त्वचा की उम्र बढ़ने का मुकाबला करने में लाल और सफेद शराब के अर्क की भूमिका की पहचान करना: फाइब्रोब्लास्ट व्यवहार पर एंटीऑक्सिडेंट के प्रभाव

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सार:त्वचीय फ़ाइब्रोब्लास्ट कई प्रोटीनों के स्राव में मुख्य अभिनेता हैं, जिनमें कोलेजन भी शामिल है, जो त्वचा के कार्य को संरक्षित करता है। मुक्त कण त्वचा की उम्र बढ़ने और विभिन्न सेलुलर घटकों को नुकसान पहुंचाने में शामिल होते हैं। प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) की मात्रा और प्राकृतिक एंटीऑक्सीडेंट एंजाइमों के बीच असंतुलन त्वचा के होमियोस्टेसिस को नकारात्मक रूप से प्रभावित करता है। प्राकृतिक यौगिक हाल ही में ऊतक पुनर्जनन में एक संभावित एंटी-एजिंग उपकरण के रूप में उभरे हैं। वर्तमान पेपर में, हमने एंटी-एजिंग गुणों वाले कॉस्मेटिक उत्पादों के निर्माण के लिए, कच्चे माल के रूप में, उनके संभावित उपयोग पर विचार करते हुए, सफेद और लाल वाइन की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का मूल्यांकन किया। हमने एक ऐसी विधि का अध्ययन किया जो वाइन के अल्कोहल अंश को हटाने की अनुमति देगी और एलसी-एमएस विश्लेषण द्वारा उनकी संरचना का निर्धारण करेगी। इसके बाद हमने 3-(4,5-डाइमिथाइलथियाज़ोल-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT) द्वारा फाइब्रोब्लास्ट पर लाल और सफेद वाइन के संभावित साइटोटोक्सिक प्रभावों का परीक्षण किया। तनाव की स्थिति में उत्प्रेरित गतिविधि परीक्षण द्वारा परख, और उनकी एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि। अंत में, हमने -galactosidase colorimetric परख के माध्यम से उनकी एंटी-एजिंग क्षमता का मूल्यांकन किया। हमारे परिणामों से पता चला है कि वाइन का अर्क एक उल्लेखनीय एंटीऑक्सिडेंट और एंटी-एजिंग गतिविधि प्रदर्शित करता है, विशेष रूप से उन कोशिकाओं पर जो तनावपूर्ण घटना के रूप में उजागर होती हैं। ये गुण सुझाव दे सकते हैं कि वे त्वचा पुनर्जनन के लिए कॉस्मेटिक उत्पादों के रूप में संभावित अनुप्रयोग हैं।

कीवर्ड:कोशिका प्रसार; एंटीऑक्सीडेंट; कोशिका जीर्णता; जैव सक्रिय अणु; त्वचा की उम्र बढ़ने; ऑक्सीडेटिव तनाव

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1 परिचय

त्वचा शरीर का सबसे व्यापक अंग है और इसमें कई प्रकार के कार्य होते हैं, जो अंतर्निहित ऊतकों को रासायनिक और यांत्रिक अपमान, यूवी विकिरण, मुक्त कणों और संक्रमण से बचाते हैं। यह थर्मोरेग्यूलेशन में एक भूमिका निभाता है, इसमें अंतःस्रावी और जैव रासायनिक कार्य होते हैं, और यह ज़ेनोबायोटिक्स (दवाओं, जहर, सौंदर्य प्रसाधन) [1-3] के अनुप्रयोग और/या अवशोषण का अंग है। डर्मिस में इलास्टिन फाइबर और कोलेजन फाइबर त्वचा की सही लोच सुनिश्चित करते हैं। उम्र, हार्मोन और पराबैंगनी विकिरण के हानिकारक प्रभाव डर्मिस की मोटाई और लोच को कम कर सकते हैं, जिसके परिणामस्वरूप झुर्रियाँ और त्वचा की टोन का नुकसान होता है [4,5]। यह पहले से ही ज्ञात है कि त्वचा की उम्र बढ़ने से त्वचा के बाधा कार्य से समझौता होता है, जिसके परिणामस्वरूप शुष्क रूप और पर्यावरणीय आक्रमणकारियों के लिए संवेदनशीलता [6] होती है। प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियां (आरओएस), एरोबिक चयापचय के दौरान या पर्यावरणीय कारकों के संपर्क में आने के बाद इलेक्ट्रॉनों के नुकसान के परिणामस्वरूप, विभिन्न जैव-अणुओं को नुकसान पहुंचाने में सक्षम अस्थिर प्रजातियां हैं [7,8]। उनके प्रभाव का मुकाबला करने के लिए, शरीर में प्राकृतिक एंटीऑक्सीडेंट सुरक्षा आरओएस को शारीरिक रूप से स्वीकार्य स्तरों के भीतर रखने में सक्षम हैं। ऐसा लगता है, वास्तव में, आरओएस, यदि नियंत्रित मात्रा में मौजूद है, तो एक शारीरिक क्रिया भी होती है, जो कोशिकाओं के बीच सिग्नल अणुओं के रूप में कार्य करती है [9,10]।सिस्टांचे चंगेज खानआरओएस और एंटीऑक्सिडेंट एंजाइमों के बीच यह असंतुलन, जैसे कि केटेलेस, ग्लूटाथियोन रिडक्टेस, और सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज, प्रोटीन, लिपिड और डीएनए [11] को नुकसान पहुंचाता है, इस प्रकार केराटिनोसाइट्स और फाइब्रोब्लास्ट के इंट्रासेल्युलर सिग्नलिंग मार्ग के साथ नकारात्मक रूप से हस्तक्षेप करता है और एमएमपी की अभिव्यक्ति को बदल देता है। (मैट्रिक्स मेटालोप्रोटीनिस), प्रोकोलेजन, और प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स [12,13]। सब्जियों, फलों और डेरिवेटिव में मौजूद रेस्वेराट्रोल, हाइड्रॉक्सीटायरोसोल और एपिगैलोकैटेचिन -3-गैलेट जैसे फेनोलिक यौगिक, कवक, बैक्टीरिया और वायरस के खिलाफ मुख्य रक्षा अणु हैं [14]। पॉलीफेनोल्स के लाभकारी प्रभाव-- वाइन में व्यापक रूप से मौजूद हैं - ने हाल के वर्षों में फार्मास्युटिकल और कॉस्मेटिक उद्योग में काफी ध्यान आकर्षित किया है [15,16]। पॉलीफेनोल का सेवन तीव्र और पुरानी बीमारियों में और चयापचय और कोशिका प्रसार के नियमन में सुरक्षात्मक प्रभाव डाल सकता है [17]। फेनोलिक यौगिकों के निष्कर्षण और लक्षण वर्णन के लिए एकल कुशल प्रक्रिया के विकास में कई सीमाएं हैं, मुख्य रूप से फेनोलिक यौगिकों की संरचनात्मक विविधता और अन्य सेलुलर घटकों के साथ उनकी बातचीत के कारण [18,19]। आधुनिक हरी निष्कर्षण तकनीक और उच्च-रिज़ॉल्यूशन मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी-ईएसआई-एलटीक्यू-ऑर्बिट्रैप-एमएस) इन बायोएक्टिव अणुओं के प्रबंधन के लिए आशाजनक दृष्टिकोण का प्रतिनिधित्व करते हैं [20]। इसलिए, हमने एक सस्ते, लचीले, मजबूत और कुशल तरीके का अध्ययन किया, जो कॉस्मेटिक उत्पादों के रूप में प्रयोग करने योग्य वाइन के अल्कोहल अंश को हटाने की अनुमति देगा। शराब के सेवन से जुड़े कई स्वास्थ्य प्रभावों को लंबे समय से जाना जाता है, और विशेष रूप से, एंटीऑक्सिडेंट पॉलीफेनोलिक यौगिकों की उच्च सामग्री इसे उच्च ऑक्सीडेटिव तनाव वाले रोगों के उपचार में उपयोगी बनाती है [21,22] एंटीऑक्सिडेंट का सामयिक अनुप्रयोग ऑक्सीडेटिव तनाव के खिलाफ त्वचा की एंटीऑक्सीडेंट प्रणाली का समर्थन कर सकता है और इसे लंबे समय तक फोटो-एजिंग [23,24] से बचा सकता है। इस संदर्भ में, वर्तमान पेपर में, हमने एक मजबूत तनावपूर्ण घटना के संपर्क में आने वाली कोशिकाओं में रेड और व्हाइट वाइन के अर्क के एंटीऑक्सिडेंट प्रभावों का मूल्यांकन करने का लक्ष्य रखा है, ताकि सेल सेनेस का मुकाबला करने के लिए, एंटी-एजिंग के साथ विभिन्न सामयिक योगों में उनके संभावित समावेश का सुझाव दिया जा सके। गुण, परिपक्व और क्षतिग्रस्त त्वचा के उपचार के लिए।

सिस्टैन्च एंटी-एजिंग कर सकता है

2। सामग्री और प्रणालियां

इस अध्ययन में उपयोग की जाने वाली लाल और सफेद वाइन बुइओ थे, नियंत्रित मूल के संप्रदाय के साथ, कैरिग्नानो डेल सुल्सिस अंगूर से प्राप्त, कैंटीना मेसा, सरडेग्ना और गिउन्को द्वारा उत्पादित, उसी कैंटीना मेसा द्वारा उत्पादित, वेरमेंटिनो अंगूर से प्राप्त किया गया था।

इन विट्रो प्रयोगों के लिए, 5 मार्ग पर इन-लाइन मानव त्वचा फाइब्रोब्लास्ट (HFF1) (ATCC, मानस, VA, यूएसए) का उपयोग किया गया था। कोशिकाओं को एक बेसल विकास माध्यम की उपस्थिति में विकसित किया गया था, जो डल्बेको के संशोधित ईगल के माध्यम (डीएमईएम) (लाइफ टेक्नोलॉजीज ग्रैंड आइलैंड, एनवाई, यूएसए) से बना है, जो 1 0 प्रतिशत भ्रूण गोजातीय सीरम (एफबीएस) (लाइफ टेक्नोलॉजीज) के पूरक हैं। , ग्रैंड आइलैंड, एनवाई, यूएसए), 200 एमएम एल-ग्लूटामाइन (यूरोक्लोन, मिलानो, इटली), और 200 यू/एमएल पेनिसिलिन-0.1 मिलीग्राम/एमएल स्ट्रेप्टोमाइसिन (यूरोक्लोन, मिलानो, इटली)। कोशिकाओं को थर्मोस्टेटिक इन्क्यूबेटरों में 37 डिग्री और 5 प्रतिशत (v/v) CO2 पर उगाया गया था। 2.1.शराब के अर्क की तैयारी: स्प्रे ड्रायर

अनुसंधान के प्रारंभिक चरणों के दौरान, हमने कोशिकाओं के लिए विषाक्त वाइन के अल्कोहल अंश को हटाने के लिए एक विधि का अध्ययन किया। सुखाने की प्रक्रिया के लिए एक मिनी स्प्रे ड्रायर बी {{0}} (BUCHIItalia srl, Cornaredo, इटली) का उपयोग किया गया था। प्रारंभ में, 100 एमएल वाइन के एक विभाज्य को क्रमशः 25 और 70 डिग्री के इनलेट और आउटलेट तापमान (नाइट्रोजन) के साथ सुखाया गया था; प्रवाह दर 15 प्रतिशत निर्धारित की गई थी। इसके बाद, वाइन का एक 100mL भाग 0.2g xanthan गम और गम के घुलनशीलता के लिए आवश्यक पानी की न्यूनतम मात्रा के साथ जोड़ा गया था। इनलेट और आउटलेट तापमान (नाइट्रोजन) क्रमशः 135 और 70 डिग्री थे; फ़ीड प्रवाह दर 12 प्रतिशत पर सेट की गई थी।

2.2.शराब के अर्क की तैयारी: रोटावापोर

हमने 500 ग्राम को ठीक से वाष्पित किया और बुची रोटावापोर卵आर द्वारा लाल और सफेद वाइन का वजन किया -10 (बुची इटालिया एसआरएल, कॉर्नारेडो, इटली) 500 एमएल फ्लास्क में, 55 डिग्री के तापमान के साथ, 5 के बराबर फ्लास्क रोटेशन की गति, और वैक्यूम की स्थिति 60 एमएमएचजी के बराबर। प्रारंभ में, 2 वाइन के नमूने पूरी तरह से सूखे लाए गए थे। फिर, हमने अल्कोहल अंश को हटाने के लिए, 20 मिनट के निर्धारित समय के साथ, नियंत्रित वाष्पीकरण के अधीन किया।

2.3.एचपीएलसी विश्लेषण

तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी-एमएस) विश्लेषण डी'उर्सो एट अल के अनुसार किया गया था। 2020） 25】 थोड़े बदलाव के साथ। संक्षेप में, 1 मिलीग्राम/एमएल (हो में) की अंतिम सांद्रता में रोटावापोर वाष्पीकरण से पहले और बाद में लाल और सफेद वाइन के 5 μL को क्वाटरनेरी एक्सेला 6 0 0 से गठित तरल क्रोमैटोग्राफी प्रणाली में इंजेक्ट किया गया था। पंप और एक एक्सेला ऑटोसैंपलर, इलेक्ट्रोस्प्रे आयनीकरण (ईएसआई) के साथ एक रैखिक ट्रैप-ऑर्बिट्रैप हाइब्रिड मास स्पेक्ट्रोमीटर (एलटीक्यू-ऑर्बिट्रैप एक्सएल, थर्मो फिशर साइंटिफिक, ब्रेमेन, जर्मनी) से जुड़ा है। क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण C18 मून कॉलम (100 × 2.0 मिमी, कण आकार 5um; फेनोमेनेक्स) पर आयोजित किया गया था, जिसमें 0.1 प्रतिशत फॉर्मिक एसिड (विलायक ए) और 0.1 प्रतिशत फॉर्मिक एसिड (विलायक बी) एच 2 ओ और सीएचएससीएन का उपयोग एलुएंट चरणों के रूप में किया गया था। निम्नलिखित बाइनरी ग्रेडिएंट 200 μL/मिनट∶ 0-35 मिनट, 5 से 95 प्रतिशत B） और 35-40 मिनट पर लागू किया गया था, लोकतांत्रिक 95 प्रतिशत B ESI स्रोत पैरामीटर इस प्रकार थे: केशिका वोल्टेज {{ 25}} वी; ट्यूब लेंस वोल्टेज-176.47; केशिका तापमान 280 डिग्री; म्यान और सहायक गैस प्रवाह (N2),15 और 5; स्वीप गैस 0; स्प्रे वोल्टेज 5. एमएस स्पेक्ट्रा को एम/जेड 180-1400 को कवर करते हुए पूर्ण रेंज अधिग्रहण द्वारा अधिग्रहित किया गया था। विखंडन अध्ययन के लिए, एलसी-एमएस विश्लेषण में सबसे गहन चोटियों के अनुरूप अग्रदूत आयनों का चयन करते हुए, एक डेटा-निर्भर स्कैन प्रयोग किया गया था। Xcalibur सॉफ्टवेयर संस्करण 2.1 का उपयोग उपकरण नियंत्रण, डेटा अधिग्रहण और डेटा विश्लेषण के लिए किया गया था।

2.4.एमटीटी व्यवहार्यता परख

उनके संभावित साइटोटोक्सिक प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए, लाल और सफेद शराब के अर्क का परीक्षण एचएफएफएल पर अलग-अलग सांद्रता (1 0 0,200,300,400, और 500 मिलीग्राम / एमएल) पर 24 से 72 घंटे तक किया गया था, 3- के वर्णमिति परीक्षण का उपयोग करके। (4,5-डाइमिथाइलथियाज़ोल-2-यल)-2.5-डिपेनिलटेट्राजोलियम (एमटीटी) (सिग्मा-एल्ड्रिच, सेंट लुइस, एमओ, यूएसए)। महत्वपूर्ण कोशिकाएं इस कॉम-पाउंड को कम करने में सक्षम थीं, जिससे 570 एनएम पर स्पेक्ट्रोफोटोमीटर द्वारा मात्रा निर्धारित किया जा सकता है। HFF1 को 96-वेल प्लेट्स में 5000 सेल्स/वेल की सांद्रता में रखा गया था। अनुपचारित नियंत्रण के रूप में उपयोग की जाने वाली कोशिकाओं को एकमात्र बुनियादी बढ़ते माध्यम में उगाया गया था। ऊष्मायन अवधि के अंत में, अर्क वाले माध्यम को हटा दिया गया था, और 0.65 मिलीग्राम / एमएल की अंतिम एकाग्रता में एमटीटीटी के 10 μL को प्रत्येक कुएं में जोड़ा गया था और 2 घंटे के लिए ऊष्मायन किया गया था।सिस्टैंच जीवन विस्तारऊष्मायन के बाद, फॉर्मेज़न को डीएमएसओ में भंग कर दिया गया था और 570 एनएम (अक्रिबिस साइंटिफिक, कॉमन फार्म, फ्रॉग एलएन, नॉट्सफोर्ड WA16 OJG, ग्रेट ब्रिटेन) पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रीडिंग द्वारा अवशोषण का पता लगाया गया था। विभिन्न अर्क की उपस्थिति में सुसंस्कृत कोशिकाओं की व्यवहार्यता की गणना अनुपचारित नियंत्रण की तुलना में प्रतिशत सेल व्यवहार्यता के रूप में की गई थी: (OD570 उपचारित कोशिकाएं) × 100/(OD570 नियंत्रण)।

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2.5.एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि

शराब के अर्क की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का मूल्यांकन कैटेलेज गतिविधि का परीक्षण करके किया गया था, जो पानी और ऑक्सीजन में हाइड्रोजन पेरोक्साइड को कम करने में सक्षम एंजाइम है। इस्तेमाल किए गए वर्णमिति परख (कैटालेस परख किट) (सिग्मा-एल्ड्रिच, सेंट लुइस, एमओ, यूएसए) स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रीडिंग द्वारा उपचारित कोशिकाओं में इस एंजाइम की गतिविधि के मूल्यांकन की अनुमति देता है। कोशिकाओं को 100 μM हाइड्रोजन पेरोक्साइड H2O2- के साथ 1 घंटे के उपचार द्वारा जीर्णता के लिए प्रेरित किया गया था और बाद में 24,48 के लिए विभिन्न सांद्रता (10, 200 300, 400, और 500 मिलीग्राम / एमएल) में अर्क की उपस्थिति में खेती की गई थी। , और 72 एच। ऑक्सीडेटिव तनाव के सकारात्मक नियंत्रण के रूप में उपयोग की जाने वाली कोशिकाओं को H2 के संपर्क में आने के बाद बेसल ग्रोइंग माध्यम में विकसित किया गया था। नियंत्रण के रूप में उपयोग की जाने वाली कोशिकाओं को H2O2 के पूर्व-जोखिम के बिना, अकेले बेसल बढ़ते माध्यम में उगाया गया था। ऊष्मायन समय के अंत में, रंग के विकास का मूल्यांकन करने के लिए 15 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर किट में मौजूद अभिकर्मकों के साथ नमूने, इलाज और नियंत्रण दोनों को ऊष्मायन किया गया था, और प्रत्येक के अवशोषण को स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रीडिंग द्वारा 520 पर मापा गया था। एनएम (अक्रिबिस साइंटिफिक, कॉमन फार्म, फ्रॉग एलएन, नॉट्सफोर्ड डब्ल्यूए16 ओजेजी, ग्रेट ब्रिटेन)। उत्प्रेरक की गतिविधि की गणना प्रत्येक नमूने में मौजूद माइक्रोमोल्स की संख्या पर की गई और अनुपचारित नियंत्रण की गतिविधि के साथ तुलना की गई।

2.6. -गैलेक्टोसिडेज़ सेनेसेंस परख

-गैलेक्टोसिडेज़ वर्णमिति परख (सेल सिग्नलिंग, एमए, यूएसए) का उपयोग संस्कृति में सेन्सेंट कोशिकाओं की पहचान करने के लिए किया गया था। HFF1 को 24-वेल प्लेट्स में, सफेद और रेड वाइन के अर्क की उपस्थिति में, कुल 72 घंटे के लिए 500 मिलीग्राम/एमएल की सांद्रता में उगाया गया था। कोशिकाओं को पहले 100 uM हाइड्रोजन पेरोक्साइड (H-O2) के साथ 1 घंटे के उपचार द्वारा बुढ़ापा के लिए प्रेरित किया गया था, ऊष्मायन समय के अंत में, पेरोक्साइड युक्त माध्यम को हटा दिया गया था, और वातानुकूलित सांद्रता वाले ताजा माध्यम को कोशिकाओं में जोड़ा गया था। अनुपचारित नियंत्रण के रूप में उपयोग की जाने वाली कोशिकाओं को H2O2 के पूर्व संपर्क के बिना, अकेले बढ़ते माध्यम की उपस्थिति में सुसंस्कृत किया गया था। इसके बजाय, पेरोक्साइड के साथ पूर्व-उपचारित कोशिकाओं का उपयोग सामान्य विकास माध्यम में सुसंस्कृत, बुढ़ापा के सकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था। अर्क के साथ 72 घंटे के उपचार के बाद, सभी कोशिकाओं को तय किया गया और प्रकाश माइक्रोस्कोप के तहत अवलोकन के लिए डाई के साथ जोड़ा गया। 2.7.सांख्यिकीय विश्लेषण

सामाजिक विज्ञान संस्करण 13 सॉफ्टवेयर (SPSSInc, शिकागो, IL, USA) के लिए सांख्यिकीय पैकेज का उपयोग करके सांख्यिकीय विश्लेषण किया गया था।सिस्टैंचे न्ज़ूप्रत्येक उपचार के लिए 3 तकनीकी प्रतिकृति के साथ 2 बार प्रयोग किए गए। प्रत्येक समूह विचरण के वितरण का मूल्यांकन क्रुस्कल-वालिस रैंक योग और विलकॉक्सन हस्ताक्षरित-रैंक परीक्षण के साथ किया गया था, एक पी-मान मानते हुए<0.05 as="" statistically="">

3। परिणाम

3.1. रोटावापोर द्वारा वाइन एक्सट्रैक्शन वाइन के फेनोलिक प्रोफाइल को बनाए रखते हुए एक्सट्रैक्शन की गुणवत्ता में सुधार करता है

वाइन निकालने का पहला प्रयास एक स्प्रे ड्रायर द्वारा किया गया था, जो वाइन से अल्कोहल अंश को हटाने के लिए उपयुक्त एक तेज़ और सरल तकनीक थी। वैसे भी, प्राप्त अर्क हमारे दायरे के लिए उपयुक्त नहीं था, इसलिए, जैविक और रासायनिक विश्लेषण के लिए नमूना प्राप्त करने के लिए वैक्यूम के तहत सरल और सस्ता वाष्पीकरण माना जाता था। 500 ग्राम वाइन से शुरू होकर 55 डिग्री पर काम करते हुए, 20 मिनट के बाद, 262 ग्राम अर्क बरामद किया गया।

वाष्पीकरण चरण के दौरान शराब में निहित पॉलीफेनोल्स की किसी भी गिरावट का पता लगाने के लिए, उपचार से पहले और बाद के नमूनों को तरल क्रोमैटोग्राफी विश्लेषण के अधीन किया गया था। आंकड़े 1 और 2 वाष्पीकरण से पहले और बाद में लाल और सफेद वाइन के एलसी-ईएसआई-एलटीक्यू-ऑर्बिट्रैप एमएस प्रोफाइल दिखाते हैं। डेटा अधिग्रहण नकारात्मक आयनीकरण मोड में किया गया था; यह ज्ञात था कि नकारात्मक आयनीकरण मोड अधिक चयनात्मक था और फेनोलिक यौगिकों के लिए अधिक संवेदनशीलता प्राप्त करने की अनुमति देता है। रेड वाइन के नमूनों में 33 फेनोलिक यौगिकों की पहचान की गई है, और व्हाइट वाइन के नमूनों में 26 यौगिकों की पहचान की गई है (तालिका 1 और 2)। फिंगरप्रिंट ने नमूनों में फेनोलिक एसिड, कैटेचिन और संबंधित प्रोएथोसायनिडिन, स्टिलबेन्स और फ्लेवोनोइड ग्लाइकोसाइड की उपस्थिति को दिखाया। वाष्पीकरण से पहले और बाद में रेड वाइन के प्रोफाइल में मामूली मात्रात्मक अंतर (चित्र 1) का पता चला। जैसा कि अपेक्षित था, व्हाइट वाइन की तुलना में रेड वाइन क्रोमैटोग्राम अधिक भीड़ में थे, जिसका अर्थ है कि रेड वाइन में सफेद की तुलना में अधिक पॉलीफेनोल यौगिक होते हैं। (चित्र 2)। गुणात्मक दृष्टिकोण से, कच्चे नमूने और संवाददाता शराब निकालने समकक्ष थे।

3.2. शराब के अर्क सेल व्यवहार्यता और एंटीऑक्सीडेंट प्रतिक्रिया में सुधार करते हैं

एमआईटी परख ने सभी परीक्षण किए गए सांद्रता (चित्रा 3) और जोखिम के समय के लिए शराब के अर्क की गैर-विषाक्तता को दिखाया, अनुपचारित कोशिकाओं को नियंत्रित करने की तुलना में सेल व्यवहार्यता को बनाए रखा। केवल उच्च सांद्रता (400 और 500 मिलीग्राम / एमएल सफेद और 500 मिलीग्राम / एमएल रेड वाइन के अर्क) के लिए, क्या कोशिकाओं ने 24 घंटे (पैनल ए) और 48 घंटे (पैनल बी) के बाद सेल व्यवहार्यता में काफी कमी दिखाई है। अनुपचारित कोशिकाओं को नियंत्रित करें। विभिन्न अर्क के साथ इलाज किए गए कोशिकाओं ने भी बेहतर एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि दिखाई, ऑक्सीजन और पानी में एच-ओ 2 के क्षरण में उत्प्रेरक गतिविधि को उत्तेजित किया, कोशिकाओं को ऑक्सीडेटिव तनाव-प्रेरित क्षति (चित्रा 4) से बचाया। उपचारित कोशिकाओं में नियंत्रण की तुलना में एंटीऑक्सिडेंट गतिविधि में सुधार, उपचार के 24 घंटे के बाद पहले से ही दिखाई दे रहा था, विशेष रूप से उच्च सांद्रता (500 मिलीग्राम / एमएल) (चित्रा 4 ए) के लिए, 48 घंटे में चरम पर पहुंचने के लिए, उच्च सांद्रता के लिए सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण ( चित्रा 4बी) और फिर 72एच (चित्रा 4सी) के बाद स्थिर।

3.3. एक मजबूत तनावपूर्ण घटना के संपर्क में आने के बावजूद, वाइन एक्स्ट्रेक्ट सेल्युलर एजिंग का प्रतिकार करता है

चित्र 5 विभिन्न बढ़ती परिस्थितियों में -galactosidase की गतिविधि को दर्शाता है। दो अर्क (500 मिलीग्राम / एमएल पर सफेद और लाल) की उपस्थिति में सुसंस्कृत कोशिकाओं ने नीली सकारात्मक कोशिकाओं की संख्या में स्पष्ट कमी दिखाई, और इसलिए, केवल की उपस्थिति में सुसंस्कृत नियंत्रण कोशिकाओं की तुलना में, वृद्धावस्था, बढ़ते माध्यम (Ctrl) और बिना अर्क के H2O2 के संपर्क में आने वाली कोशिकाओं के लिए (Ctrl H2O2)।

4। चर्चा

पॉलीफेनोल्स वाइन में सबसे प्रचुर मात्रा में बायोएक्टिव अणु हैं, जो हाल ही में कॉस्मेटिक अनुप्रयोगों के क्षेत्र में रुचि पर ध्यान केंद्रित कर रहे हैं [26]। पॉलीफेनोल्स पौधों में व्यापक रूप से पाए जाने वाले यौगिकों का एक समूह है, जो संरचनात्मक दृष्टिकोण से बहुत अलग है लेकिन खाद्य पदार्थों और पौधों के ऑर्गेनोलेप्टिक और पोषण गुणों के लिए जिम्मेदार है [14]। कैंसर, हृदय रोगों, मधुमेह, ऑस्टियोपोरोसिस, और न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों [27-29] से रक्षा करते हुए, उनका सकारात्मक प्रभाव भी होता है। अन्य लेखकों ने पहले ऑक्सीडेटिव तनाव और सूजन [30] का मुकाबला करने के लिए उनके गुणों का वर्णन किया था। विशेष रूप से, एथेरोस्क्लेरोसिस का प्रसिद्ध निवारक प्रभाव एलडीएल कोलेस्ट्रॉल की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि पर निर्भर करता है, जिसके ऑक्सीकरण से श्वेत रक्त कोशिकाओं द्वारा कब्जा कर लिया जाएगा और इसके बाद एथेरोमाटस पट्टिका का निर्माण होगा [31,32]। इस संदर्भ में, वाइन हाल ही में आंतों के संक्रमण को रोकने के सर्वोत्तम तरीकों में से एक के रूप में उभरा, जिसमें ग्राम-पॉजिटिव और ग्राम-नकारात्मक सूक्ष्मजीवों, जैसे साल्मोनेलोसिस, शिगेलोसिस, कोलीबैसिलोसिस, स्टेफिलोकोसी और स्ट्रेप्टोकोकी के खिलाफ एंटीवायरल और एंटी-बैक्टीरियल गतिविधि दिखाई गई। [334] .

रेस्वेराट्रोल को वाइन में मौजूद सबसे प्रभावी एंटीऑक्सिडेंट में से एक माना जाता है, जो त्वचा को मुक्त कणों से बचाता है और टायरोसिनेस सक्रियण [35] को रोककर उम्र बढ़ने की प्रक्रिया में देरी करता है। इसके अलावा, यह ग्लाइकोसामिनोग्लाइकेन्स के उत्पादन को प्रभावित करता है, जो डर्मिस में पानी के पुनर्वितरण को सुविधाजनक और नियंत्रित करता है, इसके संतुलन को बहाल करता है और स्थायी जलयोजन की ओर ले जाता है [36]। इसके अलावा, रेस्वेराट्रॉल डीएनए ऑक्सीडेटिव क्षति के खिलाफ सुरक्षात्मक प्रभाव दिखाते हुए, कोशिका चक्र, एपोप्टोसिस और बुढ़ापा को नियंत्रित करता है। गैलिक एसिड और इसके सभी डेरिवेटिव को सबसे महत्वपूर्ण फेनोलिक एसिड माना जाता है, जिसमें एक उच्च मुक्त कट्टरपंथी मैला ढोने की गतिविधि होती है, जो सेल सिग्नलिंग मार्ग और कैंसर कोशिकाओं के एपोप्टोसिस में हस्तक्षेप करने में सक्षम होती है [38]। Flavonoids और anthocyanins एक महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि करते हैं।लिंग का आकारयह कैंसर कोशिका प्रसार को कम करने और हृदय रोग, मोटापा और मधुमेह से बचाने की अपनी उल्लेखनीय क्षमता के लिए जाना जाता है [39,40]। इसके अलावा, वे न्यूरोनल कार्यों को संशोधित करने और उम्र से संबंधित बीमारियों को रोकने में भी शामिल हैं [41]। फेनोलिक यौगिकों की स्थिरता बनाए रखने के लिए एक कुशल निष्कर्षण प्रक्रिया का महत्वपूर्ण महत्व है [42]। इस संदर्भ में, वर्तमान पेपर में, हमने अल्कोहल-मुक्त सांद्रण का उत्पादन करने के लिए वैक्यूम वाष्पीकरण के तहत प्राप्त दो प्रकार के वाइन अर्क के घटकों का मूल्यांकन किया। यह सुनिश्चित करने के लिए कि वाष्पीकरण प्रक्रिया शराब की गुणवत्ता और मात्रा को प्रभावित नहीं करती है, रेड और व्हाइट वाइन के नमूनों के रासायनिक प्रोफाइल का विश्लेषण किया गया और वाष्पीकरण के बाद की तुलना में उनकी तुलना की गई। नमूनों के फिंगरप्रिंट विश्लेषण ने बड़ी मात्रा में फेनोलिक एसिड, कैटेचिन, और संबंधित प्रोएथोसायनिडिन, स्टिलबेन्स, और फ्लेवोनोइड ग्लाइकोसाइड्स (आंकड़े 1 और 2) की उपस्थिति को दिखाया, जो सामयिक कॉस्मेटिक तैयारी के लिए कच्चे माल के रूप में उपयोगी है [43]। संक्रमित घावों और यूवी-विकिरण सहित कई त्वचा विकारों में उनका संभावित चिकित्सीय प्रभाव संभवतः इन बायोएक्टिव अणुओं [4] की सहक्रियात्मक क्रिया से संबंधित है। ये यौगिक एक्सथाइन ऑक्सीडेज और निकोटिनमाइड एडेनिन डाइन्यूक्लियोटाइड फॉस्फेट (एनएडीपीएच) ऑक्सीडेज जैसे आरओएस-जनरेटिंग एंजाइमों को रोक सकते हैं [45,46]।

ऑक्सीडेटिव तनाव प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों की अधिकता के कारण होता है। एरोबिक चयापचय के दौरान या पर्यावरणीय कारकों के संपर्क में आने के बाद इलेक्ट्रॉनों के नुकसान से प्राप्त आरओएस, अस्थिर प्रजातियां हैं जो जैव-अणुओं की संरचना और कार्य में परिवर्तन को प्रेरित करने में सक्षम हैं [47,48] प्राकृतिक एंटीऑक्सीडेंट सुरक्षा ROS को शारीरिक रूप से उपयुक्त स्तरों के भीतर रखने में शामिल हैं [49,50]। इस प्रक्रिया में कोई भी परिवर्तन त्वचा की उम्र बढ़ने को नकारात्मक रूप से प्रभावित कर सकता है [51,52]। इस संदर्भ में, कई प्राकृतिक अर्क पर्यावरणीय तनाव [53-56] के संपर्क में आने के बाद क्षतिग्रस्त त्वचा में घाव भरने और एंटीऑक्सीडेंट प्रतिक्रियाओं को उत्तेजित करने में उनके लाभकारी प्रभावों के लिए जाने जाते हैं। अब यह ज्ञात है कि त्वचा की उम्र बढ़ने से बाधा कार्य में कमी आती है, जिसके परिणामस्वरूप शुष्क रूप और पर्यावरणीय आक्रमणकारियों के लिए संवेदनशीलता होती है, इसलिए, त्वचा विकारों के लिए एक उच्च जोखिम का प्रतिनिधित्व करता है [57,58]। इसके अलावा, घाव भरना मरम्मत की एक जटिल और गतिशील प्रक्रिया है, त्वचा की अखंडता को बहाल करना, और ऊतक होमियोस्टेसिस [59]। सक्रिय एंटीऑक्सिडेंट अणुओं का सामयिक अनुप्रयोग ऑक्सीडेटिव तनाव के खिलाफ त्वचा की एंटीऑक्सीडेंट प्रणाली का समर्थन कर सकता है, इस प्रकार इसे लंबे समय तक फोटो-एजिंग [24,60] से बचाता है। यह सर्वविदित है कि बायोएक्टिव अणु, जो एंटीऑक्सिडेंट के रूप में कार्य करते हैं, कोशिका जीर्णता और उम्र बढ़ने की प्रक्रियाओं का प्रतिकार करने में सक्षम हैं। सेल सेनेसेंस सेल ग्रोथ अरेस्ट का एक स्थिर चरण है, जो कि सेनेसेंस फेनोटाइप्स (एसएएसपी) से जुड़े स्रावी कारकों के स्राव द्वारा प्रदर्शित होता है। [61]। एसएएसपी पड़ोसी कोशिकाओं को संशोधित कर सकता है, जिससे विभिन्न रोग प्रक्रियाओं में शामिल सिग्नलिंग कैस्केड को सक्रिय किया जा सकता है [62]। सेन्सेंट कोशिकाएं टेलोमेरेस शॉर्टिंग और एक स्थिर प्रो-इंफ्लेमेटरी मिलियू से जुड़ी होती हैं, जो सेल ट्रांसडिफेनरेशन को बढ़ावा देती हैं [63]। इस संदर्भ में, हमने हाल ही में प्रदर्शित किया है कि Myrtus Communis L. स्टेम सेल प्लुरिपोटेंसी और भड़काऊ प्रतिक्रिया को संशोधित करके महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट और पुनर्योजी गुण दिखाता है [64]। पॉलीफेनोल्स से भरपूर इस पौधे के अर्क, ऑक्सीडेटिव तनाव से कोशिकाओं की रक्षा करने में सक्षम हैं, टेलोमेरेज़ रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस (टीईआरटी) की अभिव्यक्ति को प्रेरित करते हैं और समय से पहले होने वाली बुढ़ापा का प्रतिकार करते हैं [65]।

अन्य लेखकों ने पहले दिखाया था कि जीर्ण सूजन का प्रतिकार करके और घाव की मरम्मत के लिए प्रेरित करके जीर्ण कोशिकाओं की ओर चिकित्सीय हस्तक्षेप स्वास्थ्य को बहाल कर सकता है।[66] फिर भी, अन्य लेखकों ने यह भी खुलासा किया कि क्वेरसेटिन, फ्लेवोनोइड्स और गैलिक एसिड प्रत्यक्ष मुक्त कट्टरपंथी मैला ढोने की गतिविधि के कारण होने वाली चोटों को रोक सकते हैं, सेल डिटॉक्सीफिकेशन सिस्टम, जैसे कि सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज, कैटेलेज और ग्लूटाथियोन पेरोक्सीडेज [67] का समर्थन करते हैं। Catalase ROS विषहरण में शामिल सबसे महत्वपूर्ण एंजाइमों में से एक है, जिसके नियमन से कई उम्र से संबंधित अपक्षयी रोग होते हैं [68,69]।सिस्टैंच पाउडरयह सर्वविदित है कि एक कैटेलेज की कमी पेरोक्सीसोमल डिसफंक्शन [70] के माध्यम से एक त्वरित मधुमेह गुर्दे की चोट से संबंधित है, इस प्रकार सेल प्रसार, भेदभाव, प्रवासन और एपोप्टोसिस [71] सहित जैविक प्रक्रियाओं को प्रभावित करती है। वर्तमान पेपर में, हम दिखाते हैं कि रेड और व्हाइट वाइन के अर्क, अलग-अलग सांद्रता में, ऑक्सीडेटिव तनाव से प्रेरित सेल सिनेसेंस का मुकाबला करने में सक्षम हैं, कैटालेज की गतिविधि को संशोधित करते हैं, जो ऑक्सीडेटिव तनाव (चित्रा 4) के नियमन में शामिल मुख्य एंजाइम है। -गैलेक्टोसिडेज़ (चित्र 5)। हमारे परिणाम प्रदर्शित करते हैं कि शराब के अर्क आरओएस संचय का मुकाबला करने में सक्षम हैं, एच-ओ 2 उपचार के बाद उत्प्रेरित गतिविधि को बढ़ाते हैं, इस प्रकार पुरानी त्वचा रोगों को रोकते हैं और सेन्सेंट कोशिकाओं की संख्या को कम करते हैं। एक साथ लिया गया, हमारे निष्कर्ष बताते हैं कि वैक्यूम वाष्पीकरण के तहत प्राप्त ये शराब के अर्क, इस प्रकार त्वचा की उम्र बढ़ने का मुकाबला करने के लिए नए कॉस्मेटिक उत्पादों के निर्माण के लिए एक दिलचस्प कच्चे माल का प्रतिनिधित्व कर सकते हैं। इसके अलावा इन विट्रो और विवो अध्ययन में भी एकल यौगिकों पर इन परिणामों को ऊतक पुनर्जनन के लिए भविष्य के अनुप्रयोगों में अनुवाद करने में सहायक हो सकता है।

5। निष्कर्ष

त्वचा की उम्र बढ़ना एक गतिशील और बहुक्रियात्मक प्रक्रिया है जो यूवी जोखिम और प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों के संबंधित गठन से प्रेरित है। फोटो-एजिंग के खिलाफ एकमात्र ज्ञात बचाव सन फिल्टर और एंटीऑक्सिडेंट हैं, विशेष रूप से संयोजन में, मुक्त कट्टरपंथी उत्पादन को कम करने और बेअसर करने के लिए। वर्तमान पेपर में, हमने वाइन के अर्क की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता पर ध्यान केंद्रित किया, जिनके फ्लेवोनोइड उम्र बढ़ने का मुकाबला करने में सक्षम हैं, खासकर जब एक चिह्नित तनावपूर्ण घटना के संपर्क में आने वाली कोशिकाओं पर लागू होते हैं। एक नई निष्कर्षण प्रक्रिया के लिए धन्यवाद, हमने फ्लेवोनोइड एंटीऑक्सिडेंट घटकों को गुणात्मक रूप से बदलने के बिना अल्कोहल अंश को हटा दिया। आर्थिक दृष्टिकोण से, यह स्पष्ट है कि शराब कई उप-उत्पादों की तुलना में अधिक महंगी है। यह सर्वविदित है कि कॉस्मेटिक उद्योग भी शराब की तुलना में अधिक महंगे कई कच्चे माल का उपयोग करता है। इस प्रकार लाल और सफेद वाइन के अर्क त्वचा की उम्र बढ़ने से ऊतक पुनर्जनन में सुधार करने के लिए नए कॉस्मेटिक उत्पादों के निर्माण के लिए एक दिलचस्प कच्चे माल का प्रतिनिधित्व कर सकते हैं।

यह लेख एंटीऑक्सीडेंट 2021, 10, 227 से निकाला गया है। https://doi.org/10.3390/antiox10020227 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants