Cistanche के ग्लाइकोसाइड्स संवहनी मनोभ्रंश के चूहे मॉडल में सीखने और स्मृति में सुधार

अधिक information:ali.ma@wecistanche.com के लिए

जे CHEN1,2, एस.-एन. ZHOU1, Y.-M. झांग2, वाई-एल। फेंग2, एस वांग2

न्यूरोलॉजी विभाग, शेडोंग विश्वविद्यालय के Qilu अस्पताल, जिनान, चीन। & मस्तिष्क विज्ञान अनुसंधान संस्थान, शेडोंग विश्वविद्यालय, शेडोंग, पी.आर. चीन

न्यूरोलॉजी विभाग, इनर मंगोलिया स्वायत्त क्षेत्र पीपुल्स हॉस्पिटल, पी.आर. चीन

जिन चेन और यान-मेई झांग ने इस अध्ययन में समान रूप से योगदान दिया

सारांश।– उद्देश्य:Cistanche के ग्लाइकोसाइड्स(जीसी) Xin Jiang से निकाले जाते हैंCistanche, जो व्यापक रूप से एक चीनी जड़ी बूटी के रूप में उपयोग किया जाता है। इस अध्ययन का उद्देश्य संवहनी मनोभ्रंश (वीडी) पर जीसी के प्रभावों का मूल्यांकन करना है।

सामग्री और तरीके: वीडी मॉडल वयस्क Wistar चूहों में द्विपक्षीय आम कैरोटिड धमनी के लिगाचर द्वारा स्थापित किया गया था, जो 14 दिनों के लिए दैनिक i. p. खारा, जीसी (10 मिलीग्राम / किग्रा शरीर का वजन / डी, आईपी) या ऑक्सीरासेटम (450 मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन / डी, आईपी) के प्रशासन को प्राप्त करते थे। मॉरिस वाटर भूलभुलैया परीक्षण ने चूहों के संज्ञानात्मक प्रदर्शन को महत्व दिया। हिप्पोकैम्पस को विच्छेदित किया गया था और प्रोटिओमिक्स और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल विश्लेषण के अधीन किया गया था। परिणाम: जीसी समूह ने सर्जरी के बाद चार और पांच दिनों में वीडी समूह की तुलना में काफी कम एस्केप लेटेंसी दिखाई। उन्होंने शाम-संचालित समूह और ऑक्सीरासेटम नियंत्रण समूह की तुलना में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं दिखाया। हिप्पोकैम्पस में, जीसी समूह में 21 प्रोटीन स्पॉट ने वीडी समूह की तुलना में अलग-अलग अभिव्यक्ति के स्तर दिखाए। इसमें चार प्रोटीन शामिल थे जिन्होंने एक महत्वपूर्ण अंतर दिखाया: तीन अपरेगुलेटेड प्रोटीन थियोरेडॉक्सिन-जैसे प्रोटीन 1, दोहरी-विशिष्टता माइटोजेन-सक्रिय प्रोटीन किनेज किनेज 1, और डाइहाइड्रोपायरिडिन- नैस से संबंधित प्रोटीन 2 (सीआरएमपी -2), और एक डाउन-विनियमित प्रोटीन ग्लूटाथियोन सिंथेटेज। इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री विश्लेषण से पता चला है कि पी-ताऊ प्रोटीन का स्तर वीडी मॉडल समूह में शाम-संचालित समूह की तुलना में काफी अधिक था (पी< 0.05).="" after="" gc="" treatment,="" p-tau="" protein="" level="" in="" vd="" model="" rats="" showed="" a="" significant="" decrease="" compared="" with="" the="" vd="" group="" treated="" with="" saline="" (p="">< 0.05).="" conclusions:="" the="" gc="" plays="" a="" critical="" role="" in="" protecting="" the="" hippocampal="" neurons="" in="" the="" vd,="" by="" decreasing="" p-tau="" phosphorylation="" and="" increasing="" the="" crmp-2="" expression="" level.="" pharma-="" ecological="" manipulation="" of="" gc="" offers="" a="" new="" opportunity="" for="" vd="">

मुख्य शब्द:

संवहनी मनोभ्रंश, cistanche के Glycosides, प्रोटिओमिक्स, पी-ताऊ, Dihydropyrimidinase से संबंधित प्रोटीन 2.

स्मृति में सुधार के लिए Cistanche और cistanche deserticola मा पर क्लिक करें

परिचय

संवहनी मनोभ्रंश (वीडी) दूसरा प्रमुख सेनिल मनोभ्रंश है और मुख्य रूप से इस्केमिक सेरेब्रोवास्कुलर रोग के कारण होता है। वीडी विषम संज्ञानात्मक हानि की ओर जाता है, और नई प्रभावी चिकित्सीय दवाएं जो वीडी की प्रगति का इलाज या रोकथाम करती हैं, उनकी आवश्यकता होती है। हालांकि, वहाँ अभी भी im के लिए कोई प्रभावी चीनी जड़ी बूटी नहीं है- सेरेब्रल ischemia द्वारा प्रेरित संज्ञानात्मक हानि साबित.

Cistanche (जीसी) के ग्लाइकोसाइड्स को व्यापक रूप से न्यूरोप्रोटेक्टिव प्रभावों के साथ एक जड़ी बूटी के रूप में उपयोग किया गया है। उसके ba Cistanches निकालें बढ़ाता है केअधिगम और स्मृतिन्यूरोनल सेल भेदभाव, न्यूराइट विकास, और synapse formation2 को बढ़ावा देने के द्वारा चूहों की। Cistanche के ग्लाइकोसाइड्स अनुमस्तिष्क ग्रेन्युल न्यूरॉन्स में एपोप्टोसिस को रोक सकते हैं और एपोप्टोसिस-3 और एपोप्टोसिस -83 के सक्रियण को बाधित करके एक विरोधी एपोप्टोसिस प्रभाव डाल सकते हैं। Echinacoside, Herba Cistanches का एक प्रमुख सक्रिय घटक, Trk सिग्नलिंग 4 को सक्रिय करके रोटेनोन इन-जूरी से न्यूरोनल कोशिकाओं की रक्षा करने के लिए पर्याप्त है। हालांकि, जिन तंत्रों के द्वारा जीसी वीडी में संज्ञानात्मक हानि में सुधार करता है, वे अभी भी काफी हद तक अज्ञात हैं।

ताऊ प्रोटीन एक न्यूरोनल सूक्ष्मनलिकाएं से जुड़ा प्रोटीन है जो न्यूरोनल सूक्ष्मनलिकाएं को स्थिर करता है। ताऊ प्रोटीन (पी-ताऊ) का फॉस्फोराइलेशन सूक्ष्मनलिकाएं और आईएम-पैक्ट्स सिनैप्टिक ट्रांसमिशन के साथ बातचीत करने की अपनी क्षमता को प्रभावित करता है। न्यूरोफिब्रिलरी tangles (NFTs) के संचय में पी-ताऊ प्रोटीन होता है और अल्जाइमर रोग (एडी) 5 की प्रमुख विशेषताओं में से एक है। यह अच्छी तरह से ज्ञात है कि वीडी और एडी दो सबसे आम मनोभ्रंश रोग हैं। वे संवहनी जोखिम कारकों के साथ एक सामान्य सहसंबंध साझा करते हैं, जैसे कि उच्च रक्तचाप, मधुमेह मेलिटस, और हाइपरकोलेस्ट्रोलेमिया। इसलिए, पी-ताऊ को भी वीडी में फंसाया जा सकता है।

हमने GCs के प्रभावों का मूल्यांकन कियाअधिगम-स्मृति फलनवीडी के एक चूहे मॉडल में और जीसी के न्यूरोप्रोटेक्टिव प्रभावों में अंतर्दृष्टि प्रदान करने के लिए वीडी चूहों के हिप्पोकैम्पस पर प्रोटिओमिक्स और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल विश्लेषण किया। हमारे परिणामों से पता चला है कि जीसीबेहतर शिक्षा और स्मृतिवीडी चूहों में, और वीडी चूहों में पी-ताऊ जैसे प्रोटीन के स्तर को बदल दिया।

सामग्री और तरीके

जीवधारी

छह महीने के नर विस्तार चूहों (वजन 230- 270 ग्राम) को हुबेई प्रांत, चीन के प्रयोगात्मक पशु केंद्र द्वारा प्रदान किया गया था। सभी प्रयोगात्मक पशु प्रक्रियाओं को पशु देखभाल दिशानिर्देशों और वुहान नंबर 1 अस्पताल, चीन के स्थानीय नैतिक नियमों के अनुसार आयोजित किया गया था। नैतिकता अनुमोदन संख्या 00014834 है। जानवरों को 25 डिग्री सेल्सियस पर 4 प्रति पिंजरे के समूहों में अलग-अलग रखा गया था, जिसमें 12 घंटे का प्रकाश / 12-घंटे का अंधेरा चक्र और भोजन और पानी तक मुफ्त पहुंच थी। जानवरों (n = 45) को बेतरतीब ढंग से चार समूहों को सौंपा गया था: मॉडल समूह (n = 12), शाम-संचालित समूह (n = 11), GC- उपचारित समूह (n = 12), और oxiracetam-उपचारित नियंत्रण समूह (n = 10)।

द्विपक्षीय आम कैरोटिड धमनी बंधन (2-VO)

10% क्लोरल हाइड्रेट (तियानजिन दमाओ केमिकल रीएजेंट फैक्ट्री अभिकर्मक, तियानजिन, चीन) (350 मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन) के साथ गहरे संज्ञाहरण के तहत,

i. p.), द्विपक्षीय आम कैरोटिड धमनियों (सीसीए) को आसपास के ऊतकों से सावधानीपूर्वक अलग किया गया था, और फिर टांके के साथ कसकर लिगेट किया गया था। बाद में त्वचा का पुनर्निर्माण किया गया और चूहों को बाद में कमरे के तापमान पर बनाए रखा गया और पुनर्जीवन तक घर के पिंजरे में वापस आ गया। शाम-संचालित नियंत्रण चूहों को सीसीए बंधाव के बिना एक ही सर्जिकल प्रक्रिया के अधीन किया गया था। वीडी चूहों को जीसी (10 मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन / डी, आईपी) या ऑक्सीरासेटम (450 मिलीग्राम / किलोग्राम शरीर के वजन / डी, आईपी) के साथ इलाज किया गया था, जो लगातार 14 दिनों तक सर्जरी के तुरंत बाद था। मॉडल समूह को सामान्य खारा की समान मात्रा के साथ इंजेक्ट किया गया था।

मॉरिस जल भूलभुलैया परीक्षण

MWM परीक्षण पहले से वर्णित विधि 7 के अनुसार किया गया था। परीक्षण क्षेत्र में पानी से भरा एक परिपत्र पूल (25 ± 1 डिग्री सेल्सियस) शामिल था, जिसे दूध के साथ अपारदर्शी बनाया गया था ताकि चूहे पानी की सतह से 1 सेमी नीचे पानी के नीचे के मंच को देखने में असमर्थ हों। पूल को चार चतुर्भुजों (लेबल किए गए क्षेत्र I, II, III और IV) में विभाजित किया गया था और एक प्लेटफ़ॉर्म ज़ोन II में डूब गया था। दृश्य संकेतों को परीक्षण कक्ष की दीवार पर रखा गया था। जानवरों को चार शुरुआती चतुर्भुज बिंदुओं में से एक पर पानी में रखा गया था, जो परीक्षणों के दौरान बेतरतीब ढंग से भिन्न था। चूहों को प्लेटफ़ॉर्म खोजने और 15 सेकंड के लिए उस पर बैठने के लिए 2 मिनट का समय दिया गया था। जो चूहे किसी दिए गए समय के भीतर स्थान को खोजने में विफल रहे, उन्हें धीरे-धीरे मंच पर निर्देशित किया गया और 15 सेकंड के लिए उस पर रहने के लिए अल-लोट किया गया। प्रत्येक क्षेत्र में तैराकी मार्ग, विलंबता, तैराकी दूरी और समय को रिकॉर्ड करने के लिए एक स्वचालित ट्रैकिंग सिस्टम का उपयोग किया गया था। बाद के विश्लेषण के लिए MWM परीक्षण के दो सप्ताह बाद सभी चूहों की बलि दी गई थी।

प्रोटीन निष्कर्षण

10% क्लोरल हाइड्रेट के साथ गहरे संज्ञाहरण के तहत, MWM परीक्षण के अधीन सभी चूहों को डी-कैपिटेट किया गया था। हिप्पोकैम्पस ऊतकों को जल्दी से बर्फ पर काटा गया था, और फिर तुरंत तरल नाइट्रोजन में जमे हुए थे। सभी ऊतकों को मोर्टार और पेस्टल का उपयोग करके तरल नाइट्रोजन के तहत homogenized किया गया था और लाइसिस बफर (7 M यूरिया, 2 M thiourea, 2% CHAPS, 20 mM Tris) में एकत्र किया गया था। अघुलनशील कणों को 4 डिग्री सेल्सियस पर 20 मिनट के लिए 12,000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा हटा दिया गया था। नमूनों में दूषित न्यूक्लिक एसिड को 5 मिनट के लिए आंतरायिक सोनिक दोलन द्वारा बाधित किया गया था। supernatants centrifugation के बाद एक ही स्थिति में के रूप में ऊपर वर्णित एकत्र किए गए थे. supernatants में प्रोटीन एकाग्रता ब्रैडफोर्ड परख द्वारा मापा गया था, और supernatants 80 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया था।

द्वि-आयामी जेल वैद्युतकणसंचलन

प्रोटीन एलीकोट (120 μg) को 350 μL की मात्रा में एक पुनर्जलीकरण बफर (7 M यूरिया, 2 M thiourea, 4% CHAPS, 1% wt/vol DTT, 0.5% IPG बफर, और ब्रोमोफेनॉल नीले रंग का एक ट्रेस) के साथ समायोजित किया गया था। Isoelectric focusing (IEF) को IPG स्ट्रिप्स (pH 4-7, आकार 22 सेमी) में 12 मिनट के लिए 300 V पर किया गया था। 18 मिनट के लिए 700 V, 1.5h के लिए 1500 V, 3 h के लिए 9900 V, 6.5 h के लिए 9990 V, और फिर Ettan IPGphor II सिस्टम (GE ETTAN IPGPHOR3) पर 20 h के लिए 600 V। IEF कार्यक्रम के बाद, स्ट्रिप्स को एक IPG संतुलन बफर I (6 M यूरिया, 2% SDS, 30% ग्लिसरॉल, 0.375M Tris, pH 8.8, 20 mg/ml DTT, और ब्रोमोफेनॉल ब्लू का एक ट्रेस) में संतुलित किया गया था, और फिर alkylated (25 mg/ml iodoacetamide बजाय DTT in a equilibration buffer) 15 मिनट के लिए 15 मिनट के लिए (25 mg/ml iodoacetamide) 12.5% SDS×12.5% SDS×12.5% SDSacryd पर प्रदर्शन किया गया था×। Ettan DALT छह वैद्युतकणसंचलन प्रणाली (GE ETTAN DALTsix, PA, संयुक्त राज्य अमेरिका) का उपयोग कर. वैद्युतकणसंचलन 45 मिनट के लिए 2 डब्ल्यू पर किया गया था, इसके बाद चार घंटे के लिए 17 डब्ल्यू पर अलगाव किया गया था जब तक कि ब्रोमोफेनॉल नीला लगभग जैल के तल तक नहीं पहुंच गया। प्रोटीन धब्बे विश्लेषणात्मक जैल में चांदी धुंधला (तियानजिन Damao रासायनिक अभिकर्मक फैक्टरी) के माध्यम से कल्पना की गई थी। 2-डीई वाशर तीन प्रतियों में और प्रत्येक समूह के लिए तीन स्वतंत्र प्रोटीन निष्कर्षण से गठित किया गया था।

प्रीटेरेटिव जेल वैद्युतकणसंचलन

चूहों के चार समूहों से प्रोटीन के नमूने (600 μg) ऊपर वर्णित विधि के बाद 2-DE के अधीन थे। प्रोटीन धब्बे को कूमासी शानदार नीले रंग के दाग (तियानजिन दमाओ केमिकल रीएजेंट फैक्ट्री) के माध्यम से प्रीऑपरेटिव जैल में कल्पना की गई थी।

छवि अधिग्रहण और विश्लेषण

जेल छवियों को एक 2-DE छवि स्कैनिंग सिस्टम (UMAX Powerlook1100, VT, USA) पर कब्जा कर लिया गया था और छवि मास्टर 2 डी प्लैटिनम 5.0 सॉफ्टवेयर (जीई, पीए, यूएसए) द्वारा विश्लेषण किया गया था। प्रोटीन धब्बों को स्वचालित रूप से पता लगाया गया था और फिर लकीरों, धब्बों और कलाकृतियों को हटाने के लिए मैन्युअल रूप से संपादित किया गया था।

मैट्रिक्स-सहायता प्राप्त लेजर Desorption Ionization-टाइम-ऑफ-फ्लाइट मास स्पेक्ट्रोमेट्री (MALDI-TOF-MS)

पेप्टाइड मास फिंगरप्रिंटिंग और बाद के विश्लेषण के लिए, जैल को कटा हुआ किया गया था, और कूमासी-दाग वाले धब्बों को 100 एमएम अमोनियम बाइकार्बोनेट और एसिटोनिट्राइल के साथ धोया गया था, डीटीटी के साथ 40 मिनट के लिए 60 डिग्री सेल्सियस पर कम किया गया था, और फिर अंधेरे में 30 मिनट के लिए आईएए द्वारा अल्काइलेटेड किया गया था। जेल को 50 mM अमोनियम बाइकार्बोनेट (pH 8.6) में 12 ng / μl संशोधित ट्रिप्सिन समाधान के 50 μL में 37 डिग्री सेल्सियस रात भर में शामिल किया गया था। पेप्टाइड्स को जेल प्लग से 1% फॉर्मिक एसिड / 2% एसिटोनिट्राइल के साथ निकाला गया था और सी -18 ज़िप-टिप्स का उपयोग करके केंद्रित किया गया था। डाइजेस्ट को एक मैट्रिक्स के रूप में ए-साइनो 4-हाइड्रॉक्सी सिनामिक एसिड (50% एसिटोनिट्राइल में 2 मिलीग्राम / एमएल, दस एमएम अमोनियम फॉस्फेट युक्त 0.1% टीएफए) का उपयोग करके एक MALDI लक्ष्य पर (चार प्रतिकृतियां) देखा गया था। स्पेक्ट्रा को 4700 MALDI TOF / TOF मास स्पेक्ट्रोमीटर (एप्लाइड बायोसिस्टम्स, एनवाई, यूएसए) पर अधिग्रहित किया गया था, और जीपीएस एक्सप्लोरर टीएम (एप्लाइड बायोसिस्टम्स) सॉफ्टवेयर द्वारा विश्लेषण किया गया था।

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री

कोरोनल हिप्पोकैम्पल वर्गों को पैराफिन में एम्बेडेड होने से पहले 4% पैराफॉर्मेल्डिहाइड में तय किया गया था और फिर 4-μm मोटे वर्गों में काट दिया गया था। प्रस्थान- अंतिम रूप से कोरोनल हिप्पोकैम्पस वर्गों को फॉस्फेट-बफ़र्ड खारा में 3% H2O2 का उपयोग करके अंतर्जात पेरोक्सीडेज गतिविधि को बुझाने के लिए संसाधित किया गया था। गैर-विशिष्ट immunoreactions 15 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर अवरुद्ध कर दिया गया था। वर्गों को तब 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर पी-ताऊ एंटीबॉडी और माध्यमिक एंटीबॉडी के साथ इनक्यूबेट किया गया था और 3,3'-डायमिनोबेंजिडीन टेट्राहाइड्रोक्लोराइड (डाको, टोक्यो, जापान) प्रतिक्रिया के बाद कल्पना की गई थी। छवियों को एक प्रकाश माइक्रोस्कोप (ओलंपस, टोक्यो, जापान) का उपयोग करके कैप्चर किया गया था और फ़ोटोशॉप सॉफ़्टवेयर (संस्करण 7.0, एडोब, सैन जोस, सीए, यूएसए) का उपयोग करके संसाधित किया गया था।

सांख्यिकीय विश्लेषण

मात्रात्मक डेटा को एसडी ± साधन के रूप में व्यक्त किया गया था। विचरण का दो-तरफ़ा विश्लेषण (एनोवा) SPSS 10.0 विश्लेषण सॉफ़्टवेयर (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) का उपयोग करके किया गया था। p< 0.05="" was="" considered="">

परिणाम

जीसी वीडी चूहों में सीखने और स्मृति को बढ़ावा देता है

वीडी चूहा मॉडल के संज्ञानात्मक कार्य पर जीसी के प्रभावों का मूल्यांकन करने के लिए, हमने MWM परीक्षण किया। MWM परीक्षण में, जीसी समूह ने सर्जरी के बाद 4 और 5 दिनों में वीडी समूह की तुलना में काफी कम एस्केप लेटेंसी दिखाई, लेकिन शाम-संचालित समूह और ऑक्सीरासेटम नियंत्रण समूह (तालिका I) की तुलना में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं दिखाया। इन आंकड़ों से पता चलता है कि जीसी वीडी चूहों में सीखने और स्मृति को बढ़ावा देता है। जीसी वीडी चूहों के हिप्पोकैम्पस के प्रोटिओमिक प्रोफाइल को बदलता है।

चूहे हिप्पोकैम्पस के प्रोटिओमिक विश्लेषण से, हमने पाया कि जीसी समूह में 21 प्रोटीन स्पॉट ने वीडी समूह की तुलना में विभिन्न अभिव्यक्ति स्तरों को दिखाया। उनमें से, चार प्रोटीनों ने जीसी चूहों (तालिका II) के हिप्पोकैम्पस में एक महत्वपूर्ण अंतर दिखाया: जिसमें तीन अपरेगुलेटेड प्रोटीन थायोरेडॉक्सिन-जैसे प्रोटीन 1 (TXNL 1), दोहरी विशिष्टता माइटोजेन-सक्रिय प्रोटीन किनेज किनेज 1 (MAPKK 1), और डाइहाइड्रोपायरिमिडिनेज से संबंधित प्रोटीन 2 (DPYSL2) शामिल हैं; और एक नीचे विनियमित प्रोटीन ग्लूटाथियोन सिंथेटेज (जीसीएल)। DPYSL2 के विशिष्ट दो-आयामी जेल वैद्युतकणसंचलन (2-DE) प्रो-फाइलों को चित्र 1 में दिखाया गया था।

जीसी वीडी चूहों के हिप्पोकैम्पस में पी-ताऊ स्तर को संशोधित करता है

immunohistochemistry विश्लेषण द्वारा, हमने पाया कि पी-ताऊ प्रोटीन का स्तर वीडी मॉडल समूह में शाम-संचालित समूह की तुलना में काफी अधिक था (पी< 0.05).="" after="" the="" gc="" treatment,="" p-tau="" protein="" level="" in="" vd="" model="" rats="" showed="" a="" significant="" decrease="" compared="" with="" the="" vd="" group="" treated="" with="" saline="" (p="">< 0.05)="" but="" showed="" no="" significant="" difference="" compared="" with="" the="" oxiracetam="" control="" group="" (figure="">

चर्चा

वीडी मुख्य रूप से सेरेब्रोवास्कुलर रोगों के कारण स्मृति और संज्ञानात्मक कार्य की हानि के कारण होता है8,9,10,11। दो पोत रोड़ा (2VO) मॉडल सरल और स्थिर है और सेरेब्रल ischemia के मानक मॉडल के रूप में मान्यता प्राप्त है। इस अध्ययन में, हमने वीडी पशु मॉडल स्थापित करने के लिए 2वीओ मॉडल का उपयोग किया। MWM परीक्षण द्वारा, हमने पाया कि वीडी समूह ने शाम-संचालित समूह की तुलना में संज्ञानात्मक क्षमता में कमी दिखाई, यह पुष्टि करते हुए कि हमने वीडी मॉडल को सफलतापूर्वक स्थापित किया है। इस मॉडल के आधार पर, हमने पाया कि जीसी उपचार ने वीडी चूहों की स्थानिक संज्ञानात्मक क्षमता में सुधार किया है, जो ऑक्सीरासेटम, एक सकारात्मक नियंत्रण के साथ एक समान हद तक है। इन आंकड़ों से संकेत मिलता है कि जीसी वीडी में स्थानिक सीखने और स्मृति हानि को बढ़ावा दे सकता है।

उस तंत्र की जांच करने के लिए जिसके द्वारा जीसी वीडी पर न्यूरोप्रोटेक्टिव प्रभाव डालता है, हमने वीडी चूहों के हिप्पोकैम्पस में विभेदक रूप से व्यक्त प्रोटीन की स्क्रीनिंग के लिए एक प्रोटिओमिक दृष्टिकोण को नियोजित किया। हमने पाया कि ऊर्जा चयापचय, प्रोटीन तह, सिग्नलिंग मार्ग और साइटोस्केलेटन से संबंधित कई प्रोटीनों ने नियंत्रण के रूप में खारा के साथ इलाज किए गए लोगों की तुलना में जीसी के साथ इलाज किए गए वीडी चूहों के हिप्पोकैम्पस में अलग-अलग अभिव्यक्तियों को दिखाया।

विभेदक रूप से व्यक्त प्रोटीनों में से एक DPYSL2 है, जिसे कोल्सिन प्रतिक्रिया मध्यस्थ प्रोटीन -2 (CRMP-2) के रूप में भी जाना जाता है, जो प्राथमिक हिप्पोकैम्पल न्यूरॉन्स में बढ़ते अक्षतंतुओं के दूरस्थ भाग में समृद्ध होता है और अक्षतंतु भेदभाव और न्यूरोनल आउटग्रोथ 12,13 के लिए महत्वपूर्ण है। इसके अलावा, CRMP-2 सूक्ष्मनलिकाएं असेंबली को बढ़ावा देता है और एकाधिक-अक्षतंतु गठन और न्यूरोनल ध्रुवीयता को बढ़ाने के लिए रास सिग्नलिंग की मध्यस्थता करता है14,15। इस अध्ययन में, CRMP-2 के प्रोटीन अभिव्यक्ति स्तर को VD समूह की तुलना में GC समूह में 2.28 गुना बढ़ा दिया गया था, जो तंत्रिका नेटवर्क गठन के संभावित मरम्मत तंत्र और VD में न्यूरोनल ध्रुवीयता के रखरखाव में CRMP-2 के लिए एक महत्वपूर्ण भूमिका का सुझाव देता है।

इसके अलावा, वर्तमान अध्ययन में हमने वीडी मॉडल समूह में उच्च पी-ताऊ पाया, लेकिन जीसी उपचार के बाद कम पी-ताऊ अभिव्यक्ति। ताऊ प्रोटीन न्यूरॉन्स के मॉर्फोजेनेसिस में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। कुछ रोग स्थितियों में, पी-ताऊ प्रोटीन माइटोकॉन्ड्रियल फ़ंक्शन को प्रभावित करके न्यूरॉन्स के लिए विषाक्त समुच्चय उत्पन्न कर सकता है। पिछले अध्ययनों से पता चलता है कि जीसी एंटी-ऑक्सीकरण फ़ंक्शन 16,17,18 के साथ माइटोकॉन्ड्रियल ऊर्जा चयापचय को बढ़ा सकता है। दिलचस्प बात यह है कि सीआरएमपी -2 फॉस्फोराइलेशन को एडी में न्यूरोफिब्रिलरी टैंगल्स के घटक के रूप में भी चिह्नित किया गया है।

निष्कर्ष

CRMP2 आमतौर पर साइक्लिन-निर्भर प्रोटीन किनेज -5 (Cdk5) और ग्लाइकोजन सिंथेज़ किनेज -3 (GSK3) द्वारा एडी रोगियों के मस्तिष्क में फॉस्फोराइलेटेड होता है, वही किनेसेस जो NFTs19,20 उत्पन्न करने के लिए फॉस्फोराइलेट ताऊ प्रोटीन। यह जांचने के लिए आगे के अध्ययन की आवश्यकता है कि क्या जीसी सीडीके 5 और जीएसके 3 गतिविधि 21,22,23 को विनियमित करके वीडी में पी-ताऊ और सीआरएमपी 2 अभिव्यक्ति लेव-एल को नियंत्रित करता है। संक्षेप में, हमारे डेटा से पता चलता है कि जीसी पी-ताऊ फॉस्फोराइलेशन को कम करके और सीआरएमपी -2 अभिव्यक्ति स्तर को बढ़ाकर वीडी के हिप्पोकैम्पस न्यूरॉन्स की रक्षा करने के लिए एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। जीसी के औषधीय हेरफेर वीडी के खिलाफ चिकित्सा के विकास के लिए एक नया अवसर प्रदान करता है।

पावती

इस अध्ययन को विशेष फाउंडेशन फॉर ताइशान स्कॉलर्स और नेशनल नेचुरल साइंस फंड (30960520) द्वारा समर्थित किया गया था।

हितों का टकराव

लेखकों ने घोषणा की है कि हितों का कोई संघर्ष नहीं है।

संदर्भ

1) GORELICK PB, PANTONI एल संवहनी संज्ञानात्मक हानि में अग्रिम. स्ट्रोक 2013; 44: 307-308.

2) CHOI JG, चंद्रमा एम, JEONG हू, किम एमसी, किम SY, ओह एमएस Cistanches Herba तंत्रिका विकास कारकों को प्रेरित करके सीखने और स्मृति को बढ़ाता है। Behav मस्तिष्क Res 2011; 216: 652-658.

3) TIAN XF, पु XP. Cistanches साल्सा से Phenylethanoid glycosides न्यूरॉन्स में 1- मिथाइल-4-phenylpyridinium आयन द्वारा प्रेरित apoptosis को रोकते हैं। जे Ethnopharmacol 2005; 97: 59-63.

4) झू एम, एलयू सी, एलआई डब्ल्यू echinacoside के लिए क्षणिक जोखिम Trk सिग्नलिंग को सक्रिय करने और रोटेनोन से न्यूरोनल कोशिकाओं की रक्षा करने के लिए पर्याप्त है। जे Neurochem 2013; 124: 571-580.

5) मदीना एम, अविला जे। अल्जाइमर रोग में ताऊ की भूमिका पर नए दृष्टिकोण। चिकित्सा के लिए निहितार्थ। बायोकेम फार्माकोल 2014; 88: 540-547.

6) निंग एम, झांग जेड, चेन जेड, झाओ टी, झांग डी, झोउ डी, ली डब्ल्यू, लियू वाई, यांग वाई, ली एस, एचई एल आनुवांशिक सबूत है कि संवहनी मनोभ्रंश अल्जाइमर रोग से संबंधित है: चीनी आबादी में आनुवंशिक संघ बी-ट्वीन ताऊ बहुरूपता और संवहनी मनोभ्रंश। उम्र बढ़ने 2011; 40: 125-128.

7) CAIN DP, BOON F. विस्तृत व्यवहार विश्लेषण द्विपक्षीय मध्य सेरेब्रल धमनी स्ट्रोक दिए गए चूहों में कार्य रणनीतियों और स्थानिक स्मृति हानि दोनों को फिर से वील करता है। मस्तिष्क Res 2003; 972: 64-74.

8) ZHONG G, वांग Y, ZHANG Y, GUO JJ, ZHAO Y धूम्रपान मनोभ्रंश के बढ़ते जोखिम से जुड़ा हुआ है: संभावित प्रभाव संशोधक की जांच के साथ संभावित कोहोर्ट अध्ययनों का एक मेटा-विश्लेषण। PLoS एक 2015; 10: e0118333.

9) NETO E, एलन EA, AURLIEN H, NORDBY H, EICHELE T. EEG वर्णक्रमीय विशेषताएं अल्जाइमर और संवहनी मनोभ्रंश के बीच भेदभाव करती हैं। फ्रंट न्यूरोल 2015; 6: 25.

10) CALABRÉ RS, DE LUCA R, LEO A, Balletta T, MARRA A, BRAMANTI P. Lokomat संवहनी मनोभ्रंश में प्रशिक्षण: मोटर सुधार और परे! एजिंग क्लीन एक्सपी रेस 2015 मार्च 12।

11) UTKAN T, YAZIR Y, KARSON A, BAYRAMGÜRLER D. Etanercept संज्ञानात्मक प्रदर्शन में सुधार करता है और streptozotocin-प्रेरित मधुमेह में प्रयोगात्मक संवहनी मनोभ्रंश के दौरान eNOS और BDNF अभिव्यक्ति को बढ़ाता है। Curr Neurovasc Res 2015 मार्च 11.

12) झोउ एलएस, झाओ जीएल, लियू क्यू, जियांग एससी, वांग वाई, झांग डीएम प्रतिक्रिया मध्यस्थ प्रोटीन -2 मैक्रोफेज फेनोटाइप को शांत करना और प्रयोगात्मक मायोकार्डियल रोधगलन मॉडल में इन्फार्क्ट उपचार में सुधार करता है। जे ज्वलनशील (लोंड) 2015; 12: 11.

13) विल्सन एसएम, KI YEON एस, यांग XF, पार्क केडी, खन्ना आर प्रतिक्रिया मध्यस्थ प्रोटीन 2 (CRMP2) GSK3π और CDK5 द्वारा फॉस्फोराइलेशन दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के बाद के विभेदक विनियमन। फ्रंट सेल Neurosci 2014; 8: 135.

14) LIM NK, त्रिशंकु LW, PANG TY, MCLEAN CA, LIDELL JR, HILTON JB, LI QX, WHITE AR, HANNAN AJ, CROUCH PJ. हंटिंगटन के रोग से प्रभावित मस्तिष्क में ग्लाइकोजन सिंथेज़ किनेज -3 और कोल्पिन प्रतिक्रिया मध्यस्थ प्रोटीन -2 में स्थानीयकृत परिवर्तन। हम मोल जेनेट 2014; 23: 4051-4063.

15) BRUSTOVETSKY T, PELLMAN JJ, YANG XF, KHANNA R, BRUSTOVETSKY N. Concpin response mediator protein 2 (CRMP2) N-methyl-D- aspartate (NMDA) रिसेप्टर और Na+/Ca2+ ex-changer के साथ बातचीत करता है और उनकी कार्यात्मक गतिविधि को नियंत्रित करता है। जे Biol Chem 2014; 289: 7470-7482.

16) डोंग बी, युआन एक्स, झाओ क्यू, फेंग क्यू, लियू बी, गुओ वाई, झाओ बी अल्ट्रासाउंड-असिस्टेड जलीय दो-चरण निष्कर्षण Cistanche deserticola Y. C. Ma उपजी से phenylethanoid glycosides के। जे सितम्बर विज्ञान 2015 जनवरी 21. [प्रिंट के आगे Epub].

17) हू जीएस, जिया जेएम, किम डीएच। Cistanche deserticola सेल निलंबन संस्कृति के लिए phenylethanoid glycosides के संचय पर tyrosine और फेनिलएलनिन खिलाने के प्रभाव। चिन जे नट मेड 2014; 12: 367-372.

18) डोंग एस, गाओ आर, यांग वाई, गुओ एम, एनआई जे, झाओ एल चल रहे बफर संशोधक के साथ केशिका क्षेत्र वैद्युतकणसंचलन द्वारा फेनिलेथेनोइड ग्लाइकोसाइड्स और एग्लाइकोन का एक साथ निर्धारण। गुदा बायोकेम 2014; 449: 158-163.

19) XIONG WT, GU L, WANG C, SUN HX, LIU X. टाइप 2 मधुमेह डीबी / डीबी चूहों में सिंशे ट्यूबुलोसा के एंटी-हाइपरग्लाइसेमिक और हाइपोलिपिडेमिक प्रभाव। जे Ethnopharmacol 2013; 150: 935-945.

20) लियू बी, ओयूयांग जे, युआन एक्स, वांग एल, झाओ बी सोखना गुण और मैक्रोस्पोरस रेजिन के उपयोग से Cistanche deserticola से phenylethanoid glycosides के पूर्ववर्ती अलगाव। जे क्रो- मोटर बी Analyt प्रौद्योगिकियों Biomed जीवन विज्ञान 2013; 937: 84-90.

21) CALDERÓN-RIVERA A, SANDOVAL A, गोंजालेज-RAMÍREZ R, गोंजालेज-बिलॉल्ट सी, फेलिक्स R. साइक्लिन-निर्भर किनेज 5 (cdk5) द्वारा neu-ronal cav3.1 चैनलों का विनियमन। PLoS एक 2015; 10: e0119134.

22) कास्त्रो-अल्वारेज़ जेएफ, यूरिबे-एरियास ए, कार्डोना-गोमेज़ जीपी। साइक्लिन-निर्भर किनेज 5 लक्ष्यीकरण बी-एमाइलॉइड एकत्रीकरण को रोकता है जिसमें ग्लाइकोजन सिंथेज़ किनेज 3 बी और फॉस्फेट शामिल हैं। जे Neurosci Res 2015 फ़रवरी 24. [प्रिंट के आगे Epub].

23) ROUGET R, SHARMA G, LEBLANC AC. Cyclin-dependent Kinase 5 पारिवारिक प्रियन प्रोटीन म्यूटेंट का फॉस्फोराइलेशन एमिलॉइड संरचना में रूपांतरण को बढ़ाता है। जे Biol Chem 2015; 290: 5759- 5771.