यूपीएलसी के आधार पर दो प्रकार के सिस्टैंच डेजर्टिकोला के कच्चे और वाइन-प्रसंस्कृत उत्पादों में आठ रासायनिक घटकों के सामग्री अंतर की तुलना Ⅱ
Jun 16, 2025
2. तरीके और परिणाम
2.1 क्रोमैटोग्राफ़िक स्थितियाँ
यूपीएलसी विश्लेषण का उपयोग करके प्रदर्शन किया गया थावाटर्स एक्विटी यूपीएलसी™ बीईएच सी18 कॉलम (100 मिमी × 2.1 मिमी, 1.7 माइक्रोन कण आकार). मोबाइल चरण में शामिल थेमेथनॉल (ए)और0.1% फॉर्मिक एसिड जलीय घोल (बी)निम्नलिखित क्रमिक क्षालन के साथ:
0-4 मिनट: 10% → 26% ए
4-18 मिनट: 26% → 40% ए
18-20 मिनट: 40% → 50% ए
प्रवाह दर:0.3 एमएल/मिनट
इंजेक्शन की मात्रा:3 μL
स्तंभ तापमान:35°से
जांच तरंग दैर्ध्य:330 nm
2.2 समाधान की तैयारी
2.2.1 मिश्रित संदर्भ समाधान
निम्नलिखित मानक यौगिकों का सही-सही वजन करें:सिस्टानोसाइड एफ, इचिनाकोसाइड, सिस्टानोसाइड ए, verbascoside, ट्यूबलोसाइड ए, isoverbascoside, 2'-एसिटाइलवरबास्कोसाइड, औरट्यूबलोसाइड बी. निम्नलिखित सांद्रता (µg·mL⁻¹) के साथ एक संदर्भ मिश्रण तैयार करने के लिए 50% मेथनॉल में घोलें:
सिस्टानोसाइड एफ: 32.7
इचिनाकोसाइड: 102.4
सिस्टानोसाइड ए: 50.2
वर्बस्कोसाइड: 80.6
ट्यूबलोसाइड ए: 25.6
आइसोवरबास्कोसाइड: 86.3
2'-एसिटाइलवरबास्कोसाइड: 77.3
ट्यूबलोसाइड बी: 60.8
2.2.2 नमूना समाधान
कच्चे सिस्तांचे के टुकड़ेजड़ी-बूटियों को नरम करके, काटकर और सुखाकर तैयार किया गया था।
वाइन-स्टीम्ड सिस्टैंचकच्चे स्लाइस को 30% चावल की वाइन में भिगोकर, मिश्रण को 12 घंटे तक भाप में पकाकर, ठंडा करके और फिर से सुखाकर तैयार किया गया था।
लगभग0.2 gसूखे पाउडर को (65-मेष वाली छलनी से गुजारा गया) 50 एमएल एम्बर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में तौला गया, 25 एमएल 50% मेथनॉल के साथ निकाला गया, 40 मिनट (250 डब्ल्यू, 35 किलोहर्ट्ज) के लिए सोनिकेट किया गया, और वापस वजन में लाया गया। समाधान को एक के माध्यम से फ़िल्टर किया गया था0.22μm झिल्ली, और छानने का उपयोग विश्लेषण के लिए किया गया था।
नोट: एच. डेजर्ट सिस्टैंच; जी. ट्यूबुलोसा सिस्टैंच; आरएच. सिस्टैंच डेजर्टिकोला कच्चे स्लाइस; आरजी. सिस्टैंच ट्यूबुलोसा कच्चे स्लाइस; क. वाइन के साथ पका हुआ सिस्टैंच डेजर्टिकोला; डब्ल्यूजी. वाइन के साथ पका हुआ सिस्टैंच ट्यूबुलोसा; आंकड़े 4 से 7 समान हैं।
चित्र 1 सिस्टैंच डेजर्टिकोला और सिस्टैंच ट्यूबुलोसा औषधीय सामग्री, कच्चे स्लाइस और वाइन के साथ पकाए गए चित्र
चीन में बेची जाने वाली एक प्रसिद्ध सिस्टैंच वाइन
वेसिस्टैंच की सहायक सेवा-एक नमूना या थोक विवरण प्राप्त करने के लिए हमसे संपर्क करें
ईमेल:wallence.suen@wecistanche.com
व्हाट्सएप/टेलीभाष:+86 15292862950
2.3 कच्चे और वाइन-प्रसंस्कृत सिस्टैंच में 8 प्रमुख यौगिकों का मात्रात्मक विश्लेषण
2.3.1 सिस्टम उपयुक्तता
वर्णित क्रोमैटोग्राफ़िक स्थितियों के तहत, सैद्धांतिक प्लेट संख्या के लिएइचिनाकोसाइड exceeded 6000 with good resolution (>1.5). मिश्रित मानक, कच्चे रेगिस्तान सिस्टैंच और वाइन-संसाधित नमूनों के क्रोमैटोग्राम चित्र 2 में दिखाए गए हैं।
शिखर की पहचान:
सिस्टानोसाइड एफ
इचिनाकोसाइड
सिस्टानोसाइड ए
वर्बस्कोसाइड
ट्यूबलोसाइड ए
आइसोवरबास्कोसाइड
2'-एसिटाइलवरबास्कोसाइड
ट्यूबलोसाइड बी
सिस्टैंच डेजर्टिकोला
सिस्टैंच ट्यूबुलोसा
2.3.2 रैखिकता और पहचान सीमाएँ
0.1 से 5.0 एमएल की सांद्रता पर संदर्भ मिश्रण के क्रमिक तनुकरण का उपयोग करके मानक अंशांकन वक्र स्थापित किए गए थे। अंशांकन वक्र प्लॉटिंग द्वारा उत्पन्न किए गए थेएकाग्रता (एक्स)बनामशिखर क्षेत्र (वाई). पता लगाने की सीमाएं (एलओडी, एस/एन=3) और परिमाणीकरण सीमाएं (एलओक्यू, एस/एन=10) निर्धारित की गईं और परीक्षण की गई सीमाओं में अच्छी रैखिकता की पुष्टि की गई।
2.3.3 परिशुद्धता
मिश्रित संदर्भ समाधान के छह प्रतिकृति इंजेक्शन दिखाए गएसापेक्ष मानक विचलन (आरएसडी)से लेकर चरम क्षेत्रों की0.48% से 2.14%, उत्कृष्ट उपकरण परिशुद्धता का संकेत देता है।
2.3.4 स्थिरता
का नमूना समाधानकच्चा सिस्तान्चे पाउडर (बैच नं.. 160901)0, 2, 4, 8, 12 और 24 घंटों पर विश्लेषण किया गया। सभी 8 यौगिकों के लिए चरम क्षेत्रों का आरएसडी भिन्न-भिन्न प्रकार का था0.71% से 1.93%, पुष्टि कर रहा हूँ24 घंटे के भीतर समाधान स्थिरता.
तालिका 1. सिस्टैंच सामग्री का नमूना जानकारी
| स्रोत प्रजाति | नमूना आईडी | मूल | बैच संख्या |
|---|---|---|---|
| सिस्टैंच डेजर्टिकोला | H1 | भीतरी मंगोलिया | 160901 |
| H2 | झिंजियांग | 1712301 | |
| H3 | झिंजियांग | 1712305 | |
| H4 | झिंजियांग | 1712306 | |
| H5 | झिंजियांग | 1712307 | |
| H6 | भीतरी मंगोलिया | 1712308 | |
| H7 | झिंजियांग | 180710 | |
| H8 | झिंजियांग | 180710 | |
| H9 | झिंजियांग | 180710 | |
| H10 | झिंजियांग | 180711 | |
| सिस्टैंच ट्यूबुलोसा | G1 | झिंजियांग | 151201 |
| G2 | झिंजियांग | 170301 | |
| G3 | झिंजियांग | 1709001 | |
| G4 | झिंजियांग | 170601 | |
| G5 | झिंजियांग | 1712302 | |
| G6 | झिंजियांग | 1712303 | |
| G7 | झिंजियांग | 1712304 | |
| G8 | झिंजियांग | 180710 | |
| G9 | झिंजियांग | 180710 | |
| G10 | झिंजियांग | 180712 |
| इचिनाकोसाइड |
| सिस्टानोसाइड ए |
| वर्बस्कोसाइड |
2.3.5 पुनरावर्तनीयता
एक ही सिस्टैंच बैच की छह स्वतंत्र रूप से तैयार प्रतिकृतियों ने अच्छी पुनरावृत्ति दिखाई। औसत सामग्री (मिलीग्राम·जी⁻¹) और आरएसडी इस प्रकार थे:
| मिश्रण | औसत सामग्री (मिलीग्राम/जी) | आरएसडी (%) |
|---|---|---|
| सिस्टानोसाइड एफ | 0.24 | 1.24% |
| इचिनाकोसाइड | 4.49 | 0.25% |
| सिस्टानोसाइड ए | 0.56 | 1.93% |
| वर्बस्कोसाइड | 2.52 | 1.40% |
| ट्यूबलोसाइड ए | 0.59 | 1.15% |
| आइसोवरबास्कोसाइड | 1.49 | 0.71% |
| 2'-एसिटाइलवरबास्कोसाइड | 1.23 | 1.94% |
| ट्यूबलोसाइड बी | 0.86 | 1.02% |
2.3.6 पुनर्प्राप्ति परीक्षण
रिकवरी का परीक्षण स्पाइकिंग द्वारा किया गयासिस्टैंच पाउडर की छह प्रतिकृतियां (0.1 ग्राम)8 संदर्भ यौगिकों की ज्ञात सांद्रता के साथ। औसत वसूली से लेकर होती थी95.56% से 102.71%, बीच में आरएसडी के साथ1.44% और 2.97%, इंगित करता हैउत्कृष्ट निष्कर्षण और परिमाणीकरण विश्वसनीयता.
नोट: ए. मिश्रित संदर्भ; बी. कच्चा सिस्टैंच डेजर्टिकोला; सी. शराब में दम किया हुआ सिस्टैंच डेजर्टिकोला; 1. सिस्टैंचसाइड एफ; 2. इचिनाकोसाइड; 3. सिस्टैंचसाइड ए; 4. वर्बस्कोसाइड; 5. ट्यूबलोसाइड ए; 6. आइसोवरबास्कोसाइड; 7. 2΄-एसिटाइलवरबास्कोसाइड; 8. ट्यूबलोसाइड बी.
2.3.7 कच्चे बनाम वाइन-प्रसंस्कृत सिस्टैंच में सक्रिय यौगिकों की मात्रा
प्रत्येक नमूने का दो प्रतियों में परीक्षण किया गया। 8 लक्ष्य यौगिकों की मात्रा निर्धारित की गई थीसिस्टैंच डेजर्टिकोला के 10 बैच(कच्चा और वाइन-संसाधित) औरसिस्टैंच ट्यूबुलोसा के 10 बैच. परिणामों को तालिका 3 में संक्षेपित किया गया है, जिसमें अंतर्दृष्टि प्रदान की गई है:
संरचना में प्रजाति-विशिष्ट अंतर
वाइन प्रसंस्करण के बाद फाइटोकेमिकल सामग्री में परिवर्तन
सिस्टैंच गुणवत्ता नियंत्रण के लिए विश्लेषणात्मक फ़िंगरप्रिंटिंग
तालिका 2. आठ यौगिकों के लिए अंशांकन वक्र, सहसंबंध गुणांक (आर), रैखिक रेंज, एलओडी और एलओक्यू
| मिश्रण | अंशांकन समीकरण | r | रैखिक रेंज (µg·mL⁻¹) | एलओडी (µg·mL⁻¹) | एलओक्यू (µg·mL⁻¹) |
|---|---|---|---|---|---|
| सिस्टानोसाइड एफ | Y=4.89 × 10⁹X + 3.31 × 10³ | 0.9999 | 0.327-32.700 | 0.0521 | 0.1300 |
| इचिनाकोसाइड | Y=3.88 × 10⁹X + 1.71 × 10⁴ | 0.9999 | 1.024–102.400 | 0.0422 | 0.1339 |
| सिस्टानोसाइड ए | Y=5.08 × 10⁹X + 3.45 × 10³ | 0.9999 | 0.502-50.600 | 0.1006 | 0.4035 |
| वर्बस्कोसाइड | Y=3.88 × 10⁹X + 3.43 × 10³ | 0.9999 | 0.806-80.600 | 0.0732 | 0.1871 |
| ट्यूबलोसाइड ए | Y=4.42 × 10⁹X + 1.07 × 10³ | 0.9999 | 0.256-25.600 | 0.0865 | 0.2876 |
| आइसोवरबास्कोसाइड | Y=4.81 × 10⁹X + 5.29 × 10³ | 0.9999 | 0.863–86.300 | 0.0242 | 0.0734 |
| 2'-एसिटाइलवरबास्कोसाइड | Y=5.30 × 10⁹X + 2.99 × 10³ | 0.9999 | 0.773-77.300 | 0.0317 | 0.1024 |
| ट्यूबलोसाइड बी | Y=5.17 × 10⁹X + 3.39 × 10³ | 0.9999 | 0.608–60.800 | 0.1794 | 0.3876 |
2.4 सिस्टैंच प्रजातियों के बीच रासायनिक संरचना का तुलनात्मक विश्लेषण
जांच करने के लिएफाइटोकेमिकल अंतरबीच मेंसिस्टैंच डेजर्टिकोलाऔरसिस्टैंच ट्यूबुलोसा, आठ कुंजी की सांद्रताफेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्ससेकच्चे और वाइन-प्रसंस्कृत नमूनों के 10 बैचप्रत्येक प्रजाति का उपयोग करके कल्पना की गईबॉक्स प्लॉट (चित्र 3). सांख्यिकीय विश्लेषण से पता चला कि, को छोड़कर2'-एसिटाइलवरबास्कोसाइडऔरट्यूबलोसाइड बी, अधिकांश अन्य यौगिकों ने दिखायामहत्वपूर्ण अंतर (पी <0.05)दो प्रजातियों के बीच कच्चे और प्रसंस्कृत दोनों रूपों में।
विशेष रूप से:
मेंकच्चा सिस्टैंच, की सामग्रीसिस्टानोसाइड एफ, इचिनाकोसाइड, आइसोवरबास्कोसाइड, ट्यूबलोसाइड ए, और वर्बास्कोसाइडथाकाफ़ी कममेंसी. डेजर्टिकोलाकी तुलना मेंसी. ट्यूबुलोसा(पी <0.05)।
शराब-संसाधित नमूनेसमान प्रवृत्तियों को प्रतिबिंबित किया।
उल्लेखनीय रूप से,सिस्टानोसाइड एपर पाया गयामें उच्च स्तरसी. डेजर्टिकोलाऔर थाundetectableमेंसी. ट्यूबुलोसा, यह सुझाव देते हुए कि यह एक के रूप में काम कर सकता हैसंभावित मार्कर यौगिकप्रजाति विभेदन के लिए.
सिस्टैंच प्रजाति का पीएलएस-डीए केमोमेट्रिक विश्लेषण
A आंशिक न्यूनतम वर्ग विभेदक विश्लेषण (पीएलएस-डीए)आठ यौगिकों के सांद्रण डेटा का उपयोग करके प्रदर्शन किया गया था। परिणामस्वरूपस्कोर प्लॉट (चित्र 4ए)दिखाया गया कि दोनों प्रजातियों के कच्चे और प्रसंस्कृत नमूनों ने ऐसा कियास्पष्ट रूप से अलग-अलग समूहों में एकत्रित न हों.
तथापि,यादृच्छिक क्रमपरिवर्तन परीक्षण (चित्र 4बी)पता चला कि मॉडल थाओवरफिट नहीं किया गया, के सच्चे मूल्यों के रूप मेंR²Y और Q²क्रमपरिवर्तित मॉडलों की तुलना में अधिक थे। अपेक्षाकृतनिम्न Q² मानसुझाव देनासीमित पूर्वानुमानशीलता, संभवतः के कारणअंतर-समूह परिवर्तनशीलताऔरअतिव्यापी यौगिक श्रेणियाँकच्चे और प्रसंस्कृत रूपों के बीच.
आगे पीएलएस-डीए मॉडलिंग और वीआईपी विश्लेषण
दोनों प्रजातियों के कच्चे और वाइन-प्रसंस्कृत नमूनों का पता लगाने के लिए अलग-अलग पीएलएस-डीए मॉडल का निर्माण किया गया थाप्रजाति-विशिष्ट रासायनिक अंतर. निम्नलिखित देखे गए:
स्कोर प्लॉट (आंकड़े 5ए और 5सी)दिखायाविशिष्ट क्लस्टरिंगबीच मेंसी. डेजर्टिकोलाऔरसी. ट्यूबुलोसाकच्चे और प्रसंस्कृत दोनों रूपों में।
मॉडल सत्यापन (आंकड़े 5बी और 5डी)ओवरफिटिंग के बिना अच्छी पूर्वानुमानित शक्ति की पुष्टि की गई।
प्रक्षेपण (वीआईपी) भूखंडों में परिवर्तनीय महत्व (आंकड़े 6ए और 6बी)प्रजातियों के भेदभाव में योगदान देने वाले प्रमुख यौगिकों की पहचान की गई:
के लिएकच्चे नमूने: सिस्टानोसाइड ए, सिस्टानोसाइड एफ, इचिनाकोसाइड, औरverbascosideसर्वाधिक जानकारीपूर्ण थे.
के लिएशराब-संसाधित नमूने: सिस्टानोसाइड एऔरट्यूबलोसाइड बीप्रमुख भूमिकाएँ निभाईं।
2.5 सिस्टैंच फाइटोकेमिस्ट्री पर वाइन प्रसंस्करण का प्रभाव
विभिन्न बैचों में यौगिक सामग्री में पर्याप्त भिन्नता के कारण,युग्मित तुलनाके कच्चे और वाइन-प्रसंस्कृत नमूनों के बीच बनाए गए थेएक ही बैच. परिणाम, का उपयोग करके कल्पना की गईवायलिन प्लॉट (चित्र 7), निम्नलिखित का खुलासा किया:
मेंसी. डेजर्टिकोला, के स्तर2'-एसिटाइलवरबास्कोसाइड, सिस्टानोसाइड ए, सिस्टानोसाइड एफ, इचिनाकोसाइड, ट्यूबलोसाइड ए, और वर्बास्कोसाइड उल्लेखनीय रूप से कमी आईपोस्ट-प्रोसेसिंग (पी <0.05), जबकिट्यूबलोसाइड बी बढ़ा हुआ.
मेंसी. ट्यूबुलोसा, के स्तर2'-एसिटाइलवरबास्कोसाइड, इचिनाकोसाइड, और वर्बास्कोसाइडभीकी कमी हुई, जबकिआइसोबास्कोसाइड और ट्यूबलोसाइड बी बढ़ा हुआउल्लेखनीय रूप से (पी <0.05)।
इन निष्कर्षों से पता चलता है कि वाइन प्रसंस्करण का परिणाम हो सकता हैहाइड्रोलिसिस, आइसोमराइज़ेशन, यारासायनिक परिवर्तनसक्रिय अवयवों का.
3. चर्चा
के अनुसारचीनी फार्माकोपिया का 2020 संस्करण, सिस्टैंच डेजर्टिकोलासे कम नहीं होना चाहिए0.3%की संयुक्त सामग्री काइचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड, जबकिसिस्टैंच ट्यूबुलोसासे कम नहीं होना चाहिए1.5%इन दो यौगिकों का. इस अध्ययन में, एक बैच (180710) को छोड़कर सभी कच्चे और संसाधित नमूने इन मानकों पर खरे उतरे।
इसके बावजूदबैच-दर-बैच परिवर्तनशीलताप्रत्येक प्रजाति के भीतर (कुछ यौगिकों में 10 गुना तक अंतर होता है, जैसे कि ट्यूबलोसाइड ए और आइसोवरबास्कोसाइड), दोनों प्रजातियों के बीच यौगिक सामग्री में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अंतर लगातार देखा गया। इससे इसकी पुष्टि होती हैप्रजातियों की उत्पत्ति एक प्रमुख कारक हैफाइटोकेमिकल संरचना को प्रभावित करना।
इसके अलावा,सिस्टानोसाइड एथामें ही पता चलासी. डेजर्टिकोलाऔर में अनुपस्थितसी. ट्यूबुलोसा, इसे बनानाप्रजातियों के प्रमाणीकरण के लिए मूल्यवान मार्कर, विशेष रूप से फार्माकोग्नॉस्टिक या गुणवत्ता नियंत्रण सेटिंग्स में।
🔬 रासायनिक संरचना पर वाइन प्रसंस्करण का प्रभाव
वाइन प्रसंस्करण के बाद, दोनों प्रजातियों ने एक सुसंगत प्रवृत्ति दिखाई:
स्तर में कमीका:
सिस्टानोसाइड एफ, इचिनाकोसाइड, सिस्टानोसाइड ए, वर्बास्कोसाइड, ट्यूबलोसाइड ए, और 2'-एसिटाइलवरबास्कोसाइड
बढ़ा हुआ स्तरका:
ट्यूबलोसाइड बी और आइसोवरबास्कोसाइड
ये रुझान परिणामित हो सकते हैंरासायनिक जल अपघटन, निम्नीकरण, यासंरचनात्मक पुनर्व्यवस्थाभाप लेने की प्रक्रिया के दौरान. दिलचस्प बात यह है किविभिन्न बैचों में परिवर्तनों का परिमाण और दिशा भिन्न-भिन्न थी, संभवतः मतभेदों के कारण:
प्रारंभिक यौगिक सांद्रता
जड़ी-बूटी आकृति विज्ञान (आकार, मोटाई)
प्रसंस्करण स्थितियों के प्रति संवेदनशीलता
यह के महत्व पर प्रकाश डालता हैप्रसंस्करण मापदंडों का मानकीकरणऔर संचालनबैच-विशिष्ट गुणवत्ता मूल्यांकनहर्बल तैयारी के दौरान.
