झिंजियांग में बायोएक्टिव पदार्थों और सिस्टैंच ट्यूबरोसा के मूल अंतर का विश्लेषण

सार: के छह उत्पादक क्षेत्रसिस्टैंच ट्यूबुलोसाटकलामाकन रेगिस्तान में अनुसंधान वस्तु के रूप में चुना गया था, और विभिन्न भागों (जड़, मध्य और शीर्ष) के जैव सक्रिय पदार्थों और एंटीऑक्सीडेंट गतिविधियों को निर्धारित किया गया था और बहुभिन्नरूपी सांख्यिकीय विश्लेषण किया गया था। परिणामों से पता चला कि उत्पादन क्षेत्रों में अंतर का सिस्टैंच ट्यूबुलोसा (कुल पॉलीफेनोल्स) के जैव सक्रिय पदार्थों पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा।

कुल फ्लेवोनोइड्स की सामग्री, कुल ट्राइटरपीन, कुल पॉलीसेकेराइड, कुल प्रोएंथोसायनिडिन, इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड) औरप्रतिउपचारक गतिविधिसभी का महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा, और इसमें महत्वपूर्ण अंतर थेजैव सक्रिय पदार्थअलग-अलग हिस्सों में।सिस्टैंच ट्यूबुलोसाविभिन्न मूल से मजबूत हैप्रतिउपचारक गतिविधिइन विट्रो में, DPPH फ्री रेडिकल स्कैवेंजिंग रेट (IC50 DPPH ) का IC50 7 mg / mL से कम है, और ABTS फ्री रेडिकल स्कैवेंजिंग रेट (IC50 ABTS) का IC50 3 mg / mL mL से कम है। सहसंबंध विश्लेषण से पता चला है कि Cistanche tubulosa का IC50 DPPH कुल पॉलीफेनोल्स के साथ नकारात्मक रूप से सहसंबद्ध था औरइचिनाकोसाइडसामग्री; IC50 ABTS कुल पॉलीफेनोल्स, कुल पॉलीसेकेराइड्स, इचिनाकोसाइड और के साथ बेहद नकारात्मक रूप से सहसंबद्ध थावर्बास्कोसाइडसामग्री। प्रिंसिपल कंपोनेंट एनालिसिस ने 3 प्रिंसिपल कंपोनेंट्स निकाले, जिनकी वेरियंस संचयी योगदान दर 8 0 थी। 57 प्रतिशत; क्लस्टर विश्लेषण ने नमूनों को 3 समूहों में विभाजित किया। विभिन्न उत्पादक क्षेत्रों से सिस्टैंच ट्यूबलोसा के व्यापक स्कोरिंग का क्रम काशी जियाशी काउंटी (0. 445), अलार सिटी (0. 313), होतान मोयू काउंटी (0. 051), तुरपन शानशान काउंटी है (-0. 057), होतान यूटियन काउंटी (-0. 071), बेयिंगोलेंगोलेंगकिमो काउंटी (-0. 680)।

मुख्य शब्द: सिस्टैंच ट्यूबलोसा; बायोएक्टिव पदार्थ; उत्पादन क्षेत्रों में अंतर; समग्र मूल्यांकन

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परिचय

सिस्टैंच ट्यूबुलोसा(श्रेंक) वाइट, जिसे रेड विलो डेयुन [1] के रूप में भी जाना जाता है, सिस्टैंच डेजर्टिकोला के साथ मिलकर, चीन के जनवादी गणराज्य के फार्माकोपिया में सिस्टैंच डेजर्टिकोला के स्रोत संयंत्र के रूप में शामिल किया गया था, और "खाद्य और चिकित्सा" की सूची में शामिल किया गया था। राष्ट्रीय स्वास्थ्य आयोग द्वारा 2018 [2] में होमोलॉगस।सिस्टैंच ट्यूबुलोसाजैविक रूप से सक्रिय पदार्थों की एक किस्म शामिल है, जैसे कि पॉलीफेनोल्स, पॉलीसेकेराइड्स, फेनिलथेनॉल ग्लाइकोसाइड्स, इरिडोइड्स और उनके ग्लाइकोसाइड्स, आदि। रक्त वसा को कम करना [6], प्रतिरक्षा विनियमन [7], तंत्रिका सुरक्षा [8], ऑस्टियोपोरोसिस की रोकथाम [{{3] }}], रेचक [11-12], स्मृति वृद्धि [13] और अन्य कार्यात्मक गतिविधियाँ, इसमें "रेगिस्तान जिनसेंग" की प्रतिष्ठा है।

सिस्टैंच ट्यूबुलोसातामारिक्स पौधों की जड़ों पर विशेष रूप से परजीवीकरण करता है, और हेटियन, काशगर, अक्सू और मेरे देश झिंजियांग में टकलामाकन रेगिस्तान के आसपास के अन्य क्षेत्रों में वितरित किया जाता है। अनुसंधान [14] ने पाया कि विभिन्न भौगोलिक स्थानों में अलग-अलग प्रकाश, वर्षा, तापमान और मिट्टी की स्थिति होती है, जिसका पौधों की वृद्धि, विकास और आंतरिक गुणवत्ता पर प्रभाव की अलग-अलग डिग्री होगी। "पीपुल्स रिपब्लिक ऑफ चाइना का फार्माकोपिया" मुख्य रूप से उपयोग करता है Cistanche tubuloside [2] की गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के लिए इंडेक्स के रूप में इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड की सामग्री, लेकिन Cistanche tubatus में बायोएक्टिव पदार्थ अधिक जटिल हैं। , टोटल फ्लेवोनोइड्स, टोटल पॉलीसेकेराइड्स, टोटल ट्राइटरपेन्स, टोटल प्रोएंथोसायनिडिन्स आदि के औषधीय प्रभावों की एक विस्तृत श्रृंखला है। इसलिए, बहु-सूचकांक गुणवत्ता मूल्यांकन पद्धति सिस्टैंच ट्यूबलोसा औषधीय सामग्री [1] की गुणवत्ता का अधिक व्यापक रूप से मूल्यांकन कर सकती है। इसके आधार पर, यह पेपर झिंजियांग टेकिंग में तकलामाकन रेगिस्तान पर ध्यान केंद्रित करने का इरादा रखता हैसिस्टैंच ट्यूबुलोसाअनुसंधान वस्तु के रूप में, बायोएक्टिव पदार्थों के प्रकार, सामग्री और एंटीऑक्सीडेंट गतिविधियों मेंसिस्टैंच ट्यूबुलोसाझिंजियांग में विभिन्न उत्पादक क्षेत्रों को स्पष्ट करने के लिए, विभिन्न उत्पादक क्षेत्रों से जांच की गई, और व्यापक मूल्यांकन के लिए सहसंबंध विश्लेषण, प्रमुख घटक विश्लेषण और व्यवस्थित क्लस्टरिंग विश्लेषण का उपयोग किया गया। Cistanche tubulosa के गुणवत्ता अंतर Cistanche tubulosa और इसके उत्पादों के गुणवत्ता नियंत्रण को मजबूत करने के लिए सैद्धांतिक समर्थन और संदर्भ प्रदान करते हैं, साथ ही साथ Cistanche tubulosa के गहन प्रसंस्करण और व्यापक विकास और उपयोग को बढ़ावा देते हैं।

1. 1. 3 मुख्य उपकरण और उपकरण पायलट 3-6 एम प्रकार फ्रीज-सुखाने

अपकेंद्रित्र, बीजिंग Boyikang प्रायोगिक उपकरण कं, लिमिटेड द्वारा उत्पादित; TGL-20B सेंट्रीफ्यूज, जिसका उत्पादन शंघाई एंटिंग साइंटिफिक इंस्ट्रूमेंट कं, लिमिटेड; 756 प्रकार यूवी-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमीटर, शंघाई किंगहुआ प्रौद्योगिकी उपकरण कं, लिमिटेड द्वारा उत्पादित; एलसी -20एबी उच्च दक्षता तरल क्रोमैटोग्राफी जापान के शिमदज़ू निगम द्वारा निर्मित की गई थी; सिनर्जी एच1 मल्टीफंक्शनल माइक्रोप्लेट रीडर पोर्टन इंस्ट्रूमेंट्स कं, लिमिटेड द्वारा तैयार किया गया था।

1.2 जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों का निर्धारण

1. 2. 1 कुल पॉलीफेनोल सामग्री का निर्धारण एफएच ली एट अल की विधि का संदर्भ लें। [17]। नमूना समाधान तैयार करना: वजन 0.50 ग्राम नमूना, 70 प्रतिशत का उपयोग करें (यदि निर्दिष्ट नहीं है, पाठ में प्रतिशत मात्रा अंश को संदर्भित करता है) निष्कर्षण विलायक के रूप में इथेनॉल समाधान, और ठोस से तरल का अनुपात 1 है :40 (g/mL, वही नीचे। ), 60 डिग्री में निकाला गया, 40 मिनट के लिए 250 W अल्ट्रासोनिक डिवाइस, 10 मिनट के लिए 4000 r/min पर ठंडा और सेंट्रीफ्यूग किया गया, सतह पर तैरनेवाला एकत्र किया गया और 50 एमएल तक पतला किया गया, अलग रखा गया। नमूना घोल का 1 एमएल लें, 10 प्रतिशत फोलिनोल घोल के 5 एमएल डालें, अच्छी तरह से हिलाएं और हिलाएं, 15 मिनट तक खड़े रहने के बाद, 7.5 प्रतिशत Na2CO3 घोल के 4 एमएल डालें, दोलन करें और अच्छी तरह हिलाएं, और इसे अंधेरे में खड़े रहने दें 20 मिनट। 1 मिनट के बाद, इसके अवशोषण (A765) को मापें, और परिणाम गैलिक एसिड समतुल्य (mg GAE/g DW) में व्यक्त किया जाता है।

1. 2. 2 कुल फ्लेवोनोइड सामग्री का निर्धारण

झांग वेन्ये एट अल की पद्धति का संदर्भ लें। [18]। 10 एमएल ब्राउन वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में नमूना समाधान का 1 एमएल (1.2.1 के समान) लें, 0 जोड़ें। NaNO2 समाधान के 3 एमएल को 5 प्रतिशत के द्रव्यमान अंश के साथ, दोलन और हिलाएं ठीक है, 15 मिनट के लिए खड़े रहने दें, फिर 0.3 एमएल जोड़ें 10 प्रतिशत अल (NO3)3 घोल का एमएल बनाएं और 4 एमएल 4 प्रतिशत NaOH घोल, 50 प्रतिशत इथेनॉल घोल के साथ 10 एमएल तक पतला करें, हिलाएं

अच्छी तरह हिलाएं, और 20 मिनट तक अंधेरे में खड़े रहने के बाद, इसके अवशोषण (A510) को मापें, परिणाम

फल रुटिन समतुल्य (mg RE/g DW) में व्यक्त किए जाते हैं।

1. 2. 3 कुल ट्राइटरपीन सामग्री का निर्धारण

He Ce et al की विधि का संदर्भ लें। [19]। नमूना समाधान का 0.4 एमएल लें (1.2.1 के समान), इसे पानी के स्नान में सूखने के लिए वाष्पित करें, फिर 0.4 एमएल का 1.5 प्रतिशत वैनिलिन-ग्लेशियल एसिटिक एसिड घोल डालें और 1.6 एमएल पर्क्लोरिक एसिड एसिड, 15 मिनट के लिए 70 डिग्री पानी का स्नान, ठंडा करने के बाद, 5 एमएल एथिल एसीटेट मिलाएं, 10 मिनट तक खड़े रहने के बाद, इसके अवशोषण (A560) को मापें, और परिणाम ओलेनोलिक एसिड समकक्ष (mg OAE) में व्यक्त किया गया है। / जी डीडब्ल्यू)।

1. 2. 4 कुल पॉलीसेकेराइड सामग्री का निर्धारण

झांग यादन एट अल की पद्धति का संदर्भ लें। [20]। नमूना तरल की तैयारी: 1. 00 जी नमूना तौला गया था, विआयनीकृत पानी निष्कर्षण विलायक के रूप में इस्तेमाल किया गया था, ठोस से तरल का अनुपात 1:30 था, 60 डिग्री में निकाला गया, 50 मिनट के लिए 250 डब्ल्यू अल्ट्रासोनिक डिवाइस, ठंडा और फिर 10 मिनट के लिए 4000 आर/मिनट अपकेंद्रित्र की स्थिति के तहत निकाला गया, सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा करें, 95 प्रतिशत इथेनॉल समाधान की मात्रा का 4 गुना जोड़ें, 12 घंटे के लिए 4 डिग्री पर खड़े होने दें, फिर 5000 आर/मिनट पर अपकेंद्रित्र, इकट्ठा करें अवक्षेपण, और एसीटोन, ईथर के साथ धो लें, और पानी और इथेनॉल के साथ दो बार धो लें, फिर से विआयनीकृत पानी की एक उचित मात्रा को फिर से जोड़ने के लिए जोड़ें, फिर डीप्रोटीनाइजेशन (सेवेज विधि) और अपचयन (सक्रिय कार्बन विधि) उपचार करें, और 10 एमएल के लिए पतला करें परिक्षण। नमूना घोल का 1 एमएल लें, 0.6 एमएल 6 प्रतिशत फिनोल घोल और 3 एमएल सांद्रित H2SO4 क्रम में मिलाएं, दोलन करें और अच्छी तरह हिलाएं, 10 मिनट के लिए उबलते पानी के स्नान में रखें, और ठंडा होने के बाद, इसके अवशोषण को मापें (A490) , और परिणाम ग्लूकोज समकक्ष (मिलीग्राम डीई / जी डीडब्ल्यू) के रूप में व्यक्त किया गया है।

1.2.5 प्रोएंथोसायनिडिन सामग्री का निर्धारण

लू जिओ एट अल की विधि का संदर्भ लें। [21]। नमूना समाधान तैयार करना: वजन 0.50 ग्राम नमूना, 80 प्रतिशत इथेनॉल जोड़ें

समाधान का उपयोग 1:30 के ठोस-तरल अनुपात के साथ निष्कर्षण विलायक के रूप में किया गया था। इसे एक अल्ट्रासोनिक डिवाइस में 50 डिग्री और 250 डब्ल्यू पर 40 मिनट के लिए निकाला गया था। ठंडा करने के बाद, इसे 10 मिनट के लिए 4000 r/min पर सेंट्रीफ्यूज किया गया। सतह पर तैरनेवाला एकत्र किया गया था और वॉल्यूम को 50 एमएल में समायोजित किया गया था। ,अतिरिक्त।

नमूना समाधान के 0.5 एमएल लें, 4 प्रतिशत वैनिलीन-मेथनॉल समाधान के 3 एमएल और क्रम में केंद्रित एचसीएल के 1.5 एमएल जोड़ें, और 15 मिनट के लिए प्रतिक्रिया करें, फिर इसके अवशोषण (ए 500) को मापें, और परिणाम प्रोएंथोसायनिडिन समकक्ष (मिलीग्राम पीसीई / जी डीडब्ल्यू) एक्सप्रेस के रूप में व्यक्त किए जाते हैं।

1. 2. 6 इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड सामग्री का निर्धारण

जू मिंगजुन एट अल की विधि का संदर्भ लें। [22]। सैंपल लिक्विड तैयार करना: वजन 1.00 जी सैंपल, निष्कर्षण विलायक के रूप में 80 प्रतिशत इथेनॉल समाधान का उपयोग करें, ठोस से तरल का अनुपात 1:30 है, 60 डिग्री में एक्सट्रैक्ट, 250 डब्ल्यू अल्ट्रासोनिक 40 मिनट के लिए डिवाइस, ठंडा करने के बाद, 1/मिनट की स्थिति के तहत 10 मिनट के लिए 4000 r सेंट्रीफ्यूज पर एक्सट्रेक्ट करें, सुपरनेटेंट को इकट्ठा करें, 50 एमएल तक पतला करें, और अलग रखें। क्रोमैटोग्राफिक कॉलम एक Alltima C18 कॉलम (4.6 मिमी × 250 मिमी × 5 माइक्रोन) था, मोबाइल चरण 0.4 प्रतिशत जलीय फॉर्मिक एसिड (A)-एसीटोनिट्राइल (B) था, कॉलम का तापमान 25 डिग्री था, और प्रवाह दर 1.00 थी एमएल / मिनट, इंजेक्शन की मात्रा 10 μL थी, और पता लगाने की तरंग दैर्ध्य 330 एनएम थी। मात्रात्मक विश्लेषण बाहरी मानक विधि द्वारा किया गया था।

1.2.7 इन विट्रो में एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का निर्धारण नमूना समाधान तैयार करना: तौलना

1. निष्कर्षण विलायक के रूप में 60 प्रतिशत इथेनॉल समाधान के साथ 20 ग्राम नमूने निकाले गए, और ठोस से तरल का अनुपात 1:25 था। उन्हें एक अल्ट्रासोनिक डिवाइस में 60 डिग्री और 250 डब्ल्यू पर 40 मिनट के लिए निकाला गया था। ठंडा करने के बाद, उन्हें 15 मिनट के लिए 4500 r/min पर सेंट्रीफ्यूज किया गया। , सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा; सतह पर तैरनेवाला की कई उपयुक्त मात्रा लें, 1 मिलीग्राम / एमएल, 3 मिलीग्राम / एमएल, 5 मिलीग्राम / एमएल, 10 मिलीग्राम / एमएल, 20 मिलीग्राम / एमएल, 30 मिलीग्राम / एमएल, 40 मिलीग्राम की नमूना तरल एकाग्रता के लिए 60 प्रतिशत इथेनॉल समाधान के साथ पतला / एमएल, परीक्षण किया जाना है।

1) DPPH फ्री रेडिकल स्कैवेंजिंग क्षमता। जू चिनपिंग [23] की विधि का संदर्भ लें। नमूना समाधान का 1{{10}} μL लें, DPPH घोल का 250 μL डालें, अच्छी तरह मिलाएँ, माइक्रोटिटर प्लेट में डालें, 25 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर रोशनी से दूर रखें, 60 प्रतिशत इथेनॉल घोल का उपयोग करें रिक्त नियंत्रण के रूप में, इसके अवशोषण (A517) को मापें, और निम्न सूत्र के अनुसार DPPH की गणना करें मुक्त मूलक अपमार्जन दर। DPPH फ्री रेडिकल स्केवेंजिंग रेट=1-A1-A2A0( ) × 100 प्रतिशत सूत्र में: A0 नमूना समाधान (खाली नियंत्रण) के बजाय 60 प्रतिशत इथेनॉल समाधान का अवशोषण है; A1 DPPH समाधान के साथ मिश्रित नमूना समाधान का अवशोषण है; ए2 डीपीपीएच समाधान के बजाय पूर्ण इथेनॉल का अवशोषण है।

2) ABTS फ्री रेडिकल स्कैवेंजिंग क्षमता। कोंग यूटिंग एट अल की पद्धति का संदर्भ लें। [24]। ABTS की मातृ शराब पोटेशियम परसल्फेट (अंतिम सांद्रता: 2.45 mmol/L) और ABTS (अंतिम सांद्रता: 7 mmol/L) का मिश्रित घोल था, जिसे विआयनीकृत पानी में तैयार किया गया था, और अंधेरे में 12 घंटे के लिए 25 डिग्री पर खड़ा था। ABTS मदर सॉल्यूशन का उपयोग करने से पहले, इसे विआयनीकृत पानी से पतला करें ताकि अवशोषण (A734) 0.7{{10}}±0.05 हो, जो ABTS वर्किंग सॉल्यूशन है। 10 μL नमूना समाधान (1 ~ 40 mg/mL) लें, इसे माइक्रोटिटर प्लेट में जोड़ें, फिर 200 μL ABTS वर्किंग सॉल्यूशन जोड़ें, इसे कमरे के तापमान पर 30 मिनट के लिए अंधेरे में रखें, 60 प्रतिशत इथेनॉल समाधान को खाली नियंत्रण के रूप में उपयोग करें , और ABTS फ्री रेडिकल स्केवेंजिंग रेट की गणना करने के लिए निम्न सूत्र के अनुसार इसके A734 को मापें। ABTS फ्री रैडिकल स्केवेंजिंग रेट=1-A′1-A′2A0( ) × 100 प्रतिशत जहां: A′1 नमूना समाधान और ABTS समाधान मिश्रण के बाद अवशोषण है; A'2 ABTS विलयन के बजाय विआयनीकृत जल का अवशोषण है।

1.3 डेटा विश्लेषण

सभी डेटा को तीन बार समानांतर में मापा गया था, और परिणाम (मतलब ± मानक विचलन) के रूप में व्यक्त किए गए थे। उत्पत्ति 2019 का उपयोग प्रमुख घटक विश्लेषण और व्यवस्थित क्लस्टर विश्लेषण के लिए किया गया था, और SPSS सांख्यिकी 26 का उपयोग विचरण विश्लेषण के लिए किया गया था। पी<0. 05 indicated a significant difference.