प्राथमिक और मेटास्टेटिक मानव बृहदान्त्र कैंसर कोशिकाओं की प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजाति-मध्यस्थता एपोप्टोसिस

परिचय

कोलोरेक्टल कैंसर दुनिया भर में सबसे आम कैंसरों में से एक है (ब्रेनर)।और अन्य., 2014), और आधुनिक आहार और जीवनशैली के साथ-साथ कम शारीरिक गतिविधि के कारण, 2035 में अनुमानित 2.4 मिलियन मामलों के साथ इसकी घटना लगातार बढ़ रही है। वर्तमान प्रयास कोलोरेक्टल कैंसर की वर्तमान महामारी से निपटने के लिए पर्याप्त नहीं हैं और इसलिए प्रभावी रोकथाम और उपचार के लिए नवीन दृष्टिकोण की आवश्यकता है जिसमें फाइटोथेरेप्यूटिक्स (वीडनर) जैसे सुरक्षित वैकल्पिक हस्तक्षेपों के साथ जीवनशैली में बदलाव शामिल हैं।और अन्य., 2015). फाइटोथेरेपी, बीमारियों के इलाज के लिए औषधीय पौधों का उपयोग, प्राचीन मानव इतिहास का एक अनिवार्य हिस्सा रहा है। औषधीय पौधों का उपयोग लंबे समय से कैंसर के वैकल्पिक उपचार स्रोतों के रूप में किया जाता रहा है, जो पारंपरिक चिकित्सा में उपयोग किए जाने वाले साठ प्रतिशत से अधिक एंटीकैंसर एजेंटों का प्रतिनिधित्व करते हैं (बलुनास और किंगहॉर्न, 2005; सैबू)और अन्य., 2015). कुछ सबसे प्रसिद्ध उदाहरणों में से उद्धरण शामिल हैंकैथरैन्थस रोज़ियसजी डॉन. (एपोसिनेसी), टैक्सस बकाटा एल. (टैक्सएसी), और कैम्पटोथेका एक्यूमिनेट डेक्ने (निसैसी) (क्रैग और न्यूमैन, 2005; दा रोचाऔर अन्य., 2001). कई हर्बल अर्क और फाइटोकेमिकल्स को कोलोरेक्टल कैंसर में एंटीट्यूमर प्रभाव दिखाते हुए दिखाया गया है, जो प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) के उत्पादन और कैंसर कोशिकाओं के संबंधित एपोप्टोसिस के कारण होता है, जैसा कि अर्क के मामले में होता है।मेलिसा ऑफिसिनैलिस(वीडनरऔर अन्य., 2015)

फाइटोथेरेप्यूटिक उम्मीदवारों के बीच,सिस्टैंच ट्यूबुलोसा, एक ओरोबैंचेसी परजीवी रेगिस्तानी पौधा (जियांग एट अल., 2009) जो अफ्रीका, एशिया और भूमध्यसागरीय क्षेत्र के शुष्क और अर्ध-शुष्क क्षेत्रों में व्यापक रूप से वितरित होता है, इसमें मूल्यवान औषधीय गुण पाए गए हैं। सिस्टैंच ट्यूबुलोसा का पारंपरिक चिकित्सा में बड़े पैमाने पर उपयोग किया गया है और सुझाव दिया गया है कि गुर्दे की कमी, रुग्ण ल्यूकोरिया, मेट्रोरेजिया, महिला बांझपन और बुढ़ापा कब्ज (जियांग एट अल।, 2009) में उपचारात्मक प्रभाव पड़ता है। इसके पारंपरिक औषधीय उपयोगों के अलावा, महत्वपूर्ण औषधीय पिछले दशक के दौरान सिस्टैंच ट्यूबुलोसा के गुणों का गहन अध्ययन किया गया है, जिसमें वैसोरेलैक्सेंट (योशिकावा एट अल., 2006), हेपेटोप्रोटेक्टिव (मोरिकावा एट अल., 2010), एंटी-हाइपरग्लाइसेमिक और हाइपोलिपिडेमिक प्रभाव (जिओंग एट अल., 2013) शामिल हैं। सिस्टैंच ट्यूबुलोसा को प्रतिरक्षा प्रणाली के एक शक्तिशाली वर्धक, हड्डियों के निर्माण को बढ़ावा देने वाला और एक एंटी-एजिंग और एंटी-थकान एजेंट (जू एट अल।, 2014) के रूप में भी सुझाया गया था। इसके अलावा, सिस्टैंच ट्यूबुलोसा अर्क को अल्जाइमर रोग मॉडल (वू एट अल., 2015) में अमाइलॉइड जमाव को अवरुद्ध करने के लिए दिखाया गया है। इसके विभिन्न चिकित्सीय उपयोगों के बावजूद, संभावित कैंसर रोधी एजेंट के रूप में सिस्टैंच ट्यूबुलोसा के प्रभाव का अभी तक अध्ययन नहीं किया गया है।

वर्तमान कार्य में, हमने दो प्राथमिक और दो मेटास्टैटिक कोलन कैंसर सेल लाइनों पर सिस्टैंच ट्यूबुलोसा के कैंसर विरोधी प्रभाव और इस प्रभाव के अंतर्निहित संभावित तंत्र की जांच की है।

यौन क्रिया में सुधार के लिए प्राकृतिक सिस्टान्चे ट्यूबुलोसा PHGS75% ECH 30% ACT 12%

सामग्री और तरीके

पौधे के अर्क का संग्रहण एवं तैयारी

सिस्टैंच ट्यूबुलोसा के नमूने 2014 में कतर के रेगिस्तानी इलाकों से एकत्र किए गए थे और पौधे की प्रामाणिकता की पुष्टि हर्बटोलॉजिस्ट द्वारा की गई थी। वाउचर नमूने ADLQ के विष विज्ञान और बहुउद्देशीय विभाग में संग्रहीत हैं। धूप में सुखाए गए पौधों के नमूनों को रेट्श नाइफ मिल ग्रिंडोमिक्स GM300 के साथ पीसकर बारीक पाउडर बना दिया गया। 200 आरपीएम पर एक रोटरी शेकर पर 37 डिग्री पर रात भर 200 एमएल अल्ट्राप्योर पानी के साथ बीस ग्राम पाउडर निकाला गया। कच्चासिस्टैंच ट्यूबुलोसा अर्क (सीटीई)गैर-घुलनशील यौगिकों को गोली बनाने के लिए 8000 आरपीएम पर 3 0 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया गया था, सतह पर तैरनेवाला एकत्र किया गया था और लैबकोनको फ़्रीज़ोन 6 प्लस फ़्रीज़ ड्रायर का उपयोग करके फ्रीज-सूखा किया गया था। सूखे अर्क को डुलबेको के संशोधित ईगल मीडियम (डीएमईएम, सिग्मा, जर्मनी) में 20 मिलीग्राम/एमएल की सांद्रता में पुनर्गठित किया गया और 0.{8}}माइक्रोन झिल्ली फिल्टर के माध्यम से बाँझ-फ़िल्टर किया गया।

सेल लाइनें और सेल रखरखाव

मानव बृहदान्त्र कार्सिनोमा सेल लाइनें CaCo2, SW620, और LoVo सेल लाइन्स सर्विस (CLS, एपेलहेम, जर्मनी) से प्राप्त की गईं, जबकि HCT 116 सेल लाइन कतर विश्वविद्यालय के जैविक और पर्यावरण विज्ञान विभाग से एक उपहार था। CaCo2 और HCT11 कोलन कार्सिनोमा की प्राथमिक साइट से प्राप्त हुए थे जबकि SW620 और LoVo मेटास्टैटिक साइट से प्राप्त हुए थे। SW620, HCT116, और LoVo कोशिकाओं को DME माध्यम में संवर्धित और बनाए रखा गया था जबकि CaCo2 कोशिकाओं को ईगल के न्यूनतम आवश्यक माध्यम (EMEM, SIGMA, जर्मनी) में बनाए रखा गया था। कोशिकाओं को 5% कार्बन डाइऑक्साइड युक्त आर्द्र वातावरण में 10% भ्रूण गोजातीय सीरम (एफबीएस, सिग्मा, जर्मनी) और 1% पेनिसिलिन/स्ट्रेप्टोमाइसिन (सिग्मा, जर्मनी) के साथ पूरक संबंधित माध्यम में 37 डिग्री पर संवर्धित मोनोलेयर के रूप में विकसित किया गया था।

सेल व्यवहार्यता परख

साइटोटोक्सिक गतिविधि का मूल्यांकन करने के लिए {0}}[4,5-डाइमिथाइलथियाज़ोल{{3}वाईएल]{4}},{5}}डिफेनिलटेट्राजोलियम (एमटीटी) परख का उपयोग किया गया था। सीटीई उसी तरह जैसा कि पहले बताया गया है (जगनजैक एट अल., 2010)। अच्छी प्लेटों में संवर्धित CaCo2, HCT116, SW62 और LoVo कोशिकाओं का बीज घनत्व 104 कोशिका प्रति कुँआ था। उपचार से 24 घंटे पहले कोशिकाओं को 10% एफबीएस के साथ पूरक माध्यम में चढ़ाया गया था। 24 घंटों के बाद, माध्यम को हटा दिया गया और कोशिकाओं को 5% सीओ2 युक्त आर्द्र वातावरण में 37 डिग्री पर 24, 48, और 72 घंटों के लिए 0, 0.25, 0.5, 1, और 2 मिलीग्राम/एमएल सीटीई के साथ इलाज किया गया। सीटीई उपचार के बाद, माध्यम को हटा दिया गया और प्रत्येक कुएं में 40 μL एमटीटी समाधान (0.5 मिलीग्राम/एमएल) जोड़ा गया।

3 घंटे के ऊष्मायन के बाद, एमटीटी समाधान हटा दिया गया, फॉर्मेज़ान उत्पाद डाइमिथाइलसल्फोक्साइड (डीएमएसओ, सिग्मा, जर्मनी) में घुल गया, और अवशोषण को माइक्रोप्लेट रीडर (अनंत 200 प्रो नैनोक्वांट, टेकन ट्रेडिंग एजी, स्विट्जरलैंड) के साथ 590 एनएम पर मापा गया। .

एपोप्टोसिस परख

CaCo2, HCT116, SW620, और LoVo कोशिकाओं में एपोप्टोसिस का पता पीई एनेक्सिन वी एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट I का उपयोग करके 7-एमिनो-एक्टिनोमाइसिन डी (7-AAD) के साथ एक महत्वपूर्ण डाई (बेक्टॉन) के रूप में किया गया था। डिकिंसन इंटरनेशनल, बेल्जियम) निर्माता के निर्देश के अनुसार। संक्षेप में, कोशिकाओं को CTE (0, 0.5) जोड़ने से पहले 24 घंटे के लिए 10% एफबीएस के साथ पूरक संबंधित मीडिया में 5 × 1 0 4 कोशिकाओं / अच्छी तरह से घनत्व पर {{6} अच्छी तरह से प्लेटों में डाला गया था , या 1 मिलीग्राम/एमएल)। 24 सीटीई ऊष्मायन के बाद, कोशिकाओं को काटा गया, ठंडे फॉस्फेट-बफर खारा के साथ दो बार धोया गया, और अंधेरे में कमरे के तापमान पर 15 मिनट के लिए फ़ाइकोएरिथ्रिन (पीई) एनेक्सिन वी और 7-एएडी के साथ दाग दिया गया। एफएसीएस का उपयोग करके फ्लो साइटोमेट्री द्वारा 1 घंटे के भीतर दाग वाली कोशिकाओं का विश्लेषण किया गया। एरिया III प्रवाह साइटोमीटर और FACSDiva सॉफ़्टवेयर (बेक्टन डिकिंसन) न्यूनतम 104 कोशिकाओं के साथ कम प्रवाह दर पर। परख के लिए सकारात्मक नियंत्रण के रूप में 6 µM कैंप्टोथेसिन (SIGMA) के साथ 4 घंटे तक कोशिकाओं का उपचार किया गया।

इंट्रासेल्युलर आरओएस उत्पादन

इंट्रासेल्युलर आरओएस उत्पादन की जांच 2, 7- डाइक्लोरोडिहाइड्रोफ्लोरेसिन डायसेटेट (डीसीएफएच-डीए, सिग्मा, जर्मनी) का उपयोग करके की गई थी। डीसीएफएच-डीए एक गैरफ्लोरोसेंट जांच है, जो इंट्रासेल्युलर आरओएस के साथ फ्लोरोसेंट यौगिक 2, 7- डाइक्लोरोफ्लोरेसिन (डीसीएफ) (पोलजैक-ब्लाज़ी एट अल।, 2 0 11) में ऑक्सीकृत हो जाती है। डीसीएफएच डीए परख उसी तरह से की गई थी जैसा कि हमने पहले वर्णित किया है (सिंड्रिक एट अल, 2 0 13; पोलजैक-ब्लाज़ी एट अल।, 2011)। संक्षेप में, अच्छी तरह से काली प्लेटों में संवर्धित CaCo2, HCT116, SW620 और LoVo कोशिकाओं का बीजारोपण घनत्व 104 कोशिका प्रति कुआँ था। कोशिकाओं को 24 घंटे के लिए 10% एफबीएस के साथ पूरक संबंधित माध्यम में चढ़ाया गया था। उपचार से पहले कोशिकाओं को 5% CO2 / 95% हवा में 30 मिनट के लिए 37 डिग्री पर 10 µM DCFH-DA के साथ ऊष्मायन किया गया था। फिर कोशिकाओं को धोया गया और फिनोल लाल वाले माध्यम में 0, 0.5 और 1 मिलीग्राम/एमएल सीटीई के साथ इलाज किया गया। शीर्ष प्रतिदीप्ति और गैस नियंत्रण मॉड्यूल (अनंत 200 प्रो, टेकन ट्रेडिंग एजी, स्विट्जरलैंड) के साथ एक माइक्रोप्लेट रीडर का उपयोग करके 37 डिग्री और 5% सीओ2 पर इंट्रासेल्युलर आरओएस गठन की पूरे 25 घंटे तक लगातार निगरानी की गई। प्रतिदीप्ति तीव्रता को 500 एनएम की उत्तेजना तरंग दैर्ध्य और 529 एनएम पर उत्सर्जन का पता लगाने के साथ मापा गया था। मनमानी इकाइयाँ, सापेक्ष प्रतिदीप्ति इकाइयाँ (RFU), सीधे प्रतिदीप्ति तीव्रता पर आधारित थीं।

किडनी के कार्य में सुधार के लिए प्राकृतिक सिस्टान्चे ट्यूबुलोसा PHGS75% ECH 30% ACT 12%

माइटोकॉन्ड्रियल सुपरऑक्साइड पीढ़ी

माइटोकॉन्ड्रिया द्वारा सुपरऑक्साइड उत्पादन को प्रेरित करने के लिए सीटीई की क्षमता का अनुमान सेल-पारगम्य, माइटोकॉन्ड्रिया-लक्षित मिटोसॉक्स रेड जांच (लाइफ टेक्नोलॉजीज) और परमाणु धुंधलापन (लाइफ टेक्नोलॉजीज) के लिए होचस्ट 33342 का उपयोग करके किया गया था। CaCo2, HCT116, SW620, और LoVo कोशिकाओं को 24 घंटे के लिए 10% FBS के साथ पूरक संबंधित माध्यम में प्रति कुएं 1{15}} 4 कोशिकाओं के घनत्व पर {{6}अच्छी प्लेटों में डाला गया था। . फिर कोशिकाओं को 20 मिनट के लिए मिटोसॉक्स के 4 µM और Hoechst 33342 के 2 µM के साथ लोड किया गया, अतिरिक्त डाई को धोया गया, और 37 डिग्री और 5% CO2 पर 24 घंटे के लिए 0, 0.5 और 1 mg/mL CTE के साथ कुओं का इलाज किया गया। प्रतिदीप्ति तीव्रता को मिटोसॉक्स के लिए 510 एनएम की उत्तेजना तरंगदैर्ध्य और 580 एनएम पर उत्सर्जन का पता लगाने के साथ मापा गया था और शीर्ष प्रतिदीप्ति (अनंत 200 प्रो, टेकन ट्रेडिंग) के साथ एक माइक्रोप्लेट रीडर का उपयोग करके होचस्ट 33342 के लिए 350 एनएम की उत्तेजना तरंगदैर्ध्य और 461 एनएम पर उत्सर्जन का पता लगाया गया था। एजी, स्विट्जरलैंड)

सांख्यिकीय विश्लेषण

वर्णनात्मक आँकड़े माध्य +/− एसडी के रूप में दिखाए गए थे। छात्र टी-परीक्षण और ची-स्क्वायर परीक्षण का उपयोग करके समूहों के बीच अंतर के महत्व का आकलन किया गया था। जब दो से अधिक समूहों की तुलना की गई, तो हमने उचित पोस्ट हॉक परीक्षण के साथ एक तरफा एनोवा का उपयोग किया। मिरकोसॉफ्ट विंडोज़ के लिए SPSS 11.01 का उपयोग किया गया था। 0.05 से कम पी के साथ अंतर को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना जाता था।

परिणाम

मानव कोलन कैंसर सेल लाइनों के प्रसार पर सीटीई का प्रभाव चित्र 1 में दिखाया गया है। परीक्षण किए गए सभी सीटीई सांद्रता ने एकाग्रता और समय-निर्भर तरीके से CaCo2 सेल लाइन पर एक मजबूत निरोधात्मक प्रभाव दिखाया (चित्रा 1 ए)। बहत्तर घंटे के सीटीई उपचार ने नियंत्रण की तुलना में CaCo2 कोशिकाओं की वृद्धि को 6{7}}% से अधिक रोक दिया। एचसीटी116 कोशिका वृद्धि पर सीटीई उपचार का महत्वपूर्ण प्रभाव दो उच्चतम सांद्रता (1 मिलीग्राम/एमएल और 2 मिलीग्राम/एमएल) पर सभी समय बिंदुओं पर भी पाया गया, जो बाद की एकाग्रता में 7{19}}% से अधिक की कमी तक पहुंच गया (चित्र) 1बी, पी <0.05)। हालाँकि दो निम्न CTE सांद्रता (0.25 और 0.5 mg/mL) ने 24 घंटों के बाद कोशिकाओं की HCT116 वृद्धि को काफी कम कर दिया (p)<0.05), they had no significant effect following 72 hours of treatment compared to control (p>{{0}}.{{10}}5). CTE के साथ प्रसार के समय और एकाग्रता-निर्भर निषेध की LoVo कोशिकाओं में उच्चतम सांद्रता (p < {{17%) पर 60% से अधिक की पुष्टि की गई। 05) (चित्र 1C), और परीक्षण किए गए सभी चार सीटीई सांद्रता ने 48 घंटों के बाद SW62 0 कोशिकाओं की वृद्धि को कम कर दिया (चित्र 1D, p < 0.05 सभी के लिए)। 72 घंटों के उपचार के बाद, समान प्रभाव केवल दो उच्चतम सांद्रता (पी <0.05) के लिए देखा गया, जबकि 0.25 और 0.5 मिलीग्राम/एमएल सांद्रता ने नियंत्रण (पी> 0.05) की तुलना में कोई महत्वपूर्ण प्रभाव नहीं दिखाया। एपोप्टोसिस के प्रेरण पर 0.5 और 1 मिलीग्राम/एमएल सीटीई उपचार के प्रभाव का आगे सभी चार सेल लाइनों (चित्र 2) में परीक्षण किया गया। 0.5 मिलीग्राम/एमएल (पी) के साथ 24- घंटे के उपचार के बाद एचसीटी116 और लोवो में प्रारंभिक एपोप्टोसिस में कोशिकाओं की बढ़ी हुई संख्या का पता चला था।<0.05, Figure 2B and 2C) and in all cell lines at 1 mg/mL (p<0.05). A significant increase in necrotic or late apoptotic cell number was further observed in CaCo2 and SW620 cell lines (p<0.05, Figure 2A and 2D). The ability of CTE to induce intracellular ROS production is demonstrated in Figure 3. Three hours following CTE treatment there was a strong increase in intracellular ROS production in all cell lines (p<0.05). The intracellular ROS production increased progressively throughout the 25 hours of treatment in a time and concentration-dependent manner. Furthermore, the staining of cells with a mitochondria-targeted probe revealed a strong impact of CTE on mitochondrial superoxide production in a concentration-dependent manner (Figure 4). The highest increase in superoxide production by mitochondria was observed in HCT116 (69%, Figure 4B) and LoVo cells (82%, Figure 4C) following 24-hour treatment with 1 mg/mL of CTE.

चित्र .1:का प्रभावसिस्टैंच ट्यूबुलोसाकोलन कैंसर कोशिका रेखाओं की व्यवहार्यता पर। (ए) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo, और (D) SW620 कोशिकाओं के MTT परख द्वारा मापी गई सेल व्यवहार्यता को नियंत्रण अनुपचारित कोलन कैंसर सेल लाइन के प्रतिशत के रूप में प्रस्तुत किया गया है। प्रतिनिधि प्रयोग की 5 प्रतिकृतियों के लिए माध्य मान (±एसडी) दिए गए हैं: (*) महत्व पी<0.05 in comparison to control untreated respective cells.

चित्र 2: सिस्टैंच ट्यूबुलोसा जल अर्क मानव कोलन कैंसर कोशिकाओं में एपोप्टोसिस को प्रेरित करता है। (ए) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo, और (D) SW620 कोशिकाओं के एनेक्सिन-V-FITC प्रवाह साइटोमेट्री विश्लेषण को नियंत्रण अनुपचारित कोलन कैंसर सेल लाइन के प्रतिशत के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। प्रतिनिधि प्रयोग की 3 प्रतिकृतियों के लिए औसत मान (±एसडी) दिए गए हैं: (*) महत्व पी<0.05 in comparison to control untreated respective cells.

चित्र 3: सिस्टैंच ट्यूबुलोसा जल अर्क समय और खुराक पर निर्भर इंट्रासेल्युलर आरओएस उत्पादन को प्रेरित करता है। (ए) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo, और (D) SW620 कोशिकाओं में DCFH-DA परख द्वारा मापा गया ROS उत्पादन संबंधित प्रतिकृति के लिए औसत RFU मान (±SD) के रूप में प्रस्तुत किया गया है। एक प्रतिनिधि प्रयोग. (*)महत्व पृ<0.05 in comparison to control untreated colon cancer cells. 

चित्र 4: सिस्टैंच ट्यूबुलोसा जल अर्क मानव कोलन कैंसर कोशिकाओं में माइटोकॉन्ड्रियल सुपरऑक्साइड उत्पादन को प्रेरित करता है। ए) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo और (D) SW620 कोशिकाओं में माइटोकॉन्ड्रिया-लक्षित मिटोसॉक्स रेड जांच की प्रतिदीप्ति तीव्रता को नियंत्रण अनुपचारित कोलन कैंसर सेल लाइन के प्रतिशत के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। प्रतिनिधि प्रयोग की 5 प्रतिकृतियों के लिए माध्य मान (±एसडी) दिए गए हैं: (*) महत्व पी<0.05 in comparison to control untreated colon cancer cells.

बहस

हालाँकि पहले के अध्ययनों में सिस्टैंच ट्यूबुलोसा के कई औषधीय गुणों की सूचना दी गई है, लेकिन घातक कोशिकाओं में इसके प्रसार-विरोधी प्रभाव की यह पहली रिपोर्ट है। पानी से निकाले गए सिस्टैंच ट्यूबुलोसा बायोएक्टिव यौगिकों, एक अत्यधिक ध्रुवीय विलायक, ने मजबूत कैंसर विरोधी बायोएक्टिविटी दिखाई। हमने पहले पानी में घुलनशील सिस्टैंच ट्यूबुलोसा की दक्षता की तुलना मेथनॉल और एथिल एसीटेट जैसे अन्य सॉल्वैंट्स से की है, लेकिन पानी के अर्क ने सबसे आशाजनक कैंसर विरोधी गतिविधियों का प्रदर्शन किया है (डेटा नहीं दिखाया गया है)।

हमने प्राथमिक और मेटास्टैटिक कोलन कैंसर सेल लाइनों की 60% वृद्धि को रोकने के लिए 1 मिलीग्राम/एमएल और 2 मिलीग्राम/एमएल पर सीटीई की क्षमता का प्रदर्शन किया है, जिससे संभावित रूप से महत्वपूर्ण भूमिका का पता चलता है।सिस्टैंच ट्यूबुलोसाकोलन कैंसर के उपचार के रूप में। सामान्य कोशिकाओं की तुलना में, कैंसर कोशिकाओं में आमतौर पर रेडॉक्स होमोस्टैसिस में गड़बड़ी होती है और वर्तमान एंटीकैंसर उपचारों की एक सामान्य रणनीति सेलुलर ऑक्सीडेटिव तनाव को बढ़ाना है (यांग एट अल, 2013)। यद्यपि आरओएस के शारीरिक रूप से निम्न स्तर की सिग्नलिंग अणुओं के रूप में एक महत्वपूर्ण भूमिका होती है, अत्यधिक आरओएस उत्पादन कैंसर की अस्थिरता और घातकता में योगदान कर सकता है (लिउ और स्टोर्ज़, 2010)। विरोधाभासी रूप से, सेलुलर रेडॉक्स होमोस्टैसिस में यह असंतुलन कैंसर कोशिकाओं को आरओएस-प्रेरित कोशिका मृत्यु के प्रति अधिक संवेदनशील बनाता है (जगनजैक एट अल।, 2008; नोगीरा और हे, 2013)। इस अध्ययन में रिपोर्ट किए गए सीटीई के प्रसार-रोधी प्रभाव को अर्क के भीतर ज्ञात और अज्ञात यौगिकों के विभिन्न अतिरिक्त और इंट्रासेल्युलर तंत्र द्वारा मध्यस्थ किया जा सकता है, जो एपोप्टोसिस में आवश्यक भूमिका निभाने वाले कई मार्गों को लक्षित करता है। कोशिका मृत्यु के विभिन्न तरीकों के बीच अंतर करने के लिए, हमने देखे गए सीटीई-प्रेरित साइटोटॉक्सिसिटी के लिए जिम्मेदार संभावित तंत्र की जांच की।

सिस्टैंचे ट्यूबुलोसा एक्स्ट्रैक्ट एंटी अल्जर्मर PHGS75% ECH 30% ACT 12%

हमारा डेटा बताता है कि सीटीई इंट्रासेल्युलर आरओएस उत्पादन बढ़ाता है और परिणामस्वरूप आरओएस-प्रेरित कोशिका मृत्यु होती है। कोशिका की रेडॉक्स अवस्था भी एपोप्टोसिस को विनियमित करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है और माइटोकॉन्ड्रियल इलेक्ट्रॉन परिवहन श्रृंखला सेलुलर आरओएस पीढ़ी (ट्रैचूथम एट अल।, 2008) की प्रमुख साइटों में से एक है। इसके अलावा, इंट्रासेल्युलर आरओएस माइटोकॉन्ड्रिया-निर्भर और स्वतंत्र मार्गों (सिन्हा एट अल।, 2013) दोनों के माध्यम से सेलुलर एपोप्टोसिस का कारण बन सकता है। वास्तव में, हमारा डेटा यह भी संकेत देता है कि सीटीई-प्रेरित फॉस्फेटिडिलसेरिन बाह्यीकरण, प्राथमिक और मेटास्टैटिक कैंसर सेल लाइनों दोनों में एपोप्टोसिस में एक आम प्रभाव है, यह सुझाव देता है कि सीटीई-प्रेरित मृत्यु का तंत्र नेक्रोसिस के बजाय एपोप्टोसिस द्वारा मध्यस्थ होता है। कैंसर कोशिकाओं में एपोप्टोसिस की सक्रियता एक सुधारात्मक रणनीति है और कई कैंसर रोधी दवाएं कैंसर कोशिकाओं में एपोप्टोटिक प्रभाव डाल सकती हैं।

इसलिए कैंसर कोशिकाओं में प्रो-एपोप्टोटिक गतिविधियों वाले यौगिक या अर्क कैंसर विरोधी दवा अनुसंधान में संभावित रूप से उपयोगी होते हैं (वोंग, 2011)। यह निर्धारित करने के लिए कि क्या सीटीई-प्रेरित प्रो-एपोप्टोटिक प्रभाव माइटोकॉन्ड्रिया-प्रेरित आरओएस तंत्र द्वारा मध्यस्थ है, हमने सीटीई-उपचारित कोशिकाओं में माइटोकॉन्ड्रिया-लक्षित फ्लोरोसेंट जांच का उपयोग करके सुपरऑक्साइड उत्पादन को मापा। हमारा डेटा स्पष्ट रूप से दिखाता है कि सीटीई माइटोकॉन्ड्रियल सुपरऑक्साइड उत्पादन को उत्तेजित करता है, जिससे पता चलता है कि सिस्टैंच ट्यूबलोसा एंटीकैंसर गतिविधि कम से कम आंशिक रूप से माइटोकॉन्ड्रिया-प्रेरित आरओएस तंत्र के माध्यम से मध्यस्थ होती है।

निष्कर्ष

निष्कर्ष में, हमारा डेटा बताता है कि रेगिस्तानी पौधे सिस्टैंच ट्यूबुलोसा का जल अर्क कोलन कैंसर की रोकथाम और उपचार के लिए अन्य पारंपरिक उपचारों के साथ संयोजन में कैंसर विरोधी दृष्टिकोण के लिए एक आशाजनक उम्मीदवार का प्रतिनिधित्व कर सकता है। हम यह भी प्रदर्शित करते हैं कि कैंसर कोशिकाओं के खिलाफ पौधे के अर्क की विषाक्तता इंट्रासेल्युलर आरओएस उत्पादन में वृद्धि और, कम से कम आंशिक रूप से, माइटोकॉन्ड्रियल-निर्भर एपोप्टोसिस द्वारा मध्यस्थ होती है। कैंसर विरोधी गतिविधि के लिए जिम्मेदार व्यक्तिगत जैविक रूप से सक्रिय घटकों को अलग करने और चिह्नित करने के लिए आगे के अध्ययन जारी हैं।

एक प्रभावी कीमोप्रिवेंटिव एजेंट के रूप में इस अर्क के संभावित उपयोग का मूल्यांकन करने और आणविक स्तर पर कोलन कैंसर कोशिकाओं पर कार्रवाई के तंत्र को समझने के लिए अधिक शोध की आवश्यकता है। इसके लाभकारी स्वास्थ्य प्रभावों की पुष्टि के लिए आगे प्रीक्लिनिकल और क्लिनिकल अध्ययन की भी आवश्यकता हैकैंसर की रोकथाम के लिए सिस्टैंच ट्यूबुलोसा.

 CISTANCHE TUBULOSA CISTANCHE कॉफ़ी याददाश्त में सुधार करती है, एंटी-थकान PHGS75% ECH 30% ACT 12%