सार्स-सीओवी-2 हल्के कोविड में मेमोरी बी और टी सेल प्रोफाइल-19 ठीक हो चुके रोगी ✩

अमूर्त

उद्देश्य:

एंटीवायरल एडेप्टिव इम्युनिटी में मेमोरी बी सेल्स (एमबीसी) और मेमोरी टी सेल्स (एमटीसी) शामिल हैं। सीवियर एक्यूट रेस्पिरेटरी सिंड्रोम कोरोनावायरस 2 (SARS-CoV-2) में MBC और MTC की गतिशीलता स्वस्थ हो चुके लोगों के लिए आगे की जांच का वारंट है।

एंटीवायरल एडेप्टिव इम्युनिटी शरीर द्वारा वायरल संक्रमण के लिए बनाई गई एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया है, जिसमें सेल्युलर इम्युनिटी और ह्यूमोरल इम्युनिटी के दो पहलू शामिल हैं। सेलुलर प्रतिरक्षा मुख्य रूप से संक्रमित वायरस को सीधे मारने या वायरस निकासी को बढ़ावा देने के लिए टी कोशिकाओं और प्राकृतिक हत्यारा कोशिकाओं का उपयोग करती है; ह्यूमोरल इम्युनिटी को मुख्य रूप से एंटीबॉडी द्वारा बेअसर, स्पष्ट और पुन: संक्रमण को रोकने के लिए मध्यस्थता की जाती है। प्रतिरक्षा मानव शरीर की बाहरी रोगजनक सूक्ष्मजीवों और हानिकारक कारकों के आक्रमण का विरोध करने की क्षमता को संदर्भित करती है और मानव शरीर के लिए रोगों के आक्रमण का विरोध करने के लिए एक महत्वपूर्ण गारंटी है। एंटीवायरल एडेप्टिव इम्युनिटी का इम्युनिटी से गहरा संबंध है क्योंकि एंटीवायरल एडेप्टिव इम्युनिटी मानव शरीर के लिए वायरल संक्रमण का प्रतिरोध करने का एक महत्वपूर्ण साधन है। केवल मजबूत प्रतिरक्षा की स्थिति में ही शरीर पर्याप्त एंटीवायरल अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया उत्पन्न कर सकता है और जितनी जल्दी हो सके वायरस को साफ कर सकता है। , वायरल संक्रमण को रोकने और इलाज के उद्देश्य को प्राप्त करने के लिए। फिर हमें अपने दैनिक जीवन में भी अपनी रोग प्रतिरोधक क्षमता को बेहतर करने की जरूरत है। हम Cistanche का उपयोग कर सकते हैं। Cistanche विभिन्न प्रकार के एंटीऑक्सीडेंट पदार्थों से भरपूर होता है, जैसे विटामिन सी, विटामिन सी, कैरोटीनॉयड आदि। ये तत्व मुक्त कणों को नष्ट कर सकते हैं और ऑक्सीडेटिव तनाव को कम कर सकते हैं, प्रतिरक्षा प्रणाली के प्रतिरोध में सुधार कर सकते हैं।

सिस्टंच ट्यूबलोसा लाभ पर क्लिक करें

तरीके:

इस पार-अनुभागीय और अनुदैर्ध्य अध्ययन में, रक्त-व्युत्पन्न एमबीसी और एमटीसी प्रतिक्रियाओं का मूल्यांकन 68 एंटी-स्पाइक आईजीजी-पॉजिटिव माइल्ड कोरोनावायरस डिजीज 2019 (कोविड -19) में किया गया था, जो 1 से 7 महीने के बीच (औसतन) 4.1 महीने) रोग की शुरुआत के बाद। SARS-CoV-2 एंटी-स्पाइक IgG एलिसा द्वारा निर्धारित किया गया था, MBC SARS-CoV -2-विशिष्ट रिसेप्टर बाइंडिंग डोमेन (RBD) ELISpot, और इंटरफेरॉन-गामा (IFN-)-, इंटरल्यूकिन 2 (IL2) द्वारा )-, और IFN- plus IL2-IFN- और IL2 SARS-CoV-2 FluoroSpot द्वारा MTC स्रावित करना। पहली मुलाकात में लिए गए 24 मरीजों के लिए, आईजीजी, एमबीसी और एमटीसी विश्लेषण भी 3 महीने बाद दूसरी मुलाकात में किए गए।

परिणाम:

स्वास्थ्य लाभ प्राप्त करने वाले सत्तर प्रतिशत MBC- और MTC-सकारात्मक दोनों थे, 18 प्रतिशत MBC-सकारात्मक और MTC-नकारात्मक थे, और 10 प्रतिशत MTC-सकारात्मक और MBC-नकारात्मक थे। चरम MBC प्रतिक्रिया स्तर का पता COVID -19 के शुरू होने के 3 महीने बाद चला और संक्रमण के 7 महीने बाद तक बना रहा। S1, S2_N, और SNMO पेप्टाइड पूल की प्रतिक्रिया में शुरुआत के 1 महीने बाद महत्वपूर्ण MTC स्तरों का पता चला। SNMO के लिए MTC प्रतिक्रिया की आवृत्ति और परिमाण S1 और S2_N की तुलना में अधिक थे। अनुदैर्ध्य विश्लेषण ने प्रदर्शित किया कि जब विशिष्ट हास्य प्रतिरक्षा में गिरावट आई, तब भी सेलुलर प्रतिरक्षा बनी रही। निष्कर्ष: अध्ययन के निष्कर्ष SARS-CoV-2 संक्रमण के बाद कम से कम 7 महीने के लिए अनुकूली सेलुलर प्रतिरक्षा के स्थायित्व को प्रदर्शित करते हैं, जो लंबे समय तक चलने वाली सुरक्षा का सुझाव देते हैं।

1 परिचय

एंटी-सीवियर एक्यूट रेस्पिरेटरी सिंड्रोम कोरोनावायरस 2 (SARS-CoV-2) में प्राथमिक संक्रमण के बाद स्वस्थ हो चुके रोगियों में एंटीबॉडी के स्तर में प्रगतिशील गिरावट (Achiron et al., 2021; Hartley et al., 2020; Rodda et al., 2021; साखरकर एट अल।, 2021) एक बार ह्यूमरल इम्युनिटी कम हो जाने पर SARS-CoV -2 फिर से संक्रमण की संभावना को बढ़ाता है। परिणामस्वरूप, मेमोरी बी और मेमोरी टी कोशिकाओं (क्रमशः एमबीसी और एमटीसी) से जुड़े सार्स-सीओवी -2 के खिलाफ दीर्घकालिक प्रतिरक्षा पर ध्यान आकर्षित किया गया है। विशिष्ट एंटी-सार्स-सीओवी -2 एमबीसी और एमटीसी की उपस्थिति ठीक हो चुके रोगियों में प्रदर्शित की गई है (फोर्थल, 2021; हार्टले एट अल।, 2020; पेंग एट अल।, 2006; पेंग एट अल।, 2020; रोड्डा एट अल।, 2021; श्वार्जकोफ एट अल।, 2021; सेकेन एट अल।, 2020; शेरिना एट अल।, 2021; थिमे एट अल।, 2020)।

हाल के कई अध्ययनों से पता चला है कि SARS-CoV -2- विशिष्ट IgG बना रहता है और बीमारी की शुरुआत के बाद 8-9 महीनों तक MBC और MTC के साथ-साथ बढ़े हुए अनुपात के साथ होता है (Dan et al., 2021; Sandberg et al। , 2021; शेरिना एट अल।, 2021), जबकि अन्य ने SARS-CoV -2 IgG के स्तर में गिरावट और यहां तक ​​​​कि बीमारी की शुरुआत के बाद कम से कम 5 महीनों के लिए MBC में वृद्धि दिखाई है (हार्टले एट अल। 2020; रोड्डा और अन्य, 2021; साखरकर और अन्य, 2021)।

कोरोनावायरस बीमारी 2019 (COVID-19) के ठीक होने के दौरान IgG स्तरों में कथित गिरावट को देखते हुए, पुन: संक्रमण के मामले में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को फिर से बुलाने के लिए लंबे समय तक चलने वाली अनुकूली प्रतिरक्षा सबसे अधिक प्रासंगिक है। हाल ही में रिपोर्ट की गई SARSCoV की कम आवृत्ति -2 सेरोनिगेटिव व्यक्तियों में पुन: संक्रमण (लीडी एट अल।, 2021; मुर्चू एट अल।, 2021) ने अनुकूली प्रतिरक्षा को फिर से बुलाकर एंटी-सार्स-सीओवी2 रक्षा की संभावना बढ़ा दी है। . इसलिए, यह अध्ययन SARS-CoV -2 MBC और MTC प्रतिक्रियाओं और MTC प्रदर्शनों की सूची एंटी-स्पाइक IgG-पॉजिटिव हल्के COVID -19 स्वस्थ हो चुके रोगियों को प्रोफाइल करने के लिए किया गया था। विशेष रूप से, COVID -19 में MBC और MTC प्रतिक्रियाओं में गिरावट वाले IgG स्तर का आकलन किया गया।

2. तरीके

2.1। प्रतिभागियों

अध्ययन में सार्स-सीओवी -2 स्वास्थ्य लाभ प्राप्त करने वालों को निम्नलिखित मानदंडों के अनुसार शामिल किया गया था: (1) सकारात्मक आरटी-पीसीआर सार्स-सीओवी -2 आरएनए नासॉफिरिन्जियल स्वैब; (2) सकारात्मक सार्स-सीओवी -2 आईजीजी परीक्षण। रोगियों में से किसी को भी अस्पताल में भर्ती होने की आवश्यकता नहीं थी और रोग की गंभीरता हल्की थी, रोगियों में निम्न लक्षणों में से कम से कम एक लक्षण था: थकान, कमजोरी, मांसपेशियों में दर्द, खांसी और बुखार। SARS-CoV -2 लक्षणों का कोई इतिहास नहीं रखने वाले स्वस्थ व्यक्ति, संक्रमित रोगी के साथ कोई घरेलू संपर्क नहीं, और जो एंटी-स्पाइक SARS-CoV -2 के प्रति नकारात्मक थे, उन्हें एक नकारात्मक नियंत्रण समूह के रूप में शामिल किया गया था। प्रतिरक्षा आकलन के लिए रक्त के नमूने सभी प्रतिभागियों (N=84) से प्राप्त किए गए, जिनमें 68 स्वास्थ्य लाभार्थी और 16 स्वस्थ व्यक्ति शामिल थे। एमबीसी की प्रतिक्रिया सभी 68 दीक्षांत समारोह में निर्धारित की गई थी, और 41 का मूल्यांकन पहली बार एमटीसी के लिए किया गया था। अनुदैर्ध्य अध्ययन के लिए, 3 महीने बाद (दूसरी मुलाकात) में कम एंटी-स्पाइक आईजीजी परीक्षण की विशेषता वाले 24 रोगियों का फिर से एमबीसी और एमटीसी परीक्षणों द्वारा विश्लेषण किया गया।

2.2। नैतिक वक्तव्य

इस अध्ययन को शीबा इंस्टीट्यूशनल रिव्यू बोर्ड (एसएमसी -750320) द्वारा अनुमोदित किया गया था और सभी प्रतिभागियों से सूचित सहमति प्राप्त की गई थी।

2.3। SARS-CoV -2 एंटी-स्पाइक S1 IgG एंटीबॉडी का पता लगाना

SARS-CoV -2 रक्त के नमूनों में IgG एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए इम्यूनोएसे को एक पुनः संयोजक S1 पर आधारित Euroimmun (EI, Lubeck, Germany) एंटी-SARS-CoV -2 IgG क्वांटिटेटिव एलिसा किट का उपयोग करके प्रदर्शित किया गया था। SARS-CoV -2 स्पाइक प्रोटीन की सबयूनिट। चपलता स्वचालित एलिसा विश्लेषक (DYNEX Technologies Inc., Chantilly, VA, USA) का उपयोग करके निर्माता के निर्देशों द्वारा परीक्षण किए गए थे। ऑप्टिकल घनत्व (ओडी) 45 0 एनएम पर पाया गया था, और किट में शामिल अंशशोधक के पढ़ने के लिए प्रत्येक नमूने के पढ़ने के अनुपात की गणना प्रत्येक नमूने के लिए की गई थी (नीचे आईजीजी स्कोर के रूप में संदर्भित) ). 1.0 से अधिक IgG स्कोर मान सकारात्मक माने गए।

2.4। COVID -19 मेमोरी बी सेल और मेमोरी टी सेल प्रतिक्रियाएं

सार्स-सीओवी -2-विशिष्ट एमबीसी का विश्लेषण रिसेप्टर-बाइंडिंग डोमेन (आरबीडी)-विशिष्ट एमबीसी-व्युत्पन्न आईजीजी-स्रावित कोशिकाओं का पता लगाने के लिए फ्लोरोस्पॉट परख का उपयोग करके पॉलीक्लोनल बी सेल उत्तेजना के बाद किया गया था। निर्माता के निर्देशों के अनुसार मानव IgG SARS-CoV -2 रिसेप्टर बाइंडिंग डोमेन (RBD)-विशिष्ट ELISpot PLUS किट (ALP किट; Mabtech, स्वीडन) का उपयोग किया गया था। संक्षेप में, परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं (PBMC) को R848 (1 ug/ml) और इंटरल्यूकिन 2 (IL2) (10 एनजी) के मिश्रण के साथ उत्तेजना के बाद एंटी-आईजीजी फ्लोरोस्पॉट प्लेट पर (250 000 कोशिकाएं/कुएं) इनक्यूबेट किया गया था। / एमएल) (बी-सेल स्टिम पैक; माबटेक, स्वीडन)। Mabtech IRIS रीडर का उपयोग करके स्पॉट-फॉर्मिंग यूनिट्स (SFU) में SARS-CoV-2-विशिष्ट IgG-स्रावित B कोशिकाओं की संख्या मापी गई। परिणामों को अउत्तेजित कोशिकाओं की पृष्ठभूमि को घटाने के बाद प्रति 250 000 वरीयता प्राप्त कोशिकाओं में SFU की संख्या के रूप में व्यक्त किया गया था। सकारात्मक कटऑफ मूल्य स्वस्थ विषयों (एचएस) में 90 प्रतिशत विश्वास अंतराल से ऊपर निर्धारित किया गया था।

इंटरफेरॉन-गामा (IFN-)-, IL2-, और IFN- plus IL2-स्रावित MTC का मानव IFN- और IL2 SARS-CoV-2 FluoroSpot PLUS किट के अनुसार पता लगाया गया निर्माता का प्रोटोकॉल (मैबटेक एबी, स्वीडन)। मोनोक्लोनल एंटी-IFN- /IL2 के साथ प्री-कोटेड प्लेट्स को RPMI -1640 माध्यम में रातोंरात ऊष्मायन किया गया जिसमें 1 {{2 0}} प्रतिशत भ्रूण बछड़ा सीरम (FCS) SARSCoV {{16} के साथ पूरक था। } पेप्टाइड पूल या गैर-विशिष्ट एंटी-सीडी3 उत्तेजना (0.1 यूजी/एमएल) एंटी-सीडी28 (0.1 यूजी/एमएल) और 300 000 कोशिकाओं की उपस्थिति में एक ह्यूमिडिफाइड इनक्यूबेटर (5 प्रतिशत सीओ2, 37 डिग्री) में प्रति कुएं ).

SARS-CoV-2 S1 स्कैनिंग पूल में मानव SARS-CoV-2 वायरस (#3629-1; Mabtech AB) से 166 पेप्टाइड शामिल हैं। पेप्टाइड्स 15-मर्स हैं जो 11 अमीनो एसिड के साथ ओवरलैप करते हैं, एस प्रोटीन के एस1 डोमेन को कवर करते हैं (अमीनो एसिड 13–685)। S1 पूल की आपूर्ति S1_1 (1–83) और S1_2 (84–166) पेप्टाइड्स के रूप में की जाती है। SARS-CoV-2 SNMO-परिभाषित पेप्टाइड पूल में 47 सिंथेटिक पेप्टाइड्स होते हैं जो मानव ल्यूकोसाइट एंटीजन (HLA) से जुड़ते हैं, जो S, N, M, ORF3a, और ORF7a प्रोटीन (#3622-1; Mabtech से प्राप्त होते हैं एबी) (पेंग एट अल।, 2020)। SARS-CoV-2 S2_N परिभाषित पेप्टाइड पूल में 41 सिंथेटिक पेप्टाइड्स शामिल हैं जो SARS-CoV -2 वायरस (#{{33}) के S और N प्रोटीन से प्राप्त HLA के लिए बाध्यकारी हैं। }, माबटेक एबी) (अहमद एट अल।, 2020)।

ELISpot और FluoroSpot परख के परिणामों का मूल्यांकन IRIS रीडर का उपयोग करके किया गया और IRIS सॉफ़्टवेयर संस्करण 1.1.9 (Mabtech AB) का उपयोग करके विश्लेषण किया गया। पेप्टाइड पूल-विशिष्ट प्रतिक्रियाओं को IFN - -, IL 2-, या IFN- plus IL 2- MTC का उत्पादन करके निर्धारित किया गया था। कम से कम 5 के माप। पृष्ठभूमि SFU को माप से घटाया गया और SFU/250 000 कोशिकाओं के रूप में व्यक्त किया गया। समग्र IFN- -, IL2-, या IFN-प्लस IL2- का निर्धारण करने के लिए MTC प्रतिक्रिया सकारात्मक या नकारात्मक के रूप में, IFN-, IL2 के लिए कम से कम एक सकारात्मक प्रतिक्रिया वाले विषय , या IFN- प्लस IL2 से कम से कम एक SARS-CoV -2 पेप्टाइड पूल को ध्यान में रखा गया। विश्लेषित साइटोकिन्स में से किसी एक के बारे में निरंतर समग्र MTC प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए, S1, S2_N, और SNMO पेप्टाइड्स के जवाब में विशिष्ट साइटोकिन-स्रावित MTC के सकारात्मक SFU को पहले वर्णित के रूप में संक्षेपित किया गया था (शेरिना एट अल। , 2021)। स्वस्थ नियंत्रण में विशिष्ट एमटीसी की संख्या के 90 प्रतिशत विश्वास अंतराल से ऊपर सकारात्मक कटऑफ मूल्य निर्धारित किया गया था।

2.5। सांख्यिकीय विश्लेषण

सभी निरंतर विशेषताओं को औसत ± मानक विचलन (एसडी) के रूप में वर्णित किया गया है; गैर-निरंतर विशेषताओं को 25-75 प्रतिशत इंटरक्वेर्टाइल रेंज (IQR) के साथ माध्यिका के रूप में वर्णित किया गया है। मान-व्हिटनी यू-टेस्ट, फिशर के सटीक परीक्षण और ची-स्क्वायर परीक्षण द्वारा अंतर निर्धारित किए गए थे; स्पीयरमैन (रैंक) टेस्ट द्वारा सहसंबंध का आकलन किया गया था। एक पी-मूल्य<0.05 indicated significance.

3। परिणाम

अड़सठ एंटी-स्पाइक-आईजीजी पॉजिटिव कोविड-19 स्वस्थ हो गए, 25 महिलाएं, और 43 पुरुष, औसत आयु 39.3 ± 13.2 वर्ष, 4.1 महीने (आईक्यूआर) की पहली मुलाकात में बीमारी की शुरुआत (टीएफओ) से औसत समय के साथ 2.6– 6.1 महीने), अध्ययन में शामिल थे। MBC विश्लेषण पहले से 1-महीने के TFO पर था और 7 महीने तक बना रहा (P< 0.005; Figure 3B–D). Notably, while anti-spike IgG levels, MBC, and MTC were significantly higher than in the HS, no statistical differences were observed in convalescents at the different time points.

एंटी-आरबीडी एमबीसी और एंटी-स्पाइक आईजीजी लेवल (आर=0.39, पी=0.0009) और आईएल 2-स्रावित एमटीसी (आर {) की संख्या के बीच महत्वपूर्ण सहसंबंध देखे गए। {7}}.45, P=0.004), लेकिन IFN- - स्रावित MTC (r=0.3, P=0.05) के साथ कम (चित्र 4A –C), जबकि IFN - - और IL 2- MTC को स्रावित करने के साथ-साथ सहसंबद्ध थे (r=0.48, P=0.001; चित्र 4D)। IgG और MTC के बीच और TFO के साथ MBC और MTC के बीच कोई महत्वपूर्ण संबंध नहीं देखा गया।

3.2। सार्स-सीओवी -2-विशिष्ट टी सेल मेमोरी प्रदर्शनों की सूची

यह निर्धारित करने के लिए कि क्या MTC को COVID {{0}} में उत्पन्न किया गया था और बनाए रखा गया था, IFN - -, IL 2-, और IFN प्लस IL 2- की संख्या में MTC स्रावित हुआ SARS-CoV2 S1, S2_N, और SNMO पेप्टाइड पूल के साथ उत्तेजना की प्रतिक्रिया को एक साथ मापा गया। एसएनएमओ पूल (82.9 प्रतिशत, 57.5 प्रतिशत, और 72.3 प्रतिशत , क्रमशः) S1 की तुलना में (56.6 प्रतिशत , 34.1 प्रतिशत , और 43.0 प्रतिशत , क्रमशः; P <0.0001) और S2_N (31.7 प्रतिशत , 7.3 प्रतिशत और 17.5 प्रतिशत, क्रमशः पी <0.0001) (अनुपूरक सामग्री तालिका एस 1)। इसके अलावा, SNMO की प्रतिक्रिया में MTC का उत्पादन करने वाले कम से कम IFN - - का SFU स्तर S1 या S 2_N (अनुपूरक सामग्री तालिका S2) की प्रतिक्रिया की तुलना में काफी अधिक था।

जैसा कि SFU संख्या द्वारा प्रदर्शित किया गया है, SNMO पूल के साथ उत्तेजना IFN {{0}}, IL 2-, और IFN- प्लस IL {{3} की पहले की तत्काल और अधिक लगातार प्रतिक्रिया की विशेषता थी। }S1 और S2_N पेप्टाइड्स के साथ उत्तेजना की तुलना में MTC स्रावित करना। एसएनएमओ, आईएफएन - -, आईएल 2-, और आईएफएन-प्लस आईएल 2- के साथ उत्तेजना के बाद एमटीसी का स्राव टीएफओ के 1 महीने के बाद पहले से ही काफी बढ़ गया है और अभी भी 7 महीने तक बढ़ा हुआ है। अनुवर्ती (पी <0.05) (चित्रा 5)। S1 पेप्टाइड्स की प्रतिक्रिया में देरी हुई और साइटोकिन-उत्पादक MTC (सप्लीमेंट्री मैटेरियल फिगर S2) में 5 और 7 महीने में HS से काफी अलग थी। S 2_N पेप्टाइड पूल की प्रतिक्रिया मामूली थी और IFN - - में MTC को 5 महीने के TFO (सप्लीमेंट्री मैटेरियल फिगर S3) में स्रावित करते हुए देखा गया। IFN - -, IL 2-, और IFN- प्लस IL 2- के स्तरों में कोई सांख्यिकीय अंतर नहीं देखा गया, जो विभिन्न समय बिंदुओं पर स्वस्थ होने पर MTC स्रावित करता है।

3.3। अनुदैर्ध्य विश्लेषण

जैसा कि पहले प्रदर्शित किया गया था, SARS-CoV-2 एंटी-स्पाइक IgG का स्तर 50 प्रतिशत कम हुआ लेकिन फिर भी 9 महीने तक बना रहा (Achiron et al., 2021)। अनुदैर्ध्य मेमोरी सेल प्रतिक्रियाओं को बेहतर ढंग से समझने के लिए, एक ही रोगी से आईजीजी, एमबीसी और एमटीसी की दो बार की यात्राओं की गतिशीलता का विश्लेषण किया गया। विशेष रूप से, सेलुलर मेमोरी को 24 दीक्षांत समारोह में चित्रित किया गया था जो पहली यात्रा में एंटी-स्पाइक आईजीजी-पॉजिटिव थे और दूसरी यात्रा में आईजीजी स्तर में गिरावट आई थी। पहली बार बिंदु पर सकारात्मक आईजीजी वाले 24 रोगियों में से छह (औसत 1.22, आईक्यूआर 1.14-1.58) दूसरी बार बिंदु पर आईजीजी-नकारात्मक में बदल गए (मध्य 0 .66, आईक्यूआर 0। 40–0.96; पी=0.008) (चित्र 6ए)। इस उपसमूह के सभी रोगियों को MBC की संख्या में वृद्धि या कोई परिवर्तन नहीं होने की विशेषता थी: माध्य 23.5 (IQR 0-28.9) और माध्यिका 28.1 (IQR 19.0-56.3), क्रमशः (पी=0.002) (चित्र 6बी)। हालांकि, समग्र IFN-स्रावित, IL2-स्रावित, और IFN-प्लस IL2-स्रावित MTC दोनों समय बिंदुओं पर स्थिर रहा: माध्यिका 17.7 (IQR 3.22–45.2) और 5.85 (IQR 0–41.9) ), औसत 9.5 (IQR 0-24.4) और 7.7 (IQR 0-34.0), और माध्यिका 20.9 (IQR 1.65-34.6) और 8.95 (IQR 4.75-18.5), क्रमशः (P > 0.05) (पूरक सामग्री चित्र S4A-D) ).

In contrast, the 18 patients with decreased IgG yet remaining IgG-positive (median 3.91 (IQR 2.81–7.73) and 2.53 (IQR 1.89–3.88); P = 0.01) (Figure 6C) displayed no significant changes in MBC (median 30.5 (IQR 1.73–56.3) and 12.1 (IQR 0–60.8); P = 0.2) (Figure 6D) and in the overall IFN-γ -secreting, IL2-secreting, and IFN-γ +IL2-secreting MTC (median 15.0 (IQR 0.68–38.6) and 25.7 (IQR 0.9–38.5), median 4.8 (IQR 0–22.4) and 8.45 (IQR 0–30.5), and median 5.4 (IQR 0–23.9) and 19.9 (IQR 0–42.5), respectively) (P >0.05) (अनुपूरक सामग्री चित्र S4E-H)।

4। चर्चा

पुन: संक्रमण की रोकथाम में सेलुलर मेमोरी घटकों को शामिल किया गया है जो स्मृति बी और टी कोशिकाओं (क्रोमर एट अल।, 2021; फोर्टल, 2021; मैज़ोनी एट अल।, 2021; टर्नर एट अल।, 2021; यूफिंग) पैदा करने वाले एंटीजन मुठभेड़ों का तेजी से जवाब देने के लिए प्रोग्राम किया गया है। एट अल।, 2020)। इस अध्ययन ने 7 तक COVID -19 से बरामद मरीजों में मजबूत SARSCoV -2 एंटी-स्पाइक एंटीबॉडी और SARS-CoV -2 पेप्टाइड्स के लिए विशिष्ट टिकाऊ मेमोरी बी और टी सेल प्रतिक्रियाओं की एक साथ उपस्थिति का प्रदर्शन किया। महीने संक्रमण के बाद। यह प्रदर्शित किया गया कि शुरुआत के कुछ ही समय बाद एमबीसी और एमटीसी के स्तर में वृद्धि हुई। विशेष रूप से, एमटीसी की प्रतिक्रिया आरबीडी-विशिष्ट एमबीसी से पहले थी, जैसा कि पहले बताया गया है (डैन एट अल।, 2021)। MTC प्रतिक्रिया को IFN - -, IL 2-, और IFN- प्लस IL 2- द्वारा S1, S 2_N, और SNMO पेप्टाइड पूल के जवाब में MTC स्रावित करने की विशेषता थी।

हास्य और अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की देखी गई गतिशीलता ने पिछले प्रकाशनों की पुष्टि की, जिसमें बताया गया था कि एंटी-स्पाइक आईजीजी निदान के 6 महीने बाद तक स्थिर रहा (डैन एट अल।, 2021; गैब्लर एट अल।, 2021; हार्टले एट अल।, 2020; शेरिना)। एट अल।, 2021)। स्पाइक के खिलाफ देखी गई ह्यूमरल प्रतिक्रिया और आरबीडी के खिलाफ रिकॉल मेमोरी बी सेल प्रतिक्रिया, SARS-CoV -2 संक्रमण से लंबे समय तक चलने वाली सुरक्षा का समर्थन करती है। इसके अलावा, अध्ययन के परिणाम बताते हैं कि जब SARS-CoV -2 एंटीबॉडी स्तर सेरोनिगेटिव में बदल जाता है, तब भी MBC और MTC की उपस्थिति पुन: संक्रमण के मामले में संभावित रूप से बचाव प्रदान करती है। कई अध्ययनों ने लगभग 1 प्रतिशत पुनर्संक्रमण का वर्णन किया है (लीदी एट अल।, 2021; मुर्चू एट अल।, 2021)। पुन: संक्रमण के मामलों की इस कम आवृत्ति को अनुकूली प्रतिरक्षा घटकों, यानी मेमोरी बी और टी कोशिकाओं की उपस्थिति और भागीदारी द्वारा समझाया जा सकता है। इस धारणा को एक हालिया अध्ययन (मैकमैहन एट अल।, 2021) द्वारा और मजबूत किया गया है, जिसमें दिखाया गया है कि रीसस मकाक में सार्स-सीओवी -2 के खिलाफ सुरक्षा के लिए अपेक्षाकृत कम एंटीबॉडी टाइटर्स पर्याप्त हैं और सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं सुरक्षा में योगदान दे सकती हैं। यदि एंटीबॉडी प्रतिक्रियाएं उपइष्टतम हैं।

IFN - -स्रावित प्रभावकारक MTC के निष्कर्ष प्रवेश के रोगज़नक़ स्थलों पर एक तत्काल, लेकिन निरंतर सुरक्षा का सुझाव नहीं देते हैं, जबकि IL2 या IFN- प्लस IL2 स्राव की विशेषता वाले केंद्रीय MTC माध्यमिक में प्रसार द्वारा एक निरंतर लंबे समय तक चलने वाली प्रतिक्रिया का सुझाव देते हैं। लिम्फोइड अंग और नए प्रभावकों की आपूर्ति का उत्पादन (फोर्थल, 2021)।

IL2 विशिष्ट टी कोशिकाओं के सेलुलर विस्तार और प्रभावकार और मेमोरी टी कोशिकाओं (अब्बास एट अल।, 2018) की पीढ़ी के लिए एक वृद्धि कारक है, जैसा कि पहले तीव्र और स्वास्थ्य लाभ दोनों से पीबीएमसी के इन विट्रो उत्तेजना में पाया गया है {{ 2}} मरीज़ (ब्रौन एट अल।, 2020; ग्रिफोनी एट अल।, 2020; पेंग एट अल।, 2020; सेकेन एट अल।, 2020; थिमे एट अल।, 2020; वीस्कॉफ़ एट अल।, 2020)। इंट्रासेल्युलर धुंधला होने से पता चला है कि सीडी 8 प्लस टी सेल और सीडी 4 प्लस टी सेल दोनों इस साइटोकाइन के स्रोत हैं, लेकिन सीडी 4 प्लस टी सेल मुख्य उत्पादक प्रतीत होते हैं (ब्रौन एट अल।, 2020; ग्रिफ़ोनी एट अल।, 2020; पेंग एट अल। , 2020; सेकेन एट अल।, 2020)। IFN- और IL2 के उत्पादन के आधार पर, SARS-CoV-2-विशिष्ट CD4 प्लस T कोशिकाओं को तीन अलग-अलग आबादी में विभाजित किया जा सकता है: एकल IFN- -स्रावित कोशिकाएं, दोहरा IFN-प्लस IL{{23} }स्रावित कोशिकाएं, और एकल IL2-स्रावित कोशिकाएं (यांग एट अल., 2006)। यह वर्गीकरण आगे MTC की विषमता को प्रदर्शित करता है और यह भी इंगित करता है कि मेमोरी CD4 प्लस T कोशिकाओं की अलग-अलग उप-जनसंख्या में लघु/प्रभावकार IFN - -स्रावी और लंबे समय तक रहने वाले/केंद्रीय IL2-स्राव और विकसित करने की अलग-अलग क्षमता होती है। IFN- plus IL2-MTC का स्राव (यांग और अन्य, 2006)।

जैसा कि अपेक्षित था, अध्ययन के परिणामों ने सभी सार्स-सीओवी -2 पेप्टाइड पूलों के लिए एक टी-सेल प्रतिक्रिया प्रदर्शित की। विशेष रूप से स्वस्थ होने वालों में, एसएनएमओ पेप्टाइड पूल ने सबसे मजबूत मेमोरी टी सेल प्रतिक्रियाएं प्राप्त कीं, जो संभवतः स्पाइक (एस), न्यूक्लियोप्रोटीन (एन), झिल्ली प्रोटीन (एम), और ओआरएफ (ओआरएफ) सहित पूरे वायरल कण घटकों के संपर्क को दर्शाती हैं। 3}}a और ORF-7a (पेंग और अन्य, 2020)। हालांकि यह स्पष्ट प्रतीत होता है कि S1 या S2 की तुलना में SNMO पूल उच्च प्रतिक्रियाएँ पैदा करेगा, पिछले अध्ययनों से पता चला है कि S1 पूल में स्वस्थ नियंत्रणों की तुलना में COVID -19-ठीक हुए व्यक्तियों में उल्लेखनीय रूप से उच्च प्रतिक्रियाशीलता है और इसके लिए SFU गुना परिवर्तन S1 पूल SNMO (लॉन्ग एट अल।, 2021) की तुलना में अधिक है। इसके अलावा, काफी अधिक पॉली-फंक्शनल टी कोशिकाएं स्वास्थ्य लाभ में एन पेप्टाइड पूल की तुलना में एस1 पेप्टाइड पूल का जवाब देती हैं (सैंडबर्ग एट अल।, 2021)। इसलिए S1 पूल के ऊपर एक उच्च SNMO SFU प्रतिक्रिया की खोज आसानी से सीधी नहीं है।

फिर भी, हम उम्मीद करते हैं कि टीकाकरण वाले विषयों (mRNA- आधारित वैक्सीन; फाइजर BNT162b2 के साथ) की प्रतिक्रिया स्पाइक प्रोटीन पेप्टाइड पूल के लिए प्रमुख रूप से प्राप्त होगी।

हाल ही में विकसित एंटी-सार्स-सीओवी -2 टीकों और टीकाकरण वाले व्यक्तियों (बेट्स एट अल।, 2021; सरिओल एट अल।, 2021) और स्वास्थ्य लाभ रोगियों (गेब्लर एट अल।, 2021) में एंटीबॉडी टाइटर्स में गिरावट को देखते हुए। सेरोनिगेटिव स्थिति में स्विच करने वाले रोगियों में एमबीसी और एमटीसी स्तरों का पालन करना दिलचस्प था। परिसंचारी एंटीबॉडी में गिरावट वाले रोगियों में महत्वपूर्ण प्रश्न यह है कि क्या सार्स-सीओवी -2 संक्रमण के खिलाफ प्रतिरक्षात्मक प्रतिरोध के अन्य तत्व अभी भी मौजूद हैं।

अध्ययन के परिणामों से पता चला है कि ऐसे रोगियों में मजबूत टी और बी सेल प्रतिक्रियाएं न केवल बनी रहीं बल्कि बढ़ी भी हैं, पिछले अध्ययन के परिणामों के समान जिसमें गायब हो रहे सार्स-सीओवी -2-विशिष्ट आईजीजी एक टिकाऊ मेमोरी टी सेल से जुड़ा था आईजीजी-पॉजिटिव (श्वार्जकोफ एट अल।, 2021) बने रहने वाले दीक्षांत समारोह की तुलना में प्रतिक्रिया। वर्तमान अध्ययन के परिणाम मिडिल ईस्ट रेस्पिरेटरी सिंड्रोम कोरोनावायरस (MERS-CoV) और सीवियर एक्यूट रेस्पिरेटरी सिंड्रोम कोरोनावायरस 1 (SARS-CoV-1) संक्रमणों से संबंधित पिछले प्रकाशनों के अनुरूप हैं, जिसमें एक मेमोरी टी सेल प्रतिक्रिया तब देखी गई थी जब एंटीबॉडी प्रतिक्रिया कम हो गई (अबयासिंगम एट अल।, 2021; अलशुकैरी एट अल।, 2016; चन्नप्पनवर एट अल।, 2014; झाओ एट अल।, 2017)।

इसी तरह, सैंडबर्ग एट अल। (2021) और शेरिना एट अल। (2020) (सैंडबर्ग एट अल।, 2021; शेरिना एट अल।, 2021) ने रोगियों में मजबूत एमबीसी और एमटीसी प्रतिक्रियाएं दिखाईं, जिनमें सार्स-सीओवी -2 शुरू होने के 8-9 महीने बाद एंटीबॉडी स्तर धीरे-धीरे कम हो गया (डैन एट अल।) ., 2021)। इससे पता चलता है कि हालांकि एंटीबॉडी वेन के टाइटर्स, सेलुलर मेमोरी घटकों द्वारा भविष्य के संक्रमणों के लिए एक प्रभावी प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया विकसित की जा सकती है। SARS-CoV -2 की उच्च उत्परिवर्तन दर और संभावित प्रतिरक्षा पलायन को ध्यान में रखते हुए, और यह कि विभिन्न स्पाइक म्यूटेशन SARS-CoV -2 प्रतिजनता (हार्वे एट अल।, 2021) को ख़राब करते हैं, यह एक खुला प्रश्न है कि क्या मूल मेमोरी सेल SARS-CoV -2 वेरिएंट के साथ क्रॉस-रिएक्ट करेंगे।

हालांकि मौजूदा साक्ष्य कि स्पाइक अमीनो एसिड परिवर्तन एंटीबॉडी न्यूट्रलाइजेशन (हार्वे एट अल।, 2021) को प्रभावित करते हैं और कुछ वेरिएंट SARS-CoV -2 संक्रमण या BNT162b2 टीकाकरण, विशिष्ट CD4 प्लस T सेल सक्रियण से प्रेरित हास्य प्रतिरक्षा से आंशिक रूप से बच सकते हैं। कम से कम B.1.1.7 और B.1.351 वेरिएंट (Geers et al., 2021) में म्यूटेशन से प्रभावित नहीं होता है। टार्क एट अल द्वारा SARSCoV -2 वेरिएंट का विश्लेषण किया गया। 2021 में कुल SARS-CoV-2 T सेल प्रतिक्रियाशीलता को महत्वपूर्ण रूप से बाधित नहीं किया; हालाँकि, प्रतिक्रियाओं में देखी गई कमी SARS-CoV -2 विकास (टर्क एट अल।, 2021) के संदर्भ में टी सेल प्रतिक्रियाशीलता की सक्रिय निगरानी के महत्व को उजागर करती है।

अंत में, (1) सार्स-सीओवी -2 में 7 महीने तक हल्के लक्षणों वाले स्वास्थ्य लाभ करने वाले रोगियों में टिकाऊ प्रतिरक्षा विनोदी और अनुकूली प्रतिक्रियाएं देखी गईं, जो स्वास्थ्य लाभ करने वाले व्यक्तियों में हास्य और अनुकूली प्रतिरक्षा की लंबी उम्र का सुझाव देती हैं। (2) ठीक हो चुके रोगियों में, S1, S2_N, और SNMO पेप्टाइड पूलों के लिए T सेल अनुक्रियाओं को IFN- - और IL2- स्रावित करने वाली T कोशिकाओं और पॉली-फंक्शनल को प्रस्तुत करके चित्रित किया गया था। IFN- प्लस IL2-T कोशिकाओं का स्राव। (3) ठीक हो चुके रोगियों में, एक कमजोर एंटी-स्पाइक आईजीजी टिटर के साथ मजबूत एमबीसी और आईएफएन - - एमटीसी का उत्पादन किया जा सकता है, जो एक संभावित लंबे समय तक चलने वाली स्मृति प्रतिक्रिया और पुन: संक्रमण के खिलाफ बचाव का सुझाव देता है।

घोषणाओं

अनुदान

लेखकों को सार्वजनिक, वाणिज्यिक, या गैर-लाभकारी क्षेत्रों में किसी भी फंडिंग एजेंसियों से कोई विशिष्ट अनुदान प्राप्त नहीं हुआ।

नैतिक स्वीकृति

लेखक घोषणा करते हैं कि उन्होंने लेख में शामिल रोगियों से सूचित सहमति प्राप्त की है और इस रिपोर्ट में ऐसी कोई व्यक्तिगत जानकारी नहीं है जिससे उनकी पहचान हो सके।

एक ऐसी स्थिति जिसमें सरकारी अधिकारी का निर्णय उसकी व्यक्तिगत रूचि से प्रभावित हो

रिपोर्ट करने के लिए लेखकों के पास हितों का कोई टकराव नहीं है।

पूरक सामग्री

इस लेख से जुड़ी पूरक सामग्री ऑनलाइन संस्करण में doi:10.1016/j.ijid.2021.12.309 पर देखी जा सकती है।

For more information:1950477648nn@gmail.com