पेरिमेनोपॉज़ल सिंड्रोम पशु मॉडल पर फेनिलएथिल अल्कोहल ग्लाइकोसाइड्सिनसिस्टैंच का हस्तक्षेप अनुसंधान Ⅱ

प्रयोग 1 सिस्टांच फेनिलथेनॉइड ग्लाइकोसाइड की तैयारी 1 औषधीय सामग्री का स्रोत

सिस्टान्चे ट्यूबुलोसा, चेंग्दू वेसिस्टान्चे बायोटेक लिमिटेड, बैच संख्या: 20130501.

2 अभिकर्मक

95% इथेनॉल (चिकित्सा ग्रेड); AB-8 मैक्रोपोरस सोखना राल, टियांजिन गुआंगफू फाइन केमिकल रिसर्च इंस्टीट्यूट, बैच संख्या: 20130618।

इचिनाकोसाइड संदर्भ पदार्थ, चाइना इंस्टीट्यूट फॉर द कंट्रोल ऑफ फार्मास्युटिकल एंड बायोलॉजिकल प्रोडक्ट्स द्वारा प्रदान किया गया, बैच संख्या: 111670-200503.3

सिस्टान्चे को काम करने में कितना समय लगता है?

तैयारी विधि

साहित्य पद्धति [19] का संदर्भ दिया गया और हेनान कॉलेज ऑफ ट्रेडिशनल चाइनीज मेडिसिन के ड्रग एनालिसिस विभाग के प्रोफेसर फेंग सुक्सियांग के मार्गदर्शन में आयोजित किया गया।पीस सिस्टैंचमोटे पाउडर में, 70% इथेनॉल की मात्रा का 10 गुना रिफ्लक्स में मिलाएं, और दो बार निकालें, हर बार 1.5 घंटे, दो अल्कोहल अर्क को मिलाएं, कम दबाव में सांद्रण करें जब तक कि अल्कोहल की गंध न रह जाए, और आसुत जल (सांद्रता 0.5 ग्राम औषधीय सामग्री / एमएल है) के साथ नमूना समाधान के रूप में फैलाएं। AB-8 राल (स्तंभ दवा: राल 1:10 है) से गुजारें, नमूने को एक प्रवाह में लोड करें, और इसे 5 घंटे तक खड़ा रहने दें जब तक कि यह पूरी तरह से सोख न जाए। सबसे पहले, आसुत जल के स्तंभ मात्रा के 10 गुना से धो लें, पानी को त्याग दें, और फिर स्तंभ मात्रा के 10 गुना का उपयोग करें। अशुद्धियों को हटाने के लिए 10% इथेनॉल का उपयोग करें

संदर्भ समाधान के {{0}}.5 एमएल को ठीक से मापें, 5% सोडियम नाइट्राइट समाधान के 1 एमएल को जोड़ें, अच्छी तरह से हिलाएं, और 6 मिनट तक खड़े रहने दें; 10% एल्यूमीनियम नाइट्रेट समाधान के 1 एमएल को जोड़ें, अच्छी तरह से हिलाएं, और 6 मिनट तक खड़े रहने दें; 10% सोडियम हाइड्रोक्साइड समाधान 10 एमएल जोड़ें, पानी के साथ 25 एमएल तक पतला करें, अच्छी तरह से हिलाएं, और संदर्भ समाधान के रूप में काम करने के लिए 18 मिनट तक खड़े रहने दें। 0.5 मिलीलीटरसिस्टांच फेनिलएथेनॉल ग्लाइकोसाइडघोल को परीक्षण घोल की तरह ही तैयार किया गया था। संदर्भ पदार्थ को जोड़े बिना समानांतर नमूने का उपयोग करें और घोल को खाली के रूप में परीक्षण करें, और उसी तरह से खाली घोल तैयार करें। यूवी स्पेक्ट्रोफोटोमीटर पर, 200-800nm की तरंग दैर्ध्य सीमा में उपरोक्त तीन समाधानों पर एक पूर्ण तरंग दैर्ध्य स्कैन करें। संदर्भ पदार्थ और परीक्षण समाधान दोनों में 507nm पर अधिकतम अवशोषण शिखर हैं, इसलिए 507nm को अवशोषण तरंग दैर्ध्य के रूप में निर्धारित किया जाता है।

सिस्टान्चे फेनिलएथेनॉल ग्लाइकोसाइड नमूने के रंग विकास + इचिनासिया टेंजेरीन संदर्भ पदार्थ के रंग विकास (अध्यारोपित तुलना) के बाद, चित्र 1 देखें।

चित्र 1 सिस्टान्चे फेनिलथेनॉइड ग्लाइकोसाइड नमूने के रंग विकास के बाद + इचिनासिया मैंडरिन ऑरेंज संदर्भ पदार्थ के रंग विकास के बाद चित्र 5 सामग्री का पता लगाने की विधि

परीक्षण किए जाने वाले घोल का 1 एमएल ठीक से मापें, 5% सोडियम नाइट्राइट घोल का 1 एमएल डालें, अच्छी तरह हिलाएं और 6 मिनट तक खड़े रहने दें; 10% एल्युमिनियम नाइट्रेट घोल का 1 एमएल डालें, अच्छी तरह हिलाएं और 6 मिनट तक खड़े रहने दें; 10% सोडियम हाइड्रॉक्साइड डालें घोल 10 एमएल है, पानी के साथ 25 एमएल तक पतला करें, अच्छी तरह हिलाएं और 18 मिनट तक खड़े रहने दें। सैंपल घोल को बिना जोड़े समानांतर सैंपल को खाली के रूप में इस्तेमाल करें और उसी तरह खाली घोल तैयार करें। 507nm पर UV स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करके मापा गया। 6 पद्धतिगत समीक्षा

6.1 संदर्भ समाधान और नमूना समाधान की तैयारी

संदर्भ समाधान की तैयारी: 3.06 मिलीग्राम इचिनाकोसाइड संदर्भ मानक को ठीक से तौलें, जिसे स्थिर वजन तक सुखाया गया है, इसे 25 एमएल वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखें, घुलने के लिए 70% घोल डालें और निशान तक पतला करें, अच्छी तरह से हिलाएं और एक तरफ रख दें। मानक सांद्रता 0.1224 मिलीग्राम/एमएल है।

नमूना समाधान की तैयारी: ठीक 5 मिलीग्राम वजन करेंसिस्टान्चे फेनिलथेनॉइड ग्लाइकोसाइड निकालनाएक 10 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में इसे 70% इथेनॉल के साथ घोलें और मात्रा तक पतला करें।

6.2 मानक वक्र की तैयारी

संदर्भ घोल के {{0}}, 1.0, 2.0, 3.0, 4.{{10}}, 5.0, 6.0 mL को सटीक रूप से खींचे, रंग विकसित करें और 4.2 में विधि के अनुसार मात्रा में पतला करें, और 507 nm पर अवशोषण मान मापें। प्रतिगमन वक्र बनाने के लिए सांद्रता बनाम अवशोषण का उपयोग करते हुए, प्रतिगमन समीकरण है: Y=20.296X-0.0015 (r=0.9994), और रैखिक सीमा 4.90-29.4ug/ml है।

6.3 परिशुद्धता परीक्षण

नमूना समाधान लें और इसे "सामग्री निर्धारण विधि" आइटम के अनुसार समानांतर में छह बार मापें। अवशोषण के सापेक्ष मानक विचलन की गणना करें। अवशोषण क्रमशः {{0}}.299, 0.299, 0.298, 0.297, 0.297, 0.297 हैं। औसत अवशोषण=0.298, RSD=0.330% (n =6)।

6.4 स्थिरता परीक्षण

नमूना घोल की उचित मात्रा लें, और "सामग्री निर्धारण विधि" आइटम के अनुसार, घोल के पूरी तरह से रंग जाने के बाद {{0}}, 15, 30, 50, और 60 मिनट पर अवशोषण मान मापें, और सापेक्ष मानक विचलन की गणना करें। अवशोषण क्रमशः 0.304, 0.303, 0.300, और 0.296 हैं। , 0.295, 0.295, औसत अवशोषण=0.299, RSD=1.362% (n=5)।

6.5 पुनरावर्तनीयता परीक्षण

एक नमूना लें, "नमूना समाधान की तैयारी" आइटम के अनुसार 6 नमूना समाधान तैयार करें, और "सामग्री निर्धारण विधि" आइटम के अनुसार अवशोषण मूल्य को मापें, और सामग्री की गणना करें। सामग्री क्रमशः 65.2%, 65.6%, 66.7%, 67.2% और 66.5% है। , 65.8%, औसत सामग्री 66.2%, RSD=1.142% (n=6)।

6.6 नमूना पुनर्प्राप्ति परीक्षण

ज्ञात सामग्री के साथ नमूना समाधान के 0.5 एमएल को सटीक रूप से निकालें, कुल 9 भाग, और क्रमशः मानक समाधान के 200, 250 और 300 ul जोड़ें। सिस्टांच फेनिलएथेनॉल ग्लाइकोसाइड की रिकवरी दर और सापेक्ष मानक विचलन को मापें और गणना करें। रिकवरी दर क्रमशः 101.45% और 99.26% हैं। , 98.94%, 101.83%, 99.05%, 99.47%, 98.72%, 99.17%, 100.64%, औसत रिकवरी दर 99.84%, RSD=1.164% (n=9) है।

7 नमूना सामग्री निर्धारण

तालिका 1 सिस्टांच में फेनिलथेनॉइड ग्लाइकोसाइड सामग्री के निर्धारण के परिणाम