आंत के विवो प्रशासन में बैक्टीरियल कंसोर्टिया एक गैर-यूरोलिथिन-उत्पादक चूहे मॉडल में यूरोलिथिन मेटाबोटाइप ए और बी की नकल करता हैⅡ

परिणाम

डिज़ाइन किए गए प्राइमरों की विशिष्टता और संवेदनशीलता का विश्लेषण और एलेगिबैक्टर और एंटरोक्लोस्टर की जांच

एलेगिबैक्टर और एंटरोक्लोस्टर प्राइमरों और जांच की विशिष्टता की पुष्टि इन अनुक्रम संरेखण कार्यक्रम प्रोबमैच पर उनके अनुक्रमों को अपलोड करके की गई थी। परिणाम दिखाए गए हैंतालिका 1एस और 2एस में।† इसके बाद, सामग्री और विधि अनुभाग में वर्णित अनुकूलित प्रतिक्रिया स्थितियों का उपयोग करके क्यूपीसीआर द्वारा प्राइमरों और जांच की विशिष्टता को सत्यापित किया गया था। 16S rRNA जीन अनुक्रम में एलागिबैक्टर और एंटरोक्लोस्टर के साथ सबसे बड़ी समानता वाले एगरथेलेसी ​​और लैचनोस्पाइरेसी परिवारों की प्रतिनिधि जीवाणु प्रजातियों का परीक्षण मानव आंत में अक्सर पाई जाने वाली अन्य निकट संबंधी प्रजातियों के अलावा किया गया था (तालिका 1S और 2S†)।चित्र। 2 मानक परिमाणीकरण वक्रों के अनुरूप प्रवर्धन प्लॉट दिखाता है।

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सीटी मान को जीवाणु सांद्रता (सीओ) के विरुद्ध लॉग 1 0 जीनोमिक समकक्ष/प्रतिक्रिया (6.25 × 1 0 -6 एनजी, अगुणित जीनोम के लिए) के रूप में प्लॉट किया गया था। जीनोमिक डीएनए का उपयोग करके गणना की गई रैखिक प्रतिगमन वक्र की ढलान −3.78 थी, और आर2 मान 0.99 से अधिक था। क्यूपीसीआर प्रणाली की संवेदनशीलता के संबंध में, टाकमैन मोड का उपयोग करके सकारात्मक प्रतिक्रिया के लिए न्यूनतम 1.5 जीनोम समकक्षों की आवश्यकता थी। ई. आइसोरोलिथिनिफिएन्स और ई. बोल्ट के अंशांकन वक्र के साथ प्राप्त सीटी मान 15.5± 0.7 से 37.8 ± 0.7 तक थे, जबकि परीक्षण किए गए अन्य उपभेदों के लिए कोई डीएनए प्रवर्धन नहीं पाया गया था।

चूहों के मल के नमूनों में एलेगिबैक्टर और एंटरोक्लोस्टर की मात्रा का निर्धारण तीन प्रतिकृति के माध्य को ध्यान में रखते हुए इस विधि (क्यूपीसीआर) से किया गया था। परिणामों को प्रति ग्राम मल में 1 0 बैक्टीरिया के लॉग के रूप में व्यक्त किया गया और 16S rRNA अनुक्रमण द्वारा प्राप्त सापेक्ष बहुतायत मूल्यों के साथ तुलना की गई। हमने एलेगिबैक्टर (आर=0.660, पी <0.001) और एंटरोक्लोस्टर (आर=0.459, पी) दोनों तरीकों से प्राप्त परिणामों के बीच एक सकारात्मक सहसंबंध देखा।< 0.001) (data not shown).

यूरोलिथिन के इन विवोप्रोडक्शन पर मौखिक रूप से प्रशासित बैक्टीरियल कंसोर्टिया का प्रभाव

मल में यूरो विश्लेषण से पता चला कि प्रारंभ में (टी{{0}}), चूहों ने ईए पाउडर (चित्र 3ए-सी) लेने के बाद यूरो का उत्पादन नहीं किया। हालांकि, बैक्टीरियल कंसोर्टिया ए देने के बाद (चित्र 3ए) )और बी (छवि 3बी), चूहे यूरो का उत्पादन करने में सक्षम हो गए। पहले तीन हफ्तों के दौरान, जब समूह ए और बी के चूहों ने केवल ईए पाउडर खाया, यूरो एकाग्रता (सीमा: 0-1.43 माइक्रोग्राम ग्राम− 1) और मल में उनके ईए अग्रदूत (रेंज:0.07-4.54 माइक्रोग्राम जी-1) की मात्रा कम थी। हालाँकि, 21वें दिन से, जब दूसरे ईए स्रोत के रूप में अखरोट की खपत शुरू हुई, तो समूह ए (चित्र 3ए) और बी (चित्र 3बी) में मल ईए (चित्र 3ए-सी) और यूरो उत्पादन में बहुत महत्वपूर्ण वृद्धि हुई। ).

इसके अलावा, समूह ए और बी के बीच यूरो प्रोफाइल में अंतर देखा गया। समूह ए में, मलीय यूरो-सी, यूरो-एम6, यूरो-एम7 और अंतिम मेटाबोलाइट यूरो-ए प्रमुख थे। इसके विपरीत, समूह बी में, तीन अंतिम यूरो (यूरो-ए, यूरोबी, और इसोउरो-ए) मौजूद थे, जबकि मध्यवर्ती दुर्लभ थे। हालाँकि, हाल ही में वर्णित यूरो-जी की मल सांद्रता समूह ए की तुलना में समूह बी में अधिक पाई गई। इसके अलावा, यूरो-बी सांद्रता समूह बी में यूरो-ए और आइसोउरो-ए की तुलना में कम थी। इसके अलावा, यूरो-ए और IsoUro-A, लेकिन Uro-B नहीं, समूह B (चित्र 3B) के सभी चूहों में उत्पादित किया गया था। जब 21वें दिन नियंत्रण चूहों (समूह C) के आहार में अखरोट को शामिल किया गया, तो EA की मल सांद्रता भी अधिक देखी गई। अखरोट की खपत से पहले की तुलना में, जहां मल की सांद्रता बहुत कम थी (चित्र 3C)। हालाँकि, न तो ई-पाउडर के सेवन और न ही अखरोट के सेवन ने नियंत्रण चूहों की आंत में यूरोस के उत्पादन को बढ़ावा दिया (यानी, बिना किसी बैक्टीरियल कंसोर्टिया के)।

मौखिक रूप से प्रशासित बैक्टीरिया का आंतों का उपनिवेशण प्रारंभ में, समूह ए और बी के चूहों द्वारा बैक्टीरिया कंसोर्टिया की खपत शुरू करने से पहले, गोर्डोनिबैक्टर या एलेगिबैक्टर मल के नमूनों में पता लगाने की सीमा के अंतर्गत थे, जब मीसेक-इलुमिना प्लेटफॉर्म (छवि 3 डी-एफ) का उपयोग करके मेटागेनोमिक अनुक्रमण विश्लेषण किया गया था। ). जब क्यूपीसीआर का उपयोग किया गया था,चूहों में गॉर्डनिबैक्टर का स्तर कम था (<5.8 log bacteria per g faeces), and Ellagibacter levels were under the limit of detection (data not shown). In contrast, Enterocloster was detected using the MiSeq-Illumina and qPCR in the faeces of rats from all groups (A, B, and C) at the baseline (Fig. 3D–F). 

समूह ए, बी और सी में एंटरोक्लोस्टर की सापेक्ष प्रचुरता (मतलब ± एसडी) {{0} थी। }}.04 ± 0.06, और 0.13 ± 0.17%, क्रमशः, लेकिन महत्वपूर्ण अंतर के बिना (पी=0.570)। बैक्टीरियल कंसोर्टिया ए और बी के प्रशासन के परिणामस्वरूप संबंधित समूह ए और बी मल में क्रमशः गोर्डोनिबैक्टर और एलेगिबैक्टर की उपस्थिति और क्रमिक वृद्धि हुई (छवि 3 डी और ई)। इसके अलावा, समूह ए और बी (छवि 3 डी और ई) में पूरे अध्ययन के दौरान मल एंटरोक्लोस्टर का स्तर बढ़ गया।

हालाँकि, एलईएफएसई विश्लेषण ने अन्य आंत जीवाणु समूहों में दुर्लभ अंतर दिखाया जब समूह ए और बी के मेटागेनोमिक अनुक्रमण डेटा की तुलना नियंत्रण समूह (छवि 4 ए और बी) से की गई। दिलचस्प बात यह है कि समूह ए में स्ट्रेप्टोकोकस जीनस और स्ट्रेप्टोकोकेसी परिवार की कमी देखी गई। और बी की तुलना नियंत्रण समूह से की गई (चित्र 4ए और बी)। बैक्टीरियल कंसोर्टिया (अध्ययन की समाप्ति तिथि) के मौखिक प्रशासन को रोकने के पांच दिन बाद, समूह बी में एलेगिबैक्टर और एंटरोक्लोस्टर की प्रचुरता में कमी पाई गई, जिसके परिणामस्वरूप यूरो उत्पादन में भी उल्लेखनीय कमी आई (चित्र 3बी और ई)। समूह ए में, गॉर्डोनिबैक्टर की प्रचुरता में कमी देखी गई, लेकिन एंटरोक्लोस्टर की नहीं (छवि 3 ए), जिसके परिणामस्वरूप यूरो एकाग्रता में कमी आई लेकिन समूह बी (छवि 3 डी और ई) की तुलना में कम स्पष्ट थी। नियंत्रण समूह में, एलैगिबैक्टर पूरे अध्ययन के दौरान पता लगाने की सीमा के अंतर्गत था, और एंटरोक्लोस्टर और गोर्डोनिबैक्टर बहुत निम्न स्तर पर रहे (चित्र 3F)।

मौखिक रूप से प्रशासित आंत बैक्टीरिया की विषाक्तता का अध्ययन

बैक्टीरियल कंसोर्टिया के अंतर्ग्रहण से संभावित दुष्प्रभावों की जांच की गई। नियंत्रण समूह की तुलना में समूह ए और बी के चूहों में बैक्टीरियल कंसोर्टिया के 4 सप्ताह के मौखिक प्रशासन के बाद विकास, वजन बढ़ने, भोजन सेवन और महत्वपूर्ण अंगों पर कोई प्रतिकूल प्रभाव नहीं देखा गया। हालाँकि, नर चूहों का वजन 107.4 ± 2.4 ग्राम बढ़ा, जबकि मादा चूहों का वजन कम हुआअध्ययन के अंत में नियंत्रण समूह की तुलना में बिना किसी अंतर के वजन (25.7 ± 5 ग्राम)। पिंजरे में भोजन की खपत नर चूहों के लिए 63.1 ± 1.4 ग्राम और मादा चूहों के लिए 33.8 ± 1.8 ग्राम थी। हालाँकि, पानी की खपत क्रमशः 136.1 ± 37.2 ग्राम और 76 थी। .

कुछ चर में पुरुषों और महिलाओं के बीच हेमेटोलॉजिकल अंतर देखा गया, जैसे एरिथ्रोसाइट वितरण (आरडीडब्ल्यू, पी {{0}}.005), ल्यूकोसाइट्स (पी=0.005), प्लेटलेट वितरण चौड़ाई (पीडीडब्ल्यू, पी) =0.005), और रेटिकुलोसाइट हीमोग्लोबिन सामग्री (सीएचआर, पी=0.013)(तालिका 2)। फिर भी, जीवाणु संघ (समूह ए और बी) और नियंत्रण समूह (समूह सी) का उपभोग करने वाले समूहों के बीच किसी भी चर के लिए कोई अंतर नहीं देखा गया। जैव रासायनिक मूल्यों का भी विश्लेषण किया गया, और केवल कुछ चर में पुरुषों और महिलाओं के बीच अंतर पाया गया जैसे कि क्रिएटिनिन इंडेक्स (पी <0.001), फॉस्फोरस (पी=0.007), क्षारीय फॉस्फेट (एएलपी) (पी {{13) }}.003), और थायरोक्सिन (T4) (पी=0.002)(तालिका 3)। हालाँकि, बैक्टीरियल कंसोर्टिया (समूह ए और बी) और नियंत्रण समूह (समूह सी) का सेवन करने वाले समूहों के बीच किसी भी चर के लिए कोई अंतर नहीं देखा गया।

कब्ज-सिस्टैन्च से राहत के लिए प्राकृतिक हर्बल औषधि

सिस्टैंच परजीवी पौधों की एक प्रजाति है जो ओरोबैंचेसी परिवार से संबंधित है। ये पौधे अपने औषधीय गुणों के लिए जाने जाते हैं और सदियों से पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) में उपयोग किए जाते रहे हैं। सिस्टैंच प्रजातियाँ मुख्य रूप से चीन, मंगोलिया और मध्य एशिया के अन्य हिस्सों के शुष्क और रेगिस्तानी क्षेत्रों में पाई जाती हैं। सिस्टैंच पौधों की विशेषता उनके मांसल, पीले रंग के तने हैं और उनके संभावित स्वास्थ्य लाभों के लिए उन्हें अत्यधिक महत्व दिया जाता है। टीसीएम में, माना जाता है कि सिस्टैंच में टॉनिक गुण होते हैं और आमतौर पर इसका उपयोग किडनी को पोषण देने, जीवन शक्ति बढ़ाने और यौन क्रिया को समर्थन देने के लिए किया जाता है। इसका उपयोग उम्र बढ़ने, थकान और समग्र कल्याण संबंधी समस्याओं के समाधान के लिए भी किया जाता है। जबकि सिस्टैंच का पारंपरिक चिकित्सा में उपयोग का एक लंबा इतिहास है, इसकी प्रभावकारिता और सुरक्षा पर वैज्ञानिक अनुसंधान जारी है और सीमित है। हालाँकि, इसमें विभिन्न बायोएक्टिव यौगिक जैसे फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स, इरिडोइड्स, लिग्नान और पॉलीसेकेराइड शामिल हैं, जो इसके औषधीय प्रभावों में योगदान कर सकते हैं।

वेसिस्टैंच कासिस्टैंच पाउडर, सिस्टैंच गोलियाँ, सिस्टैंच कैप्सूल, और अन्य उत्पादों का उपयोग करके विकसित किया जाता हैरेगिस्तानcistancheकच्चे माल के रूप में, ये सभी कब्ज से राहत दिलाने में अच्छा प्रभाव डालते हैं। विशिष्ट तंत्र इस प्रकार है: माना जाता है कि सिस्टैंच के पारंपरिक उपयोग और इसमें मौजूद कुछ यौगिकों के आधार पर कब्ज से राहत के लिए संभावित लाभ हैं। जबकि कब्ज पर सिस्टैंच के प्रभाव पर विशेष रूप से वैज्ञानिक शोध सीमित है, ऐसा माना जाता है कि इसमें कई तंत्र हैं जो कब्ज से राहत देने की क्षमता में योगदान कर सकते हैं। रेचक प्रभाव:Cistancheपारंपरिक चीनी चिकित्सा में कब्ज के इलाज के रूप में लंबे समय से इसका उपयोग किया जाता रहा है। ऐसा माना जाता है कि इसमें हल्का रेचक प्रभाव होता है, जो मल त्याग को बढ़ावा देने और कब्ज पैदा करने में मदद कर सकता है। इस प्रभाव को सिस्टैंच में पाए जाने वाले विभिन्न यौगिकों, जैसे फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड और पॉलीसेकेराइड के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है। आंतों को नमी प्रदान करना: पारंपरिक उपयोग के आधार पर, सिस्टैंच को मॉइस्चराइजिंग गुण माना जाता है, जो विशेष रूप से आंतों को लक्षित करता है। आंतों के जलयोजन और स्नेहन को बढ़ावा देने से औजारों को नरम करने और आसान मार्ग को सुविधाजनक बनाने में मदद मिल सकती है, जिससे कब्ज से राहत मिलती है। सूजनरोधी प्रभाव: कब्ज कभी-कभी पाचन तंत्र में सूजन से जुड़ा हो सकता है। सिस्टैंच में फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स और लिग्नांस सहित कुछ यौगिक होते हैं, जिनके बारे में माना जाता है कि इनमें सूजन-रोधी गुण होते हैं। आंतों में सूजन को कम करके, यह मल त्याग की नियमितता में सुधार और कब्ज से राहत दिलाने में मदद कर सकता है।