ग्लूकोकार्टिकॉइड-प्रेरित चूहों में सिस्टैंच डेजर्टिकोला और इसके चावल वाइन उत्पादों के न्यूरोएंडोक्राइन-प्रतिरक्षा प्रभाव-Ⅱ

3.2.4. इम्युनोहिस्टोकैमिस्ट्री

न्यूरोनल एपोप्टोसिस को कई एपोप्टोटिक और एंटीएपोप्टोटिक जीन द्वारा नियंत्रित किया जाता है, मुख्य रूप से एपोप्टोसिस-प्रमोटिंग जीन बैक्स और बीसीएल -2 जीन परिवार के एंटीएपोप्टोटिक जीन। बीसीएल -2 माइटोकॉन्ड्रिया, एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम और परमाणु झिल्ली जैसे प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन उत्पादक अंगों में स्थानीयकृत है। Bcl-2 का ऑक्सीजन मुक्त कणों पर बहुत कम प्रभाव पड़ता है, लेकिन हो सकता हैकोशिकाओं में ऑक्सीडेटिव क्षति को रोकें. बैक्स साइटोप्लाज्म से माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली तक परिवहन करता है, माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली संरचना को बदलता है, और साइटोक्रोम सी की रिहाई और एपोप्टोसिस के प्रेरण को बढ़ावा देता है।

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बैक्स और बीसीएल-2 प्रोटीन की अधिवृक्क साइटोप्लाज्म में अभिव्यक्ति हुई थी। धुंधलापन में सभी पीले कण दिखाई दिए। बीसी समूह की तुलना में, एमसी समूह में बैक्स प्रोटीन का औसत ऑप्टिकल घनत्व काफी बढ़ गया (पी< 0.01). Compared to that of the MC group, the average optical density in the CD-LD and WCD-LD groups decreased significantly (P < 0.01) (Figure 5(a)).

चित्र 5(बी) से पता चलता है कि बीसी समूह की तुलना में, एमसी समूह में बीसीएल-2 प्रोटीन का औसत ऑप्टिकल घनत्व काफी कम हो गया है (पी)< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and CD-HD groups increased significantly (P < 0.01), while those of the WCD-MD and CD-MD groups increased (P < 0.05).

कैस्पेज़ -3 प्रोटीन मुख्य रूप से सामान्य ऊतकों में अपने मूल रूप में साइटोप्लाज्म में स्थानीयकृत होता है और इसकी अभिव्यक्ति कम होती है। सकारात्मक संकेत हल्के पीले या भूरे पीले रंग के होते हैं। बीसी समूह की तुलना में, एमसी समूह में कैस्पेज़ -3 की अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि हुई (पी)< 0.05). Compared to that of the MC group, the expression of caspase-3 in the WCD-HD and WCD-MD groups increased (P < 0.05) (Figure 5(c)).

सामान्य ऊतकों में, फास जीन की अभिव्यक्ति कम हो गई थी, और स्वस्थानी संकरण के लिए सकारात्मक संकेत भूरा पीला था। जैसा कि चित्र 5(डी) में दिखाया गया है, बीसी समूह की तुलना में, एमसी समूह में फास प्रोटीन का औसत ऑप्टिकल घनत्व बढ़ गया (पी)< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and WCD-LD groups improved (P < 0.05) (Figure 5(d)).

FasL प्रोटीन मुख्य रूप से कोशिका झिल्ली या साइटोप्लाज्म में स्थित होता है, और इसके सकारात्मक संकेत भूरे रंग के होते हैं। BC समूह की तुलना में, MC समूह में FasL जीन का औसत ऑप्टिकल घनत्व काफी बढ़ गया (P)< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density of the FasL gene in the WCD-HD, WCD-MD, CDHD, and CD-MD groups increased significantly (P < 0.01) (Figure 5(e)).

परिणामों से पता चला कि सीडी और डब्ल्यूसीडी हो सकते हैंसूजन वाली कोशिकाओं में एपोप्टोसिस को प्रेरित करेंऔर FasL प्रोटीन की अभिव्यक्ति को बढ़ावा देकर और Fas प्रोटीन से जुड़कर, कैस्पेज़ -3 प्रोटीन को सक्रिय करके और कैस्पेज़ कैस्केड को ट्रिगर करके अधिवृक्क क्षति को कम करता है। WCD-HD समूह का प्रभाव सबसे अच्छा था।

3.3. प्रतिरक्षा कार्य का निर्धारण

3.3.1. प्रतिरक्षा अंग सूचकांक

बीसी समूह की तुलना में, एमसी समूह के थाइमस गुणांक और प्लीहा सूचकांक में काफी कमी आई (पी)< 0.01). Compared to the MC group, the WCD-MD group had the greatest difference (P < 0.05). The thymus coefficient was almost back to the normal level. For the spleen index, the WCDMD, WCD-LD, and CD-MD groups showed significant differences compared with that of the MC group (P < 0.01) (see Figure 6). Therefore, WCD and CD treatment could protect the immune organs, and the effects of WCD were better.

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3.3.2. परिधीय रक्त में टी लिम्फोसाइट सबसेट का पता लगाना

बीसी और प्रत्येक दवा समूह में ऊपरी बाएँ चतुर्थांश में CD{0}} कोशिकाओं और दाएँ निचले चतुर्थांश में CD{1}} कोशिकाओं का प्रतिशत MC समूह की तुलना में अधिक था। बीसी समूह की तुलना में, एमसी समूह (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the ratio of CD4+ThCD8+ increased significantly in the PC group, the WCD group, and the CD-HD group (P < 0.01) (Figure 7).

3.3.3. सीरम में आईएल -10, आईएल -6, आईएल -2, टीएनएफ-Α, और आईएफएन-सी के स्तर का निर्धारण

चित्र 8 से पता चलता है कि बीसी समूह की तुलना में, आईएल -6, टीएनएफ- और आईएफएन-सी का स्तर काफी बढ़ गया है (पी)< 0.01). The level of IL-10 and IL-2 decreased in the MC group. Compared to that of the MC group, the level of IL-6, TNF-α, and IFN-c decreased and IL-10 and IL-2 increased in serum in each of the drug groups. The effect of WCD was better than the effect of CD, especially in the WCD-MD group, in which the effect was close to that of the PC group.

3.3.4. लाइमस ऊतक माइक्रोस्कोप अवलोकन प्रयोग के परिणाम

चित्र 9 से पता चलता है कि बीसी समूह में बड़ी संख्या में लिम्फोसाइट्स मौजूद थे। लिम्फोसाइट्स और रेटिकुलोसाइट्स बिखरे हुए गोल या अंडाकार थाइमोसाइट्स के साथ केंद्र में शिथिल रूप से व्यवस्थित थे। कोई परिगलन नहीं था, कोई सूजन कोशिका घुसपैठ नहीं थी, और कोई असामान्य परिवर्तन नहीं था।

एमसी समूह ने केंद्र में लिम्फोसाइट्स और रेटिकुलोसाइट्स की अव्यवस्थित व्यवस्था के साथ बड़ी मात्रा में लिम्फोइड नेक्रोसिस ऊतक दिखाया। गोल या अंडाकार थाइमोसाइट्स गायब हो गए, बड़े पैमाने पर कोशिका अध: पतन या परिगलन स्पष्ट था, और असामान्य रोग संबंधी परिवर्तनों के साथ सूजन कोशिका घुसपैठ हुई थी।

सीडी समूहों में, लिम्फोसाइटों की रूपात्मक विशेषताएं सामान्य हो गई थीं, और केंद्रीय लिम्फोसाइटों और रेटिकुलोसाइट्स की व्यवस्था लगभग सामान्य थी। गोल या अंडाकार थाइमोसाइट्स ठीक हो गए थे, लेकिन कम संख्या में अपक्षयी या नेक्रोटिक लिम्फोसाइट्स और घुसपैठ करने वाली सूजन कोशिकाएं बनी रहीं।

डब्ल्यूसीडी समूहों और पीसी समूह में, लिम्फोसाइटों की रूपात्मक विशेषताओं की बेहतर मरम्मत की गई। केंद्र में लिम्फोसाइट्स और रेटिकुलोसाइट्स अच्छी तरह से संरेखित थे, गोल या अंडाकार थाइमोसाइट्स लगभग सामान्य थे, लेकिन घुसपैठ करने वाले और अपक्षयी लिम्फोसाइट्स की एक छोटी संख्या बनी हुई थी।

3.4. सीएएम प्रोटीन जीन अभिव्यक्ति

CaM mRNA की अभिव्यक्ति की जांच करने के लिए RQ मान (CaM mRNA -actin mRNA) पर विचार किया गया। बीसी समूह का आरक्यू 1 था। एमसी समूह में हाइपोथैलेमस में सीएएम एमआरएनए की अभिव्यक्ति में काफी वृद्धि हुई (पी)< 0.01), while the value decreased in the WCD-HD, WCD-MD, WCDLD, and CD-HD groups (P < 0.05) (Figure 10). The expression of CaM mRNA in the hypophysis in the MC group was lower than that in the BC group (P < 0.01). The expression in the WCD-HD, WCD-MD, WCD-LD, CD-HD, and CD-LD groups increased (P < 0.05), and the effect in the WCD groups was better than the effect in the CD groups.

4. चर्चा

चीनी फार्माकोपिया [2] रिकॉर्ड करता है कि सीडी और डब्ल्यूसीडी का उपयोग क्लिनिक में मुख्य प्रकार के काढ़े के टुकड़ों के रूप में किया जा सकता है। चावल की शराब के साथ भाप में पकाने के बाद,किडनी-यांग प्रभाव को कम करने वाला और टोनिंग करने वालाबढ़ाया गया. यूपीएलसी-क्यूक्यूक्यू-एमएस के माध्यम से, हमने चावल वाइन स्टीमिंग की प्रक्रिया के दौरान रासायनिक सामग्री आधार में मात्रात्मक परिवर्तनों का पता लगाया। इरिडॉइड ग्लाइकोसाइड अस्थिर थे और इन ग्लाइकोसाइड की सामग्री कम हो गई, यहां तक कि पता नहीं चल पाई। फेनिलथेनॉल ग्लाइकोसाइड्स की सामग्री भी बदल गई, जो फार्माकोडायनामिक्स और नैदानिक प्रभाव में परिवर्तन ला सकती है।

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क्लासिक किडनी-यांग कमी मॉडल को कॉर्टिकोस्टेरोन के चमड़े के नीचे इंजेक्शन द्वारा दोहराया गया था [19]। कॉर्टिकोस्टेरोन की अधिक मात्रा हाइपोथैलेमस में सीआरएच के स्राव को रोक सकती है। इस बीच, ACTH का रहस्य भी बाधित हो गया। अधिवृक्क प्रांतस्था हार्मोन का स्तर कम हो गया, और इस प्रकार, एचपीए अक्ष का कार्य कम हो गया। एचपीए अक्ष का हाइपोफ़ंक्शन किडनी-यांग की कमी का एक सामान्य लक्षण है [20]। फिर चूहे "कमी" की घटनाएँ दिखाते हैं और लक्षण क्लिनिक में किडनी-यांग की कमी के अनुरूप होते हैं।

एमसी समूह में, चूहे के सीरम में सीआरएच, एसीटीएच, टी और सीओआरटी का स्तर काफी कम हो गया (पी)< 0.01). After being treated by CD and WCD, the content of CRH, ACTH, T, CORT, and cortisol all increased to some degree, and the effect of WCD-MD was the best, almost equal to that in the PC group. These results indicated that the relative hormone balance in the HPA axis had been destroyed in the MC group, CD and WCD could improve the functional recovery of abnormal adrenal axis hormone levels, but the effect of WCD was better.

Bcl -2 परिवार के सदस्यों के अनुपात को संशोधित करना मुख्य तंत्रों में से एक है जिसके द्वारा FasThFasL मृत्यु रिसेप्टर मार्ग की मध्यस्थता करता है, और Bcl -2 परिवार माइटोकॉन्ड्रियल मार्ग [21] को नियंत्रित करता है। एपोप्टोसिस-अवरोधक कारक बीसीएल -2 और एपोप्टोसिस-उत्प्रेरण कारक, जैसे बाक्स, सभी बीसीएल -2 परिवार [22] से संबंधित हैं। सेल एपोप्टोसिस को एपोप्टोसिस-अवरोधक कारकों और एपोप्टोसिस-उत्प्रेरण कारकों के सापेक्ष अनुपात द्वारा निर्धारित किया जा सकता है [23]। माइटोकॉन्ड्रिया में एपोप्टोसिस के कई रूपों के लिए केंद्रीय जांच बिंदुओं का कार्य होता है [24]। वर्तमान अध्ययन से पता चला है कि सीडी-एमडी और डब्ल्यूसीडी बैक्स की अभिव्यक्ति को कम कर सकते हैं और बीसीएल को बढ़ा सकते हैं।किडनी-यांग की कमी में सुधार करें. फास प्रमुख मृत्यु रिसेप्टर है जो फास लिगैंड (एफएएसएल) के साथ बंधाव द्वारा एपोप्टोसिस को प्रेरित करता है [25]। एमसी समूह में एफएएस और एफएएसएल की अभिव्यक्ति में वृद्धि हुई, जबकि डब्ल्यूसीडी-एमडी समूह (पी) में यह अभिव्यक्ति काफी बढ़ गई< 0.01) compared with the MC group. Both FasThFasL and BaxThBcl-2 systems transduce apoptotic signals to the caspase family [26]. Caspase-3 is one of the pivotal proteinases that initiate cell apoptosis. The activation of caspase-3 indicates that apoptosis enters an irreversible stage [27]. The expression of caspase-3 in the MC group increased and increased significantly in the WCD-HD and WCD-MD groups (P < 0.05).

प्रतिरक्षा कार्य की कमी किडनी-यांग की कमी की महत्वपूर्ण अभिव्यक्तियों में से एक है [28]। इस अध्ययन में, हमने पाया कि डब्ल्यूसीडी-एमडी समूह के प्लीहा और थाइमस के सूचकांक में काफी सुधार हुआ (पी)< 0.01, P < 0.05). The immune response of the immune system is regulated mainly by the Th subgroups [29]. IL-2 is the growth factor for T cells, secreted by T cells and macrophages, participates in inflammatory regulation, regulates immunity, and increases infection resistance [30]. The level of IL-2 in the MC group decreased (P < 0.01), and after treatment with CD and WCD, the level of IL-2 recovered. IL-6 and TNF-α are proinflammatory cytokines. Increased levels of IL-6 and TNF-α cytokines cause cytokine imbalances and exacerbate inflammation. The levels of IL-6 and TNF-α increased in the MC group, while after treatment, the levels of IL-6 and TNF-α decreased. T cells are divided into CD4 cells and CD8 cells, and the CD4+ThCD8+ ratio can be used as an important index of immune regulation [31]. CD4+ThCD8+ in the MC group decreased (P < 0.01), while in the WCD and CDHD groups increased (P < 0.01).

एचपीए अक्ष सबसे महत्वपूर्ण नियामक प्रणाली है क्योंकि यह ग्लूकोकार्टिकॉइड स्राव और अधिवृक्क प्रांतस्था के स्रावी कार्य को बनाए रखने के लिए अंतःस्रावी तंत्र को नियंत्रित करता है [32]। हाइपोथैलेमस ऊतक में CaM mRNA की अधिक अभिव्यक्ति किडनी यांग की कमी से संबंधित थी। सीडी और डब्ल्यूसीडी कैल्शियम चैनलों को अवरुद्ध कर सकते हैं, हाइपोथैलेमस में सीएएम एमआरएनए अभिव्यक्ति को रोक सकते हैं, और कैल्शियम प्रवाह को कम कर सकते हैं, इस प्रकार सीए 2+·सीएएम जटिल गतिविधि कम हो सकती है।

किडनी-यांग की कमी का गठन एक दीर्घकालिक रोग विकास प्रक्रिया है। किडनी अब पूरी तरह से शारीरिक अवधारणा नहीं है, और यह न्यूरोएंडोक्राइन-इम्युनिटी और जेनिटोरिनरी सिस्टम के लिए एक सामान्य शब्द है। न्यूरोएंडोक्राइन-इम्यून (एनईआई) नेटवर्क एक महत्वपूर्ण एकीकृत नियामक प्रणाली है [33]। सीडी और डब्ल्यूसीडी एचपीएटी अक्ष के कार्य को नियंत्रित कर सकते हैं और किडनी-यांग की कमी की वसूली में सुधार कर सकते हैं। यह परिणाम किडनी-यांग की कमी की नैदानिक रोकथाम और उपचार के लिए प्रयोगात्मक आधार प्रदान करता है।