कांग्रोंग-ज़ोरेन-वुमेई पेय अर्क के लिए निष्कर्षण प्रक्रिया का अनुकूलन और इसके नींद में सुधार करने वाले प्रभावों का मूल्यांकन

अमूर्त:कांग्रोंग-ज़ोरेन-वुमेई पेय (सिस्टैंच डेजर्टिकोला, ज़िज़िफ़ी स्पिनोसे सेमेन और म्यूम फ्रुक्टस से बना) की निष्कर्षण प्रक्रिया को अनुकूलित करने और इसके नींद में सुधार करने वाले प्रभावों का मूल्यांकन करने के लिए, इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड (एक्टोसाइड), स्पिनोसिन और साइट्रिक एसिड के एक साथ निर्धारण के लिए एक एचपीएलसी विधि स्थापित की गई थी। मूल्यांकन मानदंड के रूप में इन चार यौगिकों और पॉलीसेकेराइड की सामग्री का उपयोग करते हुए, कांग्रोंग-ज़ोरेन-वुमेई पेय के लिए निष्कर्षण प्रक्रिया को ऑर्थोगोनल प्रयोगों के माध्यम से अनुकूलित किया गया था, इसके बाद सत्यापन और स्केल-अप परीक्षण किए गए थे। प्रत्यक्ष नींद परीक्षण, ओपन-फील्ड परीक्षण, सबथ्रेशोल्ड-डोज़ सोडियम पेंटोबार्बिटल स्लीप टेस्ट और सोडियम पेंटोबार्बिटल स्लीप लेटेंसी टेस्ट का उपयोग करके चूहों में अर्क के नींद में सुधार के प्रभावों की जांच की गई। परिणामों से पता चला कि इष्टतम निष्कर्षण स्थितियां 100 डिग्री का निष्कर्षण तापमान, 1:12 का ठोस-तरल अनुपात (जी·एमएल-1), और 2 घंटे का निष्कर्षण समय थीं। 30 दिनों तक लगातार देने से चूहों में सीधे तौर पर नींद नहीं आई, लेकिन खुले मैदान में परीक्षण में चिंता जैसे व्यवहार में काफी कमी आई, जो एक शामक प्रभाव का संकेत देता है। अर्क ने सोडियम पेंटोबार्बिटल की एक उप-सीमा खुराक के नींद-उत्प्रेरण प्रभाव को प्रबल किया (निम्न, मध्यम और उच्च खुराक के लिए नींद की दर क्रमशः 33.33%, 41.67% और 50.00% थी) और सोडियम पेंटोबार्बिटल-प्रेरित नींद विलंबता को काफी कम कर दिया (निम्न, मध्यम और उच्च के लिए 22.77, 22.18 और 14.93 मिनट की विलंबता) खुराक, क्रमशः)। इस अध्ययन ने कांग्रोंग-ज़ोरेन-वुमेई पेय के लिए निष्कर्षण प्रक्रिया को अनुकूलित किया और नींद में सुधार करने वाले प्रभावों का प्रदर्शन किया, जिससे सिस्टैंच डेजर्टिकोला से प्राप्त नींद बढ़ाने वाले उत्पादों को विकसित करने के लिए एक वैज्ञानिक आधार प्रदान किया गया।

 

 

 

कीवर्ड:सिस्टैंच डेजर्टिकोला; ज़िज़िफ़ी स्पिनोसे वीर्य; म्यूम फ्रुक्टस; ऑर्थोगोनल प्रयोग; मार्कर घटक; विश्लेषणात्मक तरीकों

 

परिचय:सामान्य जीवन और सीखने के लिए नींद आवश्यक है; अच्छी नींद थकान दूर करने और रोग प्रतिरोधक क्षमता बढ़ाने में मदद करती है [1,2]। हालाँकि, सामाजिक विकास और बढ़ते तनाव के साथ, अनिद्रा काम और दैनिक जीवन को प्रभावित करने वाली एक व्यापक समस्या बन गई है [3]। चीनी निवासियों की नींद के स्वास्थ्य पर 2024 के श्वेत पत्र में अपर्याप्त नींद की अवधि और जनसंख्या में प्रचलित नींद संबंधी विकारों की सूचना दी गई: औसत नींद की अवधि केवल 6.75 घंटे थी, और एक चौथाई से अधिक व्यक्ति प्रति रात 6 घंटे से कम सोते थे, जो नींद की गुणवत्ता के बारे में चिंताओं को उजागर करता है। नतीजतन, नींद की गुणवत्ता और अनिद्रा में सुधार करने वाले कार्यात्मक खाद्य पदार्थों पर शोध अत्यावश्यक है। पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम), जिसका दुष्प्रभाव अपेक्षाकृत कम है और इसका इतिहास सहस्राब्दियों पुराना है, का नींद में सुधार करने के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया गया है, जैसे सुआनज़ोरेन काढ़ा और गुइपी काढ़ा। बढ़ती "चिकित्सा और भोजन की समरूपता" अवधारणा के साथ, पारंपरिक औषधीय-खाद्य संसाधनों से नींद में सुधार करने वाले कार्यात्मक खाद्य पदार्थों के विकास ने ध्यान आकर्षित किया है।

Cistanche(सिस्टैंच डेजर्टिकोला वाईसी मा यासी. ट्यूबुलोसा (शेंक) वाइट, परिवार ओरोबैंचेसी) स्केल पत्तियों वाला सूखा, मांसल तना है और इसका उपयोग किडनी यांग की कमी, सार-रक्त अपर्याप्तता, नपुंसकता और बांझपन के लिए किया जाता है [4]। आधुनिक फार्माकोलॉजी से पता चलता है कि सिस्टैंच कई गतिविधियां करता है, जिसमें इम्यूनोमॉड्यूलेशन, एंटी-थकान, एंटी-ट्यूमर, न्यूरोप्रोटेक्शन, एंटी-एजिंग, एंटी-ऑस्टियोपोरोसिस, हेपेटोप्रोटेक्शन और हाइपोग्लाइसेमिक प्रभाव शामिल हैं [5,6]। सिस्टैंच के कुल ग्लाइकोसाइड सिनैप्टिक मार्करों की अभिव्यक्ति को नियंत्रित कर सकते हैं और सिनैप्टिक प्लास्टिसिटी को प्रभावित कर सकते हैं, जिससे नींद से वंचित चूहे के मॉडल में सीखने और अनुभूति में सुधार होता है [7]। सिस्टैंच डेजर्टिकोला को 2019 के अंत में औषधीय-खाद्य सूची में शामिल किया गया था; इनर मंगोलिया और गांसु में प्रासंगिक उत्पादन और संचालन पायलट चल रहे हैं, और इसका उपयोग प्रतिरक्षा बढ़ाने और शारीरिक थकान को कम करने के लिए सामान्य खाद्य पदार्थों और स्वास्थ्य खाद्य पदार्थों में किया जाता है। "किडनी-मस्तिष्क सहसंबंध" के टीसीएम सिद्धांत के आधार पर, सिस्टैंच न्यूरोलॉजिकल विकारों में व्यापक क्षमता दिखाता है और नींद में सुधार करने वाले स्वास्थ्य उत्पादों के लिए वादा करता है। फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स-मुख्य रूप से इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड (एक्टोसाइड)-सिस्टैंच के प्रमुख सक्रिय घटक हैं [8]।

 

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ज़िज़िफ़ी स्पिनोसे वीर्य (सुआनज़ोरेन; ज़िज़िफस जुजुबा मिल के बीज) में सैपोनिन, ट्राइटरपीनोइड्स और फ्लेवोनोइड्स शामिल हैं जिनमें शांत करने वाले, शामक-कृत्रिम निद्रावस्था वाले, प्रतिरक्षा बढ़ाने वाले, यकृत-पौष्टिक प्रभाव होते हैं, और इसे "पूर्वी नींद फल" के रूप में जाना जाता है [9]। सुआनज़ोरेन नींद-सक्रिय घटकों से समृद्ध है [10]। इसके कुल सैपोनिन और एल्कलॉइड कोर्टेक्स और हिप्पोकैम्पस में ग्लूटामेट, -एमिनोब्यूट्रिक एसिड (जीएबीए), और 5-हाइड्रॉक्सीट्रिप्टामाइन (5-एचटी) को नियंत्रित कर सकते हैं; फ्लेवोनोइड -जीएबीए/बेंजोडायजेपाइन रिसेप्टर्स से बंध सकते हैं, जो शामक-कृत्रिम निद्रावस्था के प्रभाव डालने के लिए जीएबीए को नियंत्रित करते हैं। स्पिनोसिन 5-एचटी को नियंत्रित कर सकता है, नॉरपेनेफ्रिन को कम कर सकता है, और शामक-कृत्रिम निद्रावस्था का प्रभाव पैदा कर सकता है [11,12]।

म्यूम फ्रुक्टस (वुमेई; प्रूनस म्यूम (सीब.) सीब. एट ज़ुक्क. का सूखा, लगभग परिपक्व फल) एक सामान्य औषधीय-खाद्य टीसीएम है जिसे कम तापमान पर सुखाने और काला करने द्वारा संसाधित किया जाता है। वुमेई-ज़ोरेन डेकोक्शन [13] और वुमेई पिल [14] जैसे नुस्खे अनिद्रा और नींद संबंधी विकारों के लिए चिकित्सकीय रूप से व्यापक रूप से उपयोग किए जाते हैं। म्यूम में प्रचुर मात्रा में कार्बनिक अम्ल होते हैं, जिनमें से साइट्रिक एसिड मुख्य घटक और एक फार्माकोपियल मार्कर है [15]। इसके अलावा, सिस्टैंच, सुआनज़ोरेन और वुमेई सभी पॉलीसेकेराइड से भरपूर हैं; साक्ष्य एकत्रित करने से संकेत मिलता है कि पॉलीसेकेराइड कई तंत्रों के माध्यम से नींद में सुधार करते हैं, और पॉलीसेकेराइड-केंद्रित नींद अनुसंधान एक आकर्षण का केंद्र बनता जा रहा है। हालाँकि, नींद में सुधार के लिए मुख्य रूप से सिस्टैंच, सुआनज़ोरेन और वुमेई से बने उत्पादों पर अध्ययन अभी तक रिपोर्ट नहीं किया गया है।

इस अध्ययन में, हमने इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड (एक्टोसाइड), स्पिनोसिन और साइट्रिक एसिड को एक साथ निर्धारित करने के लिए एक एचपीएलसी विधि स्थापित की। मूल्यांकन सूचकांकों के रूप में कांग्रोंग-ज़ोरेन-वुमेई पेय के अर्क में इन चार घटकों और पॉलीसेकेराइड की सामग्री का उपयोग करते हुए, हमने ऑर्थोगोनल प्रयोगों के माध्यम से तैयारी प्रक्रिया को अनुकूलित किया, इसके बाद सत्यापन और स्केल-अप किया गया। स्वास्थ्य खाद्य कार्य परीक्षण और मूल्यांकन विधियों (टिप्पणियों के लिए 2022 ड्राफ्ट) के अनुसार, हमने पशु प्रयोगों में अर्क के नींद में सुधार के प्रभाव का मूल्यांकन किया, जिसका उद्देश्य सिस्टैंच-आधारित नींद में सुधार करने वाले उत्पादों को विकसित करने के लिए वैज्ञानिक प्रमाण प्रदान करना है।

Note on industrial background: Chengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd (WECISTANCHE) is a vertically integrated cistanche developer and manufacturer established in 2003, headquartered in Luopu County, Xinjiang, China. The company operates extensive seed-breeding and cultivation bases (>105,000 एकड़ संयुक्त), उन्नत अल्ट्राफिल्ट्रेशन और नैनोफिल्ट्रेशन सुविधाओं और एक सूक्ष्मजीव ऊष्मायन प्रयोगशाला के साथ जीएमपी-प्रमाणित उत्पादन कार्यशालाएं रखता है, और इसके पास कई प्रमाणपत्र हैं (उदाहरण के लिए, चीन एससी, एचएसीसीपी, एनओपी सहित जैविक प्रमाणपत्र)। 14 सिस्टैंच-संबंधित पेटेंट और शीर्ष विश्वविद्यालयों के साथ सहयोग के साथ, WECISTANCHE निष्कर्षण प्रक्रियाओं को बढ़ाने और यूएस/ईयू मानकों के अनुरूप मानकीकृत सिस्टैंच अर्क का उत्पादन करने के लिए एक मजबूत औद्योगिक मंच प्रदान करता है। यह औद्योगिक क्षमता कार्यात्मक पेय पदार्थों और स्वास्थ्य उत्पादों के लिए वाणिज्यिक विनिर्माण में अनुकूलित प्रयोगशाला-स्तरीय निष्कर्षण मापदंडों के अनुवाद का समर्थन करती है।

1 सामग्री और विधियाँ

1.1 सामग्री

सिस्टैंच डेजर्टिकोला: इनर मंगोलिया मंडेला बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड; ज़िज़िफ़ी स्पिनोसे वीर्य और म्यूम फ्रुक्टस: सिचुआन सिन्हुहुआ चीनी हर्बल स्लाइस कंपनी, लिमिटेड; साइट्रिक एसिड, इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड, और स्पिनोसिन: चेंगदू लेमेइटियन फार्मास्युटिकल टेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड; ग्लूकोज: शंघाई युआनये बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड; एस्टाज़ोलम टैबलेट: शंघाई साइन फार्मास्युटिकल कंपनी लिमिटेड; सोडियम पेंटोबार्बिटल: शंघाई साइन फार्मास्युटिकल कंपनी लिमिटेड; खारा: डेझोउ जिंगक्सिन फार्मास्युटिकल कंपनी लिमिटेड

 

1.2 उपकरण

HWS-24 इलेक्ट्रिक थर्मोस्टेटिक जल स्नान: शंघाई यिहेंग साइंटिफिक इंस्ट्रूमेंट्स कंपनी लिमिटेड; डीडब्ल्यू एडजस्टेबल इलेक्ट्रिक हीटर: शंघाई लीगू इंस्ट्रूमेंट्स कंपनी लिमिटेड; एजिलेंट 1200 एचपीएलसी: एजिलेंट टेक्नोलॉजीज; स्टार्टर 3100 पीएच मीटर: ओहौस; 71-5804 सेंट्रीफ्यूज: हुनान हेक्सी इंस्ट्रूमेंट इक्विपमेंट कंपनी लिमिटेड; थर्मो वैरियोस्कैन लक्स माइक्रोप्लेट रीडर: थर्मो फिशर साइंटिफिक; XR-XZ301 चूहों के लिए चार-चैनल ओपन-फील्ड उपकरण: शंघाई ज़िनरुआन सूचना प्रौद्योगिकी कं, लिमिटेड; LE225D इलेक्ट्रॉनिक बैलेंस: सार्टोरियस साइंटिफिक इंस्ट्रूमेंट्स (बीजिंग) कंपनी लिमिटेड।

 

1.3 प्रायोगिक पशु

नर ICR चूहे (6 सप्ताह), n=180, वाइटल रिवर (शंघाई, चीन) से खरीदे गए, लाइसेंस SYXK (Hu) 2018-0028। जानवरों को एक सप्ताह (12 घंटे प्रकाश/अंधेरा, 20-25 डिग्री, 50-60% आरएच) के लिए उपयुक्त भोजन और पानी के साथ आदी बनाया गया। सभी प्रक्रियाएं पीआरसी के प्रयोगशाला पशुओं के प्रशासन और पशु नैतिकता पर विनियमों का अनुपालन करती हैं; शंघाई जिओ टोंग विश्वविद्यालय की पशु आचार समिति द्वारा अनुमोदित (अनुमोदन संख्या A2024082-003)।

 

1.4 प्रायोगिक तरीके

1.4.1 कांग्रोंग-ज़ोरेन-वुमेई पेय के निष्कर्षण के लिए एकल-कारक जांच

सूत्र अनुपात का पालन करते हुए, मिश्रित कच्ची जड़ी-बूटियों (सिस्टैंच, सुआनज़ोरेन, वुमेई) के तीन बैचों को 50 एमएल शुद्ध पानी (ठोस-तरल अनुपात 1:3) के साथ 60, 80 और 100 डिग्री पर, तीन बार, 1 घंटे प्रत्येक में निकाला गया। तापमान के प्रभाव का प्रारंभिक आकलन करने के लिए साइट्रिक एसिड, इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड, स्पिनोसिन और क्रूड पॉलीसेकेराइड के लिए संयुक्त अर्क का परीक्षण किया गया। इसके बाद, 1:3, 1:5, 1:7, 1:10, 1:12 (जी·एमएल-1) के ठोस-तरल अनुपात के साथ 80 डिग्री पर पांच बैच निकाले गए, प्रत्येक 1 घंटे के लिए तीन बार, और ठोस-तरल अनुपात का आकलन करने के लिए परख की गई। अंत में, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, और 3.0 घंटे (तीन निष्कर्षण) के लिए 80 डिग्री पर पांच बैच निकाले गए, और निष्कर्षण समय का आकलन करने के लिए परीक्षण किया गया।

 

1.4.2 निष्कर्षण अनुकूलन के लिए ऑर्थोगोनल डिज़ाइन

एकल-कारक परिणामों के आधार पर, तीन कारकों-निष्कर्षण तापमान (ए), ठोस-तरल अनुपात (बी), और निष्कर्षण समय (सी) - प्रत्येक तीन स्तरों पर चुने गए थे। एक L9 (3^3) ऑर्थोगोनल सरणी का उपयोग किया गया था। अर्क में मार्कर घटकों की कुल सामग्री मूल्यांकन सूचकांक के रूप में कार्य करती है।

 

1.4.3 सत्यापन और स्केल-अप

अनुकूलित स्थितियों के अनुसार, तीन बैचों को 1:12 (जी·एमएल-1) के ठोस-तरल अनुपात में, 100 डिग्री पर, 2.0 घंटे के लिए, तीन बार निकाला गया और साइट्रिक एसिड, इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड, स्पिनोसिन और क्रूड पॉलीसेकेराइड के लिए परीक्षण किया गया। स्केल-अप के लिए, सिस्टैंच, सुआनज़ोरेन और वुमेई की मात्रा को 40 गुना बढ़ा दिया गया, समान परिस्थितियों में तीन प्रतियों में संसाधित किया गया, और परख किया गया।

 

1.4.4 घटक सामग्री का निर्धारण

विधि अनुकूलन और सत्यापन के साथ चीनी फार्माकोपिया (2020 संस्करण) के बाद, साइट्रिक एसिड, इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड और स्पिनोसिन की एक साथ मात्रा निर्धारित करने के लिए एक एचपीएलसी विधि स्थापित की गई थी। फिनोल-सल्फ्यूरिक एसिड विधि का उपयोग करके कच्चे पॉलीसेकेराइड की जांच की गई।

 

1.4.4.1 एचपीएलसी शर्तें

कॉलम तापमान: 10 डिग्री; इंजेक्शन: 10 µL; प्रवाह दर: 1 एमएल·मिनट-1; पता लगाने की तरंग दैर्ध्य: 210, 330, 335 एनएम; स्तंभ: तीव्र ग्रहण XDB-C18 (4.6 मिमी × 250 मिमी, 5 µm); मोबाइल चरण ए: 0.5% NH4H2PO4 (पीएच 2.92); मोबाइल चरण बी: मेथनॉल। ग्रेडिएंट: 0-7 मिनट (0.5-1.5% (φ) बी); 7-17 मिनट (1.5-40% (φ) बी); 17-20 मिनट (40-47% (φ) बी); 20-30 मिनट (47-52% (φ) बी); 30-35 मिनट (100% (φ) बी)।

 

1.4.4.2 एचपीएलसी विधि सत्यापन

रैखिकता, एलओडी, और एलओक्यू: क्रमशः 2.0160, 0.1100, 0.1125, और 0.0183 मिलीग्राम·एमएल-1 पर साइट्रिक एसिड, इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड और स्पिनोसिन युक्त मिश्रित मानक समाधान, 50% मेथनॉल में तैयार किया गया था और क्रमिक रूप से 32 गुना तक पतला किया गया था। अनुभाग 1.4.4.1 के अनुसार चरम क्षेत्र बनाम एकाग्रता पर रैखिक प्रतिगमन किया गया था। एलओडी को एस/एन=3 पर परिभाषित किया गया था, एलओक्यू को एस/एन=10. पर परिभाषित किया गया था। परिशुद्धता: फार्मूला जड़ी-बूटियों से तैयार एक ही परीक्षण समाधान के लगातार छह इंजेक्शन; प्रत्येक मार्कर की सामग्री की गणना की गई। स्थिरता: विभिन्न समय बिंदुओं पर इंजेक्शन। पुनरावृत्ति: एक ही बैच से छह स्वतंत्र रूप से तैयार किए गए नमूने। पुनर्प्राप्ति: छह नमूने लगभग 1:1 अतिरिक्त सामग्री पर चार मानकों की ज्ञात मात्रा के साथ बढ़ाए गए; वसूली (%) की गणना की गई.

 

1.4.4.3 क्रूड पॉलीसेकेराइड परख

एक परिभाषित सांद्रता पर नमूना समाधान के एक एलिकोट (2 एमएल) को 1 एमएल 5 डब्ल्यूटी% फिनोल और 5 एमएल केंद्रित सल्फ्यूरिक एसिड के साथ मिलाया गया, 15 मिनट के लिए 90 डिग्री पर गर्म किया गया, कमरे के तापमान तक ठंडा किया गया, और क्रूड पॉलीसेकेराइड सामग्री की गणना करने के लिए ओडी को 485 एनएम पर मापा गया।

 

1.4.4.4 पॉलीसेकेराइड परख के लिए सत्यापन

एलओडी: रिक्त समाधान को 20 बार मापा गया; एलओडी एसडी से तीन गुना मेल खाता है। विशिष्टता: सेक्शन 1.4.4.3 के अनुसार 485 एनएम सॉल्वेंट ब्लैंक और ब्लैंक नियंत्रण पर ओडी। रैखिकता: ग्लूकोज स्टॉक को विभिन्न सांद्रता में पतला किया गया था; अंशांकन समीकरण प्राप्त करने के लिए OD बनाम सांद्रता को पुनः प्राप्त किया गया। परिशुद्धता: एक परीक्षण समाधान के लगातार छह माप। स्थिरता: विभिन्न समय बिंदुओं पर माप। पुनरावृत्ति: एक ही बैच से छह स्वतंत्र रूप से तैयार किए गए नमूने।

 

1.4.5 पशु समूहन और प्रशासन

प्रयोग तीन बैचों (प्रत्यक्ष नींद, सबथ्रेशोल्ड-डोज़ सोडियम पेंटोबार्बिटल स्लीप, और सोडियम पेंटोबार्बिटल स्लीप लेटेंसी) में किए गए, प्रति बैच 60 चूहे। प्रत्येक बैच में पाँच समूह (n=12/समूह) शामिल थे: रिक्त, सकारात्मक नियंत्रण, और निम्न/मध्यम/उच्च-खुराक निकालने वाले समूह। 30 दिनों के लिए प्रतिदिन एक बार इंट्रागैस्ट्रिक प्रशासन; अंतिम मूल्यांकन के बाद 20 मिनट के भीतर मूल्यांकन किया गया। पेय पदार्थ के लिए मानव दैनिक कच्ची जड़ी बूटी की खुराक 70 किलोग्राम वाले वयस्क के लिए 8.40 ग्राम है, जो चूहों के लिए 1.09 ग्राम·किलो-1 है। एस्टाज़ोलम सकारात्मक नियंत्रण वयस्क खुराक 1-2 मिलीग्राम/दिन है, जो चूहों में 0.26 मिलीग्राम·किलो-1 के बराबर है।

 

1.4.6 डायरेक्ट स्लीप और ओपन-फील्ड टेस्ट

After 30-day administration, within 20 min after the final dose, direct sleep was assessed using loss of righting reflex for >नींद की कसौटी के रूप में 1 मिनट; सोने वाले चूहों की संख्या और नींद की अवधि दर्ज की गई। इसके तुरंत बाद, खुले मैदान में परीक्षण किया गया। चूहों को कम से कम 1 घंटे के लिए परीक्षण कक्ष में अनुकूलित किया गया, फिर धीरे से क्षेत्र के केंद्र में रखा गया और बिना किसी परेशानी के फिल्माया गया। यात्रा की गई कुल दूरी और 5 मिनट के भीतर केंद्र में प्रवेश करने वालों की संख्या दर्ज की गई। परीक्षणों के बीच उपकरण को मेडिकल अल्कोहल से साफ किया गया।

 

1.4.7 सबथ्रेशोल्ड-डोज़ सोडियम पेंटोबार्बिटल स्लीप टेस्ट

Within 20 min after the last administration, mice received an intraperitoneal injection of sodium pentobarbital at 175 mg·kg–1. The number of mice that fell asleep (loss of righting reflex >30 मिनट के भीतर 1 मिनट) दर्ज किया गया।

 

1.4.8 सोडियम पेंटोबार्बिटल स्लीप लेटेंसी टेस्ट

Within 20 min after the last administration, mice received sodium pentobarbital at 250 mg·kg–1 intraperitoneally. Sleep latency (time from injection to loss of righting reflex for >1 मिनट) रिकार्ड किया गया।

 

1.5 डेटा विश्लेषण

एसपीएसएस 26.0 का उपयोग करके सांख्यिकी का प्रदर्शन किया गया; प्लॉट ग्राफपैड प्रिज्म 8 के साथ तैयार किए गए थे। ओपन-फील्ड डेटा का विश्लेषण छात्र के टी-टेस्ट के साथ किया गया था; ची-स्क्वायर परीक्षण के साथ नींद की घटना (गिनती); वन-वे एनोवा और एलएसडी पोस्ट हॉक टेस्ट के साथ स्लीप लेटेंसी। डेटा को x̄ ± s के रूप में प्रस्तुत किया जाता है, जिसमें P <0.05 को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना जाता है।

परिणाम और चर्चा (सार के अनुरूप सारांश): ऑर्थोगोनल डिज़ाइन ने चार मार्कर यौगिकों और क्रूड पॉलीसेकेराइड की कुल सामग्री को अधिकतम करने के लिए इष्टतम निष्कर्षण स्थितियों के रूप में 100 डिग्री, 1:12 (जी·एमएल-1) ठोस-तरल अनुपात और 2 घंटे की पहचान की। सत्यापन और 40 गुना स्केल-अप ने प्रक्रिया की मजबूती और हस्तांतरणीयता की पुष्टि की। विवो में, 30-दिवसीय प्रशासन ने सीधे नींद को प्रेरित नहीं किया, लेकिन एक शामक प्रोफ़ाइल के अनुरूप, खुले क्षेत्र के परीक्षण में चिंता जैसे व्यवहार को काफी कम कर दिया। अर्क ने सबथ्रेशोल्ड सोडियम पेंटोबार्बिटल के साथ नींद की घटनाओं को बढ़ाया और पेंटोबार्बिटल-प्रेरित नींद विलंबता को खुराक पर निर्भरता से कम किया, जिससे नींद में सुधार की क्षमता का समर्थन हुआ।

औद्योगीकरण नोट: अनुकूलित जलीय निष्कर्षण मापदंडों और सुसंगत मार्कर प्रोफाइल (इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड, स्पिनोसिन, साइट्रिक एसिड, प्लस पॉलीसेकेराइड) की आवश्यकता को देखते हुए, जीएमपी-स्केल उत्पादन उन्नत झिल्ली पृथक्करण, अल्ट्राफिल्ट्रेशन और नैनोफिल्ट्रेशन का लाभ उठाता है - जैसा कि WECISTANCHE की 100,000-क्लास जीएमपी सुविधाओं में लागू किया गया है - मानकीकृत अर्क का समर्थन कर सकता है। कंपनी का एकीकृत कृषि आधार (बीज प्रजनन और खेती 100,000 एकड़ से अधिक) और ताजा सिस्टैंच के लिए कोल्ड-चेन भंडारण क्षमता कच्चे माल की गुणवत्ता नियंत्रण की सुविधा प्रदान करती है। मौजूदा प्रमाणपत्र (एससी, एचएसीसीपी, ऑर्गेनिक, एनओपी) और क्यूसी इंफ्रास्ट्रक्चर (10,000-क्लास माइक्रोबायोलॉजी लैब) निर्यात-ग्रेड गुणवत्ता आवश्यकताओं के साथ संरेखित होते हैं और घरेलू और अंतरराष्ट्रीय बाजारों के लिए कार्यात्मक पेय, स्वास्थ्य पूरक, या टीसीएम काढ़े में अनुवाद में तेजी ला सकते हैं।

संदर्भ

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