2 परिणाम और विश्लेषण

2.1 पॉलीसेकेराइड के भौतिक-रासायनिक गुण

2.1.1 रासायनिक घटकों का विश्लेषण

झिल्ली पृथक्करण के माध्यम से प्राप्त चार अंशों के भौतिक रासायनिक गुण और उपज - पेटेंट झिल्ली पृथक्करण तकनीक पर आधारित एक तकनीक (पेटेंट संख्या ZL200710102756.7) मालिकहॉटन डिचेन फार्मास्युटिकल बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड (https://www.xjcistanche.com/about-us)- तालिका 1 में प्रस्तुत किया गया है। चार अंशों के बीच कुल चीनी, प्रोटीन और यूरोनिक एसिड की सामग्री में महत्वपूर्ण अंतर देखा गया। सीटीपी 1 में सबसे अधिक चीनी सामग्री प्रदर्शित हुई, और इसकी यूरोनिक एसिड सामग्री अन्य अंशों की तुलना में काफी अधिक थी। जैसे ही अंश सीटीपी 1 से सीटीपी 4 में बदल गए, उपज, कुल चीनी सामग्री और यूरोनिक एसिड सामग्री में स्पष्ट रूप से गिरावट देखी गई।

 

 

वेसिस्टैंच मुख्यालय द्वारा मेम्ब्रेन सेपरेशन टेक्नोलॉजी पेटेंट होल्ड

 

तालिका 1. रासायनिक संरचना और उपजसिस्टैंच डेजर्टिकोलाझिल्ली पृथक्करण के बाद पॉलीसेकेराइड

अंश	कुल चीनी सामग्री (%)	प्रोटीन सामग्री (%)	यूरोनिक एसिड सामग्री (%)	उपज (%)
सीटीपी 1	91.95 ± 1.03ᵃ	1.06 ± 0.04ᶜ	26.77 ± 0.77ᵃ	3.31
सीटीपी 2	83.67 ± 1.61ᵇ	1.42 ± 0.03ᵃ	15.90 ± 0.29ᶜ	0.70
सीटीपी 3	78.32 ± 1.48ᶜ	1.25 ± 0.02ᵇ	19.12 ± 0.55ᵇ	0.10
सीटीपी 4	37.51 ± 1.40ᵈ	1.41 ± 0.02ᵃ	19.20 ± 0.54ᵇ	0.10

टिप्पणी: डेटा को माध्य ± मानक विचलन (n=3) के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। एक ही कॉलम के भीतर अलग-अलग सुपरस्क्रिप्ट अक्षर नमूनों के बीच महत्वपूर्ण अंतर दर्शाते हैं (पी <0.05)।

 

उच्च गुणवत्ता वाली सिस्टैंच सामग्री

 

 

 

 

2.1.2 मोनोसैकेराइड संरचना का विश्लेषण

जैसा कि चित्र 2 और तालिका 2 में दिखाया गया है, पीएमपी व्युत्पन्नीकरण द्वारा निर्धारित विभिन्न आणविक भार कटऑफ के साथ अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्ली द्वारा अलग किए गए चार अंशों (सीटीपी 1, सीटीपी 2, सीटीपी 3, सीटीपी 4) की मोनोसेकेराइड संरचनाएं सुसंगत थीं। सभी अंश हेटरोपॉलीसेकेराइड थे जो 8 मोनोसेकेराइड से बने थे: मैनोज (मैन), ग्लूकोसामाइन (जीएलसीएन), रैम्नोज (आरएचए), ग्लूकुरोनिक एसिड (जीएलसीए), गैलेक्टुरोनिक एसिड (गैला), ग्लूकोज (जीएलसी), गैलेक्टोज (गैल), और अरेबिनोज (आरा)। इनमें ग्लूकोज (जीएलसी), गैलेक्टोज (गैल), अरेबिनोज (आरा), गैलेक्टुरोनिक एसिड (गैला), और रैम्नोज (आरएचए) का मोलर प्रतिशत अधिक है। विभिन्न मोनोसेकेराइड का मोलर प्रतिशत चार अंशों में भिन्न-भिन्न था: सीटीपी 1 में ग्लूकोज और गैलेक्टुरोनिक एसिड की मात्रा सबसे अधिक थी; सीटीपी 2 में गैलेक्टोज़ और ग्लुकुरोनिक एसिड की उच्च सामग्री थी; सीटीपी 3 में अरबीनोज़ की उच्च मात्रा थी; और सीटीपी 4 में मैननोज़ और रैम्नोज़ की उच्च सामग्री थी। सीटीपी 1 की अम्लीय शर्करा सामग्री अन्य अंशों की तुलना में काफी अधिक थी, जो भौतिक रसायन गुण विश्लेषण में निर्धारित यूरोनिक एसिड सामग्री के अनुरूप थी। यह इंगित करता है कि झिल्ली पृथक्करण प्रौद्योगिकी (द्वारा संरक्षित)पेटेंट संख्या ZL200710102756.7) विभिन्न अम्लीय चीनी सामग्री के साथ पॉलीसेकेराइड घटकों को प्रभावी ढंग से विभाजित कर सकता है।

 

 

झिल्ली पृथक्करण प्रौद्योगिकी द्वारा निर्मित विभिन्न सिस्टैंच अर्क विशिष्टताएँ

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2.1.3 फूरियर-ट्रांसफॉर्म इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी (एफटी-आईआर) विश्लेषण

जैसा कि चित्र 3 में दिखाया गया है, सभी चार पॉलीसेकेराइड अंशों ने पॉलीसेकेराइड की विशिष्ट विशेषता अवशोषण चोटियों का प्रदर्शन किया। 3324.6 सेमी⁻¹ पर एक मजबूत और चौड़ी चोटी को पॉलीसेकेराइड के ओएच स्ट्रेचिंग कंपन के लिए जिम्मेदार ठहराया गया था [18]; 2924.6 सेमी⁻¹ का शिखर कार्बोहाइड्रेट का सीएच स्ट्रेचिंग कंपन था, जो पॉलीसेकेराइड का एक विशिष्ट विशिष्ट शिखर था [19, 20]। 1738.8 सेमी⁻¹ के करीब अवशोषण ने यूरोनिक एसिड संरचनाओं की उपस्थिति का संकेत दिया, जिससे पता चला कि पॉलीसेकेराइड अम्लीय थे [16, 21]। 1607.5 सेमी⁻¹ पर अवशोषण शिखर अधिशोषित पानी को सौंपा गया था, जो पॉलीसेकेराइड की हीड्रोस्कोपिक प्रकृति के कारण हो सकता है। 1234.3 सेमी⁻¹ के करीब अवशोषण शिखर सीएच झुकने वाले कंपन [22, 23] के कारण हुआ था, और 1014.2 सेमी⁻¹ पर अवशोषण शिखर ने पायरानोज़ रिंगों के विशिष्ट अवशोषण की पुष्टि की थी। 887.3 सेमी⁻¹ और 755.2 सेमी⁻¹ पर अवशोषण शिखर -कॉन्फ़िगर और -कॉन्फ़िगर ग्लाइकोसिडिक बांड [24-27] की उपस्थिति का संकेत देते हैं। झिल्ली पृथक्करण प्रक्रिया ने पॉलीसेकेराइड के मूल ग्लाइकोसिडिक बंधन प्रकार या कार्यात्मक समूह संरचनाओं को नुकसान नहीं पहुंचाया, जिससे पॉलीसेकेराइड अंशों की संरचनात्मक अखंडता सुनिश्चित हुई।

चित्र 1 संदर्भ पदार्थों की मोनोसैकेराइड संरचना का क्रोमैटोग्राम

नोट: 1. मन्नोज़; 2. ग्लूकोसामाइन; 3. रामनोज़; 4. ग्लुकुरोनिक एसिड; 5. गैलेक्टुरोनिक एसिड; 6. गैलेक्टोसामाइन; 7. ग्लूकोज; 8. गैलेक्टोज; 9. ज़ाइलोज़; 10. अरबीनोज़; 11. फूकोस।

 

चित्र 2. पॉलीसैकेराइड अंशों की मोनोसैकेराइड संरचना के क्रोमैटोग्राम।

नोट: 1. मन्नोज़; 3. रामनोज़; 5. गैलेक्टुरोनिक एसिड; 7. ग्लूकोज; 8. गैलेक्टोज; 10. अरबीनोज़।

 

 

 

 

2.1.4 स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (एसईएम) विश्लेषण

जैसा कि चित्र 4 में दिखाया गया है, CTP 1 ने 2000× आवर्धन (A1) पर थोड़ी लहरदार सतह प्रदर्शित की। 10,000× आवर्धन (ए2) पर, असमान आकार वाले अनियमित छिद्र देखे गए, जो एक "छिद्रपूर्ण और ढीला" समग्र लक्षण प्रस्तुत करते हैं। CTP 2 में 2000× आवर्धन (B1) पर अपेक्षाकृत अक्षुण्ण और सपाट संरचना थी, जिसमें कुछ किनारों के मोड़ के बावजूद कमजोर संचयन था। 10,000× आवर्धन (बी2) पर, सतह लगभग बिना किसी स्पष्ट छिद्र के चिकनी और सपाट थी। CTP 3 ने 2000× आवर्धन (C1) पर सतह पर सूक्ष्म "लहर" दिखाई, जो एक कॉम्पैक्ट संरचना में पूर्ण क्रॉस-लिंकिंग के बिना पॉलीसेकेराइड अणुओं के आंशिक एकत्रीकरण के कारण हो सकता है। 10,000× आवर्धन (सी2) पर, सतह ने मध्यम खुरदरापन प्रदर्शित किया [28]। CTP 3 ने 2000× आवर्धन (C1) पर सतह पर सूक्ष्म "लहर" दिखाई, जो एक कॉम्पैक्ट संरचना में पूर्ण क्रॉस-लिंकिंग के बिना पॉलीसेकेराइड अणुओं के आंशिक एकत्रीकरण के कारण हो सकता है। 10,000× आवर्धन (सी2) पर, सतह ने मध्यम खुरदरापन प्रदर्शित किया [28]। CTP 4 ने 2000× आवर्धन (D1) पर एकत्रित क्षेत्र की सतह पर नैनोस्केल कणों को बहुत कम वितरित किया था, जिसमें कणों और मध्यम फैलाव के बीच कोई स्पष्ट संबंध नहीं था। 10,000× आवर्धन (डी2) पर, कण की सतह बिना किसी स्पष्ट उभार के चिकनी थी, जिसमें मामूली सिलवटें और मध्यम संरचनात्मक एकरूपता दिखाई दे रही थी [29]। संक्षेप में, विभिन्न अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्लियों से उपचारित पॉलीसेकेराइड की सूक्ष्म आकृतियाँ काफी भिन्न थीं, विशेष रूप से एकत्रीकरण अवस्था, सतह खुरदरापन और फैलाव में। यह रूपात्मक अंतर पॉलीसेकेराइड के अंतर-आणविक बलों और अल्ट्राफिल्ट्रेशन के दौरान छानने के प्रभाव से संबंधित हो सकता है।

 

तालिका 2. पॉलीसैकेराइड अंशों की मोनोसैकेराइड संरचना का मोलर अनुपात

मोनोसैकेराइड	सीटीपी 1 (%)	सीटीपी 2 (%)	सीटीपी 3 (%)	सीटीपी 4 (%)
मन्नोज़ (आदमी)	1.373	1.112	1.772	3.484
ग्लूकोसामाइन (GlcN)	0.201	0.265	0.347	0.454
रामनोज़ (आरएचए)	8.695	9.860	11.060	12.590
ग्लूकोज (जीएलसीए)	1.239	1.313	1.166	1.228
गैलेक्टुरोनिक एसिड (GalA)	13.755	12.653	13.777	7.461
ग्लूकोज (जीएलसी)	35.101	19.329	33.898	33.998
गैलेक्टोज (गैल)	28.353	33.372	28.623	30.997
अरेबिनोज़ (आरा)	11.284	12.286	12.756	9.806

चित्र 3: फूरियर प्रत्येक अंश से पॉलीसेकेराइड के इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रा को परिवर्तित करता है

 

चित्र 4 पॉलीसेकेराइड अंशों की इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी छवियों को स्कैन करना।

चित्र 5 डीपीपीएच पॉलीसेकेराइड अंशों की रेडिकल सफाई क्षमता।

 

 

 

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2.2 पॉलीसेकेराइड की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का निर्धारण

2.2.1 डीपीपीएच · रेडिकल स्केवेंजिंग क्षमता का निर्धारण

जैसा कि चित्र 5 में दिखाया गया है, प्रत्येक अंश की डीपीपीएच कट्टरपंथी सफाई क्षमता ने एक स्पष्ट खुराक-निर्भर प्रभाव प्रदर्शित किया है [30, 31]। वीसी की कट्टरपंथी सफाई क्षमता की तुलना में, चार अंशों की डीपीपीएच सफाई क्षमता अपेक्षाकृत कमजोर थी। 8 मिलीग्राम/एमएल की सांद्रता पर, वीसी और चार अंशों के आईसी₅₀ मान क्रमशः 0.961 मिलीग्राम/एमएल, 4.946 मिलीग्राम/एमएल, 7.534 मिलीग्राम/एमएल, 7.534 मिलीग्राम/एमएल, और 8.472 मिलीग्राम/एमएल थे, जिसमें सीटीपी 1 उच्चतम कट्टरपंथी सफाई क्षमता दिखा रहा था।

 

चित्र 6 पॉलीसेकेराइड अंशों की सुपरऑक्साइड आयन सफाई क्षमता।

चित्र 7 पॉलीसेकेराइड अंशों की कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता।

 

चित्र 8 एबीटीएस पॉलीसेकेराइड अंश की कट्टरपंथी सफाई क्षमता

 

 

2.2.2 सुपरऑक्साइड आयन सफाई क्षमता का निर्धारण

जैसा कि चित्र 6 में दिखाया गया है, बढ़ती सांद्रता के साथ चार अंशों की सुपरऑक्साइड आयन सफाई क्षमताओं में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखा। वीसी की सुपरऑक्साइड आयन सफाई क्षमता की तुलना में, चार अंशों की क्षमता अपेक्षाकृत कमजोर थी। 8 मिलीग्राम/एमएल की सांद्रता पर, वीसी और चार अंशों के आईसी₅₀ मान क्रमशः 0.884 मिलीग्राम/एमएल, 11.46 मिलीग्राम/एमएल, 10.54 मिलीग्राम/एमएल, 14.03 मिलीग्राम/एमएल, और 11.83 मिलीग्राम/एमएल थे, जो दर्शाता है कि चार अंशों की सुपरऑक्साइड आयन सफाई क्षमता अनिवार्य रूप से सुसंगत थी। यह गतिविधि अंतर कई कारकों से संबंधित हो सकता है जैसे आणविक भार, मोनोसैकेराइड संरचना और अनुपात, और पॉलीसेकेराइड की अम्लीय चीनी सामग्री।

2.2.3 कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता का निर्धारण

जैसा कि चित्र 7 में दिखाया गया है, प्रत्येक अंश की कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता बढ़ती एकाग्रता के साथ धीरे-धीरे बढ़ी है [33], जो खुराक पर निर्भर प्रभाव दिखाती है। वीसी की कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता की तुलना में, चार अंशों की क्षमता अपेक्षाकृत कमजोर थी। 8 मिलीग्राम/एमएल की सांद्रता पर, वीसी और चार अंशों के आईसी₅₀ मान क्रमशः 22.88 मिलीग्राम/एमएल, 40.00 मिलीग्राम/एमएल, 61.30 मिलीग्राम/एमएल, 79.41 मिलीग्राम/एमएल, और 71.81 मिलीग्राम/एमएल थे, जिसमें सीटीपी 1 सबसे मजबूत कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता प्रदर्शित करता था।

2.2.4 एबीटीएस का निर्धारण⁺ रेडिकल स्केवेंजिंग क्षमता

जैसा कि चित्र 8 में दिखाया गया है, प्रत्येक अंश की एबीटीएस⁺ कट्टरपंथी सफाई क्षमता बढ़ती एकाग्रता के साथ धीरे-धीरे बढ़ी है, जो खुराक पर निर्भर प्रभाव दिखाती है। 4 मिलीग्राम/एमएल की सांद्रता पर, वीसी और चार अंशों के आईसी₅₀ मान क्रमशः 0.450 मिलीग्राम/एमएल, 0.486 मिलीग्राम/एमएल, 0.405 मिलीग्राम/एमएल, 1.039 मिलीग्राम/एमएल, और 0.531 मिलीग्राम/एमएल थे, जो दर्शाता है कि चार अंशों की एबीटीएस⁺ कट्टरपंथी सफाई दरें अनिवार्य रूप से वीसी के अनुरूप थीं।

 

3 निष्कर्ष

इस अध्ययन में, के अवशेषCistancheफेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड निष्कर्षण के बाद कच्चे माल के रूप में उपयोग किया गया था, और अल्कोहल अवक्षेपण तकनीक के साथ संयुक्त अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्ली - एक आविष्कार पेटेंट द्वारा संरक्षित (पेटेंट संख्या ZL200710102756.7) द्वारा आयोजितहॉटन डिचेन फार्मास्युटिकल बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड (https://www.xjcistanche.com/about-us) - was employed to achieve efficient extraction and fractionation of polysaccharides. Four polysaccharide fractions with different molecular weight ranges were successfully prepared: CTP 1 (>300 केडीए), सीटीपी 2 (50-300 केडीए), सीटीपी 3 (10-50 केडीए), और सीटीपी 4 (<10 kDa). The structural characteristics and antioxidant activity differences of each fraction were systematically analyzed.

पॉलीसेकेराइड फ़्रैक्शनेशन प्रभाव और वितरण विशेषताएँ: जैसे-जैसे अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्ली का छिद्र आकार कम होता गया, पॉलीसेकेराइड अंशों की उपज में कमी की प्रवृत्ति देखी गई, जो पॉलीसेकेराइड के व्यापक आणविक भार वितरण को दर्शाती है।Cistancheअवशेष. झिल्ली पृथक्करण तकनीक (होटन डिचेन फार्मास्युटिकल बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड द्वारा पेटेंट) पॉलीसेकेराइड के मूल ग्लाइकोसिडिक बंधन प्रकारों और कार्यात्मक समूह संरचनाओं को नुकसान पहुंचाए बिना विभिन्न आणविक भार और अम्लीय चीनी सामग्री के साथ पॉलीसेकेराइड घटकों को सटीक रूप से विभाजित कर सकती है, जिससे अंशों की संरचनात्मक अखंडता सुनिश्चित होती है। यह पॉलीसेकेराइड के सटीक विभाजन के लिए एक कुशल और पर्यावरण के अनुकूल तकनीकी समाधान प्रदान करता है।

संरचना-गतिविधि संबंध विशेषताएँ: सभी चार पॉलीसैकेराइड अंश हेटरोपॉलीसेकेराइड थे जिनमें 8 मोनोसैकेराइड थे, लेकिन मोनोसैकेराइड के दाढ़ अनुपात में महत्वपूर्ण अंतर देखा गया। सीटीपी 1 की अम्लीय शर्करा (यूरोनिक एसिड) सामग्री अन्य अंशों की तुलना में काफी अधिक थी। इन विट्रो एंटीऑक्सीडेंट प्रयोगों ने पुष्टि की है कि सीटीपी 1 ने सर्वोत्तम डीपीपीएच और एबीटीएस⁺ रेडिकल स्केवेंजिंग गतिविधियों का प्रदर्शन किया है, जो दर्शाता है कि पॉलीसेकेराइड की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि आणविक भार, अम्लीय चीनी सामग्री और मोनोसैकराइड संरचना अनुपात से निकटता से संबंधित है, जो मौजूदा अध्ययनों के मूल निष्कर्ष के अनुरूप है कि "पॉलीसेकेराइड संरचनात्मक विशेषताएं जैविक गतिविधि को नियंत्रित करती हैं"। अलादान मेमेटली एट अल द्वारा अध्ययन। [34] यह भी पता चला कि पॉलीसेकेराइड सांद्रता बढ़ने के साथ एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि में काफी वृद्धि हुई है, और इस अध्ययन में धीरे-धीरे एकाग्रता प्रयोगों द्वारा इस खुराक-निर्भर विशेषता की पुष्टि की गई थी। पिछले अध्ययनों के विपरीत, जो आमतौर पर अल्कोहल अवक्षेपण द्वारा कच्चे पॉलीसेकेराइड तैयार करते थे, इस अध्ययन ने व्यवस्थित रूप से अंशांकन के लिए झिल्ली पृथक्करण तकनीक की शुरुआत कीCistancheपॉलीसेकेराइड, विभिन्न आणविक भार श्रेणियों में पॉलीसेकेराइड अंशों की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधियों की सटीक जांच के लिए मिश्रित घटकों की समग्र गतिविधि विश्लेषण से बदलाव को सक्षम बनाता है।

इस अध्ययन ने केवल इन विट्रो रासायनिक मॉडल का उपयोग करके पॉलीसेकेराइड की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का मूल्यांकन किया, और परिणाम विवो शारीरिक वातावरण में एंटीऑक्सीडेंट प्रभावकारिता से भिन्न हो सकते हैं। एंटीऑक्सिडेंट गतिविधि और संभावित मार्गों को सत्यापित करने के लिए भविष्य के अनुसंधान को इन विट्रो सेल प्रयोगों और विवो पशु अध्ययनों में आगे बढ़ाया जाना चाहिए। इस बीच, क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री और एक्स-रे विवर्तन जैसी तकनीकों का उपयोग पॉलीसेकेराइड की बारीक संरचना का विश्लेषण करने और प्रमुख सक्रिय साइटों की पहचान करने के लिए किया जा सकता है, जो कार्यात्मक खाद्य पदार्थों, एंटीऑक्सिडेंट और अवशेष पॉलीसेकेराइड पर आधारित अन्य उत्पादों के विकास के लिए अधिक सटीक सैद्धांतिक समर्थन प्रदान करता है। बारीक संरचना विश्लेषण और विवो गतिविधि सत्यापन के और अधिक शोधन के माध्यम से, अवशेष पॉलीसेकेराइड की अनुप्रयोग क्षमता का और पता लगाने और झिंजियांग में हरित, कुशल और औद्योगिक दिशाओं की दिशा में विशिष्ट औषधीय संसाधन विकास के उन्नयन को बढ़ावा देने की उम्मीद है।

 

संदर्भ

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