्रतिक्रिया के लिए सीटी मूल्य प्रवर्धन भूखंडों से प्राप्त किया गया था। ऊतक के नमूनों में प्रत्येक जीन अभिव्यक्ति के लिए सापेक्ष परिमाणीकरण की गणना आंतरिक नियंत्रण जीन के रूप में GAPDH के साथ तुलनात्मक सीमा (ΔΔCt) विधि का उपयोग करके की गई थी। समग्र गुना परिवर्तन के लिए, इसे 2−ΔΔCt अंकगणितीय सूत्र द्वारा परिकलित और रैखिक किया गया था।

हिस्टोलॉजिकल तकनीक

प्रयोग के अंत में और चूहों को बेहोश करने के बाद, पेट को खोल दिया गया और दाहिनी अधिवृक्क ग्रंथि को विच्छेदित कर दिया गया। पैराफिन ब्लॉक प्राप्त करने के लिए, 10 प्रतिशत तटस्थ बफर फॉर्मेलिन में अधिवृक्क ग्रंथि का निर्धारण और आगे की प्रक्रियाएं की गईं। 4- माइक्रोन मोटाई के पैराफिन वर्गों को हेमटॉक्सिलिन और ईओसिन (एच एंड ई) के साथ तैयार और दाग दिया गया था। इसके अलावा, अन्य पैराफिन वर्गों को स्ट्रेप्टाविडिन-बायोटिन-पेरोक्सीडेज तकनीक का उपयोग करके प्रतिरक्षाविज्ञानी रूप से दाग दिया गया था। स्लाइड्स को रात भर 4 डिग्री पर इनक्यूबेट किया गया, और फिर उन्हें सेल प्रसार के प्रदर्शन के लिए मोनोक्लोनल एंटी-की67 (डको साइटोमेशन, यूनाइटेड स्टेट्स, कमजोर पड़ने पर 1:1, 000) के साथ इनक्यूबेट किया गया। इसके अलावा, एपोप्टोसिस का पता लगाने के लिए पॉलीक्लोनल एंटी-कस्पेज़ -3 एंटीबॉडी (सांता क्रूज़ बायोटेक्नोलॉजी, यूनाइटेड स्टेट्स, कमजोर पड़ने पर 1:1, 000) का उपयोग किया गया था। हीट शॉक प्रोटीन -70 (HSP70) (डको, कार्पिनटेरिया, सीए, संयुक्त राज्य अमेरिका, 1:1, 000) के खिलाफ एक पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी का भी उपयोग किया गया था। डाको धुंधला प्रणाली से संबंधित बायोटिनाइलेटेड संयुग्मित माध्यमिक एंटीबॉडी का उपयोग किया गया था। केवल द्वितीयक एंटीबॉडी से सना हुआ स्लाइड्स का उपयोग नकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था। नाभिक को हेमटॉक्सिलिन के साथ उलट दिया गया था। ब्राउन साइटोप्लाज्मिक धुंधला हो जाना एक सकारात्मक प्रतिक्रिया माना जाता था। एक डिजिटल कैमरा और एक कंप्यूटर से जुड़े ओलंपस माइक्रोस्कोप बीएक्स -51 (ओलंपस) का उपयोग करके दाग वाले वर्गों की जांच की गई और उनकी तस्वीरें खींची गईं। प्रो प्लस इमेज एनालिसिस सॉफ्टवेयर द्वारा एंटीबॉडी इम्युनोएक्टिविटी का अर्धवार्षिक विश्लेषण किया गया था। इम्युनोपोसिटिव प्रतिक्रिया के प्रतिशत क्षेत्र का मूल्यांकन 30 क्षेत्रों में × 400 आवर्धन पर किया गया था। सकारात्मक कोशिकाओं को प्रति 1.0 मिमी 2 क्षेत्र में गिना गया था, जैसा कि झोउ एट अल द्वारा वर्णित है। (2016)। प्रत्येक स्लाइड से कम से कम पांच क्षेत्रों की जांच की गई, और प्रत्येक जानवर के लिए माध्य की गणना की गई। मॉर्फोमेट्रिक विश्लेषण के लिए, प्रत्येक जानवर (आवर्धन × 100) में चार वर्गों की जांच की गई। अधिवृक्क ग्रंथि के विभिन्न क्षेत्रों की मोटाई माइक्रोमीटर में मापी गई। अधिवृक्क प्रांतस्था की मोटाई मज्जा और अधिवृक्क कैप्सूल के बीच की दूरी को एक सीधी रेखा में मापकर प्राप्त की गई थी, अधिवृक्क प्रांतस्था के प्रत्येक चतुर्थांश में एक माप लिया जाता है।

Echinacoside of Cistanche

सांख्यिकीय विश्लेषण

सामाजिक विज्ञान (एसपीएसएस) संस्करण 16 के लिए सांख्यिकीय पैकेज द्वारा व्यवहारिक, जैव रासायनिक और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल डेटा का विश्लेषण किया गया था। अध्ययन चर दो स्वतंत्र कारकों से प्रभावित थे: तनाव जोखिम और उपचार। इसलिए, बोनफेरोनी पोस्ट हॉक पर आधारित मिश्रित-मॉडल टू-वे एनोवा का उपयोग करके विश्लेषण किया गया था। सांख्यिकीय महत्व p < 0.05="" पर="" माना="" जाता="">

परिणाम

व्यवहार परिणाम

एफएसटी के दौरान गतिहीनता का समय सीयूएमएस समूह में नियंत्रण की तुलना में काफी अधिक (पी 0.03) था, जबकि सीयूएमएस समूह ( चित्रा 1 ए ) की तुलना में एफएलयू- और सीपी उपचारित समूहों में यह काफी कम था।

GC-MS का उपयोग करके CP निकालने के विश्लेषण के परिणाम

सीपी में पाए जाने वाले मुख्य यौगिकों में मुख्य रूप से ओलिक एसिड (लगभग 56 प्रतिशत), पामिटिक एसिड (लगभग 8.9 प्रतिशत), लिनोलेनिक एसिड 3.5 प्रतिशत, और लिनोलिक एसिड 2.8 प्रतिशत के अलावा कई अन्य यौगिक शामिल हैं (तालिका 2; चित्र 2)। सीपी के यौगिकों में एक सूजन-रोधी प्रभाव होने की सूचना मिली थी, ओलिक एसिड, पामिटिक एसिड, लिनोलेनिक एसिड, बेटुलिन और लिनोलिक एसिड हैं, जबकि एक एंटीऑक्सिडेंट प्रभाव वाले लोग पामिटिक एसिड और 10-ऑक्टाडेसेनोइक एसिड हैं। , और मिथाइल एस्टर।

जैव रासायनिक मूल्यांकन

सीरम में कॉर्टिकोस्टेरोन का स्तर

नियंत्रण चूहों की तुलना में सीयूएमएस के संपर्क में आने वाले अनुपचारित चूहों में कॉर्टिकोस्टेरोन का स्तर काफी बढ़ गया (पी <{{0}.001), जबकि एफएलयू और सीपी के साथ इलाज करने वालों ने एक महत्वपूर्ण कमी दिखाई (पी <0.001) सीरम कॉर्टिकोस्टेरोन स्तर में।

टीएनएफ- और आईएल-6 सीरम में स्तर

प्रयोग के अंत में, सीरम टीएनएफ- और आईएल - 6 के आकलन से पता चला कि वे सीयूएमएस समूह में काफी ऊंचा (पी <0.001) थे, जबकि उन्होंने एक दिखाया सीयूएमएस (आंकड़े 1 सी, डी) के संपर्क में आने वाले अनुपचारित चूहों की तुलना में एफएलयू- और सीपी-उपचारित समूहों में महत्वपूर्ण कमी (पी <0.001)।

सीरम में एमडीए, एसओडी, जीपीएक्स और कैट स्तर

यह देखा गया कि सीरम एमडीए का स्तर नियंत्रण चूहों की तुलना में सीयूएमएस समूह में काफी अधिक (पी <{0}}.001) था,="" जबकि="" उसमें="" सीयूएमएस="" के="" संपर्क="" में="" आने="" वाले="" अनुपचारित="" चूहों="" की="" तुलना="" में="" सीपी-उपचारित="" समूह="" काफी="" कम="" थे।="" एफएलयू="" प्रशासन="" सीयूएमएस="" (चित्रा="" 3ए)="" के="" संपर्क="" में="" आने="" वाले="" चूहों="" में="" एमडीए="" स्तर="" को="" महत्वपूर्ण="" रूप="" से="" कम="" नहीं="" कर="" सका।="" इसके="" विपरीत,="" cums="" समूह="" के="" सीरम="" में="" sod,="" gpx="" और="" cat="" का="" स्तर="" नियंत्रण="" समूह="" के="" सीरम="" की="" तुलना="" में="" काफी="" कम="" (p=""><0.001, p=""><0.001, p="" 0.002)="" था,="" जबकि="" उनके="" स्तर="" में="" उल्लेखनीय="" वृद्धि="" देखी="" गई।="" सीयूएमएस-उजागर="" समूह="" की="" तुलना="" में="" सीपी-उपचारित="" समूह="" में।="" flu="" प्रशासन="" cums="" (आंकड़े="" 3b-d)="" के="" संपर्क="" में="" आने="" वाले="" चूहों="" में="" sod,="" gpx="" और="" cat="" को="" महत्वपूर्ण="" रूप="" से="" नहीं="" बढ़ा="">

Ki67, Caspase-3, और HSP70 . की जीन अभिव्यक्ति

आरटी-पीसीआर ने नियंत्रण समूह की तुलना में सीयूएमएस समूह के अधिवृक्क ग्रंथियों में नगण्य उच्च Ki67 जीन अभिव्यक्ति का खुलासा किया, जबकि एफएलयू- और सीपी-उपचारित समूहों ने सीयूएमएस-उजागर समूह (चित्रा 3ई) की तुलना में काफी उच्च अभिव्यक्ति दिखाई। . कस्पासे -3 के संबंध में, नियंत्रण समूह की तुलना में CUMS समूह की अधिवृक्क ग्रंथियों में इसकी जीन अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि हुई थी (p <0.001), जबकि="" flu-="" और="" सीपी-उपचारित="" समूहों="" ने="" सीयूएमएस-उजागर="" समूह="" की="" तुलना="" में="" उल्लेखनीय="" कमी="" दिखाई="" (चित्र="" 3एफ="" जब="" यह="" एचएसपी70="" जीन="" अभिव्यक्ति="" की="" बात="" आती="" है,="" तो="" इसने="" सीयूएमएस="" समूह="" की="" अधिवृक्क="" ग्रंथियों="" की="" तुलना="" में="" काफी="" अधिक="" (पी=""><0.001) स्तर="" दर्ज="" किया।="" नियंत्रण="" समूह,="" जबकि="" flu="" और="" cp-उपचारित="" समूहों="" में="" cums-उजागर="" समूह="" (चित्र="" 3g)="" की="" तुलना="" में="" नगण्य="" कमी="" देखी="">

हिस्टोपैथोलॉजिकल असेसमेंट

नियंत्रण चूहों के अधिवृक्क ग्रंथियों में कॉर्टेक्स की संरक्षित वास्तुकला के साथ एक अक्षुण्ण संरचना होती है जिसमें ज़ोना ग्लोमेरुलोसा, ज़ोना फ़ासीकुलता, और ज़ोना रेटिकुलरिस के साथ-साथ मज्जा (चित्र 4) शामिल हैं। सीयूएमएस-उजागर चूहों की अधिवृक्क ग्रंथियों ने जेडजी, जेडएफ, और जेडआर में स्पष्ट टीकाकरण और पतित नाभिक के साथ कई कोशिकाओं को दिखाया और कभी-कभी कैप्सूल और संयोजी ऊतक ट्रेबेकुले में मध्यम मोटाई के साथ गहरे दाग वाले नाभिक होते हैं। ZR की कई कोशिकाएँ भूरे रंग के लिपोफ़सिन पिगमेंट के साथ गहरे रंग की दिखाई दीं। दूसरी ओर, सीपी उपचारित चूहों की अधिवृक्क ग्रंथियों ने कम स्पष्ट रूप से रिक्त कोशिकाओं और जेडजी में गहरे दाग वाले नाभिक दिखाए, और जेडएफ और जेडआर ने कुछ अंधेरे कोशिकाओं (चित्रा 4) का खुलासा किया।

1(1)

2(1)

मॉर्फोमेट्रिक माप से पता चला है कि प्लम के संपर्क में आने के बाद ZG और ZR की मोटाई में मामूली वृद्धि देखी गई, जबकि क्रमशः FLU- और CP- उपचारित समूहों में उनकी वृद्धि हुई थी। ZF की मोटाई के संबंध में, यह CUMS-उजागर समूह में काफी बढ़ गया था, और इसे और बढ़ा दिया गया था, लेकिन अनुपचारित CUMS समूह की तुलना में FLU- और CP उपचारित समूहों में नगण्य रूप से। यह निर्धारित करने के लिए कि क्या सेलुलर हाइपरप्लासिया अधिवृक्क ग्रंथि के एक विशिष्ट उप-क्षेत्र तक सीमित था, Ki67 (विभाजित सेल के मार्कर) के लिए इम्यूनोहिस्टोकेमिकल लेबलिंग का उपयोग किया गया था। CUMS के संपर्क में आने के बाद ZF में Ki67-पॉजिटिव प्रोलिफ़ेरेटिंग सेल्स (p <0।0{{10}}1) की="" संख्या="" में="" काफी="" वृद्धि="" हुई="" थी।="" इलाज="" न="" किए="" गए="" सीयूएमएस="" समूह="" की="" तुलना="" में="" एफएलयू="" और="" सीपी="" के="" साथ="" उपचार="" में="" काफी="" वृद्धि="" हुई="" है।="" हालाँकि,="" zg="" और="" zr="" में="" प्रोलिफ़ेरेटिंग="" कोशिकाओं="" की="" संख्या="" में="" नगण्य="" वृद्धि="" हुई="" थी="" और="" नियंत्रण="" समूह="" की="" तुलना="" में="" cums="" समूह="" के="" मज्जा="" में="" नगण्य="" रूप="" से="" कमी="" आई="" थी,="" flu="" और="" cp="" के="" साथ="" उपचार="" ने="" zg="" (p="" {{19)="" में="" प्रोलिफ़ेरेटिंग="" कोशिकाओं="" की="" संख्या="" में="" उल्लेखनीय="" रूप="" से="" वृद्धि="" की।="" }}.001,="" p="" 0.003),="" zr="" (p=""><0.001) और="" मेडुला="" अनुपचारित="" cums="" समूह="" की="" तुलना="" में="" (आंकड़े="" 4,="" 5)।="" कस्पासे="" -3="" का="" उपयोग="" करके="" इम्यूनोहिस्टोकेमिकल="" धुंधला="" हो="" जाना="" एपोप्टोसिस="" (चित्र="" 6)="" का="" आकलन="" करने="" के="" लिए="" किया="" गया="" था।="" यह="" देखा="" गया="" कि="" नियंत्रण="" समूह="" की="" तुलना="" में="" 4="" सप्ताह="" के="" लिए="" सीयूएमएस="" के="" संपर्क="" में="" आने="" के="" बाद="" ग्रंथि="" के="" सभी="" क्षेत्रों="" में="" कैस्पेज़="" -3="" अभिव्यक्ति="" का="" प्रतिशत="" क्षेत्र="" काफी="" बढ़="" गया="" (पी=""><0.001)। cp-उपचार="" समूह="" ने="" cums="" समूह="" (आंकड़े="" 5,="" 6)="" की="" तुलना="" में="" zg="" (p=""><0.001), zf,="" और="" मज्जा="" में="" कस्पासे="" -3="" अभिव्यक्ति="" में="" उल्लेखनीय="" कमी="" दिखाई।="" नियंत्रण="" समूह="" की="" तुलना="" में="" कॉर्टेक्स="" के="" सभी="" क्षेत्रों="" के="" साथ-साथ="" cums="" समूह="" के="" अधिवृक्क="" ग्रंथि="" के="" मज्जा="" में="" hsp70="" अभिव्यक्ति="" का="" क्षेत्र="" प्रतिशत="" काफी="" बढ़="" गया="" (p=""><0.001), जबकि="" यह="" सभी="" क्षेत्रों="" में="" नगण्य="" रूप="" से="" कम="" हो="" गया="" था="" और="" cums="" समूह="" (आंकड़े="" 5,="" 6)="" की="" तुलना="" में="" flu-="" और="" cp-="" उपचारित="" समूहों="" का="">

Flavonoids of Cistanche

बहस

आधुनिक समाज स्पष्ट रूप से तनाव से भरा है जो दैनिक समस्याओं, स्वास्थ्य देखभाल और नौकरी से संबंधित मुद्दों से उत्पन्न हो सकता है। ये तनाव तथाकथित तनाव संबंधी विकारों का कारण बन सकते हैं (क्लेटन और मैकेंस, 2014)। इस अध्ययन में, Cucurbita pepo L. के मांस और छिलके के इथेनॉलिक अर्क का उपयोग CUMS- प्रेरित अवसादग्रस्तता व्यवहार और अधिवृक्क ग्रंथि पर इसके प्रभाव को कम करने में इसकी क्षमता की जांच के लिए किया गया था। यह एक द्वारा सिद्ध किया गया था

2(1)

सीरम कॉर्टिकोस्टेरोन स्तर में उल्लेखनीय वृद्धि और एफएसटी के दौरान लंबे समय तक गतिहीनता द्वारा सत्यापित। ये निष्कर्ष पहले बताए गए लोगों के अनुरूप थे (तांग एट अल।, 2015)। TNF- और IL-6 दोनों को अवसाद के रोगजनन में शामिल होने की सूचना मिली थी (ताराज़ एट अल।, 2015; पेड्राज़-पेट्रोज़ी एट अल।, 2020)। यह बताया गया कि आईएल -6 या टीएनएफ-रिसेप्टर्स में चूहों की कमी अवसादग्रस्तता व्यवहार (वियाना एट अल।, 2010) के प्रतिरोधी हैं। इसलिए, इस अध्ययन में उनका मूल्यांकन किया गया, और यह देखा गया कि 4 सप्ताह के लिए CUMS के संपर्क में आने वाले चूहों के सीरम में TNF- और IL -6 दोनों में काफी वृद्धि हुई थी, यह दर्शाता है कि वे उदास थे। इस खोज को नुमाकावा एट अल द्वारा समर्थित किया गया था। (2014) चूहों में व्यवहारिक निराशा के साथ और तराज़ एट अल द्वारा। (2015) अवसाद के रोगियों में। इस अध्ययन में, कद्दू के अर्क का प्रशासन अवसादग्रस्तता व्यवहार में सुधार के साथ जुड़ा हुआ था, जो कि एफएसटी के गतिहीनता के समय में महत्वपूर्ण कमी से स्पष्ट होता है और कॉर्टिकोस्टेरोन और इन्फ्लैमेटरी साइटोकिन्स टीएनएफ- और आईएल -6 में महत्वपूर्ण कमी से पुष्टि होती है। सीरम। इन निष्कर्षों को किम एनआर एट अल द्वारा समर्थित किया गया था। (2016) जिन्होंने बताया कि एसएसपी ने 28 दिनों के लिए उदास चूहों में भड़काऊ साइटोकिन्स के स्तर को कम कर दिया।

कद्दू की सूजन-रोधी गतिविधि को कद्दू के सक्रिय यौगिकों जैसे ओलिक और पामिटिक एसिड और एस्ट्राडियोल के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है। ओलिक एसिड, पामिटिक एसिड और लिनोलिक एसिड के डाउनरेगुलेशन को अवसाद में वर्णित किया गया था (कॉनक्लिन एट अल।, 2010; मार्टिन एट अल।, 2010)। यह बताया गया कि ओलिक एसिड-मध्यस्थता न्यूरोप्रोटेक्शन पेरोक्सीसोम प्रोलिफ़रेटर-सक्रिय रिसेप्टर गामा (पीपीएआर-) सक्रियण (सॉन्ग एट अल।, 2019) द्वारा मध्यस्थता वाले इसके विरोधी भड़काऊ प्रभाव से जुड़ा हुआ है। इसके अलावा, पामिटिक एसिड को फॉस्फोलिपेज़ ए (2) को बाधित करने के लिए सूचित किया गया था, और इसलिए इसे एक विरोधी भड़काऊ यौगिक (अपर्णा एट अल।, 2012) माना जाता है। एस्ट्राडियोल इस अध्ययन में पाए गए कद्दू के यौगिकों में से एक था। एस्ट्राडियोल को एक विरोधी भड़काऊ प्रभाव को प्रेरित करने और बाद में अवसादग्रस्तता व्यवहार (जू एट अल।, 2015) को कम करने के लिए सूचित किया गया था। एक अन्य तंत्र जिसके द्वारा एस्ट्राडियोल एक एंटीडिप्रेसेंट प्रभाव को प्रेरित कर सकता है, वह है मस्तिष्क-व्युत्पन्न न्यूरोट्रॉफिक कारक (बीडीएनएफ) और ईआरके फॉस्फोराइलेशन की अभिव्यक्ति का उत्थान मस्तिष्क में ईआर- की सक्रियता (यांग एट अल।, 2010)। इस अध्ययन में, एमडीए के सीरम स्तर में वृद्धि हुई थी, जबकि सीयूएमएस-उजागर चूहों में एसओडी, जीपीएक्स और कैट के स्तर में कमी आई थी। पिछले अध्ययनों में सीयूएमएस के संपर्क में आने के बाद इसी तरह के बदलावों का दस्तावेजीकरण किया गया था, और उन्होंने कहा कि इन जैव रासायनिक परिवर्तनों के परिणामस्वरूप ऑक्सीडेटिव तनाव और एचपीए (नबावी एट अल।, 2015) की हानि हुई। लियू टी. एट अल. (2015) ने यह भी बताया कि अवसाद के विकास को शरीर में एंटीऑक्सिडेंट की कम सामग्री के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है।

कद्दू के फल के अर्क के एंटीऑक्सीडेंट गुण अक्सर बताए गए थे (बहरामसोलतानी एट अल।, 2017)। इसके अलावा, Cucurbita pepo L. के मांस और छिलके को अन्य भागों की तुलना में उच्च एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि को संसाधित करने के लिए सूचित किया गया था, उदाहरण के लिए, बीज (Oyeleke et al।, 2019)। कद्दू निकालने के प्रशासन ने, पिछले कई अध्ययनों में, एसओडी और जीपीएक्स के स्तर में काफी वृद्धि की और चूहों के सीरम में एमडीए को कम कर दिया (गुओ-हुआ एट अल।, 2000; डांग, 2004), और इस प्रभाव को इस अध्ययन में भी प्रलेखित किया गया था। इसलिए, कद्दू की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि इस अध्ययन में स्पष्ट इसके एंटीड्रिप्रेसेंट प्रभाव के पीछे हो सकती है। यह किम एनआर एट अल की टिप्पणियों के अनुरूप है। (2016)। यह बताया गया था कि प्राकृतिक उत्पादों में सूजन-रोधी, एंटीऑक्सिडेंट और थकान-रोधी प्रभाव होते हैं, जिनमें एंटीडिप्रेसेंट जैसा प्रभाव होता है (Jeong et al।, 2015)। ये सभी पिछली गतिविधियाँ कद्दू में सिद्ध हुईं। इस अध्ययन में सीयूएमएस समूह में देखे गए अधिवृक्क कॉर्टिकल कोशिकाओं के बढ़े हुए साइटोप्लाज्मिक वेक्यूलेशन को लिपिड की बढ़ती मांग के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है, जो कोर्टिसोल संश्लेषण के लिए आधारशिला बनाते हैं। सिगनकोवा एट अल। (2005) ने देखा कि लंबे समय तक चलने वाले प्रायोगिक हाइपरडायनामिक के परिणामस्वरूप कॉर्टिकल कोशिकाओं के कई साइटोप्लाज्मिक लिपिड बूंदों का सहवास होता है। इन लिपिड बूंदों में कोलेस्ट्रॉल होता है, जो स्टेरॉयड हार्मोन के संश्लेषण में प्रमुख अग्रदूत है।

Cistanche can relieve tiredness symptoms

हालांकि, कोल्डीशेवा और लुश्निकोवा (2008) ने बताया कि तनाव के परिणामस्वरूप अधिवृक्क प्रांतस्था की कोशिकाओं में लिपिड बूंदों में उल्लेखनीय कमी आई, विशेष रूप से जेडएफ (कोल्डीशेवा और लुश्निकोवा, 2008)। यह वर्णन किया गया था कि शारीरिक तनाव के संपर्क में आने पर, दर्द उत्तेजना हाइपोथैलेमस को प्रेषित होती है, जिसके परिणामस्वरूप सीआरएच स्राव हाइपोफिसियल पोर्टल सिस्टम में होता है, जो एसीटीएच स्राव को बढ़ाता है और कोर्टिसोल स्राव को बढ़ाने के लिए जेडएफ और जेडआर में अपने रिसेप्टर्स को उत्तेजित करता है (पट्टी एट अल। , 2018)। सीयूएमएस-उजागर चूहों में देखे गए गाढ़े अधिवृक्क कैप्सूल और ट्रैबेकुले को पहले रिपोर्ट किया गया था (एल-देसोकी एट अल।, 2011; अल्तायब और सलेम, 2017) स्थिरीकरण तनाव के संपर्क में फाइब्रोब्लास्ट्स द्वारा बढ़े हुए कोलेजन संश्लेषण के परिणामस्वरूप। सीयूएमएस-उजागर चूहों के अधिवृक्क ग्रंथियों में कई कोशिकाओं ने गहरे दाग वाले नाभिक दिखाए, यह दर्शाता है कि वे एपोप्टोसिस से गुजरते हैं जो कि कस्पासे -3 इम्यूनोहिस्टोकेमिकल धुंधला द्वारा पुष्टि की गई थी। इसी तरह के अवलोकन अल्तायब और सलेम, (2017) द्वारा रिपोर्ट किए गए थे, जब वे चूहों के अधिवृक्क ग्रंथियों पर स्थिरीकरण तनाव के प्रभाव का अध्ययन कर रहे थे। लियू क्यू एट अल। (2015) ने बताया कि अत्यधिक ऑक्सीडेटिव तनाव, इस अध्ययन में सीयूएमएस के संपर्क में आने के बाद स्पष्ट है, "एपोप्टोसिस-संबंधित जीन" के अभिव्यक्ति स्तर को संशोधित करता है और बीसीएल -2, बैक्स और कैस्पेज़ के सिग्नलिंग मार्ग के माध्यम से सेल एपोप्टोसिस और अध: पतन को प्रेरित करता है। -3. आरटी-पीसीआर द्वारा इस अध्ययन में इस तंत्र की पुष्टि की गई थी, जिसमें कैस्पेज़ -3 जीन अभिव्यक्ति के महत्वपूर्ण अपचयन का पता चला था।

साहित्य की समीक्षा करने पर, कस्पासे पर कुकुर्बिता पेपो का कोई प्रत्यक्ष प्रभाव नहीं था -3 - विभिन्न ऊतकों में अपोप्टोसिस। ऐसा लगता है कि कस्पासे में कमी -3 - अधिवृक्क ग्रंथियों में पाई गई सकारात्मक एपोप्टोटिक कोशिकाओं को इस अध्ययन में प्रलेखित कुकुर्बिता पेपो के एंटीऑक्सीडेंट प्रभाव के लिए जिम्मेदार ठहराया गया था। यह महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट गतिविधियों के साथ अन्य पौधों और जड़ी-बूटियों पर किए गए कई पिछले अध्ययनों द्वारा समर्थित है (बानागोज़र मोहम्मदी एट अल।, 2019; गाज़ीज़ादेह एट अल।, 2020)। इस अध्ययन से पता चला है कि सीयूएमएस के संपर्क में एड्रेनल कॉर्टेक्स में की 67- सकारात्मक कोशिकाओं में वृद्धि हुई है जो जेडएफ में काफी स्पष्ट थी, जो कि बढ़ती कोशिकाओं की संख्या में वृद्धि दर्शाती है, और इसके परिणामस्वरूप, इस परत की मोटाई में काफी वृद्धि हुई थी। दूसरी ओर, CUMS की प्रतिक्रिया में मज्जा में Ki67-धनात्मक प्रसार कोशिकाओं की संख्या में मामूली कमी आई। ये अवलोकन उलरिच-लाई एट अल के अनुरूप थे। (2006) जिन्होंने क्रोनिक वेरिएबल स्ट्रेस के संपर्क में आने के बाद केवल बाहरी ZF में Ki 67- पॉजिटिव सेल न्यूक्लियर में वृद्धि की सूचना दी, जबकि मेडुला ने सेल्युलर हाइपरट्रॉफी दिखाया और हाइपरप्लासिया नहीं। इसके अलावा, लेबोरी एट अल।, (2003) ने पुराने तनाव के संपर्क में आने के बाद मेडुलरी फ़ंक्शन में सामान्यीकृत वृद्धि की सूचना दी,

यह सुझाव देते हुए कि पुराने तनाव से मेडुलरी हाइपरट्रॉफी हो सकती है। इस अध्ययन में, कद्दू के अर्क के प्रशासन ने सेल प्रसार में काफी वृद्धि की, जो कि लगभग सभी क्षेत्रों में Ki67 जीन और इम्युनो-एक्सप्रेशन के अपगमन और CUMS की तुलना में अधिवृक्क ग्रंथि के मज्जा से स्पष्ट है। इसने इस अध्ययन में दर्ज ग्रंथि क्षेत्रों की बढ़ी हुई मोटाई को समझाया। यह CUMS के संपर्क में आने से प्रेरित एपोप्टोटिक प्रभाव की भरपाई भी कर सकता है। यह खोज किम हाय एट अल द्वारा समर्थित है। (2016) जिन्होंने Ki67 की mRNA अभिव्यक्ति के एक महत्वपूर्ण उत्थान की सूचना दी और BALB / c चूहों की तिल्ली से अलग किए गए स्प्लेनोसाइट्स के प्रसार को SSP, स्ट्रीम, और Cucurbita moschata Duch और इसके प्रमुख घटक, -कैरोटीन के साथ इलाज किया। वर्तमान अध्ययन में, CUMS के संपर्क में आने से अधिवृक्क ग्रंथि के सभी क्षेत्रों में जीन अभिव्यक्ति और HSP70 की प्रतिरक्षा-अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि हुई है। इसके अनुरूप, झेंग एट अल। (2008) ने यह भी साबित किया कि तनावपूर्ण परिस्थितियों के संपर्क में आने के बाद संवर्धित HSP70 अभिव्यक्ति भड़काऊ प्रतिलेखन कारक, परमाणु कारक-कप्पा बी (NF-kappaB) की सक्रियता को रोककर भड़काऊ प्रतिक्रियाओं को नियंत्रित करता है। इसके अलावा, HSP70 सीधे एपोप्टोसिस और नेक्रोसिस (येनारी एट अल।, 2005) में हस्तक्षेप कर सकता है। हाल ही में, ली एट अल। (2019) ने गर्मी के तनाव के संपर्क में आने के बाद पोर्सिन अधिवृक्क ग्रंथि ऊतक में एचएसपी 70 अभिव्यक्ति के एक अपग्रेड की सूचना दी, जो अधिवृक्क ग्रंथि की चोट में एचएसपी 70 की भूमिका को इंगित करता है और सूजन प्रतिक्रियाओं के लिए इसकी प्रासंगिकता पर जोर देता है।

तनाव के जवाब में HSP70 का तेजी से शामिल होना सेलुलर सुरक्षा प्रक्रिया के लिए आवश्यक माना जाता है। हमारे अध्ययन में, कद्दू के साथ सीयूएमएस-उजागर चूहों का इलाज एचएसपी 70 अभिव्यक्ति में एक महत्वहीन कमी के साथ जुड़ा था जो कम एपोप्टोसिस और सूजन संबंधी प्रतिक्रियाओं से जुड़ा था। यह FLU और CP दोनों से प्रेरित HSP70 के अपेक्षाकृत उच्च स्तर के लाभकारी प्रभाव की ओर इशारा कर सकता है क्योंकि इसके परिणामस्वरूप कस्पासे की कमी हुई -3 -मध्यस्थता वाले एपोप्टोसिस और भड़काऊ साइटोकिन्स की रिहाई। हालांकि हीट शॉक प्रोटीन परिवार पर कद्दू के प्रभाव का वर्णन पहले नहीं किया गया था, ओलिक एसिड, जो इस अध्ययन में प्रयुक्त कद्दू के मुख्य घटकों का प्रतिनिधित्व करता है, को मानव टी लिम्फोसाइट सेल लाइन (मार्टिंस डी लीमा) में एचएसपी 60 की अभिव्यक्ति को कम करने के लिए वर्णित किया गया था। एट अल।, 2004), जो हमारे अध्ययन खोज के लिए सहायक है। एक एंटीडिप्रेसेंट जैसे पदार्थ के रूप में Cucurbita pepo की कार्रवाई के प्रस्तावित तंत्र को चित्र 7 में संक्षेपित किया गया है। इस अध्ययन की सीमाओं के बीच CP के अवसादरोधी प्रभाव के गहन तंत्र की जांच करने में असमर्थता थी, और इसलिए, आगे का अध्ययन है ऐसा करने के लिए प्रोत्साहित किया। अंत में, यह अध्ययन सीयूएमएस प्रेरित व्यवहार और जैव रासायनिक परिवर्तनों के साथ-साथ एड्रेनल ग्रंथियों पर हिस्टोपैथोलॉजिकल प्रभाव को कम करने के लिए कुकुर्बिता पेपो एल निकालने की प्रभावकारिता के विज्ञान-आधारित साक्ष्य प्रदान करता है। ये प्रभाव एपोप्टोसिस और एचएसपी 70 अभिव्यक्ति के डाउनरेगुलेशन के माध्यम से स्पष्ट थे और कुकुर्बिता पेपो एल निकालने के एंटीऑक्सीडेंट और एंटी-इन्फ्लैमेटरी प्रभाव के माध्यम से मध्यस्थता प्रतीत होती थी। यद्यपि इस अध्ययन और कुछ अन्य हालिया अध्ययनों ने कुकुर्बिता पेपो के एंटीडिप्रेसेंट-जैसे प्रभाव का दस्तावेजीकरण किया है और इसके तंत्र का पता लगाया है, मनुष्यों में इस प्रभाव की पुष्टि करने के लिए नैदानिक अध्ययन सहित आगे के अध्ययन की आवश्यकता है।

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