चेहरे की उम्र बढ़ने के सेलुलर तंत्र के खिलाफ बाकुचिओल की बहुदिशात्मक गतिविधि - एक समग्र उपचार दृष्टिकोण के लिए प्रायोगिक साक्ष्य भाग 2

एंटीऑक्सीडेंट शक्ति

परीक्षण पदार्थों के एपी को परखने के लिए इलेक्ट्रॉन स्पिन अनुनाद को लागू किया गया था, जिससे 1 पीपीएम विटामिन सी के समाधान को 1 एयू के रूप में परिभाषित किया गया है। रेटिनॉल का प्रतिक्रिया समय (2.59 मिनट) बाकुचिओल (0.99 मिनट) या विटामिन सी ({{6%).24 मिनट) की तुलना में अधिक था, जो मुक्त कणों के साथ रेटिनॉल की कम प्रतिक्रियाशीलता को दर्शाता है। इसके अलावा, डब्ल्यूसी मूल्यों से पता चला कि रेटिनॉल (0.151 मिलीग्राम) की तुलना में बाकुचिओल (0.028 मिलीग्राम) में मुक्त कणों के साथ प्रतिक्रिया करने की क्षमता बढ़ गई थी। इन दोनों विशेषताओं के कारण बाकुचिओल के लिए 12 125एयू और रेटिनोल के लिए 848एयू का एपी मान प्राप्त होता है (चित्र 2बी)।

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सूजनरोधी प्रभाव का निर्धारण

बाकुचिओल और रेटिनॉल के (ii) सूजनरोधी प्रभावों की जांच के लिए, हमने प्रिनफ्लेमेटरी साइटोकिन्स PGE2 और MIF का स्तर निर्धारित किया।

सिस्टैंच का ग्लाइकोसाइड हृदय और यकृत के ऊतकों में एसओडी की गतिविधि को भी बढ़ा सकता है, और प्रत्येक ऊतक में लिपोफसिन और एमडीए की सामग्री को काफी कम कर सकता है, विभिन्न प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन रेडिकल्स (ओएच-, एच₂ओ₂, आदि) को प्रभावी ढंग से हटा सकता है और डीएनए क्षति से बचा सकता है। ओएच-रेडिकल्स द्वारा। सिस्टैंच फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स में मुक्त कणों की एक मजबूत सफाई क्षमता होती है, विटामिन सी की तुलना में उच्च कम करने की क्षमता होती है, शुक्राणु निलंबन में एसओडी की गतिविधि में सुधार होता है, एमडीए की सामग्री कम होती है, और शुक्राणु झिल्ली समारोह पर एक निश्चित सुरक्षात्मक प्रभाव पड़ता है। सिस्टैंच पॉलीसेकेराइड डी-गैलेक्टोज के कारण प्रयोगात्मक रूप से वृद्ध चूहों के एरिथ्रोसाइट्स और फेफड़ों के ऊतकों में एसओडी और जीएसएच-पीएक्स की गतिविधि को बढ़ा सकते हैं, साथ ही फेफड़ों और प्लाज्मा में एमडीए और कोलेजन की सामग्री को कम कर सकते हैं और इलास्टिन की सामग्री को बढ़ा सकते हैं। डीपीपीएच पर एक अच्छा सफाई प्रभाव, वृद्ध चूहों में हाइपोक्सिया का समय बढ़ाना, सीरम में एसओडी की गतिविधि में सुधार करना, और प्रयोगात्मक रूप से वृद्ध चूहों में फेफड़ों के शारीरिक अध: पतन में देरी करना, सेलुलर रूपात्मक अध: पतन के साथ, प्रयोगों से पता चला है कि सिस्टैंच में अच्छी एंटीऑक्सीडेंट क्षमता है और त्वचा की उम्र बढ़ने वाली बीमारियों को रोकने और उनका इलाज करने के लिए एक दवा बनने की क्षमता रखती है। साथ ही, सिस्टैंच में इचिनाकोसाइड में डीपीपीएच मुक्त कणों को साफ़ करने की एक महत्वपूर्ण क्षमता है और प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों को साफ़ कर सकता है, मुक्त कट्टरपंथी प्रेरित कोलेजन गिरावट को रोक सकता है, और थाइमिन मुक्त कट्टरपंथी आयनों की क्षति पर भी अच्छा मरम्मत प्रभाव पड़ता है।

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PGE2 स्तर

एलपीएस-उपचारित एचडीएफ के प्रोस्टाग्लैंडीन ई2 स्तर को अनुपचारित नियंत्रण (पी=0.0005) के सापेक्ष काफी ऊंचा किया गया था, जो सफल तनाव प्रेरण (चित्रा 2सी) का संकेत देता है। जैसा कि अपेक्षित था, फार्माकोलॉजिकल रूप से प्रसिद्ध उच्च-मानक डाइक्लोफेनाक ने एलपीएस-उपचारित एचडीएफ में तनावग्रस्त नियंत्रण (पी =0.0005) की तुलना में पीजीई2 स्तर में काफी कमी ला दी। एलपीएस- और बाकुचिओल-उपचारित कोशिकाओं में, केवल एलपीएस (सभी संकेतित सांद्रता के लिए पी =0.0005) के साथ इलाज किए गए एचडीएफ के सापेक्ष पीजीई2 का स्तर काफी कम हो गया था। 2.5 μM के बराबर या उससे अधिक सांद्रता पर रेटिनॉल के अनुप्रयोग से तनाव नियंत्रण के बारे में PGE2 स्तर में काफी कमी आई (2.5 μM: p=0.0024; 5 और 10 μM: p=0.0005)।

एमआईएफ प्रोटीन स्तर

जैसा कि चित्र 2डी में दर्शाया गया है, तनावग्रस्त नियंत्रण एचडीएफ ने कुशल तनाव प्रेरण को प्रदर्शित करते हुए अस्थिर नियंत्रण (पी{{1%).0020) के सापेक्ष एमआईएफ प्रोटीन स्तर में उल्लेखनीय वृद्धि प्रदर्शित की। बाकुचिओल के साथ तनावग्रस्त एचडीएफ के उपचार के परिणामस्वरूप तनावग्रस्त नियंत्रण की तुलना में एमआईएफ प्रोटीन स्तर (1 μM: p=0.0020; 10 μM: p{7}}.0039) में काफी कमी आई। रेटिनॉल के अनुप्रयोग ने एमआईएफ प्रोटीन स्तर (1 और 10 μM: p=0.0020) को भी काफी कम कर दिया।

कोशिका गतिविधि का विश्लेषण

(iii) कोशिका गतिविधि पर बाकुचिओल और रेटिनॉल के प्रभाव की जांच करने के लिए, FGF7 प्रोटीन स्तर और WST-1 चयापचय को मापा गया।

FGF7 प्रोटीन स्तर का निर्धारण

10 μM बाकुचिओल के साथ HDF के उपचार से नियंत्रण कोशिकाओं (पी=0.0396) के सापेक्ष FGF7 प्रोटीन स्तर में काफी वृद्धि हुई, जबकि 10 μM रेटिनॉल ने कोई महत्वपूर्ण प्रभाव नहीं दिखाया (चित्रा 3 ए)।

WST-1 मेटाबोलाइज़ेशन का निर्धारण

जैसा कि चित्र 3बी में दिखाया गया है, ट्राइटन-एक्स ने नियंत्रण कोशिकाओं (पी = 0.0000) के सापेक्ष एचडीएफ में डब्लूएसटी -1 मेटाबोलाइजेशन स्तर को काफी कम कर दिया है, जो उचित परख कार्यान्वयन का संकेत देता है। 1 और 10 μM बाकुचिओल के साथ इलाज किए गए HDF ने नियंत्रण (पी=0.0000 दोनों सांद्रता के लिए) की तुलना में WST{7}} मेटाबोलाइज़ेशन स्तर में काफी वृद्धि प्रदर्शित की। 1 μM रेटिनॉल के साथ उपचार से नियंत्रण कोशिकाओं के सापेक्ष WST-1 मेटाबोलाइज़ेशन स्तर (p = 0.0066) में महत्वपूर्ण वृद्धि हुई, जबकि 10 μM रेटिनॉल का कोई महत्वपूर्ण प्रभाव नहीं पड़ा।

ईसीएम घटकों की अभिव्यक्ति

(iv) ईसीएम घटकों की अभिव्यक्ति पर बाकुचिओल- और रेटिनोल-मध्यस्थता प्रभावों का आकलन करने के लिए, हमने COL7A1, COL1A1 और FN प्रोटीन अभिव्यक्ति निर्धारित की।

COL7A1 और COL1A1 प्रोटीन स्तर का निर्धारण

उच्च मानक टीजीएफ- और सोडियम एस्कॉर्बेट से उपचारित कोशिकाओं में COL7A1 प्रोटीन का स्तर नियंत्रण कोशिकाओं के सापेक्ष काफी अधिक था (4 घंटे: पी=0.0020, 72 या 96 घंटे: पी=0.0010) जैसा कि प्रदर्शित किया गया है चित्र 3सी में। 1 μM (दोनों परीक्षण पदार्थों के लिए p=0.0020) और 10 μM (bakuchiol: p=0.0195, रेटिनॉल: p{17%) की सांद्रता में बाकुचिओल या रेटिनॉल के साथ कोशिकाओं का उपचार .0059) नियंत्रण की तुलना में 4 घंटे के बाद ही COL7A1 प्रोटीन का स्तर काफी बढ़ गया। विस्तारित ऊष्मायन समय के बाद, 10 μM बाकुचिओल या रेटिनोल से प्रेरित एचडीएफ ने नियंत्रण कोशिकाओं के सापेक्ष COL7A1 प्रोटीन स्तर (बाकुचिओल: पी =0.0029, रेटिनोल: पी=0.0420) में उल्लेखनीय वृद्धि देखी। .

उच्च मानक टीजीएफ- और सोडियम एस्कॉर्बेट के साथ इलाज किए गए एचडीएफ ने अतिरिक्त रूप से COL1A1 प्रोटीन स्तर (पी=0.0010) में उल्लेखनीय वृद्धि देखी, जैसा कि चित्र 3डी में दिखाया गया है। इसी तरह, बाकुचिओल (1 μM: p=0.0020, 10 μM: p=0.0322) या रेटिनॉल (1 μM: p {{16) के साथ उत्तेजना के 4 घंटे के बाद COL1A1 प्रोटीन का स्तर काफी बढ़ गया था। }}.0244, 10 μM: p=0.0098) नियंत्रण कोशिकाओं के सापेक्ष।

एफएन प्रोटीन स्तर का निर्धारण

चित्र 3ई दर्शाता है कि 10 μM बाकुचिओल या रेटिनॉल से उपचारित एचडीएफ ने नियंत्रण कोशिकाओं के सापेक्ष एफएन प्रोटीन स्तर (बाकुचिओल: पी=0.0090, रेटिनॉल: पी=0.0302) में उल्लेखनीय वृद्धि प्रदर्शित की।

अध्ययन I: एफएन प्रोटीन स्तर का पूर्व विवो निर्धारण

यह जांचने के लिए एक पूर्व विवो अध्ययन किया गया था कि क्या पिछला डेटा पूर्व विवो परिणामों में परिवर्तित होता है। जैसा कि चित्र 4ए में दर्शाया गया है, बाकुचिओल-उपचारित साइटों ने अनुपचारित नियंत्रण क्षेत्रों (पी=0.0340) और वाहन से उपचारित क्षेत्रों (पी=0.0088) में एफएन प्रोटीन के स्तर में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण वृद्धि देखी है। रेटिनॉल-उपचारित साइटों ने अनुपचारित या वाहन-उपचारित क्षेत्रों में एफएन प्रोटीन के स्तर में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखाया। हालाँकि, असंगति प्रतिक्रियाओं के कारण रेटिनॉल उपचार के लिए परीक्षण किए गए विषयों की संख्या कम हो गई (उपचार नहीं किया गया: n=26, वाहन: n=29, बाकुचिओल: n=30, रेटिनॉल: n=19 ). परीक्षण किए गए विषयों की संख्या में अतिरिक्त मामूली विचलन नमूनाकरण मुद्दों के कारण हुआ।

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एपिडर्मल पुनर्जनन और पुन: उपकलाकरण में सुधार

(v) एपिडर्मल पुनर्जनन और पुन: उपकलाकरण पर बाकुचिओल और रेटिनॉल के प्रभावों का अध्ययन करने के लिए, इन विट्रो घाव भरने वाला मॉडल लागू किया गया था। चित्र 4बी दर्शाता है कि बाकुचिओल-उपचारित घावों ने अनुपचारित (पी=0.0251) और नियंत्रण घावों (पी=0.0102) के बारे में पुनर्जीवित एपिडर्मिस की लंबाई में उल्लेखनीय वृद्धि देखी है। इसके विपरीत, रेटिनॉल के पूरक घावों ने दोनों नियंत्रणों की तुलना में पुनर्जीवित एपिडर्मिस की लंबाई में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखाया। चित्र 4सी बाकुचिओल या रेटिनॉल उपचार के साथ-साथ नियंत्रण और अनुपचारित घावों के 43 घंटे बाद घाव भरने की प्रगति का उदाहरण देता है।

अध्ययन II: त्वचा की स्थिति में सुधार का विवो निर्धारण

बाकुचिओल युक्त फॉर्मूलेशन (टी1) के साथ 12 सप्ताह के उपचार के बाद, विषयों (एन=34) ने औसत टी के साथ बेसलाइन निर्धारण (टी 0) के अनुसार अपनी त्वचा की युवा उपस्थिति में अंतर का मूल्यांकन किया। 2.57±2.14 का 1-टी0 मान। वाहन-उपचारित साइट (2.06±1.89) के t1-t0 मान की तुलना में, बाकुचिओल-उपचारित क्षेत्र की युवावस्था को काफी बेहतर माना गया (पी=0.0275) ). दोनों उपचारों को बेसलाइन (पी=0.0000) से काफी बेहतर दर्जा दिया गया था।

विवो अध्ययन में: सहनशीलता

परिणामों से पता चला कि दोनों विवो अध्ययनों में बाकुचिओल युक्त फॉर्मूलेशन अच्छी तरह से सहन किया गया था। उपयोग की पूरी अवधि के दौरान, एक प्रतिकूल त्वचा प्रतिक्रिया देखी गई, जिसे बाकुचिओल युक्त फॉर्मूलेशन और वाहन दोनों के लिए प्रलेखित किया गया था। अध्ययन I में रेटिनॉल युक्त फॉर्मूलेशन के साथ उपचार के बाद, 52 विषयों के पूरे पैनल में से 23 प्रतिशत ने एरिथेमा, डिक्लेमेशन, सूखापन और खुजली जैसी असंगत प्रतिक्रियाओं की सूचना दी, जिसके कारण पांच विषयों को छोड़ना पड़ा।

बहस

पिछले अध्ययनों से पता चला है कि बाकुचिओल रेटिनॉल के कार्यात्मक एनालॉग के रूप में कार्य करता है [19-21]। इस प्रकार, बाकुचिओल चेहरे की उम्र-रोधी उपचारों के लिए रेटिनॉल का एक आशाजनक विकल्प प्रतीत होता है। चूंकि सेलुलर उम्र बढ़ना बहुक्रियात्मक है, इसलिए हमने समग्र उपचार दृष्टिकोण के लिए इसकी क्षमता का विश्लेषण करने के लिए विभिन्न प्रमुख प्रक्रियाओं पर रेटिनॉल की तुलना में बाकुचिओल के प्रभावों की जांच की।

जैसा कि (तालिका एस1) में दर्शाया गया है, हमने बाकुचिओल और रेटिनॉल की (i) एंटीऑक्सीडेंट और (ii) सूजन-रोधी क्षमताएं निर्धारित कीं। हमने आगे विश्लेषण किया कि वे (iii) सेल सक्रियण को कैसे प्रभावित करते हैं, (iv) ईसीएम घटकों के गठन को प्रभावित करते हैं, और (v) त्वचा पुनर्जनन को प्रभावित करते हैं। हमारी जांच में, हमने निर्धारित किया कि बाकुचिओल रेटिनॉल के साथ कार्यात्मक समानताएं साझा करता है और साथ ही अद्वितीय, लाभकारी विशेषताओं को प्रदर्शित करता है (चित्रा 5)।

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हमारे डेटा से पता चला कि बाकुचिओल ने, लेकिन रेटिनॉल ने नहीं, एक उच्च (i) एंटीऑक्सीडेंट क्षमता और शक्ति दिखाई। ये डेटा पिछले अध्ययनों के अनुरूप हैं जो बताते हैं कि बाकुचिओल ऑक्सीडेटिव तनाव को कम करता है, माइटोकॉन्ड्रियल लिपिड पेरोक्सीडेशन को रोकता है, और माइटोकॉन्ड्रियल फ़ंक्शन की रक्षा करता है [22, 24, 38]। हालाँकि, रेटिनॉल में एंटीऑक्सीडेंट क्रियाएं करने की सूचना नहीं दी गई है।

चूंकि आरओएस के शामिल होने से सूजन संबंधी तनाव होता है, इसलिए हमने दो (ii) प्रिनफ्लेमेटरी साइटोकिन्स पीजीई2 और एमआईएफ की अभिव्यक्ति पर बाकुचिओल और रेटिनॉल के प्रभावों की जांच की।

हमने सबसे पहले PGE2 का विश्लेषण किया, जो मानव त्वचा में उत्पन्न होने वाला एक प्रमुख प्रोस्टाग्लैंडीन है। PGE2 कोलेजन उत्पादन को कम करता है और इन विट्रो में फ़ाइब्रोब्लास्ट में मैट्रिक्स मेटालोप्रोटीनेज़ 1 (एमएमपी -1) अभिव्यक्ति को प्रेरित करता है [39]। ये PGE2-मध्यस्थता वाली प्रक्रियाएं त्वचीय उम्र बढ़ने के तंत्र हैं [39]। इस प्रकार, उम्र से संबंधित कोलेजन कमी [40] का विरोध करने के लिए पीजीई2 को लक्षित करना एक आशाजनक रणनीति हो सकती है। आम तौर पर, PGE2 की कम मात्रा संश्लेषित होती है। हालाँकि, त्वचा की उम्र बढ़ने पर, फ़ाइब्रोब्लास्ट ऊंचा PGE2 स्तर दिखाते हैं [40, 41]। इसमें, हम पहली बार दिखाते हैं कि बाकुचिओल और रेटिनॉल खुराक पर निर्भर तरीके से एचडीएफ में पीजीई2 के स्तर को काफी कम कर देते हैं। हालाँकि, रेटिनॉल से प्रेरित प्रभाव बाकुचिओल की तुलना में कम स्पष्ट था। हमारे परिणाम इन विवो सूजन मॉडल का उपयोग करके पिछले अध्ययन द्वारा समर्थित हैं जिसमें शीर्ष पर लागू बाकुचिओल ने एराकिडोनिक एसिड-प्रेरित प्रतिक्रिया में पीजीई 2 सामग्री को काफी कम कर दिया है [42]। इसी तरह, रेटिनोइड्स को मानव मौखिक उपकला कोशिकाओं [43] और मानव मौखिक स्क्वैमस कार्सिनोमा कोशिकाओं [44] में पीजीई2 अभिव्यक्ति को दबाने के लिए दिखाया गया है।

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एमआईएफ एक अन्य प्रिनफ्लेमेटरी साइटोकिन है जो त्वचा सहित विभिन्न अंगों में सर्वव्यापी रूप से व्यक्त होता है [45]। यह कोशिका प्रसार, एंजियोजेनेसिस और विभेदन के लिए महत्वपूर्ण है [46]। फोटोएजिंग के संदर्भ में, यूवीए और यूवीबी दोनों विकिरण केराटिनोसाइट्स और त्वचीय फ़ाइब्रोब्लास्ट द्वारा एमआईएफ स्राव को बढ़ाते हैं [46, 47]। उर्सचिट्ज़ एट अल। फोटोएज्ड प्रीऑरिकुलर त्वचा में एमआईएफ एमआरएनए के 4-गुना अपग्रेडेशन की सूचना दी गई [48]। हमारे परिणामों में बाकुचिओल और रेटिनॉल से प्रेरित एचडीएफ में एमआईएफ प्रोटीन के स्तर में महत्वपूर्ण, समान कमी देखी गई, जो सूजन-रोधी गुणों का संकेत देती है। दरअसल, पहले के अध्ययनों से यह साबित हुआ है कि बाकुचिओल सूजनरोधी क्रियाएं करता है [19, 25-27, 38]। हालाँकि, बाकुचिओल या रेटिनॉल द्वारा एमआईएफ प्रोटीन स्तर का विनियमन अभी तक प्रलेखित नहीं किया गया है।

हालाँकि PGE2 और MIF दोनों त्वचा की उम्र बढ़ने में बढ़ जाते हैं [46, 49], उनका विनियमन दो अलग-अलग सिग्नलिंग मार्गों के माध्यम से होता है। इसलिए, दोनों कारकों की बाकुचिओल- और रेटिनॉल-प्रेरित कमी बुढ़ापारोधी उपचार में एक व्यापक सूजन-रोधी दृष्टिकोण का प्रतिनिधित्व करती है।

ऑक्सीडेटिव और सूजन संबंधी तनाव त्वचा की पुनर्योजी क्षमता को गंभीर खतरे में डाल देते हैं। इसके अलावा, त्वचा का पुनर्जनन उम्र के साथ कम हो जाता है। इसलिए, हमने (iii) कोशिका गतिविधि का विश्लेषण करके त्वचीय पुनर्योजी क्षमता पर बाकुचिओल और रेटिनॉल के प्रभाव की जांच की।

केराटिनोसाइट्स को विकास कारकों को संश्लेषित करने के लिए फ़ाइब्रोब्लास्ट को उत्तेजित करने का प्रस्ताव दिया गया है, जो बदले में, दोहरे पैराक्राइन तरीके से केराटिनोसाइट प्रसार को उत्तेजित करता है [50]। वृद्धि कारक FGF7 ऐसे माइटोजेन का एक उदाहरण है [51]। इसे केराटिनोसाइट वृद्धि कारक के रूप में भी जाना जाता है -1 [51] और यह केराटिनोसाइट्स के प्रसार को बढ़ाता है [52] और साथ ही ईसीएम घटकों के साथ उनकी बातचीत को भी बढ़ाता है [53]। हमारे अध्ययन से पता चलता है कि बाकुचिओल-उपचारित एचडीएफ ने एफजीएफ7 प्रोटीन स्तर में काफी वृद्धि देखी है। इसके विपरीत, रेटिनॉल उपचार से FGF7 प्रोटीन का स्तर थोड़ा कम हो गया। इस नवीन खोज से संकेत मिलता है कि बाकुचिओल सीधे केराटिनोसाइट्स को अपग्रेड करके और अप्रत्यक्ष रूप से फाइब्रोब्लास्ट प्रसार को बढ़ाकर त्वचा पुनर्जनन और मरम्मत प्रक्रियाओं का समर्थन कर सकता है। बकुचिओल उम्र बढ़ने के दौरान होने वाले विकास कारक स्तरों में गिरावट के खिलाफ कार्य करता है [54]।

एक अन्य कारक जो त्वचा की पुनर्योजी क्षमता को प्रभावित करता है वह है त्वचीय फ़ाइब्रोब्लास्ट की संख्या [55] और वृद्धि दर [56] में उम्र से जुड़ी कमी। चूंकि WST-1 चयापचय में वृद्धि से कोशिका व्यवहार्यता में सुधार [57], प्रसार [58], और चयापचय गतिविधि [59] का संकेत मिलता है, इसलिए हमने बाकुचिओल या रेटिनॉल के अनुप्रयोग के बाद WST-1 चयापचय का विश्लेषण किया। हमारे परिणाम बताते हैं कि बाकुचिओल और कुछ हद तक रेटिनॉल भी एचडीएफ में इन सेल गतिविधि-संबंधी विशेषताओं को उत्तेजित कर सकते हैं।

कोशिका गतिविधि में कमी के अनुरूप, उम्र बढ़ने वाली त्वचा को कोलेजन और अन्य ईसीएम घटकों के कम उत्पादन के साथ-साथ एक संवर्धित एमएमपी अभिव्यक्ति [60-65] की विशेषता होती है। इन परिवर्तनों के परिणामस्वरूप ईसीएम क्षति, त्वचा की कार्यप्रणाली में गड़बड़ी और बाद में झुर्रियाँ पैदा होती हैं। हमने अनुमान लगाया कि बढ़ी हुई फ़ाइब्रोब्लास्ट गतिविधि और बाकुचिओल द्वारा मध्यस्थता वाले PGE2 और MIF के स्तर में कमी ईसीएम घटकों को बढ़ावा दे सकती है। दरअसल, चौधरी और सहकर्मियों ने दिखाया कि बाकुचिओल जीन और प्रोटीन के स्तर पर COL1A1 को नियंत्रित करता है [19]। एचडीएफ के ईसीएम पर बाकुचिओल और रेटिनॉल के प्रभावों की जांच करने के लिए, हमने (iv) संरचनात्मक ईसीएम कारकों COL1A1 और COL7A1 और ECM आसंजन कारक FN की प्रोटीन अभिव्यक्ति का विश्लेषण किया।

COL1A1 त्वचा में सबसे प्रचुर संरचनात्मक प्रोटीन है [66]। हालाँकि, वृद्ध फ़ाइब्रोब्लास्ट कोलेजन संश्लेषण के लिए कम क्षमता प्रदर्शित करते हैं [67]। COL7A1 डर्मो-एपिडर्मल जंक्शनों में एंकरिंग फाइब्रिल बनाता है और यांत्रिक त्वचा स्थिरता को बढ़ाता है [68]। फोटो-एजिंग के दौरान, COL7A1 का स्तर कम हो जाता है जिससे डर्मिस और एपिडर्मिस के बीच बंधन कमजोर हो जाता है [69-71]।

हमारा डेटा दर्शाता है कि बाकुचिओल और रेटिनॉल पहले के अवलोकनों की पुष्टि करते हुए COL1A1 स्तर बढ़ाते हैं। पिछले अध्ययन में पाया गया था कि बाकुचिओल COL1 mRNA के अभिव्यक्ति स्तर को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ाता है और MMP-1 mRNA स्तर को काफी कम करता है [72]। COL1A1 जीन अभिव्यक्ति को 0.1 प्रतिशत रेटिनॉल उपचार [73] के 4 सप्ताह के बाद विवो में संवर्धित दिखाया गया था। 0.4 प्रतिशत रेटिनॉल के सामयिक अनुप्रयोग ने विवो में वृद्ध मानव त्वचा में ईसीएम में COL1A1 प्रोटीन की अभिव्यक्ति में भी उल्लेखनीय वृद्धि की है [74]। हालाँकि, हमारा डेटा स्पष्ट करता है कि एचडीएफ में, COL1A1, और COL7A1 प्रोटीन की अभिव्यक्ति बाकुचिओल और रेटिनॉल के साथ उत्तेजना के बाद 4 घंटे पहले ही बढ़ जाती है। हम आगे दिखाते हैं कि COL7A1 प्रोटीन की अभिव्यक्ति कम से कम 72 घंटों तक बनी रहती है।

एक अन्य कारक जिसकी हमने जांच की वह सर्वव्यापी ईसीएम आसंजन प्रोटीन एफएन था जो दो आइसोफोर्मों, अर्थात् प्लाज्मा और सेलुलर एफएन में पाया जाता है। यह विकासात्मक प्रक्रियाओं, कोशिका आसंजन, प्रवासन और विभेदन में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है [75, 76]। सेलुलर एफएन उत्पन्न होता है और फाइब्रिल नेटवर्क में इकट्ठा होता है, जो ईसीएम होमियोस्टैसिस और ईसीएम-सेल इंटरैक्शन को प्रभावित करता है [77]। क्रोनिक यूवी एक्सपोज़र से मानव त्वचा बायोप्सी में एफएन जीन अभिव्यक्ति का विनियमन कम हो जाता है [78]। हमारे डेटा ने बाकुचिओल और रेटिनॉल के साथ उत्तेजना के बाद एचडीएफ में सेलुलर एफएन प्रोटीन अभिव्यक्ति के एक महत्वपूर्ण अपग्रेडेशन का खुलासा किया। पिछले विवो अध्ययन से पता चलता है कि 0.4 प्रतिशत रेटिनॉल के साथ सामयिक उपचार से वृद्ध मानव त्वचा के ईसीएम में एफएन प्रोटीन का स्तर काफी बढ़ जाता है [74]। हालाँकि, यह अभी तक रिपोर्ट नहीं किया गया है कि बाकुचिओल का अनुप्रयोग एचडीएफ में एफएन प्रोटीन अभिव्यक्ति को बढ़ा सकता है। यह विश्लेषण करने के लिए कि क्या ये इन विट्रो डेटा विवो परिणामों में तब्दील होते हैं, हमने एक पूर्व विवो अध्ययन में एफएन प्रोटीन स्तर पर बाकुचिओल और रेटिनॉल के प्रभाव को निर्धारित किया। 4-सप्ताह के आवेदन के बाद, बाकुचिओल-उपचारित क्षेत्रों में वाहन की तुलना में एफएन प्रोटीन मूल्यों में उल्लेखनीय वृद्धि देखी गई। रेटिनोल अनुप्रयोग के परिणामस्वरूप एफएन प्रोटीन स्तर में भी वृद्धि हुई; हालाँकि, यह प्रभाव महत्वपूर्ण नहीं था। यह रेटिनॉल-मध्यस्थता असंगति प्रतिक्रियाओं के कारण हो सकता है जिससे परीक्षण किए गए विषयों की संख्या कम हो गई।

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ईसीएम के एक प्रमुख घटक के रूप में, एफएन घाव भरने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, जो ऊतक निर्माण और संयोजी ऊतक मरम्मत के लिए आवश्यक है। एफएन घाव भरने के सभी चरणों में कार्य करता है और इस प्रकार ईसीएम बनाने के लिए विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं के साथ संपर्क करता है [79]। घाव भरने के लिए FGF7 एक अन्य महत्वपूर्ण कारक है। तीव्र मानव घावों में, FGF7 जीन अभिव्यक्ति तेजी से विनियमित होती है। FGF7 ज्यादातर घाव से सटे त्वचीय फ़ाइब्रोब्लास्ट और दानेदार ऊतक के फ़ाइब्रोब्लास्ट में स्थित होता है [52]। उम्र बढ़ने के साथ घाव भरने की प्रक्रिया में देरी होती है [80]। यह बिगड़ा हुआ कोशिका प्रसार और फ़ाइब्रोब्लास्ट और केराटिनोसाइट्स के प्रवासन, विकास कारकों के प्रति कम प्रतिक्रिया और ईसीएम घटकों के कम संश्लेषण [80] के कारण है। ये अवलोकन त्वचा की उम्र बढ़ने के दौरान होने वाले सामान्य परिवर्तनों से संबंधित हैं [81]। फ्रैक्सेल लेजर उपचार जैसी सौंदर्य प्रक्रियाओं के बाद सूक्ष्म घावों की उत्पत्ति सूक्ष्म घाव भरने की प्रक्रिया शुरू करती है जिससे त्वचा की संरचना और कायाकल्प में सुधार होता है [82]। इसलिए, पुनर्योजी प्रक्रियाओं को उत्तेजित करने के लिए एंटीएजिंग यौगिकों की क्षमता उनकी त्वचा कायाकल्प क्षमता का संकेत दे सकती है। घाव भरने में एफएन और एफजीएफ7 की भागीदारी और इन विट्रो में इन कारकों के बाकुचिओल-प्रेरित अपग्रेडेशन को ध्यान में रखते हुए, हमने आगे (वी) उपकला पुनर्जनन पर बाकुचिओल और रेटिनॉल के प्रभावों को निर्धारित किया। इसलिए, इन विट्रो घाव भरने वाला मॉडल लागू किया गया [34]। बाकुचिओल-उपचारित घावों के पुनर्जीवित एपिडर्मिस की लंबाई काफी बढ़ गई थी, जबकि रेटिनॉल का कोई प्रभाव नहीं पड़ा। ये डेटा रेटिनॉल की तुलना में घाव भरने से जुड़े मापदंडों एफजीएफ7, एफएन और सेलुलर चयापचय गतिविधि पर बाकुचिओल के अधिक स्पष्ट इन विट्रो प्रभाव को दर्शाते हैं।

यह निर्धारित करने के लिए कि क्या बाकुचिओल, अपनी सकारात्मक गतिविधियों के अलावा, कथित त्वचा की उपस्थिति में भी सुधार करता है, विवो अध्ययन में आधारित दूसरा स्व-ग्रेडिंग किया गया था। अध्ययन प्रतिभागियों ने अपने चेहरे की त्वचा की युवावस्था को वर्गीकृत किया। जब टी0 पर बेसलाइन स्व-ग्रेडिंग की तुलना की जाती है, तो 12 सप्ताह के लिए वाहन और बाकुचिओल युक्त फॉर्मूलेशन दोनों के साथ उपचार ने कथित त्वचा की उपस्थिति में काफी वृद्धि की है। वाहन को यथासंभव कम पौष्टिक बनाने के लिए चुना गया था। हालाँकि, किसी भी त्वचा देखभाल उत्पाद का उपयोग न करने के 3 दिनों के बाद स्व-ग्रेडिंग में एक निश्चित सुधार, विशेष रूप से टी 0 पर माप के संबंध में, को बाहर नहीं किया जा सकता है। फिर भी, बाकुचिओल-युक्त फॉर्मूलेशन के आवेदन के बाद, युवा त्वचा की उपस्थिति की व्यक्तिपरक ग्रेडिंग में संबंधित वाहन की तुलना में t{9}}t0 मानों की तुलना में काफी वृद्धि हुई थी।

हमारे विवो अध्ययनों में, बाकुचिओल की त्वचा अनुकूलता अच्छी थी। यह पिछले अध्ययन के अनुरूप है जिसमें दिखाया गया है कि संवेदनशील त्वचा वाले विषयों में बाकुचिओल युक्त मॉइस्चराइज़र अच्छी तरह से सहन किया गया था [18]। इसके विपरीत, अध्ययन में किए गए रेटिनॉल अनुप्रयोग से कई स्वयंसेवकों में त्वचा में जलन पैदा हुई। यह अच्छी तरह से प्रलेखित है कि रेटिनॉल एरिथेमा, खुजली, डिक्लेमेशन या पपल्स [6, 14] सहित विभिन्न त्वचा समस्याओं को प्रेरित कर सकता है। इसके अलावा, रेटिनोइड्स फोटोसेंसिटाइजेशन से जुड़े होते हैं और जैविक रूप से निष्क्रिय पदार्थों के लिए हवा या प्रकाश के संपर्क में आने से नष्ट हो जाते हैं [11]। इसलिए, बुढ़ापा रोधी उपचार में रेटिनॉल की प्रभावकारिता दृढ़ता से इसके वितरण मोड पर निर्भर करती है। दूसरी ओर, बकुचिओल फोटोस्टेबल है और इसे दैनिक रूप से लगाया जा सकता है। रेटिनॉल पर बाकुचिओल का फोटोस्टेबलाइजिंग प्रभाव, जैसा कि चौधरी एट अल द्वारा प्रदर्शित किया गया है। [83], दोनों यौगिकों के संयोजन के लिए एक आशाजनक तर्क प्रदान करता है।

हमारे परिणाम बाकुचिओल के बारे में वैज्ञानिक ज्ञान का विस्तार करते हैं और रेटिनॉल द्वारा लगाए गए त्वचा संबंधी प्रभावों के बारे में हमारी समझ को आगे बढ़ाते हैं। चित्र 5 बकुचिओल की प्रस्तावित कार्रवाइयों का सारांश प्रस्तुत करता है। इसके अलावा, हमारा डेटा त्वचा की उम्र बढ़ने के कई सेलुलर लक्षणों के खिलाफ बाकुचिओल की बहुदिशात्मक प्रभावकारिता के लिए साक्ष्य प्रदान करता है, जो पौधे से प्राप्त कार्यात्मक रेटिनोइड एनालॉग्स के प्रभावों से अधिक है।

निष्कर्ष

बाकुचिओल के साथ उपचार त्वचा की उम्र बढ़ने के लिए एक उन्नत, समग्र और बहुआयामी उपचार दृष्टिकोण प्रदान करता है क्योंकि यह (i) एंटीऑक्सीडेंट, (ii) एंटी-इंफ्लेमेटरी, प्रभाव (iii) कोशिका गतिविधि पर कार्य करता है, महत्वपूर्ण (iv) ईसीएम घटकों की अभिव्यक्ति को बढ़ाता है और सुधार करता है। (v) एपिडर्मल पुनर्जनन और पुन: उपकलाकरण।

आभार

लेखक पांडुलिपि तैयार करने में सहयोग के लिए डॉ. सिल्के गैलिनाट को धन्यवाद देना चाहते हैं।

एक ऐसी स्थिति जिसमें सरकारी अधिकारी का निर्णय उसकी व्यक्तिगत रूचि से प्रभावित हो

अनिका ब्लूमके, अन्निका पी. रिंग, जीनीन इम्येर, अंके हॉफ, तान्या ईसेनबर्ग, वोल्फ्राम गेरवाट, फ्रांजिस्का मेयर, सबरीनाब्रेइटक्रुत्ज़, लीनाएम। क्लिंगर, फ्रैंकरिप्पके और डोरोथिया श्वेइगर बियर्सडॉर्फ एजी के कर्मचारी हैं। ग्रिट सैंडिग और मैरिएटा सीफर्ट जेमट्रिया टेस्ट लैब जीएमबीएच के कर्मचारी हैं। डोएर्टे सेगर एसजीएस इंस्टीट्यूट फ्रेसेनियस जीएमबीएच के कर्मचारी हैं। कोई भी लेखक हितों के टकराव की बात नहीं कहता।

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