एंटीऑक्सीडेंट ग्रैफेन ऑक्साइड नैनोरिबोन एक उपन्यास व्हाइटनिंग एजेंट के रूप में मेलानोजेनेसिस तंत्र को रोकता है

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सीन-यू चाउ, हुई-मिन डेविड वांग,* चिया-हेंग कुओ, पेई-हुआन लू, लिन वांग, वेनी कांग, और चिया-लिआंग सन*

सार:मेलेनिन संश्लेषण प्रक्रिया में, ऑक्सीडेटिव प्रतिक्रियाएं एक आवश्यक भूमिका निभाती हैं, और यह ऑक्सीडेटिव तनाव को कम करके मेलेनिन उत्पादन को रोकने के लिए एक अच्छी रणनीति है। फुलरीन और इसके व्युत्पन्न, या परिसरों को मजबूत मुक्त-कट्टरपंथी मैला ढोने वाले के रूप में माना जाता था, और हमने खोज करने के लिए बहुपरत sp2 नैनोकार्बन को लागू किया।मेलेनिनसंश्लेषण निरोधात्मक तंत्र। वर्तमान अध्ययन में, हमने मेलेनिन उत्पादन को विनियमित करने के लिए एंटी-ऑक्सीडेटिव एजेंटों के रूप में उपन्यास नैनोमैटिरियल्स, जैसे मल्टीवॉल कार्बन नैनोट्यूब (MWCNTs), शॉर्ट-टाइप MWCNTs, ग्राफीन ऑक्साइड नैनोरिबोन (GONRs), और शॉर्ट-टाइप GONRs का उपयोग किया। परिणामों से पता चला कि GONRs में इंट्रासेल्युलर और बाह्य कोशिकीय ऑक्सीडेटिव तनाव विश्लेषण प्लेटफार्मों में दूसरों की तुलना में बेहतर एंटी-ऑक्सीडेटिव क्षमताएं थीं। हमने प्रस्तावित किया कि GONRs में ऑक्सीजन युक्त कार्यात्मक समूह होते हैं। 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate परख में, हमने पाया कि GONR प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों को परिमार्जन करने के लिए धातु आयनों को चीलेट कर सकता है। आणविक अंतर्दृष्टि दृश्य में, हमने देखा कि इन नैनोमैटिरियल्स ने माइक्रोफथाल्मिया-संबंधित प्रतिलेखन कारक-संबंधित जीन अभिव्यक्तियों को कम करके मेलेनिन संश्लेषण को कम कर दिया, और प्रोटीन अभिव्यक्तियों में समान परिणाम थे। संक्षेप में, GONRs एक उपन्यास एंटीऑक्सिडेंट और त्वचा को गोरा करने वाले कॉस्मेटोलॉजी सामग्री के रूप में एक संभावित एजेंट हैं।

सिस्टांच भी हैएक उपन्यास के रूप में एक संभावित एजेंटएंटीऑक्सिडेंटऔर त्वचा को गोरा करनाकॉस्मेटोलॉजी सामग्री.

1 परिचय

त्वचा वह अंग है जो मानव शरीर की बाहरी सतह को ढकता है। चूंकि इंटरफ़ेस पर्यावरण के संपर्क में है, इसलिए त्वचा की परत शरीर को रोगजनकों से बचाने, अत्यधिक पानी के नुकसान से बचने, शरीर के तापमान को नियंत्रित करने आदि में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है। मेलानोसाइट्स त्वचा के एपिडर्मिस के बेसल झिल्ली में बढ़ते हैं और सेलुलर सामग्री के 5 प्रतिशत से 10 प्रतिशत के लिए खाते हैं। उन्हें एककोशिकीय "ग्रंथियों" के रूप में चित्रित किया गया है, जिनमें पतली, लंबी, स्ट्रीमर जैसी डेंड्राइट और शाखाएं होती हैं। मेलानोसाइट्स अपने तत्काल आसपास के एपिडर्मल कोशिकाओं के माध्यम से आगे बढ़ते हैं, प्रत्येक मेलानोसाइट के चारों ओर एपिडर्मल कोशिकाओं का एक नक्षत्र बनाते हैं। त्वचा की उम्र बढ़ने के कई आंतरिक और बाहरी कारण हैं, और ऐसा ही एक कारक सूर्य के प्रकाश से पराबैंगनी (यूवी) विकिरण है। यूवी जोखिम के दौरान, त्वचा में प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) का स्तर नाटकीय रूप से बढ़ जाता है, जिसे ऑक्सीडेटिव तनाव के रूप में जाना जाता है। कई पर्यावरणीय विषाक्तता कारक भी त्वचा के लिए ऑक्सीडेटिव तनाव को बढ़ाते हैं, जैसे कि कीटनाशक, कार्बन टेट्राक्लोराइड, भारी धातु, सुगंधित अमाइन, और कण पदार्थ 2.5 (पीएम 2.5)। 2 जैव रासायनिक तंत्र में, इंट्रासेल्युलर ऑक्सीडेंट गैर-से उत्पन्न होते हैं- एंजाइमैटिक सिस्टम, मेलानोजेनेसिस पाथवे को ट्रिगर करने के लिए उन्हें आरओएस में बदल देता है

आरओएस के अलावा, ऐसे कई कारक हैं जो प्रभावित करते हैंमेलेनिन उत्पादन, जीन अभिव्यक्ति, सूजन, अंतःस्रावी परिवर्तन, और वर्णक तेज सहित। 1 मेलेनिन उत्पादन के पहले चरणों में, टायरोसिनेस टाइरोसिन को फेनोमेलेनिन और यूमेलेनिन में उत्प्रेरित करने में एक भूमिका निभाता है। दोनों वर्णक निर्माण तंत्र समान हैं, जिसमें एल-टायरोसिन हाइड्रॉक्सिलेशन से 3,4-डायहाइड्रोक्सी-एल-फेनिलएलनिन (एल-डीओपीए) और एल-डोपा ऑक्सीकरण से डोपाक्विनोन शामिल हैं। अगले चरण में, डोपामाइन को मेलेनोसोम में टाइरोसिनेस-संबंधित प्रोटीन 1 (TRP-1) और टायरोसिनेस-संबंधित प्रोटीन 2 (TRP-2) द्वारा ऑक्सीकृत किया जाता है, जिसे माइक्रोफ़थाल्मिया-संबंधित ट्रांसक्रिप्शन फ़ैक्टर द्वारा नियंत्रित किया जाता है। MITF) मेलेनिन बनाने के लिए। अंत में, मेलेनिन परिपक्व होता है और स्ट्रेटम कॉर्नियम के भीतर अवक्षेपित होता है। 4,5 ये बेसल परत के पड़ोसी केराटिनोसाइट्स में प्रवेश करते हैं और किसी भी यूवी-प्रेरित उत्परिवर्तन या संशोधनों से अपने डीएनए की रक्षा करते हैं। मेलेनोसोम के भीतर परिपक्व मेलेनिन को केराटिनोसाइट्स में स्थानांतरित कर दिया जाता है और अंत में एक लंबे समय तक चलने वाले रंजकता की ओर जाता है। कभी-कभी पुरुषों और महिलाओं में लिंग, झाइयां और भूरे/काले धब्बे सामाजिक समस्याओं का कारण बनते हैं। ऑक्सीडेटिव तनाव को रोकना या टायरोसिनेस गतिविधि को दबाना हाइपर-पिग्मेंटेशन और त्वचा संबंधी विकारों के सिंड्रोम को कम करने की एक रणनीति है। एंटीऑक्सिडेंट आरओएस-कारण हाइपर-पिग्मेंटेशन और सेलुलर क्षति को ठीक करते हैं। इसलिए, संश्लेषित एंटी-ऑक्सीडेटिव यौगिकों में त्वचा देखभाल अनुप्रयोगों में कई जैव-कार्यात्मक अनुप्रयोग होते हैं।

फुलरीन (C60), कार्बन नैनोट्यूब (CNT), ग्राफीन, और ग्राफीन नैनोरिबोन (GNR) चार प्रकार के sp2 नैनोकार्बन हैं, जिन पर दुनिया भर में व्यापक रूप से शोध किया गया है। फुलरीन और इसके डेरिवेटिव या कॉम्प्लेक्स को मजबूत माना गया है।मुक्त-कट्टरपंथी मैला ढोने वालेलंबे समय के लिए। योध एट अल। पानी में घुलनशील C60 का उपयोग कैटोबोलिक तनाव-प्रेरित अध: पतन के खिलाफ एक सुरक्षात्मक एजेंट के रूप में किया जाता है। इंजेक्शन एट अल। निष्कर्ष निकाला कि C60 (OH) 24 एक मजबूत एंटीऑक्सीडेंट यौगिक है जब ऑक्सीडेटिव तनाव बहुत अधिक होता है। ओकुडा एट अल। ने सुझाव दिया कि C60 कॉम्प्लेक्स NO-मध्यस्थता सेल की चोट को रोक सकते हैं। 13,14 टोंग एट अल। ने दिखाया कि C60complexes सुपरऑक्साइड के बढ़े हुए स्तर के कारण होने वाली मस्तिष्क संबंधी बीमारियों के इलाज के लिए आशाजनक उम्मीदवार हो सकते हैं। दरअसल, एक जापानी कंपनी ने 2006 में कॉस्मेटिक उपयोग के लिए एक मजबूत एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि के साथ फुलरीन की पहचान की। ल्यूसेंट- शुल्त्स एट अल। ने प्रदर्शित किया कि कार्यात्मक एकल-दीवार वाले CNTs (SWCNTs) की ऑक्सीजन कट्टरपंथी मैला ढोने की क्षमता डेंड्राइटिक C60.15−19 फेनोग्लियो एट अल की तुलना में लगभग 40 गुना अधिक है। ने देखा कि बहुदीवार वाले CNTs (MWCNTs) में हाइड्रॉक्सिल या सुपरऑक्साइड रेडिकल के बाहरी स्रोत के संपर्क में एक उल्लेखनीय कट्टरपंथी मैला ढोने की क्षमता होती है। घनत्व कार्यात्मक सिद्धांत गणना ने SWCNTs के एक मॉडल को मुक्त-कट्टरपंथी मैला ढोने वालों के रूप में भी प्रकट किया। 2004 में, नोवोसेलोव एट अल। पहले यह प्रदर्शित किया कि ग्राफीन ने एक मजबूत द्विध्रुवीय विद्युत प्रभाव प्रदर्शित किया और इलेक्ट्रॉनिक अनुप्रयोगों के लिए आशाजनक हो सकता है। इसके बाद, उन्होंने यह दिखाना जारी रखा कि ग्रेफीन में इलेक्ट्रॉनिक गुण होते हैं जो डिराक समीकरण द्वारा वर्णित कणों की 2डी गैस के लिए विशिष्ट होते हैं। 22,23 चूंकि इन दो महत्वपूर्ण पेपरों में, ग्राफीन-आधारित शोध पर अधिक से अधिक ध्यान दिया गया है। 24−30 उदाहरण के लिए, किउ एट अल। 2014 में दिखाया गया है कि ग्राफीन ऑक्साइड और कुछ-परत ग्राफीन महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि प्रदर्शित करते हैं और ऑक्सीकरण से विभिन्न जैव-आणविक अणुओं की रक्षा कर सकते हैं। 31 हान एट अल। 2007 में प्रयोगात्मक रूप से प्रदर्शित किया गया था कि रिबन की चौड़ाई को बदलकर जीएनआर के ऊर्जा अंतराल को लिथोग्राफी प्रक्रिया के दौरान नियंत्रित किया जा सकता है। 32 चार नैनोकार्बन में से, जीएनआर पर सबसे कम ध्यान दिया गया है। हमारे ज्ञान के लिए, ग्राफीन ऑक्साइड नैनोरिबोन (GONRs) के एंटीऑक्सीडेंट गुणों पर बहुत कम शोध है। इसलिए, इस अध्ययन में, हमने MWCNTs, लघु MWCNTs, GONRs और लघु GONRs को सावधानीपूर्वक तैयार किया और उनके एंटीऑक्सीडेंट गुणों की तुलना करने का लक्ष्य रखा। संबंधित परिणाम व्यवस्थित रूप से।

2. परिणाम और चर्चा

2.1. MWCNTs और GONRs की आकृति विज्ञान।

Figure 1a shows the low- and high-magnification transmission electron microscopy (TEM) images of MWCNTs and short MWCNTs. Following acidic cutting under ultrasonication, the length of MWCNTs could be shortened from >10 सुक्ष्ममापी से 2−3 सुक्ष्ममापी। साथ ही, यह देखा गया कि नाइट्रिक एसिड उपचार चिकनी ट्यूब सतहों को खुरदरा कर देता है। उच्च-आवर्धन चित्र में कुछ निशान और अनियमित आकार प्रदर्शित होते हैं। इसके अलावा, माइक्रोवेव प्रतिक्रियाओं के माध्यम से MWCNTs और लघु MWCNTs का उपयोग क्रमशः GONR और लघु GONR प्राप्त करता है। हमने GONR और लघु GONR के निम्न और उच्च-आवर्धन TEM चित्रों का भी चित्रण किया। प्रमुख अनुदैर्ध्य अनज़िपिंग और मामूली क्षैतिज कटिंग के कारण, ऐसा लगता है कि GONRs MWCNTs से छोटे थे। दूसरी ओर, उच्च-आवर्धन चित्रों ने MWCNTs की तुलना में बड़े व्यास, यानी 0.11−0.18 माइक्रोन, GONRs को दिखाया, यह दर्शाता है कि अनज़िपिंग प्रक्रिया सफल रही। इसी तरह, छोटे GONR ने छोटे MWCNTs की तुलना में छोटी लंबाई और बड़े व्यास का प्रदर्शन किया। हमारी नई अनज़िपिंग प्रक्रिया के एयर कंप्रेसर में, GONRs की पतली परत वाली संरचनाएं, मोटे केंद्रीय MWCNTs को बनाए रखते हुए 250 W की समान माइक्रोवेव शक्ति के लिए प्रारंभिक रिपोर्ट में प्राप्त की गई तुलना से कम थीं। इसका मतलब एक कोर-शेल MWCNT था। नई प्रक्रिया में सभी माइक्रोवेव शक्तियों के माध्यम से पूरी तरह से अनज़िप्ड नैनोरिबोन संरचना के बजाय / GONR हेटरोस्ट्रक्चर अधिक दिखाई देगा। हमारे पिछले अध्ययनों में लघु GONR के साथ तुलना करने के लिए, उच्च माइक्रोवेव शक्ति ने रिबन के किनारे पर अधिक निशान उत्पन्न किए और अच्छे, चिकने रिबन किनारों का निर्माण नहीं किया। ध्यान दें कि हमने चित्र 1a में दो भिन्न प्रकार के Cu ग्रिड का उपयोग किया है। पर्याप्त लंबाई वाले MWCNTs और GONRs के लिए, कार्बन के साथ स्थिर लेसी फॉर्मवर के साथ Gu ग्रिड (उत्पाद संख्या 01881-F, Ted Pella, Inc., USA) का उपयोग किया गया था। एक लेसी कार्बन फिल्म में खुले छेद ने नैनोकार्बन और कार्बन फिल्म के बीच एक अतिव्यापी संचरण छवि को रोका। गहरे भूरे रंग के नेटवर्क लेसी कार्बन फिल्म से संबंधित हैं। हालांकि, लघु MWCNT और लघु GONR के लिए कार्बन (उत्पाद संख्या 01800-F, टेड पेला, इंक., यूएसए) के साथ स्थिर फॉर्मवर के साथ गु ग्रिड की आवश्यकता थी। इसका कारण यह था कि लेसी कार्बन फिल्म में बड़े छेदों ने लघु MWCNT और लघु GONR को कुशलता से धारण करने में समस्याएँ पैदा कीं। जैसा कि चित्र 1 में दिखाया गया है, लघु MWCNTs और लघु GONRs के नीचे हल्का ग्रे कंट्रास्ट कार्बन की एक हल्की परत है। इस कार्बन परत ने अपनी गर्मी और विद्युत-संचालन गुणों के माध्यम से इलेक्ट्रॉन बीम के संपर्क में आने वाली फॉर्मवार फिल्म को स्थिर कर दिया।

2.2. MWCNTs और GONRs के संबंध विन्यास।

चार नैनोकार्बन के रमन स्पेक्ट्रा चित्र 1बी में प्रस्तुत किए गए हैं; अनज़िपिंग प्रक्रिया के बाद GONRs का D बैंड MWCNTs की तुलना में अधिक था। यह MWCNTs की तुलना में उच्च ऑक्सीकरण स्तर और GONR के किनारे संरचनाओं की अधिक संख्या के लिए जिम्मेदार ठहराया गया था। यह घटना भी 2011.12 में देखी गई घटना के समान है, उच्च रेखांकन स्तर के कारण, MWCNTs के G बैंड की पूर्ण-चौड़ाई-आधे-अधिकतम संख्या सबसे कम थी। चार नैनोकार्बन के आईडी/आईजी अनुपात क्रमशः {{10}}.076, 0.502, 0.483, और 0.700 थे। संक्षेप में, घटी हुई लंबाई और सतह के ऑक्सीकरण ने दोष स्तर को बढ़ा दिया और इस प्रकार आईडी / आईजी अनुपात को उच्च बना दिया। D′ शिखर सभी दोषपूर्ण ग्राफीन में मौजूद होता है और इसे गुणवत्ता के माप के रूप में देखा जाता है। जैसा कि चित्र 1b में दिखाया गया है, चार स्पेक्ट्रा में D′ चोटियाँ या तो काटने या अनज़िपिंग प्रक्रिया के बाद अधिक प्रमुख हो जाती हैं, यह सुझाव देती हैं कि वे विनाशकारी हैं प्रक्रियाएं जो कई दोषों का परिचय देती हैं। चित्रा 1 सी, डी चार नैनोकार्बन के एक्स-रे फोटोइलेक्ट्रॉन स्पेक्ट्रोस्कोपी स्पेक्ट्रा को प्रदर्शित करता है। जाहिर है, लघु GONRs के लिए D′ चोटी सबसे स्पष्ट है। जैसा कि चित्र 1c में दिखाया गया है, अम्लीय वातावरण में KMnO4 की मजबूत ऑक्सीकरण क्षमता के कारण O स्तर 7.6 प्रतिशत (MWCNTs) से बढ़कर 19.9 प्रतिशत (GONRs) हो गया है। दूसरी ओर, O स्तर MWCNT से लघु MWCNTs तक 0.8 प्रतिशत थोड़ा बढ़ गया। महत्वपूर्ण रूप से, लघु GONR के लिए उच्चतम O स्तर 38.3 प्रतिशत है, जिसका अर्थ है कि नैनोरिबोन के सिरों को प्लानर sp2 सतहों की तुलना में ऑक्सीजन कार्यात्मक समूहों को संलग्न करना आसान होगा। MWCNTs और लघु MWCNTs दोनों की अनज़िपिंग प्रक्रिया के बाद बड़ी पूर्ण-चौड़ाई-आधा-अधिकतम संख्या और C 1s चोटियों की उच्च बाध्यकारी ऊर्जा में बदलाव चित्र 1d में चित्रित किया गया है। ग्राफीन ऑक्साइड के लिए, उच्च-बाध्यकारी-ऊर्जा पक्ष में विघटित चोटियों को C−C (CC), C−O, CO, और COOH बॉन्डिंग को सौंपा जा सकता है। 36 हमने 2013 में GONR (200 W) की विशेषता बताई। ,37 और परिणाम इस अध्ययन के परिणामों के समान थे। इस अध्ययन ने रमन स्पेक्ट्रा की घटना का निष्कर्ष निकाला, जिसका अर्थ है कि ट्यूब-टू-रिबन परिवर्तन (चित्रा 2) के दौरान अधिक ऑक्सीजन युक्त कार्यात्मक समूह उत्पन्न हुए थे।

2.3. MWCNTs और GONRs के एंटी-ऑक्सीडेटिव गुण।

2.3.1. 1,1-डिफेनिल-2-पिक्रिलहाइड्राजाइल फ्री रेडिकल स्कैवेंजिंग एक्टिविटी एसेस का निर्धारण।

1,1- डिफेनिल-2-पिक्रीलहाइड्राज़िल (डीपीपीएच) मुक्त-कट्टरपंथी मैला ढोने की गतिविधि एक एंटीऑक्सिडेंट प्लेटफॉर्म है जिसे एंटी-ऑक्सीडेटिव क्षमता का पता लगाने के लिए लागू किया जाता है; चार नैनोकार्बन के परिणाम तालिका 2 में वर्णित हैं। डीपीपीएच परख में, 1 0 0 माइक्रोन की एकाग्रता में विटामिन सी का उपयोग सकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था। MWCNTs की एंटी-ऑक्सीडेटिव गतिविधियों का परीक्षण करने के लिए, लघु MWCNTs, GONRs, और लघु GONRs, 1, 5, और 1 0 mg/L की खुराक को गुणों को मापने के लिए प्रतिक्रिया समाधान में डाला गया था। MWCNTs, लघु MWCNTs, GONRs, और लघु GONRs में 10 mg/L (19.2 ± 0.3, 12.1 ± 0.3, 26.8 ± 0.3, और 30.0 ± 0.4 प्रतिशत), जबकि विटामिन सी के दमन के लिए 100 μM (93.4 ± 0.1 प्रतिशत) पर एक समान स्थिति थी।

2.3.2. आयन-चेलेटिंग गतिविधि परख।

ऑक्सीडेटिव तनाव की स्थिति के भीतर, फेरोज़ीन Fe2 प्लस के साथ एक जटिल विकसित कर सकता है जिसे मात्रात्मक रूप से मापा जा सकता है। चेलेटिंग मध्यस्थों की उपस्थिति में, कॉम्प्लेक्स टूट जाता है, जिससे फेरस आयन Fe2 प्लस कॉम्प्लेक्स के गहरे लाल रंग से कम हो जाते हैं। हमने EDTA को सकारात्मक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया। तालिका 2 से पता चलता है कि MWCNTs, लघु MWCNTs, GONRs, और लघु GONRs में 10 mg/L (29.2 ± {{10}}.8, 28.7 ± 0 पर चेलेटिंग गतिविधि थी। .7, 69.7 ± 0.6, और 68.9 ± 0.3 प्रतिशत), जबकि सकारात्मक नियंत्रण की 100 μM (93.4 ± 0.1 प्रतिशत) पर समान स्थिति थी।

2.3.3. फेरिक-घटाने वाले एंटीऑक्सीडेंट पावर मापन।

फेरिक को कम करने वाली संभावित परख एक सरल और विश्वसनीय परीक्षण है जिसका उपयोग Fe (III) -फेरिकैनाइड जटिल संश्लेषण को मापने के लिए किया जाता है। इस परख में, फेरस Fe (III) -TPTZ कॉम्प्लेक्स का उत्पादन करने वाले चार नैनोकार्बन की कम करने की शक्ति का पता पीले से हरे और नीले रंग के घोल के रंग में परिवर्तन से लगाया गया था। तालिका 2 दर्शाती है कि MWCNT, लघु MWCNT, GONR, और लघु GONR की कम करने वाली शक्तियाँ ऑप्टिकल घनत्व (OD) 1.11, 1.13, 1.15, और 1.11 10 mg/L पर थीं।

2.3.4. MWCNTs और GONRs इंट्रासेल्युलर ROS संचय को रोकते हैं।

कई रिपोर्टों से पता चला है कि आरओएस कोशिका झिल्ली की संरचनात्मक अखंडता को नष्ट कर देता है, जिसमें कोशिका झिल्ली और परमाणु झिल्ली शामिल हैं, जिससे कोशिका क्षति होती है और सामान्य कार्य का नुकसान होता है। इसके अलावा, आरओएस भी टाइरोसिनेस बनाने को उत्प्रेरित करने के लिए महत्वपूर्ण कारकों में से एक है। मेलेनिन, और आरओएस उत्पादन का निषेध मेलेनिन संश्लेषण को कम करने के लिए एक अच्छी रणनीति है। इस अध्ययन में, हमने MWCNT और GONR उपचार कोशिकाओं में इंट्रासेल्युलर ऑक्सीडेटिव तनाव स्तर का विश्लेषण करने के लिए 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA) धुंधला परख का उपयोग किया। MWCNT और GONR समूहों में Phorbol 12-myristate 13-एसीटेट (PMA) ने ऑक्सीडेटिव उत्तेजनाओं को प्रेरित किया और इसे एक नकारात्मक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया।41 जब PMA की सांद्रता 20 ng/mL थी, तो इसने ऑक्सीडेटिव तनाव को बढ़ा दिया। 38 प्रतिशत के लिए मूल्य; GONRs और MWCNTs के उपचार के बाद, ROS के स्तर को सामान्य स्तर पर डाउनग्रेड किया गया। डेटा से पता चला है कि दोनों सामग्रियों ने ऑक्सीडेटिव तनाव के स्तर को बाधित किया है, और GONRs का एंटी-ऑक्सीडेटिव प्रभाव MWCNTs (चित्र 3) की तुलना में अधिक था। तालिका 1 एक समान परिणाम सूची दिखाती है। हमने तर्क दिया कि हमारे नए निष्कर्षों के तीन कारण हैं: पहला, इन सामग्रियों की घुलनशीलता का क्रम इस प्रकार था: लघु GONRs> GONRs> लघु MWCNTs> MWCNTs, जिसका अर्थ है कि लघु GONR का संपर्क क्षेत्र सबसे बड़ा था, इसलिए यह था आरओएस मैला ढोने के लिए बेहतर। दूसरा, GONRs और MWCNTs sp2-कार्बन संरचनाएं थीं जो जोड़ निर्माण या इलेक्ट्रॉन हस्तांतरण के माध्यम से ROS बिजली को नष्ट कर सकती थीं।42 हमने पाया कि नैनोरिबोन संरचनाओं के एंटीऑक्सीडेंट प्रभाव नैनोट्यूब संरचनाओं की तुलना में बेहतर थे, इसलिए नैनोरिबोन इसे बनाते हैं। नैनोट्यूब की तुलना में इलेक्ट्रॉनों को स्थानांतरित करना आसान है। अंत में, चित्र 1b में, हम देखते हैं कि GONR sp 2- कार्बन साइट में MWCNTs की तुलना में अधिक ऑक्सीजन कार्यात्मक समूह होते हैं, कार्बोक्जिलिक एसिड समूह धातु आयनों को नष्ट कर सकते हैं, और हाइड्रॉक्सिल समूह ROS को परिमार्जन करने के लिए H-दाता हो सकते हैं। मेलेनिन उत्पादन को रोकना।

2.4. मानव त्वचीय फाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं में इलाज किए गए MWCNTs और GONRs की साइटोटोक्सिसिटी।

{0}}(4,5-डाइमिथाइल-इयाजोल-2-यल)-2,5-डिपेनहिलटेट्राजोलियम ब्रोमाइड (एमटीटी) पद्धति का मूल्यांकन करने के लिए लागू किया गया था। Hs68 कोशिकाओं (चित्र 3) पर GONRs के साइटोटोक्सिक गुण, और कोशिकाओं को 1, 5, और 10 ug/mL की विभिन्न खुराकों पर सुसंस्कृत किया गया था। हमने जांच की कि MWCNT की सेल व्यवहार्यता 100.7 ± 3.7, 99.8 ± 4.9, और 94.1 ± 4.7 प्रतिशत क्रमशः 1, 5, और 10 मिलीग्राम/एल की सांद्रता पर थी; लघु MWCNT के लिए व्यवहार्यता की गणना उसी क्रम में की गई और वे 93.9 ± 2.2, 86.4 ± 3.0, और 98.9 ± 2.1 प्रतिशत पाए गए। हमने देखा कि B16−F10 कोशिकाओं को उच्च सांद्रता में ऊष्मायन किया गया था, और Hs68 कोशिकाओं का कोशिका अस्तित्व 80 प्रतिशत से अधिक था, यह सुझाव देते हुए कि MWCNT और लघु MWCNT का मानव त्वचीय फाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं पर कोई विषाक्त प्रभाव नहीं था। GONR और लघु GONR की सेल व्यवहार्यता 86.24 ± 2.1, 90.87 ± 3.5, 88.58 ± 2.5, 89.03 ± 3.6, 90.71 ± 2.8, और 90.64 ± 2.5 प्रतिशत थी। चित्र 4a में यह भी बताया गया है कि GONR और लघु GONR का HS68 कोशिकाओं पर एक स्पष्ट साइटोटोक्सिक प्रभाव नहीं था। पिछली रिपोर्टों में, कॉस्मेटिक उद्देश्यों के लिए अप्रयुक्त नैनोमटेरियल्स के उपयोग को संदिग्ध माना जा सकता था, 43,44 और यह आमतौर पर नैनोकणों के कोशिकाओं में प्रवेश करने के बाद डीएनए के हमले के कारण होता था। साइटोटोक्सिसिटी परीक्षण के बाद, हमने पाया कि हमारी सामग्री सामान्य त्वचा कोशिकाओं के लिए विषाक्तता का कारण नहीं बनती है। हमने निष्कर्ष निकाला कि नैनोमैटेरियल्स के कोशिकाओं में प्रवेश करने के बाद, नैनोमैटेरियल्स ऑक्सीडेटिव तनाव और धातु आयनों को कम करके मेलेनिन उत्पादन को रोकते हैं और माइटोकॉन्ड्रिया या डीएनए को नुकसान नहीं पहुंचाते हैं, जिसका अर्थ है कि MWCNTs और GONRs का उपयोग करने के लिए सुरक्षित थे।

2.5. B16−F10 सेलुलर टायरोसिनेस गतिविधि और मेलेनिन सामग्री में दो प्रकार के MWCNTs और GONRs।

मेलेनिन संश्लेषण मार्ग में, टायरोसिनेस एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। Tyrosinase जैव रासायनिक प्रतिक्रियाओं की एक श्रृंखला के माध्यम से eumelanin और phomelanin को ऑक्सीकरण और बनाता है। यह निर्धारित करने के लिए कि क्या GONRs और MWCNTs tyrosinase की गतिविधियों को रोकते हैं और मेलेनिन उत्पादन में कमी का कारण बनते हैं, हमने B16−F10 कोशिकाओं में tyrosinase गतिविधि का विश्लेषण किया। हमने पाया कि MWCNTs और लघु MWCNTs ने tyrosinase गतिविधि को लगभग 17.1 प्रतिशत और 23 प्रतिशत 10 mg/L पर रोक दिया। GONRs और लघु GONRs का अन्य GONR की तुलना में समान सांद्रता में tyrosinase गतिविधि को दबाने में बेहतर प्रभाव था। वे खुराक पर निर्भर तरीके से भी थे और 49.8 प्रतिशत और 44.7 प्रतिशत टायरोसिनेस गतिविधि को बाधित करते थे, जैसा कि चित्र 4बी में दिखाया गया है।

मेलेनिन मानव शरीर में एक अनिवार्य वर्णक है, लेकिन मेलेनिन की अधिकता अक्सर बीमारियों की एक श्रृंखला को ट्रिगर करती है। पिछले अध्ययनों में, जिओ एट अल। एक समान सामग्री का इस्तेमाल किया, रेडिकल स्पंज, एक फुलरीन नैनोपार्टिकल, एक एंटी-मेलेनिन एजेंट के रूप में। 45 कुछ अच्छे परिणाम थे; लगभग 20 प्रतिशत मेलेनिन उत्पादन को बाधित किया जा सकता है। इसकी दक्षता में सुधार करने के लिए, हमने मेलेनिन और इसके आणविक तंत्र की अवरोध दर को मापने के लिए परीक्षण सामग्री में और सुधार किया, जैसा कि आंकड़े 4c और 5 में दिखाया गया है। MWCNTs और लघु MWCNTs ने मेलेनिन सामग्री को 17.6 ± 5.5 और 13.2 ± {{ 16}}.2 प्रतिशत 10 मिलीग्राम/लीटर पर और खुराक पर निर्भर तरीके से। GONRs और लघु GONRs ने मूल्यों को शक्तिशाली रूप से घटाकर 32.0 ± 2.3 और 35.3 ± 3.4 प्रतिशत 10 mg/L पर कर दिया। प्रायोगिक परिणामों ने सुझाव दिया कि सभी चार प्रकार मेलेनिन के संश्लेषण को रोक सकते हैं और GONRs का अधिक प्रभाव पड़ा। दूसरी ओर, हमने यह भी देखा है कि लघु GONR मेलेनिन उत्पादन को रोकने में बेहतर प्रभाव डालता है। हम यह निष्कर्ष निकालते हैं कि छोटे GONR में अधिक कार्यात्मक समूह होते हैं और यह धातु आयनों-उत्प्रेरित टायरोसिनेस को प्रभावी ढंग से रोक सकता है, जिससे मेलेनिन (चित्र 2) के उत्पादन को और अधिक बाधित किया जा सकता है। तालिका 1 में, हम देखते हैं कि धातु आयन-चेलेटिंग शॉर्ट टाइप का प्रयास सामान्य प्रकार से अधिक होता है; इसका मतलब यह है कि इन छोटे जीओएनआर को कॉस्मेटिक क्षेत्र में त्वचा देखभाल एजेंटों के रूप में संभावित रूप से लागू किया जा सकता है।

2.6. MWCNTs और GONRs के तंत्र ने B16−F10 सेलुलर मेलेनिन सामग्री को बाधित किया।

कोशिकाएं प्रोटीन की अभिव्यक्ति को विनियमित करके बाहरी ऑक्सीडेटिव तनाव का जवाब देती हैं। B16−F10 कोशिकाएं ऑक्सीडेटिव स्तर को कम करने के लिए c-myc जीन अभिव्यक्ति और अप-विनियमित AMPK को बढ़ाती हैं, 46 और इस कार्य में, MITF आणविक मेलेनिन संश्लेषण सिग्नल पथ-मार्ग को विनियमित करने के लिए tyrosinase का एक विशिष्ट प्रतिलेखन कारक है। 47−49 चित्र में 5a, MWCNTs और GONRs ऑक्सीडेटिव तनाव को कम करके माइक्रोफ़थाल्मिया से जुड़े ट्रांसक्रिप्शन कारक को डाउनग्रेड करते हैं, और फिर, डाउनस्ट्रीम जीन TRP -1 और TRP -2 को भी डाउनग्रेड किया गया। प्रोटीन स्तर के लिए, एक समान घटना पाई गई, जिससे MWCNTs और GONRs ने MITF से संबंधित मेलानोजेनेसिस मार्ग को डाउनग्रेड किया और फिर अंत में मेलेनिन सामग्री (चित्रा 5 बी) को कम कर दिया।

3. प्रायोगिक सामग्री और तरीके

3.1. MWCNTs और GONRs की तैयारी।

GONRs बनाने की प्रासंगिक प्रक्रिया पिछले पेपर में रिपोर्ट की गई थी। 12 MWCNT (0.05 g) को 9:1 H2SO4/H3PO4 में निलंबित कर दिया गया था और माइक्रोवेव रिएक्टर (CEM-डिस्कवर) के साथ इलाज किया गया था। 2 मिनट के लिए 250 W पर सेट की गई शक्ति के साथ। समाधानों में KMnO4 (0.25 ग्राम) जोड़ने के बाद, समाधानों को उसी माइक्रोवेव शक्ति के साथ 4 मिनट12 के लिए 65 डिग्री पर उपचारित किया गया था, फिर हमने एक एयर कंप्रेसर का उपयोग करके 8 मिनट के छोटे दूसरे चरण के माइक्रोवेव समय का उपयोग करके इस प्रक्रिया को संशोधित किया। यहां, प्रक्रिया के दौरान माइक्रोवेव रिएक्टर के तापमान को नियंत्रित करने के लिए एयर कंप्रेसर का उपयोग किया जाता है। प्रारंभिक परीक्षणों में माइक्रोवेव की शक्ति 250 W पर सेट की गई थी।

3.2. लघु MWCNTs और लघु GONRs की तैयारी।

छोटे GONRs बनाने की प्रासंगिक प्रक्रिया हमारे पिछले पेपर में बताई गई थी। 34 अम्लीय उपचार समय को 8 घंटे के रूप में चुना गया था। माइक्रोवेव की शक्ति 250 W पर सेट की गई थी, जो कि GONRs प्राप्त करने के समान है।

3.3. डीपीपीएच रेडिकल स्कैवेंजिंग गतिविधि।

DPPH का उपयोग अक्सर नमूनों की मैला ढोने की क्षमता और एंटीऑक्सीडेशन गुणों को तय करने के लिए किया जाता था। 50 DPPH एक बैंगनी अभिकर्मक है जो कि बैंगनी से पीले रंग में बदल जाता है यदि मुक्त मूलक को विश्लेषण में स्थानांतरित किया जाता है। उपयुक्त सांद्रता वाले सकारात्मक एंटी-ऑक्सीडेटिव नमूनों को समाधान में जोड़ा गया, और नमूनों का विश्लेषण 30 मिनट के लिए 517 एनएम पर किया गया। हमने पिछले DPPH रेडिकल्स को कम करने के लिए आवश्यक एंटीऑक्सीडेंट की मात्रा को मापने के लिए परीक्षण नमूनों के अलावा शेष DPPH के प्रतिशत का उपयोग किया। सकारात्मक नियंत्रण के रूप में 100 माइक्रोन पर विटामिन सी का उपयोग किया गया था। मैला ढोने की गतिविधि (प्रतिशत) को के रूप में मापा गया था

मैला ढोने की क्षमता (प्रतिशत)=(असेंपल - खाली) / (एकंट्रोल - खाली) × 100 प्रतिशत (1)

3.4. धातु-चेलेटिंग गतिविधि।

धातु आयन वह कारक है जो लिपिड के अत्यधिक ऑक्सीकरण का कारण बनता है, और Fe2 प्लस सबसे अधिक प्रभावित करने वाले आयनों में से एक है। 50 नैनोबायोमैटेरियल (1 μL) के विभिन्न सांद्रता को एक 96-वेल प्लेट में लोड किया गया था, जिसमें 2 मिमी FeCl2·4H2O था। (10 μL), और फिर फेरोज़ीन (5 मिमी, 20 μL) में लोड किया गया। मिश्रण पूरी तरह से 69 μL मेन्थॉल के साथ मिश्रित था और 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर रखा गया था। फिर, नमूना प्रतिक्रिया समाधान 562 एनएम पर देखा गया था। EDTA का उपयोग 100 μM पर एक सकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था, और धातु-chelating गतिविधि गणना सूत्र eq 1 पर आधारित था।

3.5. शक्ति को कम करना।

कम करने की शक्ति की गणना पिछले अध्ययन पर आधारित है। 50 पहले, 2.5 μL ग्राफीन सामग्री को पीबीएस बफर (67 मिमी, पीएच 6.8) और K3Fe (CN) 6 (2.5 μL, 20 प्रतिशत) के साथ मिलाया गया था और फिर 50 डिग्री पर ऊष्मायन किया गया था। 20 मिनट के लिए फिर, 10 प्रतिशत ट्राइक्लोरो एसिटिक एसिड (160 μL) को 20 मिनट के लिए 300 ग्राम सेंट्रीफ्यूज पर अभिकर्मकों के साथ मिश्रित किया गया था। 25 μL FeCl3 (2 प्रतिशत) के साथ मिश्रित होने के बाद अवशोषण की लंबाई 700 एनएम निर्धारित की गई थी। ब्यूटाइलेटेड हाइड्रॉक्सीनिसोल (BHA) का उपयोग 100 μM पर किया गया था।

3.6. सेल प्रसार परीक्षा।

मानव त्वचीय फ़ाइब्रोब्लास्ट सेल लाइन HS68 को सेल प्रसार के अनुपात का विश्लेषण करने के लिए नियोजित किया गया था। HS68 को 10 प्रतिशत भ्रूण गोजातीय सीरम और 1 प्रतिशत पेनिसिलिन और स्ट्रेप्टोमाइसिन मिश्रित युक्त Dulbecco के संशोधित ईगल माध्यम (DMEM) में ऊष्मायन किया गया था। नमूनों की विभिन्न सांद्रता के साथ इलाज करने के बाद, हमने सेल प्रसार अनुपात का पता लगाने के लिए MTT लागू किया। 8000 कोशिकाओं को 96-अच्छी तरह से प्लेटों में डाला गया और 24 घंटे के लिए नमूनों के साथ इलाज किया गया। सतह पर तैरनेवाला समाधान हटा दिया गया था, और हमने 37 डिग्री पर 2 घंटे के लिए संस्कृति के लिए एमटीटी समाधान का उपयोग किया। ऊष्मायन के बाद, हमने एमटीटी युक्त मीडिया को हटा दिया और इसे डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड (डीएमएसओ) के साथ भंग कर दिया। समाधान आयुध डिपो 590 एनएम और eq 1 द्वारा गणना की गई दर पर पढ़ा गया था।

3.7. सेलुलर मेलेनिन सामग्री का आकलन।

हमने पिछले परख के आधार पर मामूली संशोधनों के साथ एक विधि का उपयोग किया। Bioresource संग्रह और अनुसंधान केंद्र (BCRC, CRL 6323, Hsinchu, ताइवान) से B16−F1 0 के सेल छर्रों को 2.0 के मिश्रण में भंग कर दिया गया था। एन NaOH और 10 प्रतिशत डीएमएसओ। नमूना बाद में 90 डिग्री पर 1 घंटे के लिए गरम किया गया था और स्पष्ट सतह पर तैरनेवाला प्राप्त करने के लिए 10, 000 जी पर एक और 10 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया गया था। मेलेनिन गिनती 475 एनएम पर सतह पर तैरनेवाला के आयुध डिपो की निगरानी के द्वारा निर्धारित की गई थी ।

3.8. B16−F10 सेलुलर टायरोसिनेस गतिविधि।

B16−F10 सेलुलर टायरोसिनेस गतिविधि के लिए, हमने कुछ संशोधनों के साथ पिछले काम का उल्लेख किया। 50 कोशिकाओं को 105 कोशिकाओं में अच्छी तरह से प्लेटों में 105 कोशिकाओं में सुसंस्कृत किया गया था। नमूनों के साथ उपचार के बाद, कोशिकाओं को 1 प्रतिशत ट्राइटन एक्स -100/पीबीएस और 2 मिमी एल-टायरोसिन (50 μL) में 3 घंटे के लिए lysed किया गया था। ऊष्मायन के बाद, हमने मीडिया को हटा दिया और ओडी 590 एनएम पर अवशोषण पढ़ा। टायरोसिनेस गतिविधि सूत्र की गणना eq 1 द्वारा की गई थी।

सिस्टैंच टायरोसिनेस इन्हिबिटर होता है.

3.9. DCFDA स्टेनिंग द्वारा ROS का पता लगाना।

पिछले अध्ययन का उल्लेख करते हुए,54 1.2 1.105 B16−F10 कोशिकाओं को 6-वेल प्लेट्स में रखा गया था और नमूनों की विभिन्न सांद्रता के साथ इलाज किया गया था। कोशिकाओं को पीबीएस में निलंबित कर दिया गया और फिर डीसीएफडीए (5 माइक्रोन) के साथ गैर-फिनोल लाल डीएमईएम में 30 मिनट के लिए 37 डिग्री पर लोड किया गया। DCFDA के फ्लोरोसेंट सिग्नल का पता लगाने के लिए फ्लो साइटोमीटर (अमरूद, मर्क, जर्मनी) का उपयोग किया गया था। DCFDA की उत्तेजना और उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य क्रमशः 488 और 535 एनएम थे।

3.10. मात्रात्मक वास्तविक समय पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन।

हमने लिन एट अल के तरीकों का पालन किया। (2018).1 वास्तविक समय मात्रात्मक रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन-पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (क्यूआरटी-पीसीआर) में प्रतिदीप्ति उत्पन्न करने के लिए एक विशेष प्राइमर जांच शामिल थी। यह एक फ्लोरोसेंस डिटेक्शन तकनीक का उपयोग करता है जो 7500 क्यूआरटी-पीसीआर सिस्टम (एप्लाइड बायोसिस्टम्स, यूएसए) का उपयोग करके प्रत्येक चक्र को महसूस करता है। इसने जारी किए गए प्रतिदीप्ति की मात्रा के आधार पर चक्र का पता लगाया, और फिर प्रत्येक चक्र के उत्पाद की गणना उत्पन्न सामग्री के लिए की गई, जिसके परिणामस्वरूप वास्तविक समय मात्रात्मक उद्देश्यों को प्राप्त किया गया। Trizol (Invitrogen, USA) का उपयोग निर्माता द्वारा दिए गए निर्देश के अनुसार, फेफड़े के ऊतकों का एक पूरा RNA निकालने के लिए किया गया था। इसके बाद, डीएनए उत्पन्न करने के लिए एक रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन किट (तकरा, जापान) का उपयोग किया गया। तालिका 1 में सूचीबद्ध प्राइमरों का उपयोग करते हुए क्यूआरटी-पीसीआर में, डीएनए के एकल स्ट्रैंड बनाने के लिए पहले नमूने को गर्म किया गया था; फिर एक डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए (dsDNA) बनाने के लिए एक प्राइमर बाइंडिंग हुई, जिसके बाद SYBR ग्रीन dsDNA को जोड़ा गया, जिसके लिए SYBR ग्रीन प्लस रिएजेंट किट (Roche, Basel, Swiss) का उपयोग किया गया, जिसके परिणामस्वरूप प्रतिदीप्ति जारी हुई। परिणामी को एक प्रतिदीप्ति पहचान प्रणाली के माध्यम से पारित किया गया था। प्रत्येक चक्र के बढ़ाव या एनीलिंग चरण के दौरान फ्लोरोसेंट संकेतों का पता लगाना; पता लगाने के बाद, नमूना सामग्री को पता चला प्रतिदीप्ति तीव्रता से पीछे धकेल दिया गया था। 55 लक्ष्य जीन के अभिव्यक्ति स्तरों को 2−ΔΔCt विधि का उपयोग करके -ट्यूबुलिन स्तरों के लिए सामान्यीकृत किया गया था।

मायरिकेटिन

3.11. पश्चिमी धब्बा परीक्षण।

B16−F10 कोशिकाओं को एक रेडियोइम्यूनोप्रेजर्वेशन परख बफर (थर्मो साइंटिफिक कं, यूएसए) के साथ रातोंरात 4 डिग्री पर लाइस किया गया, जिसमें प्रोटीज इनहिबिटर होते हैं। प्रोटीन की मात्रा निर्धारित करने के लिए बाइसीनोनिक एसिड प्रोटीन परख किट (बीसीए, सिग्मा-एल्ड्रिच कॉर्प, यूएसए) का उपयोग किया गया था। नमूना प्रोटीन को 10 प्रतिशत सोडियम डोडेसिल सल्फेट-पॉलीक्रिलामाइड जेल पर अलग किया गया और एक पॉलीविनाइलिडिन डिफ़्लुओराइड (पीवीडीएफ) झिल्ली (पाल लाइफ साइंस, एन आर्बर, एमआई, यूएसए) में स्थानांतरित कर दिया गया। PVDF झिल्ली को 1 घंटे के लिए एक अवरुद्ध बफर (थर्मो साइंटिफिक) के साथ अवरुद्ध किया गया था और रात भर 4 डिग्री पर विशिष्ट प्राथमिक एंटीबॉडी के साथ ऊष्मायन किया गया था। इसके बाद, झिल्ली को ट्रिस बफर खारा से धोया गया- 20 बफर के बीच दो बार और 1.5 घंटे के लिए माध्यमिक एंटीबॉडी के साथ ऊष्मायन किया गया। उसके बाद, झिल्ली को केमिलुमिनेसेंस डिटेक्शन अभिकर्मकों (थर्मो साइंटिफिक) में डुबोया गया और एक मिनीकेमी केमिलुमिनेसेंस इमेजर (बीजिंग सेज क्रिएशन साइंस, चीन) द्वारा विश्लेषण किया गया। एंटीबॉडी के स्रोतों में खरगोश विरोधी MITF, खरगोश विरोधी TRP -1, खरगोश विरोधी TRP -2, और -actin (थर्मो वैज्ञानिक) शामिल थे।

3.12. सामग्री विश्लेषण।

TEM (JEOL JEM-1230, 100 kV) का उपयोग नैनोकार्बन की आकृति विज्ञान का निरीक्षण करने के लिए किया गया था। नैनोकार्बन के अनुनाद मोड की जांच के लिए एक माइक्रो रमन स्पेक्ट्रोमीटर (पीटीटी, रैमकर) लगाया गया था। एक्स-रे फोटोइलेक्ट्रॉन स्पेक्ट्रोस्कोपी (एक्सपीएस, क्रेटोस एक्सिस अल्ट्रा डीएलडी) माप भी संरचनागत विश्लेषण का निर्धारण करने के लिए किए गए थे। 12,34

3.13. सांख्यिकीय विश्लेषण।

सभी नमूने और मानक प्रयोग कम से कम तीन बार दोहराए गए। हमने औसत मूल्यों के औसत ± मानक विचलन को सांख्यिकीय रूप से तुलना करने और व्यक्त करने के लिए छात्र के टी-टेस्ट को लागू किया।

4। निष्कर्ष

संक्षेप में, हमने देखा कि लघु GONR त्वचा देखभाल उत्पादों के लिए इसके कई जैव-कार्यात्मक गुणों (चित्र 6) के कारण संभावित सामग्री थी। परिणामों से पता चला कि नैनोकार्बन ने एक बाह्य और इंट्रासेल्युलर एंटीऑक्सिडेंट के रूप में भूमिका निभाई। इस बीच, नैनोकार्बन ने टायरोसिनेस गतिविधि और मेलेनिन सामग्री को रोक दिया और वर्णक कोशिकाओं को कोई गंभीर चोट नहीं पहुंचाई। इस कार्य ने चार प्रकार के नैनोकार्बन के मेलानोजेनेसिस विरोधी कार्यों को स्थापित किया; भविष्य के अध्ययनों में मेलेनिन परिपक्वता, परिवहन और संचय से संबंधित विशिष्ट जीन और प्रोटीन अभिव्यक्तियों पर इन यौगिकों के तंत्र की जांच की जाएगी।

Cistanche सफेदी में सुधार करता है।

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