कॉमन कार्प (साइप्रिनस कार्पियो) के लिए क्वेरसेटिन अनुप्रयोग: I. विकास प्रदर्शन, हास्य प्रतिरक्षा, एंटीऑक्सीडेंट स्थिति, प्रतिरक्षा-संबंधित जीन और गर्मी तनाव के खिलाफ प्रतिरोध पर प्रभाव

यह अध्ययन सामान्य कार्प (साइप्रिनस कार्पियो) में विकास प्रदर्शन, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, एंटीऑक्सीडेंट स्थिति, सीरम जैव रासायनिक कारकों और उच्च तापमान तनाव प्रतिक्रियाओं पर विभिन्न क्वेरसेटिन स्तरों के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए किया गया था। 27:21 ± 53 ग्राम के औसत वजन वाले 216 कॉमन कार्प की कुल संख्या को 12 टैंकों (चार उपचार × तीन प्रतिकृतियां) में विभाजित किया गया और उन्हें 0 मिलीग्राम/किग्रा क्वेरसेटिन (टी0) खिलाया गया। 60 दिनों के लिए 0 मिलीग्राम/किग्रा क्वेरसेटिन (टी1), 400 मिलीग्राम/किग्रा क्वेरसेटिन (टी2), और 600 मिलीग्राम/किग्रा क्वेरसेटिन (टी3)। विकास प्रदर्शन में महत्वपूर्ण अंतर थे, और उच्चतम अंतिम शारीरिक वजन (एफबीडब्ल्यू), वजन बढ़ना (डब्ल्यूजी), विशिष्ट विकास दर (एसजीआर), और फ़ीड सेवन (एफआई) टी 2 और टी 3 (पी <0:05) में देखा गया था। .

सीरम जैव रासायनिक कारकों और प्रतिरक्षा के बीच घनिष्ठ संबंध है। सीरम जैव रासायनिक कारक मानव शरीर में मुख्य मेटाबोलाइट्स हैं, और उनके स्तर में वृद्धि या कमी मानव शरीर की प्रतिरक्षा को प्रभावित करेगी।

सीरम जैव रासायनिक कारकों में प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट, वसा और अन्य पदार्थ शामिल हैं, जो मानव शरीर में एक जटिल चयापचय नेटवर्क बनाते हैं। जब मानव शरीर स्वस्थ अवस्था में होता है, तो सीरम जैव रासायनिक कारकों का स्तर संतुलित अवस्था में होगा, जो मानव शरीर की स्वस्थ स्थिति को बनाए रखने में मदद करता है।

जब मानव शरीर बीमारी या तनाव से ग्रस्त होता है, तो सीरम जैव रासायनिक कारकों का स्तर बदल जाएगा, जिससे प्रतिरक्षा कम हो जाएगी। उदाहरण के लिए, जब सीरम में प्रोटीन और एमाइलेज का स्तर कम हो जाता है, तो शरीर की प्रतिरक्षा काफी कमजोर हो जाएगी, जिसके परिणामस्वरूप रोग की संभावना बढ़ जाएगी।

इसलिए, सीरम जैव रासायनिक कारकों का संतुलन बनाए रखना बहुत महत्वपूर्ण है, जिसे जीवनशैली में बदलाव के माध्यम से प्राप्त किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, अधिक व्यायाम करना, उच्च वसा, उच्च नमक और उच्च चीनी वाले खाद्य पदार्थ कम खाना और अधिक ताजे फल और सब्जियां खाने से शरीर को स्वस्थ सीरम जैव रासायनिक कारक स्तर बनाए रखने में मदद मिल सकती है, जिससे प्रतिरक्षा में सुधार होता है।

संक्षेप में, सीरम जैव रासायनिक कारक मानव प्रतिरक्षा से निकटता से संबंधित हैं, और साथ में वे शरीर के चयापचय नेटवर्क का निर्माण करते हैं। हमें अपने स्वास्थ्य की रक्षा के लिए स्वस्थ जीवनशैली अपनानी चाहिए और सीरम जैव रासायनिक कारकों को संतुलन में रखना चाहिए। इस दृष्टि से हमें अपनी रोग प्रतिरोधक क्षमता को बेहतर करने की जरूरत है। सिस्टैंच प्रतिरक्षा में काफी सुधार कर सकता है क्योंकि सिस्टैंच में एंटी-वायरस और कैंसर विरोधी प्रभाव भी होते हैं, जो प्रतिरक्षा प्रणाली की लड़ने की क्षमता को मजबूत कर सकते हैं और शरीर की प्रतिरक्षा में सुधार कर सकते हैं।

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अलग-अलग क्वेरसेटिन स्तरों ने गर्मी के तनाव से पहले और बाद में पूरक मार्ग गतिविधि (ACH5 0) और लाइसोजाइम गतिविधि में काफी वृद्धि की है (P < 0: 0 5)। गर्मी के तनाव के संपर्क में आने वाली मछलियों में कैटालेज (सीएटी), ग्लूटाथियोन पेरोक्सीडेज (जीपीएक्स), और मैलोनडायल्डिहाइड (एमडीए) में काफी वृद्धि हुई थी, लेकिन क्वेरसेटिन के साथ पूरक आहार खाने वाली मछली ने गर्मी के तनाव से पहले और बाद में सबसे कम स्तर दिखाया (पी <{{ 7}}:05). दोनों चरणों में क्वेरसेटिन के साथ पूरक मछली आहार में सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज (एसओडी) का स्तर काफी बढ़ गया था (पी <0:05)। चुनौतीपूर्ण परीक्षण से पहले और बाद में अलग-अलग क्वेरसेटिन स्तरों के कारण एलेनिन एमिनोट्रांस्फरेज़ (एएलटी) और एस्पार्टेट एमिनोट्रांस्फरेज़ (एएसटी) में उल्लेखनीय कमी आई (पी <0:05)।

दोनों चरणों में अन्य उपचारों की तुलना में नियंत्रण समूह में ग्लूकोज और कोर्टिसोल का स्तर काफी अधिक था (पी < {0}}:05)। क्वेरसेटिन-पूरक आहार (पी <0:05) से खिलाई गई मछली में ग्लूटाथियोन पेरोक्सीडेज (जीपीएक्स) और लाइसोजाइम की अभिव्यक्ति को स्पष्ट रूप से नियंत्रित किया गया था। ग्रोथ हार्मोन (जीआर) और इंटरल्यूकिन-8 (आईएल8) (पी > 0:05) के लिए कोई उल्लेखनीय प्रभाव नहीं देखा गया। निष्कर्ष में, आहार क्वेरसेटिन अनुपूरण ({{9%) मिलीग्राम/किग्रा क्वेरसेटिन) ने विकास प्रदर्शन, प्रतिरक्षा और एंटीऑक्सीडेंट स्थिति में सुधार किया और गर्मी के तनाव के प्रति सहनशीलता में वृद्धि की।

1 परिचय

वैश्विक जनसंख्या वृद्धि के साथ-साथ जलकृषि का भी क्रमिक विकास हो रहा है। फिर भी, गहन उत्पादन गतिविधियाँ, अचानक तापमान परिवर्तन, असामान्य जलवायु और अन्य पर्यावरणीय स्थितियाँ मछली पर तनाव का कारण बनती हैं और प्रतिरक्षा अवसाद और संक्रामक महामारी को बढ़ाकर उत्पादन की गुणवत्ता और उपज में बाधा डालती हैं। जलीय कृषि उद्योग में सबसे महत्वपूर्ण पर्यावरणीय वस्तुओं में से एक तापमान है क्योंकि यह जलीय जानवरों के चयापचय, भोजन व्यवहार, विकास प्रदर्शन, अस्तित्व और रोग प्रतिरोध को प्रभावित कर सकता है [1-3]। तापमान परिवर्तन से जलीय जंतुओं के अंगों की वृद्धि, आहार दक्षता, शारीरिक कार्य, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और ऑक्सीडेटिव स्थिति में कमी आई है ([3-5])।

ऐसी चुनौतियों से निपटने के लिए, मछली के आहार में कार्यात्मक फ़ीड योजकों को शामिल करना पर्यावरण के अनुकूल और कुशल है। ये योजक संभावित रूप से मछली की वृद्धि और प्रजनन प्रदर्शन, फ़िललेट गुणवत्ता और रोगों और पर्यावरणीय परिस्थितियों के प्रति प्रतिरोधक क्षमता को बढ़ा सकते हैं।

विकास प्रदर्शन, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, एंटीऑक्सीडेंट स्थिति और रोग प्रतिरोधक क्षमता बढ़ाने के लिए जलीय पशु आहार में पॉलीफेनोल्स और पॉलीफेनोल-समृद्ध योजक मिलाए जाते हैं [6, 7]। पॉलीफेनोलिक यौगिकों के एक परिवार, फ्लेवोनोइड्स (फ्लैवोनोल्स) का मुख्य वर्ग माना जाता है, क्वेरसेटिन चाय, प्याज, सेब, स्ट्रॉबेरी, गोभी, नट्स और फूलगोभी सहित कई फलों और सब्जियों में प्रचुर मात्रा में होता है।

यह व्यापक रूप से स्वीकार किया गया है कि क्वेरसेटिन कई रोगजनक बैक्टीरिया जैसे एंटरोकोकस फ़ेकैलिस, स्टैफिलोकोकस ऑरियस, स्ट्रेप्टोकोकस म्यूटेंट, एस्चेरिचिया कोली और स्यूडोमोनास एरुगिनोसा के बायोफिल्म उत्पादन को रोकता है, जैसे कि कोरम-सेंसिंग मार्गों का दमन, इफ्लक्स पंपों का निषेध, व्यवधान या परिवर्तन। प्लाज्मा झिल्ली का, और न्यूक्लिक एसिड संश्लेषण को अवरुद्ध करना [8]। इसके अलावा, क्वेरसेटिन में कई लाभकारी गुण होते हैं जैसे कैंसर रोधी [9], एंटीऑक्सीडेंट और सूजन रोधी [10]।

पिछले निष्कर्षों से संकेत मिलता है कि आहार क्वेरसेटिन का एंटीऑक्सीडेंट स्थिति [11, 12], विकास प्रदर्शन [13, 14], मांस की गुणवत्ता [15], हेमटोलॉजिकल और प्रतिरक्षा पैरामीटर [16], रोग प्रतिरोधक क्षमता [17, 18] पर सकारात्मक प्रभाव पड़ता है। और ग्रूपर इरिडोवायरस रक्षा गुण [19-21]। कुछ शोधों से पता चला है कि आहार क्वेरसेटिन ने चिकन के विकास प्रदर्शन को बढ़ाया है [22] और रंग, बनावट और बकरी की कमर की समग्र स्वीकार्यता जैसे संवेदी स्कोर को बढ़ाया है [23]। जलीय जानवरों में, 400 मिलीग्राम/किग्रा से ऊपर क्वेरसेटिन ने तिलापिया (ओरियोक्रोमिस एसपीपी) के विकास प्रदर्शन में सुधार किया [24]।

पिछले अध्ययनों से पता चला है कि आहार संबंधी हर्बल अनुपूरक उच्च तापमान के अधीन कुछ मछलियों और/या शेलफिश प्रजातियों जैसे मैक्रोब्रैचियम रोसेनबर्गी [25], मेगालोब्रामा एंब्लीसेफला [26] और ओंकोरहिन्चस मायकिस [27] में तनाव मार्करों को कम करते हैं। हालाँकि, उच्च तापमान के तनाव के संपर्क में आने वाले जलीय जानवरों पर आहार क्वेरसेटिन के प्रभाव के बारे में कोई जानकारी उपलब्ध नहीं है। इसलिए, वर्तमान अध्ययन मछली में विकास प्रदर्शन, कुछ प्रतिरक्षा मापदंडों, एंटीऑक्सीडेंट स्थिति, कुछ सीरम जैव रासायनिक चर और उच्च तापमान तनाव प्रतिक्रियाओं पर आहार क्वेरसेटिन अनुपूरण के प्रभाव की तुलना करने के लिए किया गया था।

2. सामग्री एवं विधियाँ

2.1. Experimental Diets. Four experimental diets with different quercetin (>95 प्रतिशत शुद्धता, सिग्मा केमिकल कंपनी, यूएसए) स्तर तैयार किए गए (तालिका 1)। संक्षेप में, सूखी सामग्री को अच्छी तरह मिलाया गया था। तरल अवयवों को मिश्रण में फैलाने के बाद, विआयनीकृत पानी मिलाया गया (250 मिली प्रति किलोग्राम आहार)। तैयार मिश्रण को एक इलेक्ट्रिक मीट ग्राइंडर (एमजी14{6}}0आर, पार्स खज़ार, तेहरान, ईरान) में निकाला गया और मछली के मुंह के आकार (व्यास में 1 मिमी) के आधार पर चारा दिया गया। अंत में, चार प्रायोगिक आहार तैयार किए गए जिनमें 0 मिलीग्राम/किलो क्वेरसेटिन (टी0), 200 मिलीग्राम/किलो क्वेरसेटिन (टी1), 400 मिलीग्राम/किलो क्वेरसेटिन (टी2), और 600 मिलीग्राम/किलो क्वेरसेटिन (टी3) शामिल थे। छर्रों को एक सुखाने वाले कैबिनेट में सुखाया गया और फिर उपयोग होने तक 4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया। निम्नलिखित मानक तरीकों से रासायनिक संरचना, नमी, कच्चे प्रोटीन, लिपिड और राख सामग्री की पुष्टि की गई [28]।

2.2. मछली और प्रायोगिक स्थिति. 27:21 ± 53 ग्राम के औसत वजन के साथ 216 सामान्य कार्प की कुल संख्या एक निजी मछली फार्म से प्राप्त की गई और गोनबाद विश्वविद्यालय (गोनबाद, ईरान) के अनुसंधान हॉल में ले जाया गया। उन्हें प्रति टैंक 18 मछलियों के घनत्व के साथ 12 टैंकों में संग्रहित किया गया और 10 दिनों के लिए प्रयोगात्मक स्थितियों के अनुकूल बनाया गया। अनुकूलन अवधि के दौरान, सामान्य कार्प को दिन में दो बार बेसल आहार दिया जाता था। अनुकूलन समय के अंत में, इन टैंकों को 3 प्रतिकृतियों के साथ 4 उपचारों के लिए यादृच्छिक रूप से नामांकित किया गया था, और मछली को शरीर के वजन के 2.5 प्रतिशत की दर से 6 0 दिनों के लिए दिन में दो बार खिलाया गया था। मछली के अपशिष्ट और एक्वेरियम के पानी का आधा हिस्सा प्रतिदिन निकाला जाता था और उसके स्थान पर अच्छी तरह से वातित पानी डाला जाता था। तापमान, घुलित ऑक्सीजन और पीएच जैसे पानी की गुणवत्ता के मापदंडों को नियमित रूप से मापा गया और कॉमन कार्प के लिए मानक स्तर पर रखा गया (तापमान 24:1±0:5C, घुलित ऑक्सीजन 6:8±0:2मिलीग्राम/ली, पीएच7 :36 ± 0:1, और फोटोपीरियड 12डी: 12एल) [29]।

2.3. बायोमेट्री और रक्त नमूना संग्रह। 24 घंटे की उपवास अवधि के बाद, प्रत्येक टैंक में सभी मछलियों को 200 मिलीग्राम एल -1 लौंग पाउडर का उपयोग करके बेहोश किया गया, और प्रत्येक मछली का वजन दर्ज किया गया [30]। विकास प्रदर्शन और उत्तरजीविता दर की गणना एक सामान्य सूत्र [7] का उपयोग करके की गई थी। रक्त का नमूना एकत्र करने के लिए प्रति टैंक तीन मछलियों (प्रति उपचार 9 मछली) को यादृच्छिक रूप से चुना गया था। एक बाँझ सिरिंज का उपयोग करके प्रत्येक मछली की दुम की नस के माध्यम से रक्त के नमूने एकत्र किए गए और ट्यूबों में डाले गए। ट्यूबों को सेंट्रीफ्यूज किया गया (4 डिग्री सेल्सियस पर 10 मिनट के लिए 5000 आरपीएम) [29], और फिर, सतह पर तैरनेवाला को अलग किया गया और -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया।

2.4. गर्मी की चुनौती. दाऊद एट अल के अनुसार, 60 दिनों के भोजन के बाद, गर्मी के तनाव की चुनौती दी गई। [30] तीन प्रतियों में अध्ययन। सबसे पहले, परीक्षण के दौरान भोजन देना बंद कर दिया गया था, और प्रति टैंक सात भूखी मछलियों (प्रति उपचार 21 मछली) को गर्मी के तनाव के लिए 48 घंटों के लिए उच्च तापमान (32 डिग्री सेल्सियस) के साथ समान स्थिति में रखा गया था। तापमान को 32 डिग्री सेल्सियस तक बढ़ाने के लिए एक्वेरियम हीटर का उपयोग किया गया था, और पानी के तापमान को पोर्टेबल मल्टीपैरामीटर मीटर (वाईएसआई, चीन) द्वारा अक्सर जांचा जाता था।

2.5. रक्त और ऊतक का नमूना. चुनौतीपूर्ण परीक्षण के बाद, प्रत्येक टैंक में सभी मछलियों को 200 मिलीग्राम एल -1 लौंग पाउडर का उपयोग करके बेहोश किया गया था, और रक्त के नमूने एकत्र करने के लिए प्रति टैंक तीन मछली (प्रति उपचार 9 मछली) का चयन किया गया था। एक बाँझ सिरिंज का उपयोग करके प्रत्येक मछली की दुम की नस के माध्यम से रक्त के नमूने एकत्र किए गए और ट्यूबों में डाले गए। ट्यूबों को सेंट्रीफ्यूज किया गया (4 डिग्री सेल्सियस पर 10 मिनट के लिए 5000 आरपीएम) [29], और फिर, सतह पर तैरनेवाला को अलग किया गया और -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया।

2.6. जैव रसायन परख. चुनौतीपूर्ण परीक्षणों से पहले और बाद में, ग्लूकोज, एलानिन एमिनोट्रांस्फरेज (एएलटी), एस्पार्टेट एमिनोट्रांस्फरेज (एएसटी), कैटालेज (सीएटी), ग्लूटाथियोन पेरोक्सीडेज (जीपीएक्स), मैलोनडायलडिहाइड (एमडीए), और सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज (एसओडी) की वाणिज्यिक किट (पार्स एज़मून) का उपयोग करके जांच की गई। , ईरान)। टर्बिडिमेट्री के साथ सौरभ और साहू [31] की विधि का उपयोग करके सीरम लाइसोजाइम गतिविधि का आकलन किया गया था। सबसे पहले, माइक्रोकॉकस लाइसोडिक्टिकस का एक सस्पेंशन 0.2 mg ml-1 को 0.{16}}5 M सोडियम फॉस्फेट बफर (पीएच 6.2) में घोलकर तैयार किया गया था। फिर, माइक्रोकॉकस लाइसोडिक्टिकस के 2 मिलीलीटर निलंबन में 50 उल सीरम जोड़ा गया था, और प्रतिक्रिया मिश्रण को एक 96- वेल माइक्रोटिट्रे प्लेट (हाइपरियन, जर्मनी) में विभाजित किया गया था, और प्रारंभिक ओडी को तुरंत 450 एनएम पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा गया था। अंतिम OD को 1 घंटे के लिए 24 डिग्री C पर प्रतिक्रिया मिश्रण के ऊष्मायन के बाद मापा गया था। लाइसोजाइम गतिविधि की एक इकाई को नमूना राशि के रूप में परिभाषित किया गया था, जिससे पीबीएस में मुर्गी के अंडे की सफेदी लाइसोजाइम (सिग्मा) के साथ निर्धारित मानक वक्र का उपयोग करके कैलिब्रेट किए गए नमूने के 0.001/मिनट लाइसोजाइम के अवशोषण में कमी आई। सीरम वैकल्पिक पूरक (ACH50) गतिविधि को यानो एट अल के आधार पर मापा गया था। [32], जिसमें खरगोश की लाल रक्त कोशिकाओं (आरबीसी) को एक लक्ष्य के रूप में इस्तेमाल किया गया था। सीरम कोर्टिसोल के स्तर को एक वाणिज्यिक किट (आईबीएल कंपनी, गेसेलशाफ्ट फर इम्यूनकेमी अंड इम्यूनबायोलॉजी) का उपयोग करके प्रतिस्पर्धी एलिसा विधि द्वारा मापा गया था।

2.7. पित्रैक हाव भाव। एक चुनौतीपूर्ण परीक्षण के बाद एकत्र किए गए मछली के जिगर के कुल आरएनए को जीनऑल किट (जीनऑल बायोटेक्नोलॉजी, सियोल, कोरिया) का उपयोग करके अलग किया गया था। इलेक्ट्रोफोरेसिस एगरोज़ जैल द्वारा आरएनए गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के बाद, कुल आरएनए के 2 ग्राम को DNase I के साथ इलाज किया गया और निर्माता के अनुसार ऑलिगो (डीटी) प्राइमर, 1 0 एमएम डीएनटीपी और रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस का उपयोग करके पहले-स्ट्रैंड सीडीएनए संश्लेषण के लिए उपयोग किया गया। निर्देश (थर्मो साइंटिफिक, जर्मनी)। तालिका 2 में आरटी-पीसीआर विश्लेषण के लिए जीन-विशिष्ट प्राइमरों का उल्लेख किया गया था। बीटा-एक्टिन जीन का उपयोग आंतरिक नियंत्रण के रूप में किया गया था। निर्माता के निर्देशों का पालन करते हुए RealQ Plus मास्टर मिक्स ग्रीन (AMPLIQONIII) का उपयोग करके qपीसीआर किया गया। प्रतिक्रिया में 10 ul SYBR हरा मिश्रण, 1 ul पतला सीडीएनए, प्रत्येक प्राइमर का 0.5 ul, और मिलिपोर पानी को 20 ul की अंतिम मात्रा में जोड़ा गया था। प्रतिक्रिया के लिए निम्नलिखित कार्यक्रम का उपयोग किया गया था: 95 डिग्री सेल्सियस पर 10 मिनट, 10 सेकंड के लिए 95 डिग्री सेल्सियस पर विकृतीकरण, 40 सेकंड के लिए 60 डिग्री सेल्सियस पर एनीलिंग, और 40 चक्रों के लिए 35 सेकंड के लिए 72 डिग्री सेल्सियस पर विस्तार। आरएनए स्तर की गणना 2-ΔΔCT विधि [33] के आधार पर की गई थी। प्रत्येक प्रयोग के लिए तीन जैविक दोहराव किए गए।

2.8. सांख्यिकीय विश्लेषण। डेटा (माध्य ± एसडी) का विश्लेषण विचरण के एक-तरफ़ा विश्लेषण (एनोवा) द्वारा किया गया, जिसके बाद समूहों के बीच के साधनों की तुलना करने के लिए डंकन के मल्टीपल रेंज परीक्षण किया गया। विश्लेषण से पहले, डेटा का मूल्यांकन क्रमशः शापिरो-विल्क परीक्षण और लेवेने परीक्षण के साथ भिन्नता की सामान्यता और एकरूपता के लिए किया गया था। दो-तरफ़ा एनोवा का उपयोग आहार के प्रभाव, गर्मी के तनाव और उनकी अंतःक्रियाओं का परीक्षण करने के लिए भी किया गया था। एसपीएसएस सॉफ्टवेयर संस्करण 23 का उपयोग करके सांख्यिकीय विश्लेषण किए गए, और पी <{6}}:05 स्वीकृत महत्व स्तर था।

3। परिणाम

3.1. विकास प्रदर्शन. विकास प्रदर्शन में महत्वपूर्ण अंतर थे, और उच्चतम एफबीडब्ल्यू, डब्ल्यूजी, एसजीआर और एफआई टी2 और टी3 में देखे गए थे (तालिका 3, पी <{5}}:05)। मछली खाने वाले क्वेरसेटिन में एफसीआर में काफी कमी आई थी (तालिका 3, पी)।< 0:05).

3.2. सीरम प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया। जब सामान्य कार्प को गर्मी के तनाव के संपर्क में लाया गया तो लाइसोजाइम और ACH50 की गतिविधि उल्लेखनीय रूप से कम हो गई थी, और सबसे कम गतिविधि उन मछलियों में देखी गई जिन्हें नियंत्रण आहार दिया गया था और मछली को पूरक आहार दिया गया था, जो उच्चतम स्तर का प्रतिनिधित्व करता है (तालिका 4, पी < 0:05). गर्मी के तनाव से पहले और बाद में, अलग-अलग क्वेरसेटिन स्तरों ने ACH50 और लाइसोजाइम गतिविधि में काफी वृद्धि की, और सबसे अधिक गतिविधियाँ 400 (T2) और 600 (T3) मिलीग्राम/किग्रा क्वेरसेटिन (तालिका 4, पी <0:05) खाने वाली मछली में देखी गईं।

3.3. एंटीऑक्सीडेंट एंजाइम. गर्मी के तनाव के संपर्क में आने वाली मछलियों में कैटालेज़, एमडीए और जीपीएक्स में काफी वृद्धि हुई थी, नियंत्रण आहार के साथ खिलाई गई मछली में उच्चतम स्तर और क्वेरसेटिन के साथ पूरक आहार के साथ खिलाई गई मछली में सबसे कम स्तर दिखा (तालिका 4, पी <{3} }:05). गर्मी के तनाव के संपर्क में आने वाली मछलियों में एसओडी का स्तर काफी कम हो गया (जब सभी उपचार संयुक्त थे); इसके अलावा, गर्मी की चुनौती से पहले और बाद के उपचारों के बीच एसओडी के स्तर में महत्वपूर्ण अंतर था, और दोनों चरणों में टी2 में उच्चतम स्तर दर्ज किया गया था (तालिका 5, पी <0:05)।

3.4. तनाव पैरामीटर्स. गर्मी के तनाव से पहले और बाद में क्वेरसेटिन अनुपूरण उपचार की तुलना में नियंत्रण समूह में ग्लूकोज और कोर्टिसोल का स्तर काफी अधिक था (तालिका 6, पी <0:05)। कॉमन कार्प के उच्च तापमान के संपर्क में आने से सभी उपचारों में एएसटी और एएलटी में उल्लेखनीय वृद्धि हुई, लेकिन 6{11}}0 मिलीग्राम/किग्रा क्वेरसेटिन के साथ खिलाई गई मछली का स्तर सबसे कम था (तालिका 6, पी <0:05)। इसके अलावा, चुनौती से पहले और बाद में, एएलटी और एएसटी की उच्चतम और निम्नतम गतिविधियां क्रमशः नियंत्रण समूह और टी3 में देखी गईं (तालिका 6, पी <0:05)।

3.5. पित्रैक हाव भाव। गर्मी के तनाव के संपर्क में आने के बाद, जीपीएक्स (चित्रा 1 (ए)) की अभिव्यक्ति को स्पष्ट रूप से अपग्रेड किया गया था, और उच्चतम आरएनए स्तर 4-4 मिलीग्राम / किग्रा क्वेरसेटिन (पी <0:) खाने वाली मछली में देखा गया था। 05). जीआर (चित्र 1(बी)) और आईएल8 (चित्र 1(सी)) के लिए कोई उल्लेखनीय प्रभाव नहीं देखा गया, लेकिन वे क्वेरसेटिन-पूरक फ़ीड (पी> 0:05) से खिलाई गई मछली में अधिक थे।

नियंत्रण समूह (चित्रा 1 (डी)) की तुलना में क्वेरसेटिन-पूरक फ़ीड के साथ खिलाए गए सामान्य कार्प में लाइसोजाइम जीन की अभिव्यक्ति स्पष्ट रूप से अधिक थी।

4। चर्चा

इस अध्ययन में, आहार में क्वेरसेटिन को शामिल करने से कॉमन कार्प की वृद्धि और फ़ीड दक्षता में उल्लेखनीय सुधार हुआ। तदनुसार, 400 और 600 मिलीग्राम/किलोग्राम क्वेरसेटिन-पूरक आहार से खिलाई गई मछली में सर्वोत्तम डब्ल्यूजी, एसजीआर, एफआई और एफसीआर प्राप्त हुए। पिछले निष्कर्षों से संकेत मिलता है कि आहार क्वेरसेटिन का नील तिलापिया (ओरियोक्रोमिस निलोटिकस) [34], ग्रास कार्प (केटेनोफैरिंजोडोन इडेला) (), और सामान्य कार्प [13] में डब्ल्यूजी, एसजीआर और एफसीआर पर सकारात्मक प्रभाव पड़ा है। मछली के विकास प्रदर्शन पर क्वेरसेटिन का बढ़ावा देने वाला प्रभाव प्रोटीज, एमाइलेज और लाइपेज जैसे पाचन एंजाइमों के स्राव को उत्तेजित करने में उनकी बेहतर प्रभावकारिता से संबंधित हो सकता है [13, 34], आंत के हानिकारक बैक्टीरिया की प्रचुरता को कम करने और आबादी को बढ़ावा देने में। लाभकारी बैक्टीरिया [35], आंतों के अवरोधक कार्य को सुधारते हैं, और आंतों के विली और गॉब्लेट कोशिकाओं के सतह क्षेत्र में सुधार करते हैं [36]।

ACH50 गतिविधि एक महत्वपूर्ण पैरामीटर है जो मछली में हास्य संबंधी गैर-विशिष्ट प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के मूल्यांकन में लाभान्वित हुआ है। मछलियों के संपर्क में आने वाली विभिन्न तनाव स्थितियों में सीरम ACH50 के स्तर में कमी दर्ज की गई है। वर्तमान अध्ययन में, नियंत्रण समूह की तुलना में तनाव से पहले और तनाव के बाद 400 और 600 मिलीग्राम/किलो क्वेरसेटिन की खुराक के साथ पूरक समूह में सीरम ACH50 गतिविधि में काफी वृद्धि हुई है। निष्कर्ष में, चूँकि लीवर पूरक प्रोटीन का मुख्य स्रोत है, ACH50 के स्तर में वृद्धि को लीवर के स्वास्थ्य और कार्य में सुधार के द्वारा समझाया जा सकता है। बढ़ती ACH50 गतिविधि के संदर्भ में हमारे परिणाम 200 या 800 मिलीग्राम/किग्रा क्वेरसेटिन [16] के साथ शामिल सामान्य कार्प-पोषित आहार में पहले के अध्ययनों के निष्कर्षों से पूरी तरह सहमत हैं। इसके अलावा, परिणाम पिछले अध्ययनों के अनुरूप हैं जो दिखाते हैं कि तनाव के बाद पूरक गतिविधि में कमी को रोकने के लिए बहिर्जात फ़ीड एडिटिव्स सफल हैं [37, 38]।

लाइसोजाइम जन्मजात प्रतिरक्षा प्रणाली पर आक्रमण करने वाले रोगजनकों का एक महत्वपूर्ण रोगाणुरोधी पेप्टाइड है। 48 घंटों के लिए 32 डिग्री सेल्सियस पर रखी गई मछलियों के नियंत्रण समूह में सीरम लाइसोजाइम गतिविधि में उल्लेखनीय कमी पाई गई। उच्च तापमान पर सीरम लाइसोजाइम गतिविधि में इसी तरह की कमी नील तिलापिया, ओरियोक्रोमिस निलोटिकस [39] में देखी गई। वर्तमान अध्ययन में, नियंत्रण समूह की तुलना में तनाव से पहले और तनाव के बाद सभी क्वेरसेटिन-पूरक समूहों में सीरम लाइसोजाइम गतिविधि में काफी वृद्धि हुई थी। इससे पता चलता है कि क्वेरसेटिन अनुपूरण उच्च तापमान के बाद तनाव इम्यूनोसप्रेशन को रोकता है।

हमारे अध्ययन के समानांतर, क्वेरसेटिन युक्त चारा खाने वाली कुछ मछली प्रजातियों में लाइसोजाइम का स्तर भी बढ़ गया है। उदाहरण के लिए, सी. कार्पियो को 2{6}}0 या 800 मिलीग्राम किग्रा−1 क्वेरसेटिन युक्त आहार देने से सीरम, आंत और बलगम में लाइसोजाइम के स्तर में वृद्धि देखी गई [16]। वांग एट अल. [18] जेब्राफिश (डैनियो रेरियो) के पालन-पोषण के पानी में 0.01, 0.1, 1, 10, 100, और 1000 ug/l क्वेरसेटिन मिलाया गया और बताया गया कि सीरम लाइसोजाइम गतिविधि 1 ug/l क्वेरसेटिन समूह की तुलना में काफी अधिक थी। नियंत्रण समूह।

यह सर्वविदित है कि मछली के अध्ययन में सीरम ग्लूकोज का उपयोग गैर-विशिष्ट तनाव सूचकांक के रूप में किया जाता है [40, 41]। इस अध्ययन में, क्वेरसेटिन अनुपूरण ने प्रेस्ट्रेस समूह में सीरम ग्लूकोज सामग्री को काफी कम कर दिया। क्वेरसेटिन के हाइपोग्लाइकेमिक प्रभावों पर कुछ रिपोर्टें उपलब्ध हैं [42, 43]। हाल के एक अध्ययन में इसका समर्थन किया गया, जहां क्वेरसेटिन सामान्य कार्प में सीरम ग्लूकोज के स्तर को कम करता है [16]। हालांकि, हमारे अध्ययन के विपरीत, क्वेरसेटिन युक्त फ़ीड खिलाए गए सिल्वर कैटफ़िश, रैमडिया क्वीन [12] और ब्लंट थूथन ब्रीम, मेगालोब्रामा एंबलीसेफला [44] में सीरम ग्लूकोज का स्तर अपरिवर्तित रहा।

सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज (एसओडी), कैटालेज (सीएटी), और ग्लूटाथियोन पेरोक्सीडेज (जीपीएक्स) मुख्य एंजाइम हैं जो क्रमशः प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) को नष्ट करते हैं और एच2ओ2 और हाइड्रोपरॉक्साइड का विषहरण करते हैं। इसके अलावा, मैलोन्डियलडिहाइड (एमडीए) का उपयोग अक्सर लिपिड पेरोक्सीडेशन के बायोमार्कर के रूप में किया जाता है। बढ़ते एसओडी और घटती एमडीए गतिविधि के संदर्भ में हमारे परिणाम कॉमन कार्प, सी. कार्पियो, 800 मिलीग्राम/किलोग्राम क्वेरसेटिन से युक्त आहार पर पहले के अध्ययनों के निष्कर्षों से पूरी तरह सहमत हैं। इसी तरह, इब्राहिम एट अल। [45] नील तिलापिया, ओरियोक्रोमिस निलोटिकस में बढ़े हुए एसओडी और जीपीएक्स और क्वेरसेटिन के एमडीए प्रभाव में कमी की सूचना दी।

इसके अलावा, क्वेरसेटिन आहार खाने वाली मछलियों में एसओडी एमआरएनए अभिव्यक्ति [46] और मस्तिष्क, गिल, यकृत, और/या मांसपेशी एसओडी और सीएटी गतिविधि स्तर [12] अधिक थे। एसओडी, सीएटी, एमडीए और जीपीएक्स पैरामीटर विभिन्न तनाव स्थितियों जैसे कीटनाशकों [47], धातु [48], उच्च तापमान [49, 50], हाइपोक्सिया [50], और में एंटीऑक्सीडेंट प्रतिक्रिया में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। ठंडा तापमान [51]। हालाँकि, उच्च तापमान तनाव की स्थिति में मछली में एंटीऑक्सीडेंट क्षमता पर क्वेरसेटिन के प्रभाव पर कोई अध्ययन उपलब्ध नहीं है। वर्तमान अध्ययन में, उच्च तापमान के बाद की तनाव स्थितियों में देखे गए सीएटी, एमडीए और जीपीएक्स स्तरों में कमी और बढ़े हुए एसओडी स्तर क्वेरसेटिन के एक महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट प्रभाव का संकेत देते हैं। इसी प्रकार, आहार संबंधी एन्थ्राक्विनोन अर्क विशेष रूप से 0.1- 0.2 प्रतिशत के स्तर पर एसओडी में काफी वृद्धि हुई है और उच्च तापमान तनाव के तहत एम. रोसेनबर्गी में जिगर में एमडीए के स्तर में कमी दर्ज की गई है [25]।

सीरम एंजाइम गतिविधियों को ऊतक क्षति के महत्वपूर्ण संकेतक के रूप में स्वीकार किया जाता है; उदाहरण के लिए, एएसटी और एएलटी जिगर की क्षति के संकेतक हैं, और मछली में जिगर या मांसपेशियों की क्षति के लिए लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज (एलडीएच) हैं [52]। इसलिए, रक्त में इन एंजाइमों में वृद्धि को यकृत और मांसपेशियों के ऊतकों की क्षति के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है। पिछले अध्ययनों से पता चला है कि जब मछली को क्वेरसेटिन खिलाया गया तो सीरम एएलटी और एएसटी गतिविधियां कम हो गईं [13, 16]। मछली के सीरम एंजाइम स्तर पर उच्च तापमान के तनाव के तहत क्वेरसेटिन के प्रभाव पर अब तक कोई अध्ययन साहित्य में नहीं पाया गया है। हालाँकि, [25] ने बताया कि मीठे पानी के झींगा (एम. रोसेनबर्गी) में एएसटी और एएलटी गतिविधियाँ, जिन्हें उच्च तापमान तनाव के तहत आर. ऑफिसिनेल बेल से एंथ्राक्विनोन अर्क युक्त आहार दिया गया था, नियंत्रण मछली की तुलना में काफी कम थीं। इस अध्ययन में, उच्च तापमान तनाव से पहले क्वेरसेटिन-पूरक फ़ीड खाने वाली मछली में सीरम एएसटी और एएलटी (200 मिलीग्राम/किग्रा को छोड़कर) में कमी आई। उच्च तापमान के तनाव के बाद भी यह प्रवृत्ति कायम रही।

उच्च तापमान पर तनावग्रस्त मछली में कम सीरम ग्लूकोज का स्तर अल्पपोषित स्थितियों, यकृत विकारों और सूजन का परिणाम हो सकता है [25, 50, 53]। यह परिधीय ऊतकों में ग्लूकोज के उपयोग में वृद्धि से संबंधित हो सकता है, संभवतः तनाव प्रतिक्रिया से उत्पन्न ऊर्जा मांग में वृद्धि से संबंधित है [54]। उच्च तापमान (21 डिग्री सेल्सियस) पर सीरम ग्लूकोज स्तर में इसी तरह की कमी रेनबो ट्राउट, ओंकोरहिन्चस मायकिस [50] में देखी गई। हालांकि, हमारे निष्कर्षों के विपरीत, उच्च तापमान तनाव के तहत वुचांग ब्रीम, एम. एंबलीसेफला में रक्त में ग्लूकोज के स्तर में वृद्धि दर्ज की गई थी [26]। ये अलग-अलग परिणाम पालन-पोषण की स्थितियों, जोखिम समय, मछली की प्रजातियों, मछली के आकार और/या उम्र में अंतर से जुड़े हो सकते हैं।

रक्त कोर्टिसोल मछली में गर्मी के तनाव की प्रतिक्रिया के सबसे महत्वपूर्ण सूचकांकों में से एक है [55]। इस अध्ययन में, गर्मी के तनाव से पहले विभिन्न क्वेरसेटिन स्तर वाली मछलियों में कोर्टिसोल का स्तर काफी कम था। इसके अलावा, क्वेरसेटिन पूरक आहार खाने वाली मछलियों में गर्मी के तनाव के बाद कोर्टिसोल का स्तर काफी कम दिखाई दिया, जो सामान्य कार्प के चयापचय पर क्वेरसेटिन अनुपूरण की सुरक्षात्मक क्षमता को उजागर करता है। इसी तरह, नाइल तिलापिया को आहार संबंधी सोडियम ब्यूटायरेट खिलाने पर गर्मी के तनाव के संपर्क में आने पर कोर्टिसोल के स्तर में कमी देखी गई [30]। इस अध्ययन में, नियंत्रण समूह की तुलना में मछली खाने वाले क्वेरसेटिन में गर्मी के तनाव के दौरान कोर्टिसोल काफी कम था। ये परिणाम क्वेरसेटिन के तनाव-विरोधी प्रभावों से संबंधित हो सकते हैं जो बढ़े हुए कोर्टिसोल के डोमेन को रोकते हैं।

इन निष्कर्षों के अनुरूप, यह सुझाव दिया जा सकता है कि क्वेरसेटिन (400-600 मिलीग्राम/किग्रा) संभावित ऑक्सीडेटिव तनाव के खिलाफ कोशिकाओं के उपचार और सुरक्षा में एक उपयोगी पदार्थ हो सकता है।

डेटा उपलब्धता

वर्तमान अध्ययन के दौरान उत्पन्न और/या विश्लेषण किए गए डेटासेट उचित अनुरोध पर संबंधित लेखकों से उपलब्ध हैं।

हितों का टकराव

लेखक घोषणा करते हैं कि उनके हितों का कोई टकराव नहीं है

स्वीकृतियाँ

इस अध्ययन को ज़ाबोल विश्वविद्यालय (ईरान) द्वारा अनुदान कोड (IR-UOZ-GR-6313) द्वारा समर्थित किया गया था। इस कार्य को आंशिक रूप से चियांग माई विश्वविद्यालय द्वारा समर्थित किया गया था।

संदर्भ

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