Cistanche के नए अनुप्रयोग के लिए वैज्ञानिक आधार

संपर्क: ऑड्रे हू Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ईमेल:audrey.hu@wecistanche.com

सन वेइदोंग1, चेन फी2, सन यूं2

(1. पारंपरिक चीनी चिकित्सा के यंग्ज़हौ अस्पताल, यंग्ज़हौ 225009, जिआंगसू; 2. स्कूल ऑफ मेडिसिन, यंग्ज़हौ विश्वविद्यालय, यंग्ज़हौ 225001, जिआंगसू)

सार सार: बेग निन प्रोस्टेटिक हाइपरप्लासिया (बीपीएच) चूहा मॉडल स्थापित किया गया था, और एक्टोसाइड के तीन खुराक समूहों को मौखिक रूप से 4 सप्ताह के लिए प्रशासित किया गया था, ताकि आसुत से आसुत एक्टियोसाइड के प्रभाव का अध्ययन किया जा सके।सिस्टैंच ट्यूबुलोसाबीपीएच के साथ चूहों में एपोप्टोसिस और अल्ट्रा माइक्रोस्ट्रक्चर प्रोस्टेट ग्रंथि पर। ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा प्रोस्टेट ग्रंथि का अल्ट्रास्ट्रक्चरल परिवर्तन देखा गया। परिणामों से पता चला कि सामान्य चूहे के प्रोस्टेट का एपोप्टोसिस स्पष्ट नहीं था, कम था

मॉडल समूह में प्रोस्टेट एपोप्टोसिस की दर, उच्च खुराक वाले एक्टियोसाइड मेंसिस्टैंच ट्यूबुलोसाउपचार, चूहा प्रोस्टेट एपोप्टोसिस मॉडल की तुलना में काफी अधिक था।

कीवर्ड:सिस्टांचे, सिस्टैंच ट्यूबुलोसा, एक्टोसाइड; चूहा; प्रोस्टेटिक हाइपरप्लासिया शुरू करें; एपोप्टोसिस; ultrastructural

हर्ब सिस्टांचे

सौम्य प्रोस्टेट हाइपरप्लासिया (बीपीएच) की प्रक्रिया में, सेल एपोप्टोसिस उन तंत्रों में से एक है जो वर्तमान में ध्यान आकर्षित कर रहे हैं। जीन कोडिंग इसे निर्धारित करती है और विशिष्ट संकेतों का जवाब देकर कोशिकाओं को क्रमादेशित कोशिका मृत्यु को नियंत्रित करने में सक्षम बनाती है।

प्रोस्टेट के वयस्क आकार में विकसित होने के बाद, एपोप्टोसिस की औसत दर के संतुलन के माध्यम से प्रोस्टेट कोशिकाओं की प्रसार दर 1 प्रतिशत से 2 प्रतिशत तक बनी रहती है। एक बार संतुलन टूट जाने पर इसे बीपीएच का कारण माना जाता है। सामान्य परिस्थितियों में, एस्ट्रोजन और एण्ड्रोजन के स्तर और प्रोस्टेट में सामान्य परिसंचरण एक प्रकार की आत्म-संतुलन अवस्था होती है जो प्रसार और एपोप्टोसिस की प्रक्रिया में मौजूद होती है। जब प्रसार और एपोप्टोसिस के बीच संतुलन संतुलन से बाहर हो जाता है, तो यह ग्रंथि के आगे विकास और विस्तार की ओर ले जाएगा, जो मुख्य रूप से उपकला कोशिका डिब्बे के विस्तार का कारण बनता है [1]।

इस प्रयोग में, हमने एक्टियोसाइड (सहसंयोजन-जैसे ग्लाइकोसाइड) के प्रभाव का निरीक्षण और विश्लेषण करने के लिए एक चूहे प्रोस्टेट हाइपरप्लासिया मॉडल की स्थापना की, जो कि रासायनिक घटकों में से एक है।सिस्टांचेएक्टियोसाइड के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए चूहे प्रोस्टेट कोशिकाओं के एपोप्टोसिस और अल्ट्रास्ट्रक्चरल परिवर्तनों पर प्रोस्टेट हाइपरप्लासिया को रोकने का प्रभाव चीनी दवा सिस्टैंच के नए उपयोगों के विकास और उपयोग के लिए एक वैज्ञानिक आधार प्रदान करता है।

सिस्टांचेनिचोड़

1 सामग्री और तरीके

1. 1 प्रायोगिक पशु

यंग्ज़हौ विश्वविद्यालय के सेंटर फॉर कम्पेरेटिव मेडिसिन द्वारा 6-7 सप्ताह, स्वच्छ ग्रेड, वजन 80-100 ग्राम वजन के पचास नर एसडी चूहों को प्रदान किया जाता है।

1. 2 अभिकर्मक और दवाएं

टेस्टोस्टेरोन प्रोपियोनेट इंजेक्शन शंघाई जनरल फार्मास्युटिकल कं, लिमिटेड से है, विनिर्देश 25 मिलीग्राम · एमएल -1 है, और बैच संख्या 060708 है। पीआई डाई समाधान यंग्ज़हौ विश्वविद्यालय परीक्षण केंद्र से है। Aktiside की सामग्री 945 g·kg . है^-1, चाइनीज मेडिसिन एनालिसिस विभाग, चाइना फार्मास्युटिकल यूनिवर्सिटी द्वारा तैयार किया गया।

1. 3 प्रायोगिक उपकरण

Philips Tecnai 12 ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप नीदरलैंड्स में Philips का है; FACSAria फ्लो साइटोमीटर संयुक्त राज्य अमेरिका में BD से है।

1. 4 ग्रुपिंग और मॉडलिंग

साहित्य की विधि के अनुसार बधियाकरण के बाद [3], चूहों को 5 मिलीग्राम · (किग्रा · डी) का इंजेक्शन लगाया गया।^-1प्रोस्टेट हाइपरप्लासिया मॉडल स्थापित करने के लिए 4 सप्ताह के लिए चूहों की पीठ पर टेस्टोस्टेरोन प्रोपियोनेट। मॉडल चूहों को बेतरतीब ढंग से मॉडल समूहों में विभाजित किया गया था: मॉडल प्लस एक्टोसाइड उच्च-खुराक समूह, मॉडल प्लस एक्टोसाइड मध्यम-खुराक समूह, मॉडल प्लस एक्टोसाइड कम-खुराक समूह, प्रत्येक समूह में दस चूहे; अन्य दस सामान्य चूहे एक नियंत्रण समूह के रूप में थे।

1. 5 प्रशासन विधि

मॉडलिंग के एक सप्ताह बाद, एक्टोसाइड उच्च, मध्यम और निम्न खुराक समूहों को क्रमशः गावेज द्वारा 60, 30, 15 मिलीग्राम · (किलोग्राम) -1 दिया गया। मॉडल समूह और नियंत्रण समूह को चार सप्ताह के लिए दिन में एक बार समान मात्रा में सामान्य खारा डाला गया, सप्ताह में एक बार तौला गया, और शरीर के वजन के अनुसार खुराक को समायोजित किया गया।

1. 6 नमूना संग्रह और प्रसंस्करण

1) सामग्री और नमूना तैयार करना: अंतिम प्रशासन के 24 घंटे बाद, उपवास चूहों को तौलना और गर्भाशय ग्रीवा की अव्यवस्था से चूहों की बलि देना। निचले पेट को तुरंत खोलें, प्रोस्टेट के आसपास के ऊतकों को छीलें, प्रोस्टेट को मुक्त करें, और बर्फ के स्नान में उपयोग के लिए प्रोस्टेट का हिस्सा लें। ऊतक homogenizer homogenized, तैयार प्रोस्टेट एकल-कोशिका निलंबन, और प्रोपीडियम आयोडाइड वन-स्टेप विधि से सना हुआ [4]; प्रोस्टेट ऊतक का एक और हिस्सा 25 ग्राम एल -1 ग्लूटाराल्डिहाइड में अल्ट्रा-थिन सेक्शन तैयार करने के लिए तय किया गया था।

2) सिंगल सेल सस्पेंशन तैयार करें: सड़न रोकने वाली स्थितियों के तहत, चूहे के प्रोस्टेट को पूरी तरह से हटा दें और इसे पेट्री डिश में ले जाएं, पीबीएस के साथ प्रोस्टेट ऊतक की सतह पर रक्त और रक्त के थक्कों को धो लें, और आसपास के वसा, अतिरिक्त फाइबर को हटा दें। और कोशिका झिल्ली। उसी चूहे के प्रोस्टेट से, लगभग 0.5 सेमी . के आकार के साथ ताजा प्रोस्टेट ऊतक³प्रोस्टेट सेल सस्पेंशन [5] तैयार करने के लिए लिया गया और टुकड़ों में काट दिया गया। प्रोस्टेट ऊतक ब्लॉक को पेट्री डिश में रखें, और पीबीएस की एक छोटी मात्रा जोड़ें; बर्फ के स्नान में ऊतक को काटने के लिए नेत्र संबंधी कैंची का उपयोग करें, होमोजेनाइज़र को निलंबन में पीसें, 1 0 एमएल पीबीएस जोड़ें, ऊतक समरूप पिपेट करें, और 0.074 मिमी ताकना आकार नायलॉन जाल का उपयोग टेस्ट ट्यूब में फ़िल्टर्ड किया गया था, सेंट्रीफ्यूज किया गया था। 1 500 बजे मिनट^-13 मिनट के लिए, और अवक्षेप को तीन बार पीबीएस से धोया गया, हर बार 500 आर मिनट . पर^-1सेल मलबे को हटाने के लिए शॉर्ट-टर्म लो-स्पीड सेंट्रीफ्यूजेशन, सेल क्लंप को हटाने के लिए 0.037 मिमी ताकना आकार नायलॉन जाल फिल्टर। कक्षों की गणना करें और कक्ष सांद्रता को 2×109 कक्षों में समायोजित करें·एल^-1. 1 एमएल पीआई धुंधला समाधान के साथ दाग, 10 मिनट के लिए 4 डिग्री पर प्रकाश से सुरक्षित रखें।

3) अल्ट्राथिन सेक्शन की तैयारी: अल्ट्राथिन टिश्यू सेक्शन की तैयारी के लिए, साहित्य देखें [6]।

2 परिणाम और विश्लेषण

अंजीर। 1 बीपीएच चूहे के मॉडल का एपोप्टोसिस और एक्टियोसाइड की प्रेरित कार्रवाई

एक। सामान्य समूह; बी। मॉडल समूह; सी। एक्टियोसाइड उच्च खुराक समूह; डी। एक्टियोसाइड कम खुराक समूह

2. 1 चूहे के प्रोस्टेट के एपोप्टोसिस पर एक्टोसाइड का प्रभाव

चित्र 1 प्रवाह साइटोमेट्री द्वारा पता लगाए गए एपोप्टोसिस के शिखर को दर्शाता है, जो दर्शाता है कि एक्टोसाइड का प्रो-एपोप्टोटिक प्रभाव होता है। सेल एपोप्टोसिस परिणामों के सांख्यिकीय विश्लेषण से पता चला है कि चूहे की कोशिका एपोप्टोसिस दर में काफी वृद्धि हुई थी (24.7 ± 1.85) प्रतिशत और (16.1 ± 1. 0 4) प्रतिशत उच्च, मध्यम और निम्न खुराक के उपचार के बाद। एक्टोसाइड। , (14.5±0.68) प्रतिशत , और सामान्य समूह (1.1±{{20}}.06) प्रतिशत , मॉडल समूह (9.5±0.5) प्रतिशत , सकारात्मक समूह (9.83± 0.76) प्रतिशत तुलना में अंतर महत्वपूर्ण है (पी .)<0.01), indicating="" that="" aktidine="" can="" induce="" cell="" apoptosis,="" the="" effect="" is="" stronger="" than="" that="" of="" the="" positive="" control="" drug="" qianliekang="" (figure="">

अंजीर। 2 बीपीएच चूहे के मॉडल में एपोप्टोसिस का रेडियो और एक्टियोसाइड का प्रभाव

2.2 प्रोस्टेटिक हाइपरप्लासिया कोशिकाओं की संरचना पर एक्टोसाइड का प्रभाव।

इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी टिप्पणियों से पता चलता है कि सामान्य चूहे के प्रोस्टेट में पूर्ण नाभिक, स्पष्ट रूप से न्यूक्लियोली और समान परमाणु क्रोमैटिन वितरण होता है; मोटे एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम का आकार समान होता है, बड़े करीने से व्यवस्थित होता है, और इसमें कोई रिक्तिका नहीं होती है। उपकला की सतह पर कोई उंगली जैसी माइक्रोविली नहीं होती है, माइटोकॉन्ड्रिया की कोई सूजन नहीं होती है, और गुहा में कुछ स्राव होते हैं। मॉडल समूह में प्रोस्टेट कोशिकाओं के नाभिक विकृत और सिकुड़ गए थे, और साइटोप्लाज्म प्रचुर मात्रा में था। रफ एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम को सिस्ट जैसे आकार में विस्तारित किया गया था, और सिस्ट उच्च घनत्व वाले प्रोटीन कणों से भरा था। माइटोकॉन्ड्रिया थोड़ा सूजा हुआ था (वहाँ रिक्तिकाएँ भी थीं), गुहा में मध्यम-घनत्व वाले स्राव होते हैं, और कुछ कोशिकाओं में घने गोल स्राव कण पाए जाते हैं। एक्टोसाइड के साथ इलाज किए गए चूहों में, मॉडल समूह की तुलना में नाभिक बरकरार था। नाभिक केंद्रित था, परमाणु घनत्व में वृद्धि हुई थी, हेटरोक्रोमैटिन जमा हुआ था, साइटोप्लाज्म में रिक्तिकाएं थीं, और किसी न किसी एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम रिक्तिकाएं कम हो गई थीं। कम-खुराक वाले एक्टोसाइड समूह में थोड़ा झुर्रीदार नाभिक संकोचन, अनियमित, समृद्ध कोशिका द्रव्य, और किसी न किसी एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम (चित्रा 3) को कम किया गया था।

सिस्टंचे का लाभ: विरोधी-apoptosis

3 चर्चा

एपोप्टोसिस बहुकोशिकीय जीवों में क्रमादेशित कोशिका मृत्यु की एक प्रक्रिया है जो शरीर के विकास को नियंत्रित करती है और आंतरिक वातावरण की स्थिरता को बनाए रखती है, और आनुवंशिक कोड इसे निर्धारित करते हैं।

एपोप्टोटिक कोशिकाओं की अपनी अनूठी रूपात्मक और जैविक विशेषताएं होती हैं: परमाणु क्रोमैटिन संकोचन, डीएनए व्यापक गिरावट और विखंडन, कोशिकाओं का पूर्ण पैमाने पर संकोचन, कोशिका झिल्ली का संकोचन और बाहरी प्रोट्रूशियंस जो ऑर्गेनेल (जैसे माइटोकॉन्ड्रिया और राइबोसोम) को कवर करते हैं, और विशेषता परमाणु का निर्माण एपोप्टोटिक शरीर, एपोप्टोटिक कोशिकाएं न केवल एक पूर्ण कोशिका झिल्ली संरचना और कार्य को बनाए रखती हैं, बल्कि ऑर्गेनेल की एक पूरी संरचना भी होती है, जो सेल नेक्रोसिस से अलग होती है।

सेल एपोप्टोसिस के आणविक तंत्र को अब तक पूरी तरह से स्पष्ट नहीं किया गया है। अध्ययन [7] ने दिखाया है कि सेल एपोप्टोसिस के जीन विनियमन में कई जीन शामिल हैं।

एपोप्टोसिस बीपीएच की प्रक्रिया है जो वर्तमान में अधिक ध्यान आकर्षित कर रही है। यह जीन कोडिंग द्वारा निर्धारित किया जाता है और विशिष्ट संकेतों का जवाब देकर कोशिकाओं को कोशिका मृत्यु को नियंत्रित करने में सक्षम बनाता है [1]। प्रोस्टेट के वयस्क आकार में विकसित होने के बाद, एपोप्टोसिस दर के संतुलन के माध्यम से प्रोस्टेट कोशिकाओं की प्रसार दर 1 प्रतिशत से 2 प्रतिशत तक बनी रहती है। इस संतुलन के नष्ट होने को हमेशा BPH [8] का कारण माना गया है। सामान्य परिस्थितियों में, प्रोस्टेट में एस्ट्रोजन और एण्ड्रोजन का स्तर और नियमित परिसंचरण एक प्रकार का आत्म-संतुलन राज्य है जो प्रसार और एपोप्टोसिस की प्रक्रिया में मौजूद है। जब प्रसार और एपोप्टोसिस संतुलन से बाहर हो जाते हैं, तो यह ग्रंथियों के बढ़ने और आगे बढ़ने का कारण बनेगा, मुख्य रूप से उपकला कोशिका डिब्बे के विस्तार के कारण [9]। इस संतुलन में रुकावट एण्ड्रोजन स्तरों या कार्यों में परिवर्तन के कारण हो सकती है; यह डीएचटी के एआर उत्तेजना या डीएचटी-मध्यस्थता वृद्धि कारक स्तरों में परिवर्तन द्वारा उत्पन्न किसी भी प्रतिक्रिया के कारण भी हो सकता है [2]। इस अध्ययन में, एफसीएम ने सेल एपोप्टोसिस का पता लगाया और पाया कि चूहों में एक्टोसाइड की उच्च खुराक देने वाले प्रोस्टेट कोशिकाओं की एपोप्टोसिस दर में काफी वृद्धि हुई है। इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी परिणामों से पता चला है कि मॉडल समूह में प्रोस्टेट कोशिकाओं के नाभिक विकृत हो गए थे, किसी न किसी एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम को सिस्ट जैसी आकृति में अत्यधिक विस्तारित किया गया था, और सिस्ट उच्च घनत्व वाले प्रोटीन कणों से भरा हुआ था, और वेक्यूलेशन पाया गया था। माइटोकॉन्ड्रिया में हल्की सूजन थी, और संबंधित अध्ययन[ 10-11 ] रिपोर्ट सुसंगत है।

एक्टियोसाइड हस्तक्षेप के बाद, चूहों में प्रोस्टेट हाइपरप्लासिया की डिग्री कम थी। उच्च खुराक समूह ने एपोप्टोसिस के शुरुआती लक्षण भी दिखाए: प्रोस्टेट कोशिकाओं का केंद्रक बरकरार रहा, और एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम रिक्तिकाएं काफी कम थीं। नाभिक का संघनन, परमाणु घनत्व में वृद्धि, हेटरोक्रोमैटिन का संचय, बधियाकरण के बाद चूहों में प्रोस्टेट ऊतक कोशिकाओं के लक्षण वर्णन के समान [12-13]। यह दर्शाता है कि से एक्टोसाइडसिस्टैंचेप्रोस्टेट हाइपरप्लासिया के साथ चूहों में सेल एपोप्टोसिस को प्रेरित कर सकता है, प्रोस्टेट सेल एपोप्टोसिस और प्रसार के संतुलन को विनियमित और पुनर्स्थापित कर सकता है, और प्रोस्टेट सेल प्रसार को रोकने में भूमिका निभा सकता है। इस अध्ययन और पिछले अध्ययनों के परिणाम [14] से संकेत मिलता है कि एक्टोसाइड का निरोधात्मक प्रभाव, एक रासायनिक घटक हैसिस्टैंच ट्यूबुलोसा, प्रोस्टेट हाइपरप्लासिया पर सेल एपोप्टोसिस को बढ़ावा देने, एआर और टीजीएफ-यूआर 1 ओवरएक्प्रेशन में कमी से संबंधित हो सकता है। कार्रवाई के विस्तृत तंत्र का अभी और अध्ययन किए जाने की आवश्यकता है।

सिस्टांचे लाभ: रोग प्रतिरोधक क्षमता में सुधार

सन्दर्भ:

[1] जियाकोमो एन, एंटोनियो जी, रा एफए एल बी बी, एट अल। सूजन, एपोप्टोसिस और बीपीएच, साक्ष्य क्या है [जे]। यूरोपीय यूरोलॉजी सप्लीमेंट्स, 2006(5): 401-408।

[2] कार सोन आईसी, रिटमास्टर आर। सौम्य प्रोस्टेटिक हाइपरप्लासिया [जे] में डायहाइड्रोटेस्टोस्टेरोन की भूमिका। यूरोलॉजी, 2003, 61: 2-7।

[3] जू शुयुन, बियान जूलियन, चेन युक्सीयू। औषधीय प्रयोग पद्धति [एम]। तीसरा संस्करण। बीजिंग: पीपुल्स मेडिकल पब्लिशिंग हाउस, 2002: 1552-1553।

[4] झाई किवेई, जी होंगबिन, यान मिंगदा, एट अल। एक्ट [जे] के कार्य का अध्ययन करने के लिए टेट-ऑफ इंड्यूसिबल एक्सप्रेशन सिस्टम का उपयोग करना। चीनी विज्ञान बुलेटिन, 2000, 45(16): 1738-1741।

[5] ज़िया अनझोउ, ज़िंग शुहुआ, झू ज़ुवेन, एट अल। गुर्दे के ऊतक एकल-कोशिका निलंबन [जे] के लिए तैयारी के तरीकों पर तुलनात्मक अध्ययन। ज़ुझाउ मेडिकल कॉलेज के जर्नल, 2004, 24(1):50-53।

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[7] लियू किंगमिंग, लू मिंगज़ी। सौम्य प्रोस्टेटिक हाइपरप्लासिया सेल प्रसार और एपोप्टोसिस [जे] के रोगजनन में अनुसंधान प्रगति। जियांग्शी मेडिकल लेबोरेटरी साइंस, 2005, 23(2): 141-143।

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[10] झेंग हेंग, शाओ चुनली, कियान जियाकिंग। चूहों [जे] में प्रोस्टेट हाइपरप्लासिया पर हाइड्रोक्लोराइड का निरोधात्मक प्रभाव। तोंगजी मेडिकल यूनिवर्सिटी का जर्नल, 1999, 28(3):227-229।

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[14] सन वेइदोंग, चेन फी, सन यूं। प्रायोगिक सौम्य प्रोस्टेटिक हाइपरप्लासिया मॉडल [जे] पर एक्टिसाइड का निरोधात्मक प्रभाव। यंग्ज़हौ विश्वविद्यालय का जर्नल: कृषि और जीवन विज्ञान

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