भाग 2 डीएनए माइक्रोएरे-आधारित स्क्रीनिंग और पारंपरिक चीनी चिकित्सा की विशेषता
Mar 03, 2022
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4. पारंपरिक चीनी चिकित्सा के लिए डीएनए माइक्रोएरे परख के अनुप्रयोग
का आधुनिकीकरणटीसीएमकई प्रमुख मुद्दों के सहयोग से चर्चा की गई है, जैसे टीसीएम सूत्रों का भौतिक आधार, गुणवत्ता मूल्यांकन प्रणाली और टीसीएम सूत्रों की दक्षता और सुरक्षा का मूल्यांकन; सिस्टम बायोलॉजी में प्रमुख तकनीकी उपकरण, जैसे कि जीनोमिक्स, इंटरैक्टोमिक्स, मेटाबॉलिकमिक्स, फेनोमिक्स और प्रोटिओमिक्स, का उपयोग कैमोमाइल को समझने के लिए भी किया जा सकता है।टीसीएम, बाहरी टीसीएम प्रणाली और आंतरिक मानव शरीर की एक एकीकृत दुनिया [2]। टीसीएम, जैसे कि बेइमू (फ्रिटिलारिया एसपीपी।), चिशाओ (पैयोनिया एसपीपी।), चुआनक्सिओनग (लिगस्टिकम चुआनक्सिओनग), चुइपेनकाओ (सेडम सरमेंटोसम), डांगगुई (एंजेलिका साइनेंसिस), डैनशेन (साल्विया मिल्टियोरिजा), डोंगचोंगक्सियाकाओ (कॉर्डीसेप्स सिनेंसिस), YYujin (कर्कुमा का प्रकंद और मूलांक), गुआंगहुओक्सियांग (पोगोस्टेमोन कैबलिन), हुआंगकी (एस्ट्रागलस एसपीपी।), जिनिनहुआ (लोनीसेरा जपोनिका), जुहुआ (गुलदाउदी मोरीफोलियम), लिंग्ज़ी (गणोडर्मा एसपीपी।), संकी (पनाक्स नोटोगिन्सेंग), वुन्ची (पैनाक्स नोटोगिनसेंग), चिनेंसिस), और यिंग्यांगहुओ (एपिमेडियम एसपीपी।), का विश्लेषण बायोफिजिकल तकनीकों जैसे कि केशिका वैद्युतकणसंचलन, गैस क्रोमैटोग्राफी, एचपीएलसी, मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एमएस), पतली परत क्रोमैटोग्राफी (टीएलसी), अल्ट्रा-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (यूपीएलसी), और आणविक जैविक तकनीकों जैसे जीनोमिक पीसीआर और आरटी-पीसीआर द्वारा पराबैंगनी / निकट-अवरक्त स्पेक्ट्रोमेट्री, या प्रभावी घटकों की स्क्रीनिंग और / या गुणवत्ता नियंत्रण के लिए एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) जैसे प्रतिरक्षाविज्ञानी assays द्वारा, जिसमें अल्कलॉइड शामिल हैं, साइनोफोरिक ग्लाइकोसाइड्स, एर्गोस्टेरॉल, आवश्यक तेल, फ्लेवोनोइड्स, इरिडॉइड ग्लाइकोसाइड्स, लिग्नन्स, पैयोनिफ्लोरिन, फेनोलिक एसिड, सैपोनिन, स्टेरॉयड, शर्करा / पॉलीसेकेराइड और ट्राइटरपेनोइड्स [5]।
चीनी औषधीय पौधों का विश्लेषण डीएनए-आधारित प्रौद्योगिकियों द्वारा किया गया था, जैसे कि प्रवर्धित टुकड़ा लंबाई बहुरूपता (AFLP), cleaved प्रवर्धित बहुरूपी अनुक्रम (CAPS), अंतर-सरल अनुक्रम दोहराव (ISSR), यादृच्छिक प्रवर्धित बहुरूपी डीएनए (RAPD), प्रतिबंध खंड का पता लगाने वाले लंबाई बहुरूपता (RFLP), और सरल अनुक्रम दोहराव (SSR), और प्रवर्धन दुर्दम्य उत्परिवर्तन प्रणाली (ARMS), डीएनए प्रवर्धन फिंगरप्रिंटिंग (DAF), संकरण, माइक्रोएरे परख और अनुक्रमण [8], या कोशिका / ऊतक पर परख द्वारा /पशु स्तर, जैसे जीन नॉकआउट और कोशिका झिल्ली क्रोमैटोग्राफी और ट्रांसजेनिक्स [187]।
चीन में 297 अक्सर उपयोग की जाने वाली औषधीय जड़ी-बूटियों के अध्ययन में डीएमए का उपयोग करते हुए ट्रांसक्रिपटॉमिक्स के लिए सर्वेक्षण किए गए साहित्य से पता चला है कि अधिकांश अध्ययन उनके जैविक प्रभावों को खोजने पर केंद्रित हैं [10]। हालांकि, ऐसे मामले हैं जहां डीएमए को प्रभावी घटकों को स्क्रीन करने और https://www.xjcistanche.com/ के गुणवत्ता नियंत्रण के लिए लागू किया गया था।सिस्टैंचे-health-products/cistanche-tubulosa-benefits.html। इस खंड में, हम चर्चा करते हैं कि टीसीएम के गुणवत्ता नियंत्रण के लिए डीएमए का उपयोग कैसे किया गया है।
में प्रभावी रसायनों के अतिरिक्त अनुप्रयोगटीसीएमडीएमए द्वारा विश्लेषण में पेटेंट फाइलिंग, दवा की खोज और नैदानिक परीक्षण शामिल हैं। इन अनुप्रयोगों द्वारा पहचाने और विशेषता वाले एक प्रभावी रसायन को एक नए रसायन के रूप में पेटेंट कराया जा सकता है, या अन्यथा एक नए आवेदन के साथ एक ज्ञात रसायन के रूप में पेटेंट कराया जा सकता है।

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4.1. पारंपरिक चीनी चिकित्सा के गुणवत्ता नियंत्रण के लिए डीएनए माइक्रोएरे परख
डीएमएशुद्ध रसायनों और रसायनों के मिश्रण की विभिन्न गतिविधियों का पता लगाने और उनका मूल्यांकन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है [13,188]। जब टीसीएम के अध्ययन के लिए डीएमए लागू किया गया था, जड़ी-बूटियों के लिए विशिष्ट जीन सेट का चयन किया गया था। उदाहरण के लिए, 55 जीनों के एक सेट की जांच की गईडीएमएजीन/प्रोटीन नेटवर्क [80] के नियमन द्वारा अस्थमा पर किंगफेई शियाओयान वान फार्मूले के प्रभाव को समझने के लिए। 92 जीनों के एक सेट को टोकी-शकुयाकु-सान द्वारा अलग-अलग विनियमित किया गया था, जो परिसंचरण समस्याओं [89] के लिए एक प्रभावी सूत्र है। नौ मार्कर जीनों के एक सेट की शुरुआत में डीएमए द्वारा जांच की गई थी और बाद में आईएसएफ -1 के जैविक प्रभावों के बैच-टू-बैच स्थिरता का आकलन करने के लिए आरटी-पीसीआर द्वारा पुष्टि की गई थी, जो स्ट्रोक के बाद के विकारों के प्रबंधन के लिए इस्तेमाल किया जाने वाला एक सूत्र है। [6]।
एक बार जीन सेट का चयन हो जाने के बाद, उनका उपयोग जड़ी-बूटियों की जांच और/या गुणवत्ता नियंत्रण के लिए किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, DMA का उपयोग एचआईवी संक्रमण के इलाज के उद्देश्य से Cytochrome P450 (CYP450) पर निरोधात्मक प्रभाव वाली TCM प्रजातियों की जांच के लिए किया गया था [189]। उच्च throughputडीएमएआमतौर पर उपयोग किए जाने वाले प्राकृतिक उत्पादों के 897 जलीय अर्क से एमडीए-एमबी -231 कोशिकाओं के प्रसार पर एंटी-माइटोटिक प्रभाव (विषाक्तता से स्वतंत्र) के लिए स्क्रीन पर लागू किया गया था, और परीक्षण किए गए अर्क के 1.34 प्रतिशत से कम ने विकास निरोधात्मक गुण दिखाया। 0.0183 मिलीग्राम/एमएल [27] से कम की सांद्रता पर।डीएमएखमीर ट्रांस्क्रिप्टोम के आधार पर इक्विसेटम अर्वेन्स [30] के अर्क के गुणवत्ता नियंत्रण के लिए इस्तेमाल किया गया था।
भोजन और पूरक में सामग्री की गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के लिए विशिष्ट गतिविधि की जांच की गई। उदाहरण के लिए, एस्ट्रोजेनिक गतिविधि की डीएमए द्वारा एक अनुकूलित . का उपयोग करके जांच की गई थीडीएनएखाद्य पदार्थों का मूल्यांकन करने के लिए 172 एस्ट्रोजन-उत्तरदायी जीन युक्त माइक्रोएरे, जैसे कि फाइटोएस्ट्रोजेन [127] और जिनसैनोसाइड्स [148], और पौधों और मशरूम के अर्क के लिए, जैसे कि सोयाबीन [127], ग्लाइसीरिज़ा ग्लबरा [150], और एगारिकस ब्लेज़ी [138]। एस्ट्रोजेन-उत्तरदायी जीन को आगे छह कार्यात्मक समूहों (एंजाइमों, सिग्नलिंग, प्रसार, प्रतिलेखन, परिवहन, और अन्य) में वर्गीकृत किया गया था और कुछ ने विशिष्ट समूहों [183] के लिए प्राथमिकताएं दिखाईं।

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4.2. गुणवत्ता नियंत्रण के लिए डीएनए माइक्रोएरे परख के प्रोटोकॉल
हर्बल अर्क के गुणवत्ता नियंत्रण के लिए नए डीएमए-आधारित प्रोटोकॉल की योजनाओं को चित्र 2 में संक्षेपित किया गया है। एक सरलीकृत प्रोटोकॉल हर्बल अर्क (ए1 से ए5) के विभिन्न स्रोतों की जीन अभिव्यक्ति प्रोफाइल पर आधारित है, जिसकी तुलना एक मानक (एस) के साथ की जाती है। ) रैखिक प्रतिगमन (चित्रा 2ए) के आधार पर सहसंबंध गुणांक (आर-मान) द्वारा। विचलन (जैसे A3, चित्र 2A में) R-मानों की तुलना करके पता लगाया जा सकता है। जबकि अभिव्यक्ति प्रोफाइलिंग के लिए जीन सेट का उपयोग चयन के बिना किया जा सकता है (चित्र 2ए), विशिष्ट सेल कार्यों वाले जीन का उपयोग गुणवत्ता नियंत्रण (चित्रा 2बी, सी) के स्तर में सुधार के लिए किया जा सकता है, जहां जीन सेट (जी1 से जी3) हो सकते हैं। मनमाने ढंग से चुने गए, जैसे कि स्थिर (G1), कम स्थिर (G2) या अस्थिर (G3) पुनरुत्पादकता दिखाने वाले जब हर्बल अर्क के विभिन्न लॉट (A1 और A2) की तुलना एक मानक (चित्र 2B) से की जाती है। वैकल्पिक रूप से, जीन सेट को जीन फ़ंक्शंस (चित्रा 2सी) के अनुसार चुना जा सकता है, जहां हर्बल अर्क के प्रभावकारिता-आधारित गुणवत्ता नियंत्रण का एक प्रोटोकॉल देने के लिए कार्यात्मक रूप से समूहीकृत जीन (एफ1 से एफ3) के साथ प्रोफाइलिंग की जा सकती है। इन प्रोटोकॉल का उपयोग करने के फायदे हैं कि: (1) सेल फ़ंक्शन-आधारित जीन पूर्व जुलूस प्रोफाइलिंग प्रभावकारिता-आधारित गुणवत्ता नियंत्रण के लिए अच्छा है; (2) जीन सेट का चयन किया जा सकता है।

4. निष्कर्ष और परिप्रेक्ष्य
नए जैव-प्रौद्योगिकी उपकरणों की प्रगति के कारण, नए दृष्टिकोण विकसित किए गए हैं, जिनमें सिस्टम बायोलॉजी, सिग्नल ट्रांसडक्शन स्टडी, और आरएनए-सीक्वेंसिंग-आधारित संपूर्ण जीनोम / एक्सोम विश्लेषण शामिल हैं, जो हमें भारी मात्रा में ओमिक्स डेटा प्रदान करते हैं। हालाँकि, हम अभी भी नहीं जानते हैं कि इन उपकरणों का प्रभावी ढंग से उपयोग कैसे किया जाए। उदाहरण के लिए, अब हम एस्ट्रोजेनिक गतिविधि दिखाने वाले कई रसायनों को जानते हैं और संख्या लगातार बढ़ रही है क्योंकि वे सेल सिग्नलिंग के जटिल और उपन्यास मार्गों के माध्यम से कोशिकाओं, ऊतकों और अंगों को प्रभावित करते हैं, जैसे इंट्रासेल्यूलर सिग्नल ट्रांसडक्शन, सिग्नल क्रॉसस्टॉक / बायपासिंग, और इंटरसेलुलर ऑटोक्राइन/पैराक्राइन सिग्नलिंग के नेटवर्क [185,186]। यह जटिल स्थिति टीसीएम के अध्ययन और अनुप्रयोग के समान होगी क्योंकि, चूंकि एस्ट्रोजेनिक गतिविधि जड़ी-बूटियों में प्रभावी घटकों की सबसे महत्वपूर्ण गतिविधियों में से एक है और मानव शरीर को प्रभावित करने के लिए दिखाया गया है, एस्ट्रोजेन के निष्कर्ष होंगे अधिक जटिल स्थितियों के लिए सही है, जिसमें अन्य हार्मोन और वृद्धि कारक शामिल हैं। अन्य हार्मोनल और वृद्धि-कारक गतिविधियों वाले रसायन ऐसी जटिलताओं को दिखा सकते हैं, और इस प्रकार रसायनों के प्रभावों को समझने के लिए नए दृष्टिकोणों की आवश्यकता है। रसायनों के औषधीय उपयोग के अलावा, डीएमए-आधारित जीन अभिव्यक्ति प्रोफाइलिंग और रसायनों के मार्ग-आधारित परीक्षण को रोगों के निदान और अंतःस्रावी व्यवधानों के जोखिम मूल्यांकन के लिए विकसित किया गया है, जहां नए प्रकार के नैदानिक उपकरण का विकास प्रगति पर है, जैसे इन विट्रो डायग्नोस्टिक मल्टीवेरिएट इंडेक्स परख (आईवीडीएमआईए), और विषाक्तता मार्ग-आधारित जोखिम प्रबंधन प्रोटोकॉल, जैसे यूएस नेशनल रिसर्च काउंसिल [190] द्वारा प्रस्तावित। इस प्रकार, टीसीएम के अध्ययन और विकास के लिए लाभकारी प्रभावों का मार्ग-आधारित मूल्यांकन और ओमिक्स प्रौद्योगिकियों के माध्यम से संभावित जोखिमों के आकलन की आवश्यकता है।
स्वीकृति: इस शोध को आंशिक रूप से एक ज्ञान क्लस्टर पहल कार्यक्रम और जापान के शिक्षा, संस्कृति, खेल, विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय से बुनियादी क्षेत्रों के लिए अनुदान सहायता, विकास को बढ़ावा देने के लिए क्यूशू सांग्यो विश्वविद्यालय से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था। और नए फ्लोरोसेंट रंगों के अनुप्रयोग, और जापान के अर्थव्यवस्था, व्यापार और उद्योग मंत्रालय से चिकित्सा उपकरण विकास के लिए दिशानिर्देश कार्यक्रम द्वारा।
हितों के टकराव: लेखक हितों के टकराव की घोषणा नहीं करते हैं।

इचिनाकोसाइड इनसिस्टैंचे
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