चीनी चिकित्सा सिस्टैंच रासायनिक संरचना और शरीर में घटकों का विश्लेषण Ⅲ

अध्याय 3 आरपीएलसी-एचआईएलआईसी-एमएस/एमएस पर आधारित सिस्टांच डेज़र्टिकोला के बहु-घटक घटकों का मात्रात्मक विश्लेषण

पारंपरिक चीनी चिकित्सा की रासायनिक संरचना जटिल है और इसमें प्राथमिक और द्वितीयक मेटाबोलाइट्स जैसे विभिन्न यौगिक शामिल हैं [55-561। पारंपरिक चीनी चिकित्सा (हाइड्रोफिलिक और हाइड्रोफोबिक घटकों सहित) के रासायनिक घटकों का व्यापक और विश्वसनीय विश्लेषण प्राप्त करना अभी भी एक बड़ी तकनीकी समस्या है। इसके अलावा, पारंपरिक चीनी चिकित्सा में प्रत्येक घटक की सामग्री बहुत भिन्न होती है, और पारंपरिक तरल द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री विधियों में एक ही समय में प्रमुख और ट्रेस घटकों दोनों को सटीक रूप से मापना मुश्किल होता है। 1571 पारंपरिक एकल-स्तंभ पृथक्करण पर्याप्त नहीं है, और पारंपरिक चीनी चिकित्सा में ट्रेस यौगिकों का विश्लेषण स्थिरांक द्वारा सीमित होगा। यौगिकों के हस्तक्षेप के कारण, पीक ओवरलैप घटना गंभीर है। यद्यपि जटिल मैट्रिसेस के पृथक्करण को बेहतर बनाने के लिए विभिन्न प्रकार की उन्नत क्रोमैटोग्राफी तकनीकों का उपयोग किया गया है बहु-स्तंभ क्रोमैटोग्राफी जो कम से कम दो ऑर्थोगोनल क्रोमैटोग्राफिक तंत्रों को जोड़ती है, जैसे कि दो-आयामी एलसी, कॉलम-स्विचिंग एलसी और टेंडेम दो-स्तंभ एलसी, को एक व्यवहार्य उपकरण माना गया है जो मेटाबोलाइट कवरेज का काफी विस्तार कर सकता है। इसमें कोई संदेह नहीं है कि दो-आयामी एलसी और कॉलम-स्विचिंग एलसी दोनों ही चरम क्षमता 160) को काफी बढ़ा सकते हैं। हालांकि, दोनों विधियां वाल्व पर निर्भर हैं, इंस्ट्रूमेंटेशन जटिल है, और समय लेने वाली है, और कनेक्टिंग ट्यूब और नियामकों को स्थापित करना आसान है। अवशेष मौजूद हैं, और ये दोनों विधियां अनिश्चितता कारकों की एक श्रृंखला को पेश करने के लिए प्रवण हैं जो मात्रात्मक अप्रतिस्पर्धीता1571 की ओर ले जाती हैं। हालांकि उलट-चरण हाइड्रोफिलिक इंटरैक्शन क्रोमैटोग्राफी-टेंडेम (आरपीएलसी-एचआईएलआईसी इसके अलावा, ट्रिपल क्वाड्रुपोल (QgQ) मास स्पेक्ट्रोमीटर के लिए अद्वितीय मल्टीपल रिएक्शन मॉनिटरिंग (MRM) मोड का उपयोग RPLC-HILIC की पृथक्करण क्षमता को और बेहतर बनाने के लिए एक अन्य पृथक्करण आयाम के रूप में किया जा सकता है। संक्षेप में, RPLC-HILIC-MRM RPLC, HILIC और MRM के अंतर्निहित लाभों को एकीकृत करता है और इसके एक विश्वसनीय विश्लेषणात्मक विधि बनने की उम्मीद है।

सिस्टान्चे को काम करने में कितना समय लगता है?

पारंपरिक चीनी चिकित्सा के प्रत्येक घटक की सामग्री बहुत भिन्न होती है। मुख्य घटकों की तुलना में, लोग इन ट्रेस या यहां तक ​​कि अल्ट्रा-ट्रेस यौगिकों का पता लगाने के लिए अधिक संवेदनशील तरीकों के विकास पर अधिक ध्यान देते हैं। एमआरएम मोड को अक्सर इसकी उत्कृष्ट संवेदनशीलता और अच्छी रैखिक गतिशील रेंज 167 के कारण अनुशंसित किया जाता है। हालांकि, और QqQ मास स्पेक्ट्रोमीटर के Q3 कक्ष के टर्मिनल इलेक्ट्रॉन गुणन की संतृप्ति के कारण, रैखिक सीमा आमतौर पर संकुचित होती है, और परिमाणीकरण की ऊपरी सीमा (ULOQ) इन ट्रेस घटकों की मज़बूती से निगरानी किए बिना कुछ प्रमुख यौगिकों की सामग्री को पूरी तरह से कवर नहीं कर सकती है। इसलिए, उत्पाद आयनों के उत्पादन को दबाने से ULOO का विस्तार हो सकता है। आयन जोड़े जैसे कमजोर यौगिक मापदंडों का उपयोग करना,डिपोटेंशियल(डीपी) औरटक्कर ऊर्जा(सीई) लक्ष्य उत्पाद आयनों की संख्या को कम कर सकता है और इस तरह यूएलओक्यू[68-69] को व्यापक बना सकता है

पारंपरिक चीनी चिकित्सासिस्टेन्चेस हर्बायह एक सूखा मांसल तना है जिसके पत्ते शल्कदार होते हैंसिस्टेन्चेस पौधायह आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली पारंपरिक चीनी दवाओं में से एक है और इसे "रेगिस्तानी जिनसेंग" के रूप में जाना जाता है। फेनिलथेनॉइड ग्लाइकोसाइड हमेशा सिस्टांच डेजर्टिकोला में एक गर्म शोध विषय रहा है, लेकिन हाल के वर्षों में, मैनिटोल जैसे अन्य हाइड्रोफिलिक घटकों के औषधीय प्रभावों को भी अच्छी तरह से पहचाना गया है! 70-721। हालांकि, हमारे नियमित सीएच मात्रात्मक विश्लेषण में, प्रमुख घटकों की सामग्री जैसे किइचिनेसीसाइड,वर्बास्कोसाइड, और मैनिटोल कभी-कभी यूवी डिटेक्टर या वाष्पीकरण प्रकाश बिखराव डिटेक्टर (ईएलएसडी) की माप सीमा से अधिक होने के लिए बहुत अधिक थे। इसलिए, समग्र गुणवत्ता मूल्यांकन के दृष्टिकोण से, एक विश्लेषणात्मक विधि स्थापित करना महत्वपूर्ण है जो एक साथ हाइड्रोफिलिक और हाइड्रोफोबिक घटकों की निगरानी कर सकता है और प्रमुख और ट्रेस घटकों दोनों को सटीक रूप से माप सकता है।

इस अध्याय में प्रयोग ने जटिल मैट्रिसेस का विश्लेषण करने के लिए उपयुक्त एक विश्वसनीय विधि स्थापित की - RPLC-HILIC-MS/MS द्रव द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री (सीरियल युग्मित उलटा चरण-हाइड्रोफिलिक इंटरैक्शन क्रोमैटोग्राफी-टेंडेम मास स्पेक्ट्रोमेट्री), जिसने सिस्टांच डेजर्टिकोला में 23 ध्रुवीयताओं का पता लगाना हासिल किया। यौगिकों की एक विस्तृत श्रृंखला (हाइड्रोफिलिक और हाइड्रोफोबिक घटकों को कवर करते हुए) का एक साथ पृथक्करण, विश्लेषण और सामग्री निर्धारण; इस विधि की पुनरुत्पादकता सुनिश्चित करने के लिए SMRM मोड का उपयोग करते हुए, पाइन शंकु का विस्तार करने के लिए उपयुक्त CE मान और विभिन्न आयन जोड़े का उपयोग करना इनुलिन और वर्बास्कोसाइड जैसे मुख्य घटकों का ULOQ सिस्टांच डेजर्टिकोला में प्रमुख घटकों और ट्रेस घटकों के एक साथ मात्रा का ठहराव सक्षम

अनुभाग 1 प्रायोगिक सामग्री

1. साधन

एचपीएलसी-क्यूटैप-एमएस लिक्विड मास स्पेक्ट्रोमीटर शिमदज़ु एचपीएलसी (2 एलसी-20एडीएक्सआर पंप, एसआईएल-20एसीएक्सआर स्वचालित नमूना, एसपीडी-एम20ए यूवी डिटेक्टर, सीटीओ-20एसी थर्मोस्टेट, डीजीयू-20ए3आर ऑनलाइन डिगैसिंग से सुसज्जित है। इसमें एक मशीन, सीबीएम-20ए नियंत्रक, शिमदज़ु कॉर्पोरेशन, जापान) और एससीआईईएक्स5500 क्यूट्रैप मास स्पेक्ट्रोमीटर (ईएसआई आयन स्रोत, एससीआईईएक्स, फोस्टर सिटी, सीए, यूएसए) शामिल हैं। डेटा अधिग्रहण और गणना विश्लेषक सॉफ्टवेयर1.6.2 सॉफ्टवेयर द्वारा पूरी की गई थी।

2. सामग्री और अभिकर्मक

वाटर्स एक्विटी यूपीएलसी एचएसएस टी3 कॉलम (2.1 x 100 मिमी, 1.8 माइक्रोन), वाटर्स एक्सब्रिज एमाइड कॉलम (4.6 मिमी x 150 मिमी, 3.5 माइक्रोन)।पॉलीइथरइथरकेटोन(PEEK) पाइपलाइन (एगिलेंट कंपनी, यूएसए)। क्रोमैटोग्राफी ग्रेड और मास स्पेक्ट्रोमेट्री ग्रेड मेथनॉल, एसिटोनाइट्राइल और मास स्पेक्ट्रोमेट्री ग्रेड फॉर्मिक एसिड थर्मोफिशर (पिट्सबर्ग, पीए, यूएसए) से खरीदे गए थे, और पानी मिलि-क्यू अल्ट्राप्योर पानी (मिलिपोर, बेडफोर्ड, एमए, यूएसए) था जिसे प्रयोगशाला में बनाया गया था। नियासिन (निकोटिनिक एसिड, cLogP, 0.799), सक्सीनिक एसिड (cLogP, -0.526) सिग्मा-एल्ड्रिच कंपनी (सेंट लुइस, एमओ, यूएसए) से खरीदे गए: यूरिडीन (cLogP, -2.219), एडेनोइड एडेनोसिन (cLogP, -2.158), इनोसिन (cLogP, {{10}}.106) और ग्वानोसिन (cLogP, -3.326) बीजिंग शिनजिंगके बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड से खरीदे गए। सैलिड्रोसाइड (cLogP -0.296), 6-डिऑक्सीकैटलपोल (cLogP, -3.071), फेनिलएलनिन (cLogP, -1.556), 8-एपि-लोगनिक एसिड (cLogP, -2.366), मैनीटोल (cLogP, -2.046), सुक्रोज (cLogP, -3.087), ग्लूरोसाइड (cLogP, -1.757), अलास्कैनियोसाइड ए (अलास्कैनियोसाइड ए, cLogP -0.971 ), इचिनाकोसाइड (इचिनाकोसाइड, cLogP, -1.811), फ़ेरूलिक एसिड (cLogP, 1.421), एक्टियोसाइड (cLogP, -0.890), आइसोएक्टियोसाइड (cLogP, -0.057) और पिनोरेसिनॉल- -डी-ग्लूकोपाइरानोसाइड (cLogP, -0.384) पेकिंग विश्वविद्यालय के प्राकृतिक और बायोमिमेटिक दवाओं की प्रमुख प्रयोगशाला द्वारा प्रदान किया गया था, -2.211) चेंग्दू मैनसाइट बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड से खरीदे गए, सिस्टेनोसाइड ए (सिस्टेनोसाइड ए, cLogP, -1.365), 2'-एसिटाइलेक्टियोसाइड (cLogP, -0.040) और लिक्विरिटिन एपिओसाइड (cLogP, -0.267) शंघाई शिडांडे बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड से खरीदे गए, और ट्यूबुलोसाइड ए (ट्यूबुलोसाइडए, cLogP, 0.287) चेंग्दू वेइकी बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड से खरीदे गए। सभी संदर्भ पदार्थों की शुद्धता का परीक्षण HPLC-DAD-IT-TOF-MS द्वारा किया गया, और शुद्धता 98% से अधिक थी। सभी नियंत्रण पदार्थ cLogP मानों की गणना ChemBioDraw Ultra14.0 सॉफ़्टवेयर (कैम्ब्रिजसॉफ्टकैम्ब्रिज, MA, USA) द्वारा की गई।