5/6 नेफरेक्टोमी के साथ चूहों में गुर्दे के ऊतकों के एपोप्टोसिस और फाइब्रोसिस पर बुशेन ह्यूओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़े का प्रभाव HIF-1 / पीकेएम2 पर आधारित है

3.4 सीआरएफ चूहों के गुर्दे के ऊतकों में -एसएमए, टीजीएफ-, एफएन, और कोलेजन-1 की प्रोटीन अभिव्यक्तियों पर बुशेन हुओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़े का प्रभाव

जैसा कि चित्र 3 ~ 6 में दिखाया गया है, नकली-संचालित समूह की तुलना में, मॉडल समूह के गुर्दे के ऊतकों में -एसएमए, टीजीएफ-, एफएन और कोलेजन -1 की प्रोटीन अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि हुई थी (पी)<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of α-SMA, TGF-β, FN, and collagen-1 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

तालिका 2 सीआरएफ चूहों में यूरिया, स्क्र, और ₂-एमजी के सीरम स्तर पर बुशेन हुओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़े के प्रभाव (x̄±s, n=10)

समूह	यूरिया/(एमएमओएल/एल)	Scr/(μmol/L)	₂-एमजी/(मिलीग्राम/एल)
दिखावा संचालित समूह	6.23±0.63	37.35±0.83	0.98±0.13
मॉडल समूह	23.02±0.73*	118.57±1.03*	3.95±1.07*
कम खुराक वाला समूह	21.23±0.69#	112.45±0.87#	2.57±0.35#
मध्यम खुराक समूह	18.02±0.54#	93.18±1.17#	1.98±0.09#
उच्च खुराक समूह	15.23±0.33#	87.24±1.08#	1.13±0.17#
बेनाज़िप्रिल समूह	19.09±0.59#	105.77±0.67#	2.48±0.15#

नोट: *पी<0.05 vs. sham-operated group; #P<0.05 vs. model group

3.5 सीआरएफ चूहों के गुर्दे के ऊतकों में HIF-1, पीकेएम2, और एचके2 की एमआरएनए अभिव्यक्तियों पर बुशेन हुओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़े का प्रभाव

जैसा कि चित्र 7 में दिखाया गया है, नकली-संचालित समूह की तुलना में, मॉडल समूह के गुर्दे के ऊतकों में HIF-1, पीकेएम2 और एचके2 की एमआरएनए अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि हुई थी (पी)<0.05). Compared with the model group, the mRNA expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

 

चित्र 3. सीआरएफ चूहों के गुर्दे के ऊतकों में -एसएमए प्रोटीन अभिव्यक्ति पर किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला का प्रभाव (आईसीएच, × 400)

ए. दिखावा संचालित समूह
बी. मॉडल समूह
सी. कम खुराक वाली किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
डी. मध्यम-खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
ई. उच्च खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रिय, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
एफ. बेनाज़िप्रिल समूह

 

चित्र 4. सीआरएफ चूहों के किडनी ऊतक में टीजीएफ-प्रोटीन अभिव्यक्ति पर किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला का प्रभाव (आईसीएच, × 400)

ए. दिखावा संचालित समूह
बी. मॉडल समूह
सी. कम खुराक वाली किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
डी. मध्यम-खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
ई. उच्च खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रिय, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
एफ. बेनाज़िप्रिल समूह

 

 

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3.6 सीआरएफ चूहों के गुर्दे के ऊतकों में HIF-1, पीकेएम2, और एचके2 के प्रोटीन अभिव्यक्तियों पर बुशेन हुओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़े का प्रभाव

जैसा कि चित्र 8 में दिखाया गया है, नकली-संचालित समूह की तुलना में, मॉडल समूह के वृक्क ऊतक में HIF-1, पीकेएम2, और एचके2 की प्रोटीन अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि हुई थी (पी)<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

3.7 सीआरएफ चूहों के गुर्दे के ऊतकों में बैक्स, बीसीएल-2, और कैस्पेज़-3 की प्रोटीन अभिव्यक्तियों पर बुशेन हुओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़े का प्रभाव

जैसा कि चित्र 9 में दिखाया गया है, नकली-संचालित समूह की तुलना में, मॉडल समूह के गुर्दे के ऊतकों में बैक्स और कैस्पेज़ -3 की प्रोटीन अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि हुई थी, जबकि बीसीएल -2 की प्रोटीन अभिव्यक्ति में काफी कमी आई थी (पी)<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of Bax and Caspase-3 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased, and the protein expression of Bcl-2 was significantly increased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

 

चित्र 7. सीआरएफ चूहों के किडनी ऊतक में HIF-1, PKM2, और HK2 mRNA की अभिव्यक्ति पर किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला का प्रभाव

ए. दिखावा संचालित समूह
बी. मॉडल समूह
सी. कम खुराक वाली किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
डी. मध्यम-खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
ई. उच्च खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रिय, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
एफ. बेनाज़िप्रिल समूह
नोट: दिखावटी संचालित समूह की तुलना में,

∗ P<0.05; Compared with the model group,

#P<0.05

चित्र 8. सीआरएफ चूहों के किडनी ऊतक में HIF-1, PKM2, और HK2 प्रोटीन पर किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला का प्रभाव

ए. दिखावा संचालित समूह
बी. मॉडल समूह
सी. कम खुराक वाली किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
डी. मध्यम-खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
ई. उच्च खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रिय, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
एफ. बेनाज़िप्रिल समूह

 

चित्र 9. सीआरएफ चूहों के किडनी ऊतक में बैक्स, बीसीएल-2 और कैस्पेज़-3 प्रोटीन की अभिव्यक्ति पर किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला का प्रभाव

ए. दिखावा संचालित समूह
बी. मॉडल समूह
सी. कम खुराक वाली किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
डी. मध्यम-खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रियण, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
ई. उच्च खुराक किडनी-टोनिफाइंग, रक्त-सक्रिय, और टर्बिडिटी-उन्मूलन फॉर्मूला समूह
एफ. बेनाज़िप्रिल समूह

नोट: दिखावटी संचालित समूह की तुलना में,

∗ P<0.05; Compared with the model group,

#P<0.05

 

4 चर्चा

हाल के वर्षों में, सीकेडी के रोगियों की संख्या बढ़ रही है, और इसका प्रचलन भी काफी बढ़ गया है। सीकेडी के मूल रोगजनन के आधार पर "अतिरेकता के साथ कमी जटिल" के रूप में, प्रोफेसर टैन जिनचुआन ने गुर्दे और प्लीहा को टोन करने, रक्त परिसंचरण को सक्रिय करने और मैलापन को दूर करने के चिकित्सीय सिद्धांत का प्रस्ताव रखा। पिछले अध्ययनों से पता चला है कि बुशेन हुओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़ा गुर्दे के कार्य की रक्षा के लिए ऑटोफैगी, एपोप्टोसिस और फाइब्रोसिस जैसे मार्गों को नियंत्रित कर सकता है। प्रासंगिक अध्ययनों से पता चला है कि रूबर्ब, एस्ट्रैगलस, एंजेलिका, साल्विया मिल्टियोराइजा और उनके सक्रिय तत्व गुर्दे की फाइब्रोसिस को रोक सकते हैं और गुर्दे के कार्य की रक्षा कर सकते हैं [7]। इस अध्ययन के नतीजों से पता चला है कि मॉडल समूह की तुलना में, बुशेन हुओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़ा के सभी खुराक समूहों ने यूरिया, स्क्र, और ₂-एमजी के सीरम स्तर में सुधार किया है, साथ ही गुर्दे के ऊतकों में कोलेजन फाइबर के जमाव में अलग-अलग डिग्री तक सुधार हुआ है, यह सुझाव देता है कि बुशेन हुओक्सू ज़िएज़ुओ काढ़ा गुर्दे के कार्य की रक्षा करने और गुर्दे की फाइब्रोसिस में देरी करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है।

विशेष रूप से, सिस्टैंच ट्यूबुलोसा के लिए समान गुर्दे सुरक्षात्मक प्रभाव की सूचना दी गई है, जो एक क्लासिक टीसीएम जड़ी बूटी है जिसे "डेजर्ट जिनसेंग" के रूप में जाना जाता है और इसे शीर्ष ग्रेड किडनी-पौष्टिक औषधीय सामग्री के रूप में मान्यता प्राप्त है [15]। टीसीएम सिद्धांत में, सिस्टैंच ट्यूबुलोसा को "किडनी यांग को सक्रिय करने और सार को फिर से भरने" की क्षमता के लिए अत्यधिक महत्व दिया जाता है, और आधुनिक शोध ने पुष्टि की है कि यह इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड और फ्लेवोनोइड्स जैसे सक्रिय तत्वों से समृद्ध है [15]। ये घटक वृक्क कोशिका एपोप्टोसिस को रोक सकते हैं, वृक्क कोशिका प्रसार को बढ़ावा दे सकते हैं, क्षतिग्रस्त वृक्क ऊतक की मरम्मत कर सकते हैं, और वृक्क रक्त वाहिकाओं को फैला सकते हैं-प्रभाव जो बुशेन ह्यूओक्स्यू ज़िएज़ुओ डेकोक्शन [15] में देखे गए गुर्दे-सुरक्षात्मक तंत्र के साथ संरेखित होते हैं। इस तरह के निष्कर्ष सीकेडी के उपचार में किडनी-पौष्टिक गुणों वाली टीसीएम जड़ी-बूटियों की क्षमता को उजागर करते हैं।

एपोप्टोसिस सीआरएफ के रोगजनन के अंतर्निहित महत्वपूर्ण तंत्रों में से एक है। शारीरिक स्थितियों के तहत, प्रो-एपोप्टोटिक और एंटी-एपोप्टोटिक परिवार के सदस्यों के बीच एक नाजुक गतिशील संतुलन बनाए रखा जाता है। एक बार जब एपोप्टोसिस अत्यधिक सक्रिय हो जाता है, तो यह ग्लोमेरुली और वृक्क नलिकाओं में पैथोलॉजिकल परिवर्तन को जन्म देगा, जिससे गुर्दे के कार्य को नुकसान पहुंचेगा। जब प्रो-एपोप्टोटिक प्रोटीन बैक्स सक्रिय होता है, तो यह माइटोकॉन्ड्रियल बाहरी झिल्ली पारगम्यता में वृद्धि को प्रेरित करता है, जिसके परिणामस्वरूप माइटोकॉन्ड्रियल आंतरिक झिल्ली क्षमता का पतन होता है और साइटोप्लाज्म में साइटोक्रोम सी (CytC) की रिहाई होती है, जो कैस्पेज़-9 को सक्रिय करती है और कैस्पेज़-3-निर्भर एपोप्टोटिक कैस्केड को ट्रिगर करती है [8]। प्रासंगिक अध्ययनों से पता चला है कि समीपस्थ ट्यूबलर उपकला कोशिकाओं में, बैक्स जीन को खत्म करना या बीसीएल -2 अभिव्यक्ति को अपग्रेड करना एपोप्टोटिक प्रक्रिया को प्रभावी ढंग से रोक सकता है [9]। इस अध्ययन में पाया गया कि बुशेन ह्यूओक्स्यू ज़िएज़ुओ डेकोक्शन की सभी खुराकों ने प्रो-एपोप्टोटिक कारकों बैक्स और कैस्पेज़ -3 की अभिव्यक्ति को काफी हद तक कम कर दिया, और एंटी-एपोप्टोटिक कारक बीसीएल -2 की अभिव्यक्ति को बढ़ा दिया, यह सुझाव देते हुए कि बुशेन ह्यूओज़ू ज़िएज़ुओ डेकोक्शन एपोप्टोटिक मार्ग को अवरुद्ध करके गुर्दे के कार्य में सुधार कर सकता है।

रीनल फ़ाइब्रोसिस एक क्रोनिक किडनी रोग है जो कई साइटोकिन्स द्वारा मध्यस्थ होता है, कई सिग्नलिंग मार्गों द्वारा नियंत्रित होता है, और कई कारकों द्वारा संचालित होता है। यह अंतिम चरण की गुर्दे की बीमारी की ओर ले जाने वाला एक सामान्य मार्ग है, जो गुर्दे के ऊतकों की क्षति, सूजन, ईसीएम जमाव और ट्यूबलर एपिथेलियल-मेसेनकाइमल संक्रमण की विशेषता है। रीनल फ़ाइब्रोसिस में ग्लोमेरुलर फ़ाइब्रोसिस और ट्यूबलोइंटरस्टिशियल फ़ाइब्रोसिस शामिल हैं [8]। अध्ययनों ने पुष्टि की है कि प्रारंभिक सीआरएफ की मुख्य रोग संबंधी अभिव्यक्ति गुर्दे की फाइब्रोसिस है, और गुर्दे की क्षति को कम करने और गुर्दे की विफलता की प्रगति को कम करने के लिए गुर्दे की फाइब्रोसिस की प्रगति में देरी करना बहुत महत्वपूर्ण है [10]। टीजीएफ- एक प्रमुख उपप्रकार ड्राइविंग फाइब्रोसिस है, जो स्मॉड सिग्नलिंग मार्ग के माध्यम से ईसीएम संश्लेषण को नियंत्रित करता है। एफएन सेल आसंजन, माइग्रेशन और ईसीएम असेंबली में शामिल है। अत्यधिक ईसीएम जमाव का मुख्य सेलुलर स्रोत मायोफाइब्रोब्लास्ट है, और उनका संरचनात्मक ट्रांसडिफेनरेशन रीनल फाइब्रोसिस की घटना और विकास में एक महत्वपूर्ण कारक है। कोलेजन-1 मुख्य रूप से मायोफाइब्रोब्लास्ट्स से प्राप्त होता है, और -एसएमए, मायोफाइब्रोब्लास्ट्स की मुख्य रूपात्मक विशेषताओं और सक्रियण मार्करों में से एक के रूप में, दोनों के अभिव्यक्ति स्तर सकारात्मक रूप से गुर्दे की फाइब्रोसिस की डिग्री के साथ सहसंबद्ध होते हैं [11]। प्रासंगिक अध्ययनों से पता चला है कि विभिन्न क्रोनिक किडनी रोगों में, -एसएमए और कोलेजन-1 की एमआरएनए और प्रोटीन अभिव्यक्तियां काफी बढ़ जाती हैं, साथ ही गंभीर रीनल फाइब्रोसिस भी होती है [12]। इस अध्ययन में, बुशेन ह्यूओक्स्यू ज़िएज़ुओ डेकोक्शन ने फाइब्रोसिस मार्करों जैसे -एसएमए, टीजीएफ-, एफएन, और कोलेजन -1 की अभिव्यक्तियों को काफी कम कर दिया, यह दर्शाता है कि बुशेन ह्यूओज़ू ज़िएज़ुओ डेकोक्शन का गुर्दे के कार्य में सुधार और गुर्दे की फाइब्रोसिस की प्रगति को धीमा करने में महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है।

HIF-1 /PKM2 सिग्नलिंग मार्ग एपोप्टोसिस से निकटता से संबंधित है। HIF-1 बैक्स को ट्रांसक्रिप्शनल रूप से सक्रिय करके और बीसीएल-2 को रोककर एपोप्टोसिस को बढ़ावा दे सकता है, और पीकेएम2 न्यूक्लियर ट्रांसलोकेशन के बाद एपोप्टोसिस-संबंधित प्रोटीन जैसे पी53 को विनियमित करके प्रभाव डाल सकता है [13]। स्तनधारी हाइपोक्सिक प्रतिक्रिया के प्रमुख नियामकों में से एक के रूप में, HIF-1 रीनल इंटरस्टिशियल फाइब्रोसिस मॉडल में हाइपोक्सिक रीनल ट्यूबलर एपिथेलियल कोशिकाओं में HIF-1 के माध्यम से टीजीएफ- अभिव्यक्ति को बढ़ा सकता है, जिससे स्मैड-संबंधित मार्ग सक्रिय हो जाते हैं और -एसएमए और कोलेजन -1 जैसे फाइब्रोसिस मार्करों की अभिव्यक्ति प्रेरित होती है। एपोप्टोसिस विनियमन में भाग लेने के अलावा, PKM2 ग्लाइकोलाइटिक चयापचय को विनियमित करके फाइब्रोटिक कोशिकाओं की ऊर्जा आवश्यकताओं का भी समर्थन करता है [14]। इस अध्ययन के नतीजों से पता चला है कि सीआरएफ मॉडल समूह के गुर्दे के ऊतकों में HIF-1, पीकेएम2, और एचके2 के स्तर में काफी वृद्धि हुई थी, जबकि टीसीएम समूहों में काफी कमी आई थी, जिससे पता चलता है कि बुशेन हुओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़ा गुर्दे के ऊतकों में HIF-1 /पीकेएम2 मार्ग की सक्रियता को दबाकर एपोप्टोसिस को रोक सकता है और गुर्दे की फाइब्रोसिस में देरी कर सकता है।

संक्षेप में, बुशेन हुओक्स्यू ज़िएज़ुओ काढ़ा सीआरएफ चूहों में सेल एपोप्टोसिस और फाइब्रोसिस को रोक सकता है, सीआरएफ मॉडल चूहों में गुर्दे की चोट में सुधार कर सकता है, और इसका तंत्र HIF-1 /पीकेएम2 सिग्नलिंग मार्ग के विनियमन से संबंधित हो सकता है।

संदर्भ

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