झिंजियांग सिस्टैंच पॉलीसेकेराइड: प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों और मुक्त रेडिकल्स को साफ़ करने में सक्षम

अमूर्त

इन विट्रो में सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का अध्ययन किया गया था। एस्कॉर्बिक एसिड को नियंत्रण के रूप में लेना, हाइड्रॉक्सिल रेडिकल्स का उत्पादन करने के लिए फेंटन जैसी प्रतिक्रिया लेना, सुपरऑक्साइड आयन रेडिकल्स का उत्पादन करने के लिए डोपामाइन की ऑटोऑक्सीडेशन प्रतिक्रिया, सिंगलेट ऑक्सीजन का उत्पादन करने के लिए हाइड्रोजन पेरोक्साइड के साथ सोडियम हाइपोक्लोराइट की प्रतिक्रिया, प्रयोगात्मक मॉडल के रूप में डिफेनिल बिटर हाइड्राज़िन रेडिकल्स, सुपरऑक्साइड आयन रेडिकल्स पर सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड का प्रभाव, हाइड्रॉक्सिल रेडिकल्स डीपीपीएच · मुक्त रेडिकल (डिफेनिल) कड़वा हाइड्राज़ीन रेडिकल), सिंगलेट ऑक्सीजन का अपमार्जक प्रभाव। परिणामों से पता चला कि सिस्टैंच डेजर्टिकोला के पॉलीसेकेराइड का उपरोक्त मुक्त कणों पर स्पष्ट सफाई प्रभाव था, और सफाई प्रभाव सकारात्मक रूप से पॉलीसेकेराइड की एकाग्रता के साथ सहसंबद्ध था।

कीवर्ड :सिस्टैंच डेजर्टिकोला; पॉलीसेकेराइड; कट्टरपंथी मुक्त

1 . परिचय

जीवन गतिविधियों के ऑक्सीडेटिव चयापचय की प्रक्रिया में शरीर लगातार विभिन्न प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन मुक्त कणों (आरओएस) का उत्पादन करता है, जो एरोबिक चयापचय की ऑक्सीकरण-कमी प्रतिक्रिया के मध्यवर्ती उत्पाद हैं।शोध में पाया गया है कि अतिरिक्त मुक्त कण जीवन मैक्रोमोलेक्यूल्स और विभिन्न ऑर्गेनेल पर हमला करेंगे, जिससे आणविक स्तर, कोशिका स्तर, ऊतक और अंग स्तर पर विभिन्न नुकसान होंगे, शरीर की उम्र बढ़ने की प्रक्रिया तेज हो जाएगी और थ्रोम्बोसिस, मधुमेह, एथेरोस्क्लेरोसिस, ट्यूमर इत्यादि जैसी बीमारियों को प्रेरित किया जाएगा।. [1]. मानव शरीर में रासायनिक रूप से संश्लेषित एंटीऑक्सिडेंट की विषाक्तता के कारण, उच्च दक्षता और कम विषाक्तता वाले प्राकृतिक एंटीऑक्सिडेंट की खोज जो ऑक्सीजन मुक्त कणों को हटा सकते हैं, हाल के वर्षों में चिकित्सा, भोजन, रासायनिक इंजीनियरिंग और अन्य क्षेत्रों में एक गर्म शोध विषय बन गया है।

सिस्टैंच डेजर्टिकोला (Y.C...)एक दुर्लभ चीनी पारंपरिक औषधि है और इसे "डेजर्ट जिनसेंग" के नाम से जाना जाता है। [2]. सिस्टैंच डेजर्टिकोला मापॉलीसेकेराइड सिस्टैंच डेजर्टिकोला के मुख्य जैव सक्रिय घटकों में से एक है, लेकिन इस पर कोई रिपोर्ट नहीं है कि सिस्टैंच डेजर्टिकोला के पॉलीसेकेराइड में मुक्त कणों को ख़त्म करने का प्रभाव है या नहीं। इस पेपर में, सुपरऑक्साइड आयन रेडिकल, हाइड्रॉक्सिल रेडिकल, डीपीपीएच · फ्री रेडिकल और सिंगलेट ऑक्सीजन पर सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड के सफाई प्रभाव को इसकी एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का मूल्यांकन करने और इस प्राकृतिक संसाधन के पूर्ण विकास और उपयोग के लिए वैज्ञानिक आधार प्रदान करने के लिए वर्णक्रमीय विश्लेषण द्वारा निर्धारित किया गया था।

चीनी जड़ी बूटी सिस्टैंच

2. प्रायोगिक भाग

2.1 उपकरण और अभिकर्मक

UV-2401 यूवी-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (शिमदज़ु, जापान); LumatLB9507 अल्ट्रा-सेंसिटिव ट्यूब ल्यूमिनोमीटर (जर्मनी

बर्थोल्डटेक्नोलॉजीज); RE-52CS रोटरी बाष्पीकरणकर्ता (शंघाई यारोंग बायोकेमिकल उपकरण फैक्टरी); HW-SY इलेक्ट्रॉनिक थर्मोस्टेटिक वॉटर बाथ (जिंटन शिन्हांग इंस्ट्रूमेंट फैक्ट्री); PHS-3C पीएच मीटर (शंघाई प्रिसिजन साइंटिफिक इंस्ट्रूमेंट कंपनी लिमिटेड); DZF-6020 वैक्यूम सुखाने वाला ओवन (शंघाई यिहेंग टेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड)। सिस्टैंच डेजर्टिकोला: कुइतुन फार्मास्युटिकल कॉर्पोरेशन से खरीदा गया। ल्यूमिनोल (सिग्मा, यूएसए), डोपामाइन (चाइना इंस्टीट्यूट फॉर द कंट्रोल ऑफ फार्मास्युटिकल एंड बायोलॉजिकल प्रोडक्ट्स), FeSO4, EDTA, विटामिन C, H2O2, NaClO, Na2CO3, NaHCO3, आदि सभी घरेलू विश्लेषणात्मक अभिकर्मक हैं। प्रायोगिक जल आयन-विनिमय आसुत जल है।

2.2 प्रायोगिक विधि

2.2.1 सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की निष्कर्षण विधि

30 ग्राम सिस्टैंच डेजर्टिकोला पाउडर लें और इसे 500 एमएल शंक्वाकार फ्लास्क में डालें। इसे क्रमशः 6 घंटों के लिए पेट्रोलियम ईथर (60-90 डिग्री), ईथर और 80% इथेनॉल गर्म समाधान (30 डिग्री) में डुबोएं, और विलायक को सुखाने के लिए अवशेष को वाष्पित किया जाता है। फिल्टर अवशेषों को 24 घंटे के लिए 1:10 के अनुपात में पानी में भिगोएँ, इसे 30 डिग्री पर गर्म करें और 100 मिनट के लिए निकालें। निष्कर्षण के बाद, सतह पर तैरनेवाला प्राप्त करने के लिए अपकेंद्रित्र। सतह पर तैरनेवाला कम दबाव में केंद्रित होने के बाद, यह 3 गुना मात्रा के 95% इथेनॉल के साथ अवक्षेपित होता है। इसे 4 डिग्री पर 24 घंटे तक खड़े रहने की अनुमति है। सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, इसे एकत्र किया जाता है और अवक्षेपित किया जाता है। वैक्यूम सुखाने के बाद, सिस्टैंच डेजर्टिकोला का कच्चा पॉलीसेकेराइड प्राप्त किया जा सकता है। 1.00 ग्राम क्रूड पॉलीसेकेराइड का वजन करें, इसे पानी में घोलें, और इसे स्टैंडबाय के लिए 50 एमएल वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में डालें।

डेजर्ट जिनसेंग-एंटीऑक्सीडेंट

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2.2.2 सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की O2 · मुक्त रेडिकल को साफ़ करने की क्षमता पर परीक्षण

डोपामाइन ऑटोऑक्सीडेशन [3] से सुपरऑक्साइड फ्री रेडिकल्स (O-2 ·) के उत्पादन द्वारा सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की O-2 · तक सफाई करने की क्षमता का परीक्षण किया गया था। बारी-बारी से स्केल के साथ सुखाने वाली टेस्ट ट्यूब में 3.0mL 0.1mmol/LpH=10.12 कार्बोनेट बफर समाधान, 3.0mL पानी, और विभिन्न सांद्रता के 0.5mL पॉलीसेकेराइड नमूना समाधान जोड़ें। 5 मिनट के लिए 30 डिग्री पानी के स्नान में पहले से गरम करने के बाद, 30 डिग्री पानी के स्नान में 1.0 एमएल 2.0 मिमीोल/एल डोपामाइन पहले से गरम करें, तुरंत मिश्रण करें और समय दें, प्रतिक्रिया को 5 मिनट के लिए 30 डिग्री पर रखें, और 10 मोल/एल एचसीएल की 2 बूंदों के साथ प्रतिक्रिया को तुरंत रोकें। संदर्भ के रूप में बफर समाधान का उपयोग करें, 221 एनएम पर अवशोषण (नमूना ए) को मापें, नमूना (रिक्त ए) को रिक्त समूह में 0.5 एमएल पानी से बदलें, और नियंत्रण समूह में नमूने को 0.5 एमएल एस्कॉर्बिक एसिड से बदलें, प्रत्येक नमूने को समानांतर में तीन बार मापें, और औसत मूल्य लें। O-2 · निकासी दर (%)=(एक रिक्त - एक नमूना)/एक रिक्त × 100%

2.2.3 सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की ओएच मुक्त रेडिकल को साफ करने की क्षमता पर परीक्षण

Dएज़र्ट लिविंग सिस्टैंच-एंटीऑक्सिडेंट

EDTA-Fe (Ⅱ) - मेथिलीन ब्लू - H2O2 प्रणाली का उपयोग हाइड्रॉक्सिल रेडिकल पर सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की सफाई क्षमता का परीक्षण करने के लिए किया गया था। सिद्धांत यह है कि EDTA-Fe (Ⅱ) हाइड्रोजन पेरोक्साइड के साथ प्रतिक्रिया करके · OH मुक्त कण उत्पन्न करता है, जो 660 एनएम पर मेथिलीन नीले समाधान की विशेषता अवशोषण शिखर को कम कर देता है।

1.0mL 5mmol/L LFeSO4 घोल, 1.2mL 5mmol/L LEDTA घोल, 2.0mL 0.03mol/L NaH2PO4-Na2HPO4 (pH=7.4) बफर घोल, और 1.3mL 20mmol/L हाइड्रोजन पेरोक्साइड घोल को स्टॉपर्स के साथ 10mL टेस्ट ट्यूब की श्रृंखला में डालें, अच्छी तरह से हिलाएं, डालें 0.2mmol/L मेथिलीन नीला घोल का 0.7mL, और फिर परीक्षण किए जाने वाले घोल का 1.0mL और विभिन्न सांद्रता के विटामिन C1.0 को क्रमशः पानी के साथ 10.00mL तक पतला करें, अच्छी तरह मिलाएं, 30 मिनट के लिए 37 डिग्री पर रखें, और प्रत्येक घोल के अवशोषण मूल्य को 660nm पर मापें, खाली समूह ने नमूना समाधान को पानी से बदल दिया। प्रत्येक नमूने को समानांतर में तीन बार मापा जाएगा, और औसत मूल्य लिया जाएगा। · नमूने की OH रेडिकल सफाई दर (%) क्षतिग्रस्त ट्यूब का ए1 - अवशोषण मूल्य; नमूना जोड़ने के बाद ए2 -- फोटोमीट्रिक मान।

2.2.4 डीपीपीएच पर परीक्षण · सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की सफाई क्षमता

0.1 एमएल सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड घोल लें और इसे 5.0 एमएल डीपीपीएच · घोल में मिलाएं, इसे जल्दी से मिलाएं, और कमरे के तापमान पर 10 मिनट तक रखें,

517एनएम तरंगदैर्घ्य [4] पर इसका अवशोषण परिवर्तन निर्धारित करें। प्रत्येक नमूने को समानांतर में तीन बार मापा जाएगा, और औसत मूल्य लिया जाएगा। डीपीपीएच का नमूना निकासी दर · (%)=1 - [(एबी)/ए0] × 100% के सूत्र में: ए0 -- डीपीपीएच का अवशोषण मूल्य · (1.9एमएलडीपीपीएच ·+0.1एमएल50% इथेनॉल) बिना नमूने के; ए - डीपीपीएच के साथ प्रतिक्रिया के बाद नमूने का अवशोषण मूल्य; बी - खाली नमूने का अवशोषण मूल्य (नमूना 0.1एमएल+1.9एमएल 50% इथेनॉल)।

2.2.5 सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड स्केवेंजिंग सिंगलेट ऑक्सीजन 1O2 परीक्षण

सिंगल-लाइन ऑक्सीजन (1O2) 37 डिग्री [5] पर NaClO और H2O2 की रासायनिक प्रतिक्रिया से उत्पन्न होती है। 1O2 के निर्धारण के लिए उपयोग किया जाने वाला घोल 100 μL2.8mmol/L NaClO घोल, 400 μL 5 mmol/NaOH घोल, 300 μL 10 mmol/H2O2 घोल, और 50 μL 1 mmol/L/Luminol घोल है। प्रतिक्रिया के दौरान, प्रतिक्रिया समाधान को नमूना समाधान में जोड़ा जाता है, और केमिलुमिनसेंस उपकरण स्वचालित रूप से एक ही समय में प्रतिक्रिया प्रक्रिया को रिकॉर्ड करता है। रिक्त नियंत्रण के रूप में NaClO-H2O2-NaOH-Luminol लें। प्रतिक्रिया शुरू करें, और प्रक्रिया द्वारा निर्धारित मात्रा के अनुसार केमिलुमिनसेंस उपकरण की भंडारण बोतल से नमूना ट्यूब में प्रतिक्रिया समाधान जोड़ें। फिर प्रतिक्रिया मिश्रण की केमिलुमिनसेंस तीव्रता को हर 5 सेकंड में रिकॉर्डिंग पेपर पर दर्ज किया जाता है, प्रत्येक नमूने को समानांतर में तीन बार मापा जाता है, और औसत मूल्य लिया जाता है।

निकासी दर की गणना निम्नलिखित सूत्र के अनुसार की जाती है: निकासी दर (%)

3) परिणाम और चर्चा

3.1 सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड का O-2 · पर सफाई प्रभाव

सिस्टैंच ट्यूबुलोसा-एंटीओ के फायदेxident

O-2 · का रासायनिक गुण सक्रिय है, जो बायोफिल्म पर फैटी एसिड को पेरोक्साइड उत्पन्न कर सकता है, और फिर कोशिकाओं को नष्ट कर सकता है [6]। इस पेपर में, O2 · की सफाई क्षमता निर्धारित करने के लिए डोपामाइन विधि का उपयोग किया गया था। सिस्टैंच डेजर्टिकोला की O2 को साफ करने की क्षमता चित्र 1 में दिखाई गई है। परिणामों से पता चला है कि सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड डोपामाइन के ऑटोऑक्सीकरण द्वारा उत्पादित O2 · को रोक सकता है, और मापी गई एकाग्रता सीमा (0-8mg/mL) के भीतर एकाग्रता में वृद्धि के साथ बढ़ सकता है, लेकिन सफाई क्षमता एस्कॉर्बिक एसिड की तुलना में कम थी।

3.2 सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड · ओएच का सफाई प्रभाव

·ओएच सक्रिय ऑक्सीजन प्रजातियों में सबसे सक्रिय ऑक्सीजन-मुक्त रेडिकल्स में से एक है। यह जीवित कोशिकाओं में लगभग किसी भी जैविक मैक्रोमोलेक्यूल के साथ प्रतिक्रिया कर सकता है और शरीर के ऊतकों में लिपिड पेरोक्सीडेशन, प्रोटीन पोलीमराइजेशन, डीपोलाइमराइजेशन, न्यूक्लिक एसिड ब्रेकेज इत्यादि जैसी जैव रासायनिक प्रक्रियाओं को जन्म दे सकता है, जिससे ऊतक और कोशिका रोग हो सकते हैं, जिससे विभिन्न बीमारियों की घटना हो सकती है और शरीर की उम्र बढ़ने में तेजी आ सकती है [7]। सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की · OH परिमार्जन क्षमता चित्र 2 में दिखाई गई है। परिणामों से पता चला कि सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसैकेराइड का · OH पर अच्छा अपमार्जन प्रभाव पड़ा, और यह सांद्रता में वृद्धि के साथ बढ़ गया।

3.3 सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की डीपीपीएच तक सफाई करने की क्षमता ·

डीपीपीएच · (डिफेनिल कड़वा हाइड्राज़िन रेडिकल) एक स्थिर मुक्त रेडिकल है, जो कार्बनिक सॉल्वैंट्स में बैंगनी होता है और 517nm के पास मजबूत अवशोषण होता है। एंटीऑक्सिडेंट जोड़ने के बाद, कुछ मुक्त कण हटा दिए जाते हैं, जो अवशोषण को कमजोर कर देता है, जिसका उपयोग इस पदार्थ की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का मूल्यांकन करने के लिए किया जा सकता है [8]। डीपीपीएच · सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की सफाई क्षमता के लिए चित्र 3 देखें। प्रयोगात्मक परिणामों से पता चला कि डीपीपीएच · पर सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की सफाई क्षमता सकारात्मक रूप से इसकी एकाग्रता से संबंधित थी, और सफाई क्षमता एस्कॉर्बिक एसिड की तुलना में अधिक थी।

3.4 सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की 1O2 तक सफाई करने की क्षमता

सिंगल-लाइन ऑक्सीजन सक्रिय रासायनिक गुणों के साथ उत्तेजित आणविक ऑक्सीजन है। क्योंकि अयुग्मित इलेक्ट्रॉन युग्मित होते हैं, मुक्त कण अधिक सक्रिय रासायनिक गुण दिखाते हैं [9]। सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की 1O2 तक सफाई करने की क्षमता चित्र 4 में दिखाई गई है। प्रायोगिक परिणामों से पता चला है कि सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की सफाई क्षमता 0-4.0mg/mL की सीमा में एस्कॉर्बिक एसिड की तुलना में कम थी, और सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की सफाई क्षमता एस्कॉर्बिक एसिड की तुलना में अधिक थी जब एकाग्रता इससे अधिक थी। 4.0एमजी/एमएल.

 

4. निष्कर्ष

इन विट्रो में सिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का विभिन्न प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन-मुक्त कट्टरपंथी प्रणालियों के माध्यम से विस्तार से अध्ययन किया गया था।प्रयोगात्मक परिणामों से, यह देखा जा सकता है कि प्रयोगात्मक एकाग्रता सीमा के भीतर, सिस्टैंच डेजर्टिकोला के पॉलीसेकेराइड अर्क का O2 ·, · OH, DPPH · और 1O2 पर सफाई प्रभाव पड़ता है, और अलग-अलग प्रणालियों के लिए सफाई प्रभाव अलग-अलग होते हैं।नतीजों ने यह दिखायासिस्टैंच डेजर्टिकोला पॉलीसेकेराइड एक प्रभावी बहिर्जात प्राकृतिक एंटीऑक्सीडेंट है, जो आगे के अनुसंधान, विकास और व्यापक उपयोग के योग्य है।.

सिस्टैंच 200 मि.ग्रा-एंटीओxident

संदर्भ

[1] लिंग गुआंटिंग। एंटीऑक्सीडेंट भोजन और स्वास्थ्य [एम]। बीजिंग: केमिकल इंडस्ट्री प्रेस, 2004.1-58।

[2] गाओ मिंग, तियान ज़ियू, कै होंगमेई, और अन्य। सिस्टैंच डेजर्टिकोला [जे] से क्षार निष्कर्षण और पॉलीसेकेराइड का रासायनिक विश्लेषण। कृषि एवं खाद्य विज्ञान एवं प्रौद्योगिकी, 2008,2 (3): 32-34।

[3] शी शुआंगकुन, सोंग शिनफैंग। डोपामाइन का ऑटोऑक्सीकरण [जे]। जर्नल ऑफ़ हेबेई नॉर्मल यूनिवर्सिटी, 1997,21 (4): 387-389।

[4] झांग ज़ेकिंग, तियान यिंगजुआन, झांग जिंग। फैंगफेंग पॉलीसेकेराइड [जे] की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि पर अध्ययन। चीनी चिकित्सा, 2008,31 (2): 268-271।

[5] ली हैपिंग, झांग शुहाई, झांग कुन्शेंग। लेंटिनन [जे] की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि पर अध्ययन। खाद्य अनुसंधान एवं विकास, 2008,29 (4): 56-60।

[6] मो जियान। मेडिकल फ्री रेडिकल बायोलॉजी का परिचय [एम]। बीजिंग: पीपुल्स हेल्थ पब्लिशिंग हाउस, 1989.21-25।

[7]फ्रेडरिकवीएल.फ्रीरेडिकल्स[जे].क्लिनिकलकेमिस्ट्री,1993,65(12):374-377।

[8]मात्सुदाएम, नागाहामावाई, सातोटेटल.डीएमवाईइसास्पेसिफिकडीएमडोमेनजीनरिक्वायर्डफॉरमेलडेवलपमेंटइनदमेडकाफिश[जे].नेचर,2002,30:559-563।

[9] कानोफ़्स्की जेआर। सिंगलेटऑक्सीजनप्रोडक्शनबाय लैक्टोपेरोक्सिडेज़ [जे]। जर्नल ऑफ़ बायोलॉजिकल केमिस्ट्री, 1983,258(10):5991-5993।