मेलाटोनिन उच्च नमक वाले आहार से प्रेरित उच्च रक्तचाप से ग्रस्त चूहों के गुर्दे में टी लिम्फोसाइट घुसपैठ को रोकता है, CXCR3 लिगैंड केमोकाइन्स की अभिव्यक्ति को रोककर

अधिक जानकारी के लिए:ali.ma@wecistanche.com

एरियल बियर¹, रावण खशाबी², येहोनातन शरबी^1,2,3, एहूद ग्रॉसमैन^1,2,3और अवशालोम लिबोविट्ज^1,2,3,*

¹मेडिसिन डी, द चैम शेबा मेडिकल सेंटर, टेल-हाशोमर 5262000, इज़राइल; arielbier@gmail.com (एबी);Yehonatan.Sharabi@sheba.health.gov.il (वाईएस); Ehud.Grossman@sheba.health.gov.il (ईजी)² Hypertension Unit, the Chaim Sheba Medical Center, Tel-Hashomer 5262000, Israel;rawankhasbab@gmail.com³सैकलर फैकल्टी ऑफ मेडिसिन, तेल-अवीव विश्वविद्यालय, तेल-अवीव 6997801, इज़राइल *

सार: पिछले अध्ययन में, हमने दिखाया था किमेलाटोनिनसे बचाता हैगुर्दाऑक्सीडेटिव तनाव को कम करके नमक-प्रेरित उच्च रक्तचाप मॉडल में नुकसान। हमने अनुमान लगाया कि इस प्रभाव में मेलाटोनिन के इम्यूनोमॉड्यूलेटरी गुण शामिल हैं। विवो स्टडी-डाहल नमक-संवेदनशील (डीएसएस) चूहों में सामान्य चाउ, एक उच्च नमक आहार (एचएसडी), या एक एचएसडी और खिलाया गया था।मेलाटोनिन(30 मिलीग्राम/किग्रा/दिन) उनके पानी में आठ सप्ताह।गुर्देफ्लो साइटोमेट्री (सीडी3 प्लस सीडी4 प्लस और सीडी3 प्लस सीडी8 प्लस) द्वारा तत्काल लिम्फोसाइट अलगाव और लक्षण वर्णन के लिए और लिम्फोसाइट केमोअट्रेक्टेंट (मुख्य रूप से सीएक्ससीएल) के लिए काटा गया।chemokines) जीन अभिव्यक्ति अध्ययन। इन विट्रो अध्ययन-चूहे में, मेसेंजियल कोशिकाओं (आरएमसी) को बिना और बिना उच्च नमक वाले माध्यम में सुसंस्कृत किया गया थामेलाटोनिन. एक एचएसडी नियंत्रण की तुलना में सीडी4 प्लस और सीडी8 प्लस टी लिम्फोसाइटों के महत्वपूर्ण रीनलइनफिल्ट्रेशन से जुड़ा था। मेलाटोनिन ने गुर्दे की लिम्फोसाइट घुसपैठ को काफी कम कर दिया। एक एचएसडी ने सीएक्ससीएल की एमआरएनए अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि की हैchemokinesएचएसडी में मेलाटोनिन मिलाने से यह प्रभाव समाप्त हो गया। नमक के साथ RMC कोशिकाओं का इलाज करने से CXCL10 और CXCL11 की अभिव्यक्ति में वृद्धि हुई, लेकिन CXCL9 की नहीं। जोड़ा जा रहा हैमेलाटोनिनसंस्कृति मीडिया ने इस वृद्धि को रोका। मेलाटोनिन के साथ एचएसडी-खिलाए गए चूहों का इलाज करने से गुर्दे की लिम्फोसाइट कीमोअट्रेक्टेंटएमआरएनए अभिव्यक्ति में कमी आई है और यह गुर्दे की टी लिम्फोसाइट घुसपैठ को काफी कम करने के साथ जुड़ा हुआ है। नमक का रसायन-उत्पादक वृक्क कोशिकाओं पर सीधा प्रभाव पड़ सकता है, जो मेलाटोनिन उपचार द्वारा धुंधला हो जाता है।

कीवर्ड:मेलाटोनिन; नमक; टी-लिम्फोसाइट्स; उच्च रक्तचाप;गुर्दा; सीएक्ससीएल 9; सीएक्ससीएल 10; सीएक्ससीएल 11

1 परिचय

उच्च रक्तचाप (HTN) एक प्रमुख परिवर्तनीय हृदय जोखिम कारक है। जनसंख्या की उम्र बढ़ने के कारण, एचटीएन की व्यापकता लगातार बढ़ रही है, जो उन्नत उम्र में 30 प्रतिशत तक पहुंच गई है [1]। विभिन्न चिकित्सीय चिकित्सीय विकल्पों के बावजूद, एचटीएन का विश्वव्यापी नियंत्रण खराब है। अनियंत्रित एचटीएन के परिणाम विनाशकारी हैं, जिससे सार्वजनिक स्वास्थ्य पर भारी नकारात्मक प्रभाव पड़ता है [2]।

एचटीएन के रोगजनन में विभिन्न व्यवहार, पर्यावरणीय और आनुवंशिक कारक शामिल हैं। पश्चिमी आहार में उच्च नमक सामग्री को एचटीएन में एक प्रमुख योगदानकर्ता के रूप में फंसाया गया है और यह बढ़ी हुई रुग्णता और मृत्यु दर से जुड़ा है। दिशानिर्देश और सार्वजनिक पहल आम जनता के लिए नमक का सेवन कम करने की सलाह देते हैं। हालांकि, हर व्यक्ति इस प्रतिबंध से लाभान्वित नहीं हो सकता है, क्योंकि नमक संवेदनशीलता को एचटीएन से जोड़ने वाले पैथोफिज़ियोलॉजी को पूरी तरह से समझा नहीं गया है और इसे बेहतर यंत्रवत समझ की आवश्यकता है [3]। इस प्रकार, बेहतर एचटीएन समझ और नियंत्रण के लिए नई रणनीतियां महत्वपूर्ण हैं, जिससे नए शोध प्रतिमान तत्काल आवश्यकता बन जाते हैं।

आवश्यक एचटीएन के रोगजनन में सूजन और ऑक्सीडेटिव तनाव शामिल पाया गया है। इन प्रक्रियाओं को शुरू करने और जारी रखने वाले ट्रिगर्स के लिए शोध करते समय, कई प्रयोगात्मक एचटीएन मॉडल अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया [4] की भागीदारी का सुझाव देते हैं।

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एचटीएन के लिए अनुकूली प्रतिरक्षा को जोड़ने वाले सुराग 1960 के दशक से पहले से ही मौजूद हैं। हालांकि, हाल ही में, प्रतिरक्षा प्रणाली की बेहतर समझ के साथ, इस दिशा में प्रगति हासिल की जा सकती है। गुज़िक एट अल द्वारा एक अग्रणी अध्ययन। ने प्रदर्शित किया कि एंजियोटेंसिन (Ang) II या डीऑक्सीकोर्टिकोस्टेरोन (DOC) नमक HTN को rag1 - / - चूहों में विस्फोटित किया गया था, जो T और B लिम्फोसाइटों में कमी है, और T का दत्तक हस्तांतरण, लेकिन B कोशिकाएं नहीं, BP प्रतिक्रिया को पुनर्स्थापित कर सकती हैं [5]। इस पत्र के बाद से, अधिकांश सामान्य पशु मॉडल में विभिन्न दत्तक प्रतिरक्षा घटकों को एचटीएन के रोगजनन के लिए प्रासंगिक पाया गया। नमक प्रेरित एचटीएन मॉडल में टी कोशिकाओं की भूमिका का भी बड़े पैमाने पर अध्ययन किया गया है। इन विट्रो अध्ययनों से पता चलता है कि नमक भोले टी सेल भेदभाव को TH17 कोशिकाओं [6] में धकेल सकता है। उच्च नमक वाले आहार में कई विवो काम करते हैं- (HSD) प्रेरित HTN मॉडल, जैसे कि ढल नमक-संवेदनशील (DSS) चूहों, व्यापक वृक्क टी कोशिकाओं की घुसपैठ [7–9] दिखाते हैं।

कई शारीरिक प्रक्रियाओं के बीच,मेलाटोनिन कारक्तचाप विनियमन के साथ भागीदारी कुछ हद तक सहज है। रक्तचाप के सर्कैडियन पैटर्न ने मेलाटोनिन और एचटीएन के बारे में व्यापक शोध को प्रोत्साहित किया। अतीत में कई काम, मनुष्यों में और प्रयोगात्मक मॉडल में, कम मेलाटोनिन के स्तर को एचटीएन [10] से जोड़ा गया। कुछ नैदानिक ​​आंकड़े बताते हैं कि मेलाटोनिन अनुपूरण एचटीएन का इलाज कर सकता है, मुख्यतः निशाचर एचटीएन वाले रोगियों के लिए [11]। इन आंकड़ों की असंगति, हालांकि, यह सवाल उठाती है कि क्या गैर-सर्कैडियन मेलाटोनिन गुण भी रक्तचाप के नियमन में शामिल हैं।

मेलाटोनिन के विरोधी भड़काऊ और एंटी-ऑक्सीडेटिव गुणों ने सुझाव दिया है कि मेलाटोनिन प्रतिरक्षा प्रणाली के साथ बातचीत करता है। उभरते डेटा ने टी सेल विकास, सक्रियण, विभेदन और स्मृति में मेलाटोनिन सिग्नलिंग की भूमिका को फंसाया है। इस बात का सबूत है किमेलाटोनिनझिल्ली और परमाणु रिसेप्टर्स टी कोशिकाओं [12,13] पर मौजूद हैं।मेलाटोनिनप्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में शामिल कई साइटोकिन्स के उत्पादन को प्रभावित करता है, जैसे कि इंटरफेरॉन (IFN) - जो कि Th1 प्रतिक्रिया का एक धुरी नियामक है [14]।

ऑक्सीडेटिव तनाव और टी सेल प्रतिक्रिया, कुछ शोधकर्ताओं के अनुसार, एचटीएन के विकास को बढ़ावा देने और अंग उच्च रक्तचाप से ग्रस्त क्षति [15] में काम करते हैं। अपने पिछले काम में, हमने दिखाया किमेलाटोनिनस्थानीय (गुर्दे) ऑक्सीडेटिव तनाव को कम करता है और नमक-संवेदनशील एचटीएन चूहा मॉडल (डीएसएसमॉडल) [16] में नमक-प्रेरित गुर्दे फाइब्रोसिस और प्रोटीनूरिया को रोकता है। चूंकि एचटीएन से जुड़े अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में ऑक्सीडेटिव तनाव की एक महत्वपूर्ण भूमिका होती है, इसलिए हमने अनुमान लगाया कि मेलाटोनिन के इम्यूनोमॉड्यूलेटरी गुण एचएसडी-प्रेरित एचटीएन में इसकी सुरक्षात्मक भूमिका के लिए जिम्मेदार हैं।

इस अध्ययन का उद्देश्य यह मूल्यांकन करना है कि क्यामेलाटोनिननमक-प्रेरित टी सेल प्रतिक्रिया को कम करता है और इस प्रभाव के लिए जिम्मेदार तंत्र को स्पष्ट करता है।

2। सामग्री और प्रणालियां

2.1. पशु और अध्ययन प्रोटोकॉल

इज़राइल में शेबा मेडिकल सेंटर में संस्थागत पशु नैतिकता समिति द्वारा अध्ययन प्रोटोकॉल को मंजूरी दी गई थी। शरीर के वजन को मापने और प्रत्येक जानवर के लिए आंदोलन और स्वास्थ्य की स्थिति के लिए एक दैनिक सामान्य अवलोकन द्वारा उनके स्वास्थ्य की स्थिति की निगरानी की गई थी। नर डाहल नमक-संवेदनशील चूहे, चार सप्ताह पुराने (आरजीडी कैट # 1582190, आरआरआईडी: आरजीडी _1582190), थे एक पशु सुविधा में नियमित पिंजरों (प्रति पिंजरे में दो चूहे) में 22 डिग्री सेल्सियस पर 14 hlight / 10 घंटे के अंधेरे चक्र के साथ रखे जाते हैं। चूहों को एक सामान्य नमक आहार पर रखा गया था और पांच दिनों की अवधि के लिए एड लिबिटम पीने के लिए नल का पानी दिया गया था। आहार के अनुसार, चूहों को आठ सप्ताह की अवधि में तीन समूहों (n=8) में विभाजित किया गया था। आचार समिति के अनुसार, जिन जानवरों में बीमारी और पीड़ा के लक्षण दिखाई देते थे, उनकी बलि दी जानी थी।

नियंत्रण समूह को एक मानक चूहा चाउ आहार (2018 SC; Teklad Envigo, Madison, WI, USA) और नल का पानी खिलाया गया; उच्च नमक आहार (एचएसडी) समूह को एक मिलान समृद्ध नमक आहार (4 प्रतिशत) (टीडी.120485; टेकलाड एनविगो, मैडिसन, डब्ल्यूआई, यूएसए) और नल का पानी खिलाया गया था, औरमेलाटोनिनसमूह को उनके पीने के पानी में मेलाटोनिन (M5250; सिग्मा, रेहोवोट, इज़राइल) (30 मिलीग्राम / किग्रा / दिन) के साथ एक ही समृद्ध नमक आहार (4 प्रतिशत) खिलाया गया। शरीर के वजन और पानी की खपत को समय-समय पर मापा जाता था। प्रत्येक जानवर के लिए सही खुराक देने के लिए प्रत्येक पिंजरे के लिए मैच की पानी की जरूरतों में सही मेलाटोनिन की मात्रा को भंग कर दिया गया था। दिन शून्य को एचएसडी और मेलाटोनिन की खपत शुरू करने के दिन के रूप में परिभाषित किया गया है। अध्ययन के अंत में, चूहों को 3 प्रतिशत आइसोफ्लुरेन (पीछे के पैर निचोड़ने से पुष्टि की गई संज्ञाहरण की गहराई) के साथ गहरी संवेदनाहारी द्वारा बलिदान किया गया था औरगुर्देकटाई की गई। दोनों किडनी निकाल दी गई और उनका हेमिसेक्ट किया गया। किडनी को प्रवाह साइटोमेट्री विश्लेषण के लिए कई भागों को छोड़कर लिया गया था, जिन्हें जल्दी से हटा दिया गया था और तरल N2 में स्नैप-फ्रोजन और −80 C पर संग्रहीत किया गया था। आरएनए निष्कर्षण के लिए जमे हुए ऊतकों का उपयोग किया गया था।

सिस्टैंच-किडनी रोग के लक्षण

2.2. रीयल-टाइम मात्रात्मक रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन पीसीआर

जीन के mRNA अभिव्यक्ति स्तर का पता लगाया गया थागुर्दावास्तविक समय मात्रात्मक रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस-पीसीआर (क्यूआरटी-पीसीआर) द्वारा ऊतक। न्यूक्लियोस्पिन आरएनए किट (MACHERY-NAGEL, ड्यूरेन, जर्मनी) का उपयोग करके गुर्दे के ऊतकों से कुल आरएनए को निकाला गया था। एक एप्लाइड बायोसिस्टम्स उच्च-क्षमता सीडीएनए रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन किट (एप्लाइड बायोसिस्टम्स, फोस्टर सिटी, सीए, यूएसए) का उपयोग करके रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन किया गया था। पावर SYBR ग्रीन पीसीआर मास्टर मिक्स (एप्लाइड बायोसिस्टम्स, वारिंगटन, यूके) और एप्लाइड बायोसिस्टम्स 75 0 0 रीयल-टाइम पीसीआर सिस्टम का उपयोग करके qRT-PCR प्रतिक्रियाओं का प्रदर्शन किया गया। साइकिल चालन की स्थितियाँ थीं: 0 के लिए 95 C का पहला एकल चरण। 20 मिनट और फिर 30 s के लिए 95 C पर 40 चक्र पिघल चरण और 60 C पर 30 s का एक विस्तारित चरण। 40 चक्रों के अंत में, एक पिघला हुआ वक्रता प्रदर्शन किया गया था। राइबोसोमल प्रोटीन लेटरल डंठल सबयूनिट P0 (Rplp0) mRNA को आंतरिक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था। प्राइमर तालिका 1 में सूचीबद्ध हैं।

तालिका 1. इस अध्ययन में प्रयुक्त चूहों के प्राइमरों की सूची।

2.3. गुर्दे से टी कोशिकाओं का अलगाव

गुर्दे के कैप्सूल को हटाने के बाद, दोगुर्देRPMI 1640 में 1 0 0 µm सेल स्ट्रेनर के माध्यम से 2 एमएल सिरिंज के प्लंजर के साथ कीमा बनाया और छेड़ा गया जिसमें 2 एमएमएल-ग्लूटामाइन, 10 प्रतिशत एफबीएस, 10 यूजी/एमएल DNase 1 (स्टेम सेल टेक्नोलॉजीज, कैम्ब्रिज, एमए) शामिल थे। , यूएसए) और 0.1 प्रतिशत कोलेजनेज़ प्रकार IV (CLS 4, वर्थिंगटन डीकैचर, AL, यूएसए)। समाधान 37 डिग्री सेल्सियस पर 25 मिनट के लिए ऊष्मायन किया गया था। धुलाई समाधान (DPBS / 2 प्रतिशत FBS / 2 mM EDTA) को तब 45 एमएल तक पहुंचने के लिए किडनी होमोजेनेट में जोड़ा गया था और इसे 70 माइक्रोन सेलस्ट्रेनर के माध्यम से फ़िल्टर किया गया था। घोल को 400 × g/7 मिनट पर सेंट्रीफ्यूज किया गया। और गोली को 5 एमएल धोने के घोल में निलंबित कर दिया गया था और 40 माइक्रोन सेल छलनी और हाल ही में 400 × जी / 7 मिनट के माध्यम से फ़िल्टर किया गया था। गोली को 3 मिली FBS (10 mM EDTA) और लेयर्डओवर हिस्टोपैक -1083 (सिग्मा, रेहोवोट, इज़राइल) में फिर से जोड़ा गया, और ब्रेक के साथ 400 × g / 30 मिनट पर 20 C पर सेंट्रीफ्यूज किया गया। हिस्टोपैक के ऊपर आराम करने वाली मोनोन्यूक्लियर सेल परत को हटा दिया गया, दो बार धोने के घोल से धोया गया, और फ्लोसाइटोमेट्रिक विश्लेषण के लिए 5 एमएल धोने के घोल में निलंबित कर दिया गया।

2.4. फ़्लो साइटॉमेट्री

प्रत्येक समूह से,गुर्दे5-7 चूहों से विश्लेषण किया गया। प्रत्येक नमूने के लिए, 1 × 106 सेल लिए गए। पृथक मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं को बाह्य मार्करों के साथ जोड़ा गया था: एंटी-सीडी 3 (थर्मो फिशर साइंटिफिक कैट # 12-0030-82, आरआरआईडी: एबी _465493) और इसका आइसोटाइप कंट्रोल (थर्मो फिशर साइंटिफिक कैट # 12-4742-41, आरआरआईडी :AB_10753770), एंटी-सीडी4 (थर्मो फिशर साइंटिफिक कैट# 17-0040-80, RRID:AB_1210581) और इसका आइसोटाइप कंट्रोल (थर्मो फिशर साइंटिफिक कैट# 17-4724-81, RRID: AB_470188), एंटी-सीडी8 (थर्मो फिशर साइंटिफिक कैट# 25-0084-82, RRID:AB_10548361) और इसका आइसोटाइप कंट्रोल (थर्मो फिशर साइंटिफिक कैट# 25-4714-80,RRID: एबी _657914)। फ्लोजो सॉफ्टवेयर (फ्लोजो, आरआरआईडी: एससीआर -008520) का उपयोग करके फ्लो साइटोमेट्री (बीडी एफएसीएससीलिबुर फ्लो साइटोमेट्री सिस्टम, आरआरआईडी: एससीआर _000401) द्वारा सभी कोशिकाओं का विश्लेषण किया गया था।

सिस्टैंच-किडनी फंक्शन

2.5. कोश पालन

मेसेंजियल रैट सेल लाइन, RMC (ATCC Cat# CRL{0}}, RRID: CVCL_0506), ATCC® से प्राप्त की गई थी। सेल को Dulbecco के संशोधित ईगल माध्यम (01-055-1A, जैविक उद्योग, Beit HaEmek, इज़राइल) में संवर्धित किया गया था, जिसमें 4 mM L-glutamine को 1.5 g/L सोडियम बाइकार्बोनेट और 4.5 g/L ग्लूकोज से समायोजित किया गया था और इसके साथ पूरक किया गया था। 0.4 मिलीग्राम/एमएलजी418 और 15 प्रतिशत भ्रूण गोजातीय सीरम। मेलाटोनिन सिग्मा (M5250 रेहोवोट, इज़राइल) से प्राप्त किया गया था। एक 250 मिमीमेलाटोनिनइथेनॉल में स्टॉक बनाया गया था। कोशिकाओं को मेलाटोनिन (0.5 मिमी) के बिना या बिना सामान्य उच्च नमक (8 0 मिमी NaCl को माध्यम में जोड़कर) में सुसंस्कृत किया गया था। NaCl को माध्यम में जोड़ने से पहले मेलाटोनिन उपचार को 45 मिनट का समय दिया गया था। सभी प्रयोग 6 अच्छी तरह से प्लेटों में 3 × 105 कोशिकाओं के साथ प्रति कुएं में थे और 6 स्वतंत्र परीक्षणों द्वारा किए गए थे।

2.6. सांख्यिकीय विश्लेषण

डेटा को माध्य के रूप में प्रस्तुत किया जाता है ± SEM सांख्यिकीय विश्लेषण IBMSPSS सांख्यिकी, RRID: SCR_019096 का उपयोग करके किया गया। विचरण (एनोवा) और पोस्टहॉक तुकी पद्धति के एकतरफा विश्लेषण ने समूहों के बीच अंतर की जांच की। DataAssist, RRID: SCR_014969 का उपयोग करके रीयल-टाइम qPCR डेटा का विश्लेषण किया गया।

3। परिणाम

3.1. मेलाटोनिन एक एचएसडी उपभोग करने वाले चूहों की रक्षा करता है

इस अध्ययन के दौरान चूहों की उम्र 4-13 सप्ताह थी। इस उम्र में, वजन बढ़ने से चूहों की भलाई का संकेत मिलता है जिसे नियंत्रण समूह [17] द्वारा प्रदर्शित किया गया था। हालांकि, एचएसडीग्रुप 30 दिन में एक पठार पर पहुंच गया और इसके अतिरिक्तमेलाटोनिनएचएसडी ने इस परिघटना में सुधार किया (चित्र 1क)। एचएसडी समूह ने उच्च मृत्यु दर का प्रदर्शन किया, जहां 50 प्रतिशत चूहों की मृत्यु हो गई या एक नैदानिक ​​​​स्थिति थी जिसके लिए प्रायोगिक अवधि के दौरान पशु चिकित्सा समिति के नियमों के अनुसार इच्छामृत्यु की आवश्यकता थी। मेलाटोनिन की खुराक ने चूहों की मृत्यु दर को महत्वपूर्ण रूप से रोका, जहां आठ चूहों में से केवल एक की मृत्यु 58 दिन में हुई, प्रायोगिक अवधि के अंत में (चित्र 1ख)।

आकृति 1।मेलाटोनिनएचएसडी में रक्तचाप और उत्तरजीविता में सुधार। डीएसएस चूहों का इलाज एचएसडी के साथ और मेलाटोनिन के बिना 9 सप्ताह तक किया गया था। एक उच्च नमक आहार 36 दिन से शरीर के वजन को कम करता है और मेलाटोनिन ने इस प्रभाव को नियंत्रित किया (ए)। एचएसडी ने दिन 40 से मृत्यु दर में वृद्धि की। मेलाटोनिन के साथ एचएसडी-फेडरेट्स का इलाज करने से उनके अस्तित्व में सुधार होता है। (बी)। (n=8) *-p 0 से कम या बराबर। 05 नमक और नमक प्लस मेलाटोनिन बनाम नियंत्रण। #-p 0.05 से कम या बराबर नमक बनाम नियंत्रण और नमक प्लस मेलाटोनिन। एचएसडी - उच्च नमक वाला आहार।

3.2. मेलाटोनिन एचएसडी द्वारा प्रेरित किडनी टी सेल घुसपैठ को रोकता है

हम कोशिकाओं को से अलग करते हैंगुर्दाऔर उन्हें टी सेल मार्कर, सीडी3 में गेट किया। सीडी3 प्लस सेल को सीडी4 और सीडी8 से जोड़ा गया। सीडी3 प्लस सीडी4 प्लस और सीडी3 प्लस सीडी8 प्लस दोनों एचएसडी (5.18 ± 1.62 और 4.6 ± 0.75 प्रतिशत, क्रमशः) में नियंत्रण की तुलना में काफी अधिक थे (0.16 ± {{18} }.{{20}}2और 0.95 ± 0.15 प्रतिशत, क्रमशः) औरमेलाटोनिनएचएसडी के पूरक ने सीडी3 प्लस सीडी4 प्लस और सीडी3 प्लस सीडी8 प्लस कोशिकाओं को नियंत्रण स्तर पर वापस कर दिया (0.68 ± 0.21 और 1.37 ± 0.45, क्रमशः) (चित्र 2ए-डी)।

चित्रा 2. मेलाटोनिन टी कोशिकाओं की घुसपैठ को रोकता हैगुर्दा. टी कोशिकाओं को चूहों के गुर्दे से अलग किया गया और सीडी 3 के लिए गेट किया गया। CD3-सकारात्मक कोशिकाओं को CD4 और CD8 के लिए गेट किया गया था। मेलाटोनिन (सी) ने सीडी3 प्लस सीडी4 प्लस और सीडी3 प्लस सीडी8 प्लस दोनों को कम कर दिया, जबकि मेलाटोनिन (बी) के बिना एचएसडी की तुलना में नियंत्रण समूह (ए) से कोई अंतर नहीं था। सभी चूहों के लिए विश्लेषण (डी) (एन=7–8) में दिखाया गया है। एचएसडी - उच्च नमक वाला आहार। *-p 0 से कम या बराबर।05 बनाम नियंत्रण। #-p 0.05 बनाम नमक प्लस मेलाटोनिन से कम या उसके बराबर।

3.3. मेलाटोनिन कुछ किडनी केमोकाइन्स को कम करता है जिन्हें एचएसडी में अपग्रेड किया गया था

भड़काऊ ऊतकों में टी कोशिकाओं की भर्ती स्थानीय केमोकाइनएक्सप्रेशन द्वारा नियंत्रित होती है। इसलिए, हमने चूहे के में दो केमोकाइन परिवारों की अभिव्यक्ति को मापागुर्दे: केमोकाइन (सीएक्ससी मोटिफ) लिगैंड (सीएक्ससीएल) परिवार और केमोकाइन (सी-सीमोटिफ) लिगैंड (सीसीएल) परिवार।

CXCL परिवार के लिए, CXCL 9, 10, और 11 जो T कोशिकाओं को T कोशिकाओं पर CXCR3 रिसेप्टर का उपयोग करके अपने लक्ष्य ऊतक की ओर आकर्षित करते हैं, HSD चूहों में महत्वपूर्ण रूप से अपग्रेड किए गए थे। का पूरकमेलाटोनिनएचएसडी ने अपनी अभिव्यक्ति को वापस नियंत्रण स्तर तक कम कर दिया। सीएक्ससीएल 1 और 16 के लिए समान पैटर्न का पता चला था। हालांकि, सीएक्ससीएल 12 के लिए, एचएसडी (चित्रा 3 ए) में कोई अपग्रेड नहीं पाया गया था।

CCL परिवार के लिए, CCL 2, 4, 12, 17, 19 और CX3CL1 ने HSD में कोई अपग्रेड नहीं दिखाया। CCL3 को HSD में अपग्रेड किया गया था, लेकिन आहार में मेलाटोनिन को शामिल करने से कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं पाया गया। CCL7 के लिए, HSD में एक महत्वपूर्ण अपग्रेडेशन और के अतिरिक्त के साथ एक महत्वपूर्ण डाउनरेगुलेशनमेलाटोनिनएचएसडी का पता चला था (चित्र 3ख)।

चित्र 3. का विनियमनगुर्दे काchemokinesएचएसडी में मेलाटोनिन के साथ और बिना। चूहों में केमोकाइन (सीएक्ससी मोटिफ) लिगैंड (सीएक्ससीएल) परिवार (ए), केमोकाइन (सीसी मोटिफ) लिगैंड परिवार और सीएक्स3सीएल1 (बी) की अभिव्यक्ति निर्धारित की गई थी। (n=7–8) *-p 0 से कम या बराबर।05 बनाम नियंत्रण। #-p 0.05 बनाम नमक प्लस मेलाटोनिंग से कम या उसके बराबर। एचएसडी - उच्च नमक वाला आहार।

3.4. आरएमसी मेसेंजियल सेल लाइन पर मेलाटोनिन का सीधा प्रभाव

हमने तब CXCL9, 10 और 11 पर ध्यान केंद्रित किया जो रिसेप्टर CXCR3 से जुड़कर टी कोशिकाओं को आकर्षित करते हैं। हमने इनकी अभिव्यक्ति निर्धारित कीchemokinesआरएमसी कोशिकाओं में जो एक चूहा मेसेंजियल सेल लाइन हैं।

हमने 80 mM NaCl के साथ और 0.5 mM . के साथ कोशिकाओं का इलाज कियामेलाटोनिन. NaCl की इस सांद्रता ने CXCR1 0 की अभिव्यक्ति को 2.4 ± 0। 26- नियंत्रण की तुलना में गुना बढ़ा दिया, और 0 .5 मिमी मेलाटोनिन के अतिरिक्त में काफी कमी आई 1.4 ± 0.{{10}} नियंत्रण की तुलना में इस अभिव्यक्ति को गुना करें (चित्र 4क)। CXCL11 के लिए, 80 mM NaCl ने नियंत्रण की तुलना में अभिव्यक्ति को 3 ± 0.48- गुना बढ़ा दिया, और 0.5 मिमी मेलाटोनिन के अतिरिक्त ने इस अभिव्यक्ति को 1.8 ± 0.{{22 }}नियंत्रण की तुलना में गुना (चित्र 4ख)। RMC कोशिकाओं में CXCL9 का पता नहीं चला।

चित्रा 4. नमक एक mesangial सेल लाइन में CXCL1 0 और CXCL11 अभिव्यक्ति को अपग्रेड किया जहां मेलाटोनिनट्रीटमेंट ने अपनी अभिव्यक्ति को कम कर दिया। RMC (चूहों की मेसेंजियल सेल लाइन) को 0.5 mM मेलाटोनिन के साथ और बिना नमक 80 mM के साथ इलाज किया गया था। CXCL10 (A) और CXCL11 (B) को नमक उपचार और के अतिरिक्त द्वारा अपग्रेड किया गया थामेलाटोनिनइस विनियमन को कम करें। रेखांकन 6 स्वतंत्र परीक्षण प्रस्तुत करते हैं। *-p 0 से कम या बराबर।001 बनाम नियंत्रण #-p 0 से कम या बराबर।005 बनाम नमक 80 मिमी और मेलाटोनिन 0.5 मिमी। $-p 0.05 बनाम नमक 80 मिमी और मेलाटोनिन 0.5 मिमी से कम या बराबर।

4। चर्चा

का लाभकारी प्रभावमेलाटोनिनएचटीएन पर पिछले अध्ययनों में प्रदर्शित किया गया था और उपचार प्रतिरोधी एचटीएन [18] के लिए कार्रवाई के संभावित पाठ्यक्रम के रूप में सुझाव दिया गया था। अपने पहले अध्ययन में, हमने ऑक्सीडेटिव तनाव पर ध्यान केंद्रित किया और खुलासा किया कि मेलाटोनिन एचएसडी द्वारा प्रेरित ऑक्सीडेटिव तनाव को कम करता है। वर्तमान अध्ययन में, हमने अनुकूली प्रतिरक्षा प्रभाव पर ध्यान केंद्रित किया और दिखाया कि मेलाटोनिन एचएसडी-खिलाए गए चूहों के अस्तित्व में सुधार करता है। यह प्रभाव गुर्दे में घुसपैठ करने वाली टी कोशिकाओं में कमी और के डाउनरेगुलेशन के साथ जुड़ा हुआ हैगुर्दाकेमोकाइन अभिव्यक्ति।

ऐतिहासिक आंकड़ों से पता चलता है कि एचएसडी का सेवन करने वाले डीएसएस चूहों में गंभीर एचटीएन विकसित होता है और उच्च मृत्यु दर [19] प्रदर्शित होती है। डाहल ने खुद मॉडल की स्थापना करते हुए बताया कि जब डीएसएस चूहों को वीनिंग (21-23 दिन की उम्र) में एचएसडी (8 प्रतिशत NaCl) पर रखा गया था, तो उन्होंने तेजी से एचटीएन विकसित किया और सभी 16 वें सप्ताह में नमक खिलाने से मर गए [20]। लेटरन, तनाव के कुछ संशोधनों के बाद, रैप एट अल। ने बताया कि एचएसडी (8 प्रतिशत NaCl) [21] के आठ सप्ताह के भीतर सभी चूहों की मृत्यु हो गई। हमारे अध्ययन में चूहों की मृत्यु दर उच्च थी, फिर भी वे 100 प्रतिशत तक नहीं पहुंचे, शायद उनके आहार में नमक के कम प्रतिशत (4 प्रतिशत) के कारण। फिर भी, यह स्पष्ट है किमेलाटोनिनपूरकता ने चूहे की मृत्यु दर को काफी हद तक रोका।

वजन बढ़ना 4-13 सप्ताह की उम्र में चूहों की भलाई का एक मार्कर है। DSS चूहों की उत्पत्ति Sprague Dawley से हुई है, जो एक सुविख्यात स्ट्रेन है। चूहों की उम्र में हमने अपने प्रयोगों में इस्तेमाल किया, चूहों को लगातार वजन बढ़ाना चाहिए [22]। कई जानवरों के अध्ययन में, वजन घटाने को प्रयोगों के "अंतिम बिंदुओं" में से एक माना जाता है [23]। कई अध्ययनों से, यह स्पष्ट है कि डीएसएस चूहों में एचएसडी के परिणामस्वरूप नियंत्रण [24,25] की तुलना में वजन कम होता है। इन अध्ययनों के अनुसार, हमने समूहों के बीच वजन के अंतर को भी देखा। इधर, एचएसडी के चार सप्ताह के बाद चूहों का वजन नहीं बढ़ा। मेलाटोनिन ने एचएसडी के इस प्रभाव को भी रोक दिया, क्योंकि जिन चूहों को मेलाटोनिन के साथ इलाज किया गया था, उनका वजन बढ़ना जारी रहा, हालांकि यह नियंत्रण से कम था।

की क्षमतामेलाटोनिन20वीं सदी के उत्तरार्ध [26-28] में जानवरों के मॉडल में रक्तचाप को कम करने की खोज की गई थी। तब से, यह कई अन्य मॉडलों में बताया गया था, जैसे कि एक उच्च फ्रुक्टोज आहार अनायास उच्च रक्तचाप वाले चूहों [29,30] में चयापचय सिंड्रोम को प्रेरित करता है। इस क्षेत्र में हमारे अध्ययन ने सबसे पहले यह दिखाया है कि मेलाटोनिन नमक से प्रेरित एचटीएन में अंग क्षति को रोकने और मृत्यु दर को कम करने में भूमिका निभाता है।

इस अध्ययन में, हमने दिखाया है कि एक एचएसडी टी लिम्फोसाइट घुसपैठ को प्रेरित करता हैगुर्दा, एक प्रक्रिया जिसे डीएसएस चूहों में मुख्य रूप से मैटसन के समूह [31-33] द्वारा वर्णित किया गया है। डीएसएस मॉडल में इस घुसपैठ की प्रक्रिया की महत्वपूर्ण भूमिका को हाल के अध्ययन द्वारा प्रदर्शित किया गया है जिसमें देखा गया है कि टी-सेल की कमी वाले डीएसएस चूहों से संरक्षित हैं। एक एचएसडी और एक स्प्लेनोसाइट स्थानांतरण द्वारा प्रेरित एचटीएन नमक के प्रति संवेदनशील एचटीएन [34] को बढ़ा देता है।

मेलाटोनिन विभिन्न पहलुओं में टी कोशिकाओं को प्रभावित कर सकता है (समीक्षा के लिए, [35] देखें)। इस अध्ययन ने पहली बार दिखाया है किमेलाटोनिनCD4 plus और CD8 plus Tcells दोनों के आकर्षण को कम कर देता हैगुर्दाएचएसडी में। मेलाटोनिन का यह प्रभाव इस मॉडल में इसके लाभकारी प्रभाव को रेखांकित करने वाला तंत्र हो सकता है।

टी सेल घुसपैठ को कम करने के लिए मेलाटोनिन की क्षमता को प्रयोगात्मक ऑटोइम्यून एन्सेफेलोमाइलाइटिस (ईएई) चूहों के मॉडल में वर्णित किया गया है। EAE में, मेलाटोनिन को CD4 प्लस T कोशिकाओं और Th17 कोशिकाओं की CNS [36,37] में घुसपैठ को कम करने के लिए दिखाया गया था।

एक विशिष्ट ऊतक के लिए टी सेल का आकर्षण मुख्य रूप से स्थानीय उच्च सांद्रता द्वारा नियंत्रित होता हैchemokinesजो कीमोटैक्टिक साइटोकिन्स हैं जो प्रवासी पैटर्न और प्रतिरक्षा कोशिकाओं की स्थिति को नियंत्रित करते हैं। दो बड़े केमोकाइन परिवार जो टी सेल घुसपैठ को प्रेरित करते हैं, वे हैं सीएक्ससी मोटिफ लिगैंड (सीएक्ससीएल) और सीसी मोटिफ लिगैंड (सीसीएल) केमोकाइन परिवार [38]।

गुर्दे की शिथिलता में सुधार के लिए सिस्टैंच

हमारे अध्ययन में, हमें सीसीएल परिवार की एचएसडी और उसके प्रति प्रतिक्रिया में एक निरंतर पैटर्न नहीं मिलामेलाटोनिन. नौ में सेchemokinesइस परिवार में, केवल CCL7 और CLL21 को HSD के कारण अपनी अभिव्यक्ति बढ़ाने के लिए मनाया गया, और मेलाटोनिन पूरकता कम हो गई। एक HSD ने CCL3 की अभिव्यक्ति में वृद्धि की, लेकिन मेलाटोनिन-उपचारित चूहों में कोई कमी नहीं पाई गई। इसी मॉडल में हाल ही में किए गए एक अध्ययन से पता चला है कि एक HSD CCL2 को अपग्रेड करता हैगुर्दाRNA-Seq विधि [39] का उपयोग करके। हालांकि, इस अध्ययन ने आहार शुरू होने के बाद 3 और 21 दिनों के स्तर का परीक्षण किया। अपने अध्ययन में, हमने आठ सप्ताह के बाद स्तरों का परीक्षण किया। यह संभव है कि एचएसडी अवधि के दौरान केमोकाइन अभिव्यक्ति बदल जाए।

इसके विपरीत, CXCL 1, 9, 10, 11, और 16 सहित अधिकांश CXCL परिवार का स्तर, HSD-उपचारित चूहों में बढ़ गया औरमेलाटोनिनपूरकता ने इस वृद्धि को समाप्त कर दिया। केवल CXCL12 ने HSD के प्रति प्रतिक्रिया में कोई वृद्धि नहीं दिखाई।

CXCL9, CXCL10, और CXCL11, जिसका नाम "इंटरफेरॉन-इंड्यूसिबल CXC केमोकाइन रिसेप्टर 3 लिगैंड्स" है, IFN- से प्रेरित हैं और CXC केमोकाइन रिसेप्टर 3 (CXCR3) के लिगैंड हैं। विवो अध्ययनों ने लक्ष्य अंग [40-42] में टी लिम्फोसाइटों की सक्रियता और भर्ती में उनके महत्व का प्रदर्शन किया है। यून एट अल। मानव उच्च रक्तचाप से ग्रस्त रोगियों में, टी कोशिकाओं के गुर्दे की घुसपैठ और तीनों CXCR3 के उच्च परिसंचारी स्तर दोनों को दिखाया गया है।chemokines, यह सुझाव देते हुए कि CXCR3 और इसके लिगेंड्स मानव HTN [43] में शामिल T कोशिकाओं के लिए प्रासंगिक हैं। एक अन्य अध्ययन से पता चला है कि CXCL10 उच्च रक्तचाप के रोगियों में ऊंचा है, और इसका स्तर उनके रक्तचाप के मूल्यों से संबंधित है [44]।

इन अध्ययनों के कारण, हमने CXCL9, CXCL10, और CXCL11 पर ध्यान केंद्रित किया। हमने मेसेंजियल रैट सेल लाइन को सुसंस्कृत किया और उन्हें 80 एमएम NaCl और 0.5 एमएम मेलाटोनिन के साथ इलाज किया। हमने पाया कि सीएक्ससीएल 10 और 11 को कोशिकाओं में अपग्रेड किया जाता है और मेलाटोनिन इस ऊंचाई को समाप्त कर देता है। हमारे परिणामों से संकेत मिलता है कि सीएक्ससीएल 10 और 11 को ऊपर उठाने में नमक का प्रभाव, और इसके विपरीत प्रभावमेलाटोनिन, दोनों सीधे मेसेंजियल कोशिकाओं में पाए गए थे। इसके विपरीत, इन कोशिकाओं में CXCL9 का पता नहीं चला।

हमारे अध्ययन की सीमाएँ हैं। हमारे FACS परिणामों में, CD3 प्लस के कई CD4 और CD8 दोनों के लिए दोहरे नकारात्मक थे। 2010 [31] से मैटसन के अध्ययन में वही परिणाम देखे गए। हालांकि, मैटसन के समूह के हाल के अध्ययनों में, सीडी3 प्लस सीडी4-सीडी8-कोशिकाएं बहुत कम थीं [32,33,45,46]। दोहरे नकारात्मक सीडी3 कोशिकाओं में उल्लेखनीय कमी सीडी45 मार्कर को जोड़ने और केवल उन कोशिकाओं का विश्लेषण करने के परिणामस्वरूप हो सकती है जो सीडी45 पॉजिटिव थे, जो कि मैटसन के बाद के अध्ययनों में किया गया था। यह संभव है कि सीडी3 प्लस सीडी4-सीडी8- की बड़ी आबादी एक आर्टिफैक्ट हो। हालांकि, सीडी3 प्लस सीडी4 प्लस और सीडी3 प्लस सीडी8 प्लस सेल आबादी के लिए कोई आर्टिफैक्ट ज्ञात नहीं है।

5। निष्कर्ष

अंत में, एक उच्च नमक वाला आहार टी सेल घुसपैठ के साथ जुड़ा हुआ हैगुर्देडीएसएस चूहों की। नमक ने गुर्दे में विशिष्ट टी सेल कीमोअट्रेक्टेंट्स की अभिव्यक्ति को भी बढ़ाया। के साथ उपचारमेलाटोनिन(30 मिलीग्राम/किग्रा/दिन) ने इन प्रभावों को समाप्त कर दिया (मेलाटोनिनCXCL3 लिगैंड केमोकाइन अभिव्यक्ति में कमी के साथ गुर्दे में टी कोशिकाओं के एचएसडी-प्रेरित घुसपैठ को कम करता है)।

हमारे इन विट्रो अध्ययन से पता चलता है कि नमक और मेलाटोनिन सीधे प्रभावित करके कीमोअट्रेक्टेंट अभिव्यक्ति को नियंत्रित कर सकते हैंगुर्दाकोशिकाएं।

लेखक योगदान: संकल्पना, एएल; औपचारिक विश्लेषण, एबी और आरके; जांच, आरके; कार्यप्रणाली, एबी और एएल; लेखन- मूल मसौदा, एबी और एएल; लेखन-समीक्षा और संपादन, YSand EG सभी लेखकों ने पांडुलिपि के प्रकाशित संस्करण को पढ़ लिया है और सहमत हैं।

फंडिंग: इस शोध को कोई बाहरी फंडिंग नहीं मिली।

इंस्टीट्यूशनल रिव्यू बोर्ड स्टेटमेंट: स्टडी प्रोटोकॉल को शीबा मेडिकल सेंटर में इंस्टीट्यूशनल एनिमलएथिक्स कमेटी, प्रोटोकॉल नंबर 1219/19/एएनआईएम और मिनिस्ट्री ऑफ हेल्थ प्रोटोकॉल नंबर 16418 द्वारा अनुमोदित किया गया था।

सूचित सहमति वक्तव्य: लागू नहीं।

डेटा उपलब्धता विवरण: इस अध्ययन में प्रस्तुत डेटा संबंधित लेखक के अनुरोध पर उपलब्ध हैं।

आभार: लेखक जेहावा शबताई को उनके उत्कृष्ट तकनीकी समर्थन और माइकल कनोवस्की को उनकी संपादकीय सेवाओं के लिए धन्यवाद देते हैं।

हितों के टकराव: लेखक हितों के टकराव की घोषणा नहीं करते हैं।

संदर्भ

1. ऑलसेन, एमएच; एंजेल, एसवाई; अस्मा, एस.; बाउटौरी, पी.; बर्गर, डी.; चिरिनोस, जेए; दमिश्केनो, ए.; डेल्स, सी.; गिमेनेज़-रोक्वेप्लो, एपी; हेरिंग, डी.; और अन्य। वर्तमान और भविष्य की पीढ़ियों पर बढ़े हुए रक्तचाप के वैश्विक बोझ को दूर करने के लिए एक कॉल टू एक्शन और एक जीवन पाठ्यक्रम रणनीति: उच्च रक्तचाप पर लैंसेट आयोग। लैंसेट 2016, 388, 2665-2712। [क्रॉसरेफ]

2. ओ'ब्रायन, ई. उच्च रक्तचाप पर लैंसेट आयोग: वर्तमान और भविष्य की पीढ़ियों पर बढ़े हुए रक्तचाप के वैश्विक बोझ को संबोधित करना। जे क्लिन। हाइपरटेन्स 2017, 19, 564-568। [क्रॉसरेफ]

3. ओ'डोनेल, एम।; मेंटे, ए.; यूसुफ, एस। सोडियम सेवन और हृदय स्वास्थ्य। सर्किल। रेस. 2015, 116, 1046-1057। [क्रॉसरेफ]

4. शिफरीन, छोटी धमनियों के रीमॉडेलिंग के ईएल तंत्र, उच्चरक्तचापरोधी चिकित्सा और उच्च रक्तचाप में प्रतिरक्षा प्रणाली। क्लिन। जांच. मेड. 2015, 38, ई394-ई402। [क्रॉसरेफ]

5. गुज़िक, टीजे; होच, एनई; ब्राउन, केए; मैककैन, एलए; रहमान, ए.; डिकालोव, एस।; गोरोन्ज़ी, जे.; वेयंड, सी.; हैरिसन, एंजियोटेंसिन II-प्रेरित उच्च रक्तचाप और संवहनी रोग की उत्पत्ति में टीसेल की डीजी भूमिका। जे. क्स्प. मेड. 2007, 204, 2449-2460। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

6. क्लेनविएटफेल्ड, एम.; मंज़ेल, ए.; टिट्ज़, जे.; क्वाकन, एच.; योसेफ, एन.; लिंकर, आरए; मुलर, डीएन; हाफलर, डीए सोडियम क्लोराइड रोगजनक TH17 कोशिकाओं के शामिल होने से ऑटोइम्यून रोग को दूर करता है। प्रकृति 2013, 496, 518-522। [क्रॉसरेफ]

7. मैटसन, डीएल; लुंड, एच.; गुओ, सी.; रुडमिलर, एन.; गेर्ट्स, एएम; जैकब, एच। डाहल नमक के प्रति संवेदनशील चूहों में पुनर्संयोजन सक्रिय करने वाले जीन 1 का आनुवंशिक उत्परिवर्तन उच्च रक्तचाप और गुर्दे की क्षति को कम करता है। पूर्वाह्न। जे फिजियोल। नियमित। पूर्णांक। कॉम्प. फिजियोल। 2013, 304, 407-414। [क्रॉसरेफ]

8. मैटसन, डीएल में प्रतिरक्षा कोशिकाओं को घुसपैठ कर रहा हैगुर्दानमक के प्रति संवेदनशील उच्च रक्तचाप और गुर्दे की चोट में। पूर्वाह्न। जे फिजियोल। रेन। Physiol.2014, 307. [CrossRef] [PubMed]

9. लू, एक्स.; क्रॉली, एसडी इनफ्लेमेशन इन सॉल्ट-सेंसिटिव हाइपरटेंशन एंड रीनल डैमेज। कर्र। उच्च रक्तचाप प्रतिनिधि 2018, 20. [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

10. बेकर, जे।; केम्पिंस्की, के. भूमिका कीमेलाटोनिनरक्तचाप नियमन में: एक सहायक उच्चरक्तचापरोधी एजेंट। क्लीन. Expक्स्प. फार्म। फिजियोल। 2018, 45, 755–766। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

11. ग्रॉसमैन, ई.; लॉडन, एम.; ज़िसापेल, एन। रात के रक्तचाप पर मेलाटोनिन का प्रभाव: यादृच्छिक नियंत्रित परीक्षणों का मेटा-विश्लेषण। वास्क। स्वास्थ्य जोखिम प्रबंधक। 2011, 7, 577-584। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

12. पोजो, डी.; डेलगाडो, एम.; फर्नांडीज-सैंटोस, जेएम; कैल्वो, जेआर; गोमरीज़, आरपी; मार्टिन-लाकेव, आई.; ऑर्टिज़, जीजी; चूहे के थाइमस और प्लीहा से लिम्फोसाइटों के टी और बी उपसमुच्चय में मेल1ए-मेलाटोनिन रिसेप्टर एमआरएनए की ग्युरेरो, जेएम अभिव्यक्ति। फ़सेब जे. ऑफ़. प्रकाशन फेड.एम. समाज. Expक्स्प. बायोल। 1997, 11, 466-473। [क्रॉसरेफ]

13. ग्युरेरो, जेएम; पोज़ो, डी.; गार्सिया-मौरीनो, एस.; ओसुना, सी.; मोलिनेरो, पी.; केल्वो, जेआर जर्कैट कोशिकाओं में मेलाटोनिन द्वारा संवर्धित आईएल-2 उत्पादन में परमाणु रिसेप्टर्स की भागीदारी। ऐन। एनवाई एकेड। विज्ञान 2000, 917, 397-403। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

14. फ़रेज़, एमएफ; मस्कैनफ्रोनी, आईडी; मेन्डेज़-ह्युएर्गो, एसपी; येस्टे, ए.; मुरुगइयां, जी.; गारो, एल.पी.; बलबुएना एगुइरे, एमई; पटेल, बी., यसरेलिट, एमसी; झू, सी.; और अन्य।मेलाटोनिनमल्टीपल स्केलेरोसिस रिलैप्स की मौसमीता में योगदान देता है। सेल 2015, 162, 1338-1352। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

15. किराबो, ए.; फोंटाना, वी.; डी फारिया, एपीसी; लोपेरेना, आर.; गैलिंडो, सीएल; वू, जे.; बिकनीवा, एटी; डिकालोव, एस।; जिओ, एल.; चेन, डब्ल्यू।, एट अल। डीसी आइसोकेटल-संशोधित प्रोटीन टी कोशिकाओं को सक्रिय करते हैं और उच्च रक्तचाप को बढ़ावा देते हैं। जे क्लिन। जांच. 2014, 124, 4642-4656। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

16. लीबोविट्ज़, ए।; वोल्कोव, ए।; वोलोशिन, के.; शेमेश, सी.; बरशैक, आई.; ग्रॉसमैन, ई. मेलाटोनिन रोकता हैगुर्दाऑक्सीडेटिव तनाव को कम करके एक उच्च नमक-प्रेरित उच्च रक्तचाप मॉडल में चोट। जे पीनियल रेस। 2016, 60, 48-54। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

17. हॉकिन्स, पी.; मॉर्टन, डीबी; बर्मन, ओ.; डेनिसन, एन.; सम्मान, पी.; जेनिंग्स, एम.; लेन, एस.; मिडलटन, वी.; रूघन, जेवी; वेल्स, एस.; एट अल। प्रयोगशाला पशुओं के कल्याण मूल्यांकन के लिए प्रोटोकॉल को परिभाषित करने और लागू करने के लिए एक गाइड: शोधन पर बीवीएडब्ल्यूएफ/फ्रेम/आरएसपीसीए/यूएफएडब्ल्यू संयुक्त कार्य समूह की ग्यारहवीं रिपोर्ट। प्रयोगशाला। एनिम। 2011, 45, 1-13। [क्रॉसरेफ]

18. सिमको, एफ।; रेइटर, आरजे; पॉलिस, एल.मेलाटोनिनप्रतिरोधी उच्च रक्तचाप के रूढ़िवादी उपचार में एक तर्कसंगत विकल्प के रूप में। हाइपरटेन्स रेस। 2019, 42, 1828-1831। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

19. रैप, जेपी डाहल नमक-संवेदनशील और नमक प्रतिरोधी चूहे। उच्च रक्तचाप 1982, 4, 753–763। [क्रॉसरेफ]

20. डाहल, एलके; नुडसेन, केडी; हेन, एमए; लीटल, जीजे क्रोनिक अतिरिक्त नमक अंतर्ग्रहण के प्रभाव। आहार में भिन्नता द्वारा चूहे में प्रायोगिक उच्च रक्तचाप में संशोधन। सर्किल। रेस. 1968, 22, 11-18। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

21. रैप, जेपी; डेने, एच। डाहल नमक-संवेदनशील और नमक प्रतिरोधी चूहों के इनब्रेड उपभेदों का विकास और विशेषताएं। उच्च रक्तचाप 1985,7, 340-349। [क्रॉसरेफ]

22. ब्राउनर, एम।; ग्रेस, एम.; कोट्ज़, सीएम; कोया, वी। विभिन्न स्रोतों से प्राप्त स्प्रेग डावले चूहों की वृद्धि विशेषताओं का तुलनात्मक विश्लेषण। प्रयोगशाला। एनिम रेस। 2015, 31, 166-173। [क्रॉसरेफ]

23. टैलबोट, एसआर; बिरनेट, एस.; ब्लीच, ए.; वैन डिजक, आरएम; अर्न्स्ट, एल.; हैगर, सी.; हिल्गर्स, SOA; कोएगल, बी.; कोस्का, आई.; कुहला, ए.; एट अल। एक मानवीय समापन बिंदु के रूप में शरीर के वजन में कमी को परिभाषित करना: एक महत्वपूर्ण मूल्यांकन। प्रयोगशाला। एनीम 2020, 54, 99–110। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

24. गेस्चका, एस।; क्रेश्चमर, ए.; शारकोवस्का, वाई।; एवगेनोव, ओवी; लॉरेंज, बी.; हक, ए.; होचर, बी.; स्टैश, जे.-पी. घुलनशील गनीलेटसाइक्लेज उत्तेजना फाइब्रोटिक ऊतक रीमॉडेलिंग को रोकता है और नमक के प्रति संवेदनशील डाहल चूहों में अस्तित्व में सुधार करता है। प्लस वन 2011, 6,e21853। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

25. वांग, वाई।; म्यू, जे जे; लियू, एफक्यू; रेन, केवाई; जिओ, एचवाई; यांग, जेड।; युआन, ZY नमक-प्रेरित एपिथेलियल-टू-मेसेनकाइमल संक्रमण डाहलसाल्ट-संवेदनशील चूहों में उच्च रक्तचाप पर निर्भर है। ब्राज़। जे. मेड. बायोल। रेस. रेव। ब्रा। पेसक्विसा मेड। ई बायोल। 2014, 47, 223-230। [क्रॉसरेफ]

26. होम्स, दप; सगडेन, डी। कार्यवाही: चूहे में पाइनएलेक्टोमी-प्रेरित उच्च रक्तचाप पर मेलाटोनिन का प्रभाव। ब्र. जे. फार्म.1976, 56, 360पी-361पी।

27. ज़ानोबोनी, ए।; ज़ानोबोनी-म्यूसियाकिया, डब्ल्यू। पाइनएलेक्टोमाइज्ड चूहों में प्रायोगिक उच्च रक्तचाप। जीवन विज्ञान। 1967, 6, 2327–2331। [क्रॉसरेफ]

28. ज़ानोबोनी, ए।; फोर्नी, ए.; ज़ानोबोनी-मुसियाकिया, डब्ल्यू.; ज़ानुसी, सी। धमनी रक्तचाप और चूहे में भोजन और पानी के सेवन पर पीनियलेक्टॉमी का प्रभाव। जे एंडोक्रिनोल। जांच. 1978, 1, 125-130। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

29. पेचानोवा, ओ.; ज़िचा, जे.; पॉलिस, एल.; ज़ेनेबे, डब्ल्यू.; डोबेसोवा, जेड .; कोजसोवा, एस.; जेंडेकोवा, एल.; स्लैडकोवा, एम.; डोविनोवा, आई.; सिमको, एफ।, एट अल। स्थापित उच्च रक्तचाप के साथ वयस्क अनायास उच्च रक्तचाप से ग्रस्त चूहों में एन-एसिटाइलसिस्टीन और मेलाटोनिन का प्रभाव। ईयूआर। जे. फार्मकोल। 2007, 561, 129-136। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

30. लीबोविट्ज़, ए।; पेलेग, ई.; शराबी, वाई.; शबताई, जेड .; शमिस, ए.; ग्रॉसमैन, ई. की भूमिकामेलाटोनिनचयापचय सिंड्रोम वाले चूहों में उच्च रक्तचाप के रोगजनन में। पूर्वाह्न। जे. हाइपरटेन्स 2008, 21. [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

31. डी मिगुएल, सी।; दास, एस.; लुंड, एच.; मैटसन, डीएल टी लिम्फोसाइट्स उच्च रक्तचाप में मध्यस्थता करते हैं औरगुर्दाडाहल नमक-संवेदनशील चूहों में नुकसान। पूर्वाह्न। जे फिजियोल। नियमित। पूर्णांक। कॉम्प. फिजियोल। 2010, 298, आर1136-आर1142। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

32. इवांस, एलसी; पेट्रोवा, जी.; कुर्थ, टी.; यांग, सी.; बुकोवी, जेडी; मैटसन, डीएल; काउली, ए.डब्ल्यू. बढ़ा हुआ छिड़काव दबाव दाहल नमक-संवेदनशील चूहे में गुर्दे की टी-सेल घुसपैठ को बढ़ाता है। उच्च रक्तचाप 2017, 70, 543-551। [क्रॉसरेफ]

33. अबैस-बट्टाड, जेएम; अलशेख, ए.जे.; पैन, एक्स.; फेरेनबैक, डीजे; दासिंगर, जेएच; लुंड, एच.; रॉबर्ट्स, एमएल; क्रेगेल, ए जे; काउली, एडब्ल्यूजे, किदांबी, एस.; और अन्य। डाहल नमक-संवेदनशील उच्च रक्तचाप, गुर्दे की क्षति, और टी लिम्फोसाइट ट्रांसक्रिप्टोम पर आहार प्रभाव। हाइपरटेन्स 2019, 74, 854–863। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

34. फेरेनबैक, डीजे; दासिंगर, जेएच; लुंड, एच.; ज़मज, जे.; मैटसन, डीएल स्प्लेनोसाइट ट्रांसफर नमक के प्रति संवेदनशील उच्च रक्तचाप को बढ़ाता है। Expक्स्प. फिजियोल। 2020, 105, 864–875। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

35. रेन, डब्ल्यू।; लियू, जी.; चेन, एस.; यिन, जे.; वांग, जे.; टैन, बी.; वू, जी.; बजर, परिवार कल्याण; पेंग, वाई.; ली, टी.; और अन्य। टी कोशिकाओं में मेलाटोनिन सिग्नलिंग: कार्य और अनुप्रयोग। जे पीनियल रेस। 2017, 62. [क्रॉसरेफ]

36. अल्वारेज़-सांचेज़, एन।; क्रूज़-कैमोरो, आई.; लोपेज़-गोंजालेज, ए.; यूट्रिला, जे.सी.; फर्नांडीज-सैंटोस, जेएम; मार्टिनेज-लोपेज़, ए.; लार्डोन, पीजे; ग्युरेरो, जेएम; कैरिलो-विको, ए। मेलाटोनिन टी इफ़ेक्टर / रेगुलेटरी बैलेंस को बदलकर प्रायोगिक ऑटोइम्यून एन्सेफेलोमाइलाइटिस को नियंत्रित करता है। मस्तिष्क व्यवहार। प्रतिरक्षा। 2015, 50, 101-114। [क्रॉसरेफ]

37. चेन, एस.-जे .; हुआंग, एस.-एच.; चेन, जे.-डब्ल्यू.; वांग, के.-सी.; यांग, वाई.-आर।; लियू, पी.-एफ.; लिन, जी.-जे .; सितवू, एच.-के.मेलाटोनिनइंटरल्यूकिन 10 की अभिव्यक्ति को बढ़ाता है और स्वस्थानी सूजन को रोकने और प्रयोगात्मक ऑटोइम्यून एन्सेफेलोमाइलाइटिस की गंभीरता को कम करने के लिए केमोटैक्सिस को दबाता है। इंट. इम्यूनोफार्माकोल। 2016, 31, 169-177। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

38. ग्रिफिथ, जेडब्ल्यू; सोकोल, सीएल; चमक, ADchemokinesऔर केमोकाइन रिसेप्टर्स: मेजबान रक्षा और प्रतिरक्षा के लिए पोजिशनिंग सेल। अन्नू। रेव इम्यूनोल। 2014, 32, 659–702। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

39. अलशेख, ए.जे.; दासिंगर, जेएच; अबैस-बट्टाड, जेएम; फेरेनबैक, डीजे; यांग, सी.; काउली, एडब्ल्यूजे; मैटसन, डीएल CCL2 नमक के प्रति संवेदनशील उच्च रक्तचाप के दौरान प्रारंभिक गुर्दे की ल्यूकोसाइट घुसपैठ की मध्यस्थता करता है। पूर्वाह्न। जे फिजियोल। रेन। फिजियोल। 2020, 318, F982–F993। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

40. लियू, एल।; कैलाहन, एमके; हुआंग, डी.; रैनसॉफ, आरएम केमोकाइन रिसेप्टर CXCR3: एक अप्रत्याशित पहेली। कर्र। ऊपर। देव। बायोल.2005, 68, 149-181। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

41. दूल्हे, जेआर; चमक, AD CXCR3 लिगेंड्स: निरर्थक, सहयोगी और विरोधी कार्य। इम्यूनोल। सेल बायोल। 2011, 89,207-215। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

42. वैन रैम्डोंक, के.; वैन डेन स्टीन, पीई; लिकेन्स, एस.; वैन डेम, जे.; Struyf, S. CXCR3 रोग और चिकित्सा में लिगेंड्स। साइटोकाइन ग्रोथ फैक्टर रेव 2015, 26, 311-327। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

43. यूं, जे.-सी.; यू, एचटी; लिम, बीजे; कोह, एमजे; ली, जे.; चांग, ​​डी.-वाई.; चोई, वाईएस; ली, एस.-एच.; कांग, एस.-एम.; जांग, वाई.; और अन्य। इम्यूनोसेनसेंट सीडी 8 प्लस टी कोशिकाएं और सीएक्ससी केमोकाइन रिसेप्टर टाइप 3chemokinesमानव उच्च रक्तचाप में वृद्धि हुई है। उच्च रक्तचाप 2013, 62, 126-133। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

44. स्टंपफ, सी .; एउर, सी.; यिलमाज़, ए.; लेवज़ुक, पी.; क्लिंगहैमर, एल.; श्नाइडर, एम.; डैनियल, डब्ल्यूजी; श्मीडर, आरई; गार्लिक, सीडीएसरम का स्तर Th1 केमोअट्रेक्टेंट इंटरफेरॉन-गामा-इंड्यूसिबल प्रोटीन (आईपी) 10 आवश्यक उच्च रक्तचाप वाले रोगियों में बढ़ा हुआ है। हाइपरटेन्स रेस। 2011, 34, 484-488। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

45. रुडमिलर, एनपी; लुंड, एच.; प्रीस्टली, जेआरसी; एंड्रेस, बीटी; प्रोकॉप, जेडब्ल्यू; जैकब, एचजे; गेर्ट्स, एएम; कोहेन, ईपी; मैटसन, SH2B3 (LNK) का डीएल म्यूटेशन, उच्च रक्तचाप के लिए एक जीनोम-वाइड एसोसिएशन अध्ययन उम्मीदवार, डाहल नमक-संवेदनशील उच्च रक्तचाप के माध्यम से भड़काऊ मॉड्यूलेशन को दर्शाता है। उच्च रक्तचाप 2015, 65, 1111-1117। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]

46. ​​वेड, बी.; पेट्रोवा, जी.; मैटसन, डीएल डाहलसाल्ट-संवेदनशील चूहों में एंजियोटेंसिन II-प्रेरित उच्च रक्तचाप और गुर्दे की क्षति में प्रतिरक्षा कारकों की भूमिका। पूर्वाह्न। जे फिजियोल। नियमित। पूर्णांक। कॉम्प. फिजियोल। 2018, 314, R323-R333। [क्रॉसरेफ] [पबमेड]