HPLC द्वारा Cistanche में Echinacoside का निर्धारण

HpLC Cistanche में echinacoside का निर्धारण

संपर्क:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

खोजशब्दों:सिस्तानचे,एकाइनाकोसाइड

उद्देश्य:

HPLC ने कितनी राशि निर्धारित की है?एकाइनाकोसाइडमेंCistancheतरल नाइट्रोजन की स्थिति के साथ-साथ स्वाभाविक रूप से हवा-सूखे की स्थिति में जमीन, जंगली में इसकी तुलनासिस्तानचेऔर कृत्रिम रूप से खेती की जाती हैCistanche.

विधियाँ: LC-20a HPLC प्रणाली (Shimadzu, जापान) का उपयोग किया गया था। स्तंभ YMC जड़त्वीय ods-sp (4.6 मिमी × 150 मिमी, 5 μ m; YMC Co Ltd, जापान) था; मोबाइल चरण: एसिटोनिट्राइल-मेथनॉल -1% फॉर्मिक एसिड (10: 15: 75); पता लगाने तरंग दैर्ध्य 334 एनएम; प्रवाह दर 0.7 मिलीग्राम · मिलीलीटर^-1. स्तंभ तापमान 30 डिग्री सेल्सियस.

परिणाम: विभिन्न उपचार स्थितियों पर एक बहुत ही स्पष्ट प्रभाव पड़ाएकाइनाकोसाइडसामग्री, आम तौर पर उच्च स्तर के साथएकाइनाकोसाइडमेंCistancheप्राकृतिक हवा-सूखे परिस्थितियों में उन जमीन की तुलना में तरल नाइट्रोजन के तहत जमीन; जंगली की सक्रिय घटक सामग्रीCistancheयह कृत्रिम संस्कृति की तुलना में बहुत अधिक था।

Cistancheएक लुप्तप्राय प्रजाति है, एक परजीवी पौधा है कि Clostridium, Salix rubrum की जड़ों में निवास करता है. चीन में,Cistancheमुख्य रूप से इनर मंगोलिया, Ningxia, Gansu, और शिनजियांग में वितरित किया जाता है, "रेगिस्तान ginseng" के लिए एक उत्कृष्ट प्रतिष्ठा के साथ, जो महान औषधीय मूल्य का है। इसकी मुख्य औषधीय सामग्री फेनिलिथेनोइड ग्लाइकोसाइड्स हैं, जिन्हें इसमें विभाजित किया जा सकता हैएकाइनाकोसाइड, पत्ती एकजुट,Cistanche, और दूसरों को उनके substituents पर निर्भर करता है। उनमें से,एकाइनाकोसाइडयौन समारोह, एंटीऑक्सिडेंट, और मुक्त कट्टरपंथी scavenging प्रभाव में सुधार हुआ है, लेकिन यह भी कुछ विरोधी एपोप्टोटिक प्रभाव है. 1980 के दशक के बाद से, HPLC तकनीक, जो फेनिलएथेनोइड ग्लाइकोसाइड्स के अलगाव के लिए एक सरल और तेज़ विधि प्रदान करती है, का व्यापक रूप से प्राकृतिक उत्पादों के अलगाव में उपयोग किया गया है। एक HPLC विधि की सामग्री का विश्लेषण करने के लिए चुना गया थाCistanche, जंगली और कृत्रिम रूप से खेती का प्रमुख सक्रिय घटकCistanche, विभिन्न विकास अवधियों में, तर्कसंगत विकास और उपयोग के लिए एक वैज्ञानिक आधार प्रदान करनाCistancheऔर इसकी गुणवत्ता का प्रभावी मूल्यांकन।

Cistancheट्यूबुलोसाकई प्रभाव है, और अधिक जानने के लिए यहाँ क्लिक करें

उपकरण और अभिकर्मक

Shimadzu, जापान एलसी-20a HPLC उपकरण, एलसी-20at अग्रानुक्रम डबल प्लंजर पंप, सीटीओ-20a कॉलम ओवन, सोडा-20a यूवी विस दोहरी तरंग दैर्ध्य डिटेक्टर; Kunshan kq-100 अल्ट्रासोनिक क्लीनर; एसिटोनिट्रिल (क्रोमैटोग्राफिक रूप से शुद्ध, तियानजिन गुआंगफू रासायनिक अनुसंधान संस्थान); मेथनॉल (क्रोमैटोग्राफिक रूप से शुद्ध, तियानजिन गुआंगफू रासायनिक अनुसंधान संस्थान); फॉर्मिक एसिड (क्रोमैटोग्राफिक रूप से शुद्ध, तियानजिन गुआंगफू रासायनिक अनुसंधान संस्थान); आसुत जल

नियंत्रण:एकाइनाकोसाइड, 98.43% ≥ सामग्री (शंघाई Yuanye जैव प्रौद्योगिकी कं, लिमिटेड).

के पांच नमूनेCistanche: कृत्रिम रूप से निम्नलिखित के साथ एक वर्ष के लिए लगायाCistanche, कृत्रिम रूप से के लिए लगाया गयाCistanche, कृत्रिम रूप से सुखाया गयाCistancheजंगलीCistanche, और कृत्रिम रूप से तीन साल से अधिक समय तक लगाया गयाCistanche.

विधियाँ और परिणाम

वर्ण-चित्रणीय स्थितियों का निर्धारण

मापे गए शिखर को अलग करने के लिएएकाइनाकोसाइडअन्य पदार्थों से एलसी क्रोमैटोग्राम में, साथ ही पंप दबाव और समय सारणी को एक उपयुक्त सीमा के भीतर होने के लिए नियंत्रित करने के लिए, क्रोमैटोग्राफिक स्थितियों का प्रयोगात्मक संशोधन किया गया था, और मोबाइल चरण के साथ अनुकूलन प्रयोगों के बाद, यह निष्कर्ष निकाला गया था कि तापमान जितना अधिक होगा, प्रतिधारण समय उतना ही कम होगा और एकाग्रता उतनी ही कम होगी, पंप का दबाव जितना कम होगा और प्रतिधारण समय उतना ही कम होगा, लेकिन चोटी की ऊंचाई कम हो गई, जो माप के लिए प्रतिकूल थी। मोबाइल चरण को अंततः एसिटोनिट्राइल-मेथनॉल -1% फॉर्मिक एसिड (10: 15: 75), पता लगाने वाली तरंग दैर्ध्य 334 एनएम, प्रवाह दर 0.7 एमएल / मिनट, और कॉलम तापमान 30 डिग्री सेल्सियस, कमरे के तापमान की उद्देश्य स्थितियों और पंप के अधिकतम असर दबाव के अनुसार निर्धारित किया गया था, जिसके परिणामस्वरूप तेज चोटी के आकार और घटकों के अच्छे अलगाव के साथ प्रचुर मात्रा में जानकारी मिली।

स्तंभ निर्धारण

YMC-Inertsil ODS-SP (4.6 मिमी × 150 मिमी, 5 μ मीटर; YMC Co Ltd, जापान)।

प्रयोगात्मक समाधान तैयारी

मानक समाधानों का

echineoside मानक की एक उचित राशि को सटीक रूप से तौला गया था और मोबाइल चरण एसिटोनिट्राइल-मेथनॉल -1% फॉर्मिक एसिड (10: 15: 75) के साथ स्पाइक किया गया था ताकि 0.06 मिलीग्राम बनाया जा सके । ML - 1, 0.05 mg · ML - 1, 0.04 mg · ML - 1, 0.03 mg · ML - 1, 0.02 mg · ML - 1, 0.01 मिलीग्राम · एमएल - 1, और 0.005 मिलीग्राम · ML - 1 के समाधानएकाइनाकोसाइडमानक।

परीक्षण विलयन तैयार करना

कृत्रिम रूप से लगाए गए ताजा की उचित मात्राCistanche(एक वर्ष से कम), कृत्रिम रूप से ताजाCistancheऔर जंगली ताजाCistancheतरल नाइट्रोजन के तहत एक मोर्टार का उपयोग करके पाउडर के लिए जमीन थे; इसके अलावा, उपरोक्त 3 Cistanche की एक उचित राशि को ब्लॉकों में काट दिया गया था, छाया वेंटिलेशन में स्वाभाविक रूप से हवा से सुखाया गया था, और सूखने के बाद, इसे पाउडर में pulverized और जमीन पर रखा गया था। कृत्रिम शुष्कसिस्तानचेऔर तीन साल से अधिक सूखे जंगलीCistancheसीधे पाउडर में जमीन थे। ऊपर तैयार किए गए 0.5 ग्राम सिंशे पाउडर को लिया गया था और एक सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में रखा गया था, 25 मिलीलीटर मोबाइल चरण को जोड़ा गया था, वजन किया गया था और 30 मिनट के लिए भिगोया गया था, 40 मिनट के लिए sonicated, ठंडा किया गया था, और फिर मोबाइल चरण के साथ लापता वजन बनाने के लिए फिर से वजन किया गया था, हिलाया और सेंट्रीफ्यूज किया गया था, और supernatant को 0.45 μ एम माइक्रोस्पोरस फिल्टर झिल्ली निस्पंदन के लिए लिया गया था।

के मानक नमूने के लिए प्रतिगमन घटता के भूखंडोंएकाइनाकोसाइड

के तैयार मानक नमूनेएकाइनाकोसाइडअलग से एलसी उपकरण में इंजेक्ट किए गए थे, और नियंत्रण की एकाग्रता (मिलीग्राम · L-1) का उपयोग abscisa के रूप में किया गया था, और इसी चोटी के क्षेत्रों को मानक वक्र को प्लॉट करने के लिए व्यवस्थित किया गया था, जिसके परिणामस्वरूप प्रतिगमन समीकरण: y = 66 867 100x-46 360.83, R2 = 0.98637, जिसने दिखायाएकाइनाकोसाइडपर 0.1 ~ 1.2 μg एक अच्छा रैखिक संबंध के भीतर.

चर्चा

Echinacosideके मुख्य सक्रिय घटकों में से एक हैCistanche, जो अच्छी तरह से के औषधीय प्रभाव के रासायनिक आधार का प्रतिनिधित्व कर सकते हैंCistanche, औषधीय सामग्री और इसके औषधीय प्रभाव की गुणवत्ता मूल्यांकन करने के अनुरूप बनाने और की pertinence में सुधारCistancheगुणवत्ता मूल्यांकन.

विभिन्न उपचार स्थितियों पर एक स्पष्ट प्रभाव पड़ाएकाइनाकोसाइडसामग्री, आम तौर पर उच्च स्तर के साथएकाइनाकोसाइडमेंCistancheप्राकृतिक हवा-सूखे परिस्थितियों में उन जमीन की तुलना में तरल नाइट्रोजन के नीचे जमीन। आम हवा सुखाने की मात्रा में कमी आईएकाइनाकोसाइड, जिसे हवा सुखाने या परिवर्तित करने के दौरान खाया जा सकता है। सक्रिय घटक सामग्री की कमी को रोकने के लिए और की प्रभावकारिता की गारंटी देने के लिएCistanche, उचित उपचार का चयन किया जाना चाहिए।

लगातार, अधिकांश का मानना था कि कृत्रिम खेती के वातावरणCistanche, साथ ही साथ विकास की आदतें, गुणवत्ता में कोई अंतर नहीं होने के साथ जंगली से अप्रभेद्य थीं, केवल उपज पर जोर देने के लिए प्रवृत्त थीं, और गुणवत्ता का विश्लेषण नहीं किया। वर्तमान अध्ययन से पता चला है कि कृत्रिम रूप से खेती की मात्राCistancheएकाइनाकोसाइडजंगली की तुलना में कम थाCistancheएकाइनाकोसाइड. सबसे अधिक जंगली का 0.3360% थासिस्तानचेऔर सबसे कम कृत्रिम का 0.007 0% थाCistanche. इसलिए, सक्रिय अवयवों की सामग्री में सुधार करने के लिए अभी भी खेती प्रौद्योगिकी में इसका अध्ययन करने की आवश्यकता है।

की गुणवत्ताCistancheअपने सक्रिय घटक की मात्रा पर निर्भर करता है,एकाइनाकोसाइड, जो बदले में मौसम, समय और कटाई की विधि के साथ एक मजबूत संबंध है, इसलिए कटाई कीCistancheको सक्रिय घटक की संचय स्थिति और विकास और विकास के चरण को ध्यान में रखना चाहिए। गुणवत्ता और उपज दोनों पर विचार करें।

इस पेपर में उल्लिखित विधि सरल, सटीक, पुन: प्रस्तुत करने योग्य है, और echinacoside का निर्धारण करने के लिए सटीक है। के लिए उपयोगीCistancheनिर्धारण।