हाई-टाइटर मेथिलीन ब्लू-ट्रीटेड कॉन्वेलसेंट प्लाज़्मा COVID के साथ आउट पेशेंट के लिए एक प्रारंभिक उपचार के रूप में -19: एक यादृच्छिक, प्लेसबो-नियंत्रित परीक्षण

अधिक जानकारी के लिए:ali.ma@wecistanche.com

सारांश

पार्श्वभूमि

प्रारंभिक उपचार के रूप में प्रारंभिक उपचार के रूप में प्रस्तावित किया गया है ताकि प्रारंभिक प्रगति को बाधित किया जा सकेकोविड-19गंभीर बीमारी के लिए, लेकिन कोई निश्चित प्रमाण नहीं है। हमने यह आकलन करने का लक्ष्य रखा है कि क्या दीक्षांत प्लाज्मा के साथ प्रारंभिक उपचार अस्पताल में भर्ती होने के जोखिम को कम करता है और कम करता हैसार्स-सीओवी-2आउट पेशेंट के बीच वायरल लोडकोविड-19.

तरीकों

हमने कैटेलोनिया, स्पेन में चार स्वास्थ्य केंद्रों में एक बहुकेंद्र, डबल-ब्लाइंड, यादृच्छिक, प्लेसीबो-नियंत्रित परीक्षण किया। रैंडमाइजेशन से 7 दिन या उससे कम समय पहले हल्के COVID-19 लक्षणों की शुरुआत के साथ 50 वर्ष या उससे अधिक आयु के वयस्क आउट पेशेंट नामांकन के लिए पात्र थे। प्रतिभागियों को बेतरतीब ढंग से सौंपा गया था (1:1) एबीओ-संगत उच्च के 250-300 एमएल के एक अंतःशिरा जलसेक प्राप्त करने के लिएसार्स-सीओवी विरोधी-2IgG अनुमापांक (EUROIMMUN अनुपात 6 से अधिक या उसके बराबर) मेथिलीन ब्लू-ट्रीटेड दीक्षांत प्लाज्मा (प्रयोगात्मक समूह) या 250 बाँझ 0·9 प्रतिशत खारा समाधान (नियंत्रण)। यादृच्छिकीकरण एक केंद्रीय वेब-आधारित प्रणाली के उपयोग के साथ किया गया था जिसमें परीक्षण समूह असाइनमेंट को छुपाया गया था और कोई स्तरीकरण नहीं था। मास्किंग को संरक्षित करने के लिए, हमने अपारदर्शी ट्यूबलर बैग का उपयोग किया जो जांच उत्पाद और जलसेक कैथेटर को कवर करते थे। कोप्राइमरी एंडपॉइंट बेसलाइन से 28 दिनों के भीतर अस्पताल में भर्ती होने की घटनाएं थीं और बेसलाइन से दिन 7 तक नासॉफिरिन्जियल स्वैब में वायरल लोड (प्रति एमएल 10 प्रतियों में) में औसत परिवर्तन। डेटा सुरक्षा निगरानी बोर्ड की सिफारिश के बाद परीक्षण को जल्दी रोक दिया गया था क्योंकि अधिक लक्षित जनसंख्या के 85 प्रतिशत से अधिक को प्राप्त हुआ थाकोविड-19 वैक्सीन. प्राथमिक प्रभावकारिता विश्लेषण इरादा-से-इलाज करने वाली आबादी में किया गया था, जांच उत्पाद प्राप्त करने वाले सभी रोगियों में सुरक्षा का मूल्यांकन किया गया था। यह अध्ययन क्लीनिकलट्रायल.जीओवी, एनसीटी04621123 के साथ पंजीकृत है।

जाँच - परिणाम

1 नवंबर{{30}}, 2020 और 28 जुलाई, 2021 के बीच, हमने परीक्षण में शामिल किए जाने के लिए पुष्टि किए गए COVID-19 के 909 रोगियों का आकलन किया। , जिनमें से 376 पात्र थे और बेतरतीब ढंग से उपचार के लिए सौंपे गए थे (दीक्षांत प्लाज्मा n =188 [सीरम एंटीबॉडी-नकारात्मक n =160]; प्लेसबो n =188 [सीरम एंटीबॉडी-नकारात्मक n {{12 }}])। औसत आयु 56 वर्ष (IQR 52-62) थी और यादृच्छिक असाइनमेंट से पहले औसत लक्षण अवधि 4·4 दिन (एसडी 1·4) थी। इलाज के इरादे से आबादी में, बेसलाइन से 28 दिनों के भीतर अस्पताल में भर्ती 22 (12 प्रतिशत) प्रतिभागियों में हुआ, जिन्होंने 21 (11 प्रतिशत) की तुलना में दीक्षांत प्लाज्मा प्राप्त किया, जिन्होंने प्लेसबो प्राप्त किया (सापेक्ष जोखिम 1 · 05 [95 प्रतिशत सीआई 0 · 78 से] 1·41])। बेसलाइन से दिन 7 तक वायरल लोड में औसत परिवर्तन -2 · 41 लॉग 10 प्रतियां प्रति एमएल (एसडी 1 · 32) में दीक्षांत प्लाज्मा के साथ और -2 · 32 लॉग 10 प्रतियां प्रति एमएल (1 · 43) प्लेसीबो के साथ (कच्चा अंतर -0 था) · 10 लॉग 10 प्रतियां प्रति एमएल [95 प्रतिशत सीआई -0 · 35 से 0 · 15])। हल्के COVID-19 वाले एक प्रतिभागी ने दीक्षांत प्लाज्मा जलसेक के 7 दिन बाद एक थ्रोम्बोम्बोलिक घटना विकसित की, जिसे संभवतः COVID-19 या प्रायोगिक हस्तक्षेप से संबंधित एक गंभीर प्रतिकूल घटना के रूप में रिपोर्ट किया गया था।

व्याख्या

मेथिलीन ब्लू-ट्रीटेड दीक्षांत प्लाज्मा ने हल्के से गंभीर बीमारी की प्रगति को नहीं रोका और COVID-19 के साथ आउट पेशेंट में वायरल लोड को कम नहीं किया। इसलिए, COVID-19 के आउट पेशेंट में दीक्षांत समारोह प्लाज्मा के उपयोग का समर्थन करने के लिए औपचारिक सिफारिशों का निष्कर्ष नहीं निकाला जा सकता है।

एंड्रिया एलेमनी*, पेरे मिलट-मार्टिनेज*, मार्क कॉर्बाचो-मोने, पियरे मालचेयर, डैन ओची, अन्ना रुइज़-कोमेलस, अन्ना रामिरेज़-मॉरोस, जोआना रोड्रिग्ज कोडिना, रोजा अमाडो साइमन, सेबस्टियन विडेला, गेलिया कॉस्टेस, मार कैपडेविला-जारेगुई, पामेला टोरानो-सोलर, अल्बा सैन जोस, ग्लोरिया बोनेट पैपेल, जोर्डी पुइग, ऑरेमा ओटेरो, जोस कार्लोस रुइबल सुआरेज़, अल्वारो ज़ारौज़ा पेलेजेरो, फेरान लोपिस रोका, ऑरलैंडो रोड्रिग्ज कोर्टेज़, वेनेसा गार्सिया गार्सिया, जोसेप विडाल-अलारास, एनरिकेस , जोआन-रेमन ग्रिफोल्स, एगुएडा एंकोचिया, इवान गलवान-फेमेनिया, फ्रांसिनी पिकोलो फरेरा, मिरिया बोनेट, जोर्डी कैंटोनी, नुरिया प्रैट, जोर्डी आरा, अन्ना फोरकाडा आर्करोन्स, मैगी फर्रे, एडवर्ड्स प्रेडेनस, जूलियस ब्लैंको, मिकेल एंगेल रोड्रिग CONV-ERT ग्रुप के लिए फर्नांडीज रिवास, माइकल मार्क्स, क्विक बैसैट, इग्नासियो ब्लैंको, बरबारा बारो*, बोनावेंटुरा क्लॉटेट*, ओरिओल मित्जू

परिचय

प्रतिरक्षा चिकित्सारोगी को सीधे एंटीबॉडी का प्रबंध करने वाले को निष्क्रिय के रूप में वर्गीकृत किया जाता हैप्रतिरक्षा चिकित्सा, सक्रिय के विपरीतप्रतिरक्षा चिकित्साजिसका उद्देश्य मेजबान के को प्रोत्साहित करना हैप्रतिरक्षाजवाब. निष्क्रियप्रतिरक्षा चिकित्सादीक्षांत प्लाज्मा (संक्रमण से उबर चुके दाताओं से प्राप्त) और विशिष्ट एपिटोप्स को लक्षित करने वाले मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के उपयोग सहित, गंभीर बीमारी को रोकने के लिए उम्मीदवार के रूप में उभरे हैं जब COVID-19 शुरुआत के बाद जल्दी प्रशासित किया गया।1,2 आज तक, विभिन्न SARS-CoV -2 मोनोक्लोनल एंटीबॉडी ने अस्पताल में भर्ती होने और शुरुआती, हल्के रोग वाले रोगियों में मृत्यु की संयुक्त दरों को कम करने और अस्पताल में भर्ती होने वाले सेरोनिगेटिव रोगियों में मृत्यु दर को कम करने में एक छोटा सा लाभ दिखाया है। 2–6 अमेरिकी खाद्य एवं औषधि प्रशासन ने हल्के से मध्यम COVID-19 के रोगियों में मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के लिए आपातकालीन उपयोग प्राधिकरण5 जारी किया है, जो गंभीर COVID-19 के बढ़ने के उच्च जोखिम में हैं। हालांकि, मोनोक्लोनल एंटीबॉडी उत्पादन की उच्च लागत और जटिलता इस रणनीति के व्यापक वैश्विक उपयोग के लिए एक चुनौती है, और इस बात को लेकर चिंता पैदा हो गई है कि ये एंटीबॉडी उभरते SARS-CoV -2 वेरिएंट पर कैसे प्रतिक्रिया देंगे। उदाहरण के लिए, चिंता का नया ओमाइक्रोन संस्करण (बी.1.1.529) लगभग सभी लाइसेंस प्राप्त मोनोक्लोनल के खिलाफ प्रतिरोधी है।8,9

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दीक्षांत प्लाज्मा, निष्क्रिय करने के लिए पारंपरिक दृष्टिकोणप्रतिरक्षा चिकित्सा, ने अन्य वायरल श्वसन संक्रमणों में आशाजनक परिणाम प्राप्त किए हैं। 1 0 मोनोक्लोनल एंटीबॉडी की तुलना में, दीक्षांत प्लाज्मा में खुराक, आत्मीयता और एंटीबॉडी की विशिष्टता में मानकीकरण की कमी है, जिससे विभिन्न प्लाज्मा में अलग-अलग तटस्थ गतिविधि हो सकती है। इकाइयां विशिष्ट एंटीबॉडी की समग्र खुराक आमतौर पर दीक्षांत प्लाज्मा में कम होती है, हालांकि दीक्षांत प्लाज्मा में मोनोक्लोनल एंटीबॉडी थेरेपी की तुलना में व्यापक एंटीवायरल गतिविधि का संभावित लाभ होता है। हालांकि, COVID-19 के साथ अस्पताल में भर्ती रोगियों (गंभीर बीमारी) से जुड़े यादृच्छिक नियंत्रित परीक्षणों में दीक्षांत प्लाज्मा उपचार के साथ कोई उत्तरजीविता लाभ नहीं मिला है। 11-22 दीक्षांत प्लाज्मा के एक हालिया यादृच्छिक नियंत्रित परीक्षण (SIREN-C3P0) के परिणाम लक्षण शुरू होने के बाद 4 दिनों (IQR 2-5) के मध्य में दिए जाने पर 511 उच्च-जोखिम वाले रोगियों में COVID के साथ -19 ने बीमारी को हल्के से गंभीर बीमारी में बढ़ने से रोकने में कोई लाभ नहीं दिखाया।23

However, in this trial, patients were recruited at emergency rooms and were, therefore, likely to present with moderate-to-severe symptoms. Moreover, 25 (16%) of 158 patients who met the primary outcome of disease progression within 15 days after randomization were ultimately admitted to the hospital during the index visit (at baseline). Additionally, serological tests were not done at enrolment, and the benefit of convalescent plasma is most likely in seronegative individuals. In addition, plasma units were sourced more than 150 miles (>240 किमी) प्लाज्मा प्राप्तकर्ताओं से, जो प्रभावोत्पादकता को प्रभावित कर सकते हैं यदि वे SARS-CoV के विभिन्न उपभेदों से संक्रमित दाताओं से प्राप्त होते हैं-2.24 16{{11 में अर्जेंटीना में किया गया एक छोटा यादृच्छिक परीक्षण }} 75 वर्ष और उससे अधिक आयु के बाह्य रोगी और लक्षण शुरू होने (हल्के रोग) के 72 घंटे के भीतर इलाज किया गया, पाया गया कि उच्च अनुमापांक वाले दीक्षांत प्लाज्मा गंभीर बीमारी (सापेक्ष जोखिम [आरआर] {{13} के बढ़ने की कम संभावना के साथ जुड़ा था। }·52 [95 प्रतिशत सीआई 0·29–0·94]).25

आउट पेशेंट में दीक्षांत प्लाज्मा प्रभावकारिता पर अधिक निर्णायक जानकारी की आवश्यकता है। इस यादृच्छिक नियंत्रित परीक्षण में, हमने जांच की कि क्या लक्षण शुरू होने के बाद 7 दिनों के भीतर प्रशासित, निकट-स्रोत, उच्च-टिटर दीक्षांत प्लाज्मा, अस्पताल में प्रवेश को रोकेगा या SARS-CoV -2 हल्के-से-हल्के रोगियों में वायरल लोड को कम करेगा। मध्यम COVID-19।

तरीकों

पढ़ाई की सरंचना

CONV-ERT अध्ययन एक बहुकेंद्रीय, डबल-ब्लाइंड, रैंडमाइज्ड, प्लेसीबो-नियंत्रित परीक्षण था, जो SARS-CoV से संक्रमित रोगियों में गंभीर COVID-19 को रोकने में दीक्षांत प्लाज्मा की प्रभावकारिता का आकलन करने के लिए था-2 हल्के और मध्यम बीमारी। यह परीक्षण कैटेलोनिया, स्पेन (परिशिष्ट पृष्ठ 3) में 3·9 मिलियन लोगों की जलग्रहण आबादी को सार्वभौमिक स्वास्थ्य देखभाल प्रदान करने वाले चार स्वास्थ्य केंद्रों पर किया गया था।

यह अध्ययन वर्ल्ड मेडिकल एसोसिएशन के हेलसिंकी डिक्लेरेशन के अनुसार किया गया था। अध्ययन प्रोटोकॉल को अस्पताल जर्मन ट्रायस आई पुजोल (नंबर पीआई 20-313) में नैतिकता समिति और भाग लेने वाले केंद्रों के संस्थागत समीक्षा बोर्डों द्वारा अनुमोदित किया गया था। अध्ययन की निगरानी एक स्वतंत्र डेटा और सुरक्षा निगरानी बोर्ड द्वारा की गई थी।

प्रतिभागियों

भागीदारी के लिए पात्र होने के लिए, रोगियों की आयु 50 वर्ष या उससे अधिक होनी चाहिए और हल्के से मध्यम COVID-19 के साथ गैर-अस्पताल में भर्ती (अस्पताल में भर्ती नहीं) होना चाहिए। सभी रोगियों को एक पुष्टिकृत SARS-CoV -2 संक्रमण होना था, एक सकारात्मक पीसीआर या मान्य एंटीजन रैपिड टेस्ट परिणाम के साथ यादृच्छिकरण से 5 दिन पहले प्राप्त नहीं हुआ, और लक्षण यादृच्छिकरण से पहले 7 दिनों से अधिक नहीं शुरू हुआ। हल्के और मध्यम COVID-19 को अंतर्राष्ट्रीय दिशानिर्देशों के अनुसार परिभाषित किया गया था: बुखार, खांसी, गले में खराश, अस्वस्थता, सिरदर्द और मांसपेशियों में दर्द वाले 26 रोगियों को हल्का COVID-19 माना जाता था, जबकि कम श्वसन के प्रमाण नैदानिक ​​मूल्यांकन या इमेजिंग द्वारा रोग और कमरे की हवा में 94 प्रतिशत या अधिक ऑक्सीजन की संतृप्ति को मध्यम COVID-19 माना गया। मरीजों को बाहर रखा गया था यदि उनके पास गंभीर COVID-19 था या किसी भी कारण से अस्पताल में भर्ती होने की आवश्यकता थी, पिछले SARS-CoV-2 संक्रमण का इतिहास, एक COVID-19 वैक्सीन की एक या दो खुराक प्राप्त की, जांच उत्पाद के लिए contraindications, थ्रोम्बोटिक जोखिम में वृद्धि, नैदानिक ​​​​रूप से महत्वपूर्ण असामान्य यकृत समारोह का इतिहास (जैसे, चाइल्ड-पुग सी), या क्रोनिक किडनी रोग चरण 4 या इससे भी बदतर।

हमने अध्ययन अवधि के दौरान गर्भवती, स्तनपान कराने वाली, या गर्भावस्था की योजना बनाने वाले रोगियों को बाहर रखा। पात्रता मानदंड पर अधिक विवरण परीक्षण प्रोटोकॉल (परिशिष्ट पृष्ठ 21) में सूचीबद्ध हैं। हमने दो स्रोतों से अध्ययन प्रतिभागियों की पहचान की: (1) अध्ययन स्थलों पर प्रयोगशाला-पुष्टि किए गए नए संक्रमणों की सक्रिय जांच और (2) ऐसे व्यक्ति जो प्रायोजक और कैटलन इंस्टीट्यूट ऑफ हेल्थ द्वारा शुरू की गई एक संस्थागत वेबसाइट पर स्वेच्छा से पंजीकृत हैं। जांचकर्ताओं ने प्रतिभागियों को अध्ययन के बारे में सूचित करने, भागीदारी को आमंत्रित करने और उनकी पात्रता की जांच करने के लिए टेलीफोन या व्यक्तिगत रूप से संपर्क किया। हमने बेसलाइन विज़िट के लिए पात्र प्रतिभागियों को शेड्यूल किया, जो या तो अस्पताल में या घर पर हॉस्पिटल डोमिसिलरी होमकेयर यूनिट द्वारा किया गया था, जिसके दौरान लिखित सूचित सहमति प्राप्त की गई थी, और पात्रता की पुष्टि की गई थी।

रैंडमाइजेशन और मास्किंग

हमने आबंटन छुपाने के साथ एक केंद्रीय वेब-आधारित रैंडमाइजेशन सिस्टम का उपयोग किया और प्रतिभागियों को बेतरतीब ढंग से असाइन करने के लिए कोई स्तरीकरण नहीं किया (1:1) दीक्षांत प्लाज्मा या प्लेसीबो प्राप्त करने के लिए। अध्ययन शोधकर्ताओं ने प्रतिभागियों की योग्यता की पुष्टि की और केंद्रीय रक्त बैंक (बैंक डी सांग आई टेक्सिट्स डी कैटालुन्या, बार्सिलोना, स्पेन) पर आधारित एक स्वतंत्र तकनीशियन से संपर्क किया, जिसमें प्रतिभागियों के बारे में कोई जानकारी नहीं थी, जिन्होंने प्रतिभागियों को असाइन करने के लिए वेब-आधारित प्रणाली का उपयोग किया था। परीक्षण समूहों। ब्लड बैंक के कर्मचारियों ने जांच उत्पादों को अपारदर्शी ट्यूबलर बैगों से ढक दिया, जो प्लाज्मा या खारा समाधान और जलसेक कैथेटर की पूरी इकाई को कवर करते थे। अंत में, एक नकाबपोश अध्ययन नर्स, जो रोगी अनुवर्ती कार्रवाई में शामिल नहीं थी, ने जांच उत्पाद को प्रशासित किया। सभी प्रतिभागियों और अन्य जांचकर्ताओं (रोगी अनुवर्ती, प्रयोगशाला कर्मचारियों और सांख्यिकीविदों में शामिल सभी कर्मियों सहित) को उपचार आवंटन के लिए नकाबपोश किया गया था। रैंडम असाइनमेंट और इन्फ्यूजन हमेशा एक ही दिन किया जाता था।

अनमास्किंग की अनुमति केवल तभी दी गई थी जब जलसेक के दौरान या तुरंत बाद कोई नैदानिक ​​​​आपातकाल हुआ हो या फॉलो-अप के दौरान एक अप्रत्याशित गंभीर प्रतिकूल घटना हुई हो। केवल प्रमुख अन्वेषक को इलेक्ट्रॉनिक केस रिपोर्ट फॉर्म में एक विशिष्ट कमांड का उपयोग करके व्यक्तिगत अध्ययन प्रतिभागियों को अनमास्क करने की अनुमति थी।

प्रक्रियाओं

प्रतिभागियों को 250-300 एमएल एबीओ-संगत हाई-टिटर मेथिलीन ब्लू-ट्रीटेड दीक्षांत प्लाज्मा (प्रयोगात्मक समूह) या 250 एमएल बाँझ 0·9 प्रतिशत खारा समाधान का एक अंतःशिरा जलसेक प्राप्त हुआ। (नियंत्रण समूह)। 45 किलोग्राम से कम वजन वाले प्रतिभागियों के लिए, हस्तक्षेप की खुराक (एबीओ-संगत हाई-टाइटर मेथिलीन ब्लू-ट्रीटेड दीक्षांत प्लाज्मा या 0 · 9 प्रतिशत खारा समाधान) शरीर के वजन को 5 एमएल / किग्रा में समायोजित किया गया था। सभी रोगियों को मानक चिकित्सा उपचार भी मिला। अध्ययन दीक्षांत प्लाज्मा इकाइयां दो सबसे बड़े अध्ययन स्थलों से 12 किमी या उससे कम स्थित केंद्रीय रक्त बैंक से प्राप्त की गईं, और सभी अध्ययन स्थलों से 90 किमी या उससे कम (परिशिष्ट पीपी 3, 12)। अंतरराष्ट्रीय दिशानिर्देशों के अनुसार, प्लाज्मा को उच्च सार्स-सीओवी -2 एलिसा के साथ आईजीजी टाइटर्स (EUROIMMUN अनुपात 6 से अधिक या उसके बराबर) के लिए स्क्रीनिंग के बाद चुना गया था।27

आधान के बाद, हमने आगे एक स्यूडोवायरस-आधारित न्यूट्रलाइजिंग एंटीबॉडी परख के साथ प्लाज्मा पोस्ट हॉक की विशेषता बताई, जिसमें वायरस वंश वुहान-हू से एक स्पाइक का उपयोग किया गया था-1.28 प्लास्मिड SARS-CoV-2.SctΔ19 उत्पन्न हुआ था (जीनआर्ट) मूल वुहान-हू-1 वंश बी सार्स-सीओवी-2 स्पाइक (जेनबैंक एमएन908947.3) के पूर्ण प्रोटीन अनुक्रम से सी-टर्मिनल में पिछले 19 अमीनो एसिड को हटाने के साथ। अनुक्रम मानव कोडन-अनुकूलित था और पीसीडीएनए 3.1 (प्लस) में डाला गया था। अल्फा वैरिएंट (बी.1.1.7) के खिलाफ न्यूट्रलाइज़िंग गतिविधि का आकलन करने के लिए, पोस्ट हॉक हमने अल्फा-वेरिएंट स्यूडोटाइप्ड वायरस का उपयोग करके न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी परीक्षण को दोहराया। इसके अलावा, एंटीबॉडी को बेअसर करने पर मेथिलीन ब्लू उपचार के प्रभाव का आकलन करने के लिए, हमने तुलना की। प्रतिभागियों के एक उपसमुच्चय में दाता (यानी, मेथिलीन ब्लू ट्रीटमेंट से पहले) और प्लाज्मा यूनिट (यानी, मेथिलीन ब्लू ट्रीटमेंट के बाद) से संग्रहीत बायोस्पेसिमन्स की निष्प्रभावी गतिविधि। ID50 ज्यामितीय माध्य टाइटर्स को IU/mL में बदलने के लिए कैलिब्रेटिंग कारक स्थापित करने के लिए, हमने नेशनल इंस्टीट्यूट फॉर बायोलॉजिकल स्टैंडर्ड एंड कंट्रोल (यूके, संख्या 20/136) द्वारा विकसित और वितरित प्लाज्मा नमूनों के एक पैनल का उपयोग किया। डेटा विश्लेषण के प्रयोजन के लिए, 1:250 से अधिक (60 आईयू/एमएल से अधिक के बराबर) के 50 प्रतिशत निरोधात्मक कमजोर पड़ने (आईडी50) की दहलीज के साथ उच्च अनुमापांक दीक्षांत प्लाज्मा को परिभाषित करने के लिए निष्प्रभावी परिणामों का उपयोग किया गया; विवरण में प्रदान किया गया है परिशिष्ट पी 5)।

मरीजों को एक इलेक्ट्रॉनिक रूप के माध्यम से यादृच्छिक असाइनमेंट के बाद 14 दिनों के लिए हर दिन एक लक्षण सूची को पूरा करने के लिए कहा गया था। प्रतिभागियों के आवास पर, या अस्पताल में यदि प्रतिभागी को अस्पताल में भर्ती कराया गया था, तो इन-पर्सन फॉलो-अप विज़िट 7 और 28 दिनों में निर्धारित की गई थीं। इसके अतिरिक्त, हमने अध्ययन प्रतिभागियों से उनकी नैदानिक ​​स्थिति का आकलन करने के लिए 3, 14, और 60 दिनों में टेलीफोन द्वारा संपर्क किया। डब्ल्यूएचओ क्लिनिकल प्रोग्रेसिव स्केल स्कोर (रेंज 0–10) प्रत्येक अध्ययन यात्रा (परिशिष्ट पी 7) पर निर्धारित किया गया था। अनुवर्ती यात्राओं के दौरान, हमने एंटी-एसएआरएस-सीओवी -2 सीरम एंटीबॉडी और भड़काऊ बायोमार्कर, और नासॉफिरिन्जियल स्वैब (बेसलाइन और दिन 7 और 28 पर) का आकलन करने के लिए रक्त के नमूने (बेसलाइन और दिन 7 पर) प्राप्त किए। सार्स-सीओवी-2 वायरल लोड। हमने डेटा रिकॉर्ड करने के लिए एक संरचित इलेक्ट्रॉनिक केस रिपोर्ट फॉर्म का इस्तेमाल किया।

सभी नामांकित प्रतिभागियों की सीरम एंटीबॉडी स्थिति को पूरी तरह से स्वचालित प्लेटफॉर्म (LIAISON XL, DiaSorin, Vercelli, इटली) में केमिलुमिनेसिसेंस इम्यूनोसे द्वारा बेसलाइन नमूनों से संभावित रूप से चित्रित किया गया था। मरीजों को सीरम एंटीबॉडी-नकारात्मक नामित किया गया था यदि वे निम्नलिखित दोनों एंटीबॉडी के लिए नकारात्मक थे: IgG एंटी-SARS-CoV -2 ट्राइमेरिक स्पाइक ग्लाइकोप्रोटीन (DiaSorin, Vercelli, इटली) और IgM एंटी-SARS-CoV {{6} } एस1-आरबीडी (डायसोरिन, वर्सेली, इटली; परिशिष्ट पी 6)। वायरल लोड वास्तविक समय मात्रात्मक आरटी-पीसीआर द्वारा एक ही चरण में ऑलप्लेक्स 2019- nCoV परख (वेरफेन, हॉस्पिटैलेट डी लोब्रेगेट, स्पेन) के साथ CFX96 इंस्ट्रूमेंट (BIO-RAD, Hercules, CA, USA) पर निर्धारित किया गया था। . निरपेक्ष मात्रा का ठहराव के लिए, ज्ञात एकाग्रता के SARS-CoV2 प्लास्मिड RNA के 2-फोल्ड सीरियल dilutions का उपयोग करके एक मानक वक्र बनाया गया था (Amplirun Coronavirus RNA Control, कैटलॉग संदर्भ MBC090, वीरसेल माइक्रोबायोलॉजिस्ट, ग्रेनेडा, स्पेन)। विश्लेषण में उपयोग किए गए सभी थर्मल चक्रों को कवर करने वाले पूर्व-योग्य नमूनों के सेट के समानांतर अध्ययन के नमूने चलाए गए थे। वायरल लोड को आरडीआरपी जीन परिणामों (परिशिष्ट पी 6) में संबंधित चक्र थ्रेशोल्ड मानों का उपयोग करके मानक वक्र से एक्सट्रपलेशन किया गया था। हमने बेसलाइन पर और 7 दिन डी-डिमर, फेरिटिन, इंटरल्यूकिन (आईएल) -6, लिम्फोसाइट्स, सी-रिएक्टिव प्रोटीन और प्रीलब्यूमिन सहित गंभीर COVID-19 के लिए सबसे अधिक सबूत के साथ बायोमार्कर का परीक्षण किया। .29

परिणामों

हमने उपचार प्रभावकारिता के संबंध में दो सहप्राथमिक परिणामों को परिभाषित किया। सबसे पहले, नैदानिक ​​​​परिणाम बेसलाइन से 28 दिनों के भीतर अस्पताल में भर्ती होने की घटना थी। दूसरा, वायरोलॉजिकल परिणाम बेसलाइन से दिन 7 तक नासोफेरींजल स्वैब में वायरल लोड (लॉग 10 प्रतियों प्रति एमएल में) में औसत परिवर्तन था।

निर्धारित माध्यमिक परिणाम लक्षणों के समाधान को पूरा करने का समय थे, जलसेक के बाद 60 दिनों के भीतर 10-बिंदु डब्ल्यूएचओ नैदानिक ​​​​प्रगति स्केल स्कोर30 में परिवर्तन, अनुवर्ती के दिन 7 पर भड़काऊ बायोमार्कर में बेसलाइन से परिवर्तन, वायरल लोड में औसत परिवर्तन 28 दिन में नासॉफिरिन्जियल स्वैब में, मृत्यु दर, सार्स-सीओवी के खिलाफ एंटीबॉडी को निष्क्रिय करने के टाइटर्स -2 दिन 7 में प्रतिभागियों के एक उपसमूह के प्लाज्मा में, और प्रतिकूल घटनाओं की दर। सभी माध्यमिक परिणामों का विवरण अध्ययन प्रोटोकॉल (परिशिष्ट पी 21) में शामिल है, जिसमें तीन पूर्वनिर्धारित परिणाम शामिल हैं जिन्हें अन्यत्र रिपोर्ट किया जाएगा क्योंकि वे सहायक विकल्प से संबंधित थे।

अनुवर्ती अवधि के दौरान हुई या खराब होने वाली प्रतिकूल घटनाओं वाले रोगियों के अनुपात के रूप में सुरक्षा का मूल्यांकन किया गया था। गंभीरता और कार्य-कारण के लिए प्रतिकूल घटनाओं का मूल्यांकन किया गया था। सुरक्षा आबादी में वे सभी रोगी शामिल थे जिन्हें जांच उत्पाद प्राप्त हुआ था।

सांख्यिकीय विश्लेषण

हमने अनुमान लगाया कि 474 प्रतिभागियों (प्रति समूह 237) का एक नमूना आकार अस्पताल में भर्ती होने की अपेक्षित दर को मानते हुए 28,31 दिन तक अस्पताल में भर्ती होने की घटनाओं में 50 प्रतिशत की कमी का पता लगाने के लिए 80 प्रतिशत शक्ति प्रदान करेगा। 15 प्रतिशत , =0·05 के महत्व स्तर पर, और अनुवर्ती करने के लिए 5 प्रतिशत हानि की अनुमति देता है। प्रति समूह लगभग 150 प्रतिभागियों के पास सार्स-सीओवी -2 के दो-तरफा महत्व स्तर पर वायरल लोड की औसत कमी में 0·5 लॉग10 प्रति एमएल के अंतर का पता लगाने के लिए 80 प्रतिशत शक्ति की आवश्यकता थी {{19 }}·05, 1·5 की अपेक्षित समग्र एसडी मानकर। हमारे विश्लेषण के लिए जैविक रूप से प्रासंगिक परिवर्तन के लिए न्यूनतम सीमा का प्रतिनिधित्व करने के लिए कमी में प्रति एमएल अंतर 0·5 लॉग 10 प्रतियों को चुना गया था। 28 मई, 2021 को, नमूना आकार तक नहीं पहुंचने के बावजूद, डेटा और सुरक्षा निगरानी बोर्ड ने परीक्षण के लिए भर्ती रोकने की सिफारिश की क्योंकि लक्षित आबादी के 85 प्रतिशत से अधिक को SARS-CoV-2 टीकाकरण प्राप्त हुआ था।

प्राथमिक प्रभावकारिता विश्लेषण इरादे से इलाज करने वाली आबादी में किया गया था। अस्पताल में भर्ती होने की दर की तुलना आरआर का उपयोग करने वाले समूहों के बीच की गई थी, जो एक सामान्यीकृत अनुमान समीकरण लॉग-द्विपद मॉडल को फिट करके प्राप्त किया गया था जो क्लस्टरिंग (भर्ती का केंद्र) के लिए जिम्मेदार था। यह निर्धारित करने के लिए कि क्या अनुमानक शून्य से काफी अलग था, हमने फिटर उपचार प्रभाव गुणांक से मजबूत एसई पर वाल्ड परीक्षण का उपयोग किया। वायरल लोड की औसत कमी को बेसलाइन से 7 और 28 दिनों तक तुलना करके वायरोलॉजिकल प्रभावकारिता निर्धारित की गई थी। वायरल लोड की औसत कमी (लॉग 10 स्केल में) की तुलना भर्ती के केंद्र का उपयोग करके रैखिक मिश्रित-प्रभाव वाले मॉडल और व्यक्ति के रूप में की गई थी। इंटर-इंडिविजुअल और इंट्रा-क्लस्टर सहसंबंध के लिए समायोजित करने के लिए इंटरसेप्ट में नेस्टेड रैंडम इफेक्ट्स (क्लस्टर या इंडिविजुअल)।

According to available evidence on factors influencing the successful treatment of COVID-19, prespecified analyses of the primary outcomes were done in subgroups (as an interaction term with the treatment) defined by participant's baseline antibody serum status (IgG or IgM anti-SARS-CoV-2 positive and negative), duration of illness (≤3 days and >3 days), and according to the neutralization activity of the plasma received (ID50 >1:250 और ID50 1:250 से कम या उसके बराबर)। प्रति-प्रोटोकॉल आबादी में प्राथमिक परिणामों का पूर्वनिर्धारित संवेदनशीलता विश्लेषण किया गया था।

लक्षणों के पूर्ण समाधान के दिनों का विश्लेषण आनुपातिक जोखिमों की मान्यताओं के आधार पर कॉक्स आनुपातिक खतरों प्रतिगमन मॉडल को फिट करके प्राप्त किए गए कपलान-मीयर उत्तरजीविता कार्यों और जोखिम अनुपात (एचआर) का उपयोग करके किया गया था। लॉग-रैंक परीक्षण का उपयोग करके कपलान-मायर वक्रों की तुलना की गई। 10-बिंदु WHO क्लिनिकल प्रोग्रेसिव स्केल स्कोर की औसत कमी की तुलना रैखिक मिश्रित-प्रभाव वाले मॉडल को फिट करके की गई थी। गैर-पैरामीट्रिक विलकॉक्सन-मान-व्हिटनी परीक्षण के माध्यम से उपचार समूहों के बीच 7 दिन में प्रयोगशाला मापदंडों के औसत मूल्यों की तुलना की गई। डीक्स और हिगिंस के अनुसार प्राप्त आरआर का उपयोग करने वाले समूहों के बीच मृत्यु दर और प्रतिकूल घटनाओं की दर की तुलना की गई। 32 दिन में प्रतिभागियों के एक उपसमूह के प्लाज्मा में SARS-CoV -2 के खिलाफ एंटीबॉडी टाइटर्स को बेअसर करने के माध्यिका की तुलना की गई। विलकॉक्सन मिलान-जोड़े द्वारा हस्ताक्षरित-रैंक परीक्षण।

सभी विश्लेषण आर सांख्यिकीय पैकेज (संस्करण 4.1 या उच्चतर) के साथ 0·05 के महत्व स्तर के साथ किए गए थे। हमने बहुलता के लिए टाइप I त्रुटि को समायोजित नहीं किया क्योंकि हमने माना कि दोनों सह-प्राथमिक समापन बिंदुओं को व्यक्तिगत रूप से सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण उपचार लाभ दिखाना चाहिए।

परिणाम

10 नवंबर, 2020 और 28 जुलाई, 2021 के बीच, हमने पात्रता के लिए पुष्टि किए गए COVID-19 के 909 रोगियों का आकलन किया। अध्ययन प्रतिभागियों की भर्ती और अनुवर्ती कार्रवाई को चित्र 1 में दिखाया गया है। 909 जांच किए गए रोगियों में से 525 (58 प्रतिशत) ने चयन मानदंडों को पूरा नहीं किया या भाग लेने से इनकार कर दिया और इसलिए उन्हें नामांकित नहीं किया गया। इसके अतिरिक्त, 384 सहमत प्रतिभागियों में से आठ (2 प्रतिशत) को बेतरतीब ढंग से हस्तक्षेप के लिए नहीं सौंपा गया था और स्क्रीनिंग विफलता के कारण इरादा-से-इलाज विश्लेषण से बाहर रखा गया था। इसलिए, 376 प्रतिभागियों को बेतरतीब ढंग से सौंपा गया था (दीक्षांत प्लाज्मा एन =188; प्लेसीबो एन =188)। सभी 376 प्रतिभागियों को इरादा-से-इलाज विश्लेषण में शामिल किया गया था।

बेसलाइन जनसांख्यिकी और नैदानिक ​​​​विशेषताएं दीक्षांत प्लाज्मा समूह और प्लेसीबो समूह (तालिका 1) में समान थीं। प्रतिभागियों की औसत आयु 56 वर्ष (IQR 52-62), 173 (46 प्रतिशत) महिलाएं थीं, 203 (54 प्रतिशत) पुरुष थे, और 278 (74 प्रतिशत) में गंभीर सीओवीआईडी ​​​​की प्रगति के लिए कम से कम एक जोखिम कारक था। {10}} सह-अस्तित्व की स्थितियों से संबंधित। लक्षण शुरू होने से यादृच्छिक असाइनमेंट तक का औसत समय 4 · 4 दिन (एसडी 1 · 4) था। कुल मिलाकर, 376 रोगियों में से 366 (97 प्रतिशत) में हल्के COVID-19 थे। बेसलाइन सीरम एंटीबॉडी की स्थिति 369 रोगियों में से 326 (88 प्रतिशत) में नकारात्मक थी, जिनके लिए परिणाम उपलब्ध थे। बेसलाइन पर नासॉफिरिन्जियल स्वैब से औसत वायरल लोड 6 · 7 लॉग 10 प्रतियां प्रति एमएल (एसडी 1 · 6) था जो कि दीक्षांत प्लाज्मा समूह के लिए और 6 · 8 लॉग 10 प्रतियां प्रति एमएल (1 · 4) प्लेसीबो समूह के लिए था।

उपलब्ध न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी टाइटर्स के साथ मिथाइलीन ब्लू-ट्रीटेड दीक्षांत प्लाज्मा की 148 इकाइयों में से, 132 (89 प्रतिशत) में एक SARS-CoV -2 1:250 से अधिक के ID50 को बेअसर कर रहा था। मूल वायरस (वुहान-हू-1 के लिए माध्य ID50 1:1379 (IQR 1:602–1:2801 [माध्य 1:342 IU/mL, IQR 1:147–1:705] के बराबर) था। [जेनबैंक एमएन908947.3]; परिशिष्ट पी 8)। वुहान-हू-1 और अल्फा वैरिएंट स्यूडोवायरस के खिलाफ 40 नमूनों के एक सबसेट में न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी टाइटर्स के वितरण में 1·33-गुना (माध्य आईडी50 1:1256 [IQR 1] की कमी देखी गई। :709–1:2712] वुहान-हू के खिलाफ-1 और माध्य आईडी50 1:943 [1:428–1:2236] अल्फा संस्करण के खिलाफ; पी=0·0032; परिशिष्ट पी 9)। मेथिलीन ब्लू ट्रीटमेंट (औसत आईडी50 1:1256 [IQR 1:709–1:2712] बनाम 1:1287 [1:349–1] के बाद वुहान-हू -1 के लिए तटस्थ गतिविधि टाइटर्स अपरिवर्तित रहे :3333] उपचार के बाद; पी=0·32; परिशिष्ट पी 9)। दीक्षांत प्लाज्मा दान ऐसे समय में एकत्र किया गया था जब कैटलोनिया (अप्रैल 2020, जनवरी 2021) में SARS-CoV-2 वायरस के B1, B1.1, और B1.177 वेरिएंट प्रमुख थे, और सभी परीक्षण प्रतिभागी थे COVID-19 महामारी की दूसरी लहर (बड़े पैमाने पर B1.177, अक्टूबर 2020, जनवरी 2021) और तीसरी लहर (मुख्य रूप से अल्फा संस्करण, फरवरी-मई 2021; परिशिष्ट p 10) के दौरान भर्ती किया गया। प्लाज्मा इकाइयों को दो सबसे बड़े अध्ययन स्थलों से 12 किमी या उससे कम की दूरी पर सोर्स किया गया था, जिसमें 174 (93 प्रतिशत) प्रतिभागियों को दीक्षांत प्लाज्मा समूह में भर्ती किया गया था, और सभी अध्ययन स्थलों (परिशिष्ट पी 12) से 90 किमी या उससे कम।

नैदानिक ​​​​प्राथमिक परिणाम के लिए, दो समूहों (तालिका 2) के बीच 28 दिन तक अस्पताल में भर्ती होने में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। दीक्षांत प्लाज्मा समूह में 188 प्रतिभागियों में से 22 (12 प्रतिशत) और प्लेसीबो समूह में 188 प्रतिभागियों में से 21 (11 प्रतिशत) में अस्पताल में भर्ती हुए (RR 1·05 [95 प्रतिशत CI 0·78–1·41 ]). लॉग-बिनोमियल रिग्रेशन मॉडल के अनुसार, उम्र, बॉडी-मास इंडेक्स, लिम्फोसाइट्स और फेरिटिन स्वतंत्र रूप से अस्पताल में भर्ती होने की घटना (परिशिष्ट पी 14) से जुड़े थे।

मरीजों की बेसलाइन सीरम एंटीबॉडी स्थिति, बीमारी की अवधि, और दीक्षांत प्लाज्मा की निष्क्रियता गतिविधि के अनुसार पूर्वनिर्धारित उपसमूह विश्लेषण में, समूह (तालिका 2) के बीच अस्पताल में भर्ती दर काफी भिन्न नहीं थी। सहप्राथमिक, वायरोलॉजिकल परिणाम के लिए, वायरल लोड में बेसलाइन से दिन 7 तक का औसत अंतर -2 · 41 लॉग1 0 प्रति एमएल (एसडी 1 · 32) प्रति एमएल (एसडी 1 · 32) प्रति लीटर प्लाज्मा समूह में और -2 · 32 लॉग 1 था। प्लेसीबो समूह में {16}} प्रति एमएल (1·43) प्रतियां (कच्चा अंतर -0·10 लॉग10 प्रति एमएल प्रतियां [95 प्रतिशत सीआई -{{39} }·35 से 0·15]; तालिका 2, चित्र 2)। वायरल लोड में कमी के विश्लेषण ने 28 दिन में इसी तरह की प्रवृत्ति का पालन किया: -3 · 86 लॉग10 प्रति एमएल (एसडी 1 · 56) प्रति एमएल (एसडी 1 · 56) में दीक्षांत प्लाज्मा समूह बनाम -4 · 00 लॉग 10 प्लेसीबो समूह में प्रति एमएल (1·45) प्रतियां (कच्चा अंतर 0·12 लॉग10 प्रति एमएल [95 प्रतिशत सीआई -0·17 से 0·40])। मरीजों की बेसलाइन सीरम एंटीबॉडी स्थिति के अनुसार उपसमूह विश्लेषण से वायरोलॉजिकल परिणामों के परिणाम समूहों (तालिका 2) के बीच काफी भिन्न नहीं थे। प्रति-प्रोटोकॉल आबादी में प्राथमिक परिणाम परिशिष्ट (पी 15) में दिखाए गए हैं।

यादृच्छिक असाइनमेंट से लेकर COVID{{0}} लक्षणों के समाधान के लिए मध्यकाल के माध्यमिक परिणाम के विश्लेषण में, दीक्षांत प्लाज्मा समूह (12·0 दिनों [IQR] के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। 6·0–21·3]) और प्लेसीबो समूह (12·{{10}} दिन [6·0–22·0]; एचआर 1·05 [95 प्रतिशत सीआई 0·85–1·30]; परिशिष्ट पी 16)। समय के साथ जोखिम के कॉक्स प्रतिगमन की आनुपातिक खतरा धारणा संतुष्ट थी (स्कोनफेल्ड परीक्षण पी=0·81; परिशिष्ट पी 17)। जलसेक के बाद 60 दिनों के भीतर 10-बिंदु WHO नैदानिक ​​​​प्रगति स्केल स्कोर में परिवर्तन के द्वितीयक समापन बिंदु में समूहों के बीच कोई अंतर नहीं था (परिशिष्ट p18)। 188 दीक्षांत प्लाज्मा प्राप्तकर्ताओं में से दो (1 प्रतिशत) और 188 प्लेसबो प्राप्तकर्ताओं में से चार (2 प्रतिशत) को यांत्रिक वेंटिलेशन की आवश्यकता थी (7 से अधिक या उसके बराबर सामान्य स्कोर तक पहुंच गया)। दीक्षांत प्लाज्मा समूह में किसी भी प्रतिभागी की मृत्यु नहीं हुई, जबकि प्लेसीबो समूह में दो (1 प्रतिशत) प्रतिभागियों की मृत्यु हो गई (आरआर 0·20 [95 प्रतिशत सीआई 0·01–4·14])।

फॉलो-अप के दिन 7 में समूहों के बीच भड़काऊ मापदंडों में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं थे, आईएल -6 में मामूली अंतर को छोड़कर कोई नैदानिक ​​​​महत्व नहीं था (आंकड़ा 3)। 376 प्रतिभागियों के 125 (33 प्रतिशत) के उपसमूह में मापा गया जलसेक के बाद 7 दिन में एंटीबॉडी को निष्क्रिय करने के स्तर, दीक्षांत प्लाज्मा समूह (एन =67; माध्य आईडी 50 1: 1017 [ IQR 1:296–1:2501]) और प्लेसीबो समूह (n=58; माध्यिका ID50 1:989 [1:424–1:2321]; परिशिष्ट p 13)।

32 उपचार से संबंधित प्रतिकूल घटनाओं की सूचना मिली, 188 रोगियों में से 24 (13 प्रतिशत) में दीक्षांत प्लाज्मा समूह में और प्लेसबो समूह में 188 रोगियों में से आठ (4 प्रतिशत) (आरआर 3 · 00 [95 प्रतिशत सीआई 1 ·38–6·51])। रिपोर्ट की गई सबसे आम उपचार संबंधी प्रतिकूल घटनाएं हल्की एलर्जी प्रतिक्रियाएं, बुखार और स्थानीय प्रतिक्रियाएं थीं (परिशिष्ट पी 19)। हल्के COVID-19 लक्षणों और लक्षणों वाले एक प्रतिभागी ने दीक्षांत प्लाज्मा जलसेक के 7 दिन बाद एक थ्रोम्बोम्बोलिक घटना विकसित की, जिसे संभवतः COVID-19 या प्रयोगात्मक हस्तक्षेप से संबंधित एक गंभीर प्रतिकूल घटना के रूप में रिपोर्ट किया गया था।

बहस

50 वर्ष या उससे अधिक आयु के वयस्क रोगियों के लिए हाई-टिटर मेथिलीन ब्लू-ट्रीटेड दीक्षांत प्लाज्मा के इस यादृच्छिक डबल-ब्लाइंड परीक्षण में, जिनके पास एक सप्ताह या उससे कम समय के लिए हल्के से मध्यम COVID-19 थे, हमने पाया कि दीक्षांत प्लाज्मा प्राप्त करने वाले रोगियों में था प्लेसबो जलसेक प्राप्त करने वालों की तुलना में कोई बेहतर नैदानिक ​​​​या वायरोलॉजिकल परिणाम नहीं। हमारे किसी भी द्वितीयक समापन बिंदु के लिए दीक्षांत प्लाज्मा समूह में लाभ का कोई सबूत नहीं था और न ही हमारे किसी भी पूर्वनिर्धारित उपसमूह विश्लेषण में।

हमारा डेटा उन प्रतिभागियों के अनुपात में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं दर्शाता है, जिन्हें परीक्षण में प्रवेश करने के 28 दिनों के भीतर अस्पताल में भर्ती होना पड़ा था (आरआर 1 · 0 5 [95 प्रतिशत सीआई 0 · 78–1 · 41])। प्रभाव की यह अनुपस्थिति सीरम-एंटीबॉडी-नकारात्मक रोगियों के उपसमूह में भी देखी गई थी, जो हमारे सहवास के बहुमत थे और जिनके बीच मोनोक्लोनल एंटीबॉडी जैसे अन्य निष्क्रिय इम्यूनोथेरेपी का लाभ उच्चतम होने की भविष्यवाणी की गई है। इसके अलावा, दीक्षांत प्लाज्मा हस्तक्षेप के 7 और 28 दिनों के बाद नासॉफिरिन्क्स में वायरल लोड में कमी नहीं हुई।

पिछले यादृच्छिक परीक्षणों ने COVID-19 के साथ अस्पताल में भर्ती रोगियों या आपातकालीन कक्षों में भर्ती रोगियों में किसी भी प्रासंगिक परिणाम में सुधार करने के लिए या तो आंशिक लाभ21,22 या विफलता11-20 की सूचना दी है। आउट पेशेंट सेटिंग में दीक्षांत प्लाज्मा अर्जेंटीना में किए गए एक छोटे यादृच्छिक परीक्षण से आता है, जिसमें एक अध्ययन आबादी हमारे अन्य यादृच्छिक परीक्षणों की तुलना में अधिक समान है। 25 उस परीक्षण और हमारे बीच मुख्य अंतर में पहले का दीक्षांत प्लाज्मा प्रशासन समय (शुरुआत के बाद से औसत समय) शामिल है। लक्षणों की संख्या 39·6 एच [एसडी 13·9] बनाम 4·4 दिन [1·4]) और अर्जेंटीना में वृद्ध रोगियों का चयन (औसत आयु 77 वर्ष [एसडी 8·5] बनाम 58 वर्ष [8]) परीक्षण।

हमारे नैदानिक ​​परीक्षण की कई सीमाओं का उल्लेख किया जाना चाहिए। एक प्रमुख सीमा यह है कि डेटा सुरक्षा और निगरानी बोर्ड ने परीक्षण को जल्दी समाप्त करने की सिफारिश की क्योंकि 50 वर्ष या उससे अधिक आयु की 85 प्रतिशत से अधिक आबादी को स्पेन में पूरी तरह से टीका लगाया गया था (और जिनके नैदानिक ​​परीक्षण में भाग लेने की संभावना नहीं थी), और क्योंकि मोनोक्लोनल एंटीबॉडी आउट पेशेंट के लिए उपलब्ध हो गए थे, जिन्हें गंभीर COVID-19 के बढ़ने का उच्च जोखिम था। इसलिए मुकदमे को कमजोर कर दिया गया था। टीकाकरण हमारे परीक्षण के बहिष्करण मानदंडों में से एक था, लेकिन यह आवश्यक रूप से वास्तविक जीवन में दीक्षांत प्लाज्मा के उपयोग को रोकता नहीं है, विशेष रूप से समय के साथ टीकों द्वारा प्रदत्त प्रतिरक्षा को देखते हुए।

इसके अलावा, हमें कई कारकों पर विचार करने की आवश्यकता है जो दीक्षांत प्लाज्मा की प्रभावकारिता को कम कर सकते हैं, जिसमें नैदानिक ​​समय पाठ्यक्रम शामिल है जब चिकित्सा प्रशासित होती है, खुराक, एंटीबॉडी की आत्मीयता, और इम्युनोग्लोबुलिन फ़ंक्शन पर प्लाज्मा रोगज़नक़ निष्क्रियता प्रक्रियाओं का प्रभाव।

सबसे पहले, हमने लक्षणों की शुरुआत से 7 दिनों तक प्रतिभागियों को नामांकित किया और यदि उपचार पहले शुरू किया गया था तो हम संभावित प्रभावकारिता से इंकार नहीं कर सकते। फिर भी, तथ्य यह है कि 369 रोगियों में से 326 (88 प्रतिशत) SARS-CoV -2 IgM और IgG शामिल किए जाने के समय नकारात्मक थे, यह पुष्टि करता है कि अंतर्जात प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया शुरू होने से पहले उन्हें भर्ती किया गया था।

दूसरा, हमारे परीक्षण में रोगियों को एक एकल उच्च अनुमापांक प्लाज्मा इकाई प्राप्त हुई। हालांकि यह दृष्टिकोण अन्य आउट पेशेंट परीक्षणों के समान था, 23,25 उच्च प्लाज्मा मात्रा आमतौर पर उन रोगियों में प्रशासित की जाती है जिन्हें COVID-19 के लिए अस्पताल में भर्ती कराया गया है। हम स्वीकार करते हैं कि प्रारंभिक अवस्था में उच्च खुराक की आवश्यकता हो सकती है जब विकृति सूजन के विपरीत संक्रमण द्वारा संचालित होती है। हमारा डेटा सीधे तौर पर यह नहीं बताता है कि क्या दीक्षांत प्लाज्मा की उच्च खुराक या एंटीबॉडी को बेअसर करने वाले टाइटर्स प्रभावोत्पादक होंगे। प्राप्तकर्ताओं में एंटीबॉडी के कैनेटीक्स को बेहतर ढंग से समझने के लिए, हमने प्रतिभागियों के परिधीय रक्त में जलसेक के 7 दिन बाद न्यूट्रलाइजेशन एंटीबॉडी को मापा, और हमें दीक्षांत प्लाज्मा और प्लेसीबो समूहों के बीच कोई अंतर नहीं मिला। यह संभावना है कि नामांकन के 7 दिनों के बाद, अंतर्जात एंटीबॉडी प्रतिक्रिया उच्च स्तर पर पहुंच गई होगी। 33 जलसेक के बाद 2-3 दिनों में प्लेसबो और हस्तक्षेप समूहों के बीच एंटीबॉडी सांद्रता को बेअसर करने की पहले की तुलना ने फार्माकोकाइनेटिक्स में बेहतर अंतर्दृष्टि प्रदान की हो सकती है। एंटीबॉडी वितरित।

तीसरा, एंटीजेनिक शिफ्ट, डोनर और प्राप्तकर्ता संक्रमित वेरिएंट के बीच विसंगति के कारण, प्रभावकारिता को प्रभावित कर सकता है। इस परीक्षण के लिए दीक्षांत प्लाज्मा इकाइयाँ SARS-CoV -2 वेरिएंट (B.1, B.1.1, और B.1.177) द्वारा निरंतर एक लहर के दौरान एकत्र की गईं, जो भर्ती अवधि के पहले भाग के दौरान भी हावी थीं, लेकिन थीं दूसरे हाफ में हावी होने वाले एक (अल्फा वेरिएंट) से अलग। प्लाज़्मा न्यूट्रलाइज़ेशन गतिविधि का आकलन करने के लिए, हमने पहले एक छद्म वायरल न्यूट्रलाइज़ेशन परख का उपयोग किया, जिसमें एक मूल वायरस वंश (वुहान-हू -1) ​​से स्पाइक का उपयोग किया गया था, और फिर एक अल्फा स्यूडोटाइप्ड वायरस के साथ बार-बार परीक्षण किया गया था। हमने वुहान-हू की तुलना में अल्फा संस्करण के खिलाफ गतिविधि को निष्क्रिय करने में 1 · 33-गुना कमी देखी है-1। यह खोज गतिविधि को निष्क्रिय करने में 1·5-गुना से 3·0-गुना कमी की पिछली रिपोर्ट के अनुरूप है (परिशिष्ट पृष्ठ 11)। हमारे अध्ययन के नकारात्मक परिणाम आंशिक रूप से दाताओं और प्राप्तकर्ताओं के वायरल वेरिएंट में अंतर के कारण एंटीबॉडी की प्रभावकारिता में कमी से प्रभावित हो सकते हैं। ध्यान दें, अधिकांश पिछले प्रयोगशाला अध्ययनों ने चिंता के अल्फा संस्करण के खिलाफ गतिविधि को निष्क्रिय करने में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण कमी नहीं दिखाई, जबकि बीटा (बी.1.351) और डेल्टा (बी.1.617.2) वेरिएंट के लिए कमी बड़ी और सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण थी। चिंता का विषय (परिशिष्ट पृष्ठ 11)। कुछ हद तक, वायरल उपभेदों में प्रतिजन बदलाव क्षेत्र-निर्भर होने की उम्मीद है। 24 हमारे अध्ययन में, प्लाज्मा इकाइयों को 90 प्रतिशत से अधिक अध्ययन प्रतिभागियों की भर्ती करने वाले दो सबसे बड़े अध्ययन स्थलों से 12 किमी या उससे कम की दूरी पर सोर्स किया गया था।

अंत में, SARS-CoV -2 के निष्प्रभावीकरण पर मेथिलीन ब्लू के प्रभाव पर ध्यान केंद्रित करने वाले अध्ययनों ने मिश्रित परिणाम दिए हैं। मेथिलीन ब्लू प्लाज्मा के लिए रोगजनक निष्क्रियता की एक विधि है जिसका व्यापक रूप से यूरोप के कुछ देशों में उपयोग किया जाता है। रूस के एक अध्ययन से पता चला है कि प्लाज्मा की कुछ इकाइयों ने मेथिलीन ब्लू निष्क्रियता के साथ निष्क्रिय गतिविधि खो दी, जबकि अन्य अध्ययनों में कोई अंतर नहीं पाया गया। प्लाज्मा इकाइयों के एक उपसमूह में इकाई (यानी, मेथिलीन ब्लू ट्रीटमेंट के बाद) और हमें एंटीबॉडी टाइटर्स (माध्य आईडी 50 1: 1256 [IQR 1: 709–1: 2712] बनाम 1:1287 [1] को बेअसर करने में कोई अंतर नहीं मिला। :349–1:3333]; पी=0·32)। यद्यपि हमने मेथिलीन ब्लू उपचार के बाद संरक्षित तटस्थ गतिविधि को देखा, हम इम्युनोग्लोबुलिन के एफसी-क्षेत्र को नुकसान के संभावित जोखिम का मूल्यांकन नहीं कर सके। एफसी-निर्भर कार्यों में महत्वपूर्ण रोगाणुरोधी प्रभाव होते हैं, जिसमें फागोसाइटोसिस, पूरक सक्रियण और एंटीबॉडी-निर्भर सेलुलर विषाक्तता शामिल हैं। 37 पिछले अध्ययनों से पता चलता है कि दीक्षांत प्लाज्मा इकाइयों से नैदानिक ​​​​लाभ का मुख्य चालक उनकी तटस्थ एंटीबॉडी सामग्री पर निर्भर करता है, 38 और यह कि सेल रिसेप्टर एफसी-क्षेत्र की बाध्यकारी क्षमता मेथिलीन ब्लू उपचार के बाद संरक्षित है। 36 फिर भी, एक चिंता बनी हुई है कि डाई ग्लाइकोसिलेशन डोमेन के साथ प्रतिक्रिया कर सकती है और एफसी-क्षेत्र की कार्यक्षमता को प्रभावित कर सकती है और इस प्रकार समग्र प्रतिक्रिया।39

स्वस्थ्य प्लाज्मा के अपेक्षाकृत कम लागत और सीधे उत्पादन के परिणामस्वरूप COVID-19 के रोगियों के लिए इसका व्यापक उपयोग हुआ है। हमारा विश्लेषण पिछले डेटा23 पर आधारित है जो बताता है कि COVID-19 दीक्षांत प्लाज्मा गैर-अस्पताल में भर्ती प्रतिभागियों में हल्के से गंभीर बीमारी की प्रगति को नहीं रोकता है और यह कि दीक्षांत प्लाज्मा वायरल लोड को कम नहीं करता है। अब तक सृजित दीक्षांत समारोह प्लाज्मा की प्रभावकारिता पर सभी परिणामों को एक साथ लेते हुए, COVID-19 के साथ बाह्य रोगियों में इसके उपयोग का समर्थन करने के लिए औपचारिक सिफारिशों का निष्कर्ष नहीं निकाला जा सकता है। अल्फा संस्करण के खिलाफ पूर्व तरंगों के दौरान एकत्रित प्लाज्मा की संभावित कम गतिविधि से संबंधित सीमाओं और मेथिलिन ब्लू निष्क्रियता की प्रभावकारिता पर संभावित प्रभाव के साथ-साथ संदर्भ में इस अध्ययन के निष्कर्षों को सावधानी के साथ लिया जाना चाहिए। मुकदमे की जल्दी समाप्ति।

संदर्भ

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