अमूर्त

त्वचा के हाइपरपिग्मेंटेशन विकार, जैसे मेलास्मा, झाइयां और पोस्ट-इंफ्लेमेटरी हाइपरपिग्मेंटेशन (पीआईएच), अक्सर पराबैंगनी-बी (यूवीबी) विकिरण, त्वचीय चोट और स्थानीय त्वचा की सूजन से उत्पन्न होते हैं। अतिरिक्त मेलेनिन जमाव त्वचा की बनावट को ख़राब करता है और रोगी के मनोवैज्ञानिक स्वास्थ्य पर नकारात्मक प्रभाव डालता है। हाइड्रोक्विनोन जैसे पारंपरिक डिपिगमेंटिंग एजेंट मुख्य रूप से एकल-मोड कार्रवाई के साथ टायरोसिनेस को लक्षित करते हैं और अच्छी तरह से प्रलेखित सुरक्षा जोखिम उठाते हैं। बहु-लक्ष्य प्राकृतिक वनस्पति मिश्रण आधुनिक कार्यात्मक कॉस्मेटिक फॉर्मूलेशन के लिए आशाजनक विकल्प के रूप में उभरे हैं।

फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स (पीएचजी) से अलग किए गए हस्ताक्षरित बायोएक्टिव घटक हैंसिस्टैंच डेजर्टिकोला, शुष्क रेगिस्तानी क्षेत्रों की एक प्रसिद्ध औषधीय जड़ी बूटी। ग्लैब्रिडिन (ग्लै), एक प्रीनिलेटेड आइसोफ्लेवन से निकाला गयामुलेठी, व्यापक रूप से एक उच्च क्षमता वाली त्वचा को चमकदार बनाने वाले प्राकृतिक यौगिक के रूप में पहचाना जाता है। इस शोध ने ग्लैब्रिडिन के साथ संयुक्त रूप से पीएचजी के सहक्रियात्मक एंटी-हाइपरपिग्मेंटेशन प्रदर्शन की व्यवस्थित रूप से जांच की। प्रारंभिक द्रव्यमान-अनुपात स्क्रीनिंग के लिए टायरोसिनेस निषेध, डीपीपीएच और एबीटीएस मुक्त-रेडिकल-स्कैवेंजिंग परीक्षणों सहित इन-विट्रो जैव रासायनिक परख लागू की गई थी। आगे तीन सेलुलर मॉडल बनाए गए: यूवीबी-विकिरणित बी16एफ10 माउस मेलेनोमा सेल पिग्मेंटेशन मॉडल; लिपोपॉलीसेकेराइड (LPS)-उत्तेजित HaCaT केराटिनोसाइट सूजन मॉडल; AAPH-प्रेरित HaCaT ऑक्सीडेटिव-तनाव मॉडल। इंट्रासेल्युलर टायरोसिनेस गतिविधि, मेलेनिन सामग्री, प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन रिलीज (IL-6, TNF-), सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज (SOD) और कैटालेज (CAT) एंजाइम गतिविधि को कवर करने वाले संकेतक निर्धारित किए गए थे। दो वनस्पति अर्क के बीच सहक्रियात्मक अंतःक्रिया को मात्रात्मक रूप से पहचानने के लिए संयोजन-सूचकांक (सीआई) गणना लागू की गई थी।

परीक्षण किए गए अनुपातों में, द्रव्यमान अनुपात m(PhGs):m(Gla)=1:1, 5:1 और 10:1 ने प्रमुख टायरोसिनेस-दमनकारी और एंटीऑक्सीडेंट तालमेल प्रदर्शित किया। पीएच 6.8 फॉस्फेट-बफ़र्ड सलाइन (पीबीएस) में 0.4 ग्राम/लीटर की कुल सांद्रता पर, टायरोसिनेस निषेध दर 94.37% (1:1), 92.93% (5:1), और 88.06% (10:1) तक पहुंच गई। संगत डीपीपीएच रैडिकल-स्केवेंजिंग प्रतिशत 89.44%, 88.72%, 88.10% थे; एबीटीएस⁺ कटियन रेडिकल-स्कैवेंजिंग क्षमताएं 100.13%, 100.01%, 99.87% हासिल की गईं। 25 ug/mL की कार्यशील सांद्रता पर, सभी तीन यौगिक फॉर्मूलेशन ने B16F10 और HaCaT सेल लाइनों के प्रति कोई महत्वपूर्ण साइटोटोक्सिसिटी प्रदर्शित नहीं की। 1:1 मिश्रित समूह ने बेहतर व्यापक प्रभावकारिता उत्पन्न की: अवशिष्ट इंट्रासेल्युलर टायरोसिनेस गतिविधि 23.80% तक गिर गई, सापेक्ष मेलेनिन सामग्री 30.90% तक कम हो गई। इसके अलावा, PhGs/Gla (1:1) ने IL‑6 और TNF‑ स्राव पर सबसे मजबूत दमन लगाया और SOD और CAT एंटीऑक्सीडेंट एंजाइम गतिविधि को अधिकतम रूप से बहाल किया। प्रायोगिक परिणामों ने पुष्टि की है कि ग्लैब्रिडिन के साथ मिलकर पीएचजी ट्रिपल मार्गों के माध्यम से सहक्रियात्मक एंटी-हाइपरपिग्मेंटेशन परिणाम प्राप्त करते हैं: मेलेनिन जैवसंश्लेषण को रोकना, त्वचा की सूजन को कम करना और ऑक्सीडेटिव तनाव का प्रतिकार करना। 1:1 द्रव्यमान अनुपात इष्टतम एकीकृत जैविक प्रदर्शन प्रदान करता है। यह अध्ययन इसके अनुप्रयोग का समर्थन करने वाले प्रायोगिक साक्ष्य प्रदान करता हैCistancheस्वच्छ-सुंदरता में फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड-ग्लैब्रिडिन मिश्रित सामग्री, पौधे-व्युत्पन्न त्वचा देखभाल कच्चे-सामग्री विकास।

कीवर्ड: सिस्टैंच डेजर्टिकोलाफेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स; ग्लैब्रिडिन; सहक्रियात्मक प्रभाव; एंटी-हाइपरपिग्मेंटेशन; एंटीऑक्सीडेंट; सूजनरोधी; कॉस्मेटिक वनस्पति कच्चे माल

1 परिचय

एपिडर्मल परतों में अत्यधिक मेलेनिन संचय के परिणामस्वरूप मेलास्मा, एफेलाइड्स और पोस्ट-इंफ्लेमेटरी हाइपरपिग्मेंटेशन (पीआईएच) सहित विषम त्वचा रंजकता फेनोटाइप होते हैं। Google के लिए... कई बाहरी और आंतरिक ड्राइविंग कारक पैथोलॉजिकल मेलेनिन अतिउत्पादन में योगदान करते हैं। यूवीबी पराबैंगनी विकिरण प्राथमिक पर्यावरणीय ट्रिगर का प्रतिनिधित्व करता है; त्वचा का आघात और पुरानी स्थानीय सूजन प्रतिक्रियाएं वर्णक विकारों को और बढ़ा देती हैं। यह अच्छी तरह से स्थापित है कि एपिडर्मल केराटिनोसाइट्स और मेलानोसाइट्स के बीच क्रॉस-टॉक वर्णक प्रगति पर हावी है। बाहरी उत्तेजना पर, सक्रिय केराटिनोसाइट्स प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) और प्रो-इंफ्लेमेटरी मध्यस्थों को मुक्त करते हैं। ये सिग्नलिंग अणु फैलते हैं और आसन्न मेलानोसाइट्स पर कार्य करते हैं, टायरोसिनेस उत्प्रेरक गतिविधि को विनियमित करते हैं, मेलेनिन संश्लेषण को तेज करते हैं और केराटिनोसाइट्स की ओर मेलानोसोम परिवहन को बढ़ावा देते हैं, अंततः त्वचा की सतह पर दृश्यमान रंगद्रव्य घावों का उत्पादन करते हैं। तदनुसार, हाइपरपिग्मेंटेशन के लिए प्रभावी हस्तक्षेप केवल टायरोसिनेस निषेध पर ध्यान केंद्रित नहीं कर सकता है। मल्टी-मोडल चिकित्सीय रणनीतियों में एक साथ मेलानोजेनेसिस निषेध, विरोधी भड़काऊ हस्तक्षेप और ऑक्सीडेटिव-तनाव तटस्थता को शामिल किया जाना चाहिए।

हाइड्रोक्विनोन जैसे पारंपरिक सिंथेटिक त्वचा-प्रकाश सक्रिय पदार्थ मुख्य रूप से प्रत्यक्ष टायरोसिनेस दमन द्वारा डीपिगमेंटिंग प्रभावकारिता प्रदान करते हैं। फिर भी, एकल-लक्ष्य तंत्र व्यावहारिक प्रदर्शन को सीमित करता है, और दीर्घकालिक सामयिक हाइड्रोक्विनोन अनुप्रयोग त्वचा में जलन, संपर्क जिल्द की सूजन और संभावित सुरक्षा खतरों को ट्रिगर कर सकता है, जिससे कॉस्मेटिक-ग्रेड उपयोग के दायरे में बाधा आ सकती है। प्राकृतिक पौधों से प्राप्त जैव-अवयव अपने हल्के प्रोफाइल और बहु-पथ औषधीय कार्यों के लिए कॉस्मेटिक फॉर्मूलेशनर्स और उपभोक्ताओं की बढ़ती रुचि को आकर्षित करते हैं। विभिन्न वनस्पति अर्क के यौगिक मिश्रण सहक्रियात्मक जैविक प्रभाव पैदा करने में सक्षम हैं, जो प्रभावी खुराक आवश्यकताओं को कम करते हुए समग्र प्रभावकारिता को बढ़ाते हैं, जो एंटी-पिग्मेंटेशन कॉस्मेटिक-कच्चे-सामग्री अनुसंधान के लिए नई तकनीकी दिशाएं खोलता है। Google

सिस्टैंच डेजर्टिकोला, जिसे आमतौर पर "डेजर्ट जिनसेंग" नाम दिया गया है, पारंपरिक चीनी चिकित्सा में एक क्लासिक टॉनिक जड़ी बूटी है। आधुनिक फाइटोकेमिकल जांच से पता चलता है कि फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स (पीएचजी) इसके प्रमुख औषधीय रूप से सक्रिय अंश का गठन करते हैं, जिसमें प्रतिनिधि यौगिकों के रूप में इचिनाकोसाइड और एक्टियोसाइड शामिल हैं। प्रकाशित फार्माकोलॉजिकल शोध से पता चलता है कि पीएचजी में मजबूत एंटीऑक्सीडेंट क्षमता, एंटी-इंफ्लेमेटरी बायोएक्टिविटी और मध्यम टायरोसिनेस-निरोधात्मक क्षमता होती है, जो त्वचा संबंधी त्वचा देखभाल सामग्री में संभावित अनुप्रयोग संभावनाओं को दर्शाता है। ग्लैब्रिडिन एक विशिष्ट आइसोफ्लेवोनॉइड यौगिक है जिसे पृथक किया गया हैमुलेठीजड़, जो कॉस्मेटिक उद्योग में "सफेद सोने" के रूप में प्रसिद्ध है। यह संभावित रूप से मेलानोजेनेसिस को दबाता है और साथ ही त्वचीय सूजन संबंधी कैस्केड को नियंत्रित करता है। पारंपरिक-चिकित्सा सैद्धांतिक दृष्टिकोण से,Cistancheगुर्दे के सार को पोषण देता है और यांग को टोन करता है, जबकि मुलेठी की जड़ें प्लीहा को टोन करती हैं और गर्मी-विष को साफ़ करती हैं। संयुक्त उपयोग हर्बल त्वचाविज्ञान उपचारों के यौगिक अनुकूलता सिद्धांतों के अनुरूप है।

यंत्रवत परिकल्पना मानती है कि PhGs-ग्लैब्रिडिन संयोजन बहु-लक्ष्य और बहु-पथ मोड के माध्यम से त्वचा रंजकता को नियंत्रित कर सकता है: मेलेनिन पीढ़ी की उत्पत्ति को कम करने के लिए संयुक्त रूप से टायरोसिनेस उत्प्रेरक फ़ंक्शन को रोकना; शमन प्रतिक्रियाशील-ऑक्सीजन-प्रजाति का निर्माण; प्रो-इंफ्लेमेटरी-फैक्टर ओवर-रिलीज़ को रोकना, ताकि मेलानोसाइट सक्रियण के लिए आरओएस- और साइटोकिन-मध्यस्थता सिग्नल प्रवर्धन को बाधित किया जा सके। आज तक, कुछ शोध पत्रों ने इस बाइनरी मिश्रण के लिए व्यवस्थित रूप से सहक्रियात्मक एंटी-हाइपरपिग्मेंटेशन मूल्यांकन की सूचना दी है।

यह पेपर बीच के संयोजनात्मक जैविक प्रभावों का पता लगाने के लिए तैयार किया गया हैCistancheफेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स और ग्लैब्रिडिन। बायोकेमिकल इन-विट्रो एंजाइम-निषेध और रेडिकल-स्कैवेंजिंग स्क्रीनिंग प्रयोग पहले लागू किए गए थे। बहुआयामी प्रभावकारिता मूल्यांकन के लिए वर्णक जमाव, त्वचा की सूजन और ऑक्सीडेटिव क्षति की नकल करने वाले तीन प्रतिनिधि सेल मॉडल का निर्माण किया गया था। संयोजन-सूचकांक पद्धति को तालमेल या प्रतिपक्षी अंतःक्रियाओं को मापने के लिए लागू किया गया था। हमारा लक्ष्य इष्टतम यौगिक द्रव्यमान अनुपात निर्धारित करना, ट्रिपल-मोड कार्यात्मक तंत्र को स्पष्ट करना, और प्राकृतिक सहक्रियात्मक त्वचा-चमकदार कॉस्मेटिक कच्चे माल के विकास के लिए प्रयोगात्मक डेटा समर्थन प्रस्तुत करना है।

2। सामग्री और विधि

2.1 अभिकर्मक, सेल स्ट्रेन और प्रयोगशाला उपकरण

B16F10 माउस मेलेनोमा सेल लाइन (STCC20013G-1) को सायरबियो कंपनी लिमिटेड से खरीदा गया था। अमर मानव एपिडर्मल केराटिनोसाइट HaCaT (iCell-h066) को iCell Bioscience Inc. से प्राप्त किया गया था।Cistancheफेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स (PhGs) और ग्लैब्रिडिन (Gla) की व्यावसायिक आपूर्ति शानक्सी तियानक्सिंगजियान बायोकेमिकल टेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड द्वारा की गई थी। मशरूम टायरोसिनेज, आर्बुटिन, एल-टायरोसिन, एल-डोपा, डीपीपीएच, एबीटीएस डायमोनियम नमक, एल-एस्कॉर्बिक एसिड (विटामिन सी), एएपीएच, एलपीएस, ट्राइटन X-100, DMSO और अन्य विश्लेषणात्मक-ग्रेड रासायनिक अभिकर्मकों को मुख्यधारा के जैव रासायनिक अभिकर्मक विक्रेताओं से प्राप्त किया गया था। सेल-कल्चर उपभोग्य सामग्रियों में उच्च-ग्लूकोज डीएमईएम माध्यम, भ्रूण गोजातीय सीरम, पेनिसिलिन-स्ट्रेप्टोमाइसिन मिश्रित समाधान शामिल हैं। मानव IL‑6, TNF‑, CAT और कुल‑SOD डिटेक्शन किट को लक्षित करने वाली एलिसा परख किट संबंधित बायोटेक निर्माताओं से खरीदी गई थीं।

प्रमुख प्रयोगशाला उपकरणों में मल्टीस्कैन एफसी पूर्ण-तरंगदैर्ध्य माइक्रोप्लेट रीडर, हेरासेल 371 सीओ₂ इनक्यूबेटर (थर्मो फिशर) शामिल थे; KQ‑200VDB अल्ट्रासोनिक क्लीनर; स्थिर तापमान जल स्नान; DHG‑9246A ब्लास्ट-सुखाने वाला ओवन; KN4006B UVB पराबैंगनी विकिरण उपकरण 8 mW/cm² के आउटपुट विकिरण के साथ।

2.2 नमूना समाधान तैयार करना

पीएचजी और ग्लैब्रिडिन के स्टॉक समाधान पीएच 6.8 पीबीएस बफर या 50% (वी/वी) इथेनॉल-पानी विलायक में तैयार किए गए थे, जो क्रमिक रूप से कार्यशील सांद्रता में पतला थे: 0.001 ग्राम/एल, 0.005 ग्राम/एल, 0.025 ग्राम/एल, 0.1 ग्राम/एल, 0.4 ग्राम/एल, 0.8 ग्राम/एल, 1.2 ग्राम/एल, 1.6 जी/एल, 2.0 जी/एल. विभिन्न द्रव्यमान अनुपात m(PhGs):m(Gla)=40:1, 20:1, 10:1, 5:1, 1:1, 1:5, 1:10, 1:20, 1:40 के साथ 0.4 g/L की निश्चित कुल द्रव्यमान सांद्रता पर नौ मिश्रित समूहों को कॉन्फ़िगर किया गया था, जिन्हें PhGs/Gla (40:1) से PhGs/Gla (1:40) के रूप में नामित किया गया था।

सेलुलर-प्रयोग परीक्षण के लिए, कार्यशील-सांद्रण समाधानों की श्रृंखला तैयार करने के लिए पाउडर के नमूनों को सीरम-मुक्त डीएमईएम माध्यम में भंग कर दिया गया था।

2.3 जैव रासायनिक इन-विट्रो परीक्षण

2.3.1 टायरोसिनेस निषेध परख

50 μL नमूना समाधान, 50 μL पीएच 6.8 पीबीएस और 50 μL 1 ग्राम/एलएल-टायरोसिन सब्सट्रेट समाधान क्रमिक रूप से 96-वेल माइक्रोप्लेट पर प्रत्येक कुएं में जोड़ा गया था। प्री-इन्क्यूबेशन 10 मिनट के लिए 37 डिग्री पानी के स्नान के तहत आगे बढ़ा। इसके बाद, 50 μL 0.4 ग्राम/लीटर मशरूम टायरोसिनेस समाधान (200 यू/एमएल) पूरक किया गया, और ऊष्मायन 10 मिनट के लिए 37 डिग्री पर जारी रहा। आर्बुटिन ने सकारात्मक-नियंत्रण पदार्थ के रूप में कार्य किया, रिक्त नियंत्रण ने पीएच 6.8 पीबीएस बफर अपनाया। अवशोषण मान को माइक्रोप्लेट रीडर पर 490 एनएम तरंग दैर्ध्य के तहत मापा गया था। टायरोसिनेस-निषेध-दर गणना सूत्र:

टायरोसिनेस निषेध दर (%)={1 - [(ए_रिएक्शन - ए_रिएक्शन-नियंत्रण) / (ए_ब्लैंक - ए_ब्लैंक-कंट्रोल)]} × 100%

कहाँ: A_प्रतिक्रिया: नमूना, सब्सट्रेट, पीबीएस और टायरोसिनेस युक्त अवशोषण; A_प्रतिक्रिया-नियंत्रण: एंजाइम के बिना नमूना, सब्सट्रेट और पीबीएस का अवशोषण; A_blank: सब्सट्रेट, पीबीएस और टायरोसिनेस का अवशोषण; A_रिक्त-नियंत्रण: केवल सब्सट्रेट और पीबीएस बफर के लिए अवशोषण।

2.3.2 डीपीपीएच फ्री‑रेडिकल‑स्कैवेंजिंग निर्धारण

0.2 mmol/L DPPH कार्यशील तरल तैयार करने के लिए DPPH पाउडर को निर्जल इथेनॉल में घोला गया। एकाग्रता-ग्रेडिएंट स्टॉक समाधान बनाने के लिए पीएचजी, ग्लैब्रिडिन और विटामिन सी संदर्भ पदार्थ को 50% इथेनॉल-पानी विलायक में भंग कर दिया गया था। नौ द्रव्यमान अनुपात वाले बाइनरी-मिश्रण नमूने समान रूप से मिश्रित किए गए थे। प्रत्येक कुएं से 100 μL नमूना तरल और 100 μL DPPH कार्यशील समाधान प्राप्त हुआ। पूरी तरह मिलाने के बाद, माइक्रोप्लेट को 30 मिनट के लिए परिवेश के तापमान पर प्रकाश से दूर रखा गया। अवशोषण रीडिंग λ = 517 एनएम पर दर्ज की गई थी। विटामिन सी ने सकारात्मक नियंत्रण के रूप में कार्य किया, प्रत्येक प्रयोगात्मक समूह को 3 जैविक प्रतिकृति के लिए दोहराया गया। डीपीपीएच-स्कैवेंजिंग-दर फॉर्मूला:

डीपीपीएच सफाई दर (%)={1 - [(ए₁ - ए₃) / ए₂]} × 100 %

A₁: नमूने का अवशोषण + DPPH कार्यशील द्रव; ए₂: 50% इथेनॉल + डीपीपीएच कार्यशील तरल पदार्थ का अवशोषण; ए₃: 50% इथेनॉल विलायक के साथ मिश्रित नमूना समाधान का अवशोषण।

2.3.3 एबीटीएस⁺ कटियन रेडिकल‑स्केवेंजिंग परख

7.4 mmol/L ABTS स्टॉक समाधान और 2.6 mmol/L पोटेशियम परसल्फेट घोल को समान रूप से मिलाया गया, स्थिर ABTS⁺ कार्यशील अभिकर्मक का उत्पादन करने के लिए 12 घंटे के लिए अंधेरे वातावरण में रखा गया। नमूना समाधानों को खंड 2.3.2. 40 μL नमूना समाधान में वर्णित प्रोटोकॉल का पालन करते हुए कॉन्फ़िगर किया गया था और 160 μL ABTS⁺ कार्यशील तरल को माइक्रोप्लेट कुओं में पाइप किया गया था। कमरे के तापमान पर 6 मिनट तक प्रकाश-परिरक्षित ऊष्मायन के बाद, अवशोषण 734 एनएम मापा गया। एबीटीएस⁺ रेडिकल-स्कैवेंजिंग-रेट फॉर्मूला:

ABTS⁺ सफाई दर (%)={1 - [(A₁ - A₃) / A₂]} × 100 %

A₁: नमूना समाधान का अवशोषण प्लस ABTS⁺ कार्यशील समाधान; A₂: ABTS⁺ कार्यशील अभिकर्मक के साथ मिश्रित विआयनीकृत पानी का अवशोषण; A₃: शुद्ध विआयनीकृत-जल विलायक के साथ मिश्रित नमूना समाधान के लिए अवशोषण मूल्य।

2.4 सेल-कल्चर प्रक्रियाएँ

B16F10 मेलेनोमा कोशिकाओं और HaCaT केराटिनोसाइट्स को 10% भ्रूण-गोजातीय सीरम और 1% पेनिसिलिन-स्ट्रेप्टोमाइसिन के साथ पूरक उच्च-ग्लूकोज DMEM माध्यम में संवर्धित किया गया था। इनक्यूबेटर पैरामीटर: 37 डिग्री, 5% वॉल्यूम अंश CO₂, सापेक्ष आर्द्रता 70%। उल्टे ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप के तहत देखे गए सेलुलर-विकास घनत्व के अनुसार सेल पासिंग और मध्यम रिफ्रेशमेंट का प्रदर्शन किया गया। लॉगरिदमिक-विकास चरण में कोशिकाओं को 96-वेल कल्चर प्लेटों पर बाद के बीजारोपण के लिए एकत्र किया गया था।

2.5 तीन सेलुलर कार्यात्मक मॉडल की स्थापना

2.5.1 यूवीबी‑प्रेरित बी16एफ10 पिग्मेंटेशन मॉडल

संबंधित नमूना माध्यम के साथ 1 घंटे पूर्व-उपचार के बाद, कोशिका-परत की सतह को पीबीएस बफर के साथ कवर किया गया था। UVB विकिरण की तीव्रता 8 mW/cm², विकिरण दूरी 3 सेमी, विकिरण अवधि 110 s निर्धारित की गई थी। सामान्य समूह को यूवीबी विकिरण हस्तक्षेप के बिना समान माध्यम प्राप्त हुआ। मॉडल नियंत्रण समूह ने नमूना अनुपूरण के बिना समान खुराक यूवीबी एक्सपोज़र के बाद पीबीएस प्रीट्रीटमेंट प्राप्त किया।

2.5.2 एलपीएस-मध्यस्थता HaCaT सूजन-सक्रियण मॉडल

HaCaT कोशिकाओं को 24 घंटे के लिए परीक्षण-नमूना DMEM माध्यम से पूर्व-ऊष्मायन किया गया था। बाद में, 20 यूजी/एमएल की अंतिम सांद्रता तक पहुंचने के लिए लिपोपॉलीसेकेराइड एलपीएस समाधान को पूरक किया गया, और सह-संस्कृति अगले 24 घंटे तक चली। मॉडल-समूह कोशिकाओं को नमूना पूर्व-उपचार के बिना एलपीएस द्वारा चुनौती दी गई थी। सामान्य समूह ने सामान्य पूर्ण-मध्यम खेती को बनाए रखा।

2.5.3 AAPH‑ट्रिगर HaCaT ऑक्सीडेटिव‑तनाव मॉडल

कोशिकाओं को 24 घंटे का नमूना पूर्व-ऊष्मायन प्राप्त हुआ। AAPH अभिकर्मक को संस्कृति माध्यम में जोड़ा गया, अंतिम सांद्रता 25 mmol/L, 24‑h ऊष्मायन जारी रखा। मॉडल-नियंत्रण समूह को नमूना हस्तक्षेप के बिना AAPH द्वारा उत्तेजित किया गया था। सामान्य-नियंत्रण समूह नियमित मध्यम स्थिति में विकसित हुआ।

सभी सेलुलर-मॉडल समूहों में तीन तकनीकी प्रतिकृति कुएं शामिल थे।

2.6 साइटोटोक्सिसिटी परीक्षण (सीसीके‑8 विधि)

सेल सस्पेंशन को घनत्व 1 × 10⁴ सेल/एमएल पर समायोजित किया गया और 96‑वेल माइक्रोप्लेट्स में टीका लगाया गया। कोशिका पालन के बाद, ग्रेडिएंट-एकाग्रता नमूना माध्यम प्रशासित किया गया, और ऊष्मायन 24 घंटे, 48 घंटे, 72 घंटे तक जारी रहा। CCK‑8 का पता लगाने वाले अभिकर्मक को ताजा DMEM माध्यम (मात्रा अंश 10%) के साथ मिश्रित करके पुराने माध्यम को बदल दिया गया, ऊष्मायन 60 मिनट तक जारी रहा। माइक्रोप्लेट रीडर ने 450 एनएम तरंग दैर्ध्य पर अवशोषण मापा। सापेक्ष सेल-व्यवहार्यता प्रतिशत के लिए गणना सूत्र:

सेल व्यवहार्यता (%)=[(A_sample - A_blank) / (A_0 - A_blank)] × 100 %

A_नमूना: अच्छी तरह से युक्त कोशिकाओं, CCK‑8 अभिकर्मक और नमूना माध्यम का अवशोषण; A_blank: संस्कृति माध्यम के लिए अवशोषण प्लस CCK‑8 बीजयुक्त कोशिकाओं के बिना; A_0: कोशिकाओं का अवशोषण और CCK‑8 अभिकर्मक को रिक्त माध्यम से संवर्धित किया गया (कोई परीक्षण नमूने नहीं)।

2.7 इंट्रासेल्युलर टायरोसिनेस-गतिविधि मात्रा का ठहराव

48 घंटे के मॉडल-स्थापना प्रसंस्करण के बाद, सेल सतह पर तैरनेवाला को त्याग दिया गया। सेल मोनोलेयर को पीएच 7.4 पीबीएस के साथ दो बार धोया गया था . 50 μL 1% ट्राइटन X‑100 लाइसिस समाधान प्रति कुएं में जोड़ा गया था। माइक्रोप्लेट को 30 मिनट के लिए -80 डिग्री रेफ्रिजरेटर पर जमाया गया, फिर पूर्ण सेल-झिल्ली टूटने के लिए कमरे के तापमान की स्थिति में पिघलाया गया। 37 डिग्री पर प्री-वार्मिंग उपचार 5 मिनट तक चला। L-DOPA सब्सट्रेट (10 mmol/L, 10 μL) पूरक किया गया था। माइक्रोप्लेट को CO₂ इनक्यूबेटर के अंदर 1 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया था। सापेक्ष इंट्रासेल्युलर टायरोसिनेस-गतिविधि की गणना के लिए 475 एनएम पर अवशोषण का पता लगाया गया था।

2.8 इंट्रासेल्युलर मेलेनिन-सामग्री मापन

मेलेनिन-सामग्री का पता लगाने के लिए NaOH क्लीवेज विधि अपनाई गई। पोस्ट‑72‑एच मॉडल‑हस्तक्षेप, कल्चर सतह पर तैरनेवाला हटा दिया गया था, कोशिकाओं को पीबीएस बफर का उपयोग करके दो बार धोया गया था . 100 μL 1 मोल/एल NaOH जलीय घोल जिसमें 10% डीएमएसओ शामिल था। पूर्ण मेलेनिन विघटन के लिए माइक्रोप्लेट को 60 मिनट के लिए 90 डिग्री ओवन के अंदर इनक्यूबेट किया गया था। सापेक्ष मेलेनिन-सामग्री प्रतिशत की गणना करने के लिए अवशोषण को 490 एनएम पर पढ़ा गया था।

2.9 सूजन-कारक और एंटीऑक्सीडेंट-एंजाइम संकेतक का पता लगाना

48 घंटे के मॉडल-प्रसंस्करण के बाद, HaCaT कोशिकाओं को स्क्रैप किया गया और एकत्र किया गया, सेल सतह पर तैरनेवाला निकालने के लिए सेंट्रीफ्यूज किया गया। वाणिज्यिक एलिसा किट का उपयोग IL-6 और TNF-प्रो-इंफ्लेमेटरी-साइटोकिन सांद्रता के मात्रात्मक निर्धारण के लिए किया गया था। एंटीऑक्सीडेंट-एंजाइम परीक्षण के लिए, कोशिका विखंडन को प्राप्त करने के लिए कोशिका छर्रों को बार-बार फ्रीज-पिघलना चक्र के अधीन किया गया था। सेंट्रीफ्यूजेशन स्थिति: 12 000 आर/मिनट, 4 डिग्री, 10 मिनट। किट परिचालन विनिर्देशों के अनुसार एसओडी जीवन शक्ति और सीएटी एंजाइम सामग्री को परखने के लिए सतह पर तैरनेवाला अंश एकत्र किया गया था।

2.10 संयोजन-सूचकांक (सीआई) विश्लेषण

टायरोसिनेस-निषेध और एंटीऑक्सीडेंट परख के भीतर पीएचजी और ग्लैब्रिडिन के बीच सहक्रियात्मक/योज्य/विरोधी बातचीत का न्याय करने के लिए चाउ-तलाले संयोजन-सूचकांक (सीआई) एल्गोरिदम लागू किया गया था:

सीआई=D₁/DX₁ + D₂/DX₂

D₁ and D₂: individual mass‑concentration of PhGs and glabridin inside compound solution, when reaching fixed biological‑effect level X. DX₁ and DX₂: required mass‑concentration for single PhGs or glabridin to produce identical X‑level biological effect. CompuSyn software completed CI‑value computation. Evaluation criteria: CI >1 विरोधी अंतःक्रिया का प्रतिनिधित्व करता है; सीआई ≈ 1 का अर्थ है योगात्मक प्रभाव; सीआई< 1 indicates significant synergistic‑enhancement effect.

2.11 सांख्यिकीय विश्लेषण

प्रायोगिक माप परिणाम माध्य मान ± मानक विचलन (माध्य ± एसडी) के रूप में व्यक्त किए गए थे। ग्राफपैड प्रिज्म 9.5.0 सॉफ्टवेयर ने सांख्यिकीय गणना की। बहु-समूह तुलना के लिए विचरण का एकतरफ़ा विश्लेषण (एनोवा) का उपयोग किया गया था। पी-मूल्य< 0.05 was regarded as statistically significant difference; P < 0.01 marked significant difference; P < 0.001 stood for extremely significant statistical difference.
 

3) परिणाम और चर्चा

3.1 इन-विट्रो टायरोसिनेस-पीएचजी, ग्लैब्रिडिन और बाइनरी-मिश्रण नमूनों का निरोधात्मक प्रदर्शन

Half‑inhibitory concentration IC₅₀ values for single‑component PhGs PBS solution, glabridin PBS solution and positive‑control arbutin were (2.192 ± 0.038) g/L, (1.376 ± 0.025) g/L and (0.101 ± 0.003) μg/mL respectively. In‑vitro tyrosinase‑suppressing potency sequence: arbutin > glabridin >पी.एच.जी.

यौगिक पीबीएस समाधान के लिए 0.4 ग्राम/लीटर की कुल सांद्रता पर, PhGs/Gla (10:1), PhGs/Gla (5:1), PhGs/Gla (1:1) ने टायरोसिनेस-निषेध दर 88.06%, 92.93%, 94.37% प्रदान की। 5:1 और 1:1 दोनों अनुपातों ने कुल द्रव्यमान-सांद्रण के मिलान पर एकल-घटक पीएचजी (36.92%) और एकल-घटक ग्लैब्रिडिन (92.71%) की निषेध दक्षता को पार कर लिया। 1:1 समूह ने सकारात्मक-नियंत्रण आर्बुटिन के साथ तुलनीय निषेध परिमाण हासिल किया। CI-मूल्य गणना परिणामों के अनुसार: m(PhGs):m(Gla) 40:1 से 1:1 तक उत्पन्न CI< 1, confirming obvious synergistic enhancement on tyrosinase‑suppression. Conversely, proportion series from 1:5 up to 1:40 gave CI >1, विरोधी अंतःक्रिया प्रकट करना।

फेनोलिक हाइड्रॉक्सिल समूह टायरोसिनेस-निरोधात्मक क्षमता के लिए मुख्य कार्यात्मक भाग का गठन करते हैं। पीएचजी में ऑर्थो-डायहाइड्रॉक्सीफेनिल संरचनात्मक टुकड़े होते हैं जो टायरोसिनेस उत्प्रेरक-सक्रिय पॉकेट के भीतर तांबे के आयनों को पिघलाने में सक्षम होते हैं, जो प्रतिस्पर्धात्मक रूप से सब्सट्रेट-एंजाइम बाइंडिंग में बाधा डालते हैं। ग्लैब्रिडिन आइसोफ्लेवन कंकाल अपने बी-रिंग पर 2‑OH और 4‑OH समूह रखता है, जो संरचनात्मक रूप से L-टायरोसिन / L-DOPA सुगंधित हाइड्रॉक्सिल-प्रतिस्थापित रिंग के अनुरूप है, जो एंजाइम-सक्रिय-साइट डोमेन के प्रतिस्पर्धी कब्जे को सक्षम करता है। यौगिक सम्मिश्रण के बाद, संचयी फेनोलिक-हाइड्रॉक्सिल मात्रा बढ़ जाती है; इस बीच, दो अणु टायरोसिनेस प्रोटीन के अलग-अलग बंधन स्थलों से जुड़ सकते हैं, जो संयुक्त रूप से निरोधात्मक दक्षता को बढ़ाते हैं।

3.2 परीक्षण नमूनों की रेडिकल-स्केवेंजिंग एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि

DPPH‑scavenging IC₅₀ data: PhGs (21.135 ± 1.164 μg/mL), glabridin (55.537 ± 5.230 μg/mL), Vitamin C positive reference (2.852 ± 0.252 μg/mL). DPPH radical‑quenching‑ability ranking: Vitamin C > PhGs >ग्लैब्रिडिन. पीएचजी कैफॉयल-ग्रुप और 3,4-डायहाइड्रॉक्सीफेनिलथेनॉल मोइटीज़ में प्रचुर मात्रा में हैं, संयुग्मित डबल-बॉन्ड सिस्टम फ्री-रेडिकल-न्यूट्रलाइजिंग प्रदर्शन को मजबूत करते हैं। ग्लैब्रिडिन फ्लेवोनोइड ढांचा प्रतिक्रियाशील-ऑक्सीजन-प्रजातियों से अयुग्मित इलेक्ट्रॉनों को स्थिर करने के लिए हाइड्रॉक्सिल-समूह और विस्तारित संयुग्मित-रिंग आर्किटेक्चर भी प्रदान करता है।

तीन आशाजनक यौगिक समूह PhGs/Gla (1:1), (5:1), (10:1) ने उत्कृष्ट DPPH‑ और ABTS⁺‑स्कैवेंजिंग प्रदर्शन प्रस्तुत किया। एबीटीएस⁺‑स्कैवेंजिंग दर लगभग 100% तक पहुंच गई, जो कि कटियन फ्री‑रेडिकल्स के लगभग पूर्ण उन्मूलन का संकेत देती है। विभिन्न द्रव्यमान अनुपात दो अणुओं के बीच विभिन्न आणविक-अंतःक्रिया अवस्थाएँ उत्पन्न करते हैं, जिससे हाइड्रॉक्सिल-समूह एक्सपोज़र स्थिति में असमानताएँ होती हैं और परिणामस्वरूप एंटीऑक्सीडेंट सहक्रियात्मक परिमाण में विचलन होता है।

3.3 पीएचजी, ग्लैब्रिडिन और मिश्रित तैयारियों का साइटोटॉक्सिसिटी मूल्यांकन

CCK‑8 साइटोटोक्सिसिटी परीक्षण से पता चला कि 62.5 ~ 500 ug/mL और ग्लैब्रिडिन 6.25 ~ 25 ug/mL के एकाग्रता दायरे के भीतर PhG ने B16F10 और HaCaT सेल लाइनों के लिए स्पष्ट व्यवहार्यता-कमी को ट्रिगर नहीं किया। 25 यूजी/एमएल कुल द्रव्यमान-सांद्रण स्थिति के तहत, तीन यौगिक-अनुपात समूह PhGs/Gla (1:1, 5:1, 10:1) ने उच्च सेल व्यवहार्यता बनाए रखी, दोनों सेल उपभेदों के खिलाफ कोई पता लगाने योग्य साइटोटोक्सिक प्रभाव नहीं दिखाया। परिणामस्वरूप, बाद के सेलुलर-फ़ंक्शन मूल्यांकन के लिए 25 ug/mL को सुरक्षित कामकाजी एकाग्रता के रूप में चुना गया था। एकल-एजेंट समूहों के लिए, PhGs निम्न-/मध्यम-/उच्च-खुराक को 125 ug/mL, 250 ug/mL, 500 ug/mL के रूप में परिभाषित किया गया था; ग्लैब्रिडिन कम‑/मध्यम‑/उच्च‑खुराक: 6.25 ug/mL, 12.5 ug/mL, 25 ug/mL।

3.4 यूवीबी-उत्तेजित बी16एफ10 कोशिकाओं में इंट्रासेल्युलर टायरोसिनेस-गतिविधि और मेलेनिन-सामग्री पर प्रभाव

यूवीबी विकिरण उपचार के बाद, बी16एफ10 मॉडल-समूह ने इंट्रासेल्युलर टायरोसिनेस-गतिविधि और मेलेनिन संचय (पी) में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण वृद्धि प्रदर्शित की।< 0.001), verifying successful construction of cellular pigmentation‑model. Both single‑agent PhGs and glabridin reduced tyrosinase‑activity and melanin level following concentration‑dependent tendency.

25 यूजी/एमएल की एकीकृत कुल सांद्रता पर, यौगिक समूहों ने एकल-घटक समकक्षों के सापेक्ष बेहतर जैविक परिणाम प्रदर्शित किए। तीन अनुपातों में, PhGs/Gla (1:1) ने इष्टतम प्रभाव दिया: अवशिष्ट इंट्रासेल्युलर टायरोसिनेस-गतिविधि केवल 23.80%, सापेक्ष मेलेनिन-सामग्री 30.90% तक गिर गई। सांख्यिकीय तुलना से 5:1 और 10:1 यौगिक समूहों की तुलना में महत्वपूर्ण अंतर पता चला। 1:1 अनुपात ने मेलानोसाइट कोशिकाओं के अंदर मेलेनिन जैवसंश्लेषण को रोकने के लिए प्रमुख सहक्रियात्मक-प्रवर्धन को प्रकट किया।

यूवीबी-विकिरण मेलानोसाइट-आंतरिक मेलानोजेनिक सिग्नलिंग कैस्केड को उत्तेजित करता है, एमआईटीएफ प्रतिलेखन कारक अभिव्यक्ति को विनियमित करता है और आगे टायरोसिनेस प्रोटीन ओवर-अभिव्यक्ति को प्रेरित करता है। हमारे सेलुलर-प्रयोग के परिणामों ने पुष्टि की है कि ग्लोब्रिडिन के साथ संयुक्त पीएचजी यूवीबी-प्रेरित टायरोसिनेस सक्रियण को प्रभावी ढंग से उलट सकता है और मेलेनिन उत्पादन में कटौती कर सकता है।

3.5 एलपीएस-चुनौतीपूर्ण HaCaT केराटिनोसाइट्स पर सूजनरोधी प्रभाव

एलपीएस उत्तेजना ने एचसीएटी मॉडल-समूह (पी) में आईएल-6 और टीएनएफ-प्रो-इंफ्लेमेटरी-साइटोकिन स्राव को दृढ़ता से बढ़ा दिया।< 0.001), proving inflammatory‑model replication success. Individual PhGs and glabridin suppressed cytokine release in concentration‑dependent manner.

When comparing three compound ratios at 25 μg/mL, anti‑inflammatory potency sequence was PhGs/Gla (1:1) > PhGs/Gla (5:1) >पीएचजी/जीएलए (10:1)। 1:1 फॉर्मूलेशन ने आईएल‑6 और टीएनएफ‑ रिलीज के लिए अधिकतम कमी उत्पन्न की, जो पीएचजी या ग्लैब्रिडिन के अलग-अलग अनुप्रयोग द्वारा प्राप्त निरोधात्मक प्रभाव से अधिक है।

आणविक-तंत्र स्पष्टीकरण: PhGs फेनोलिक-हाइड्रॉक्सिल अंश सूजन-ट्रिगर मुक्त-रेडिकल्स को साफ़ करता है; इसके अलावा PhGs प्रो-इंफ्लेमेटरी-जीन ट्रांसक्रिप्शन को रोकने के लिए NF-κB और MAPK इंट्रासेल्युलर सिग्नलिंग कैस्केड में हस्तक्षेप कर सकते हैं। ग्लैब्रिडिन तनाव-सक्रिय किनेज़ जेएनके और पी38 के फॉस्फोराइलेशन को रोकता है, डाउनस्ट्रीम सूजन-सिग्नल ट्रांसडक्शन को अवरुद्ध करता है। एकल पदार्थ केवल आंशिक रूप से सूजन-संकेत-मार्ग सक्रियण को दबा सकता है। बाइनरी संयोजन एक साथ सूजन-सिग्नलिंग-नेटवर्क के भीतर कई नोड्स में हस्तक्षेप करता है, जिससे सहक्रियात्मक विरोधी-भड़काऊ-प्रदर्शन प्राप्त होता है।

त्वचीय सूजन पीआईएच घटना के लिए महत्वपूर्ण अपस्ट्रीम ड्राइवर के रूप में कार्य करती है। केराटिनोसाइट्स द्वारा स्रावित सूजन संबंधी साइटोकिन्स पैराक्राइन सिग्नलिंग दूत के रूप में कार्य करते हैं, जो मेलेनिन उत्पादन और मेलेनोसोम स्थानांतरण में तेजी लाने के लिए आसन्न मेलानोसाइट्स को उत्तेजित करते हैं। हाइपरपिग्मेंटेशन घावों को रोकने और सुधारने के लिए एपिडर्मल सूजन का प्रभावी शमन आवश्यक है। इसलिए, PhGs-ग्लैब्रिडिन यौगिक का सूजन-रोधी लाभ एंटी-पिग्मेंटेशन कॉस्मेटिक-सामग्री अनुप्रयोग के लिए अतिरिक्त मूल्य प्रदान करता है।

3.6 एएपीएच-प्रेरित ऑक्सीडेटिव-तनाव की स्थिति के तहत एंटीऑक्सीडेंट-एंजाइम-विनियमन क्षमता

एएपीएच ऑक्सीडेटिव-तनाव मॉडल-समूह ने इंट्रासेल्युलर एसओडी और सीएटी एंटीऑक्सीडेंट-एंजाइम जीवन शक्ति (पी) में स्पष्ट गिरावट देखी।< 0.001). Treatment with PhGs or glabridin alone could partially restore SOD and CAT activity. Among compound‑ratio groups, PhGs/Gla (1:1) displayed most powerful capability to elevate SOD and CAT enzyme level inside HaCaT cells.

पराबैंगनी विकिरण के संपर्क में आने वाली त्वचा बड़ी मात्रा में प्रतिक्रियाशील-ऑक्सीजन-प्रजातियां उत्पन्न करती है। अतिरिक्त आरओएस न केवल मेलेनिन-संश्लेषण-संबंधित बायोमोलेक्यूल्स को सीधे ऑक्सीकरण करता है, बल्कि कई मेलेनोजेनिक सिग्नलिंग मार्गों को भी सक्रिय करता है। अंतर्जात एंटीऑक्सीडेंट-एंजाइम प्रणाली (एसओडी, सीएटी) इंट्रासेल्युलर आरओएस को खत्म करने के लिए प्रमुख रक्षा बाधा का गठन करती है। जब ऑक्सीडेटिव-तनाव आंतरिक एंटीऑक्सीडेंट क्षमता को खत्म कर देता है, तो आरओएस-संचय रंजकता की प्रगति को तेज कर देता है। PhGs-ग्लैब्रिडिन यौगिक न केवल फेनोलिक-हाइड्रॉक्सिल रासायनिक प्रतिक्रिया के माध्यम से मुक्त-रेडिकल्स को सीधे नष्ट करता है, बल्कि सेलुलर एंटीऑक्सीडेंट-एंजाइम-सिस्टम फ़ंक्शन की मरम्मत भी करता है, दो आयामों से ऑक्सीडेटिव-तनाव क्षति से राहत देता है। विभिन्न द्रव्यमान अनुपात दो प्राकृतिक अणुओं के बीच आणविक-अंतःक्रिया पैटर्न को बदलते हैं, जिसके परिणामस्वरूप अंतिम एंटीऑक्सीडेंट-विनियमन प्रभावकारिता में विसंगति होती है।

3.7 सिनर्जिस्टिक एंटी-हाइपरपिग्मेंटेशन के लिए व्यापक तंत्र चर्चा

त्वचा हाइपरपिग्मेंटेशन पैथोलॉजिकल-प्रक्रिया एक जटिल सिग्नलिंग नेटवर्क बनाती है: यूवीबी विकिरण मेलानोसाइट्स और आसपास के केराटिनोसाइट्स दोनों पर कार्य करता है। केराटिनोसाइट्स आरओएस और प्रो-इंफ्लेमेटरी-साइटोकिन्स जारी करते हैं। ये जैव-संकेत मेलानोसाइट्स को और अधिक सक्रिय करते हैं, टायरोसिनेस गतिविधि को विनियमित करते हैं, मेलेनिन जैवसंश्लेषण को बढ़ावा देते हैं, और एपिडर्मल केराटिनोसाइट्स की ओर मेलानोसोम परिवहन की सुविधा प्रदान करते हैं, जिससे अंततः त्वचा की सतह पर रंगद्रव्य का जमाव दिखाई देता है। तदनुसार, एकल-लक्ष्य टायरोसिनेस-निषेध पैथोलॉजिकल रंजकता को पूरी तरह से उलट नहीं सकता है। बहु-पथ हस्तक्षेप रणनीति में मेलानोजेनेसिस-निषेध, सूजन-रोधी और एंटीऑक्सीडेंट सुरक्षा को एकीकृत किया जाना चाहिए।

हमारे प्रायोगिक परिणामों से पता चला कि पीएचजी ग्लैब्रिडिन के साथ मिलकर हाइपरपिग्मेंटेशन के खिलाफ मल्टी-मोडल हस्तक्षेप का एहसास करते हैं:

मेलेनिन जैवसंश्लेषण स्रोत को बाधित करने के लिए मेलानोसाइट्स के अंदर टायरोसिनेस उत्प्रेरक-गतिविधि को सीधे दबाएं;

केराटिनोसाइट्स से प्रो-इंफ्लेमेटरी-साइटोकिन ओवर-स्राव को रोकें, मेलानोसाइट्स की ओर पैराक्राइन सूजन-उत्तेजना संकेत को काट दें;

अतिरिक्त प्रतिक्रियाशील-ऑक्सीजन-प्रजातियों को हटा दें और अंतर्जात एसओडी/सीएटी एंटीऑक्सीडेंट-एंजाइम गतिविधि को पुनर्प्राप्त करें, ऑक्सीडेटिव-तनाव-मध्यस्थ वर्णक-प्रवर्धन को कम करें।

एम(पीएचजी):एम(ग्ला) = 1:1 अनुपात ने जैव रासायनिक एंजाइम-अवरोध, रेडिकल-स्केवेंजिंग, मेलानोसाइट पिगमेंट-मॉडल, केराटिनोसाइट सूजन-मॉडल और ऑक्सीडेटिव-तनाव-मॉडल में इष्टतम व्यापक सहक्रियात्मक-प्रदर्शन प्रदर्शित किया। इस अनुपात ने लगभग सभी परीक्षण संकेतकों में 5:1 और 10:1 समूहों को पीछे छोड़ दिया। सिनर्जी पूरक आणविक-संरचनात्मक विशेषताओं से उत्पन्न हो सकती है: पीएचजी और ग्लैब्रिडिन में अलग-अलग फेनोलिक-कंकाल ढांचे होते हैं, जो विभिन्न लक्ष्य प्रोटीन (टायरोसिनेस, सूजन-सिग्नलिंग किनेसेस, एंटीऑक्सीडेंट-एंजाइम-संबंधित पथ) के साथ बातचीत करते हैं। यौगिक सम्मिश्रण के बाद, फेनोलिक-हाइड्रॉक्सिल एक्सपोज़र स्थिति को अंतर-आणविक संपर्क के माध्यम से अनुकूलित किया जाता है, जिससे समग्र जैविक-गतिविधि बढ़ती है।

कॉस्मेटिक-उद्योग के व्यावहारिक परिप्रेक्ष्य के लिए, सहक्रियात्मक वनस्पति-मिश्रित कच्चे माल दो प्रमुख लाभ लाते हैं। सबसे पहले, सहक्रियात्मक-प्रभाव प्रत्येक सक्रिय-घटक के लिए आवश्यक खुराक को कम करने में सक्षम बनाता है, जिससे फॉर्मूलेशन लागत कम हो जाती है; दूसरा, बहु-पथ कार्यात्मक प्रोफ़ाइल पीआईएच और मेलास्मा जैसे नैदानिक-अवलोकित त्वचा हाइपरपिग्मेंटेशन के जटिल रोग-संबंधी-तंत्र से मेल खाता है, जो उच्च-प्रभावकारिता वाले प्राकृतिक त्वचा-चमकदार कॉस्मेटिक फ़ार्मुलों को विकसित करने के लिए सैद्धांतिक-आधार प्रदान करता है।

4. निष्कर्ष

इस शोध ने व्यवस्थित रूप से सहक्रियात्मक एंटी-हाइपरपिग्मेंटेशन बायोएक्टिविटी का मूल्यांकन कियासिस्टैंच डेजर्टिकोला-व्युत्पन्नफेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स (PhGs) को ग्लैब्रिडिन (Gla) के साथ मिलाया जाता है। बहुआयामी प्रभावकारिता लक्षण वर्णन के लिए जैव रासायनिक इन-विट्रो स्क्रीनिंग और तीन प्रतिनिधि सेलुलर-मॉडल का उपयोग किया गया था। मुख्य प्रयोगात्मक-निष्कर्षों को संक्षेप में इस प्रकार प्रस्तुत किया गया है:

टायरोसिनेस-निषेध और मुक्त-रेडिकल-स्कैवेंजिंग के लिए इन-विट्रो जैव रासायनिक परीक्षणों के भीतर, यौगिक फॉर्मूलेशन m(PhGs):m(Gla) = 1:1, 5:1, 10:1 ने अनुकूल निरोधात्मक-प्रदर्शन और सहक्रियात्मक-इंटरैक्शन प्रस्तुत किया। पीएच 6.8 पीबीएस में कुल सांद्रता 0.4 ग्राम/लीटर के तहत, टायरोसिनेस-निषेध-दर 94.37% (1:1), 92.93% (5:1), 88.06% (10:1) तक पहुंच गया। डीपीपीएच-रेडिकल-स्कैवेंजिंग-दरें: 89.44%, 88.72%, 88.10%। एबीटीएस⁺‑रेडिकल‑स्केवेंजिंग‑रेट्स: 100.13%, 100.01%, 99.87%।

सुरक्षित कामकाजी सांद्रता 25 ug/mL पर, PhGs/Gla (1:1), (5:1), (10:1) DMEM समाधानों ने B16F10 मेलेनोमा कोशिकाओं और HaCaT मानव केराटिनोसाइट्स के खिलाफ कोई साइटोटॉक्सिसिटी प्रदर्शित नहीं की। इन समूहों में, PhGs/Gla (1:1) ने सर्वोत्तम एकीकृत-प्रभावकारिता हासिल की: इंट्रासेल्युलर टायरोसिनेस-गतिविधि घटकर 23.80% हो गई, मेलेनिन-सामग्री घटकर 30.90% हो गई। इसने IL-6, TNF-इंफ्लेमेटरी-साइटोकिन रिलीज पर सबसे मजबूत अवरोध उत्पन्न किया और SOD और CAT एंटीऑक्सीडेंट-एंजाइम जीवन शक्ति के लिए अधिकतम बहाली की। 1:1 द्रव्यमान-अनुपात समूह ने एकल-एजेंट समूहों और अन्य यौगिक-अनुपात समूहों से बेहतर स्पष्ट सहक्रियात्मक-वृद्धि प्रभाव प्रदर्शित किया।

पीएचजी और ग्लैब्रिडिन बाइनरी मिश्रण ट्रिपल-पाथवे के माध्यम से एंटी-स्किन-हाइपरपिग्मेंटेशन प्रभाव डालता है: मेलेनिन बायोसिंथेसिस को दबाता है, एपिडर्मल सूजन को कम करता है और ऑक्सीडेटिव-तनाव क्षति का प्रतिकार करता है। इष्टतम सहक्रियात्मक-द्रव्यमान-अनुपात m(PhGs):m(Gla) = 1:1. यह अध्ययन त्वचा को चमकदार बनाने और रंजकता-विरोधी अनुप्रयोगों के लिए प्राकृतिक पौधों से प्राप्त बहु-कार्यात्मक कॉस्मेटिक कच्चे माल को विकसित करने के लिए प्रयोगात्मक-साक्ष्य और तकनीकी-समर्थन प्रदान करता है।

स्वीकृतियाँ

इस कार्य को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (अनुदान संख्या. 82160772) द्वारा आर्थिक रूप से समर्थित किया गया था। हम प्रयोगात्मक-प्लेटफ़ॉर्म समर्थन के लिए क्लिनिकल ड्रग रिसर्च की झिंजियांग कुंजी प्रयोगशाला को धन्यवाद देते हैं।

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