डी-गैलेक्टोज-प्रेरित एजिंग मॉडल चूहों के प्रतिरक्षा कार्य पर सिस्टैंच ग्लाइकोसाइड का प्रभाव

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सार उद्देश्य:

डी-गैलेक्टोज-प्रेरित उम्र बढ़ने वाले चूहों पर सिस्टेन्च ग्लाइकोसाइड्स के एंटी-एजिंग प्रभाव के प्रतिरक्षा तंत्र का अध्ययन करना।तरीकों: 3 एच-टीडीआर निगमन विधि का उपयोग लिम्फोसाइट परिवर्तन क्षमता को निर्धारित करने के लिए किया गया था, तटस्थ लाल परीक्षण का उपयोग माउस पेरिटोनियल मैक्रोफेज के फागोसाइटिक फ़ंक्शन को निर्धारित करने के लिए किया गया था, इम्यूनोफ्लोरेसेंस विधि का उपयोग लिम्फोसाइट सबसेट का पता लगाने के लिए किया गया था, और रेडियोइम्यूनोसे का उपयोग निर्धारित करने के लिए किया गया था। परिधीय रक्त में IL-2 का स्तर। एनके सेल गतिविधि को मापने के लिए ट्रेस एनएजी एंजाइम रिलीज विधि।परिणाम: डी-गैलेक्टोज-प्रेरित उम्र बढ़ने वाले चूहों का प्रतिरक्षा कार्य काफी कम हो गया था, जो लिम्फोसाइट परिवर्तन, परिधीय रक्त आईएल -2 सामग्री, सीडी 4 प्लस टी सेल, और सीडी 8 प्लस टी सेल सामग्री, एक फागोसाइटिक की क्षमता में प्रकट हुआ था। पेरिटोनियल मैक्रोफेज का कार्य, और एनके सेल गतिविधि। कमी (पी<>ग्लाइकोसाइड का सिस्टैंचलिम्फोसाइट परिवर्तन क्षमता, परिधीय रक्त आईएल -2 सामग्री, पेरिटोनियल मैक्रोफेज का एक फागोसाइटिक कार्य, एनके सेल गतिविधि, सीडी 4 प्लस टी और सीडी 8 प्लस टी सेल सामग्री (पी) में सुधार कर सकते हैं।<0.05). 0.="" 05).="">निष्कर्ष: ग्लाइकोसाइड का सिस्टैंच डी-गैलेक्टोज-प्रेरित उम्र बढ़ने वाले चूहों के प्रतिरक्षा कार्य को काफी बढ़ा सकता है, युवा चूहों की स्थिति को बहाल कर सकता है या उनसे संपर्क कर सकता है, और उम्र बढ़ने में देरी का प्रभाव डाल सकता है।

[कीवर्ड]: सिस्टैंच कुल ग्लाइकोसाइड; डी-गैलेक्टोज; उम्र बढ़ने का मॉडल; रोग प्रतिरोधक शक्ति

ग्लाइकोसाइड का सिस्टैंच:बुढ़ापा विरोधी

सिस्टांचेएंटी-एजिंग और दीर्घायु फ़ार्मुलों में सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली दवा है। सिस्टैंच टोटल ग्लाइकोसाइड्स (जीसीएस) सिस्टैंच में फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स के एक वर्ग के लिए सामान्य शब्द है और उत्तरी झिंजियांग घटक [1] में नमक-उत्पादक सिस्टैंच से निकाली गई मुख्य जैविक गतिविधि है, जीसीएस को एक एंटी-लिपिड साबित किया गया है। पेरोक्सीडेशन प्रभाव [2], लेकिन इसके बारे में कुछ शोध रिपोर्टें हैंविरोधी उम्र बढ़ने प्रतिरक्षा तंत्र.

1. सामग्री और तरीके

1. 1 पशु समूहन और चिकित्सा

स्वास्थ्य मंत्रालय के जैविक उत्पाद संस्थान के पशु कक्ष द्वारा उपलब्ध कराए गए 60 कुनमिंग चूहे, 3 महीने के नर और मादा, जिनका वजन 18-21 ग्राम है। प्रत्येक समूह के चूहों को एक ही कमरे में अलग-अलग पिंजरों में रखा गया था, और वे खाने और पीने के लिए स्वतंत्र थे। जानवरों को बेतरतीब ढंग से तीन समूहों में विभाजित किया गया था: प्रत्येक समूह में 20 जानवरों के साथ युवा नियंत्रण समूह, वृद्ध मॉडल समूह और मॉडल प्रशासन समूह। साहित्य के अनुसार जीसीएस को फाइटोकेमिस्ट्री विभाग, फार्मेसी स्कूल, जियामुसी विश्वविद्यालय द्वारा निकाला और पहचाना गया था।

प्रतिरक्षा में सुधारसिस्टैंच पूरक

1.2 विधि

युवा समूह को हर दिन 30 दिनों के लिए गर्दन में सामान्य खारा इंजेक्शन लगाया गया था और 15वें दिन से 15 दिनों के लिए गर्म पानी दिया गया था। उम्र बढ़ने वाले मॉडल समूह में चूहों को हर दिन गर्दन के पीछे डी-गैलेक्टोज (ऑटोक्लेव) 100 मिलीग्राम / किग्रा के साथ इंजेक्शन लगाया गया था। लगातार 30 दिनों तक बॉडीवेट। मॉडल प्रशासन समूह में, डी-गैलेक्टोज 100 मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन को हर दिन गर्दन के पीछे चमड़े के नीचे इंजेक्ट किया गया था, और जीसीएस 125 मिलीग्राम · किग्रा -1 · डी -1 उसी पर प्रशासित किया गया था। 15 वें दिन से समय, और प्रशासन लगातार 15 दिनों के लिए प्रशासित किया गया था। 30वें दिन एक ही समय में सभी जानवरों की बलि दी गई, और विभिन्न अवलोकन सूचकांक निर्धारित किए गए।

1. 2. 1 लिम्फोसाइट परिवर्तन प्रयोग

माउस प्लीहा सेल निलंबन को 2 × 106 की सेल सांद्रता में समायोजित किया गया था, और कॉन ए को 5 दिनों के लिए इन विट्रो में सुसंस्कृत होने के लिए एक उत्तेजना के रूप में इस्तेमाल किया गया था, और इसकी परिवर्तन क्षमता का परीक्षण 3 एच-टीडी आर निगमन विधि द्वारा किया गया था। परिणाम उत्तेजना सूचकांक एसआई (एसआई=कोना उत्तेजना समूह / नियंत्रण समूह) के रूप में व्यक्त किए जाते हैं।

1. 2. 2 माउस पेरिटोनियल मैक्रोफेज फागोसाइटिक फ़ंक्शन (तटस्थ लाल परीक्षण [3])

माउस पेरिटोनियल द्रव लीजिएबृहतभक्षककोशिकाअसंबद्ध रूप से निलंबन। सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, अवक्षेप को सेल कल्चर मीडियम में फ्लोट करें। समाधान की सेल एकाग्रता को 2×106 में गिनने और समायोजित करने के लिए हेमोसाइटोमीटर का उपयोग करें। इसे 37 डिग्री इन्क्यूबेटर में 2 घंटे के लिए रखें। , सतह पर तैरनेवाला और गैर-पक्षपाती कोशिकाओं को त्यागें। दीवार मैक्रोफेज लें और 37 डिग्री के लिए 0.1 प्रतिशत तटस्थ लाल शारीरिक खारा जोड़ें और 30 मिनट के लिए संस्कृति जारी रखें, तटस्थ लाल त्यागें और बार-बार 37 डिग्री पीबीएस के साथ मैक्रोफेज धो लें, 50 प्रतिशत एसिटिक एसिड और 50 प्रतिशत इथेनॉल के साथ पतला, 722 सेट करें 540 एनएम तरंग दैर्ध्य पर स्पेक्ट्रोफोटोमीटर वर्णमिति, मापा अवशोषण ए मान।

1. 2. 3 लिम्फोसाइट सबसेट का पता लगाना

0.1 मिली 1×107/एमएल . लेंलिम्फोसाइट निलंबन, क्रमशः 10 उल माउस एंटी-माउस सीडी3, सीडी4 और सीडी8 मोनोक्लोनल एंटीबॉडी जोड़ें, अच्छी तरह मिलाएं, 30 मिनट के लिए 4 डिग्री पर इनक्यूबेट करें, पीबीएस में 1 प्रतिशत एफसी एस (0. 2एम, पीएच7.4) धो लें 3 बार, फ्लो साइटोमेट्री डिटेक्शन: लेजर फ्लो साइटोमीटर (FACScan, USA BD कंपनी), आर्गन लेजर, एक्साइटेशन वेवलेंथ 488 एनएम, FITC डिटेक्शन स्पेक्ट्रम 480-630 एनएम, काउंट 800/s सेल, 200, 000 सेल कुल मिलाकर। परिणामों का विश्लेषण किया गया और एक कंप्यूटर HP340 और पेशेवर सॉफ्टवेयर LYSI SⅡ के साथ रिकॉर्ड किया गया।

1. 2. 4 रेडियोइम्यूनोसे द्वारा परिधीय रक्त में आईएल-2 का निर्धारण

एक परखनली में माउस नेत्रगोलक से 1 मिलीलीटर रक्त लें। जमावट के बाद, सीरम अलग हो जाता है। किट ऑपरेशन के अनुसार काउंटर पर सीपीएम नंबर नापा जाता है।

1. 2. 5 एनके सेल गतिविधि

माउस नेत्र रक्त को असमान रूप से लें और थक्कारोधी के लिए हेपरिन जोड़ें। विवरण के लिए साहित्य [4] देखें। 1.3 सांख्यिकीय प्रसंस्करण प्रयोगात्मक डेटा को x±s के रूप में व्यक्त किया जाता है, जिसे एस एएस सॉफ्टवेयर द्वारा संसाधित किया जाता है, और विचरण विश्लेषण, एफ परीक्षण और टी-टेस्ट द्वारा विश्लेषण किया जाता है।

सिस्टैंच का लाभ: प्रतिरक्षा में सुधार

2. परिणाम

2.1 चूहों के प्रत्येक समूह में लिम्फोसाइटों और टी सेल सबसेट की परिवर्तन क्षमता पर जीसीएस के प्रभाव तालिका 1 में दिखाए गए हैं।

तालिका एक. चूहों के प्रत्येक समूह में लिम्फोसाइटों और टी सेल सबसेट की परिवर्तन क्षमता पर जीसीएस का प्रभाव (n= 16,x±s)

Ⅰ की तुलना में: 1) पी<0.05, 2)="" p.="" 05;="" compared="" with="" ⅱ:="" 2)="" p=""><0.05; the="" same="" as="" the="" table="">

2.2 चूहों के प्रत्येक समूह में फागोसाइटिक फ़ंक्शन, आईएल -2 सामग्री, और पेरिटोनियल मैक्रोफेज की एनके सेल गतिविधि पर जीसी के प्रभाव तालिका 2 में दिखाए गए हैं।

तालिका 2. चूहों के प्रत्येक समूह में phagocytic फ़ंक्शन, NK सेल गतिविधि और IL-2 पेरिटोनियल मैक्रोफेज की सामग्री पर GCS का प्रभाव (n= 16,x±s)

3. चर्चा

इस प्रयोग में, उम्र बढ़ने वाले मॉडल चूहों की पेरिटोनियल मैक्रोफेज और एनके सेल गतिविधि के फागोसाइटिक फ़ंक्शन को कम किया गया था (पी<0.05). gcs="" can="" increase="" the="" phagocytic="" function="" and="" nk="" cell="" activity="" of="" peritoneal="" macrophages="" in="" aging="" model="" mice=""><0.05), which="" is="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" from="" this,="" it="" can="" be="" inferred="" that="" gcs="" can="">शरीर की गैर-विशिष्ट सेलुलर प्रतिरक्षा और प्रतिरक्षा विनियमन कार्यों में सुधार करें, तथाएंटी-ट्यूमर और एंटी-संक्रमण को बढ़ाएंउम्र बढ़ने में देरी करने के तरीकों में से एक उम्र बढ़ने वाला शरीर है [4]। आईएल-2 टी लिम्फोसाइटों के प्रसार और विभेदन के लिए एक अनिवार्य साइटोकाइन है, और यह लिम्फोसाइटों, मोनोसाइट्स-मैक्रोफेज और एनके कोशिकाओं के कार्यों को नियंत्रित कर सकता है। आईएल -2 टी लिम्फोसाइटों के प्रसार और भेदभाव को बढ़ावा दे सकता है, नियंत्रित कर सकता हैरोग प्रतिरोधक क्षमता का पता लगना, टीसी गतिविधि को प्रेरित करता है, और एंटीबॉडी और इंटरफेरॉन के उत्पादन को बढ़ावा देता है।यह प्रतिरक्षा प्रणाली में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है. इस प्रयोग में, उम्र बढ़ने वाले मॉडल चूहों की IL-2 सामग्री में कमी आई (P .)<0.05). after="" gcs="" were="" given,="" the="" il-2="" content="" increased=""><0.05), which="" was="" close="" to="" the="" youth="" model="" group,="" indicating="" that="" gcs="" produced="" il="" by="" increasing="" t="" lymphocytes.="" -2,="" enhance="" the="" immune="" function="" of="" elderly="" mice="" and="" achieve="" the="" effect="" of="" delaying="" immune="" aging.="" the="" content="" of="" cd4+="" t="" cells="" and="" cd8+="" t="" cells="" decreased="" significantly="" with="" increasing="" age.="" the="" low="" t="" cell="" function="" was="" also="" manifested="" by="" the="" decline="" of="" specific="" antigen="" and="" mitogen="" con="" a,="" and="" the="" decline="" of="" the="" ability="" of="" t="" cells="" to="" divide="" repeatedly.="" in="" this="" experimental="" model,="" the="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4+="" t="" cell="" and="" cd8+="" t="" cell="" content="" of="" the="" mouse="" was="" reduced="" (p=""><0.05), and="" gcs="" increased="" the="" mouse="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4="" +="" t="" cell="" and="" cd8="" +="" t="" cell="" content="" (p=""><0.05). 05),="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" it="" shows="" that="" gcs="" can="" make="" the="" body="" resist="" aging="" and="" tend="" to="" be="" younger="" by="" promoting="" the="" proliferation="" of="" lymphocytes="" and="">चूहों के विशिष्ट सेलुलर प्रतिरक्षा समारोह में सुधार।

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4. सन्दर्भ

1. डू नियानशेंग, वांग होंग। सिस्टैंच [जे] से फेनोक्सीथेनॉल ग्लाइकोसाइड्स का अलगाव और पहचान। प्राकृतिक उत्पाद अनुसंधान और विकास, 1993; 5(4): 7-8.

2. ली लिनलिन, वांग ज़ियाओवेन, वांग ज़ुफ़ेई, एट अल। सिस्टैंच J〕 के कुल ग्लाइकोसाइड के एंटी-लिपिड पेरोक्सीडेशन और एंटी-विकिरण प्रभाव। चाइनीज जर्नल ऑफ चाइनीज मटेरिया मेडिका, 1997; 22(6): 364-367।

3. जू शुयुन, बियान रुलियन। फार्माकोलॉजी की प्रायोगिक पद्धति [एम]। दूसरा संस्करण। बीजिंग: पीपुल्स हेल्थ पब्लिशिंग हाउस, 1994: 1221।

4. लियू ज़िओंगबो, लियू कैयू, यांग ज़ियुन, एट अल। माइक्रो-नाग रिलीज विधि [जे] द्वारा एनके सेल गतिविधि का पता लगाना। जर्नल ऑफ़ क्लिनिकल लेबोरेटरी साइंस, 1996; 14(2): 66-67।