चिकन बोन कोलेजन पेप्टाइड्स का मौखिक सेवन चूहों में त्वचा की उम्र बढ़ने के खिलाफ कोलेजन क्षरण और संश्लेषण को नियंत्रित करके, सूजन को रोकता है और लाइसोसोम को सक्रिय करता है भाग 1

कृपया संपर्क करेंoscar.xiao@wecistanche.comअधिक जानकारी के लिए

सार:त्वचा की उम्र बढ़ने पर आहार का प्रभाव एक दिलचस्प शोध विषय बन गया है। पिछले अध्ययनों ने मौखिक रूप से प्रशासित होने पर उम्र बढ़ने वाली त्वचा पर समुद्री जीवों से प्राप्त कोलेजन पेप्टाइड्स के लाभकारी प्रभावों पर ध्यान केंद्रित किया है, जबकि उम्र बढ़ने वाली त्वचा पर पोल्ट्री से प्राप्त कोलेजन पेप्टाइड्स के लाभकारी प्रभाव शायद ही कभी रिपोर्ट किए गए हैं। इस अध्ययन में, एंजाइमी हाइड्रोलिसिस द्वारा चिकन की हड्डी से कोलेजन पेप्टाइड्स तैयार किए गए थे, और डी-गैलेक्टोज के साथ संयुक्त यूवी द्वारा प्रेरित त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने पर मौखिक रूप से प्रशासित कोलेजन पेप्टाइड्स की क्रिया के प्रभाव और तंत्र की जांच की गई थी। परिणामों से पता चला कि चिकन बोन कोलेजन में कोलेजन की विशिष्ट विशेषताएं थीं, और चिकन बोन कोलेजन पेप्टाइड्स (CPs) मुख्य रूप से आणविक भार वाले छोटे आणविक पेप्टाइड्स थे।<3000 da.="">सिस्टैंच जीवन विस्तारविवो में प्रयोगों से पता चला है कि उम्र बढ़ने वाली त्वचा पर सीपी का महत्वपूर्ण राहत प्रभाव पड़ता है, जो उम्र बढ़ने वाली त्वचा की संरचना और संरचना में परिवर्तन, त्वचा एंटीऑक्सीडेंट स्तर में सुधार, और सूजन के अवरोध से संकेत मिलता है; राहत प्रभाव सकारात्मक रूप से सीपी की खुराक के साथ सहसंबद्ध था। आगे की जांच से पता चला कि सीपी पहले त्वचा ऑक्सीकरण के स्तर को कम करते हैं, प्रमुख प्रतिलेखन कारक एपी -1 (सी-जून और सी-फॉस) की अभिव्यक्ति को रोकते हैं, फिर कोलेजन संश्लेषण को बढ़ावा देने के लिए टीजीएफ- /स्मैड सिग्नलिंग मार्ग को सक्रिय करते हैं। , कोलेजन क्षरण को रोकने के लिए MMP-1/3 की अभिव्यक्ति को रोकता है, और चूहों में त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने के लिए त्वचा की सूजन को रोकता है। इसके अलावा, त्वचा प्रतिलेख ने पाया कि सीपी के मौखिक प्रशासन के बाद सक्रिय लाइसोसोम त्वचा की उम्र बढ़ने में सीपी के लिए एक महत्वपूर्ण मार्ग हो सकता है, और आगे के शोध के योग्य है। इन परिणामों ने सुझाव दिया कि सीपी को एक कार्यात्मक एंटी-एजिंग पोषण घटक के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।

अधिक जानने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

कीवर्ड:कोलेजन पेप्टाइड्स; बुढ़ापा विरोधी; त्वचा प्रतिलेख; कोलेजन संश्लेषण; लाइसोसोम

1 परिचय

स्वास्थ्य युग, एक स्वस्थ आहार का सही ढंग से पालन करना, त्वचा की उम्र बढ़ने में पोषण की भूमिका का निर्धारण करना और युवा और स्वस्थ त्वचा को बनाए रखने के लिए क्या खाना चाहिए, यह तय करना कठिन समस्याएं हैं। त्वचा शरीर का सबसे बड़ा अंग है, जो एपिडर्मिस, डर्मिस और चमड़े के नीचे की परत से बना होता है। यह बाहरी कारकों से शरीर की रक्षा के लिए एक बाधा के रूप में कार्य करता है और स्वास्थ्य और सुंदरता में भी भूमिका निभाता है [1]। त्वचा की उम्र बढ़ना एक जटिल प्रक्रिया है, जो कालानुक्रमिक उम्र बढ़ने और फोटो-एजिंग में विभाजित है और आंतरिक और बाहरी दोनों कारकों से प्रभावित होती है। मुख्य विशेषताओं में कोशिका में मैक्रोमोलेक्यूलर क्षति का संचय, स्टेम सेल फ़ंक्शन में गिरावट (ऊतक नवीकरण को बढ़ावा देना), और त्वचा की भौतिक अखंडता का क्रमिक नुकसान शामिल है। मुख्य आणविक तंत्र जो त्वचा की उम्र बढ़ने का कारण बनते हैं, उनमें मुख्य रूप से ऑक्सीडेटिव तनाव, टेलोमेयर छोटा, डीएनए क्षति, आनुवंशिक उत्परिवर्तन, माइक्रो-आरएनए विनियमन, उन्नत ग्लाइकेशन एंड-प्रोडक्ट संचय, और सूजन-उम्र बढ़ने [3] शामिल हैं। फोटो-एजिंग त्वचा एपिडर्मल हाइपरप्लासिया, सुखाने, और पराबैंगनी विकिरण से प्रेरित बाह्य मैट्रिक्स गिरावट है।सिस्टैंचे न्ज़ूफोटो-एजिंग का मुख्य कारण पराबैंगनी विकिरण द्वारा उत्पन्न प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियां (आरओएस) है जो माइटोजेन-एक्टिवेटेड प्रोटीन किनेज (एमएपीके) सिग्नलिंग जैसे सिग्नल पथों के माध्यम से मैट्रिक्स मेटालोप्रोटीनिस (एमएमपी) और टाइप-आई प्रो-कोलेजन की अभिव्यक्ति में मध्यस्थता करता है। मार्ग, इस प्रकार त्वचा में बाह्य मैट्रिक्स (ईसीएम) के क्षरण और फाइब्रोब्लास्ट्स के एपोप्टोसिस की ओर जाता है [4]। हाल के वर्षों में, त्वचा के स्वास्थ्य को बनाए रखना और उम्र बढ़ने में देरी करना लोकप्रिय हो गया है, और एंटीऑक्सिडेंट और एंटी-एजिंग कार्यों के साथ बायोएक्टिव पेप्टाइड्स और पॉलीफेनोल्स जैसे प्राकृतिक अवयवों को खोजना एक शोध हॉटस्पॉट बन गया है [5]।

हालांकि, कोलेजन का एक बड़ा आणविक भार होता है और इसे सीधे अवशोषित और उपयोग करना मुश्किल होता है, जबकि कोलेजन हाइड्रोलिसिस के बाद छोटे आणविक कोलेजन पेप्टाइड्स में मजबूत जैविक गतिविधि और उच्च अवशोषण दर [6] होती है। इस बीच, भोजन, दवा, ऊतक इंजीनियरिंग, सौंदर्य प्रसाधन, और अन्य क्षेत्रों में कोलेजन के व्यापक अनुप्रयोग ने कम आणविक भार, उच्च अवशोषण दक्षता और मजबूत जैविक गतिविधि वाले कोलेजन पेप्टाइड्स को कार्यात्मक भोजन और चिकित्सा अनुसंधान में एक नया पसंदीदा बना दिया है [{{1 }}]. कोलेजन पेप्टाइड्स छोटे होते हैं, जिनमें कोलेजन हाइड्रोलिसिस के बाद प्राप्त 2-20 अमीनो एसिड अवशेष होते हैं। उनके संभावित विरोधी भड़काऊ और एंटीऑक्सीडेंट कार्यों और प्रतिरक्षा विनियमन और त्वचा फाइब्रोब्लास्ट्स [10] पर एंटीऑक्सीडेशन और प्रसार के प्रभाव के कारण त्वचा की उम्र बढ़ने के उपचार के लिए उन्हें आहार पूरक के रूप में उपयोग किया जाता है।

सिस्टैन्च एंटी-एजिंग कर सकता है

मौखिक प्रशासन के बाद, कोलेजन पेप्टाइड्स को छोटे पेप्टाइड्स के रूप में अवशोषित किया जाता है और जल्दी से रक्त में ले जाया जाता है, और अंत में, गुर्दे, त्वचा, जोड़ों और अन्य ऊतकों को संग्रहीत और उपयोग किया जाता है। 14 दिनों के बाद, चूहों की त्वचा में रेडियोधर्मिता का स्तर उच्च बना रहा, जिसे C14-लेबल वाले कोलेजन पेप्टाइड्स से प्रभावित किया गया था। कोलेजन पेप्टाइड्स को शरीर द्वारा लगभग पूरी तरह से अवशोषित और उपयोग किया जा सकता है, जबकि कोलेजन का अवशोषण और उपयोग दर केवल 50-60 प्रतिशत [6,11-13] है। हाल के वर्षों में, मछली की त्वचा, मछली के पैमाने, गाय की हड्डी, गाय की खाल और सुअर की त्वचा से कोलेजन हाइड्रोलाइज़ेट्स को व्यापक रूप से त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने पर लाभकारी प्रभाव के बारे में बताया गया है और शोधकर्ताओं ने काफी ध्यान आकर्षित किया है। उदाहरण के लिए, सिल्वर कार्प त्वचा से पृथक कोलेजन पेप्टाइड्स प्रो-कोलेजन संश्लेषण को बढ़ावा देते हैं और एपी -1, एमएमपी -1, और एमएमपी -3 प्रोटीन अभिव्यक्ति को रोकने के लिए टीजीएफ-/स्मैड मार्ग को सक्रिय करके रोकते हैं। कोलेजन क्षरण और फोटोएज्ड त्वचा कोशिकाओं की मरम्मत [14]। गोजातीय कोलेजन पेप्टाइड्स का मौखिक प्रशासन त्वचा की छूट में सुधार कर सकता है, कोलेजन सामग्री और एंटीऑक्सीडेंट एंजाइम गतिविधि को बढ़ा सकता है, कोलेजन फाइबर की मरम्मत कर सकता है, और उम्र बढ़ने वाले चूहों में त्वचा के कोलेजन अनुपात को सामान्य कर सकता है [15]। हालांकि, विभिन्न स्रोतों से कोलेजन पेप्टाइड्स के अलग-अलग प्रभाव होते हैं। कोलेजन पेप्टाइड्स के मौखिक प्रशासन के बाद रक्त में अत्यधिक सक्रिय पेप्टाइड्स की मात्रा और संरचना कोलेजन के स्रोत पर निर्भर करती है। यूवीए-प्रेरित फाइब्रोब्लास्ट की चोट के खिलाफ मुर्गियों की त्वचा से निकाले गए कोलेजन पेप्टाइड का सुरक्षात्मक प्रभाव सुअर, गाय या तिलापिया की त्वचा से निकाले गए कोलेजन पेप्टाइड से बेहतर था, और इसका प्रभाव कोलेजन-व्युत्पन्न ट्रिपेप्टाइड (ग्लाइ-प्रो) के बराबर था। -हाइप) [16]। धार्मिक विश्वासों और रोग संबंधी चिंताओं (जैसे पागल गाय रोग) ने लोगों को धीरे-धीरे कोलेजन और उसके उत्पादों के विकास की दिशा को स्थलीय स्तनधारियों से मुर्गी और समुद्री जीवों में स्थानांतरित करने के लिए प्रेरित किया है [17]। कुक्कुट प्रसंस्करण के मुख्य उप-उत्पाद के रूप में, चिकन की हड्डी कोलेजन उत्पादों का एक आशाजनक स्रोत है। यह न केवल संसाधनों की बर्बादी और पर्यावरण प्रदूषण को कम करता है बल्कि उप-उत्पादों के कुशल उपयोग की भी अनुमति देता है। इसलिए, इस अध्ययन में, हमने त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने के लिए कोलेजन पेप्टाइड के मौखिक प्रशासन के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए मॉडल के रूप में, त्वचा की उम्र बढ़ने को प्रेरित करने के लिए डी-गैलेक्टोज और यूवी के साथ इलाज किए गए नग्न चूहों के साथ कच्चे माल के रूप में चिकन बोन कोलेजन पेप्टाइड्स का उपयोग किया। चूहों और प्रासंगिक तंत्र का निर्धारण।

2। सामग्री और प्रणालियां

2.1. सामग्री, रसायन, और पशु

युन्नान कृषि विश्वविद्यालय (कुनमिंग, चीन) के चिकन फार्मों ने खर्च की गई मुर्गियाँ प्रदान कीं, जिन्हें चिकन की हड्डी का भोजन प्राप्त करने के लिए अलग, सुखाया और कुचला गया था। Su-peroxide dismutase (SOD), catalase (CAT), और glutathione peroxidase (GSH-PX) किट Soleibao Biotechnology Co., Ltd. (बीजिंग, चीन) से खरीदे गए थे। हाइड्रोक्सीप्रोलाइन (एचवाईपी), इंटरल्यूकिन -1 (आईएल -1), मैट्रिक्स मेटालोप्रोटीनस -1/3 (एमएमपी -1/3), टाइप I प्रो-कोलेजन, और हाइलूरोनिक एसिड ( HA) एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसे (एलिसा) किट नानजिंग जियानचेंग बायोइंजीनियरिंग इंस्टीट्यूट (नानजिंग, चीन) से खरीदे गए थे। स्वस्थ मादा BALB/C बाल रहित चूहे (18 ± 2g, छह सप्ताह पुराने) को नानजिंग जंक बायोइंजीनियरिंग कॉर्पोरेशन, लिमिटेड (नानजिंग, चीन) से परमिट संख्या: SCXK (SU) 2016-0010 के साथ खरीदा गया था। पेप्सिन और पपैन अलादीन बायोकेमिकल टेक्नोलॉजी कं, लिमिटेड (शंघाई, चीन) से खरीदे गए थे, और अन्य रसायन विश्लेषणात्मक ग्रेड के थे। युन्नान प्रांत की प्रयोगशाला पशु देखभाल के नियमों का पालन करते हुए सभी चूहों को संभाला गया और युन्नान कृषि विश्वविद्यालय पशु देखभाल और उपयोग समिति (अनुमोदन आईडी: YAUACUC01) द्वारा अनुमोदित किया गया।

2.2. कोलेजन तैयारी और अमीनो एसिड संरचना

चिकन बोन कोलेजन के निष्कर्षण और अमीनो एसिड संरचना ने लेउत अल द्वारा वर्णित विधि का पालन किया। [18] थोड़े संशोधनों के साथ। चिकन बोन पाउडर को 0.05 M NaOH,10 प्रतिशत n-hexane, और 0.25 MEDTA सॉल्यूशन (pH 7.5) में भिगोया गया। 1/10 (एम / ओ) का अनुपात। प्रत्येक चरण में, नमूने को 36 घंटे के लिए उपचारित किया गया था, और हड्डी के पाउडर को सूजने और हड्डी के पाउडर से गैर-कोलेजन प्रोटीन, वसा और खनिजों को हटाने के लिए हर 6 घंटे में भिगोने के घोल को बदल दिया गया था। नमूना प्रत्येक चरण के बाद तटस्थता के लिए शुद्ध पानी से धोया गया था। प्री-ट्रीटेड चिकन बोन मील को 0.5 एम ग्लेशियल एसिटिक एसिड युक्त 0.1 प्रतिशत (w/v) पेप्सिन के साथ 1:10 (wo/v) के ठोस-से-तरल अनुपात में मिलाया गया और लगातार हिलाया गया और 4 डिग्री पर निकाला गया। 48 घंटे फिर इसे फ़िल्टर किया गया, और छानना 15, 000 × g पर 15 मिनट के लिए 4 डिग्री पर सेंट्रीफ्यूज किया गया।लिंग का आकारसतह पर तैरनेवाला 7.5-7.8 NaOH समाधान के साथ समायोजित किया गया था, और NaCl को 1.5 M की अंतिम सांद्रता में जोड़ा गया था। मिश्रण को बाहर निकालने के लिए 4C पर 12 घंटे के लिए अबाधित रखा गया था, कोलेजन अवक्षेप को सेंट्रीफ्यूज किया गया था। 15 पर, 000 × जी 15 मिनट के लिए 4 डिग्री पर, फिर 0 .5 एम एसिटिक एसिड के साथ भंग, शुद्ध पानी में डायलिज्ड, फ्रीज-सूखे, और तैयार उत्पाद चिकन बोन कोलेजन था।

चिकन बोन कोलेजन की अमीनो एसिड संरचना Sykam S433D एमिनो एसिड स्वचालित विश्लेषक (म्यूनिख, जर्मनी) द्वारा निर्धारित की गई थी। परीक्षण किए जाने वाले कोलेजन नमूने की एक निश्चित मात्रा को एक सीलबंद ट्यूब में लिया गया, जिसमें 10mL6 M HCl मिलाया गया, और 24 घंटे के लिए 110 डिग्री पर हाइड्रोलाइज्ड किया गया। हाइड्रोलाइज़ेट को नाइट्रोजन उड़ाने और 20 एमएल साइट्रिक एसिड बफर में फिर से भंग करके केंद्रित किया गया था। 0.22 माइक्रोन माइक्रोप्रोसेसर झिल्ली के साथ माइक्रोफिल्ट्रेशन के बाद, अमीनो एसिड स्पेक्ट्रम विश्लेषण के लिए 20 μL हाइड्रोलाइजेट लिया गया था। नमूने में अमीनो एसिड की मात्रा प्रतिशत में व्यक्त की गई थी।

2.3. कोलेजन पेप्टाइड्स (सीपी) की तैयारी और आणविक भार वितरण

हमारी पिछली अनुकूलन प्रक्रिया के परिणामों के अनुसार, 1:40(द्रव्यमान अनुपात) के एंजाइम-से-सब्सट्रेट अनुपात में पपैन का उपयोग करके सीपी तैयार किए गए थे। पीएच को 7 और एंजाइमी हाइड्रोलिसिस को 5 घंटे के लिए 63 डिग्री पर समायोजित करने के बाद, एंजाइम को उबलते पानी के स्नान में 15 मिनट के लिए निष्क्रिय कर दिया गया था। एंजाइम हाइड्रोलाइज़ेट को डिसाल्टेड और lyophilized किया गया था, 0.1 प्रतिशत फॉर्मिक एसिड समाधान में फिर से भंग कर दिया गया था, और सतह पर तैरनेवाला प्राप्त करने के लिए सेंट्रीफ्यूज किया गया था। AQ Exactive HF Orbitrap उच्च-रिज़ॉल्यूशन मास स्पेक्ट्रोमीटर-OE-HF (थर्मो फिशर, Waltham, MA, USA), जो इलेक्ट्रोस्प्रे आयनीकरण (ESI) से लैस है, का उपयोग 350-1800 के पूर्ण स्कैन मोड में कोलेजन हाइड्रोलाइज़ेट का विश्लेषण करने के लिए किया गया था। एम / जेड, और परिणाम प्रोटीन खोजकर्ता का उपयोग करके पुनर्प्राप्त और विश्लेषण किए गए थे

2.1 सॉफ्टवेयर

2.4.पशु परीक्षण

मादा BALB/चेयरलेस चूहों (n {0}}) को एक कमरे में तापमान (24°1 डिग्री), आर्द्रता (60± 5 प्रतिशत) और 12 की नियंत्रित परिस्थितियों में रखा गया था। h दिन-रात का चक्र एक सप्ताह के लिए। उन्हें भोजन और पानी के लिए एड लिबिटम एक्सेस प्रदान किया गया था। अनुकूलन के एक सप्ताह के बाद, चूहों को बेतरतीब ढंग से निम्नलिखित पांच समूहों (एन =11 प्रति समूह) में विभाजित किया गया था: (i)। सामान्य समूह (एन): यूवी अनएक्सपोज्ड; 0.4 एमएल खारा प्रतिदिन का मौखिक प्रशासन। (ii)। मॉडल समूह (एम): यूवीएक्सपोज्ड प्लस डी-गैलेक्टोज (0.2 एमएल); प्रतिदिन 0.4 एमएल खारा का मौखिक प्रशासन। (मैं)। कम खुराक कोलेजन पेप्टाइड्स समूह (LCPs): UVexposed प्लस D-galactose (0.2mL); मौखिक

प्रतिदिन 0.4 एमएल सीपी (खुराक: 200 मिलीग्राम किग्रा-1 शरीर का वजन) का प्रशासन। (iv)। मध्यम खुराक कोलेजन पेप्टाइड्स समूह (एमसीपी): यूवी उजागर प्लस डी-गैलेक्टोज; मौखिक

प्रतिदिन 0.4 एमएल सीपी (खुराक: 500 मिलीग्राम: किग्रा-1 शरीर के वजन) का प्रशासन।

(वी)। उच्च खुराक कोलेजन पेप्टाइड्स समूह (एचसीपी): यूवी उजागर प्लस डी-गैलेक्टोज; प्रतिदिन 0.4 एमएल सीपी (खुराक: 1000 मिलीग्राम · किग्रा-1 शरीर के वजन) का मौखिक प्रशासन।

डी-गैलेक्टोज उपचार माउस की गर्दन के पीछे 0.2 एमएल 10 प्रतिशत डी-गैलेक्टोज घोल के चमड़े के नीचे इंजेक्शन द्वारा किया गया था (खुराक: 1.0g/ किग्रा-1शरीर का वजन) प्रतिदिन। यूवी विकिरण 40 डब्ल्यू यूवीए -340 लैंप (ओ-पैनल, क्लीवलैंड, यूएसए, शिखर तरंग दैर्ध्य: 340 एनएम) के साथ किया गया था, दीपक और चूहों के पीछे की दूरी 30 सेमी (230 मीटर जे /) थी सेमी-), और विकिरण सात सप्ताह (49 दिन) के लिए हर दिन 30 मिनट तक रहता है। विकिरण की तीव्रता को एक UVA365-रेडियोमीटर (Xinbao Keyi Electronic Technology Co., Ltd., Xi'an, China) द्वारा मापा गया था। डी-गैलेक्टोज और यूवी उपचार के एक घंटे बाद, चूहों को हर दिन मौखिक रूप से 0.4 एमएल सीपी दिया गया। अंतिम विकिरण के बाद, चूहों को संवेदनाहारी, तौला गया, और बाद के विश्लेषण के लिए ऊतकों का नमूना लिया गया।

2.5.त्वचा की नमी, आंत का सूचकांक, और शरीर का वजन बढ़ना

त्वचा की नमी आईएसओ 1442 द्वारा निर्धारित की गई थी, और आंत के सूचकांक की गणना निम्नलिखित समीकरण का उपयोग करके की गई थी: आंत का सूचकांक (जी/किग्रा)=आंत का वजन / शरीर का वजन।

2.6.ऑक्सीडेटियो तनाव, HA, और HYP त्वचा की सामग्री

एक ऊतक होमोजेनाइज़र (TGrinder OSE-Y30, Tiangen Biochemical Technology Co., Ltd., बीजिंग, चीन) के साथ बर्फ के स्नान में त्वचा के नमूनों को सामान्य खारा (w / w) की नौ गुना मात्रा के साथ समरूप बनाया गया और फिर 2000 में सेंट्रीफ्यूज किया गया। × जी और 10 मिनट के लिए 4 डिग्री। सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज (एसओडी), कैटेलेज (कैट), ग्लूटाथियोन पेरोक्सीडेज (जीएसएच-पीएक्स), और एकत्रित सतह पर तैरनेवाला में हयालूरोनिक एसिड (एचए) और हाइड्रॉक्सीप्रोलाइन (एचवाईपी) की सामग्री निर्देशों में वर्णित विधि के अनुसार निर्धारित की गई थी। संबंधित किट के अनुरूप।

2.7. त्वचा हिस्टोलॉजिकल

माउस त्वचा के नमूने 24 घंटे के लिए 4 प्रतिशत पैराफॉर्मलडिहाइड समाधान में तय किए गए थे, निर्जलित, पैराफिन में एम्बेडेड और कटा हुआ। त्वचा के वर्गों को हेमटॉक्सिलिन और ईओसिन (एचई) के साथ दाग दिया गया था और एक ईसीएलआईपीएसई सीआई-ई फॉरवर्ड प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप (निकॉन, जापान) के साथ देखा गया था। हैल्कॉन 13.0.1.1 सॉफ्टवेयर (एमवीटेक, म्यूनिख, जर्मनी) का उपयोग करके त्वचा के एपिडर्मिस और डर्मिस की मोटाई का मूल्यांकन किया गया था।

2.8.त्वचा प्रतिलेख अनुक्रमण

2.8.1. आरएनए एक्सट्रैक्शन, लाइब्रेरी निर्माण, और ट्रांसक्रिप्टोम सीक्वेंसिंग

निर्माता के निर्देशों के अनुसार RNeasy Mini Kit (टियांगेन बायोकेमिकल टेक्नोलॉजी कं, लिमिटेड, बीजिंग, चीन) का उपयोग करके चूहों की त्वचा से कुल RNA निकाला गया। RNA की शुद्धता और सांद्रता kaiaoK5500Spectrophoto-meter (Kaiao, बीजिंग, चीन) का उपयोग करके जाँच की गई; RNA नैनो 6000 परख किट और Bioanalyzer 2100 सिस्टम (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA) का उपयोग करके RNA अखंडता का आकलन किया गया था। प्रत्येक नमूने का ट्रांसक्रिप्शनल अनुक्रमण विश्लेषण बायोलिंकर टेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड (कुनमिंग, चीन) द्वारा किया गया था।सिस्टैंच पाउडरसंक्षेप में, इंडेक्स-कोडेड नमूनों की क्लस्टरिंग निर्माता के निर्देशों के अनुसार HiSeq PE क्लस्टर किट v 4- cBot-HS (इलुमिना) का उपयोग करके cBot क्लस्टर जनरेशन सिस्टम पर की गई थी। क्लस्टर पीढ़ी के बाद, पुस्तकालयों को एक इलुमिना प्लेटफॉर्म पर अनुक्रमित किया गया था, और 150 बीपी पेयर-एंड रीड जेनरेट किए गए थे।

2.8.2. आरएनए-अनुक्रमण डेटा का जैव सूचना विज्ञान विश्लेषण

जीन ओन्टोलॉजी (जीओ) और क्योटो एनसाइक्लोपीडिया ऑफ जीन और जीनोम (केईजीजी) विभेदित रूप से व्यक्त जीन (डीईजी) का संवर्धन विश्लेषण आर भाषा क्लस्टर विश्लेषक पैकेज का उपयोग करके किया गया था। जब पी-मान 0.05 से कम था, तो जीओ और केईजीजी द्वारा समृद्ध वस्तुओं और मार्गों को महत्वपूर्ण माना जाता था।

2.8.3. रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस-पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (क्यूआरटी-पीसीआर)

क्यूआरटी-पीसीआर को पहले वर्णित [19] के रूप में प्रदर्शित किया गया था।

2.9.Wester1 ब्लॉट

पार्क एट अल द्वारा वर्णित विधि के अनुसार। [20], चूहों में त्वचा की उम्र बढ़ने से संबंधित प्रोटीन की अभिव्यक्ति की मात्रा निर्धारित करने के लिए पश्चिमी धब्बा (WB) विश्लेषण किया गया था। प्रत्येक उपचार समूह में त्वचा लाइसेट की प्रोटीन सांद्रता को बीसीए किट का उपयोग करके निर्धारित किया गया था, जिसे एसडीएस-पेज (10 प्रतिशत एक्रिलामाइड जेल) द्वारा अलग किया गया था, जिसे पीवीडीएफ झिल्ली में स्थानांतरित किया गया था, 5 प्रतिशत स्किम दूध से अवरुद्ध किया गया था, और उचित मात्रा में प्राथमिक के साथ ऊष्मायन किया गया था। एंटीबॉडी (TGF-b1,c-Fos, c-Jun, Samd2/3, and -actin) रात भर 4 डिग्री पर। टीबीएसटी से धोने के बाद, नमूनों को द्वितीयक एंटीबॉडी के साथ मिलाया गया और 1 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर ऊष्मायन किया गया। विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाने के लिए ChemiDoc XRS plus chemiluminescence gel इमेजर (BioRAD, Hercules, CA, USA) का उपयोग किया गया था। छवि] प्रत्येक उपचार समूह में लक्ष्य प्रोटीन की अभिव्यक्ति की मात्रा निर्धारित करने के लिए सॉफ़्टवेयर का उपयोग किया गया था, और परिणामों को -एक्टिन प्रोटीन के लिए सामान्यीकृत घनत्व मूल्यों द्वारा दर्शाया गया था।

2.10.एलिसा

एमएमपी-1, एमएमपी-3, टाइप I प्रो-कोलेजन, और आईएल-1 त्वचा लसीका द्रव में अभिव्यक्ति के स्तर एंजाइम से जुड़े इम्युनोसे द्वारा निर्धारित किए गए थे। परख किट के साथ दिए गए निर्देशों के अनुसार आयोजित की गई थी।

2.11. सांख्यिकीय आंकड़े

सभी परिणामों का विश्लेषण SPSS 21 (IBM Inc., Armonk, NY, USA) सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके विचरण (ANOVA) और डंकन के मल्टीपल रेंज टेस्ट के एक-तरफ़ा विश्लेषण के माध्यम से किया गया था, जिसमें महत्व स्तर p पर सेट किया गया था।<0.05. originpro="" 2017="" (originlab,="" northampton,="" ma,="" usa)was="" used="" to="" plot="" the="" data.="" all="" data="" were="" expressed="" as="" the="" mean="" ±standard="" deviation="">

3) परिणाम और चर्चा

3.1. कोलेजन की अमीनो एसिड संरचना

चिकन बोन कोलेजन की अमीनो एसिड संरचना तालिका 1 में दिखाई गई है। नमूनों में ग्लाइ मुख्य अमीनो एसिड था, जो कुल अमीनो एसिड का लगभग एक-तिहाई (27.86 प्रतिशत) था, और हाइप था कोलेजन में विशेष अमीनो एसिड, 9.83 प्रतिशत के लिए लेखांकन। कोलेजन अणुओं की मुख्य विशेषताएं बार-बार ग्लाइ-एक्सवाई अनुक्रम और तीन सी श्रृंखलाओं से बना अद्वितीय ट्रिपल-पेचदार संरचना थी। ग्लाइक कुल अमीनो एसिड का लगभग एक-तिहाई हिस्सा होता है, एक्स और वाई अक्सर प्रोलाइन और हाइड्रॉक्सीप्रोलाइन होते हैं, या कोई अवशेष [21] हो सकते हैं। नमूने की अमीनो एसिड संरचना पिछले अध्ययनों में रिपोर्ट किए गए चिकन बोन कोलेजन के समान थी और इसमें कोलेजन की विशिष्ट विशेषताएं थीं [22]।

3.2. सीपी का आणविक भार वितरण

Molecular weight distribution reflects the degree of collagen hydrolysis. The molecular weight of the CPs was mainly below 3000 Da(Figure 1), accounting for about 87.61%of all collagen hydrolysates, indicating that almost all of the CPs were small peptides. Many studies claim that collagen peptides with a lower molecular weight have better biological activity [23]. For example, Song et al. [24]. reported that lower molecular weight (200-1000 Da,65%)silver carp skin collagen peptides repaired UV-induced aging skin in mice more effectively than similar peptides with a higher molecular weight(>1000 दा, 72 प्रतिशत)। हालांकि, जर्मन गेलिटा कंपनी ने कई नैदानिक ​​अध्ययनों के माध्यम से दिखाया कि कोलेजन पेप्टाइड्स का प्रभाव मुख्य रूप से कोलेजन पेप्टाइड्स के आणविक भार के बजाय मानव कोलेजन के क्षरण के बाद कोलेजन पेप्टाइड्स के गुणों के साथ इसकी मिलान डिग्री से निर्धारित होता है। उन्होंने पाया कि 2000 Da के औसत आणविक भार वाले उत्पाद VERISOL⑧ का त्वचा के फ़ाइब्रोब्लास्ट पर सबसे उत्तेजक प्रभाव पड़ता है, जबकि उत्पाद FortigelTM का औसत आणविक भार 3000 Da का उपास्थि की मरम्मत [25-27] पर विशेष प्रभाव पड़ता है।

3.3. त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने पर ओरल सीपी का प्रभाव

3.3.1. शरीर का वजन और अंग सूचकांक

शरीर-भार सूचकांक और अंग सूचकांक महत्वपूर्ण हैं और चूहों की स्वास्थ्य स्थिति को दर्शाते हैं। परीक्षण अवधि (तालिका 2) के दौरान प्रत्येक समूह में चूहों का वजन सामान्य रूप से बढ़ा। एम समूह का औसत वजन एन समूह की तुलना में कम था, और सीपी उपचार समूहों की तुलना में एम समूह की तुलना में अधिक था, यह सुझाव देते हुए कि सीपी का चूहों पर कोई दुष्प्रभाव नहीं था। पिछली रिपोर्टों में, कोलेजन पेप्टाइड-उपचारित चूहों की खुराक ज्यादातर 100-1000 mg/kg.bw·d के बीच थी, और तिलापिया कोलेजन पेप्टाइड्स की सुरक्षित खुराक 4.07 g/kg.bw·d [{{6} तक पहुंच गई थी। }].सिस्टैंच साल्सा अर्क Similarly, the growth of skin-aged mice after gavage with tilapia scale collagen peptides (dose: 500 and 1000 mg/kg.bw·d)was also similar to our results [29]. The spleen plays an important role in humoral and cellular immunity, thus, the spleen index is often used to evaluate immune system function. The liver index was used to evaluate the toxicity of the tested sample. In these tests, the liver and spleen indices in the M group were lower than those in the N group, and both recovered after treatment with CPs, but there was no significant difference across the treatment groups(p>0.05). परिणाम पिछले अध्ययनों के समान थे [30], यह दर्शाता है कि सीपी सुरक्षित हैं और चूहों की प्रतिरक्षा में थोड़ा सुधार कर सकते हैं।

3.3.2. त्वचा की संरचना

यूवी और डी-गैलेक्टोज उपचार (एम समूह) ने समूह की तुलना में त्वचा में नमी, एचए और हाइप सामग्री को क्रमशः 13.36 प्रतिशत, 24.08 प्रतिशत और 15.83 प्रतिशत कम कर दिया।<0.05)(table 2).the="" contents="" of="" moisture,="" ha,="" and="" hyp="" in="" the="" skin="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" the="" contents="" of="" those="" in="" the="" mice="" of="" the="" m="" group=""><0.05). among="" the="" dose="" groups,="" the="" contents="" of="" the="" three="" skin="" components="" were="" significantly="" different="" between="" the="" lcp="" and="" hcp="" groups="" and="" were="" dependent="" on="" the="" dose="" of="" intake="" of="" cps.="" the="" hcp="" group="" had="" even="" higher="" contents="" than="" the="" n="" group,="" and="" ha="" and="" hyp="" were="" significantly="" different="" between="" the="" two="" groups="" (p=""><>

त्वचा की नमी की मात्रा में परिवर्तन के कारण झुर्रियाँ और त्वचा ढीली हो जाती है और मैट्रिक्स घटकों जैसे त्वचा कोलेजन और HA [31] से प्रभावित होते हैं। हाइड्रोक्सीप्रोलाइन कोलेजन में एक स्थिर, समृद्ध और विशेष अमीनो एसिड है, और इसकी सामग्री परोक्ष रूप से त्वचा में कोलेजन की सामग्री, साथ ही त्वचा की उम्र बढ़ने को प्रतिबिंबित कर सकती है। इसके अतिरिक्त, एचए, जो त्वचा ईसीएम में अत्यधिक अभिव्यक्त होता है, त्वचा के जल संतुलन, आसमाटिक दबाव, नमी प्रतिधारण, और लोच को जल भंडारण प्रणाली और त्वचा के संरचनात्मक घटक के रूप में नियंत्रित करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है [32]। इस अध्ययन में, सीपी सेवन के बाद त्वचा में नमी, HYP और HA की मात्रा में काफी वृद्धि हुई, जो कि CPs द्वारा कोलेजन और HA संश्लेषण को बढ़ावा देने से संबंधित हो सकता है। इसके अलावा, HYP और HA में वृद्धि ने नमी की मात्रा को बढ़ा दिया।

3.3.3. त्वचा ऊतकीय परिवर्तन

सात सप्ताह के निरंतर उपचार के बाद चूहों की पिछली त्वचा में ऊतकीय परिवर्तन चित्र 2 में दिखाए गए हैं। एम समूह की उम्र बढ़ने वाली त्वचा ने एन समूह की त्वचा की तुलना में खुरदरी सतह, मोटी एपिडर्मिस, पतली डर्मिस और विरल कोशिकाओं की विशेषताओं को दिखाया। हालांकि, सीपी के मौखिक प्रशासन के बाद चूहों में उम्र बढ़ने वाली त्वचा की स्थिति में सुधार हुआ, एन समूह के चूहों के समान एक चिकनी, व्यवस्थित और पूर्ण संरचना बनाए रखी। इस प्रकार, त्वचा की त्वचा काफी पतली थी, और एपिडर्मिस एम समूह में एन समूह (पी) की तुलना में काफी मोटा था।<0.05). the="" change="" in="" skin="" dermis="" and="" epidermal="" thickness="" was="" significantly="" better="" after="" treatment="" with=""><0.05), and="" the="" effect="" was="" more="" obvious="" with="" the="" increase="" in="" the="" dose="" of="" cps="" (figure="" 2).="" the="" effect="" of="" oral="" cps="" on="" the="" histological="" structure="" of="" aging="" skin="" was="" similar="" to="" that="" reported="" previously[4,28,31].="" the="" increase="" in="" the="" thickness="" of="" the="" epidermis="" might="" be="" an="" adaptive="" change="" to="" protect="" the="" skin="" from="" external="" stimuli,="" loss="" of="" skin="" moisture,="" and="" uv="" damage,="" possibly="" due="" to="" the="" increase="" in="" uv-activated="" epidermal="" growth="" factor="" receptor="" (egfr)="" that="" induces="" keratinocyte="" proliferation="" and="" epidermal="" hyperplasia[4].="" however,="" the="" mechanism="" by="" which="" oral="" cps="" alleviate="" the="" increase="" in="" epidermal="" thickness="" remains="" unclear.="" the="" dermis="" imparts="" elasticity="" and="" strength="" to="" the="" skin,="" and="" the="" degradation="" of="" ecm="" and="" the="" reduction="" in="" the="" ability="" to="" repair="" fibroblasts="" are="" the="" main="" causes="" of="" dermal="" thinning="" in="" aging="" skin.="" dermal="" thickness="" increased="" after="" the="" treatment="" with="" cps,="" which="" might="" be="" due="" to="" the="" removal="" of="" ros="" from="" the="" skin="" and="" inhibition="" of="" the="" increase="" of="" mmps="" by="" cps.="" this,="" in="" turn,="" inhibited="" the="" degradation="" of="" skin="" collagen="" and="" elastin="" (figure="" 3),="" the="" entry="" of="" cps="" into="" the="" skin,="" and="" their="" participation="" in="" the="" synthesis="" of="" collagen="" and="" ha="" [6],="" which="" was="" confirmed="" by="" the="" increase="" in="" the="" content="" of="" hyp="" and="" ha="" in="" the="" skin="" (table="">

3.3.4.त्वचा एंटीऑक्सीडेंट और सूजन स्तर

एंटीऑक्सिडेंट एंजाइम की गतिविधि का निर्धारण शरीर में एंटीऑक्सीडेंट स्तर का मूल्यांकन करने के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका है [28]। जैसा कि चित्र 3 में दिखाया गया है, एम समूह में कैट, एसओडी, जीएसएच-पीएक्स और एमडीए सामग्री की गतिविधियां एन समूह (पी) की तुलना में काफी कम थीं।<0.05). administering="" cps="" effectively="" inhibited="" the="" decrease="" of="" cat,="" sod,="" gsh-px="" activities,="" and="" the="" mda="" content="" in="" the="" skin="" of="" mice,="" compared="" to="" those="" in="" the="" mice="" skin="" of="" the="" m="" group,and="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" dose="" of="" cps;="" there="" were="" significant="" differences="" among="" the="" different="" dose="" groups=""><0.05). when="" ros,="" accumulated="" by="" skin="" oxidative="" stress,="" exceed="" the="" antioxidant="" defense="" ability="" of="" the="" body,="" they="" destroy="" the="" ecm,="" which="" is="" the="" key="" cause="" of="" skin="" aging.="" ros="" can="" cause="" the="" oxidation="" of="" lipids="" and="" proteins="" in="" the="" skin,="" resulting="" in="" fibroblast="" degeneration="" and="" changes="" in="" the="" skin.="" ros="" activates="" the="" mapk="" signaling="" pathway="" and="" the="" ap-1="" protein="" to="" upregulate="" the="" expression="" of="" mmps="" and="" promote="" the="" degradation="" of="" matrix="" collagen="" [21].="" although="" the="" antioxidant="" enzymes="" and="" antioxidants="" in="" the="" body="" can="" remove="" ros="" to="" protect="" the="" skin="" from="" damage,="" when="" the="" content="" of="" rosexceeds="" the="" defense="" (antioxidant)="" ability="" of="" the="" body="" or="" the="" body's="" defense="" ability="" declines,="" it="" causes="" oxidative="" stress="" and="" skin="">

इसके अतिरिक्त, आरओएस के कारण होने वाली सेलुलर भड़काऊ प्रतिक्रिया भी त्वचा की उम्र बढ़ने में योगदान करती है। यूवी और डी-गैलेक्टोज उपचार (एम समूह) के बाद, चूहों की त्वचा में आईएल -1 की सामग्री एन समूह (चित्रा 3 डी) की तुलना में काफी बढ़ गई, यह दर्शाता है कि त्वचा ने एक महत्वपूर्ण भड़काऊ प्रतिक्रिया दिखाई है। (पी<0.05). the="" cps="" significantly="" reduced="" the="" content="" of="" il-1α="" in="" the="" skin="" in="" a="" dose-dependent="" manner,="" compared="" to="" that="" in="" the="" skin="" of="" mice="" in="" the="" m="" group.="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" hcps="" and="" lcps=""><0.05), indicating="" that="" cps="" alleviated="" skin="" inflammation.="" the="" o2="" produced="" by="" ultraviolet="" irradiation="" stimulated="" the="" expression="" of="" mmp-1="" in="" dermal="" fibroblasts="" through="" the="" secretion="" of="" il-1α="" and="" il-6,="" thereby="" disrupting="" the="" ecm="" [33].="" therefore,="" this="" study="" suggested="" that="" cps="" significantly="" increased="" the="" activity="" of="" skin="" antioxidant="" enzymes="" and="" inhibited="" inflammatory="" responses,="" which="" might="" be="" important="" in="" delaying="" skin="" aging="" in="">

3.4. त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने में आहार सीपी की कार्रवाई का तंत्र

3.4.1. RNA-Seq डेटा का विश्लेषण और सत्यापन

Analysis techniques, such as PCA, HCA, gene GO enrichment, and KEGG pathway enrichment were used to analyze the transcriptome data. Based on the PCA analysis (Figure 4A)and hierarchical clustering analysis (heat map)of 4303 differential genes with average channel strength greater than 100, the relative expression levels of total DEGs between the two treatment groups are shown to provide an overview of the changes in gene expression(Figure 4B).The M group and the HCP group were significantly separated, and the expression patterns of most DEGs in the M and HCP groups were opposite, indicating that there were significant differences between the mouse skin after HCP treatment and the M group(Figure 4A,B).Pairwise comparisons showed that after feeding HCPs, 4303 genes were significantly expressed in the mice's skin, including 1790 upregulated genes and 2513 downregulated genes(Foldchange>2,p<0.05)(figure 4c).among="" the="" six="" genes="" associated="" with="" skin="" aging="" quantified="" by="" qrt-pcr,="" five="" genes(including="" fos,="" jun,="" cxcl1,="" and="" egr1)were="" downregulated,="" and="" one="" gene="" was="" upregulated(figure="" 4d),="" which="" was="" consistent="" with="" the="" overall="" trend="" of="" transcriptomic="" data.="" the="" rna="" expression="" levels="" of="" fos,="" jun,="" and="" cxcll="" were="" significantly="" upregulated="" in="" damaged="" skin="" compared="" to="" that="" in="" intact="" skin="" [34],="" and="" inhibition="" of="" egr1="" expression="" alleviated="" skin="" inflammation="" [35].="" these="" results="" reflected="" the="" reliability="" of="" transcriptome="" sequencing="" data,="" and="" oral="" cps="" effectively="" alleviated="" skin="">

संवर्धन विश्लेषण और केईजीजी डेटाबेस संवर्धन विश्लेषण ने डीईजी के जैविक कार्यों की और जांच के लिए सहायता प्रदान की। जीओ विश्लेषण से पता चला कि डीईजी जैविक प्रक्रियाओं जैसे डीएनए प्रतिकृति, हेमोपोइजिस के विनियमन, हाइड्रोलेस गतिविधि के विनियमन और साइटोकिन उत्पादन में काफी समृद्ध थे; सेल घटकों में, जिसमें लिटिक रिक्तिका और लाइसोसोम, कोलेजन युक्त और अन्य संबंधित जीन शामिल थे, काफी समृद्ध थे; आणविक कार्य, रिसेप्टर-लिगैंड गतिविधि, साइटोकाइन गतिविधि और अन्य संबंधित जीन के संदर्भ में काफी समृद्ध थे (चित्र 5)। DEG द्वारा महत्वपूर्ण रूप से परिवर्तित किए गए पहले 20 सिग्नल पथों का KEGG संवर्धन विश्लेषण चित्र 5 में दिखाया गया है। साइटोकाइन-रिसेप्टर इंटरैक्शन, लाइसोसोम, न्यूरोएक्टिव लिगैंड-रिसेप्टर इंटरैक्शन, सेल साइकिल, सिस्टमिक ल्यूपस एरिथेमेटोसस, और टीजीएफ-पाथवे (पी)<0.05)were closely="" related="" to="" aging,="" especially="" cytokine-receptor="" interactions,="" lysosomes,="" and="" tgf-βsignaling.="" an="" important="" feature="" of="" cellular="" senescence="" is="" the="" accumulation="" of="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates.="" lysosomes="" play="" an="" important="" role="" in="" degrading="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates="" in="" senescent="" cells="" [36].="" cytokine-receptor="" interaction="" is="" the="" main="" pathway="" of="" enrichment="" in="" the="" skin="" after="" being="" affected="" by="" various="" factors="" such="" as="" inflammation="" [37],="" sulfur="" mustard="" exposure="" [38],="" and="" terahertz="" pulse="" [39].="" cytokines,="" as="" small="" molecular="" proteins="" synthesized="" and="" secreted="" by="" various="" tissue="" cells,="" maintain="" skin="" homeostasis="" by="" controlling="" the="" balance="" between="" keratinocyte="" proliferation,="" differentiation,="" and="" apoptosis="" through="" complex="" interactions="" with="" growth="" factors="" [40].="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" is="" also="" important="" for="" regulating="" skin="" aging="" [14].="" gene="" functional="" enrichment="" analysis="" showed="" that="" tgf-β="" was="" highly="" expressed="" during="" cytokine-receptor="" interaction="" and="" in="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway.="" tgf-β="" is="" a="" major="" pro-fibrotic="" cytokine="" that="" regulates="" cell="" differentiation="" and="" proliferation="" while="" inducing="" extracellular="" matrix="" protein="" synthesis="" [41.="" therefore,="" we="" verified="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" and="" some="">

3.4.2. त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने में सीपी की कार्रवाई के तंत्र का सत्यापन

मौखिक सीपी द्वारा त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने में टीजीएफ-सिग्नलिंग पाथवे और साइटोकाइन-रिसेप्टर इंटरैक्शन की भूमिका को सत्यापित करने के लिए, टीजीएफ-सिग्नलिंग मार्ग में टीजीएफ- और ट्रांसक्रिप्शन फैक्टर स्मैड2/3 को सत्यापित करने के लिए डब्ल्यूबी विश्लेषण किया गया था, साथ ही साथ कुंजी भी। प्रतिलेखन कारक AP-1(c-Fos और c-Jun) जो साइटोकिन्स को नियंत्रित करता है। एमएमपी-1, एमएमपी-3, टाइप I प्रो-कोलेजन, और I-1 की सामग्री एलिसा द्वारा निर्धारित की गई थी। WB विश्लेषण के परिणामों से पता चला है कि समूह M में TGF-, Smad2 और Smad3 की अभिव्यक्ति समूह N (p) की तुलना में काफी कम थी।<0.05). the="" expression="" levels="" of="" tgf-β="" and="" smad3="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" their="" levels="" in="" group="" m="" mice;="" additionally,="" smad2="" also="" increased="" significantly=""><0.05), except="" for="" in="" the="" lcps="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (figure="" 6).="" on="" the="" contrary,="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" m="" group="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" n="" group.="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" cp="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" m="" group,="" except="" for="" the="" expression="" of="" c-jun="" in="" the="" lcp=""><0.05), and="" the="" change="" was="" dose-dependent.="" these="" results="" indicated="" that="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" was="" activated="" and="" ap-1="" was="" inhibited="" after="" feeding="">

AP-1 प्रोटीन, Jun और Fos परिवार के प्रोटीन का एक डिमेरिक कॉम्प्लेक्स है और त्वचा की सूजन और साइटोकाइन अभिव्यक्ति का एक महत्वपूर्ण नियामक है। आम तौर पर, सी-जून और सी-फॉस से बना कॉम्प्लेक्स त्वचा में उच्चतम ट्रांसक्रिप्शनल गतिविधि दिखाता है [41, ए42]। उम्र बढ़ने वाली त्वचा कोशिकाओं में उत्पादित आरओएस पहले एपी -1 प्रोटीन को सक्रिय करता है और फिर डाउनस्ट्रीम साइटोकिन्स (जैसे आईएल -1), एमएमपी, और टीजीएफ- सिग्नलिंग मार्ग को ट्रांसक्रिप्शन और अनुवाद के माध्यम से नियंत्रित करता है, इस प्रकार त्वचा की उम्र बढ़ने की सुविधा [43] ,44]। TGF- / Smad सिग्नलिंग प्रतिक्रिया एक शास्त्रीय कोलेजन संश्लेषण मार्ग है, और Smad प्रतिलेखन कारक इस संकेत पारगमन मार्ग के मूल में है। TGF- रिसेप्टर से जुड़कर डाउनस्ट्रीम Smad2 और Smad3 के फॉस्फोराइलेशन और सक्रियण को ट्रिगर करता है, जिससे COLI [14] का संश्लेषण बढ़ जाता है।

इसके अतिरिक्त, एलिसा परिणामों ने दिखाया कि एम समूह की त्वचा में एमएमपी-1, एमएमपी-3, और आईएल-एल की सामग्री एन समूह की तुलना में काफी अधिक थी, और प्रकार की सामग्री मैं प्रो-कोलेजन काफी कम था(p<0.05). however,="" the="" contents="" of="" mmp-1,="" mmp-3,="" and="" il-1α(figure="" 3d)in="" the="" skin="" after="" oral="" administration="" of="" cps="" were="" significantly="" lower="" than="" those="" in="" the="" m="" group="" (p=""><0.05); type="" i="" pro-collagen="" increased="" significantly,="" and="" all="" the="" changes="" were="" dose-dependent="" with="" cps="" (figure="" 7).="" mmps="" are="" involved="" in="" the="" decomposition="" of="" skin="" collagen,="" il-1α="" shows="" the="" level="" of="" inflammation="" of="" the="" skin,="" and="" type="" i="" pro-collagen="" reflects="" the="" synthesis="" of="" skin="" collagen.="" accumulating="" evidence="" suggests="" that="" the="" role="" of="" the="" jun/ap-1="" protein="" pathway="" has="" also="" been="" proposed="" to="" regulate="" skin="" inflammation="" [40].="" the="" elisa="" results="" showed="" that="" the="" combined="" treatment="" of="" uv="" and="" d-galactose="" caused="" skin="" collagen="" degradation,="" decreased="" collagen="" synthesis,="" and="" caused="" skin="" inflammation,="" leading="" to="" skin="" aging.="" however,="" these="" changes="" were="" reversed="" after="" the="" oral="" administration="" of="">

उपरोक्त रास्तों के अलावा, इस अध्ययन में, सीपी उपचार के बाद अप-विनियमित जीन को लाइसोसोम मार्ग में काफी समृद्ध किया गया था, यह दर्शाता है कि सीपी उपचार ने त्वचा में लाइसोसोम को सक्रिय किया (चित्र 5)। पिछले अध्ययनों से संकेत मिलता है कि सक्रिय लाइसोसोम समुच्चय को साफ करते हैं और उम्र बढ़ने के दौरान सेन्सेंट न्यूरल स्टेम कोशिकाओं की सक्रियता को बढ़ाते हैं [45]। इनके अलावा, लाइसोसोम का बढ़ा हुआ कार्य सेल डॉर्मेंसी को रोकने के लिए इंट्रासेल्युलर आरओएस की एकाग्रता को कम कर सकता है। इसी तरह, लाइसोसोम फ़ंक्शन में कोई भी कमी इंट्रासेल्युलर आरओएस एकाग्रता को बढ़ा सकती है जो अंततः सेल डॉर्मेंसी को बढ़ावा देती है [46]। यद्यपि हमने इस पेपर में इसे व्यवस्थित रूप से सत्यापित नहीं किया है, इन परिणामों और पिछली रिपोर्टों का अर्थ है कि लाइसोसोमल फ़ंक्शन की सक्रियता सीपी के लिए त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने का मुख्य तरीका हो सकता है, और हम इसे सत्यापित करने का लक्ष्य जारी रखेंगे।

इसलिए, इस अध्ययन से पता चला है कि आहार सीपी खुराक पर निर्भर तरीके से यूवी और डी-गैलेक्टोज से प्रेरित त्वचा की उम्र बढ़ने को कम कर सकते हैं। सीपी त्वचा के ऑक्सीकरण के स्तर को कम करके त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करते हैं, प्रमुख प्रतिलेखन कारकों एपी -1 (सी-जून और सी-फॉस) की अभिव्यक्ति को रोकते हैं, कोलेजन संश्लेषण को बढ़ावा देने के लिए टीजीएफ- / स्मैड सिग्नलिंग मार्ग को सक्रिय करते हैं, की अभिव्यक्ति को रोकते हैं। एमएमपी-1 और एमएमपी-3(जो कोलेजन क्षरण को रोकता है), और त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने के लिए त्वचा की सूजन को रोकता है (चित्र 8)। इसके अलावा, वर्तमान में हमारे निष्कर्ष

4। निष्कर्ष

सारांश में, इस अध्ययन ने पुष्टि की कि चिकन बोन कोलेजन पेप्टाइड्स का आहार पूरक कई मार्गों के माध्यम से पराबैंगनी विकिरण और डी-गैलेक्टोज से प्रेरित त्वचा की उम्र बढ़ने को कम कर सकता है, जिसमें प्रो-कोलेजन संश्लेषण को बढ़ावा देना, कोलेजन गिरावट को रोकना, त्वचा के एंटीऑक्सिडेंट स्तर में सुधार करना और अवरोध करना शामिल है। सूजन और जलन; उन्मूलन सीपी के साथ खुराक पर निर्भर था। एक विस्तृत जांच से पता चला है कि सीपी पहले त्वचा के ऑक्सीकरण के स्तर को कम करते हैं, प्रमुख प्रतिलेखन कारक एपी -1 (सी-जून और सी-फॉस) की अभिव्यक्ति को रोकते हैं, और फिर टीजीएफ- / स्मैड सिग्नलिंग मार्ग को बढ़ावा देने के लिए सक्रिय करते हैं। कोलेजन संश्लेषण, एमएमपी -1 और एमएमपी -3 की अभिव्यक्ति को रोकता है, कोलेजन क्षरण को रोकता है, और चूहों में त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने के लिए त्वचा की सूजन को रोकता है। इसके अलावा, त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने के लिए सीपी के लिए लाइसोसोम की सक्रियता भी मुख्य मार्ग हो सकती है, जो अनुवर्ती अनुसंधान और सत्यापन के योग्य है। ये परिणाम त्वचा की उम्र बढ़ने को कम करने और कार्यात्मक खाद्य पदार्थों में पशु उप-उत्पादों के व्यापक उपयोग के दायरे को व्यापक बनाने के लिए कोलेजन पेप्टाइड्स को लागू करने के लिए एक सैद्धांतिक आधार प्रदान करते हैं।

लेखक का योगदान: सीसी ने पांडुलिपि को डिजाइन, मापा और लिखा; ZXand HT ने पांडुलिपि को डिजाइन और संशोधित किया; YL ने पद्धति संबंधी मार्गदर्शन प्रदान किया; सी और वाई ने पांडुलिपि की समीक्षा की। सभी लेखकों ने पांडुलिपि के प्रकाशित संस्करण को पढ़ लिया है और सहमत हैं।

यह लेख पोषक तत्वों 2022, 14, 1622 से निकाला गया है। https://doi.org/10.3390/nu14081622 https://www.mdpi.com/journal/nutrients