सिस्टैंच टुबुलोसा से पॉलीसेकेराइड के पानी के अर्क के पृथक्करण और प्रतिरक्षण क्षमता पर अध्ययन

अधिक जानकारी के लिए:ali.ma@wecistanche.com

ऐलादान · मैमैतियाली1, ली यांग1, याओ जून1,युआन जी2

1. फार्मेसी स्कूल, झिंजियांग मेडिकल यूनिवर्सिटी, उरुमकी 830011, चीन; 2. हौबो का कोलाज, झिंजियांग मेडिकल यूनिवर्सिटी, झिंजियांग कलमायी 834000, चीन）

सार उद्देश्य:के पानी निकालने को अलग करने के लिएसिस्टैंच ट्यूबुलोसा से पॉलीसेकेराइड्स, और इन विट्रो में उनकी प्रतिरक्षा क्षमता की जांच करने के लिए। तरीके: एबी {{{3 0}}}} मैक्रोपोरस सोखना राल का उपयोग सी। ट्यूबुलोसा पॉलीसेकेराइड को रंगहीन करने के लिए किया गया था। विरंजन प्रक्रिया को ऑर्थोगोनल परीक्षण द्वारा अनुकूलित किया गया था जिसमें प्रतिधारण दर और पॉलीसेकेराइड की विघटन दर व्यापक स्कोर के रूप में थी, और सोखना दर, रंग हटाने का समय, कारकों के रूप में नमूना एकाग्रता का उपयोग किया गया था। सत्यापन परीक्षण आयोजित किए गए थे। DEAE-650M आयन एक्सचेंज कॉलम का उपयोग विवर्णित C. ट्यूबुलोसा पॉलीसेकेराइड के पानी के अर्क को अलग करने के लिए किया गया था। CCK-8 परख का उपयोग पॉलीसेकेराइड -6 के विभिन्न सांद्रता के प्रभावों का पता लगाने के लिए किया गया था। 25-100 ug/mL- चूहों के मैक्रोफेज RAW264.7 के प्रसार दर पर अलगाव से पहले और बाद में। NO,IL-6 और TNF- के विमोचन पर पॉलीसेकेराइड-12.5,25,50 ug/mL） के निम्न, मध्यम और उच्च सांद्रता के प्रभावों का पता लगाने के लिए ग्रिज़ विधि और एलिसा परख को अपनाया गया था। LPS- प्रेरित RAW264.7 कोशिकाओं में। परिणाम: एबी -8 मैक्रोपोरस सोखना राल की इष्टतम विघटन प्रक्रिया में, सोखना प्रवाह दर 1.2 बीवी / एच थी, रंग हटाने का समय 9 घंटे था, और नमूना एकाग्रता 25 मिलीग्राम / एमएल थी। सत्यापन परीक्षणों के 3 बार के व्यापक स्कोर क्रमशः 63.43％, 63.29％ और 63.34％ थे, जिनका औसत 63.35％（RSD＝0.11％ ,n＝3） था। एक तटस्थ पॉलीसेकेराइड-सीटीजेड-और 5 एसिड पॉलीसेकेराइड-सीटी1,सीटी2,सीटी3,सीटी4,सीटी5-को सी। सिस्टैंच के पॉलीसेकेराइड से अलग किया गया था, सामग्री 299.2,168 थी।0,123.2,121.6,54.4, 11.2 मिलीग्राम / जी। नियंत्रण समूह की तुलना में, 6.25-100 ug/mL CTZ - 6.25 μg/mL）, CT2, CT4, CT5 और 6.25 μg/mL CTC को छोड़कर (पृथक्करण से पहले पॉलीसेकेराइड) प्रसार दर में काफी वृद्धि कर सकता है RAW264.7 कोशिकाओं की (P＜{{80}.05）, जबकि 6.25-100 ug/mL CT1,CT3 और 50 ug/mL CTC RAW264 की प्रसार दर को कम कर सकती है। 7 सेल (पी 0.05) । एलपीएस समूह की तुलना में, सीटीसी, सीटी 2, सीटी 3 और सीटी 5, सीटीजेड कम एकाग्रता समूह (पी ＜0.05) के निम्न, मध्यम और उच्च एकाग्रता समूहों में NO की रिहाई में काफी कमी आई थी, जबकि सीटी 1 के उच्च एकाग्रता समूहों में काफी वृद्धि हुई थी। और CT4 पी＜0.05）। आईएल -6 की रिहाई (सीटी 1 उच्च एकाग्रता समूह और सीटी 5 कम एकाग्रता समूह को छोड़कर) और टीएनएफ- - सीटी 1 मध्यम एकाग्रता समूह को छोड़कर-निम्न, मध्यम और उच्च एकाग्रता समूहों में काफी कम हो गई थी। पी ＜0.05 . निष्कर्ष: मैक्रोपोरस सोखना राल की अनुकूलित रंग हटाने की तकनीक अध्ययन में स्थिर और व्यवहार्य है। एक तटस्थ पॉलीसेकेराइड और 5 अम्लीय पॉलीसेकेराइड को सी। ट्यूबुलोसा पॉलीसेकेराइड के पानी के अर्क से अलग किया जा सकता है, जिनमें से सीटी 2 पॉलीसेकेराइड में मजबूत विरोधी भड़काऊ क्षमता है।

कीवर्ड:सिस्टैंच ट्यूबुलोसा पॉलीसेकेराइड; रंग हटाना; पृथक्करण; प्रतिरक्षण क्षमता

सिस्टैंच ट्यूबुलोसाएक सूखा, मांसल तना होता है, जिसके पत्तों के आकार की पत्तियाँ होती हैंसिस्टैंच ट्यूबुलोसा (शेंक) वाइटलिडानेसी परिवार से। आधुनिक अध्ययनों से पता चला है कि सिस्टैंच ट्यूबुला में फेनिथाइल अल्कोहल ग्लाइकोसाइड्स, इरिडॉइड ग्लाइकोसाइड्स, लिग्नन्स, पॉलीसेकेराइड्स, एल्कलॉइड्स और अन्य जैविक रूप से सक्रिय पदार्थ होते हैं, जिनमें कामोद्दीपक, रेचक, यकृत-सुरक्षात्मक और एंटी-एजिंग गुण होते हैं। , थकान-रोधी बढ़ी हुई प्रतिरक्षा, और नॉट्रोपिक प्रभाव [1-4], किडनी यांग की कमी, सार और रक्त की कमी, नपुंसकता और बांझपन, कमर और घुटनों की कमजोरी, मांसपेशियों की कमजोरी के नैदानिक ​​उपचार के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। हड्डियाँ, सूखी आंतें और कब्ज [5]।

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का पानी निकालनेसिस्टैंच ट्यूबुलोसा पॉलीसेकेराइडभूरा-पीला है। हमारे शोध समूह के पिछले प्रयोग में पाया गया कि इसके अलावासिस्टैंच ट्यूबुलोसा बहुशर्करा, पानी के अर्क में पानी में घुलनशील वर्णक और प्रोटीन जैसे गैर-लक्षित घटक भी होते हैं। यह पॉलीसेकेराइड के पृथक्करण और शुद्धिकरण में योगदान देता है। जैविक गतिविधि अनुसंधान ने बड़ी मुश्किलें पैदा की हैं। पारंपरिक कार्बनिक विलायक विरंजन उपचार कच्चे अर्क में लक्ष्य घटक की रासायनिक संरचना को नष्ट कर देगा, और व्यक्ति की औषधीय गतिविधि को कम करेगा, और मानव शरीर के लिए हानिकारक अवयवों की शुरूआत [6]। मैक्रोपोरस सोखना राल चीनी दवा के अर्क में पॉलीसेकेराइड के रंग बदलने के लिए एक सामान्य सामग्री है। यह स्थिर भौतिक और रासायनिक गुणों के साथ एक लागत प्रभावी बहुलक सोखना सामग्री है। इसे इसके चयनात्मक सोखना और वर्णक घटकों के लिए प्रदर्शन के प्रदर्शन द्वारा लक्षित किया जा सकता है। पारंपरिक चीनी दवा के अर्क में वर्णक को हटाने के लिए, इसके अलावा, इसे अचार और क्षार धोने से पुनर्जीवित किया जा सकता है, इसलिए इसका व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है [7]। इस अध्ययन का उद्देश्य सिस्टैंच ट्यूबुला पॉलीसेकेराइड के पानी के अर्क को रंगहीन करने के लिए मैक्रोपोरस सोखना राल का उपयोग करना है, और रंग बदलने की स्थिति को अनुकूलित करने के लिए ऑर्थोगोनल प्रयोग का उपयोग करना है; अर्क के रंग बदलने के बाद, पॉलीसेकेराइड द्वारा किए गए समूह की विभिन्न प्रकृति के अनुसार, इसका उपयोग करने की योजना बनाई गई है आयन-एक्सचेंज कॉलम क्रोमैटोग्राफी की विधि पॉलीसेकेराइड में तटस्थ और अम्लीय पॉलीसेकेराइड घटकों को अलग करती है।सिस्टैंच ट्यूबुलोसा.

अध्ययनों से पता चला है किसिस्टैंच प्लांटपॉलीसेकेराइड में इम्युनोमोडायलेटरी प्रभाव होते हैं और प्राकृतिक इम्युनोमोड्यूलेटर होते हैं जो पूरक प्रणाली और प्रतिरक्षा कोशिकाओं जैसे टी / बी लिम्फोसाइट्स, मैक्रोफेज, प्राकृतिक हत्यारे (एनके) कोशिकाओं को सक्रिय कर सकते हैं, और साइटोकिन्स की एक किस्म की रिहाई को बढ़ावा दे सकते हैं, और एंटीबॉडी के उत्पादन को बढ़ावा दे सकते हैं। , आदि [8-11]। लिपोपॉलीसेकेराइड (LPS) मैक्रोफेज के इंफ्लेमेटरी सिग्नल पाथवे को सक्रिय कर सकता है, नाइट्रिक ऑक्साइड (NO), और प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स जैसे इंटरल्यूकिन 6 (IL -6) और ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर-अल्फा (TNF-) को प्रेरित कर सकता है। संश्लेषण और रिलीज, जिससे शरीर में भड़काऊ प्रतिक्रियाओं की एक श्रृंखला शुरू हो जाती है [12]। यह अध्ययन एक LPS- प्रेरित माउस RAW264.7 मैक्रोफेज सूजन मॉडल स्थापित करने का इरादा रखता है, जो मैक्रोफेज प्रसार, भड़काऊ कारक स्राव, और NO उत्पादन पर सिस्टैंच ट्यूबुला पॉलीसेकेराइड के प्रभाव से शुरू होता है, और शरीर की प्रतिरक्षा गतिविधि पर इसके प्रभाव का प्रारंभिक मूल्यांकन करता है। इसका उद्देश्य के विरोधी भड़काऊ सक्रिय पदार्थ आधार के गहन अध्ययन के लिए सैद्धांतिक आधार प्रदान करना हैसिस्टैंच ट्यूबुलोसापॉलीसेकेराइड और इसके पॉलीसेकेराइड संसाधनों का विकास।

प्रारंभिक अध्ययनों में पाया गया है कि जब सिस्टांच सिस्टैंच में पॉलीसेकेराइड को पानी के साथ निकाला जाता है, तो अधिक पानी में घुलनशील पदार्थ एक साथ घुल जाएंगे, जो कि शुद्धता को प्रभावित करता है।सिस्टैंचे सिस्टैंच पॉलीसेकेराइड्स. इसलिए, उनका आगे पृथक्करण और शुद्धिकरण पॉलीसेकेराइड सामग्री आधार और जैविक गतिविधि के अध्ययन की नींव रख सकता है। मैक्रोपोरस सोखना राल विधि आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली रंग हटाने की विधि है [17-19]। चूंकि यह अभी भी वर्णक संरचना के बारे में स्पष्ट नहीं हैसिस्टैंच ट्यूबुलोसा, इसलिए अनुसंधान समूह ने विभिन्न ध्रुवों के मैक्रोपोरस सोखना रेजिन से सबसे उपयुक्त मैक्रोपोरस सोखना राल एबी -8 को स्क्रीन करने के लिए स्थिर सोखना प्रयोगों का उपयोग किया। सिस्टैंच डेजर्टिकोला के पॉलीसेकेराइड में अच्छी अवधारण क्षमता होती है। एक बेहतर रंग हटाने के प्रभाव को प्राप्त करने के लिए, यह शोध पिछले शोध पर आधारित है और रंग बदलने की प्रक्रिया को निर्धारित करने के लिए ऑर्थोगोनल प्रयोगों का उपयोग किया गया है (धोने के लिए desorption प्रवाह दर, रंग हटाने का समय, और नमूना द्रव्यमान एकाग्रता) को अनुकूलित किया गया है। नतीजतन, सिस्टेन्च ट्यूबुलोसा के पॉलीसेकेराइड के लिए इष्टतम रंग हटाने की विधि 1.2 बीवी / एच की एक रेफरेंस प्रवाह दर, 9 घंटे का एक रंग हटाने का समय और 25 मिलीग्राम / एमएल का एक नमूना द्रव्यमान एकाग्रता था। सत्यापन प्रयोग के परिणाम बताते हैं कि विरंजन विधि संभव है।

प्राकृतिक पॉलीसेकेराइड की शुद्धता और प्रकार इसकी गतिविधि को प्रभावित करने वाले महत्वपूर्ण कारक हैं। इसलिए, पॉलीसेकेराइड के अलगाव और शुद्धिकरण के तरीकों पर प्रासंगिक शोध अभी भी प्राकृतिक सक्रिय पॉलीसेकेराइड के शोध कार्य का केंद्र बिंदु है। पॉलीसेकेराइड को अलग करने के लिए आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली विधियों में वर्षा, जेल क्रोमैटोग्राफी, आयन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी, मैक्रोपोरस रेजिन कॉलम क्रोमैटोग्राफी और अल्ट्राफिल्ट्रेशन [20] शामिल हैं। मोनोसेकेराइड की विभिन्न रचनाओं के कारण, पॉलीसेकेराइड में अलग-अलग चार्ज गुण होते हैं। उन्हें तटस्थ पॉलीसेकेराइड और एसिड पॉलीसेकेराइड में विभाजित किया जा सकता है। तटस्थ पॉलीसेकेराइड दो या दो से अधिक विभिन्न चीनी-आधारित मोनोमर्स से बने पॉलिमर होते हैं जिनमें कार्बनिक अम्ल नहीं होते हैं। अम्लीय पॉलीसेकेराइड दो से अधिक चीनी-आधारित मोनोमर्स को छोड़कर, संरचना और संरचना के संदर्भ में तटस्थ पॉलीसेकेराइड की तुलना में अधिक जटिल हैं। इसमें यूरोनिक एसिड मोनो बॉडी [21] भी शामिल है। अनियन एक्सचेंज कॉलम क्रोमैटोग्राफी अम्लीय पॉलीसेकेराइड से तटस्थ पॉलीसेकेराइड को अलग करने के लिए पॉलीसेकेराइड के प्रभारी अंतर का उपयोग करता है [22]। इस कारण से, इस अध्ययन ने सिस्टैंच ट्यूबुला पॉलीसेकेराइड को अलग करने के लिए एक डीईएई -650 एम आयन-एक्सचेंज कॉलम क्रोमैटोग्राफी कॉलम का इस्तेमाल किया, और कुल 1 तटस्थ पॉलीसेकेराइड और 5 एसिड पॉलीसेकेराइड को अलग किया गया। मैक्रोफेज इम्युनोकोम्पेटेंट कोशिकाएं हैं जो रोगजनक सूक्ष्मजीवों को घेरकर और मारकर प्रतिरक्षा को नियंत्रित कर सकती हैं। अध्ययनों से पता चला है कि जब मानव शरीर पैथोलॉजिकल या यांत्रिक क्षति से प्रेरित होता है, तो एक दवा हस्तक्षेप मैक्रोफेज को LPS द्वारा प्रेरित मैक्रोफेज की फैगोसाइटिक क्षमता को बढ़ाने के लिए सक्रिय कर सकता है, जिससे NO और सूजन कोशिकाओं की एक श्रृंखला जैसे IL{{ का उत्पादन बाधित होता है। 9}} और TNF- कारक स्राव, जिससे मेजबान को रोगजनकों से बचाया जा सके [23]। यह अंत करने के लिए, इस अध्ययन ने RAW264.7 कोशिकाओं के प्रसार दर पर विभिन्न सिस्टैंच ट्यूबुलोसा पॉलीसेकेराइड के प्रभावों का परीक्षण किया, साथ ही एलपीएस-प्रेरित मैक्रोफेज पर NO, IL-6, और TNF- जारी करने के प्रभावों का परीक्षण किया। परिणामस्वरूप, 12.5, 25, और 50 ug/mL की द्रव्यमान सांद्रता सीमा के भीतर, इसने न केवल RAW264.7 कोशिकाओं के प्रसार को बढ़ावा दिया, बल्कि RAW264.7 कोशिकाओं के प्रसार को भी महत्वपूर्ण रूप से बाधित किया।

सिस्टैंच ट्यूबुलोसा का पॉलीसेकेराइडRAW264.7 कोशिकाओं में LPS द्वारा NO, IL-6 और TNF- को छोड़ने के लिए प्रेरित CT2 हैं। प्रासंगिक अध्ययनों से पता चला है कि पॉलीसेकेराइड की मोनोसैकराइड संरचना और आणविक भार इसके प्रभाव को प्रभावित करेगाइम्यूनोमॉड्यूलेटरीगतिविधि। मोनोसेकेराइड जैसे गैलेक्टोज, अरेबिनोज, मैनोज और ग्लूकोज पॉलीसेकेराइड [24] की प्रतिरक्षा गतिविधि के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध हैं। बड़े आणविक भार वाले पॉलीसेकेराइड में उच्च कई अत्यधिक दोहराव वाले समुद्री मील हो सकते हैं संरचना, प्लाज्मा झिल्ली सतह रिसेप्टर्स को बहु-प्रत्यक्ष रूप से और विशेष रूप से क्रॉस-कनेक्ट कर सकते हैंइम्यूनोमॉड्यूलेटरी को बढ़ाएंप्रभाव [25]। इसलिए, इस अध्ययन में अम्लीय पॉलीसेकेराइड CT2 की मोनोसैकराइड संरचना में विशेष मोनोसेकेराइड या कई मोनोसेकेराइड शामिल हो सकते हैं जो सकारात्मक रूप से प्रतिरक्षा गतिविधि से संबंधित हैं, और आणविक भार तटस्थ पॉलीसेकेराइड और अन्य अम्लीय पॉलीसेकेराइड से बड़ा हो सकता है, लेकिन पुष्टि करने के लिए और अधिक शोध की आवश्यकता है . संक्षेप में, इस शोध में अनुकूलित मैक्रोपोरस सोखना राल रंग हटाने की प्रक्रिया स्थिर और व्यवहार्य है; 1 न्यूट्रल पॉलीसेकेराइड और 5 एसिड पॉलीसेकेराइड को सिस्टैंच सिस्टैंच सिस्टैंच के पानी के अर्क से अलग किया जा सकता है, जिसके बीच एसिड पॉलीसेकेराइड CT2 स्ट्रॉन्गर की प्रतिरक्षात्मक गतिविधि होती है। यह अध्ययन सिस्टैंच ट्यूबुला पॉलीसेकेराइड के विकास और उपयोग के लिए प्रायोगिक नींव रख सकता है।