ऑटोरिएक्टिव टी कोशिकाओं की होमिंग और सूजन कोशिकाओं की घुसपैठ

कृपया संपर्क करेंoscar.xiao@wecistanche.comअधिक जानकारी के लिए

प्रायोगिक ऑटोइम्यून यूवाइटिस (ईएयू) मानव ऑटोइम्यून यूवाइटिस का एक पशु मॉडल है जो कि प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स और प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों में समवर्ती वृद्धि के साथ ऑटोइम्यून टी कोशिकाओं की घुसपैठ की विशेषता है। इस अध्ययन का उद्देश्य यह आकलन करना है कि क्या बीटा लुईस चूहों में ईएयू की प्रगति को नियंत्रित करता है। ईएयू को लगातार 9 दिनों तक इंटरफोटोरिसेप्टर रेटिनोइड-बाइंडिंग प्रोटीन (आईआरबीपी) और किसी वाहन या बीटाइन (100 मिलीग्राम / किग्रा) के मौखिक प्रशासन के साथ टीकाकरण के माध्यम से प्रेरित किया गया था। बलिदान के समय प्रायोगिक चूहों से तिल्ली, रक्त और रेटिना का नमूना लिया गया और टी सेल प्रसार परख, सीरोलॉजिकल विश्लेषण, वास्तविक समय पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के लिए उपयोग किया गया। टी सेल प्रसार परख से पता चला कि बीटाइन का आईआरबीपी एंटीजन के खिलाफ प्लीहा टी कोशिकाओं के प्रसार पर 9 दिन के बाद टीकाकरण में इन विट्रो परख में बहुत कम प्रभाव था। सीरोलॉजिकल विश्लेषण से पता चला है कि वाहन-उपचारित समूह की तुलना में बीटा-उपचारित समूह में सीरम सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज का स्तर बढ़ गया है।सिस्टैंच ट्यूबुलोसा अर्कईएयू के साथ चूहों के रेटिना में संवहनी कोशिका आसंजन अणु I और इंटरल्यूकिन -1 सहित प्रो-सूजन-संबंधी अणुओं के डाउनरेगुलेशन द्वारा बीटाइन के विरोधी भड़काऊ प्रभाव की पुष्टि की गई थी। हिस्टोपैथोलॉजिकल निष्कर्ष आयनित कैल्शियम-बाइंडिंग एडेप्टर अणु एल इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के साथ सहमत हुए, आगे यह सत्यापित करते हुए कि वाहन-उपचार समूह की तुलना में बीटा-उपचारित समूह में रेटिना और सिलिअरी निकायों में सूजन को काफी दबा दिया गया था। वर्तमान अध्ययन के परिणाम बताते हैं कि बीटाइन एंटी-ऑक्सीकरण और विरोधी भड़काऊ गतिविधियों के माध्यम से ईएयू को कम करने में शामिल है।

अधिक जानने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

मुख्य शब्द:विरोधी सूजन, विरोधी ऑक्सीकरण, बीटािन, प्रायोगिक ऑटोइम्यून यूवाइटिस, रेटिना

परिचय

ऑटोरिएक्टिव टी कोशिकाओं की होमिंग और ईएयू [6] में मोनोसाइट्स, ट्रिगर यूवाइटिस और रेटिनाइटिस जैसे भड़काऊ कोशिकाओं की घुसपैठ। ऑक्सीडेटिव तनाव [7] से गुजरने वाली ग्लियाल कोशिकाओं की सक्रियता के साथ सूजन से रेटिना क्षतिग्रस्त हो जाती है।

बीटाइन, जिसे ट्राइमेथिलग्लिसिन भी कहा जाता है (सीएच: एनओ :), फ्रक्टस लाइकिया से एक क्षारीय और गैर-विषैले प्राकृतिक पदार्थ है, और एक प्रतिनिधि एंटीऑक्सीडेंट पदार्थ [8] है। बीटाइन परमाणु कारक-केबी भागीदारी के माध्यम से परमाणु कारक-केबी भागीदारी के माध्यम से चूहों में उम्र से संबंधित सूजन में सुधार करता है, परमाणु कारक-उत्प्रेरण किनेज / आई कप्पा बी किनेज और माइटोजेन-सक्रिय प्रोटीन किनेसेस [9], मानव हृदय रोग, इंटरल्यूकिन (आईएल) सहित भड़काऊ साइटोकिन्स को दबाकर मानव हृदय रोग {{ 6}} और ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर-ए (टीएनएफ-ए) [10], और डेक्सट्रान सल्फेट सोडियम-प्रेरित कोलन ट्यूमरजेनिसिस [11]।सिस्टैंच ट्यूबुलोसा समीक्षा,इसके अलावा, बीटाइन ने डायबिटिक रेटिनाइटिस [12] के साथ चूहों में पैथोलॉजिकल एंजियोजेनेसिस / नवविश्लेषण को रोका और ग्लूकोमा के एक पशु मॉडल में दृश्य तीक्ष्णता बढ़ाने के लिए रेटिना गैंग्लियन कोशिकाओं की रक्षा की [13]। हालांकि, यूवेइटिस में बीटािन के प्रभावों के अंतर्निहित सटीक तंत्र के बारे में बहुत कम जानकारी है।

इस अध्ययन में, ईएयू को राहत देने में बीटाइन की प्रभावकारिता का मूल्यांकन किया गया था। हमने हिस्टोपैथोलॉजिकल परीक्षा और साइटोकाइन माप के आधार पर ईएयू में बीटाइन के विरोधी भड़काऊ प्रभाव की जांच की। इसके अलावा, ईएयू के साथ चूहों में एक एंटीऑक्सिडेंट के रूप में बीटाइन के विशिष्ट तंत्र का मूल्यांकन किया गया था।

सामग्री और तरीके

जानवरों

लुईस चूहों के दोनों लिंग (7 ~ 9 सप्ताह पुराने; ओरिएंट बायो इंक, ग्योंगगी-डो, कोरिया) को प्रयोगशाला स्थितियों (12- एच प्रकाश / अंधेरे चक्र, तापमान 23 ± 2 डिग्री) के तहत हमारी सुविधा में रखा गया था। जेजू नेशनल यूनिवर्सिटी (अनुमति संख्या: 2020-0012) के प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए दिशानिर्देशों का पालन करते हुए सभी प्रायोगिक प्रक्रियाएं की गईं। सभी पशु प्रोटोकॉल अंतरराष्ट्रीय कानूनों और एनआईएच नीतियों के अनुरूप हैं, जिनमें प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग (एनआईएच प्रकाशन संख्या 85-23, 1985, संशोधित 1996) शामिल हैं।

ईएयू का प्रेरण

गोजातीय इंटरफोटोरिसेप्टर रेटिनोइड-बाइंडिंग प्रोटीन (IRBP) (I mg / ml; PTARSVGAADGSS-WEGVGVVPDV, कोमाबायोटेक, सियोल, कोरिया गणराज्य) और फ्रायंड के पूर्ण सहायक (सीएफए) की समान मात्रा से बना मिश्रित पायस के 200 उल के साथ चूहों को प्रतिरक्षित किया गया था। ) मेरे साथ एमजी/एमएल माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस H37Ra (Difco Laboratories Inc., डेट्रायट, MI, USA) के साथ उनके हिंद अंगों के फ़ुटपैड पर पूरक।

प्रायोगिक समूह

EAU पर बीटाइन (Fig.1A) के प्रभावों का आकलन करने के लिए, चार प्रायोगिक समूहों को निम्नानुसार नामित किया गया था: सामान्य नियंत्रण (n=8); सीएफए नियंत्रण (एन =8); ईएयू प्लस वाहन (एन =8); और ईएयू प्लस बीटाइन (एन =8)। बीटाइन के चिकित्सीय प्रभाव का परीक्षण करने के लिए उपचार में खुराक (1 0 मिलीग्राम/किलोग्राम शरीर का वजन/दिन, बी2629, सिग्मा-एल्ड्रिच, सेंट लुइस, एमओ, यूएसए) को पिछले अध्ययन [14] के आधार पर चुना गया था। चूहों को मौखिक रूप से 9 दिन के बाद टीकाकरण से 9 दिन के बाद टीकाकरण तक बीटाइन के साथ इलाज किया गया था।

ऊतक तैयारी

टीकाकरण के 9 दिन बाद सीओ 2 गैस इनहेलेशन के माध्यम से गहरी संज्ञाहरण के तहत चूहों की बलि दी गई।सिस्टैंच यूकेहिस्टोपैथोलॉजिकल परीक्षा के लिए ऊतक पैराफिन मोम में एम्बेडेड थे और खंडित थे

एक माइक्रोटोम (आरएम 2135; लीका, नुस्लोच, जर्मनी) के साथ 5 um की मोटाई और हेमटॉक्सिलिन और ईओसिन से सना हुआ। सीरम विश्लेषण और रीयल-टाइम पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) विश्लेषण के लिए रक्त और रेटिना को -80 डिग्री पर संग्रहीत किया गया था।

टी सेल प्रसार परख

प्रत्येक समूह में जानवरों से प्लीहा मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं को अलग कर दिया गया और हमारे पिछले अध्ययन [15] में वर्णित अनुसार निलंबित कर दिया गया। फिर, कुओं में 10 ug/ml IRBP (अंतिम सांद्रण) मिलाया गया। IRBP के साथ उत्तेजना के 48 घंटे के बाद, कोशिकाओं को 'H-मिथाइल थाइमिडीन-विशिष्ट गतिविधि 42 Ci/mmol; 18 घंटे के लिए एमर्सहम, अर्लिंग्टन हाइट्स, आईएल, यूएसए)। फिर, थाइमिडीन निगमन को मापने के लिए कोशिकाओं को काटा गया।

सिस्टैन्च एंटी-एजिंग कर सकता है

सीरोलॉजिकल विश्लेषण

नमूने की तारीख पर चूहों की बलि दी गई, और हृदय के माध्यम से रक्त एकत्र किया गया। एक अपकेंद्रित्र (वीएस -5500 सीएफएन; विजन साइंटिफिक, डेजॉन, कोरिया गणराज्य) का उपयोग करके पूरे रक्त के नमूनों को सीरम और रक्त कोशिकाओं में अलग किया गया था। सीरम में सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज (एसओडी) गतिविधि का मूल्यांकन एसओडी किट (ab65354; Abcam, कैम्ब्रिज, यूके) का उपयोग करके किया गया था।

इम्युनोहिस्टोकैमिस्ट्री

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री उसी प्रोटोकॉल का उपयोग करके किया गया था जैसा कि हमारे पिछले अध्ययन [16] में वर्णित है। प्राथमिक एंटीबॉडी-आयनित कैल्शियम-बाइंडिंग एडेप्टर अणु (इबाल) (1: 1, 000; 019-19741, वाको प्योर केमिकल इंडस्ट्रीज, लिमिटेड, ओसाका, जापान), सीडी68 (ईडी1;1:800;एमसीए341,सेरोटेक,किडलिंगटन,यूके), और ग्लूटामाइन सिंथेटेस(जीएस)(1:5,000;एमएबी302,केमिकॉन इन -टेरनेशनल, टेमेकुला, सीए, यूएसए) का उपयोग क्रमशः माइक्रोग-लिया, मैक्रोफेज और मुलर सेल के लिए मार्कर के रूप में किया गया था।

रीयल-टाइम पीसीआर

सभी समूहों (n =5 प्रति समूह) में नेत्रगोलक में कुल RNA को TRIzol RNA आइसोलेशन रिएजेंट (लाइफ टेक्नोलॉजीज, थर्मो फिशर साइंटिफिक, कार्ल्सबैड, सीए, यूएसए) से अलग किया गया था, और सेलस्क्रिप्ट एम ऑल-इन का उपयोग करके सीडीएनए तैयार किया गया था। -एक 5X फर्स्ट स्टैंडर्ड सीडीएनए सिंथेसिस मास्टर मिक्स (सेलसेफ, ग्योंगगी-डो, कोरिया गणराज्य)। प्राइमरी जानकारी तालिका 1 में सूचीबद्ध है। पीसीआर को एमआईसी साइक्लर (बीएमएस, क्वींसलैंड, ऑस्ट्रेलिया) के साथ 2x एसवाईबीआर ग्रीन (फिलेकोरिया, सियोल, कोरिया गणराज्य) और निम्नलिखित कार्यक्रम का उपयोग करके किया गया था: विकृतीकरण के 55 चक्र (5 एस, 95) डिग्री), एनीलिंग (20 एस, 60 डिग्री), और विस्तार (10 एस, 72 डिग्री)।

वेस्टर्न ब्लॉट विश्लेषण

पश्चिमी धब्बा विश्लेषण उसी प्रोटोकॉल द्वारा किया गया था जैसा कि हमारे पिछले अध्ययन [16] में वर्णित है।सिस्टैंच विर्कुंगकेल्च-जैसे ECH- संबद्ध प्रोटीन 1 (Keap1)(1:1,000;abl19403,abcam,MA,USA), और परमाणु कारक एरिथ्रोइड-2-पुनः संबंधित कारक2(Nrf2) सहित प्राथमिक एंटीबॉडी )(1:1,000;sc-722,सांता क्रूज़, सीए, यूएसए)।

सांख्यिकीय विश्लेषण

सभी मापों को तीन स्वतंत्र प्रयोगों के औसत के रूप में सूचित किया जाता है। सभी मानों को माध्य (SEM) की माध्य मानक त्रुटि के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। कई तुलनाओं के लिए छात्र-न्यूमैन-केल्स पोस्टहॉक परीक्षण के बाद विचरण के एक-तरफ़ा विश्लेषण का उपयोग करके परिणामों का विश्लेषण किया गया। एक पी-मान<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" significance.="" immunostaining="" was="" analyzed="" semi-quantitatively="" based="" on="" the="" positive="" areas="" in="" the="" photographs="" using="" imagej="" software="" (national="" institutes="" of="" health,="" bethesda,="" md,="" usa).eau="" was="" histopathologically="" evaluated="" using="" a="" method="" modified="" from="" a="" previous="" study="" [17].="" antibody-positive="" areas="" were="" measured="" as="" follows:(1)three="" different="" sections="" from="" each="" rat="" (n="3" animals="" per="" group)="" were="" used;="" then,="" (2)="" the="" percentage="" of="" the="" stained="" area="" [(positive="" area/total="" area)x100(%)]="" was="" calculated.="" the="" total="" area="" included="" all="" layers="" of="" the="" retina.="" these="" results="" are="" presented="" as="" the="">

परिणाम

Betaine had no immunomodulatory function in EAU The T cell proliferation assay was performed to determine whether betaine affected the proliferation of IRBP-specific T cells (Fig.1B). No significant changes were observed between the EAU-induced groups in medium only and those that were IRBP-stim-ulated (medium only, p>0.05 vs.EAU+Vehicle; IRBP stimulation, p>0.05 बनाम ईएयू प्लस वाहन)। इन आंकड़ों से संकेत मिलता है कि बीटाइन आईआरबीपी-विशिष्ट टी कोशिकाओं या उनकी ऑटो-रिएक्टिविटी के साथ शामिल नहीं था।

ईएयू में बीटाइन अपग्रेडेड सीरम एसओडी स्तर

हमने ऑक्सीडेटिव संशोधन के मार्कर के रूप में एसओडी का उपयोग करते हुए, सीरम में ऑक्सीडेटिव क्षति का मूल्यांकन किया। सामान्य और सीएफए समूहों के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं देखा गया। सामान्य नियंत्रण और सीएफए समूहों के स्तरों की तुलना में ईएयू प्लस वाहन समूह में एसओडी गतिविधि में काफी कमी आई है। बीटािन उपचार ने एसओडी गतिविधि के स्तर को सामान्य नियंत्रण और सीएफए समूहों (छवि 2) के स्तर पर काफी हद तक बहाल कर दिया। यह परिणाम इंगित करता है कि बीटा उपचार ने ईएयू के साथ चूहों में ऑक्सीडेटिव तनाव को दबा दिया।

बीटाइन ने ईएयू-प्रेरित चूहों के सिलिअरी बॉडी और रेटिना में इबल-पॉजिटिव कोशिकाओं की घुसपैठ को कम किया

रक्त वाहिकाओं की प्रचुरता के कारण सिलिअरी बॉडी मुख्य भड़काऊ सेल घुसपैठ स्थल है [18]। सामान्य और सीएफए समूहों (छवि 3 ए, 3 बी) में सिलिअरी निकायों में केवल कुछ गोल-प्रकार की कोशिकाओं का पता लगाया गया था, जबकि ईएयू-प्रेरित समूहों (छवि 3 सी में तीर) में कुछ गोल-प्रकार की कोशिकाओं की घुसपैठ की पुष्टि की गई थी। , 3डी)। सामान्य (Fig.3E) और CFA (Fig.3F) समूहों ने लगातार इबल इम्युनोएक्टिविटी के लिए देखे गए समान परिणाम प्रदर्शित किए। ईएयू प्लस व्हीकल और ईएयू प्लस बीटाइन समूहों (अंजीर 3 जी, 3 एच में एरोहेड्स) में इबल-पॉजिटिव इम्युनोएक्टिविटी बढ़ गई। हालांकि, ईएयू प्लस वाहन समूह (छवि 3आई) की तुलना में ईएयू प्लस बीटाइन समूह में इबल-पॉजिटिव कोशिकाओं की संख्या में काफी कमी आई है। हमने सिलिअरी बॉडी में भड़काऊ सेल घुसपैठ के सटीक स्थान का मूल्यांकन करने के लिए एक और दृष्टिकोण के रूप में ईडीआई के स्थानीयकरण का विश्लेषण किया। ईडी 1- सामान्य (छवि 3 जी) और सीएफए (छवि 3 के) में सकारात्मक कोशिकाओं का शायद ही कभी पता चला था। ) समूह। इसके विपरीत, ईएयू प्लस वाहन और ईएयू प्लस बीटाइन समूहों में कई ईडी 1- सकारात्मक कोशिकाओं का पता चला था (छवि 3 एल, 3 एम में डबल एरोहेड)।साइट्रस बायोफ्लेवोनोइड्सईडी 1- सकारात्मक कोशिकाओं की संख्या के एक अर्ध-मात्रात्मक विश्लेषण ने पुष्टि की कि बीटा उपचार ने ईएयू-प्रेरित चूहों के सिलिअरी निकायों में भड़काऊ कोशिकाओं की घुसपैठ को दबा दिया।

इसके बाद, हमने रेटिना (चित्र 4) में हिस्टोपैथोलॉजिकल परिवर्तनों की जांच की। ईएयू के साथ रेटिना में कुछ भड़काऊ कोशिकाओं का पता चला था, लेकिन सामान्य और सीएफए चूहे के रेटिना में नहीं (छवि 4 ए ~ 4 डी)। ईएयू [17] की गंभीरता के अनुसार घावों को हिस्टोपैथोलॉजिकल रूप से स्कोर किया गया था, जिससे रेटिना की सूजन (छवि 4 ई) से राहत मिलती है। माइक्रोग्लियल और मुलर सेल सक्रियण, जो रेटिना की सूजन को दर्शाता है, की पुष्टि क्रमशः वैश्विक (छवि 4 एफ ~ 4 आई) और जीएस इम्युनोरेक्टिविटी (छवि 4 के ~ 4 एन) के आधार पर की गई थी। माइक्रोग्लिया में इबाल का स्थानीयकरण सामान्य और सीएफए समूहों (क्रमशः अंजीर। 4F, 4G में तीर के निशान) में बहुत दुर्लभ था। माइक्रोग्लिया की सक्रियता ईएयू चूहों (Fig.4H में एरोहेड्स) में बीटा उपचार (Fig.4I, 4J) द्वारा बाधित थी। जीएस-पॉजिटिव इम्युनोएक्टिविटी परिणाम रेटिना में वैश्विक के समान था (चित्र 4K ~ 4N)। ईएयू प्लस वाहन समूह में सक्रिय मुलर कोशिकाओं में जीएस-इम्यूनोरेक्टिविटी स्तर कम था (चित्र। 40)।

ईएयू में बीटाइन ने आसंजन अणु और प्रो-भड़काऊ मध्यस्थों को दबा दिया

इसके बाद, हमने वास्तविक समय पीसीआर (छवि 5 ए) का उपयोग करके आसंजन अणु अभिव्यक्ति की जांच की। EAU प्लस बीटाइन समूह में संवहनी कोशिका आसंजन अणु 1 (VCAM1) mRNA स्तर में तेज कमी देखी गई (p<0.05 vs.eau+vehicle).="" the="" mrna="" levels="" of="" serpina3n,interleukin-1β(il-1β),="" tumor="" necrosis="" factor-alpha="" (tnf-a),="" inducible="" nitric="" oxide="" synthase(inos),="" and="" cyclooxygenase="" at-2(cox-2)as="" pro-inflammatory="" mediators,="" were="" assessed="" to="" confirm="" the="" inflammatory="" condition="" (fig.="" 5b).="" the="" mrna="" levels="" of="" serpina3n,="" il-1β,="" tnf-a,="" cox-2="" were="" significantly="" downregulated="" in="" the="" eau+betaine="" group="" compared="" with="" that="" of="" vehicle-treated="" eau="" group="" (fig.5b).="" these="" results="" indicate="" that="" the="" betaine="" treatment="" suppressed="" the="" upregulation="" of="" pro-inflammatory="">

बीटाइन ने एंटीऑक्सीडेंट एंजाइम उत्प्रेरित (कैट) और SODinEAU को अपग्रेड किया

सीरम में ऑक्सीडेटिव क्षति स्तरों के अध्ययन ने हमें CAT, SOD1, SOD2 और SOD3 (Fig.5C) सहित एंटीऑक्सिडेंट एंजाइमों की एंटीऑक्सिडेंट प्रतिक्रिया स्थिति की जांच करने के लिए प्रेरित किया। हमने ईएयू प्लस व्हीकल ग्रुप की तुलना में ईएयू प्लस बीटाइन ग्रुप के नेत्रगोलक में कैट, एसओडी1, एसओडी2 और एसओडी3 के काफी अपग्रेडेड एक्सप्रेशन लेवल देखे।

Betaine ने Keapl-Nrf2 पाथवे को सक्रिय किया

बीटाइन के एंटी-ऑक्सीडेटिव प्रभाव का समर्थन करने के लिए, Keapl-Nrf2 मार्ग की जांच की गई (चित्र 6)। कीपल का प्रोटीन स्तर (0.75±0.05 गुना परिवर्तन,p<0.05,fig.6a)and nrf2(0.79±0.04fold=""><0.05,fig.6b)in eau+vehicle="" group="" were="">

सामान्य नियंत्रण की तुलना में। दूसरी ओर, Keapl और Nrf2 ने या तो 1.46 ± 0 दिखाया। 00 गुना परिवर्तन या 1.13 ± 0। 34 गुना परिवर्तन EAU प्लस वाहन समूह (p<0.01 and=""><0.001,>

बहस

यह पहला अध्ययन है जिसमें बताया गया है कि बीटाइन एंटी-इंफ्लेमेटरी और एंटी-ऑक्सीडेंट प्रभावों के माध्यम से ईएयू रोगजनन की प्रगति को कम करता है, लेकिन टी सेल प्रसार (चित्र 7 में योजनाबद्ध चित्रण) को दबाकर नहीं।

ऑटोइम्यून बीमारियों में बीटािन का नियामक प्रभाव, जैसा कि ईएयू, ऑटोइम्यून बीमारी के एक प्रोटोटाइप का उपयोग करके प्रमाणित किया गया है, को ऑक्सीडेटिव तनाव और प्रो-भड़काऊ मध्यस्थों की कमी के कारण माना जाता है, लेकिन टी सेल प्रसार नहीं, बीटाइन द्वारा [19]। इसी तरह, वर्तमान अध्ययन से पता चला है कि ईएयू मॉडल में टी सेल प्रसार और संस्कृति सतह पर तैरनेवाला में साइटोकाइन प्रोफाइल पर बीटािन का बहुत कम प्रभाव था, यह सुझाव देता है कि बीटा ईएयू में ऑटोइम्यून टी कोशिकाओं के प्रसार की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को प्रभावित नहीं करता है। यूविया ईएयू में एक लक्षित अंग है। यूवीए और रेटिना लसीका के बिना प्रतिरक्षात्मक रूप से पृथक अंग हैं [20]। ईएयू में ऑटोइम्यून टी कोशिकाओं पर सिलिअरी और ऑप्थेल्मिक धमनियों [21] की एक शाखा के माध्यम से आक्रमण किया जाता है। ऑक्सीडेटिव तनाव भड़काऊ प्रतिक्रिया की प्रगति के लिए महत्वपूर्ण संकेत है और बढ़ी हुई प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियां एंडोथेलियल डिसफंक्शन और ऊतक की चोट का कारण बनती हैं [22]। अशांत एंडोथेलियल कोशिकाएं भड़काऊ कोशिकाओं और भड़काऊ अणुओं [22] के पारित होने को बढ़ावा देती हैं। यूवीए में भड़काऊ मध्यस्थों और कोशिकाओं को रेटिनल पिगमेंट एपिथेलियल कोशिकाओं में ट्रिगर किया जाता है, जो रॉड और शंकु कोशिकाओं और पिगमेंटेड एपिथेलियल कोशिकाओं के बीच के जंक्शनों को परेशान करता है, जिससे एक अलग रेटिना [23] हो जाता है। सिलिअरी बॉडी ओकुलर सूजन के लिए एक प्रवेश स्थल है। विशिष्ट रेटिनल सूजन निवासी माइक्रोग्लिया की सक्रियता और रक्त-रेटिना बाधा के टूटने के कारण भड़काऊ कोशिकाओं की घुसपैठ में शामिल है [24]। ब्रेन ट्यूमर [25], एक्सोटॉमी [26], और वायरस संक्रमण [27] सहित न्यूरोपैथोलॉजिकल स्थितियों के तहत, सक्रिय मैक्रोफेज और माइक्रोग्लिया को इबाल द्वारा प्रतिष्ठित किया गया था। इसके अलावा, सक्रिय निवासी माइक्रोग्लिया रेटिना अपक्षयी रोगों में होने वाले रोग परिवर्तनों में शामिल होते हैं और भड़काऊ मध्यस्थों को छोड़ते हैं जो रोग प्रक्रिया को तेज करते हैं [28]। इन परिणामों से पता चलता है कि बीटािन यूविया और सिलिअरी बॉडी, ईएयू के मुख्य लक्ष्यों में विरोधी भड़काऊ प्रभाव डालता है, और सीरम में ऑक्सीडेटिव तनाव को कम कर सकता है। हालांकि, सटीक तंत्र का अध्ययन किया जाना बाकी है।

सक्रिय माइक्रोग्लिया रेटिना अपक्षयी स्थितियों [29] के तहत प्रो-भड़काऊ साइटोकिन्स का मुख्य स्रोत हैं। आईएल और टीएनएफ सहित प्रो-भड़काऊ साइटोकिन्स, ओकुलर सूजन [30] और रेटिनाइटिस [6,29] से दृढ़ता से जुड़े हुए हैं। माइक्रोग्लिया के अलावा, मुलर कोशिकाएं रेटिना में होने वाली सभी रोग संबंधी घटनाओं के तहत सक्रिय होती हैं [31]। सक्रिय मुलर कोशिकाएं सूजन से संबंधित अणुओं को संश्लेषित और मुक्त करके रेटिना में न्यूरोइन्फ्लेमेटरी प्रभाव में शामिल होती हैं [31]। हम मानते हैं कि बीटा माइक्रोग्लिया और मुलर कोशिकाओं की सक्रियता को दबाकर ईएयू-प्रेरित चूहों में भड़काऊ प्रतिक्रिया को कम करता है। VCAMl का अपगमन भड़काऊ कोशिकाओं [32] की घुसपैठ में अत्यधिक शामिल है। VCAMl को लेट एंटीजन -4 [3] के साथ क्रॉस-टॉक के माध्यम से CD4 Tlym-phagocytes में तेजी से बढ़ाया जाता है। इसके अलावा, Serpina3n, एक एंजाइम जो आरंभ करता है सूजन [34], म्यूलर कोशिकाओं, एस्ट्रोसाइट्स, और प्रकाश-क्षतिग्रस्त रेटिनस [35] के रेटिनल पिगमेंट एपिथेलिया में पाया गया है और बिगड़ा हुआ शंकु कोशिकाओं के साथ एनआरएल’माउस रेटिना में महत्वपूर्ण रूप से परिवर्तनशील स्तर है [36]। EAU में Serpina3n बढ़ गया है गंभीर रेटिनल सूजन वाले चूहे लेकिन बीटा-उपचारित ईएयू समूह में काफी कमी आई। न्यूरोइन्फ्लेमेशन [34] के साथ सिज़ोफ्रेनिया के लिए एक समान खोज की सूचना दी गई है, क्योंकि murine Serpina3n मानव Serpina3 [37] का एक ऑर्थोलॉग है। इसके अलावा, उच्च फ्रुक्टोज-प्रेरित रेटिना की चोट [38] में IL -1 में वृद्धि देखी गई। हम मानते हैं कि बीटािन का विरोधी भड़काऊ प्रभाव EAU- प्रेरित चूहों में VCAM1, Serpina3n, और IL -1 के डाउन-रेगुलेशन से जुड़ा है। Keep-Nrf2 मार्ग का उपयोग ऑक्सीडेटिव तनाव [39] की निगरानी के लिए किया जाता है। बीटाइन को एक एंटी-ऑक्सीडेंट अणु के रूप में जाना जाता था, जो एसिटामिनोफेन-प्रेरित तीव्र यकृत चोट मॉडल [40] में केपल-एनआरएफ 2 मार्ग से जुड़ा था। इसके अतिरिक्त, हेपेटिक जीन अभिव्यक्ति प्रोफाइलिंग को 3H -1, 2-डाइथियोल -3- थायोन उपचार के बाद किया गया था, जिसमें कार्सिनोजेन्स के विषहरण को बढ़ाने और नियोप्लासिया [4] से बचाने की भूमिका थी। इस रूपरेखा के परिणाम से पता चला कि Keap1-Nrf2 ने nrf2-आश्रित 3H-1,2-dithiole-3-thion-inducible जीन को AF033381 सहित विनियमित किया। बीटाइन होमोसिस्टीन मिथाइल ट्रांसफरेज़, बढ़ा दिया गया था, और विषहरण और एंटी-ऑक्सीकरण में शामिल था [41]। ईएयू में भड़काऊ प्रतिक्रिया टी कोशिकाओं और मैक्रोफेज [42] जैसी भड़काऊ कोशिकाओं की घुसपैठ से प्रेरित थी, और ऑक्सीडेटिव तनाव का उत्पादन, विशेष रूप से प्रारंभिक चरण के फोटोरिसेप्टर माइटोकॉन्ड्रिया में [43]। इन परिणामों के अनुसार, बीटािन उपचार ऑक्सीडेटिव तनाव के नियमन के लिए एक महत्वपूर्ण मार्ग के रूप में Keap1-Nrf2 मार्ग के मॉड्यूलेशन द्वारा EAU- प्रेरित ऊतक क्षति को दूर करने के लिए एक उम्मीदवार था।

रेडिकल-प्रेरित चोट मॉडल [44] में बीटाइन के एंटीऑक्सीडेंट प्रभाव का व्यापक रूप से मूल्यांकन किया गया है। लेवोडोपा-प्रेरित ऑक्सीडेटिव-क्षति मस्तिष्क में, बीटािन को कैट और एसओडी के स्तर तक बढ़ाया गया था, जो प्रतिनिधि एंटीऑक्सिडेंट एंजाइम हैं [4]। SOD1, SOD2, और SOD3 विभिन्न तंत्रों द्वारा सक्रिय होते हैं और क्रमशः साइटोप्लाज्म, माइटोकॉन्ड्रिया और बाह्य मैट्रिक्स में स्थानीयकृत होते हैं [45]। बीटाइन, एक एंटी-ऑक्सीडेटिव अणु के रूप में, ऑक्सीडेटिव क्षति को कम करने में शामिल है [46]। कम ऑक्सीडेटिव तनाव को सूजन को हल करने के लिए बढ़ाया गया था, जो कि अल्जाइमर रोग, पार्किंसंस रोग और मल्टीपल स्केलेरोसिस [47] सहित कई बीमारियों में इबल-पॉजिटिव मैक्रोफेज / माइक्रोग्लिया द्वारा इंगित किया गया था। ईएयू प्लस वाहन समूह की तुलना में बीटा उपचार को ऑक्सीडेटिव तनाव मार्कर के एमआरएनए स्तरों तक अपग्रेड किया गया था। इस परिणाम का तात्पर्य है कि बीटा उपचार ने चूहे ईएयू मॉडल के प्रतिरक्षा अंगों में टी सेल प्रसार में हस्तक्षेप किए बिना संचार प्रणाली में ऑक्सीडेटिव तनाव को कम कर दिया।

सामूहिक रूप से, वर्तमान अध्ययन से पता चलता है कि बीटाइन ईएयू-प्रेरित चूहों के रेटिना और सिलिअरी बॉडीज में सूजन को कम कर सकता है, संभवतः एंटी-ऑक्सीडेशन और एंटी-इंफ्लेमेशन मैकेनिज्म के माध्यम से।

यह लेख https://doi.org/10.5607/en21011 . से लिया गया है