चूहों में डी-गैलेक्टोज-प्रेरित सबएक्यूट एजिंग पर चिटोसन ओलिगोसेकेराइड का एंटी-एजिंग प्रभावⅡ

3. चर्चा

यह व्यापक रूप से स्वीकार किया गया है कि हमारे वर्तमान अध्ययन में उपयोग किया जाने वाला डी-गैल-प्रेरित सबस्यूट एजिंग माउस मॉडल आमतौर पर उम्र बढ़ने के चयापचय सिद्धांत पर आधारित उम्र बढ़ने का मॉडल है, जिसके लक्षण प्राकृतिक उम्र बढ़ने की प्रक्रिया के समान हैं। डी-गैल एक सामान्य पोषक तत्व है जो शरीर में स्वाभाविक रूप से मौजूद होता है (21)। चूंकि डी-गैल की एक निश्चित खुराक समय की अवधि के भीतर चूहों में इंजेक्शन दी जाती है, इसलिए कोशिकाओं में इसकी एकाग्रता गैलेक्टोज ऑक्सीडेज द्वारा एल्डोस और हाइड्रोजन पेरोक्साइड द्वारा उत्प्रेरित होने के लिए अंततः सुपरऑक्साइड आयनों (22) उत्पन्न करने के लिए बहुत अधिक होगी।शरीर में ऑक्सीकरणबड़ी संख्या में मुक्त कणों का उत्पादन करता है, जो शरीर की मैला ढोने की क्षमता से परे होते हैं और आगे बढ़ते हैंलिपिड पेरोक्सिडेशन; इस बीच, अंतिम अपघटन उत्पाद (जैसे एमडीए) प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष रूप से प्रोटीन न्यूक्लिक एसिड, फॉस्फोलिपिड्स और अन्य पदार्थों के साथ संयोजन कर सकते हैं, न केवल इंट्रासेल्युलर जीवन पदार्थों की रासायनिक संरचना को नष्ट कर सकते हैं और सेल फ़ंक्शन को बाधित कर सकते हैं, बल्कि सामान्य ऊतक कोशिकाओं को भी नुकसान पहुंचा सकते हैं। सामान्य आसमाटिक दबाव को प्रभावित करने के रूप में, जो आगे चलकर महत्वपूर्ण अंगों के चयापचय संबंधी विकारों को जन्म देता हैजीव उम्र बढ़ने(23, 24)। इस प्रकार,डी-गैल-प्रेरित सबस्यूट एजिंग in चूहों को हमारे वर्तमान अध्ययन में जांच के लिए चुना गया हैसीओएस के संभावित एंटी-एजिंग प्रभावऔरअंतर्निहित तंत्र का अन्वेषण करें, वर्तमान अध्ययन में, परिणामों से पता चला कि सामान्य समूह के चूहों की तुलना में मॉडल समूह के चूहों के दैनिक व्यवहार में महत्वपूर्ण अंतर था। इसके अलावा, मॉडल चूहों की तिल्ली और थाइमस में काफी कमी आई, जबकि उनकी तिल्ली और थाइमस के सूचकांक सामान्य चूहों की तुलना में काफी कम थे। इसके अलावा, की जीवन शक्तिएंटीऑक्सीडेंट एंजाइम, जैसे जीएसएच-पीएक्स, सीएटी, और मॉडल चूहों के जिगर और गुर्दे में एसओडी कम हो गए थे, जबकि विपरीत एमडीए स्तर के लिए सच था। ये परिणाम पिछले अध्ययनों (6,7, 22-24) के अनुरूप हैं, यह दर्शाता है कि हमारे वर्तमान अध्ययन में चूहों को सफलतापूर्वक स्थापित किया गया था।

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साथआयु वृद्धि, प्रतिरक्षा प्रणालीशरीर अपक्षयी परिवर्तनों से ग्रस्त है जो न केवल एक विदेशी विशिष्ट प्रतिजन के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को कम करता है, बल्कि प्रतिरक्षा समारोह के सामान्य असंतुलन के साथ भी मौजूद होता है, जिसके कारण अंततः विभिन्न रोग (25) होते हैं। इसलिए शरीर की प्रतिरक्षा का नियमन बुढ़ापा-रोधी अध्ययन के मुख्य तरीकों में से एक है। इसके अतिरिक्त, थाइमस और प्लीहा शरीर के दो महत्वपूर्ण प्रतिरक्षा अंग हैं, जिनमें से अंग सूचकांक शुरू में एक गैर-विशिष्ट प्रतिरक्षा प्रणाली की ताकत को प्रतिबिंबित कर सकते हैं, और जो गैर-विशिष्ट प्रतिरक्षा कार्य का अनुमान लगाने के लिए प्रारंभिक सूचकांक भी हैं। शरीर (26,27। वर्तमान परिणामों से पता चला है कि सामान्य समूह की तुलना में, प्रतिरक्षा अंग, जैसे कि मॉडल समूह में थाइमस और चूहों की प्लीहा को आठ सप्ताह के लिए डी-गैल के साथ इंजेक्ट किया गया था, स्पष्ट रूप से सिकुड़ गए थे, और थाइमस और प्लीहा सूचकांक स्पष्ट रूप से कम थे। जब मॉडल समूह के साथ तुलना की गई, हालांकि, उपचार के लिए, थाइमस और प्लीहा सूचकांकों के डी-गैल-प्रेरित कमी के लिए कोई स्पष्ट प्रचार प्रभाव नहीं था, सीओएस निम्न-मध्य में इन दो अंगों के सूचकांक- उच्च खुराक समूहों में धीरे-धीरे वृद्धि हुई (विशेष रूप से प्लीहा सूचकांक के लिए), यह दर्शाता है कि सीओएस सेनेइल चूहों के तिल्ली और थाइमस गुणवत्ता सूचकांकों में सुधार कर सकता है, प्रतिरक्षा अंगों के अध: पतन को रोक सकता है, और अंततः कुछ हद तक गैर-विशिष्ट प्रतिरक्षा को बढ़ा सकता है। दूसरी ओर, शरीर के गैर-विशिष्ट प्रतिरक्षा कारकों में से एक के रूप में, एंटीबॉडी प्रणाली शरीर की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और प्रतिरक्षा अनुकूलन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है, जबकि इम्युनोग्लोबुलिन (एलजी) हास्य प्रतिरक्षा स्थिति ({{12) का आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला संकेतक है। }}]। सीरम lg में lgG, IgM, IgA, IgD, और IgE शामिल हैं, जिनमें से lgG और IgM सीरम एंटीबॉडी के मुख्य घटक हैं, क्योंकि उनकी सामग्री शरीर की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया क्षमता और हास्य प्रतिरक्षा को दर्शा सकती है (31]। वर्तमान अध्ययन के परिणामों से पता चला है कि मॉडल समूह के चूहों में lgG का सीरम स्तर सामान्य समूह के चूहों की तुलना में काफी कम था। मॉडल समूह की तुलना में, वीई-उपचार के लिए, वहाँ भी कोई चिह्नित बढ़ावा देने वाला प्रभाव नहीं था चूहों के सीरम में lgG और lgM के इनD-gal-उत्पादित कमी, जबकि COS के साथ इलाज किए गए सेन्सेंट चूहों के IgG' और lgM के सीरम स्तर में काफी वृद्धि हुई है, यह दर्शाता है कि COS प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया क्षमता में सुधार कर सकता है और शरीर के हास्य प्रतिरक्षा समारोह को बढ़ा सकता है। . सारांश में, COS की D-gal- प्रेरित उम्र बढ़ने वाले चूहों के प्रतिरक्षा कार्य पर एक अच्छी नियामक भूमिका है, जो उम्र बढ़ने में देरी करने का काम करता है।

इसके अलावा, अंतर्जातएंटीऑक्सीडेंट एंजाइम प्रणाली, मुख्य रूप से शामिल हैंएसओडी(एक एंजाइमके लिए समर्पितसुपरऑक्साइड ऑयन रेडिकल्स को साफ करनाऔरलिपिड पेरोक्सीडेशन के उत्पादन को कम करना), बिल्ली(एक एंजाइम जो मैला ढोने के लिए समर्पित है एच2O2 रक्षा करनासेल वॉल लिपिड और लिपोप्रोटीन का पेरोक्सीडेशन), और जीएसएच-पीएक्स (जीएसएच को जीएसएसजी में उत्प्रेरित करने और विषाक्त पेरोक्साइड को उत्तेजित करने पर केंद्रित एक एंजाइमगैर विषैले हाइड्रॉक्सिल यौगिकों में कमी), मुक्त कणों के खिलाफ एक महत्वपूर्ण रक्षा प्रणाली हैशरीर में क्षति, जिसका मुख्य कार्य आंतरिक में ROS के होमियोस्टैसिस को बनाए रखना हैपर्यावरण और आरओएस के अत्यधिक उच्च स्तर को हटाने के लिए [4,5,32,33]। कई साक्ष्य प्रदर्शित करते हैंजैविक प्रणालियों में आरओएस के अत्यधिक उत्पादन से ऊतकों को ऑक्सीडेटिव क्षति हो सकती है,झिल्ली के कार्यों को कम करता है, सेलुलर चयापचय को प्रभावित करता है, और विशेष रूप से प्रोटीन और एंजाइम को निष्क्रिय करता हैयकृत और गुर्दे जैसे तेज चयापचय प्रक्रियाओं वाले अंगों में [34–36]। इनके अनुरूपअध्ययन, हमने पाया कि दोहरायाD-गल-इंजेक्शन ने की गतिविधियों में एक उल्लेखनीय कमी को प्रेरित कियाये प्रमुख एंटीऑक्सीडेंट एंजाइम (SOD, CAT, और GSH-Px), और स्पष्ट रूप से बढ़े हुए लिपिड पेरोक्सीडेशन,एमडीए के संचय के रूप में प्रकट हुआ, यह दर्शाता है कि चूहों के जिगर में ऑक्सीडेटिव क्षति हुईऔर किडनी। इसके अलावा, एएलटी, एएसटी और एएलपी के सीरम स्तर व्यापक रूप से यकृत का मूल्यांकन करने के लिए उपयोग किए जाते हैंकार्य करता है, जिसमें ALP प्रोटीन एंजाइमों के डिफॉस्फोराइलेशन में बहुत महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है,जबकि एएलटी और एएसटी लीवर की चोट के शुरुआती और सबसे संवेदनशील संकेतक हैं। इस बीच, यूए औरसीआरईए गुर्दे के कार्य के मुख्य संकेतक हैं, जिन्हें ग्लोमेरुलर द्रव के माध्यम से फ़िल्टर किया जाएगाउम्र बढ़ने की प्रक्रिया के दौरान गुर्दे की क्षति होने पर बड़ी मात्रा में रक्तप्रवाह में [37,38]. चूहों के जिगर और गुर्दे की ऑक्सीडेटिव ऊतक क्षति के साथ, एएलटी, एएसटी, और के सीरम स्तरमॉडल समूह चूहों में ALP, साथ ही CREA और UA सामान्य चूहों की तुलना में महत्वपूर्ण रूप से अधिक थे।समूह चूहों। हालांकि, COS, चिंराट खोल chitosan से एंजाइमी हाइड्रोलिसिस द्वारा, न केवल प्रदर्शन कियाइन एंटीऑक्सीडेस की गतिविधियों को बढ़ाकर और कम करके अनुकूल एंटीऑक्सीडेंट गुणएमडीए का स्तर, पर विपक्षी प्रभाव दिखा रहा हैD-गैल-प्रेरित ऑक्सीडेटिव क्षति चूहों के जिगर औरकिडनी, लेकिन सीरम एएलटी, एएसटी, एएलपी, सीआरईए और यूए स्तरों के इन असाधारण उतार-चढ़ाव को भी कम कियामॉडल समूह की तुलना में एक हद तक कम, जो सामान्य को बनाए रखने में महत्वपूर्ण भूमिका का संकेत देता हैजिगर और गुर्दे का कार्य। इस बीच, वीई ने कुछ हद तक एक एंटीऑक्सीडेंट भी प्रदर्शित कियाप्रभाव मुख्य रूप से चूहों के जिगर और गुर्दे में एसओडी की गतिविधियों को तेज करने के साथ-साथ कम करने से होता हैएमडीए के स्तर, चूहों के यकृत और गुर्दे के कार्यों पर सुरक्षात्मक प्रभावों की एक डिग्री को लागू करने के लिए।इसके अतिरिक्त, हिस्टोलॉजिकल परीक्षा से पता चला है कि भड़काऊ सेल घुसपैठ के स्तर औरमॉडल में हेपेटोसाइट्स के परिगलन, साथ ही गुर्दे के ग्लोमेरुलस के शोष को बढ़ाया गया थासमूह, जबकि COS और VE के अनुप्रयोग ने इन यकृत और गुर्दे की संरचना को नुकसान पहुँचायाजीर्ण प्रशासन द्वारा प्रेरितD-गल कुछ हद तक, और हिस्टोलॉजिकल स्थिति मेंCOS-H समूह सामान्य समूह के समान था। हिस्टोलॉजिकल आकलन के ये परिणामजैव रासायनिक विश्लेषण के साथ अच्छी तरह से मेल खाता है।

संक्षेप में, वीई, जिसका मोनोमर अक्सर अध्ययन के लिए सकारात्मक नियंत्रण के रूप में उपयोग किया जाता हैद्वारा प्रेरित चूहों में सबस्यूट एजिंगD-गल, उत्कृष्ट के साथ एक प्रसिद्ध वसा में घुलनशील विटामिन हैप्रतिउपचारक गतिविधि [37,39,40]। यह देखते हुए कि वीई ने इस डी-गैल-उत्पादित कमी पर कोई प्रमुख प्रचार प्रभाव नहीं दिखायाचूहों के प्रतिरक्षा समारोह संकेतकों के बारे में, यह अनुमान लगाना उचित थाके जिगर और गुर्दे पर VE का निश्चित सुरक्षात्मक प्रभावD-गैल-प्रेरित उम्र बढ़ने वाले चूहे मुख्य रूप से हो सकते हैंइसकी ऑक्सीकरण रोधी गुणवत्ता के कारण। अपेक्षाकृत, सीओएस, झींगा और केकड़े के गोले के गोले से प्राप्त होता हैमहासागर, विभिन्न प्रकार के जैविक प्रभाव रखता है, जैसे कि इस डी-गैल-प्रेरित कमी पर बढ़ता प्रभावचूहों के प्रतिरक्षा समारोह संकेतक, औरD-गल-जनित चाबियों की गतिविधियों में कमी आती हैचूहों के जिगर और गुर्दे में एंटीऑक्सीडेंट एंजाइम [12,15–17]। हमारे परिणामों को व्यापक रूप से समाप्त करने के लिए,यह माना जा सकता है कि COS में हेपेटोप्रोटेक्टिव और रीनोप्रोटेक्टिव प्रभाव होते हैंD-गल प्रेरितसबस्यूट एजिंग चूहों को इसकी एंटी-एजिंग गतिविधि का एहसास होता है, जो एंटी-ऑक्सीडेंट से जुड़ा हो सकता हैCOS की क्षमता, साथ ही काफी हद तक चूहों के प्रतिरक्षा कार्य पर इसकी अच्छी नियामक भूमिका।

4.1। सामग्री और रसायन

अध्ययन विश्लेषणात्मक ग्रेड के थे।

4.2। जानवरों

आठ सप्ताह की प्रायोगिक अवधि के दौरान प्रकाश चक्र। वे मानक गोली तक पहुंच सकते थेअध्ययन अवधि के दौरान आहार और पानी का भरपूर सेवन करें।

4.3। Subacute एजिंग माउस मॉडल और COS उपचार की तैयारी

एक सप्ताह के अनुकूलन के बाद, चूहों को बेतरतीब ढंग से आठ चूहों के छह समूहों में विभाजित किया गयातालिका के अनुसार3. एक प्राकृतिक एजिंग मॉडल माउस स्थापित करने के लिए,D-gal (250 mg/kg/दिन) थालगातार 56 दिनों तक दिन में एक बार चूहों की गर्दन के पिछले हिस्से में चमड़े के नीचे इंजेक्ट किया गया। जबकिसामान्य समूह के चूहों कोD-गल।के चमड़े के नीचे इंजेक्शन के बादD-एक घंटे के लिए चूहों में गैल, चूहों में सामान्य और मॉडल समूह थेगैवेज (20 एमएल/किग्रा/दिन) द्वारा आसुत जल से उपचारित; इस बीच, वीई समूह में चूहों का इलाज किया गयाहालिया रिपोर्टों के अनुसार सकारात्मक नियंत्रण के रूप में वीई के साथ गैवेज (50 मिलीग्राम/किग्रा/दिन) के साथ [37,39,40]। चूहेसीओएस-एल, सीओएस-एम, और सीओएस-एच समूहों में नमूना समाधान (तीन अलग-अलग खुराकCOS) प्रति दिन क्रमशः गैवेज द्वारा, जिन्हें उपचार अनुसूची के रूप में दैनिक रूप से प्रशासित किया गया थातालिका में प्रदर्शित3.

4.4। चूहों का दैनिक अवलोकन

प्रायोगिक अवधि के दौरान, चूहों के शरीर के वजन को इलेक्ट्रॉनिक संतुलन द्वारा मापा गया थाएक सप्ताह में एक बार। इसके अलावा, चूहों की भूख, उपस्थिति, मानसिक स्थिति और व्यवहारिक गतिविधिप्रत्येक समूह में क्रमशः प्रति सप्ताह देखा और रिकॉर्ड किया गया।

4.5। चूहों और नमूना संग्रह की तैयारी

अंग सूचकांक के रूप में गणना की गई। इसके बाद लिवर और किडनी को तुरंत स्टोर कर दिया गया−80 ◦सी के लिएअनुक्रमिक जैव रासायनिक विश्लेषण। पूरे दौरान विषाक्तता के कोई आकस्मिक या स्पष्ट संकेत नहीं थेप्रयोगों के दौरान और इसमें शामिल सभी चूहे बच गए।

4.6। सीरम सूचकांकों का निर्धारण

4 मिनट पर 15 मिनट के लिए 4000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा सीरम को पूरे रक्त से अलग किया गया था◦C और फिर पर संग्रहीत−80 ◦जैविक विश्लेषण के लिए C. एक स्वचालित जैव रसायन विश्लेषक (माइंडरीबीएस -480, शेन्ज़ेन मिंड्रे बायो-मेडिकल इलेक्ट्रॉनिक्स कं, लिमिटेड, शेन्ज़ेन, चीन) को मापने के लिए इस्तेमाल किया गया थापरख के अनुसार चूहों के सीरम में ALT, AST, ALP, CREA, UA, IgG, और IgM का स्तरकिट निर्देश।

4.7। चूहे के जिगर और गुर्दे में ऑक्सीकरण रोधी गतिविधि का मापन

जैव रासायनिक विश्लेषण के लिए, लीवर और किडनी सहित प्रत्येक माउस के अंग के ऊतकों को जल्दी से निकाला गया10 प्रतिशत तैयार करने के लिए निकाल दिया (w/v) आइस-कोल्ड 0.9 प्रतिशत NaCl विलयन में समरूप होता है, जिसके बाद सेंट्रीफ्यूगेशन होता है3000 आरपीएम पर 15 मिनट के लिए 4 बजे◦सी, और फिर सतह पर तैरनेवाला जमे हुए रखा गया था−70 ◦C जैव रासायनिक तकविश्लेषण। गोजातीय का उपयोग करके बाइसीनोनिक एसिड (बीसीए) विधि द्वारा प्रोटीन सांद्रता को मापा गयासीरम एल्बुमिन मानक के रूप में। SOD, CAT, और GSH-Px की गतिविधियाँ, साथ ही साथ MDA के स्तरजिगर और गुर्दे में, परख किट द्वारा निर्धारित किए गए थे।

4.8। लीवर और किडनी की हिस्टोलॉजिकल परीक्षा

बलिदान के बाद, अंग ऊतक के नमूने, यकृत और गुर्दे सहित, जल्दी से छीन लिए गए, में तय किए गए24 घंटे के लिए 4 प्रतिशत पैराफॉर्मलडिहाइड, अल्कोहल के आरोही ग्रेड में निर्जलित, फिर पैराफिन में एम्बेडेड,और अंत में 5 की मोटाई में विभाजितµएम। ये नमूने एचई द्वारा नियमित जांच के लिए दागे गए थेइन ऊतकों की।

4.9। सांख्यिकीय विश्लेषण

सभी मात्रात्मक डेटा को साधन के रूप में प्रस्तुत किया गया था± एसडी। द्वारा प्रायोगिक मूल्यों का विश्लेषण किया गयावन-वे एनोवा। का मानp < 0.05 was considered to be statistically signifificant. All analyses were सांख्यिकीय विश्लेषण सॉफ़्टवेयर (SPSS 17.0) का उपयोग करके प्रदर्शन किया गया।

हितों का टकराव:ऑथर ने किसी हित संघर्ष की घोषणा नहीं की है।

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