आईजीएएन मरीजों में रेनल फाइब्रोसिस प्रगति में रेनल मैक्रोफेज, एआईएम, और टीजीएफ-बी 1 अभिव्यक्ति की भूमिका

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उद्देश्य: एलजीएएन रोगियों के गुर्दे में मैक्रोफेज, एएलएम, और टीजीएफ- 1 की अभिव्यक्ति का विश्लेषण करने के लिए, और एलजीएएन रोगियों में गुर्दे की फाइब्रोसिस की प्रगति में मैक्रोफेज, एएलएम और टीजीएफ की भूमिका का पता लगाने के लिए - 1 .

तरीकों: 40 lgAN रोगियों के वृक्क ऊतक के पैराफिन नमूनों को प्रेक्षण समूह के रूप में चुना गया था। उसी समय, नेफरेक्टोमी द्वारा इलाज किए गए 11 रोगियों के सामान्य गुर्दे के ऊतकों के पैराफिन नमूनों को सामान्य नियंत्रण समूह के रूप में चुना गया था। हमने इम्यूनोहिस्टोकेमिकल धुंधला और / या इम्यूनोफ्लोरेसेंस द्वारा मैक्रोफेज के वितरण और एएलएम और टीजीएफ - 1 की अभिव्यक्ति का अवलोकन किया।

परिणाम: एलजीएएन रोगियों में एमओ, एम1 और एम2 मैक्रोफेज की संख्या में वृद्धि पाई जा सकती है। M0 मैक्रोफेज मुख्य रूप से M2 मैक्रोफेज की ओर ध्रुवीकृत होते हैं। AlM और TGF - 1 की अभिव्यक्ति NC की तुलना में lgAN रोगियों में काफी अधिक थी। M2 मैक्रोफेज, AlM, और TGF - 1 सीरम क्रिएटिनिन और 24- घंटे प्रोटीनमेह के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध थे, लेकिन eGFR के साथ नकारात्मक रूप से सहसंबद्ध थे। M2 मैक्रोफेज, AlM, और TGF - 1 को फाइब्रोटिक क्षेत्र के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध किया गया था।

निष्कर्ष: M2 मैक्रोफेज, AlM, और TGF- 1 lgAN फाइब्रोसिस की प्रक्रिया में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं, और तीनों एक दूसरे को प्रभावित करते हैं।

कीवर्ड: IgAN, रीनल फाइब्रोसिस, मैक्रोफेज, AlM, TGF- 1

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परिचय

IgA नेफ्रोपैथी (IgAN) एक सामान्य प्रणालीगत प्रतिरक्षा ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस है, जो मेसेंजियल क्षेत्र में मेसेंजियल सेल प्रसार और मेसेंजियल मैट्रिक्स विस्तार (1,2) के साथ IgA या IgA- आधारित प्रतिरक्षा परिसरों के जमाव की विशेषता है। हालांकि IgAN धीरे-धीरे आगे बढ़ता है, 50 प्रतिशत तक रोगी अंतिम चरण में विकसित होते हैं, और यह मुख्य प्रकार है जो ESRD (3) का कारण बनता है।रेनल फाइब्रोसिसकी प्रगति में सामान्य मार्ग हैगुर्दे की पुरानी बीमारी(सीकेडी)(4)। हाल के वर्षों में, यह पाया गया है कि मैक्रोफेज, मैक्रोफेज, एपोप्टोसिस इनहिबिटर ऑफ मैक्रोफेज (एआईएम), और ट्रांसफॉर्मिंग ग्रोथ फैक्टर - 1 (टीजीएफ - 1) सभी रीनल फाइब्रोसिस में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।

मैक्रोफेज कई किडनी रोगों के विकास में शामिल हैं। कुछ विद्वानों का मानना ​​है कि वृक्क में मैक्रोफेज के जमाव को वृक्क रोगों के विकास और पूर्वानुमान का न्याय करने के लिए एक महत्वपूर्ण संकेतक के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। मैक्रोफेज को M0, M1 और M2 प्रकार(5) में विभाजित किया गया है। एमएल मैक्रोफेज प्रकार की भड़काऊ प्रतिक्रिया को बढ़ावा देते हैं और आईएल -1, आईएल -6, आईएल -12, टीएनएफ-, प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) जैसे भड़काऊ कारकों को स्रावित करके बैक्टीरिया या ट्यूमर कोशिकाओं को हटाते हैं। और नहीं। हालांकि, अगर सूजन बनी रहती है, तो यह आगे फैल जाएगी और अंततः ऊतक फाइब्रोसिस (6) को जन्म देगी। रोगजनक सूक्ष्मजीवों और एलर्जी के उत्तेजना का विरोध करने के लिए Arginase 1(Argl), Chitinase-like 3 प्रोटीन (Yml), और हाइपोक्सिया-प्रेरित माइटोजेनिक कारक (HIMF) को व्यक्त करके, M2 मैक्रोफेज भड़काऊ प्रतिक्रिया को सीमित करते हैं और I अनुकूली प्रकाररोग प्रतिरोधक शक्ति, अवशेषों को खत्म करना, एंजियोजेनेसिस को बढ़ावा देना, एक विरोधी भड़काऊ भूमिका निभाना, सेल एपोप्टोसिस को कम करना, सेल प्रसार को बढ़ावा देना और ऊतक मरम्मत को बढ़ावा देना (7,8)। वास्तव में, किस प्रकार का मैक्रोफेज IgAN के गुर्दे फाइब्रोसिस में एक प्रमुख भूमिका निभाता है, यह अभी भी विवादास्पद है। . अध्ययनों से पता चला है कि सीडी68 और सीडी80 को एमओ और एम1 मैक्रोफेज(9) के विशिष्ट सतह मार्कर के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है; CD163 M2 मैक्रोफेज में व्यक्त एक अत्यधिक विशिष्ट मैननोज रिसेप्टर है, जिसे M1 मैक्रोफेज में व्यक्त नहीं किया जाता है। इस प्रकार CD68, CD80, और CD163 को विभिन्न प्रकार के मैक्रोफेज (10-12) की उपस्थिति का प्रतिनिधित्व करने के लिए मार्कर के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।

इसके अलावा, एआईएम को मूल रूप से मैक्रोफेज के एक गुप्त प्रोटीन के रूप में खोजा गया था और इस प्रकार इसे स्पा (13) नाम दिया गया था। सफेद रक्त कोशिकाओं पर इसके एंटीपैप्टोटिक प्रभाव (14), या सीडी 5 एल के मानव जीनोम संगठन नामकरण के अनुसार बाद में इसे एआईएम नाम दिया गया था। एआईएम में कार्यों की एक विस्तृत श्रृंखला है और ल्यूकोसाइट प्रवासन संतुलन, चयापचय, और को विनियमित करने में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता हैभड़काऊजवाब। कई प्रकार के साहित्य ने उल्लेख किया है कि एआईएम प्रतिरक्षा-भड़काऊ प्रतिक्रिया (15), लिपिड होमियोस्टेसिस, गैर-अल्कोहल में भूमिका निभाता हैजिगर की बीमारी(16), ऑटोइम्यून रोग, एथेरोस्क्लेरोसिस (17), और अन्य रोग। हाल के वर्षों में, गुर्दे की बीमारी में एआईएम की भूमिका पर कई अध्ययन हुए हैं। उदाहरण के लिए, तदाशी उरमत एट अल। (18) उच्च रक्तचाप से ग्रस्त माउस मॉडल में पाया गया कि एआईएम और ऑक्सएलडीएल (ऑक्सीडाइज्ड लो-डेंसिटी लिपोप्रोटीन, जिसमें एआईएम की अभिव्यक्ति को विनियमित करने का प्रभाव होता है) की अभिव्यक्ति को कम करने से गुर्दे के ऊतकों के फाइब्रोसिस को प्रभावी ढंग से कम किया जा सकता है। इसी तरह, मेगुमी ओशिमा एट अल। (19) पाया गया कि गुर्दे के ऊतकों में एआईएम और मैक्रोफेज के जमाव का क्षेत्र सकारात्मक रूप से सीकेडी के रोगियों में प्रोटीनमेह और ईजीएफआर की कमी के साथ सहसंबद्ध था। उपरोक्त सभी अध्ययनों से पता चलता है कि एआईएम रीनल फाइब्रोसिस की प्रक्रिया में भी महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। हालांकि, वर्तमान में विपरीत परिणाम मौजूद हैं: यह तीव्र गुर्दे की चोट के मॉडल में पाया गया है कि एआईएम रीनल ट्यूबलर एपिथेलियल कोशिकाओं (20) द्वारा एपोप्टोटिक सेल मलबे को हटाने को बढ़ावा दे सकता है।

वर्तमान में, कई अध्ययनों ने गुर्दे की बीमारी में मैक्रोफेज, एआईएम और टीजीएफ- 1 की भूमिका के बारे में विस्तार से बताया है, लेकिन आईजीएएन की प्रगति, फाइब्रोसिस प्रक्रिया और इन तीनों के बीच संबंध पर कुछ अध्ययन हैं। तीन। यदि IgAN फाइब्रोसिस की प्रगति के रोगजनन को स्पष्ट किया जा सकता है, तो यह IgAN के उपचार और रोग का निदान करने के लिए एक नई खिड़की खोल सकता है। IgAN फाइब्रोसिस की प्रगति में मैक्रोफेज, AIM, और TGF- 1 की भूमिका की जांच करने के लिए, हमने IgAN रोगियों के गुर्दे के ऊतकों में मैक्रोफेज की घुसपैठ और AIM और TGF की अभिव्यक्ति स्तर और विशेषताओं का पता लगाया- 1 और फिर IgAN रोगियों के तीन और नैदानिक ​​​​संबंधित संकेतकों और वृक्क फाइब्रोसिस क्षेत्र के बीच संबंधों का विश्लेषण किया।

विधि

विषयों

सुबेई पीपल हॉस्पिटल से गुर्दे की बायोप्सी के माध्यम से पुष्टि किए गए IgAN वाले चालीस रोगियों को भर्ती किया गया था। पुरानी प्रणालीगत बीमारियों (सिस्टमिक ल्यूपस एरिथेमेटोसस, डायबिटीज मेलिटस, हेनोच-शोनेलिन पुरपुरा, लीवर सिरोसिस, आदि) के रोगी, (ग्लूकोकॉर्टिकॉइड, इम्यूनोसप्रेशन, एसीईआई, एआरबी, आदि का उपचार), या उन्नत गुर्दे की विफलता (अनुमानित ग्लोमेरुलर निस्पंदन दर) eGFR) 15ml/मिनट/1.73m2 से कम या उसके बराबर) को बाहर रखा गया था। eGFR स्तरों की गणना गुर्दे की बीमारी (MDRD) समीकरण में आहार के संशोधन का उपयोग करके की गई थी। नैदानिक ​​जानकारी (लिंग, आयु, वजन, रोग इतिहास) और प्रयोगशाला डेटा ( सीरम एल्ब्यूमिन, सीरम क्रिएटिनिन, मूत्र लाल रक्त कोशिका, 24 घंटे मूत्र प्रोटीन, और ईजीएफआर स्तर) बायोप्सी के समय एकत्र किए गए थे। गुर्दे के ट्यूमर से सटे हिस्टोलॉजिकल रूप से सामान्य गुर्दे के ऊतकों को नियंत्रण (एन =11) के रूप में इस्तेमाल किया गया था। सभी विषयों से लिखित सूचित सहमति प्राप्त की गई थी और अध्ययन को सुबेई पीपल हॉस्पिटल की आचार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था।

इम्यूनोफ्लोरेसेंट और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल धुंधला हो जाना

मानव गुर्दे के ऊतक वर्गों का विश्लेषण इम्यूनोहिस्टोकेमिकल और इम्यूनोफ्लोरेसेंट धुंधला के साथ किया गया था। सभी मानव गुर्दे के ऊतक वर्गों पर मेसन धुंधला हो गया था। वर्गों को हटा दिया गया और 3 प्रतिशत हाइड्रोजन डाइऑक्साइड के साथ इलाज किया गया। प्रतिजन पुनर्प्राप्ति और अवरोधन के बाद, मानव CD68 एंटीबॉडी (पतला 1:600, Abcam), मानव CD80 एंटीबॉडी (पतला 1:600, Abcam), मानव CD163 एंटीबॉडी (पतला 1:600, Abcam), मानव AIM के साथ रातोंरात वर्गों को ऊष्मायन किया गया था। एंटीबॉडी (पतला 1:150, Abcam) या मानव TGF- 1 एंटीबॉडी (पतला 1:500, Abcam)। हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज-लेबल बायोटिन-संयुग्मित माध्यमिक एंटीबॉडी (पतला 1: 200, बायोसिंथेसिस बायोटेक्नोलॉजी, चीन) और डीएबी धुंधला (जेडएसजीबी-बायो, चीन) के साथ उपचार के बाद, एक माइक्रोस्कोप के तहत वर्गों को देखा गया। 10 बेतरतीब ढंग से चयनित फ़ील्ड (400×) प्रति अनुभाग इमेज किए गए थे। ग्लोमेरुली और नलिकाओं में मैक्रोफेज की अभिव्यक्ति इमेज-प्रो प्लस इमेज एनालिसिस सॉफ्टवेयर (मेयर इंस्ट्रूमेंट्स, इंक।, ह्यूस्टन, TX, यूएसए) का उपयोग करके निर्धारित की गई थी; ग्लोमेरुली में एआईएम और टीजीएफ - 1 के भाव समान तरीके से निर्धारित किए गए थे। प्रत्येक छवि के लिए एकीकृत ऑप्टिकल घनत्व (IOD) को दो रोग विशेषज्ञों द्वारा स्वतंत्र रूप से मापा गया था। तब औसत आईओडी/सकारात्मक दाग वाले क्षेत्र (एआईओडी) की गणना की गई थी। एआईओडी की गणना करके मैक्रोफेज, एआईएम और टीजीएफ - 1 आईजीएएन रीनल बायोप्सी और सामान्य किडनी बायोप्सी में अभिव्यक्ति के स्तर की तुलना की गई। नाभिक को 5 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर डीएपीआई के साथ दाग दिया गया था। एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप (ZEISS, Axioimager.Z2) का उपयोग करके फ्लोरोसेंटली लेबल वाले वर्गों की छवियां प्राप्त की गईं।

फाइब्रोसिस आकलन के लिए मैसन स्टेनिंग

फाइब्रोसिस क्षेत्र हरा था, और हमने फाइब्रोसिस की डिग्री को दर्शाने के लिए दृश्य क्षेत्र क्षेत्र में हरे क्षेत्र के प्रतिशत की गणना की। बड़े जहाजों से परहेज करते हुए, प्रत्येक खंड के लिए तीन उच्च-आवर्धन क्षेत्रों को बेतरतीब ढंग से चुना गया था (सभी नमूनों को समान परिस्थितियों में फोटो खिंचवाया गया था)। IPP6.0 छवि विश्लेषण प्रणाली का उपयोग फाइब्रोसिस क्षेत्र के क्षेत्र अनुपात का सांख्यिकीय विश्लेषण करने के लिए किया गया था (सभी नमूनों का एक ही तरीके से विश्लेषण किया गया था)।

सांख्यिकीय आंकड़े

SPSS 22 का उपयोग करके सांख्यिकीय विश्लेषण किया गया।0। डेटा को माध्य ± एसडी या माध्यिका (रेंज) के रूप में व्यक्त किया गया था। परीक्षण या एकतरफा एनोवा का उपयोग करके महत्वपूर्ण अंतर का मूल्यांकन किया गया था। प्रयोगात्मक समूहों के बीच एकीकृत ऑप्टिकल घनत्व की तुलना करने के लिए एक गैर-पैरामीट्रिक मान-व्हिटनी यू परीक्षण किया गया था। एक दो-पूंछ वाला P<0.05 was="" considered="" statistically="">

परिणाम

किडनी इम्यूनोफ्लोरेसेंस और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (आंकड़े 1,2) में मैक्रोफेज के वितरण से पता चला है कि IgAN समूह में मैक्रोफेज मुख्य रूप से वृक्क ट्यूबलर इंटरस्टीशियल में वितरित किए गए थे, और कभी-कभी ग्लोमेरुलर केशिका जाल और वृक्क ट्यूबलर लुमेन में, जबकि मैक्रोफेज सामान्य रूप से वितरित नहीं किए गए थे। गुर्दे का ऊतक।

इसके अलावा, IgAN के रीनल इंटरस्टिटियम में M{{0}}, Ml, और M2 मैक्रोफेज की संख्या भिन्न थी, और M0 का M2 (P) की ओर अधिक ध्रुवीकरण था।<0.05, figure="">

वृक्क ऊतक में AIM, TGF- 1 की अभिव्यक्ति IgAN समूह में, AIM मुख्य रूप से ग्लोमेरुलर केशिका लूप और वृक्क ट्यूबलर उपकला कोशिकाओं के साथ-साथ वृक्क ट्यूबलर लुमेन में व्यक्त किया जाता है; TGF- 1 मुख्य रूप से रीनल ट्यूबलर एपिथेलियल कोशिकाओं में व्यक्त किया जाता है, लेकिन रीनल इंटरस्टिटियम में भी। हालांकि, एआईएम और टीजीएफ - 1 की अभिव्यक्ति सामान्य गुर्दे के ऊतकों में कम या अनुपस्थित थी (आंकड़े 4,5)।

मैक्रोफेज की अभिव्यक्ति, एएलएम, टीजीएफ- 1 एलजीएएन के नैदानिक ​​​​अभिव्यक्ति के साथ

The infiltration of MO and M1 macrophages in the renal tissue of the IgAN group was not significantly correlated with age, sex, urinary red blood cell count,24-hour proteinuria, and eGFR (P>{{0}}.05). M2 मैक्रोफेज घुसपैठ की संख्या सकारात्मक रूप से सीरम क्रिएटिनिन और 24- घंटे प्रोटीनुरिया (आर =0 .447, पी =0 .004; आर =0 .436, पी {के साथ सहसंबद्ध थी। {10}}.005), और नकारात्मक रूप से eGFR(r=-0.332, P=0.004)(चित्र 6) के साथ सहसंबद्ध है।24-घंटे मूत्र प्रोटीन, सीरम क्रिएटिनिन, और eGFR को AIM और TGF - 1 के साथ सहसंबद्ध किया गया था, जिनमें से 24- घंटे के मूत्र प्रोटीन और सीरम क्रिएटिनिन को AIM और TGF - 1 के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध किया गया था, जबकि eGFR को AIM और TGF-B1 के साथ नकारात्मक रूप से सहसंबद्ध किया गया था। (तालिका एक)। चूंकि M0 और M1 मैक्रोफेज और नैदानिक ​​संकेतकों के बीच कोई महत्वपूर्ण संबंध नहीं था, बाद के डेटा ने केवल M2 मैक्रोफेज की गणना की। आगे के सांख्यिकीय विश्लेषण से पता चला है कि एम2 मैक्रोफेज, एआईएम, और टीजीएफ-बी1 के भाव विभिन्न रोग प्रकारों में भिन्न थे, और एम 2 मैक्रोफेज, एआईएम और टीजीएफ - 1 (तालिका 2) के बीच एक संबंध था।

M2 मैक्रोफेज, AlM, TGF- 1, और फाइब्रोटिक क्षेत्र का सहसंबंध

IgAN रोगियों के ऊतकों में फाइब्रोटिक क्षेत्र और M2-टाइप मैक्रोफेज, AIM, और TGF- 1 के बीच सहसंबंध के सांख्यिकीय विश्लेषण से पता चला है कि M2 मैक्रोफेज फ़ाइब्रोटिक क्षेत्र के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध थे (चित्र 7,r{ {4}}.777, पी<0.01);aim was="" positively="" correlated="" with="" the="" fibrotic="" area(figure="" 8,r="0.768,"><0.01); tgf-β1="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" fibrotic="" area="" (figure="" 9,="" r="0.853,"><>

बहस

IgAN सबसे आम प्राथमिक ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस है और लगभग 40 प्रतिशत रोगी 20-30 वर्षों (21) के भीतर अंतिम चरण के गुर्दे की बीमारी (ESRD) विकसित करेंगे। सभी सीकेडी को ईएसआरडी में विकसित करने के लिए रेनल फाइब्रोसिस एक आवश्यक प्रक्रिया है। पैथोलॉजिकल अभिव्यक्तियाँ बड़ी संख्या में फ़ाइब्रोब्लास्ट और मायोफिब्रोब्लास्ट का निर्माण और बड़ी संख्या में बाह्य मैट्रिक्स का संचय है, जिससे ग्लोमेरुलोस्केलेरोसिस और रीनल ट्यूबलर इंटरस्टिशियल फाइब्रोसिस होता है। अंततः, बड़ी संख्या में सामान्य नेफ्रॉन के नुकसान के कारण वृक्क समारोह खो जाता है (4)। वर्तमान में, वृक्क तंतुमयता मुख्य रूप से चार चरणों में विभाजित है: 1. वृक्क नलिकाकार उपकला कोशिकाओं की सक्रियता और सूजन के कारण मोनोसाइट्स/मैक्रोफेज की घुसपैठ। 2. साइटोकिन्स, वृद्धि कारक, और अन्य प्रो-फाइब्रोजेनिक कारकों की रिहाई।3। फाइब्रोसिस का निर्माण मुख्य रूप से मैट्रिक्स प्रोटीन के जमाव में प्रकट हुआ है। 4. बाह्य मैट्रिक्स (ईसीएम) का जमाव, गुर्दे की संरचनात्मक और कार्यात्मक हानि का एक प्रमुख चरण है (प्रभावी नेफ्रॉन की महत्वपूर्ण कमी और ग्लोमेरुलर निस्पंदन दर में और गिरावट)।

माइलॉयड स्टेम कोशिकाएं मोनोसाइट्स में अंतर करती हैं और अस्थि मज्जा से परिसंचरण में प्रवेश करती हैं। परिसंचरण में मोनोसाइट्स सूजन और आघात जैसे विभिन्न उत्तेजनाओं के तहत ऊतकों में माइग्रेट और घुसपैठ करते हैं, और फिर मैक्रोफेज में अंतर करते हैं। मैक्रोफेज प्राकृतिक प्रतिरक्षा प्रणाली में विषम कोशिकाएं हैं, जो स्थानीय माइक्रोएन्वायरमेंट के अनुकूल होने के लिए अपने फेनोटाइप को गतिशील रूप से विनियमित कर सकती हैं। संचलन में मोनोसाइट्स, भड़काऊ संकेतों द्वारा संचालित, गुर्दे में प्रवेश करते हैं और संवहनी एंडोथेलियल कोशिकाओं से जुड़ते हैं, एक ही समय में केमोकाइन और पुरानी भड़काऊ कारकों की रिहाई को प्रेरित करते हैं। इसके परिणामस्वरूप रीनल इंटरस्टिशियल में मोनोसाइट्स का व्यापक स्थानीय एकत्रीकरण होता है, जो अलग-अलग रास्तों से शास्त्रीय रूप से सक्रिय मैक्रोफेज (एम 1) या चुनिंदा सक्रिय मैक्रोफेज (एम 2) में अंतर करता है। सबसे पहले, रोगजनक और परिगलित कोशिकाएं टोल-जैसे रिसेप्टर्स और अन्य जन्मजात प्रतिरक्षा रिसेप्टर्स को सक्रिय करती हैं, जो M0 मैक्रोफेज के M1 मैक्रोफेज के ध्रुवीकरण को बढ़ावा देती हैं। M1 मैक्रोफेज गुर्दे की चोट के प्रारंभिक चरण में तहखाने की झिल्ली के माध्यम से जमा होते हैं, भड़काऊ प्रतिक्रियाओं की एक श्रृंखला को बढ़ावा देते हैं और आगे गुर्दे की चोट के लिए अग्रणी होते हैं। चोट के विकास के रूप में, मैक्रोफेज द्वारा phagocytosed एपोप्टोटिक और नेक्रोटिक कोशिकाएं, साथ ही साथ विरोधी भड़काऊ कारकों की पीढ़ी, एम 2 मैक्रोफेज की ओर मैक्रोफेज के ध्रुवीकरण को बढ़ावा देती है। M2 मैक्रोफेज मुख्य रूप से विरोधी भड़काऊ की भूमिका निभाते हैं, गुर्दे की मरम्मत को बढ़ावा देते हैं और फाइब्रोसिस का कारण बनते हैं (6, 22-26)। इसलिए, M1 और M2 मैक्रोफेज का गतिशील संतुलन सूजन और ऊतक की मरम्मत की प्रक्रिया को इंगित करता है, जो गुर्दे के पूर्वानुमान को निर्धारित करता है और मैक्रोफेज को लक्षित करने वाले उपचारों के प्रयासों को प्रेरित करता है।

इस अध्ययन में, हमने उन रोगियों के गुर्दे के रोग संबंधी ऊतकों को चुना, जिन्हें IgAN का निदान किया गया था और विभिन्न मैक्रोफेज के ध्रुवीकरण का अवलोकन किया था। हमने M1 का प्रतिनिधित्व करने के लिए CD68, M1 का प्रतिनिधित्व करने के लिए CD80 और M2 का प्रतिनिधित्व करने के लिए CD163 का चयन किया। हमारे परिणामों से पता चला है कि सामान्य किडनी की तुलना में M0(CD68*)मैक्रोफेज, M1(CD80*)मैक्रोफेज, और M2(CD163*)मैक्रोफेज की संख्या में क्रमशः काफी वृद्धि हुई थी, यह दर्शाता है कि मैक्रोफेज की अपेक्षाकृत स्पष्ट घुसपैठ थी। एलजीएएन रोगियों के गुर्दे के ऊतक।

It was not only found that the infiltration of macrophages in the renal tissue of IgAN patients increased significantly, but also found that there were differences in the number of M0, Ml, and M2 macrophages in the interstitium of lgAN patients, with more polarization of M0 towards M2. In other words, the infiltration of M2 macrophages is mainly found in the renal tissue of IgAN patients. There was a positive correlation between M2 macrophages and fibrotic area; The distribution of M0 and M1 macrophages in the lgAN group had no significant correlation with age, sex, urinary red blood cell count, 24-hour proteinuria, and eGFR(P>0.05); हालांकि, एम2 मैक्रोफेज घुसपैठ की संख्या सीरम क्रिएटिनिन और 24-घंटे प्रोटीनूरिया के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध है; यह साबित हो गया है कि एम 2 मैक्रोफेज IgAN फाइब्रोसिस की प्रगति में अधिक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।

एआईएम कई बीमारियों में भी महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, जैसे एथेरोस्क्लेरोसिस, गैर-अल्कोहलिक यकृत रोग (16), इंसुलिन प्रतिरोध (27), ऑटोइम्यून रोग, आदि। साथ ही, एआईएम गुर्दे की फाइब्रोसिस से निकटता से संबंधित है। मेगुमी ओशिमा एट अल। (19) ने 43 गुर्दे की बायोप्सी रोगियों से गुर्दे के ऊतकों को लिया और पाया कि एआईएम और मैक्रोफेज का जमाव क्षेत्र प्रोटीनुरिया की गंभीरता और रोगियों में ईजीएफआर की कमी के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध था। इसने सुझाव दिया कि एआईएम ने गुर्दे की क्षति को बढ़ा दिया हो सकता है। तदाशी उरमत एट अल। (18) ने चूहों में सहज उच्च रक्तचाप प्रवृत्ति (एसएचआरएसपी) के एक मॉडल का उपयोग करके गंभीर उच्च रक्तचाप और प्रेरित गुर्दे की क्षति की स्थापना की। संबंधित दवाओं के साथ उच्च रक्तचाप के उपचार के बाद, यह पाया गया कि ग्लोमेरुली और इंटरस्टिटियम में घुसपैठ करने वाले मैक्रोफेज की संख्या काफी कम हो गई थी। नियंत्रण समूह की तुलना में, AIM और oxLDL के भाव काफी कम हो गए थे। इसके अलावा, गुर्दे के ऊतकों में फाइब्रोसिस की डिग्री अनुपचारित समूह की तुलना में कम थी।

हमारे अध्ययन में, प्रत्येक पैथोलॉजिकल ग्रेड में एआईएम की अभिव्यक्ति में महत्वपूर्ण अंतर थे, और इसकी अभिव्यक्ति एम 2 मैक्रोफेज, टीजीएफ - 1 और रीनल फाइब्रोसिस की डिग्री के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध थी। यह प्रयोग और उपरोक्त सभी स्थितियां बताती हैं कि एआईएम सीकेडी की वृक्क फाइब्रोसिस प्रक्रिया से संबंधित है, जो मैक्रोफेज पर एआईएम के एपोप्टोटिक विरोधी प्रभाव से संबंधित हो सकता है, और फिर निरंतर भड़काऊ संकेत फाइब्रोसिस के आगे के विकास को बढ़ावा देते हैं। ताकाको टोमिता एट अल। (28) ने इन विट्रो में खमीर पॉलीसेकेराइड द्वारा प्रेरित पेरिटोनिटिस वाले चूहों से नेक्रोटिक कोशिकाओं को निकाला और पाया कि एआईएम नेक्रोटिक कोशिकाओं को एमएल और एम 2 ए मैक्रोफेज के फागोसाइटोसिस को बढ़ावा दे सकता है। यह IgAN मॉडल और ischemia-reperfusion (IRI) के तीव्र गुर्दे की चोट मॉडल में भी पाया गया था कि AIM IgAl और एपोप्टोटिक कोशिकाओं की निकासी को बढ़ावा दे सकता है जिससे मैक्रोफेज द्वारा नेफ्रैटिस हो सकता है। उपरोक्त अध्ययनों से, यह पाया गया है कि एआईएम, मैक्रोफेज की तरह, रोग के विभिन्न चरणों में अलग-अलग भूमिका निभा सकता है, जबकि गुर्दे की बीमारी में एआईएम की भूमिका मैक्रोफेज के समान हो सकती है।

IRI के कारण होने वाले CKD मॉडल में, M2 मैक्रोफेज का रीनल फाइब्रोसिस की प्रक्रिया के साथ घनिष्ठ संबंध है, जो मुख्य रूप से TGF - 1 (29) को स्रावित करने के कारण होता है। टीजीएफ- 1 टीजीएफ-सुपरफैमिली से संबंधित है और सीकेडी(30) के विकास में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। ट्यूबलर एपिथेलियल मायोफिब्रोब्लास्ट ट्रांसडिफेनरेशन (टीईएमटी) भी रीनल इंटरस्टिशियल फाइब्रोसिस का एक महत्वपूर्ण तंत्र है, और टीजीएफ - 1 टीईएमटी (31) को विनियमित करने वाला एक महत्वपूर्ण साइटोकाइन है। टीजीएफ - 1 न्यूट्रलाइजेशन एंटीबॉडीज, इनहिबिटर्स, जीन नॉकआउट, और टीजीएफ का उपभोग करने के अन्य तरीकों का उपयोग करके - 1, रीनल फाइब्रोसिस की डिग्री को प्रभावी ढंग से कम किया जा सकता है (32)। अब तक, टीजीएफ - 1 के कारण वृक्क फाइब्रोसिस के तंत्र में मुख्य रूप से निम्नलिखित बिंदु शामिल हैं: 1. कोलेजन I और फाइब्रोनेक्टिन (33) जैसे बाह्य मैट्रिक्स के संश्लेषण को प्रेरित करें। 2. मैट्रिक्स मेटालोप्रोटीनेज (एमएमपी) और मेटालोप्रोटीनेज (टीआईएमपी) के ऊतक अवरोधक संतुलन से बाहर हैं, इस प्रकार बाह्य मैट्रिक्स के क्षरण को कम करते हैं।3। मेसेंजियल सेल प्रसार, और कोलेजन स्राव को बढ़ावा देना और उपकला और पॉडोसाइट कोशिकाओं को नुकसान पहुंचाना, जिससे सूजन और आगे ऊतक फाइब्रोसिस (34.4) को बढ़ावा मिलता है। विभिन्न स्रोतों (जैसे पेरीसाइट्स, एपिथेलियल कोशिकाओं, एंडोथेलियल कोशिकाओं, फाइब्रोब्लास्ट्स, मैक्रोफेज, आदि) से मायोफिब्रोब्लास्ट के ट्रांसडिफेनरेशन और प्रसार को बढ़ावा देना, इस प्रकार फाइब्रोसिस (35) के विकास की मध्यस्थता करना। पिछले अध्ययनों में देखा गया है कि IgAN में TGF-B1 की mRNA और प्रोटीन अभिव्यक्ति और वृक्क ऊतक में M2 मैक्रोफेज की घुसपैठ की डिग्री सामान्य वृक्क ऊतक (31) की तुलना में काफी बढ़ गई थी, TGF - 1 को M2 मैक्रोफेज के साथ सह-व्यक्त किया गया था। सीकेडी प्रेरित उच्च रक्तचाप के गुर्दे की बायोप्सी ऊतक में। इन सभी ने सुझाव दिया कि M2 मैक्रोफेज टीजीएफ के माध्यम से वृक्क फाइब्रोसिस में भूमिका निभा सकते हैं - 1।

इस प्रयोग में, हमने पाया कि पैथोलॉजिकल ग्रेड की वृद्धि के साथ, एम 2 मैक्रोफेज की घुसपैठ और एआईएम और टीजीएफ की अभिव्यक्ति की डिग्री - 1 भी बढ़ रही थी। विभिन्न रोग समूहों के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर था। ये तीनों 24- घंटे के मूत्र प्रोटीन, सीरम क्रिएटिनिन, ईजीएफआर, और आईजीएएन रोगियों के अन्य नैदानिक ​​संकेतकों से निकटता से संबंधित थे, और तीनों और रीनल फाइब्रोसिस के क्षेत्र के बीच एक महत्वपूर्ण सकारात्मक सहसंबंध था, जो इंगित करता है कि एम 2 मैक्रोफेज, एआईएम, और टीजीएफ-बी1 सभी एलजीएएन की घटना और विकास में शामिल थे और आईजीएएन की फाइब्रोसिस प्रक्रिया से निकटता से संबंधित थे। इस प्रयोग के परिणाम ब्रागा एट अल के अध्ययन के अनुरूप थे। (36,37), जिसमें पाया गया कि M2 मैक्रोफेज एक MyD88 सिग्नलिंग मार्ग में एकतरफा मूत्रवाहिनी अवरोध (UUO) के वृक्क फाइब्रोसिस में शामिल हैं। इसके विपरीत, अध्ययनों में पाया गया है कि मैक्रोफेज ऑब्सट्रक्टिव नेफ्रोपैथी के रिकवरी चरण में एक वीर विरोधी भूमिका निभाते हैं। निशिदा एट अल। (38) ने प्रदर्शित किया कि एंजियोटेंसिन II टाइप 1 रिसेप्टर (Agtr1) इंटरस्टीशियल मैक्रोफेज पर यूयूओ के बाद के चरण में गुर्दे की फाइब्रोसिस को कम करने के लिए कार्य करता है। लोपेज़-गुइसा एट अल। (39) ने पुष्टि की कि मैक्रोफेज ने यूयूओ में मैनोज रिसेप्टर 2 (Mrc2) को व्यक्त करके एक लाइसोसोमल कोलेजन टर्नओवर मार्ग को सक्रिय करके फाइब्रोसिस-क्षीणन भूमिका प्रदर्शित की।

M2 मैक्रोफेज, AIM और TGF- 1 IgAN फाइब्रोसिस की प्रक्रिया में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं, और तीनों एक दूसरे को प्रभावित करते हैं। हालांकि, इस प्रयोग के छोटे नमूने के आकार और तीनों के बीच बातचीत तंत्र और संबंध के कारण, प्रासंगिक पशु प्रयोगों के और सत्यापन की आवश्यकता होगी।