सेप्टिसीमिया चूहों के लीवर माइटोकॉन्ड्रिया में एटीपीस के परिवर्तन पर सिस्टैंच का प्रभाव

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वांग ज़िकियांग यिन गंग

सार: उद्देश्य:के परिवर्तन का अध्ययन करने के लिएसेप्सिस में लीवर माइटोकॉन्ड्रिया की एटीपीस गतिविधिऔर का प्रभावसिस्टांचेइस पर।तरीके:40 एसडी चूहों को बेतरतीब ढंग से शम ऑपरेशन समूह, 12- घंटे नियंत्रण समूह, 12- घंटे प्रशासन समूह, 16- घंटे नियंत्रण समूह, और 16- घंटे प्रशासन समूह में विभाजित किया गया था।पूतिमॉडल को cecal बंधाव और वेध (C LP) द्वारा दोहराया गया और तुलना की गई। समूह जीवित रहने की दर, औसत धमनी दबाव (एमएपी), यकृतमाइटोकॉन्ड्रियल ATPase के सक्रियणगतिविधि में परिवर्तन।परिणाम:चूहों द्वारा सेप्सिस मॉडल को दोहराने के बाद,ATPase के सक्रियणजिगर की गतिविधिमाइटोकॉन्ड्रियाघट गया, और 24-घंटे जीवित रहने की दर में उल्लेखनीय कमी आई।ATPase के सक्रियणप्रशासन के बाद यकृत माइटोकॉन्ड्रिया की गतिविधिसिस्टांचेनियंत्रण समूह (पी .) की तुलना में काफी सुधार हुआ था<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">निष्कर्ष:घटी हुई माइटोकॉन्ड्रियलसेप्सिस में एटीपीस गतिविधि, सेल कैल्शियम अधिभार, और एडीमा और नेक्रोसिस मृत्यु के प्रत्यक्ष कारण हैंसेप्टिक चूहे. Cistanche ATPase गतिविधि को बढ़ाता हैके उपचार के लिए एक महत्वपूर्ण तंत्र हैपूति.

कीवर्ड: सिस्टैंच, सिस्टैंच सेप्सिस माइटोकॉन्ड्रिया एटीपी एंजाइम

पूतिचिकित्सकीय रूप से गंभीर बीमारी है। हालांकि पिछले 30 वर्षों में एंटीबायोटिक दवाओं को अद्यतन किया गया है, लेकिन सेप्सिस की मृत्यु दर में उल्लेखनीय कमी नहीं आई है और यह अभी भी 50 प्रतिशत के बराबर है। पश्चिमी जीवाणुरोधी "बुराई को खत्म करना" अकेले उपचार से रोग के निदान में सुधार नहीं होता हैपूतिटीसीएम के रोगजनन में, सेप्सिस "कमी और बुराई की धार्मिकता" से संबंधित है, उपचार "शरीर को मजबूत करने" और "बुराई को खत्म करने" के सिद्धांत पर आधारित होना चाहिए। पारंपरिक चीनी चिकित्सा ने सेप्सिस के उपचार में काफी संभावनाएं दिखाई हैं।पूतिकई अंग विफलता से जटिल उच्च मृत्यु दर का मूल कारण है, और कोशिका संरचना क्षति कई अंग विफलता का सूक्ष्म रोग संबंधी आधार है [2]। सिस्टैंच टॉनिक के लिए एक पारंपरिक चीनी दवा है, आधुनिक औषधीय अध्ययनों से पता चला है किसिस्टांचेझिल्ली एस्टर पेरोक्सीडेशन का विरोध करने और सेल फ़ंक्शन की रक्षा करने का प्रभाव है [3]। का कार्यमाइटोकॉन्ड्रियल ऊर्जाचयापचय कोशिकाओं के बुनियादी कार्यों में से एक है, और की गतिविधिATPase के सक्रियणके कार्य को मापने के लिए एक महत्वपूर्ण संकेतक हैमाइटोकॉन्ड्रियल ऊर्जाउपापचय। इस प्रयोग में, हमने के परिवर्तनों को देखाATPase के सक्रियणजिगर की कोशिकाओं की गतिविधिसेप्टिक चूहेऔर के प्रभावों के बीच संबंधसिस्टांचेइस पर और चूहों की मृत्यु दर और नैदानिक ​​"मजबूत" उपचार के लिए सैद्धांतिक आधार और प्रभावी अन्वेषण प्रदान करने के उद्देश्य सेपूति

सिस्टांचे

1. सामग्री और तरीके

1.1 अभिकर्मक

सिस्टांचेझिंजियांग (थ्री गोरजेस यूनिवर्सिटी स्कूल ऑफ मेडिसिन के प्रोफेसर टैन डेफू द्वारा पहचाना गया) से खरीदा गया था। 200 ग्राम सूखे सिस्टांच को लेकर आसुत जल में दो बार काढ़ा करें। छानना वाष्पित हो गया था और 1 ग्राम / एमएल की एकाग्रता में केंद्रित था। सोडियम पेंटोबार्बिटल (001104), चाइना नेशनल फार्मास्युटिकल ग्रुप शंघाई केमिकलअभिकर्मककंपनी;ATPase अभिकर्मक(20030108), नानजिंग जियानचेंग बायोइंजीनियरिंग रिसर्च इंस्टीट्यूट।

1.2 प्रायोगिक पशु मॉडल और समूहीकरण

40 नर एसडी चूहों (टोंगजी मेडिकल कॉलेज के प्रायोगिक पशु केंद्र, हुआज़ोंग विज्ञान और प्रौद्योगिकी विश्वविद्यालय से खरीदे गए), को बेतरतीब ढंग से 5 समूहों में विभाजित किया गया था: शम ऑपरेशन समूह (एन =8), 12- घंटे का नियंत्रण समूह (एन =8), 12- घंटे प्रशासन समूह (एन =8), 16- घंटे नियंत्रण समूह (एन =8), 16- घंटा प्रशासन समूह (एन=8)। शम ऑपरेशन समूह और नियंत्रण समूह को गैवेज द्वारा सामान्य खारा दिया गया था, और प्रशासन समूह को 1 ग्राम/मिलीलीटर सिस्टैंच के साथ, दिन में दो बार, 15 दिनों तक के लिए गैवेज दिया गया था।पूति मॉडलcecal बंधाव और वेध [4] द्वारा दोहराया गया था। ऑपरेशन से पहले, जानवर पानी पीने के लिए स्वतंत्र थे और 12 घंटे तक उपवास करते थे।

1.3 माध्य धमनी दाब का निर्धारण

जुगुलर नस को खोपड़ी की सुई के साथ डाला गया था, हेपरिन का उपयोग थक्कारोधी के लिए किया गया था, बाईं आम कैरोटिड धमनी को महाधमनी चाप में बंद कर दिया गया था, और स्व-निर्मित कैथेटर जैविक मल्टीचैनल उपकरण से जुड़ा था, और औसतधमनी दाब(एमएपी) दर्ज किया गया। एमएपी स्थिर होने के बाद प्रयोग।

1.4 माइटोकॉन्ड्रियल एटीपीस गतिविधि का निर्धारण

चूहे के जिगर का 6 ग्राम लें और इसे जल्दी से 0 डिग्री पृथक्करण माध्यम [250सुक्रोज के मिमीोल, एथॉक्सी-एथिल पाइपरज़ीन के 2 मिमीोल 2-एथिल सल्फोनिक एसिड, 0.1 मिमी एथिलीनडायमिनेटेट्राएसेटिक एसिड, में रखें। pH7.4], इसे खोलें और अशुद्धियों को धो लें, मीडियम सस्पेंशन (1:10) को अलग करें, टेफ्लॉन इलेक्ट्रिक होमोजेनाइज़र (1200r/मिनट) के साथ होमोजेनाइज़ करें, 10 मिनट के लिए 2000r/मिनट पर सेंट्रीफ्यूज, 10000r पर सुपरनेटेंट, सेंट्रीफ्यूज को बनाए रखें। / मिनट 15 मिनट के लिए, सतह पर तैरनेवाला त्यागें, अवक्षेप लें और इसे प्राप्त करने के लिए पृथक्करण माध्यम के 2 मिलीलीटर में निलंबित करेंमाइटोकॉन्ड्रियल निलंबन. पूरी प्रक्रिया 0 से 4 डिग्री पर की जाती है। फॉस्फोरस निर्धारण विधि [5] का उपयोग मापने के लिए किया गया थाएटीपीस गतिविधि(किट को नानजिंग जियानचेंग इंस्टीट्यूट ऑफ बायोलॉजिकल इंजीनियरिंग से खरीदा गया था)।

1.5 सांख्यिकीय प्रसंस्करण

प्रयोगात्मक डेटा सभी माध्य ± मानक विचलन (एक्स ± एस) के रूप में व्यक्त किए जाते हैं, और एसपीएसएस सॉफ्टवेयर विचरण और सहसंबंध विश्लेषण का एकतरफा विश्लेषण करता है।

सिस्टैंच का अर्क

2. परिणाम

2.1 माध्य धमनी दाब और 24- घंटे चूहे की मृत्यु दर पर सिस्टैंच का प्रभाव

cecal बंधाव और वेध के 12 घंटे बाद नियंत्रण समूह का रक्तचाप काफी कम हो गया, और यह 16 घंटों में अधिक स्पष्ट हो गया। दिखावटी ऑपरेशन समूह की तुलना में, एक महत्वपूर्ण अंतर था। का रक्तचापसिस्टैंच उपचारसमूह में सुधार हुआ। नियंत्रण समूह की मृत्यु दर नकली ऑपरेशन समूह की तुलना में काफी अधिक थी, और प्रशासन समूह की मृत्यु दर संबंधित नियंत्रण समूह की तुलना में काफी कम थी।

2.2 माइटोकॉन्ड्रियल एटीपीस गतिविधि पर सिस्टैंच का प्रभाव

की गतिविधियाँसोडियम-पोटेशियम ATPase, कैल्शियम ATPase, मैग्नीशियम ATPase, और कैल्शियम-मैग्नीशियम ATPaseप्रशासन समूह में संबंधित नियंत्रण समूह की तुलना में काफी अधिक थे, जो नकली ऑपरेशन समूह के स्तर तक पहुंच गया था, जो कि कमी के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध था।चूहा मृत्यु दर (r=0.834) ).

सिस्टांचे

3. चर्चा

ना प्लस -K प्लस -ATPase, जिसे सोडियम-पोटेशियम पंप के रूप में भी जाना जाता है, कोशिका की शारीरिक गतिविधियों, शरीर के तापमान और सामान्य चयापचय को बनाए रखने और कोशिका के अंदर और बाहर आयनों के संतुलन को विनियमित करने में एक महत्वपूर्ण शारीरिक भूमिका निभाता है।पूति मेंआंतरिक माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली में गंभीर सोडियम पंप की शिथिलता होती है, जिससेमाइटोकॉन्ड्रियलशोफ।ना प्लस-के प्लस-एटीपीएंजाइम क्षतिग्रस्त है, का असंतुलनमाइटोकॉन्ड्रियलआयन सांद्रता बढ़ जाती है, ऊर्जा चयापचय एंजाइम गतिविधि बाधित हो जाती है, सेल ऊर्जा की आपूर्ति समाप्त हो जाती है, और साइटोटोक्सिक एडिमा होती है। उसी समय, झिल्ली पारगम्यता बढ़ जाती है, जो अंततः कोशिका मृत्यु की ओर ले जाती है। प्रयोग में, हमने पाया कि माइटोकॉन्ड्रियलना प्लस -K प्लस -ATPaseसेप्टिक हेपेटोसाइट्स की गतिविधि काफी कम हो गई थी (पी<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">ना प्लस -K प्लस -ATPaseकी गतिविधिजिगर माइटोकॉन्ड्रियाउल्लेखनीय रूप से वृद्धि हुई थी (पी<0.05), and="" the="" mortality="" of="">सेप्टिक चूहेउल्लेखनीय रूप से कम किया गया था। प्रयोगात्मक परिणाम बताते हैं कि की कमीना प्लस-के प्लस-एटीपीस गतिविधिके विकास के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध हैचूहों में सेप्सिस. निषेधना प्लस-के प्लस-एटीपीस गतिविधिसेप्सिस का तेजी से विकास हो सकता है, सेल एडिमा, और कई अंगों की विफलता के कारण मृत्यु हो सकती है। महत्वपूर्ण तंत्रों में से एक। हाल के वर्षों में, इस बारे में कई रिपोर्टें आई हैंना प्लस -K प्लस -ATPaseऔर कई बीमारियां, जिन्होंने नैदानिक ​​और बुनियादी कर्मचारियों का ध्यान आकर्षित किया है। की गतिविधि में परिवर्तन के नियम का अध्ययन करना बहुत महत्वपूर्ण हैना प्लस -K प्लस -ATPaseऔर इसके विनियमन [6]। के विशिष्ट तंत्र के बारे में बहुत कम जानकारी हैना प्लस -K प्लस -ATPaseके विकास और परिणाम मेंपूति,और आगे के शोध की जरूरत है।

इंट्रासेल्युलर रिलीज प्रतिक्रिया और सूचना संचरण [7] को बनाए रखने के लिए इंट्रासेल्युलर कैल्शियम और मैग्नीशियम की स्थिरता आवश्यक भौतिक आधार है। प्रयोग में, की कमीCa2 प्लस -ATPase गतिविधिनियंत्रण समूह में कैल्शियम पंप की गतिविधि को सीधे प्रभावित करता है, और कैल्शियम पंप गतिविधि में कमी की भूमिका कमजोर होती हैमाइटोकॉन्ड्रियलCa2 प्लस को सेल से बाहर निकालने के लिए कैल्शियम पंप, और Ca2 प्लस ओवरलोड inमाइटोकॉन्ड्रिया. माइटोकॉन्ड्रिया में कैल्शियम का अधिभार एक महत्वपूर्ण कारण हैमाइटोकॉन्ड्रियलऑक्सीडेटिव फास्फारिलीकरण विकार, संरचनात्मक क्षति, और कोशिका परिगलन [8, 9]। Ca2 प्लस अधिभार माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता और ऊतक एटीपी सामग्री [10] को कम करता है, और ऊतक कोशिकाओं का ऊर्जा उपयोग बिगड़ा हुआ है। Ca2 प्लस माइटोकॉन्ड्रिया पर फॉस्फोलिपेज़ को सक्रिय कर सकता है, जिससे नुकसान हो सकता हैमाइटोकॉन्ड्रियल झिल्लीमाइटोकॉन्ड्रिया के सामान्य एटीपी संश्लेषण कार्य को नष्ट करते हैं, और माइटोकॉन्ड्रियल ऊर्जा उत्पादन में बाधा डालते हैं [11]। के विकारमाइटोकॉन्ड्रियल कैल्शियम चयापचयसीधे प्रभावित कर सकता हैमाइटोकॉन्ड्रियल श्वसन क्रिया, कारणमाइटोकॉन्ड्रियल ऑक्सीजनइलेक्ट्रॉन परिवहन श्रृंखला [12] में तेज और प्रोटॉन ऑक्सीकरण विकार। इसी समय, Ca2 प्लस की वृद्धि से माइटोकॉन्ड्रिया को एस्टर पेरोक्सीडेशन की क्षति बढ़ सकती है [13]। ये सभी प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष रूप से सेल ऊर्जा आपूर्ति की विफलता और ऊतकों और अंगों की मृत्यु का कारण बनते हैं और सेप्सिस में रोग संबंधी परिवर्तनों के विकास में तेजी लाते हैं। प्रयोग में, हमने यह भी पाया कि की गतिविधियाँसेप्टिक चूहों में M g2 plus -ATPase और Ca2 plus -M g2 plus -ATPaseमें भी काफी कमी आई है।Mg2 plus -ATPase और Ca2 plus -M g2 plus -ATPaseइंट्रासेल्युलर कैल्शियम और मैग्नीशियम संतुलन बनाए रखने के लिए महत्वपूर्ण पदार्थ हैं। विडनर ने बताया कि इंट्रासेल्युलर मैग्नीशियम आयनों की कमी अपरिवर्तनीय सेल क्षति का उत्प्रेरण कारक है, और एमजी 2 प्लस / सीए 2 प्लस का अनुपात एक महत्वपूर्ण संकेतक है जो कोशिकाओं की अपरिवर्तनीय क्षति को दर्शाता है [14]।Mg2 plus -ATPase और Ca2 plus -M g2 plus -ATPaseकी गतिविधियाँसिस्टांचे-प्रशासित समूह को बढ़ाया गया, A TPase एक सल्फ़हाइड्रीलेज़ है, औरसिस्टांचेएक विरोधी झिल्ली एस्टर पेरोक्सीडेशन प्रभाव है, जो कि की वृद्धि के कारण हो सकता हैATPase के सक्रियणरसायन विज्ञान के सिस्टांचे आधार और औषध विज्ञान के आधार [15] द्वारा गतिविधि।

पूति में, माइटोकॉन्ड्रियलऊर्जा चयापचय विकार, कमीएटीपी एंजाइम गतिविधि, माइटोकॉन्ड्रियल एडिमा, इंट्रासेल्युलर कैल्शियम अधिभार, और कैल्शियम-मैग्नीशियम संतुलन विकार सेप्सिस कोशिका मृत्यु और कई अंग विफलता के प्रत्यक्ष कारण हैं।सिस्टांचेझिल्ली एस्टर पेरोक्सीडेशन का विरोध करता है, एटीपीस गतिविधि को बढ़ाता है, इंट्रासेल्युलर कैल्शियम और मैग्नीशियम होमियोस्टेसिस को बनाए रखता है, और सेल कार्यों के सामान्य संचालन की रक्षा करता है।सिस्टांचेकी मृत्यु दर को कम करने के लिए एक महत्वपूर्ण तंत्र हैसेप्टिक चूहे. यह की अच्छी संभावनाओं को प्रदर्शित करता हैसेप्सिस के उपचार में सिस्टैन्च