उस तंत्र की जांच करना जिसके द्वारा Cistanche Deserticola नेटवर्क फार्माकोलॉजी और प्रायोगिक सत्यापन का उपयोग करके अल्जाइमर रोग का इलाज करता है
Dec 10, 2024
2 परिणाम
2.1 मुख्य सक्रिय अवयवों की स्क्रीनिंग और सिस्टेंच डेजर्टिकोला के घटक लक्ष्य
Cistanche deserticola को TCMSP डेटाबेस और स्विस ADME प्लेटफॉर्म के माध्यम से खोजा गया था, और साहित्य खोज के परिणामस्वरूप 8 मुख्य सक्रिय अवयव, अर्थात् सुचिलैक्टोन, यांगाम्बिन, क्वेरसेटिन, अराचिडोनेट, मार्किन, एक्टिओसाइड, इचिनकोसाइड, और बीटा-सिटोस्टेरोल, कुल 307 के साथ।
2.2 रोग लक्ष्य और वेन आरेख की तैयारी, प्रोटीन-प्रोटीन इंटरैक्शन नेटवर्क (पीपीआई) निर्माण, और गो और केग की स्क्रीनिंग
OMIM, जीनकार्ड और NCBI डेटाबेस के माध्यम से संवर्धन विश्लेषण किया गया था, और स्क्रीनिंग के बाद कुल 2 013 विज्ञापन-संबंधित लक्ष्य प्राप्त किए गए थे। वेनी आरेख ऑनलाइन वेबसाइट में Cistanche Deserticola घटक लक्ष्य और AD- संबंधित लक्ष्यों को आयात करें, और कुल 207 दवा-रोग चौराहे के लक्ष्य प्राप्त करें, और एक वेन आरेख बनाएं, जैसा कि चित्र 1A में दिखाया गया है। दवा-रोग बातचीत का विश्लेषण करने के लिए स्ट्रिंग डेटाबेस में 207 चौराहे के लक्ष्य को आयात करें। फिर डेटा फ़ाइल को साइटोस्केप सॉफ्टवेयर में आयात करें, और डिग्री के बाद, निकटता और संख्यात्मक स्क्रीनिंग के बीच, 42 लक्ष्य और 593 किनारों को प्राप्त किया जाता है। डिग्री आकार की छंटाई के अनुसार, TNF, AKT1, CASP3, PPARG, EGFR, MMP9, ESR1, HIF1A को प्रमुख लक्ष्य जीन के रूप में चुना जाता है, और प्रोटीन-प्रोटीन इंटरैक्शन नेटवर्क आरेख खींचा जाता है (चित्रा 1 बी)।
Cistanche Deserticola द्वारा AD के उपचार में शामिल लक्ष्यों की जीवन प्रक्रिया को समझाने के लिए, Metascape डेटाबेस का उपयोग ऊपर प्राप्त 42 लक्ष्यों पर GO संवर्धन विश्लेषण करने के लिए किया गया था, जिसमें तीन भागों सहित: सेलुलर घटक (CC), आणविक कार्य (MF), और जैविक प्रक्रिया (BP)। परियोजनाओं को p अंक 0 के मानक के साथ जांचा गया था। डेविड ऑनलाइन टूल का उपयोग रोगों और दवाओं के 42 सामान्य प्रमुख लक्ष्यों पर KEGG संवर्धन विश्लेषण करने के लिए किया गया था, और P are0.05 के साथ परियोजनाओं की जांच की गई थी। परिणामों से पता चला कि कुल 172 सिग्नल मार्ग समृद्ध थे। शीर्ष 20 मार्गों को पी मान के अनुसार चुना गया था, और बुलबुला आरेख माइक्रोबायोलॉजी ऑनलाइन प्लेटफॉर्म (चित्रा 1 डी) का उपयोग करके तैयार किया गया था। संवर्धन परिणामों से पता चला है कि एडी के इलाज में सिस्टांच डेजर्टिकोला का तंत्र PI3K-AKT मार्ग, कैंसर मार्ग, आसंजन फोकल और अन्य मार्गों से निकटता से संबंधित हो सकता है।
अंजीर 1 (ए) अल्जाइमर रोग लक्ष्य और cistanche घटक लक्ष्य वेन चार्ट; (बी) प्रोटीन-प्रोटीन इंटरैक्शन नेटवर्क; (C) GO संवर्धन विश्लेषण बबल आरेख; (D) KEGG संवर्धन विश्लेषण बबल आरेख
2.3 ड्रग-इवेंटिएंट-डिसेज़-पाथवे-टारगेट मैप की तैयारी
PPI नेटवर्क निर्माण परिणामों के साथ KEGG संवर्धन परिणामों को मिलाकर, एक दवा-घटक-रोग-रोग-मार्ग-लक्ष्य नेटवर्क को खींचा जा सकता है (चित्र 2)। नीला त्रिभुज: ड्रग सिस्तांचे डेजर्टिकोला; नारंगी त्रिभुज: रोग विज्ञापन; हल्के हरे रंग का चक्र: दवा का मुख्य घटक; पीला सर्कल: Cistanche Deserticola द्वारा इलाज किए गए रोग से संबंधित मुख्य मार्ग; गहरे हरे रंग की आयत: दवा-रोग संबंधी लक्ष्य; एज: नोड्स के बीच सहसंबंध
अंजीर 2 मंच पर जाने से पहले स्थान नेविगेशन परीक्षण के प्रत्येक समूह में चूहों द्वारा यात्रा की गई कुल दूरी (x s, mm)
| समूह | दिन 1 | दिन 2 | तीसरा दिन | दिन 4 | दिन 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| सामरी | 11,963.53 | 7,759.00 | 5,660.00 | 3,922.00 | 1,984.67 |
| नमूना | 11,977.35 | 8,417.67 | 5,465.38 | 7,329.67 | 5,517.67 |
| एल-जीसीएस | 11,964.33 | 8,330.33 | 6,226.87 | 4,789.33 | 3,867.47 |
टैब 3 प्लेस नेविगेशन टेस्ट के प्रत्येक समूह में चूहों की विलंबता (x, s, s)
| समूह | दिन 1 | दिन 2 | तीसरा दिन | दिन 4 | दिन 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| सामरी | 50.33 ± 1.24 | 45। 00 {43.43 | 39.67 ± 21.55 | 35। 00 {6.64 | 30.01 ± 1.64 |
| नमूना | 53। 00 {3.81 | 47। 00} 4.81 | 41। 00 {2.71 | 36। 00} 4.81 | 31। 00} 1.81 |
| एल-जीसीएस | 54। 00} 4.12 | 47.67 ± 4.34 | 39.67 ± 1.22 | 35.75 ± 2.45 | 36। 00 {1.81* |
| एम-जीसीएस | 52.67 ± 4.47 | 46। 00 {4। 00 | 35.75 ± 2.67 | 34। 00} 1.53 | 32। 00} 2.31* |
| एच-जीसीएस | 50.33 ± 2.11 | 45.67 ± 3.25 | 36.50 ± 2.31* | 35.75 ± 1.22* | 31.50 ± 1.81* |
| F | 2.84 |
*नोट: सामरी समूह की तुलना में,P <{{{0}}} 0 5; मॉडल समूह के साथ तुलना में, † पी <0.05; एल-जीसीएस और एच-जीसीएस समूह, ‡ पी <0.05।
यदि आपको किसी और संशोधन की आवश्यकता है, तो मुझे बताएं!
अंजीर 3 प्रतिशत लक्ष्य चतुर्थांश में बिताया
2.4.2 वाई भूलभुलैया प्रयोग
वाई भूलभुलैया प्रयोग के परिणामों से पता चला है कि: SAMR1 समूह के साथ तुलना में, मॉडल समूह के उपन्यास हथियारों का पता लगाने के लिए समय और वैकल्पिक दर में काफी कमी आई है (पी (पी<0.05); compared with the Model group, the M-GCs group and H-GCs group's novel The arm exploration time was significantly increased (P<0.05); the spontaneous alternation rate of new arms in the GCs-administered group was significantly higher than that in the Model group (P<0.05), among which the spontaneous alternation rate of the M-GCs group was higher than that of the other administration groups ( P <0.05) (Fig. 4).
माउस हिप्पोकैम्पस न्यूरॉन्स की संख्या और आकृति विज्ञान पर जीसीएस के 2.5 प्रभाव
NISSL धुंधला परिणामों से पता चला कि SAMR1 समूह में न्यूरोनल पिरामिड कोशिकाएं गोल या अंडाकार थीं, जिनमें पूर्ण आकार और साफ -सुथरी व्यवस्था थी। इंट्रासेल्युलर निस्ल निकायों को गहराई से दाग दिया गया था और संख्या बड़ी थी। SAMR1 समूह के साथ तुलना में, मॉडल समूह में न्यूरोनल पिरामिडल कोशिकाएं दैहिक कोशिकाओं की आकृति विज्ञान थीं, जो व्यवस्था बिखरी हुई थी, और NISSL निकायों को हल्के से रंगा गया था, और पूर्ण पिरामिड कोशिकाओं की संख्या काफी कम हो गई थी (पी (पी।<0.05); compared with the Model group, the morphology of the pyramidal cells in the GCs administration group was more complete and the arrangement was more complete. Relatively neat, the number of complete pyramidal cells increased significantly (P<0.05). Among them, most pyramidal cells in the M-GCs group were complete in shape and more neatly arranged. The number of complete pyramidal cells was significantly higher than that in other drug administration groups. increased (P <0.05), as shown in Figure 5.
2.4.2 वाई भूलभुलैया प्रयोग
वाई भूलभुलैया प्रयोग के परिणामों से पता चला है कि: SAMR1 समूह के साथ तुलना में, मॉडल समूह के उपन्यास हथियारों का पता लगाने के लिए समय और वैकल्पिक दर में काफी कमी आई है (पी (पी<0.05); compared with the Model group, the M-GCs group and H-GCs group's novel The arm exploration time was significantly increased (P<0.05); the spontaneous alternation rate of new arms in the GCs-administered group was significantly higher than that in the Model group (P<0.05), among which the spontaneous alternation rate of the M-GCs group was higher than that of the other administration groups ( P <0.05) (Fig. 4).
माउस हिप्पोकैम्पस न्यूरॉन्स की संख्या और आकृति विज्ञान पर जीसीएस के 2.5 प्रभाव
NISSL धुंधला परिणामों से पता चला कि SAMR1 समूह में न्यूरोनल पिरामिड कोशिकाएं गोल या अंडाकार थीं, जिनमें पूर्ण आकार और साफ -सुथरी व्यवस्था थी। इंट्रासेल्युलर निस्ल निकायों को गहराई से दाग दिया गया था और संख्या बड़ी थी। SAMR1 समूह के साथ तुलना में, मॉडल समूह में न्यूरोनल पिरामिडल कोशिकाएं दैहिक कोशिकाओं की आकृति विज्ञान थीं, जो व्यवस्था बिखरी हुई थी, और NISSL निकायों को हल्के से रंगा गया था, और पूर्ण पिरामिड कोशिकाओं की संख्या काफी कम हो गई थी (पी (पी।<0.05); compared with the Model group, the morphology of the pyramidal cells in the GCs administration group was more complete and the arrangement was more complete. Relatively neat, the number of complete pyramidal cells increased significantly (P<0.05). Among them, most pyramidal cells in the M-GCs group were complete in shape and more neatly arranged. The number of complete pyramidal cells was significantly higher than that in other drug administration groups. increased (P <0.05), as shown in Figure 5.
2.6 माउस हिप्पोकैम्पस में PI3K-AKT पाथवे संबंधित प्रोटीन और ताऊ प्रोटीन की अभिव्यक्ति पर GCS का प्रभाव
Immunohistochemical धुंधला परिणामों से पता चला कि SAMR1 समूह की तुलना में, मॉडल समूह में हिप्पोकैम्पस CA1 क्षेत्र में PI3K और P-AKT को व्यक्त करने वाली सकारात्मक कोशिकाओं की संख्या काफी कम हो गई थी (P (P (P<0.05), and the number of positive cells expressing P-Tau was significantly increased (P < 0.05); compared with the Model group, the number of positive cells in the hippocampal CA1 area of PI3K and P-Akt in the GCs group was significantly increased (P<0.05), and the number of positive cells expressing P-Tau was significantly reduced (P<0.05 ); among them, the number of positive cells expressing PI3K and P-Akt in the CA1 area of mouse hippocampus was significantly increased in the M-GCs group compared with other GCs administration groups (P<0.05), see Figure 6.
अंजीर 7 पश्चिमी धब्बा प्रयोगात्मक पट्टी चार्ट
टैब 4 स्ट्रिप एब्जॉर्बेंस वैल्यू (x) s)
| समूह | दिन 1 | दिन 2 | तीसरा दिन | दिन 4 | दिन 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| सामरी | 50.33 ± 1.24 | 45। 00 {43.43 | 39.67 ± 21.55 | 35। 00 {6.64 | 30.01 ± 1.64 |
| नमूना | 53। 00 {3.81 | 47। 00} 4.81 | 41। 00 {2.71 | 36। 00} 4.81 | 31। 00} 1.81 |
| एल-जीसीएस | 54। 00} 4.12 | 47.67 ± 4.34 | 39.67 ± 1.22 | 35.75 ± 2.45 | 36। 00 {1.81* |
| एम-जीसीएस | 52.67 ± 4.47 | 46। 00 {4। 00 | 35.75 ± 2.67 | 34। 00} 1.53 | 32। 00} 2.31* |
| एच-जीसीएस | 50.33 ± 2.11 | 45.67 ± 3.25 | 36.50 ± 2.31* | 35.75 ± 1.22* | 31.50 ± 1.81* |
| F | 2.84 |
*नोट: सामरी समूह की तुलना में,P <{{{0}}} 0 5; मॉडल समूह के साथ तुलना में, † पी <0.05; एल-जीसीएस और एच-जीसीएस समूह, ‡ पी <0.05।
3 चर्चा
अल्जाइमर रोग एक सामान्य न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारी है। कपटी शुरुआत और निरंतर प्रगति के साथ एक पुरानी बीमारी के रूप में, यह स्मृति, भाषा, अनुभूति, व्यक्तित्व और व्यवहार कार्यों जैसे असामान्य नैदानिक अभिव्यक्तियों की विशेषता है [15,16]। वर्तमान में, अल्जाइमर रोग का रोगजनन जटिल है, और कई सिद्धांत हैं जैसे कि Aβ अमाइलॉइड बयान, न्यूरॉन्स के ऑक्सीडेटिव तनाव, न्यूरोइन्फ्लेमेशन, ताऊ प्रोटीन और आंतों के वनस्पति असंतुलन के असामान्य फॉस्फोराइलेशन। उनमें से, ताऊ प्रोटीन फॉस्फोराइलेशन के कारण होने वाले न्यूरॉन्स के भड़काऊ एपोप्टोसिस एडी-प्रेरित संज्ञानात्मक हानि [17,18] का एक महत्वपूर्ण तंत्र है। ताऊ प्रोटीन एक सूक्ष्मनलिका-जुड़े प्रोटीन (एमएपीएस) है जो न्यूरोनल अक्षतंतु के साथ जुड़ा हुआ है। इसका मुख्य कार्य सूक्ष्मनलिकाएं के गठन को बढ़ावा देना है, उनकी स्थिरता बनाए रखना और एक्सोनल परिवहन को विनियमित करना है [19,20]। ताऊ प्रोटीन के अत्यधिक फॉस्फोराइलेशन माइक्रोट्यूबुल्स को बांधने की अपनी क्षमता खो देंगे, जिससे माइक्रोट्यूब्यूल डिपोलीमराइजेशन, एक्सोनल डिसफंक्शन और न्यूरोफिब्रिलरी टेंगल्स हो जाते हैं, जिससे न्यूरोनल डिजनरेशन और एपोप्टोसिस [21] होता है। अध्ययनों में पाया गया है कि संबंधित सिग्नलिंग मार्ग की एक किस्म ताऊ प्रोटीन के फॉस्फोराइलेशन से निकटता से संबंधित हैं, जिनमें से इंट्रासेल्युलर फॉस्फेटिडिलिनोसिटोल किनसे/प्रोटीन किनेज बी (पीआई 3 के/एक्ट) मार्ग टीएयू प्रोटीन के फॉस्फोराइलेशन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, और इसके असंतुलित अभिव्यक्ति में एक महत्वपूर्ण प्रभाव हो सकता है।
उपर्युक्त नेटवर्क फार्माकोलॉजी अध्ययन में, GO और KEGG संवर्धन विश्लेषण से पता चला है कि I3K/AKT पाथवे Cistanche Deserticola द्वारा AD के सुधार में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, और सेल एपोप्टोसिस, सेनील पट्टिका गठन और न्यूरोनल टैंगल्स से निकटता से संबंधित है; GCS और AD के सामान्य लक्ष्यों को स्ट्रिंग डेटाबेस के माध्यम से जांच की गई थी, जिनमें से AKT1 एक महत्वपूर्ण महत्वपूर्ण लक्ष्य और PI3K/AKT मार्ग में एक प्रमुख प्रोटीन था। PI3K, AKT के अपस्ट्रीम अणु के रूप में, एक विशिष्ट इंट्रासेल्युलर फॉस्फेटिडिलिनोसिटोल किनसे [23] है। स्तनधारियों में, PI3K परिवार में टाइप I, II, और III आइसोज़ाइम हैं, जिनमें से I Isozymes PI3K-AKT मार्ग में मुख्य नियामक लक्ष्य हैं। जब IA प्रकार Pi3K का isozyme टायरोसिन रिसेप्टर किनेसेस जैसे प्रोटीनों को बांधता है, तो PI3K को फॉस्फोराइलेटेड और सक्रिय किया जा सकता है, सेल झिल्ली के बाहर PIP2 लक्ष्य को PIP3 लक्ष्य बनने के लिए फॉस्फोराइलेटिंग किया जा सकता है, जो AKT1, AKT 1, एक सबटाइप को आकर्षित करता है। AKT परिवार के सदस्यों में सेल अस्तित्व, प्रसार, चयापचय और विकास सहित जैविक कार्यों को विनियमित करने की क्षमता है। एक ओर, फॉस्फोराइलेटेड AKT1 सेरीन अवशेष 136 पर β- सेल CLL/Lymphoma (Bcl -2) के साथ जुड़े कोशिका मृत्यु एगोनिस्ट (BAD) को फॉस्फोराइलेट कर सकता है, जिससे सेल एपोप्टोसिस [27] को रोकता है। दूसरी ओर, यह डाउनस्ट्रीम प्रोटीन MTOR, GSK3, और फॉक्सो को विनियमित कर सकता है, जिससे P-tau प्रोटीन [28-30] का उत्पादन कम हो सकता है।
चूंकि पी-ताऊ प्रोटीन की वृद्धि को एडी की एक हॉलमार्क पैथोलॉजिकल विशेषता के रूप में माना जा सकता है, इसलिए यह माना जाता है कि यह संज्ञानात्मक गिरावट और सिनैप्टिक नुकसान से निकटता से संबंधित है। इसलिए, PI3K/AKT सिग्नलिंग मार्ग की सक्रियता अल्जाइमर रोग में सुधार करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकती है।
Cistanche Deserticola पौधे के सूखे पपड़ी के पत्तों के साथ मांसल तना है। यह प्रकृति में गर्म है, स्वाद में मीठा और नमकीन है, और गुर्दे और बड़ी आंत मेरिडियन से संबंधित है। यह गुर्दे को टोन करने और यांग को मजबूत करने, आंतों को नम करने और कब्ज से राहत देने के लिए एक दवा है [31]। इसमें एंटी-एपोप्टोसिस, एंटी-ऑक्सीकरण, सेल ऑटोफैगी और न्यूरोएंडोक्राइन को विनियमित करने, शारीरिक शक्ति को बढ़ाने और सीखने और अनुभूति में सुधार करने के प्रभाव हैं। केंद्रीय तंत्रिका तंत्र रोगों की रोकथाम और उपचार में इसका महत्वपूर्ण मूल्य है [32]। कई साहित्य रिकॉर्ड करते हैं कि सेरेब्रल इस्किमिया-रीपरफ्यूजन द्वारा घायल न्यूरॉन्स के ऑटोफैगी में सिस्टेंच डेजर्टिकोला अमीनो एसिड की रक्षा और उत्साहित कर सकता है, डिमेंशिया चूहों में न्यूरोनल ऑक्सीडेटिव तनाव में सुधार कर सकता है, लिपोपॉलीसेकराइड द्वारा प्रेरित माइक्रोग्लियल भड़काऊ प्रतिक्रिया की रक्षा करता है, और उम्र के चूहों को बढ़ाता है। उपरोक्त व्यवहार प्रयोगों से पता चला है कि मॉडल समूह की तुलना में, जीसीएस समूह में चूहों में सीखने और अनुभूति में महत्वपूर्ण सुधार हुआ था (पी)<0.05); Nissl staining experiments found that the number of pyramidal cells in the GCs group was significantly increased compared with the Model group, with complete morphology and neat arrangement (P<0.05); immunohistochemistry and Western blot experiments found that GCs could significantly increase the expression of PI3K and P-Akt proteins in the hippocampus of SAMP8 mice and significantly reduce the expression of P-Tau protein (P<0.05), which indicates that Cistanche deserticola may play a role in improving Alzheimer's disease by regulating the PI3K-Akt signaling pathway and affecting the production of P-Tau. This study used SAMP8 mice to construct an Alzheimer's disease model. Through network pharmacology, the main mechanism of action of Cistanche deserticola in treating Alzheimer's disease was explored, and a preliminary discussion of the mechanism of action and the optimal drug dose were explored. The subsequent exploration will continue to explore the mechanism of action and efficacy of Cistanche deserticola in improving the learning and cognitive function of AD model animals, in order to provide more modern scientific basis for the development of Cistanche deserticola products for the prevention and treatment of AD.
