HPLC Cistanche Cistanche में Echinacoside का निर्धारण

Cistanche Cistanche में echinacoside के HPLC निर्धारण

अधिक information:ali.ma@wecistanche.com के लिए

उद्देश्य:HPLC ने कितनी राशि निर्धारित की है?एकाइनाकोसाइडमेंCistancheतरल नाइट्रोजन की स्थिति के साथ-साथ स्वाभाविक रूप से हवा-सूखे की स्थिति में जमीन, इसकी तुलना मेंजंगली सिन् शेऔरकृत्रिम रूप से Cistanche खेती की।

विधियाँ:LC-20a HPLC प्रणाली (Shimadzu, जापान) का उपयोग किया गया था। स्तंभ YMC inertsil ods-sp (4.6 मिमी × 150 मिमी, 5μm; YMC Co Ltd, जापान) था; मोबाइल चरण: एसिटोनिट्राइल-मेथनॉल -1% फॉर्मिक एसिड (10: 15: 75); पता लगाने तरंग दैर्ध्य 334 एनएम; प्रवाह दर 0.7 मिलीग्राम · एमएल -1। स्तंभ तापमान 30 डिग्री सेल्सियस.

परिणाम:विभिन्न उपचार स्थितियों का एचिनाकोसाइड सामग्री पर बहुत स्पष्ट प्रभाव पड़ा, आम तौर पर प्राकृतिक हवा-सूखे परिस्थितियों में उन जमीनों की तुलना में तरल नाइट्रोजन के तहत सिस्टांच जमीन में एचिनाकोसाइड के उच्च स्तर के साथ; जंगली की सक्रिय घटक सामग्रीCistancheयह कृत्रिम संस्कृति की तुलना में बहुत अधिक था।

Cistanche निकालने पाउडर उत्पादों के लिए क्लिक करें

Cistanche एक लुप्तप्राय प्रजाति है, एक परजीवी पौधा है जो क्लोस्ट्रीडियम, सैलिक्स रूब्रम की जड़ों में निवास करता है। चीन में, सिस्टांचे को मुख्य रूप से इनर मंगोलिया, निंगक्सिया, गांसू और शिनजियांग में वितरित किया जाता है, जिसमें "रेगिस्तान जिनसेंग" के लिए एक उत्कृष्ट प्रतिष्ठा है, जो महान औषधीय मूल्य का है। इसकी मुख्य औषधीय सामग्री फेनिलएथेनोलिक ग्लाइकोसाइड्स हैं, जिन्हें उनके प्रतिस्थापन के आधार पर एचिनाकोसाइड, लीफ कोहोसाइड, सिस्टांचे और अन्य में विभाजित किया जा सकता है। उनमें से, echinacoside ने यौन कार्य, एंटीऑक्सिडेंट और मुक्त कट्टरपंथी स्कैवेंजिंग प्रभावों में सुधार किया है, लेकिन कुछ एंटी-एपोप्टोटिक प्रभाव भी हैं। 1980 के दशक के बाद से, HPLC तकनीक, जो फेनिलइथेनोलिक ग्लाइकोसाइड्स के अलगाव के लिए एक सरल और तेज़ विधि प्रदान करती है, का व्यापक रूप से प्राकृतिक उत्पादों के अलगाव में उपयोग किया गया है। एक एचपीएलसी विधि को अलग-अलग विकास अवधियों में जंगली और कृत्रिम रूप से खेती किए गए सिस्टांचे के प्रमुख सक्रिय घटक सिस्टांच की सामग्री का विश्लेषण करने के लिए चुना गया था, जो कि सिंशे के तर्कसंगत विकास और उपयोग के लिए एक वैज्ञानिक आधार प्रदान करता है और इसकी गुणवत्ता के प्रभावी मूल्यांकन के लिए।

उपकरण और अभिकर्मक

Shimadzu, जापान एलसी-20a HPLC उपकरण, lc-20at अग्रानुक्रम डबल प्लंजर पंप, cto-20a कॉलम ओवन, spda-20a यूवी विस दोहरी तरंग दैर्ध्य डिटेक्टर; Kunshan kq-100 अल्ट्रासोनिक क्लीनर; एसिटोनिट्रिल (क्रोमैटोग्राफिक रूप से शुद्ध, तियानजिन गुआंगफू रासायनिक अनुसंधान संस्थान); मेथनॉल (क्रोमैटोग्राफिक रूप से शुद्ध, तियानजिन गुआंगफू रासायनिक अनुसंधान संस्थान); फॉर्मिक एसिड (क्रोमैटोग्राफिक रूप से शुद्ध, तियानजिन गुआंगफू रासायनिक अनुसंधान संस्थान); आसुत जल

नियंत्रण: echineoside, 98.43% ≥ सामग्री (शंघाई Yuanye जैव प्रौद्योगिकी कं, लिमिटेड).

Cistanche के पांच नमूने: कृत्रिम रूप से निम्नलिखित Cistanche के साथ एक वर्ष के लिए लगाया, कृत्रिम रूप से Cistanche के लिए लगाया, कृत्रिम रूप से सूखे Cistanche, जंगली Cistanche, और कृत्रिम रूप से Cistanche के साथ तीन साल से अधिक के लिए लगाया।

2 तरीके और परिणाम

2.1 क्रोमैटोग्राफिक स्थितियों का निर्धारण

अन्य पदार्थों से एलसी क्रोमैटोग्राम में मापा echineoside के शिखर को अलग करने के लिए, साथ ही साथ पंप दबाव और समय सारणी को एक उपयुक्त सीमा के भीतर होने के लिए नियंत्रित करने के लिए, क्रोमैटोग्राफिक स्थितियों का प्रयोगात्मक संशोधन किया गया था, और मोबाइल चरण के साथ अनुकूलन प्रयोगों के बाद, यह निष्कर्ष निकाला गया था कि तापमान जितना अधिक होगा, प्रतिधारण समय जितना कम होगा और एकाग्रता उतनी ही कम होगी, पंप का दबाव उतना ही कम होगा और प्रतिधारण समय उतना ही कम होगा, लेकिन चोटी की ऊंचाई कम हो गई, जो माप के लिए प्रतिकूल थी। मोबाइल चरण को अंततः एसिटोनिट्राइल-मेथनॉल -1% फॉर्मिक एसिड (10: 15: 75), पता लगाने वाली तरंग दैर्ध्य 334 एनएम, प्रवाह दर 0.7 मिली / मिनट, और कॉलम तापमान 30 डिग्री सेल्सियस, कमरे के तापमान की उद्देश्य स्थितियों और पंप के अधिकतम असर दबाव के अनुसार निर्धारित किया गया था, जिसके परिणामस्वरूप तेज चोटी के आकार और घटकों के अच्छे अलगाव के साथ प्रचुर मात्रा में जानकारी हुई।

2.2 स्तंभों का निर्धारण

YMC-Inertsil ODS-SP (4.6 मिमी × 150 मिमी, 5 μ m; YMC Co Ltd, जापान)।

2.3 प्रयोगात्मक समाधान तैयारी

2.3.1 मानक समाधानों की तैयारी

echineoside मानक की एक उचित राशि को सटीक रूप से तौला गया था और मोबाइल चरण एसिटोनिट्राइल-मेथनॉल -1% फॉर्मिक एसिड (10: 15: 75) के साथ स्पाइक किया गया था ताकि 0.06 मिलीग्राम बनाया जा सके । ML - 1, 0.05 mg · ML - 1, 0.04 mg · ML - 1, 0.03 mg · ML - 1, 0.02 mg · ML - 1, 0.01 मिलीग्राम · एमएल - 1, और 0.005 मिलीग्राम · एमएल - echinacoside मानक के 1 समाधान.

2.3.2 परीक्षण समाधान की तैयारी

कृत्रिम रूप से लगाए गए ताजा सिंशे (एक वर्ष से कम), कृत्रिम रूप से ताजा सिस्टांच, और जंगली ताजा सिस्टांच की उचित मात्रा को तरल नाइट्रोजन के तहत एक मोर्टार का उपयोग करके पाउडर के लिए जमीन पर रखा गया था; इसके अलावा, उपरोक्त 3 Cistanche की एक उचित मात्रा को ब्लॉकों में काट दिया गया था, हवा को स्वाभाविक रूप से छाया वेंटिलेशन में सुखाया गया था, और सूखने के बाद, इसे पाउडर में pulverized और जमीन पर रखा गया था। कृत्रिम सूखी cistanche और जंगली तीन साल सूखी Cistanche सीधे पाउडर में जमीन थे. ऊपर तैयार 0.5 ग्राम Cistanche पाउडर लिया गया था और एक सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में रखा गया था, 25 मिलीलीटर मोबाइल चरण जोड़ा गया था, वजन किया गया था और 30 मिनट के लिए भिगोया गया था, 40 मिनट के लिए sonicated, ठंडा और फिर मोबाइल चरण के साथ लापता वजन बनाने के लिए फिर से वजन किया गया, हिलाया और centrifuged, और supernatant 0.45 μ एम microporous फिल्टर झिल्ली निस्पंदन के लिए लिया गया था।

echinacoside के मानक नमूने के लिए प्रतिगमन घटता के 2.4 भूखंडों

echineoside के तैयार मानक नमूनों को एलसी उपकरण में अलग से इंजेक्ट किया गया था, और नियंत्रण की एकाग्रता (मिलीग्राम · एल -1) का उपयोग एब्सिसा के रूप में किया गया था, और इसी चोटी के क्षेत्रों को मानक वक्र को प्लॉट करने के लिए ऑर्डिनेट किया गया था, जिसके परिणामस्वरूप प्रतिगमन समीकरण होता है: y = 66 867 100x-46 360.83, R2 = 0.98637, जिसने एक अच्छे रैखिक संबंध के भीतर 0.1 ~ 1.2 μg पर echineoside दिखाया।

3 चर्चाएं

Echinacoside Cistanche के मुख्य सक्रिय घटकों में से एक है, जो Cistanche के औषधीय प्रभाव के रासायनिक आधार का अच्छी तरह से प्रतिनिधित्व कर सकता है, जिससे औषधीय सामग्री की गुणवत्ता का मूल्यांकन और इसके औषधीय प्रभाव अनुरूप हो जाते हैं, और Cistanche गुणवत्ता मूल्यांकन के pertinence में सुधार होता है।

विभिन्न उपचार स्थितियों का एचिनाकोसाइड सामग्री पर स्पष्ट प्रभाव पड़ा, जिसमें आम तौर पर प्राकृतिक हवा-सूखे परिस्थितियों में उन जमीन की तुलना में तरल नाइट्रोजन के तहत सिस्टांचे जमीन में एचिनाकोसाइड के उच्च स्तर थे। आम हवा सुखाने से इचीनियोसाइड की मात्रा कम हो जाती है, जिसे हवा सुखाने या परिवर्तित करने के दौरान खाया जा सकता है। सक्रिय घटक सामग्री की कमी को रोकने और Cistanche की प्रभावकारिता की गारंटी देने के लिए, एक उपयुक्त उपचार का चयन किया जाना चाहिए।

लगातार, अधिकांश का मानना था कि Cistanche के कृत्रिम खेती के वातावरण के साथ-साथ विकास की आदतें गुणवत्ता में कोई अंतर नहीं होने के साथ जंगली से अलग नहीं थीं, केवल उपज पर जोर देने के लिए प्रवृत्त थीं, और गुणवत्ता का विश्लेषण नहीं किया। वर्तमान अध्ययन से पता चला है कि कृत्रिम रूप से खेती की गई Cistanche echinacoside की मात्रा जंगली Cistanche echinacoside की तुलना में कम थी। उच्चतम जंगली cistanche का 0.3360% था और कृत्रिम Cistanche का सबसे कम 0.007 0% था। इसलिए, सक्रिय अवयवों की सामग्री में सुधार करने के लिए अभी भी खेती प्रौद्योगिकी में इसका अध्ययन करने की आवश्यकता है।

Cistanche की गुणवत्ता अपने सक्रिय घटक, echinacoside की मात्रा पर निर्भर करती है, जो बदले में मौसम, समय और कटाई की विधि के साथ एक मजबूत संबंध है, इसलिए Cistanche की कटाई को सक्रिय घटक की संचय स्थिति और विकास और विकास के चरण को ध्यान में रखना चाहिए। गुणवत्ता और उपज दोनों पर विचार करें।

इस पेपर में उल्लिखित विधि सरल, सटीक, पुन: प्रस्तुत करने योग्य है, और echineoside का निर्धारण करने के लिए सटीक है। Cistanche निर्धारण के लिए उपयोगी.