सिस्टांच डेज़र्टिकोला के कुल ग्लाइकोसाइड्स MCAO/R चूहों में Nrf- 2/Keap-1 मार्ग के माध्यम से न्यूरोवैस्कुलर पुनर्जनन को प्रेरित करके न्यूरोलॉजिकल फ़ंक्शन रिकवरी को बढ़ावा देते हैं-Ⅱ

टीजीएस आई/आर घायल चूहों में तंत्रिका पुनर्रचना को बढ़ावा देते हैं

कई अध्ययनों के अनुसार, स्ट्रोक के बाद न्यूरोजेनेसिस कार्यात्मक रिकवरी में महत्वपूर्ण रूप से सुधार कर सकता है। कॉर्टेक्स के इस्केमिक पेनम्ब्रा में न्यूरोनल प्लास्टिसिटी की जांच करने के लिए मार्कर के रूप में सिनैप्टोफिसिन (SYN), पोस्टसिनेप्टिक डेंसिटी 95 (PSD-95) प्रोटीन और माइक्रोट्यूब्यूल-एसोसिएटेड प्रोटीन 2 (MAP-2) का उपयोग किया गया था। I/R घायल चूहों में न्यूरोजेनेसिस पर TGs, PSs और OSs उपचार के प्रभावों का आकलन करने के लिए, SYN, PSD95 और MAP-2 अभिव्यक्तियों के लिए इम्यूनोफ्लोरेसेंस और वेस्टर्न ब्लॉट का प्रदर्शन किया गया। जैसा कि चित्र 9 और 10 में दिखाया गया है, 14 दिनों के रिपरफ्यूजन के बाद I/R चूहों में SYN, PSD95 और MAP-2 अभिव्यक्ति के स्तर NOR चूहों की तुलना में कम हो गए, जबकि TGs और PSs उपचार उनके अभिव्यक्ति स्तरों को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ा सकते हैं। OSs समूह में MOD समूह की तुलना में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं हुआ। डेटा से पता चला कि टीजीएस और पीएस का इलाज नाटकीय रूप से सक्षम थाआई/आर चोट के बाद तंत्रिका रीमॉडलिंग को बढ़ावा देना. 

इस्केमिक स्ट्रोक से बचाव के लिए प्राकृतिक सिस्टान्चे ट्यूबुलोसा PHGS75% ECH 30% ACT 12%

टीजीएस आई/आर घायल चूहों में एनआरएफ-2 और कीप-1 अभिव्यक्ति को बदलते हैं

ऑक्सीडेटिव तनाव I/R चोट में मुख्य रोगजनक तंत्र है। अध्ययनों ने सत्यापित किया है कि Nrf-2 एंटीऑक्सीडेंट प्रतिक्रियाओं का एक प्रमुख नियामक है। I/R चोट के बाद Nrf-2 और Keap-1 मध्यस्थ ऑक्सीडेटिव प्रतिक्रियाओं की जांच करने के लिए, हमने साइटोप्लाज्मिक का मूल्यांकन किया

Keap-1 की अभिव्यक्ति के साथ-साथ परमाणु स्थानांतरण भी। इस बीच, I/R घायल चूहों के मस्तिष्क के ऊतकों में Nrf-2 की अभिव्यक्ति का भी परीक्षण किया गया (आंकड़े 10 और 11)। इम्यूनोफ्लोरेसेंस विश्लेषण के अनुसार, NOR समूह में Nrf-2 मुख्य रूप से कोशिका द्रव्य में स्थित पाया गया। TGs समूह में, कोशिकाद्रव्यी स्थानीयकरण में Nrf-2 की अभिव्यक्ति कम हो गई, लेकिन नाभिक में बढ़ गई, और Keap-1 की अभिव्यक्ति में कमी भी देखी गई। डेटा से पता चला कि TGs की मस्तिष्क सुरक्षा Nrf-2 और Keap-1 के मॉड्यूलेशन से जुड़ी हो सकती है।

टीजीएस आई/आर घायल चूहों में मस्तिष्क ऊतक ऑक्सीडेटिव तनाव को कम करता है

टीजी के एंटीऑक्सीडेटिव प्रभावों की पुष्टि करने के लिए, आई/आर घायल चूहों में एसओडी, कैट, जीएसएच-पीएक्स और एमडीए की गतिविधियों का मूल्यांकन किया गया। चित्र 12 में, एमओडी समूह में एमडीए की मात्रा में उल्लेखनीय वृद्धि हुई थी, और साथ ही, सामान्य चूहों की तुलना में एसओडी, कैट और जीएसएच-पीएक्स की गतिविधियों में कमी आई थी। इसके विपरीत, टीजी उपचार से एमडीए की मात्रा में उल्लेखनीय कमी आई और एसओडी, कैट और जीएसएच-पीएक्स की गतिविधियों में वृद्धि हुई। इन परिणामों ने टीजी की एंटीऑक्सीडेशन गतिविधि की और पुष्टि की।

इस्केमिक स्ट्रोक के उपचार के लिए प्राकृतिक सिस्टेन्चे ट्यूबुलोसा PHGS75% ECH 30% ACT 12%

बहस

कई अध्ययनों से पता चलता है कि टीसीएम सी. डेजर्टीकोला में व्यापक जैविक गतिविधियाँ हैं, जैसे सीखने, याददाश्त और प्रतिरक्षा की क्षमता को बढ़ाना। हालाँकि, न्यूरोप्रोटेक्शन के लिए सी. डेजर्टीकोला के सक्रिय घटक अस्पष्ट बने हुए हैं। वर्तमान कार्य का उद्देश्य सक्रिय घटकों को स्क्रीन करना हैइस्केमिक स्ट्रोक के विरुद्ध सी. डेजर्टीकोलाएमसीएओ/आर मॉडल पर। सी. डेज़र्टिकोला (टीजी, पीएस और ओएस) से तीन अर्क का उपयोग एमसीएओ/आर चूहों पर उनके प्रभावों के साथ-साथ संभावित तंत्रों का मूल्यांकन करने के लिए किया गया था।

स्ट्रोक एक आम तीव्र मस्तिष्कवाहिकीय रोग है। महामारी विज्ञान संबंधी अध्ययनों से पता चलता है कि स्ट्रोक महिलाओं की तुलना में पुरुषों में अधिक आम है। इस प्रकार, हमारे प्रयोग में, परीक्षणों के लिए नर चूहों को अपनाया गया। हमारे परिणामों ने साबित किया कि I/R प्रेरण ने ऑक्सीडेटिव तनाव और रोधगलन मात्रा को तेज कर दिया, BBB को तोड़ दिया और तंत्रिका और मस्तिष्कवाहिकीय चोट को जन्म दिया। स्क्रीनिंग के बाद, TGs को रोधगलन मात्रा को कम करने और तंत्रिका रीमॉडलिंग और एंजियोजेनेसिस को बढ़ावा देने के लिए पाया गया। इसके अलावा, I/R चोट के बाद TGs को BBB अखंडता बनाए रखने के लिए देखा गया। इसके विपरीत, PSs और OSs I/R चोट में कोई महत्वपूर्ण राहत नहीं लाते हैं। इस प्रकार, TGs को न्यूरोप्रोटेक्शन के लिए C. डेजर्टिकोला का प्रमुख सक्रिय अंश माना जाता है, संभावित रूप से Nrf- 2/Keap-1 मार्ग को सक्रिय करके तंत्रिका रीमॉडलिंग, एंजियोजेनेसिस और BBB अखंडता को बढ़ावा देने के माध्यम से।

बढ़ते प्रमाण संकेत देते हैं कि प्रभावी संपार्श्विक परिसंचरण की स्थापना रोधगलन और इस्केमिक पेनम्ब्रा के गठन से बचने के लिए महत्वपूर्ण है, और इस्केमिक स्ट्रोक के शुरुआती चरण में एक महत्वपूर्ण उपचार है। इस्केमिक रोधगलन के बाद संवहनी एंडोथेलियल कोशिकाओं और चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं का प्रसार संपार्श्विक परिसंचरण की स्थापना को निर्धारित करता है। हालांकि, इस्केमिया मॉडल में एक सामान्य घटना है-यानी, मस्तिष्क के माइक्रोवैस्कुलचर में ऑक्सीडेटिव तनाव व्यापक रूप से मौजूद है। अध्ययन के आंकड़ों ने प्रदर्शित किया है कि बड़ी संख्या में एंटीऑक्सिडेंट BBB के कार्य और एंजियोजेनेसिस के गुणों को बाधित कर सकते हैं। CD31 और a-SMA क्रमशः संवहनी एंडोथेलियल कोशिकाओं के साथ-साथ चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं के मार्कर हैं। सी. डेजर्टीकोला के अर्क के उपर्युक्त कोशिका प्रसार के प्रभाव की जांच करने के लिए, हमने सेरेब्रल इस्केमिक पेनम्ब्रा होमोजेनेट में CD31 और a-SMA की अभिव्यक्तियों की जांच की। हमारे डेटा से पता चला कि TGs ने CD31 और a-SMA की अभिव्यक्तियों को आश्चर्यजनक रूप से बढ़ाया। हालाँकि, PSs और OSs समूहों के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं थे। इसलिए, हमने निष्कर्ष निकाला कि TGs CD31 और a-SMA की अभिव्यक्ति को बढ़ाकर एंजियोजेनेसिस को बढ़ावा देकर मस्तिष्क क्षति को कम कर सकते हैं, जबकि PSs और OSs मस्तिष्क क्षति से ऐसी कोई सुरक्षा प्रदान नहीं करते हैं। इन परिणामों ने आगे पुष्टि की कि केवल TGs ही मस्तिष्क I/R चोट को रोक सकते हैं।

इस्केमिक स्ट्रोक को मस्तिष्क संबंधी इस्केमिया के परिणाम के रूप में माना जा सकता है जो न्यूरोनल प्लास्टिसिटी में कमी या मस्तिष्क क्षेत्रों के रीमॉडलिंग के कारण होता है। स्ट्रोक के अधिकांश रोगी न्यूरोलॉजिकल कमियों से पीड़ित होते हैं। स्ट्रोक के रोगियों के लिए न्यूरोजेनेसिस को सक्रिय करना उनके न्यूरोलॉजिकल कार्यों को बेहतर बनाने के लिए एक आशाजनक रणनीति है। न्यूरोजेनेसिस मस्तिष्क I/R चोट के बाद न्यूरोलॉजिकल फ़ंक्शन रिकवरी में सीधे भाग लेता है। पिछले शोध से पता चलता है कि TGs हिप्पोकैम्पल पिरामिडल कोशिकाओं की उत्तरजीविता दर में सुधार कर सकते हैं और न्यूरोजेनेसिस को प्रेरित कर सकते हैं। ऑक्सीडेटिव तनाव कई बीमारियों, जैसे पार्किंसंस, स्ट्रोक, आदि के दौरान न्यूरॉन्स के नुकसान का कारण बनता है। Nrf-2 अपने प्रमोटर क्षेत्र में न्यूरो-प्रोटेक्शन से संबंधित कई जीनों को ट्रांसक्राइब करता है, जिसमें मुख्य रूप से SOD, MDA, CAT और g-glutamyl cysteine ​​ligases आदि शामिल हैं। SYN, PSD-95, और MAP-2 प्रोटीन, जो सिनैप्टिक गठन और न्यूरोट्रांसमिशन के साथ निकटता से जुड़े हैं, को इस्केमिक पेनम्ब्रा क्षेत्र में अनुसंधान न्यूरोनल प्लास्टिसिटी के मार्कर माना जा सकता है। अध्ययन के बाद, हमने पाया कि TGs के साथ इलाज PSD95, SYN, और MAP-2 की अभिव्यक्तियों को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ा सकता है, जो दर्शाता है कि TGs की मस्तिष्क सुरक्षा I/R के दौरान बढ़ी हुई न्यूरोनल प्लास्टिसिटी के साथ सहसंबंधित थी। हालाँकि, यह अफ़सोस की बात है कि PSs के साथ-साथ OSs समूहों के बीच कोई स्पष्ट अंतर नहीं है। इन परिणामों ने संकेत दिया कि TGs मस्तिष्क I/R चोट के बाद न्यूरोप्लास्टिसिटी को बढ़ा सकते हैं।

स्ट्रोक के रोगियों में इमेजिंग शोध से पता चला है कि BBB डिसफंक्शन को पेरी-इस्केमिक मस्तिष्क (बैंग एट अल., 2007) की एक खास विशेषता माना जा सकता है। TJs, जो साइटोप्लाज्मिक प्रोटीन, ट्रांसमेम्ब्रेन प्रोटीन और केशिका एंडोथेलियल कोशिकाओं के बीच जंक्शन आसंजन अणुओं से बने होते हैं, BBB अखंडता को बनाए रखने में बहुत महत्वपूर्ण हैं (ये एट अल., 2019)। उनमें से, ZO-1, क्लॉडिन-5, और ऑक्लुडिन TJs में सबसे महत्वपूर्ण प्रोटीन हैं। बढ़ते सबूत बताते हैं कि इस्केमिया द्वारा प्रेरित BBB की बढ़ी हुई पारगम्यता आम तौर पर ZO-1, क्लॉडिन-5, और ऑक्लुडिन (काओ एट अल., 2016a; पेज एट अल., 2016; यू एट अल., 2017; लियू एट अल., 2018) के परिवर्तनों के साथ सहसंबंधित होती है। इस कार्य में, परिणामों ने प्रदर्शित किया कि यद्यपि TGs MCAO-प्रेरित मस्तिष्क के ऊतकों में ZO-1, क्लॉडिन-5, और ऑक्लुडिन प्रोटीन की अभिव्यक्तियों को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ा सकते हैं, लेकिन न तो PSs और न ही OSs ने ऐसा किया। BBB में सेरेब्रल एंडोथेलियल कोशिकाएँ होती हैं और यह पेरीसाइट्स (न्यूल-टोथ एट अल., 2016) से निकटता से जुड़ी होती हैं। पेरीसाइट्स BBB अखंडता के लिए महत्वपूर्ण हैं (बेल एट अल., 2010)। इस्केमिक स्ट्रोक तीव्र चरण में पेरीसाइट्स की मृत्यु और मस्तिष्क की एंडोथेलियल कोशिकाओं से अलगाव को ट्रिगर करता है, इस प्रकार माइक्रोवैस्कुलचर को अस्थिर करता है और BBB गुणों को बदलता है (ज़ेकरियाह एट अल., 2013)। हमारे डेटा से पता चला कि TGs केशिकाओं पर पेरीसाइट्स कवरेज को बढ़ा सकते हैं और ZO-1, क्लॉडिन-5, और ऑक्लुडिन के अभिव्यक्ति स्तरों को बढ़ा सकते हैं संक्षेप में, टीजीएस कई तरीकों से मस्तिष्क की चोट को कम कर सकते हैं, जैसे एंजियोजेनेसिस को बढ़ावा देना, न्यूरोनल प्लास्टिसिटी में सुधार करना और बीबीबी की अखंडता को बनाए रखना।

फिर हमने TGs मस्तिष्क सुरक्षा के अंतर्निहित तंत्र का पता लगाने के लिए सिग्नलिंग मार्ग की जांच की। I/R चोट की प्रक्रिया बहुक्रियाशील है, और इस प्रकार रोगजनन में कई तंत्र शामिल हैं। ऑक्सीडेटिव तनाव I/R-प्रेरित मस्तिष्क चोट में योगदान देने वाला एक मौलिक जोखिम कारक है, जैसे कि BBB संरचना क्षति, संवहनी एंडोथेलियल शिथिलता, और इस्केमिक न्यूरोनल चोट का बढ़ना। इस प्रकार, ऑक्सीडेटिव तनाव I/R-प्रेरित मस्तिष्क चोट में एक आकर्षक चिकित्सीय लक्ष्य बन गया है। चरण 2 एंजाइम, जो परमाणु कारक E2-संबंधित कारक-2 (Nrf-2) द्वारा मध्यस्थ होते हैं, को एक महत्वपूर्ण साधन माना जाता है जिसके द्वारा न्यूरॉन्स ऑक्सीडेटिव तनाव के विरुद्ध खुद को बचाते हैं। बढ़ते प्रमाण संकेत देते हैं कि I/R के दौरान Nrf-2 की सक्रियता न्यूरोप्रोटेक्शन के लिए एक संभावित चिकित्सीय लक्ष्य है। अंतर्जात एंटीऑक्सीडेंट रक्षा के एक महत्वपूर्ण विनियामक के रूप में एनआरएफ-2, हीम ऑक्सीजनेज 1 (एचओ-1) और अन्य एंटीऑक्सीडेंट एंजाइमों, जैसे एनएडी (पी) एच क्विनोन ऑक्सीडोरडक्टेस 1 (एनक्यूओ 1), एसओडी, सीएटी, जीएसएच और एमडीए के स्तर की मध्यस्थता करता है। इसके अलावा, एनआरएफ-2 एंजियोजेनेसिस में एक महत्वपूर्ण विनियामक भूमिका निभाता है। वर्तमान अध्ययन से पता चलता है कि संवहनी विकास की प्रक्रिया में एनआरएफ-2 को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ाया और सक्रिय किया जा सकता है।

एंटी-इस्केमिक स्ट्रोक के लिए प्राकृतिक सिस्टेन्चे ट्यूबुलोसा PHGS75% ECH 30% ACT 12%

जैसा कि पहले बताया गया है, TGs में बहुत सारे बायोएक्टिव यौगिक होते हैं, उदाहरण के लिए, इचिनाकोसाइड, ट्यूबुलोसाइड A, एक्टियोसाइड, आइसोएक्टियोसाइड और 2'-एसिटाइलेक्टियोसाइड, और उनमें से कुछ ने मस्तिष्क I/R चोट के बाद न्यूरोप्रोटेक्टिव फ़ंक्शन दिखाए। इचिनाकोसाइड में बहुत सारे औषधीय प्रभाव होते हैं, जैसे कि एंटीऑक्सीडेशन, एंटी-सेनेसेंस, न्यूरोप्रोटेक्शन, एंटी-इंफ्लेमेशन, सिकाट्राइजेशन को बढ़ावा देना, हेपेटोप्रोटेक्शन, हड्डी के निर्माण को बढ़ावा देना और एंटी-ट्यूमर गतिविधियाँ। हाल ही में, इचिनाकोसाइड को केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में एक शक्तिशाली एंटीऑक्सीडेंट के रूप में पहचाना गया है। इचिनाकोसाइड MDA सामग्री को कम कर सकता है और इस्केमिया मस्तिष्क की चोट में SOD और GSH-Px की गतिविधियों में सुधार कर सकता है, और आणविक डॉकिंग विश्लेषण ने दिखाया कि इचिनाकोसाइड Keap-1 से बंध सकता है, जिससे Nrf-2 परमाणु स्थानांतरण हो सकता है। ज़िया द्वारा किए गए अध्ययन से पता चला है कि एक्टियोसाइड ऑक्सीडेटिव तनाव को कम करके MCAO/R चूहों में न्यूरोलॉजिकल घाटे को सुधारने के लिए इंफार्क्ट वॉल्यूम और मस्तिष्क जल सामग्री को कम कर सकता है। अन्य अध्ययनों ने प्रदर्शित किया है कि आइसोएक्टियोसाइड H2O2- उपचारित V79-4 कोशिकाओं में सेलुलर एंटीऑक्सीडेंट एंजाइम, SOD और CAT की गतिविधियों को बढ़ा सकता है। TGs में निहित सक्रिय यौगिकों की उपरोक्त रिपोर्टों के आधार पर, यह निष्कर्ष निकालना संभव है कि TGsएंटीऑक्सीडेशन मार्गों के माध्यम से इस्केमिक स्ट्रोक से बचाव.

ली ने H2O2- पर फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स (PhGs) के न्यूरोप्रोटेक्टिव प्रभावों पर रिपोर्ट की, जो Nrf2/ARE मार्ग के माध्यम से PC12 कोशिकाओं पर अपोप्टोसिस को प्रेरित करते हैं (ली एट अल., 2018)। Nrf2 न्यूक्लियर ट्रांसलोकेशन को ट्रिगर करके और HO-1, NQO1, ग्लूटामेट सिस्टीन लिगेज-कैटेलिटिक सबयूनिट (GCLC), और ग्लूटामेट-सिस्टीन लिगेज मॉडिफ़ायर सबयूनिट (GCLM) (ली एट अल., 2018; गोंग एट अल., 2019) की अभिव्यक्ति को बढ़ाकर इन PhGs को काफी हद तक दबा दिया गया था। इसलिए, ये निष्कर्ष बताते हैं कि Nrf-2/ARE मार्ग न्यूरोनल कोशिकाओं पर PhGs-मध्यस्थ सुरक्षात्मक प्रभावों में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। इसी तरह, इस अध्ययन में, हमने पाया कि TGs I/R चूहों में MDA के स्तर को कम कर सकते हैं और SOD, CAT, और GSH-Px के स्तरों को बढ़ा सकते हैं। इस बीच, TGs नाभिक में Nrf2 अभिव्यक्ति को बढ़ा सकते हैं, कोशिका द्रव्य में इसी अभिव्यक्ति को घटा सकते हैं, और Keap-1 अभिव्यक्ति को महत्वपूर्ण रूप से कम कर सकते हैं। इसलिए, Nrf-2/Keap-1 मार्ग TGs-मध्यस्थ न्यूरोप्रोटेक्टिव प्रभावों में शामिल हो सकता है। इस मार्ग का आगे का सत्यापन भविष्य में ऑक्सीजन-ग्लूकोज अभाव/पुनःऑक्सीजनीकरण चोट मॉडल के साथ इन विट्रो सेल संस्कृति में किया जाएगा। इसके अलावा, हमारे अध्ययन में सी. डेज़र्टिकोला अर्क को लगातार 14 दिनों तक प्रशासित किया गया था। चूंकि वयस्क न्यूरोजेनेसिस 14 दिनों के रिपरफ्यूजन के दौरान न्यूरोप्रोटेक्टिव प्रभावों की व्याख्या को प्रभावित करेगा, इसलिए CTs के न्यूरोप्रोटेक्टिव प्रभाव की खोज में न्यूरोजेनेसिस को हमारे वर्तमान प्रयोग डिजाइन से बाहर नहीं रखा जा सकता है। यह हमारे शोध की सीमा है।

निष्कर्ष में, यह सी. डेज़र्टिकोला से प्राप्त टीजीएस है जोएंजियोजेनेसिस और न्यूरोजेनेसिस को बढ़ानासाथ ही I/R चोट वाले चूहों में BBB की अखंडता को बनाए रखें, लेकिन PSs और OSs को नहीं। प्रभावों को Nrf-2/Keap-1 मार्ग के सक्रियण द्वारा मध्यस्थ किया जा सकता है।

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