पारंपरिक चीनी जड़ी बूटी सिस्टैंच की अवसादरोधी और संज्ञानात्मक सुधार गतिविधियाँ
Jun 23, 2022
सार
दस प्रतिशत से अधिक लोग अपने जीवनकाल में कम से कम एक प्रकरण अवसाद और संबंधित मानसिक विकारों से पीड़ित होते हैं, और अवसाद और संबंधित मानसिक विकार दुनिया की सबसे बड़ी सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्याओं में से एक हैं। एक बहु प्रणाली सिद्धांत यह मानता है कि कई प्रणालियों का अपचयन अवसाद और संबंधित मानसिक विकारों के रोगजनन को रेखांकित करता है, और कई प्रणाली विकृति सिद्धांत पर आधारित नए उपचारों की तत्काल आवश्यकता है। इस अध्ययन में जड़ी-बूटी के काढ़े का अवसादरोधी प्रभाव पाया गयासिस्टांचे डेजर्टिकोलावाईसीएमए औरसिस्टैंच ट्यूबुलोसाजांच की गई। जड़ी बूटीसिस्टांचेकाढ़े ने माउस टेल सस्पेंशन टेस्ट में गतिहीनता की अवधि को काफी कम कर दिया। जड़ी-बूटियों के काढ़े से उपचारित चूहे ने मॉरिस वाटर भूलभुलैया परीक्षण में स्थानिक सीखने और स्मृति की बेहतर क्षमता दिखाई। जड़ी-बूटियों के काढ़े का इलाज करने वाले समूहों ने एक डाउनरेगुलेटेड मोनोमाइन ऑक्सीडेज (MAO) गतिविधि प्रदर्शित की; मस्तिष्क में डोपामाइन (डीए) की एकाग्रता को बढ़ा दिया गया था, जो जड़ी बूटी को दर्शाता हैसिस्टांचेकाढ़े ने तंत्रिका उत्तेजना में सुधार किया; कॉर्टिकोस्टेरोन (CORT) की सीरम सांद्रता को कम कर दिया गया था, यह दर्शाता है कि चूहों को तनाव के कम स्तर से लाभ हुआ है। इसलिए, अवसादरोधी प्रभावकारिता और तंत्रपारंपरिक चीनी जड़ी बूटीसिस्टांचेइस अध्ययन में पता लगाया गया। जड़ी बूटीसिस्टांचेने अवसाद के लिए एक पूरक और वैकल्पिक चिकित्सा के रूप में विकसित होने की क्षमता दिखाई।
1 परिचय
अवसाद और संबंधित मनोदशा संबंधी विकार, अनुमान है कि 12 ~ 17 प्रतिशत आबादी अपने जीवनकाल में कम से कम एक प्रकरण का अनुभव करती है, मानसिक अक्षमता के प्रमुख कारणों में से एक है और इसे दुनिया भर में प्रमुख सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्याओं में से एक माना जाता है। विशेष रूप से प्रासंगिक, अवसाद के रोगियों का एक महत्वपूर्ण अनुपात स्मृति हानि, एकाग्रता की समस्याओं, ऊर्जा या थकान में कमी, शौक और गतिविधियों में रुचि या आनंद की हानि, और सोने में कठिनाई, सुबह-सुबह जागना, या अधिक नींद से पीड़ित है। हालांकि अवसाद और संबंधित सिंड्रोम में असामान्यता के लिए तंत्रिका सब्सट्रेट अस्पष्ट हैं, यह आमतौर पर स्वीकार किया जाता है कि न्यूरोप्लास्टिकिटी और सेलुलर लचीलापन की हानि अवसाद के पैथोफिजियोलॉजी को जन्म देती है और सफल उपचार न्यूरोट्रांसमीटर स्तर के हस्तक्षेप पर निर्भर हो सकता है। अवसाद की दवा के लिए दृष्टिकोण मूल रूप से क्लासिक मोनोअमाइन सिस्टम परिकल्पना पर आधारित है, जो दावा करता है कि मोनोअमाइन विशेष रूप से सेरोटोनिन (5-एचटी) और नॉरपेनेफ्रिन (एनई) का अपचयन अवसाद रोगजनन में योगदान देता है, और डोपामाइन के साथ न्यूरोट्रांसमीटर सिस्टम का हस्तक्षेप एगोनिस्ट और डोपामाइन-नोराड्रेनर्जिक न्यूनाधिक प्रमुख अवसाद विकार के लक्षणों को कम करेंगे। हालांकि व्यापक रूप से निर्धारित, एंटीडिपेंटेंट्स की उपचारात्मक प्रभावकारिता संदिग्ध है और साइड-इफेक्ट को नजरअंदाज नहीं किया जा सकता है क्योंकि रोगियों का एक महत्वपूर्ण अनुपात मोनोमाइन सिस्टम हेरफेर का जवाब नहीं देता है। हाल ही में, अवसाद रोगजनन के उपन्यास सिद्धांतों से संकेत मिलता है कि सूजन पथ, ऑक्सीडेटिव तनाव मार्ग, हाइपोथैलेमिक-पिट्यूटरी-एड्रेनल (एचपीए) अक्ष, चयापचय और बायोएनेरगेटिक्स सिस्टम, न्यूरोट्रॉफिक मार्ग, ग्लूटामेट सिस्टम, ओपियोइड सिस्टम, और सहित कई प्रणालियां कोलीनर्जिक प्रणाली, अवसाद की घटना के साथ निकटता से जुड़ी हुई हैं। साक्ष्य बताते हैं कि एकाधिक लक्ष्य हस्तक्षेप ने एक एकल लक्ष्य हस्तक्षेप की तुलना में बेहतर प्रभावोत्पादकता उत्पन्न की। मल्टीपल सिस्टम डिसरेगुलेशन थ्योरी पर आधारित नए उपचारों की तत्काल आवश्यकता है।
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हर्बल उत्पादों ने कथित तौर पर अमेरिका की आधी से अधिक आबादी का उपभोग किया; अवसाद के इलाज के पूरक तरीके के रूप में जड़ी-बूटी या हर्बल उत्पादों की रुचि और मांग पूरी दुनिया में बढ़ रही है। अवसाद से राहत देने वाले लाभकारी प्रभाव को प्रदर्शित करने के लिए कई चिकित्सा पौधे पाए जाते हैं। जिन जड़ी-बूटियों में अवसाद को दबाने और संज्ञानात्मक कार्य में सुधार करने के प्रभाव होने की सूचना है, उनमें समुद्री हिरन का सींग शामिल हैं,जिन्कगो बिलोबा,मुरलीवाला नाइग्रम,हाइपरिकम छिद्रण,ग्रिफ़ोनिया सिंपिसिफोलिया. फेरुलिक एसिड और पिपेरिन के संयोजन प्रशासन ने मोनोएमिनर्जिक प्रणाली में हेरफेर करके चूहों में एक सहक्रियात्मक एंटीडिप्रेसेंट जैसा प्रभाव प्रदर्शित किया। एल्बिफ्लोरिन को न्यूरोट्रांसमीटर रिसेप्टर्स और ट्रांसपोर्टर्स के लिए एक उच्च चयनात्मक आत्मीयता की विशेषता थी और स्वतंत्र रूप से चलने वाले चूहों के हाइपोथैलेमस में 5- HT और NE की बाह्य सांद्रता में काफी वृद्धि हुई थी। एक चिकित्सा जड़ी बूटीमेलिसा ऑफिसिनैलिसL. सेरोटोनर्जिक न्यूरोट्रांसमीटर स्तर पर प्रभाव डालकर चूहों के अवसादग्रस्तता-व्यवहार से राहत मिली। अवसाद के वैकल्पिक उपचार के रूप में विकसित ये जड़ी-बूटियाँ या काढ़े, अवसाद के लक्षणों को कम करने में मदद करते हैं और अवसादरोधी दवा के विकास के लिए एक नया स्रोत प्रदान करते हैं। जड़ी बूटीसिस्टांचेचीन के उत्तरी भाग में शुष्क भूमि और रेगिस्तान में वितरित प्रजातियां, पारंपरिक चीनी औषधि जड़ी-बूटियां हैं और चीन में 1,000 से अधिक वर्षों से विभिन्न रोगों के उपचार के लिए व्यापक रूप से उपयोग की जाती हैं। जड़ी बूटी की कई प्रभावकारितासिस्टांचेकामोद्दीपक के बीच काढ़ा रेंज [14], प्रतिरक्षा को बढ़ावा देने वाला [15], एंटीऑक्सीडेंट [16], और हेपेट्रोप्रोटेक्टिव [17] गुण।सी. डेजर्टिकोलाकाढ़े वृषण स्टेरॉइडोजेनिक एंजाइम को प्रेरित करते हैं [18], लिंग स्तंभन प्रतिक्रिया को बढ़ावा देना, और कास्टेड चूहों में स्तंभन प्रतिक्रिया की विलंबता अवधि को छोटा करना [19]. जड़ी बूटीसिस्टांचेनिरोधात्मक एपोप्टोसिस जीन और न्यूरोट्रॉफिक कारकों को विनियमित करके डोपामिनर्जिक न्यूरॉन्स की गतिविधियों को बाधित करने की सूचना मिली है [20].सी. ट्यूबुलोसाकाढ़े ने A . के कारण होने वाली संज्ञानात्मक शिथिलता में संशोधन किया 1-42 अमाइलॉइड जमाव को अवरुद्ध करके और कोलीनर्जिक और हिप्पोकैम्पस डोपामिनर्जिक न्यूरोनल फ़ंक्शन को पुनर्जीवित किया [21]. हर्बल की न्यूरोप्रोटेक्टिव संपत्तिसिस्टांचेतात्पर्य संज्ञानात्मक-संबंधी रोगों में चिकित्सीय क्षमता से है। अवसाद सामान्य लक्षणों के रूप में भूलने की बीमारी और संज्ञानात्मक गिरावट के साथ भावनात्मक प्रतिक्रियाओं का एक सामान्य मिश्रित तरीका है [22]. जड़ी बूटीसिस्टांचेआमतौर पर भूलने की बीमारी के इलाज के लिए पारंपरिक चीनी दवा के रूप में इस्तेमाल किया जाता था; इसके अलावा, एक हालिया रिपोर्ट से पता चलता है कि कॉर्नमील के प्रारंभिक वयस्क प्रशासन के साथ पूरकसी. ट्यूबुलोसागैर-कशेरुकी में दीर्घायु संवर्धन और घ्राण-संबंधी शिक्षा और स्मृति सुधार के लिए फायदेमंद हैड्रोसोफिलानमूना [23]. ये तथ्य जड़ी-बूटी के संज्ञानात्मक सुधार के गुण को इंगित करते हैंसिस्टांचे; यहाँ इस शोध में, पहली बार हमने मोनोअमाइन प्रणाली और एचपीए अक्ष को विनियमित करके स्तनपायी मॉडल में अवसादरोधी संपत्ति और संज्ञानात्मक सुधार गतिविधियों के साथ इसके संबंध की विशेषता बताई। एंटीडिप्रेसेंट संपत्ति और जड़ी बूटी के प्रारंभिक तंत्र को रोशन करनासिस्टांचेजड़ी बूटी के अनुप्रयोग स्पेक्ट्रम का विस्तार कर सकता हैसिस्टांचे, जिसे अवसाद के वैकल्पिक उपाय के रूप में विकसित किया जा सकता है।
2. सिस्टैंच के अवसाद-रोधी कार्य की सामग्री और तरीके
2.1. पौधे की सामग्री और सिस्टैंच की काढ़ा तैयार करना
सी. डेजर्टिकोलाYCMa को Nei मंगोल स्वायत्त क्षेत्र, चीन से प्राप्त किया गया था;सी. ट्यूबुलोसाझिंजियांग उइगुर स्वायत्त क्षेत्र, चीन से प्राप्त किया गया था। काढ़े से पहले, जड़ी बूटी (सी. डेजर्टिकोलाYCMa orसी. ट्यूबुलोसाएचपीएलसी (उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी) (मिलफोर्ड, एमए, वाटर्स, यूएसए) का उपयोग करके इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड की सामग्री का पता लगाने के लिए निरीक्षण किया गया था, और योग्य उत्पाद (पीपुल्स रिपब्लिक ऑफ चाइना के फार्माकोपिया के अनुसार) का उपयोग पशु प्रयोगों के लिए किया गया था। . राज्य शिक्षा मंत्रालय, सुन यात-सेन विश्वविद्यालय के खाद्य और स्वास्थ्य इंजीनियरिंग अनुसंधान केंद्र द्वारा विकसित जल वाष्पन की विधि के आधार पर काढ़ा प्राप्त किया गया था। सूखासिस्टांचे डेजर्टिकोला125 ग्राम के वाईसीएमए को 120-मेष स्क्रीन से तोड़कर छान लिया गया और फिर पाउडर को 3 एल अल्ट्राप्योर पानी में घोलकर, 2 घंटे के लिए 100 डिग्री पर गर्म किया गया, फिर कमरे के तापमान तक ठंडा किया गया, और छलनी से छान लिया गया। ; सतह पर तैरनेवाला पुनर्नवीनीकरण किया गया था। तलछट को फिर 2 लीटर अल्ट्राप्योर पानी में घोल दिया गया और फिर 1.5 घंटे के लिए गर्म किया गया और सतह पर तैरनेवाला को रीसायकल करने के लिए ऊपर बताए अनुसार ठंडा किया गया; तलछट का उपयोग तब सतह पर तैरनेवाला के पुनर्चक्रण के लिए किया गया था। सभी सतह पर तैरनेवाला की सामग्री 60 डिग्री पर रोटरी वैक्यूम बाष्पीकरण द्वारा समृद्ध किया गया था; अंत में कच्चे दवा की सांद्रता 0.5 ग्राम / एमएल के रूप में निर्धारित की गई थी और उत्पाद को °20 डिग्री पर संग्रहीत किया गया था।
2.2. एचपीएलसी विश्लेषण द्वारा इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड परख
एचपीएलसी (उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी) का उपयोग इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड के गुणात्मक और मात्रात्मक परख को मापने के लिए किया गया था; वर्बास्कोसाइड (शुद्धता> 93 प्रतिशत) और इचिनाकोसाइड (शुद्धता> 93 प्रतिशत) को राष्ट्रीय खाद्य और औषधि नियंत्रण संस्थान (बीजिंग, चीन) से खरीदा गया था और एक मानक नियंत्रण के रूप में उपयोग किया गया था।
2.3. Cistanche पर पशु देखभाल और प्रायोगिक आचरण
विषय एसपीएफ़ (विशिष्ट रोगज़नक़ मुक्त) नर कुनमिंग चूहों का वजन 21 ~ 25 ग्राम था, जो ग्वांगडोंग प्रांत के मेडिकल प्रायोगिक पशु केंद्र द्वारा आपूर्ति की गई थी। जानवरों को प्लास्टिक के पिंजरों (दस प्रति पिंजरे) में रखा गया था; पर्यावरण की स्थिति इस प्रकार निर्धारित की गई थी: आर्द्रता 40 ~ 70 प्रतिशत, कमरे का तापमान 21 ± 1 डिग्री, और 12 घंटे: 12 घंटे प्रकाश-अंधेरे अवधि। सभी पशु प्रयोगों को सन यात-सेन विश्वविद्यालय की पशु आचार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था।
2.4. सिस्टैंच पर टेल सस्पेंशन टेस्ट
टेल सस्पेंशन टेस्ट क्रायन एट अल द्वारा वर्णित प्रोटोकॉल के अनुसार किया गया था । [24] मामूली बदलाव के साथ। संक्षेप में, 21 वें दिन, चूहों को पूंछ से निलंबित कर दिया गया था, नायलॉन कैथेटर द्वारा बंधे धातु के फांसी का उपयोग करके, फर्श से 50 मिमी की ऊंचाई पर सिर के साथ। चूहों को उसकी पूंछ के छोर से 10 ~ 20 मिमी चिपकने वाली टेप पर हुक पर लटका दिया गया था और क्लैपबोर्ड द्वारा ध्वनिक और नेत्रहीन रूप से अलग किया गया था। माउस के शरीर की गतिविधियों को रिकॉर्ड किया गया और श्वसन आंदोलनों को नजरअंदाज कर दिया गया। प्रयोग के दिन से पहले, चूहों को अनुकूलन के लिए 8 मिनट के लिए निलंबित कर दिया गया था।
2.5. Cistanche . पर मॉरिस वॉटर भूलभुलैया टेस्ट
वोरहीस एट अल के विवरण के अनुसार जल भूलभुलैया परीक्षण किया गया था। [25–27] चाइनीज एकेडमी ऑफ मेडिकल साइंसेज द्वारा विकसित डिवाइस का उपयोग करना। पानी से भरा एक गोलाकार पूल (150 सेमी व्यास) (26 ± 1 डिग्री; रिम ऊंचाई (दीवार रिम से पानी की सतह की दूरी): 10 सेमी) का उपयोग किया गया था, गोलाकार बचाव मंच (व्यास: 11 सेमी; प्लेटफार्म केंद्र बिंदु और पूल के बीच की दूरी दीवार: 27 सेमी) पानी की सतह से 1-1.5 सेमी नीचे डूबा हुआ था, और परावर्तन से बचने के लिए परीक्षण क्षेत्र को अप्रत्यक्ष प्रकाश (50 ± 10 लक्स) से रोशन किया गया था। चार प्रारंभ स्थानों का उपयोग किया गया था, एन, एस, ई, और डब्ल्यू। स्थानिक सीखने के परीक्षण के लिए, जानवरों को निश्चित प्रारंभ स्थान पर 9-11 दिनों पर प्रतिदिन प्रशिक्षित किया गया था। भागने की विलंबता अवधि को चूहों की स्थानिक स्मृति और सीखने की क्षमता को प्रदर्शित करने के लिए मापा जाता है। यदि चूहों को मंच पर नहीं मिला या चढ़ नहीं पाया, तो चूहों को मंच पर ले जाया जाएगा और 10 एस के लिए रुकेंगे। 60 सेकेंड तक आराम करने के बाद प्रशिक्षण का अगला सत्र शुरू किया जाएगा। पिछले स्थानिक शिक्षण परीक्षण से प्राप्त डेटा को मोल्डिंग के लिए आधार मान के रूप में उपयोग किया गया था। 23-28 दिनों में, स्थान नेविगेशन परीक्षण और स्थानिक जांच की गई। स्थान नेविगेशन परीक्षण 6 दिनों तक चला और दोपहर 1 बजे लिया गया, जानवरों को उनके सिर के साथ पूल की दीवार की दक्षिणावर्त दिशा में पानी में रखा गया, और विलंबता अवधि (2 मिनट के भीतर) दर्ज की गई। जहां नेविगेशन टेस्ट किया गया उसके बाद प्लेटफॉर्म को हटा दिया गया। चूहों को एक यादृच्छिक स्थान पर पूल की दीवार का सामना करने वाले उनके सिर के साथ पानी में रखा गया था, और गति निशान और आवृत्ति जो चूहों ने 2 मिनट के भीतर मंच पर तैरती थी, दर्ज की गई थी। मोशन ट्रेल को चूहों की गति के मल्टीफ़ंक्शन ऑटोनोमिक रिकॉर्डर (YLS -1A, यियान टेक्नोलॉजी, जिनान, चीन) द्वारा रिकॉर्ड किया गया था।
2.6. माओ गतिविधि का पता लगाना
MAO गतिविधि को MAO डिटेक्शन किट (A034, नानजिंग जियानचेंग बायोइंजीनियरिंग इंस्टीट्यूट, नानजिंग, चीन) का उपयोग करके मापा गया था और निर्माण के प्रोटोकॉल के अनुसार पता लगाया गया था। मस्तिष्क के ऊतकों से समरूप प्राप्त किया गया था; 500μएल को 300 . के साथ मिलाया गया थाμएल एजेंट 1 और 300μएजेंट 2 का एल, 37 डिग्री पर 3 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया, और फिर क्रमिक रूप से 300 . के साथ जोड़ा गयाμएल, एजेंट 3 का, एजेंट 4 का 3 मिली, और 2 मिनट के लिए भंवर। प्रतिक्रिया मिश्रण 10 मिनट के लिए 3, 000 आरपीएम सेंट्रीफ्यूज किया गया था, और सतह पर तैरनेवाला का ऑप्टिक घनत्व 242 एनएम उत्तेजना प्रकाश का उपयोग करके पराबैंगनी और दृश्य स्पेक्ट्रम स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (लैम्ब्डा 25, पर्किनएल्मर, यूएसए) द्वारा निर्धारित किया गया था।
2.7. न्यूरोट्रांसमीटर और ACTH और CORT . की एंजाइम लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख
डोपामाइन (DA), नॉरपेनेफ्रिन (NE), और 5-हाइड्रॉक्सिट्रिप्टामाइन (5-HT) के लिए एंजाइम लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (ELISA) डिटेक्शन किट BLUE GENE, शंघाई से खरीदा गया था। एलिसा डिटेक्शन किट को कियुन बायोटेक, ग्वांगझू से खरीदा गया था।
प्रक्रियाएं इस प्रकार हैं: प्रयोग कमरे के तापमान पर किया गया था। 1-10 . पर कैप्चर एंटीबॉडी के साथ पीवीसी माइक्रोटिटर प्लेट के कुओं को कोट करेंμकार्बोनेट/बाइकार्बोनेट बफर (पीएच 9.6) में जी/एमएल एकाग्रता। प्लेट को सील करें और रात भर 4 डिग्री इनक्यूबेट करें; पीबीएस/ट्वीन के साथ प्लेट को 3 बार धोएं, और गैर-विशिष्ट बाध्यकारी साइटों को ब्लॉक सॉल्यूशन द्वारा अवरुद्ध किया जाता है; फिर प्लेट को पीबीएस/ट्वीन से 3 बार धोएं। मानक और नमूने ब्लॉकिंग सॉल्यूशन में पतला होते हैं और 100μl को प्लेट के कुएं में जोड़ा जाता है, और प्लेट को सील कर दिया जाता है और 1 घंटे के लिए 37 डिग्री पर इनक्यूबेट किया जाता है। 100 . जोड़ेंμएल पतला पता लगाने एंटीबॉडी और 1 घंटे के लिए 37 डिग्री पर प्लेट सेते हैं; प्लेट को पीबीएस/ट्वीन से 3 बार धोएं। 50 . जोड़ेंμएल रंग विकास समाधान और प्लेट को प्रकाश से दूर रखें और इसे कमरे के तापमान पर 15 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें; 50μएल स्टॉप बफर प्रतिक्रिया को रोकने के लिए जोड़ा जाता है। 30 मिनट में 405 एनएम पर सेट एक माइक्रोप्लेट रीडर के साथ प्रत्येक कुएं के लिए ऑप्टिकल घनत्व (ओडी) को मापें ।
2.8. सांख्यिकीय विश्लेषण
सभी डेटा को माध्य ± SEM (माध्य की मानक त्रुटि) के रूप में दर्शाया गया था, महत्वपूर्ण अंतर का विश्लेषण किया गया था t-टेस्ट या वन-वे एनोवा के बाद एसपीएसएस 16 का उपयोग करते हुए डंकन की मल्टीपल रेंज टेस्ट। 0, और समूहों के बीच अंतरP< 0.05 को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना गया।
