ओकरा के एंटीऑक्सीडेंट और एंटी-थकान घटक
Mar 21, 2022
अधिक जानकारी के लिए:ali.ma@wecistanche.com
सार
भिंडी (Abelmoschus esculentus (L.) Moench), एक स्वस्थ सब्जी, उष्णकटिबंधीय और उपोष्णकटिबंधीय क्षेत्रों में व्यापक रूप से फैली हुई है। पिछले अध्ययनों ने साबित किया है कि भिंडी की फली होती हैथकान-विरोधी गतिविधि,और इस शोध का उद्देश्य यह स्पष्ट करना है किथकान मिटाने वालाघटक इसे प्राप्त करने के लिए, हमने भिंडी की फली (ओपीडी) को बीज (ओएसडी) और खाल (ओएसके) में विभाजित किया और कुल पॉलीसेकेराइड, कुल पॉलीफेनोल्स, कुल फ्लेवोनोइड्स, आइसोक्वेर्सिट्रिन और क्वेरसेटिन की सामग्री की तुलना की -3-ओ-जेंटियोबायोज और एंटीऑक्सिडेंट इन विट्रो और . में गतिविधिथकान रोधी गतिविधिविवो में OSD और OSK के बीच। कुल पॉलीफेनोल्स और कुल पॉलीसेकेराइड की सामग्री ओएसडी में क्रमशः 29.5 प्रतिशत और 14.8 प्रतिशत और ओएसके में 1.25 प्रतिशत और 43.1 प्रतिशत थी। कुल फ्लेवोनोइड्स, आइसोक्वेर्सिट्रिन और क्वेरसेटिन-3-O-gentiobiose (क्रमशः 5.35 प्रतिशत, 2.067 प्रतिशत और 2.741 प्रतिशत) केवल OSD में पाए गए थे। 1-डाइफिनाइल-2-पिक्रीलहाइड्राज़िल (डीपीपीएच) सफाई, फेरिक कम करने वाली एंटीऑक्सीडेंट शक्ति (एफआरएपी) और शक्ति परीक्षण को कम करने, और वजन-भारित तैराकी परीक्षण सहित एंटीऑक्सीडेंट परख, ओएसडी में महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट और महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट होते हैं।थकान रोधी प्रभाव. इसके अलावा, जैव रासायनिक निर्धारण से पता चला किथकान रोधी गतिविधिOSD रक्त लैक्टिक एसिड (BLA) और यूरिया नाइट्रोजन (BUN) के स्तर को कम करने, यकृत ग्लाइकोजन भंडारण को बढ़ाने और malondialdehyde (MDA) स्तर को कम करके और सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज (SOD) और ग्लूटाथियोन पेरोक्सीडेज (GSH-) को बढ़ाकर एंटीऑक्सीडेंट क्षमता को बढ़ावा देने के कारण होता है। पीएक्स) का स्तर। ये परिणाम साबित हुए भिंडी के बीज थेथकान मिटाने वालाभिंडी की फली का हिस्सा और पॉलीफेनोल्स और फ्लेवोनोइड सक्रिय घटक थे।

1 परिचय
थकान एक जटिल शारीरिक घटना है, जिसे स्वैच्छिक गतिविधियों को शुरू करने या बनाए रखने में कठिनाई के रूप में परिभाषित किया गया है [1]। उम्र के साथ बढ़ने और कैंसर, अवसाद, एचआईवी संक्रमण, मल्टीपल स्केलेरोसिस और पार्किंसंस रोग के रोगियों में पेश होने के अलावा, आधुनिक जीवन की बढ़ती गति के साथ सामान्य मनुष्यों में थकान अधिक से अधिक सामान्य लक्षण बनता जा रहा है [2-4]। बड़े सामुदायिक सर्वेक्षणों से पता चला है कि आधे से अधिक वयस्क आबादी थकान की शिकायत करती है [5,6]। लंबे समय तक जमा या पुरानी थकान न केवल जीवन की गुणवत्ता को कम करती है, बल्कि क्रोनिक थकान सिंड्रोम और अन्य जैविक बीमारियों की ओर ले जाती है, और यहां तक कि करोशी (अधिक काम के कारण तीव्र हृदय रोगों से असामान्य मृत्यु [7]) की ओर ले जाती है। थकान के कारणों के बारे में कई सिद्धांत हैं, जैसे कि थकावट सिद्धांत, जो बताता है कि थकान एक्टिन-मायोसिन युग्मन के लिए उपलब्ध एटीपी की कमी के कारण होती है, Na`/K` पंपिंग और सीए 2' सार्कोप्लास्मिक रेटिकुलम द्वारा तेज [8-11] ]; होमोस्टैसिस अशांति सिद्धांत, जो इंगित करता है कि थकान विभिन्न चयापचय उपोत्पादों के संचय के कारण होती है [10,12]; और आपदा सिद्धांत यह दर्शाता है कि बल उत्पादन के मार्ग के साथ एक या कई साइटों पर विफलता के कारण थकान विकसित हो सकती है [13]। इनमें से, ऑक्सीडेटिव तनाव को व्यापक रूप से थकान के एटियलजि में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाने के लिए माना जाता है [10,13-16]। कुछ जड़ी-बूटियों के एंटीऑक्सिडेंट को काफी थकान-विरोधी प्रभाव दिखाया गया है, जो इंगित करता है कि एंटीऑक्सिडेंट उपचार एक मूल्यवान थकान-विरोधी चिकित्सीय दृष्टिकोण हो सकता है [17-20]। इसलिए, उपभोक्ता ऑक्सीडेटिव क्षति को कम करने और थकान से लड़ने के लिए अपने आहार में अधिक प्राकृतिक एंटीऑक्सीडेंट घटकों की मांग कर रहे हैं। ओकरा (एबेलमोस्कस एस्कुलेंटस (एल।) मोएंच, परिवार: मालवेसी), जिसे भिंडी, भिंडी और गंबो के रूप में भी जाना जाता है, अफ्रीका का एक वार्षिक पौधा है और इसे दुनिया भर के विभिन्न देशों में उगाया जाता है, मुख्यतः उष्णकटिबंधीय, उपोष्णकटिबंधीय, और गर्म समशीतोष्ण क्षेत्र।
भिंडी की फली का उपयोग लंबे समय से सब्जी और आहार दवाओं के स्रोत के रूप में किया जाता रहा है। पारंपरिक एशियाई और अफ्रीकी चिकित्सा में, भिंडी की फली का उपयोग गैस्ट्र्रिटिस [21] से निपटने के लिए एक श्लेष्मायुक्त भोजन के रूप में किया जाता है। औषधीय अध्ययनों से पता चला है कि भिंडी में एंटीऑक्सिडेंट, न्यूरोप्रोटेक्टिव, एंटीडायबिटिक, एंटीहाइपरलिपिडेमिक और थकान-रोधी गतिविधियाँ होती हैं [22-26]। हालांकि भिंडी की फली की थकान-रोधी गतिविधि [26] से पहले सिद्ध हो चुकी है, लेकिन इसकी थकान-विरोधी गतिविधियों और घटकों के बारे में बहुत कम जानकारी है। पिछले साहित्य ने बताया है कि भिंडी की फली में पॉलीसेकेराइड, पॉलीफेनोल्स और फ्लेवोनोइड्स की उच्च सामग्री होती है [27-34]। यह भी प्रदर्शित किया गया है कि पॉलीफेनोल्स और फ्लेवोनोइड्स में पिछले अध्ययनों [15,18,20,35,36] में मजबूत एंटीऑक्सिडेंट और थकान-विरोधी प्रभाव होते हैं। क्या अधिक है, हमारे प्रारंभिक गुणात्मक प्रयोग, जिसमें हमने रंग विकसित करने वाले अभिकर्मक के रूप में क्लोराइड फेरिक घोल का उपयोग किया, से पता चला कि भिंडी के बीज के अर्क ने एक मजबूत फेनोलिक प्रतिक्रिया प्रदर्शित की; हालाँकि, इसकी त्वचा के अर्क ने शायद ही ऐसी प्रतिक्रिया (पूरक सामग्री) प्रदर्शित की, जिससे पता चलता है कि भिंडी के बीजों में भिंडी की खाल की तुलना में पॉलीफेनोल्स और फ्लेवोनोइड्स की उच्च सामग्री होती है। इसलिए, यह अनुमान लगाया जा सकता है कि भिंडी के बीज भिंडी की फली का थकान-विरोधी हिस्सा हो सकते हैं, और पॉलीफेनोल्स और फ्लेवोनोइड सक्रिय घटक हो सकते हैं। अध्ययन का उद्देश्य भिंडी की फली के थकान-रोधी घटकों को स्पष्ट करना था। इसे प्राप्त करने के लिए, हमने ताजा भिंडी की फली को बीज और खाल में विभाजित किया और कुल पॉलीसेकेराइड, कुल पॉलीफेनोल्स, कुल फ्लेवोनोइड्स, आइसोक्वेर्सिट्रिन, और क्वेरसेटिन -3-ओ-जेंटियोबायोज, और इन विट्रो और एंटी-ऑक्सीडेंट गतिविधियों की रासायनिक सामग्री की तुलना की। भिंडी के बीज और खाल के बीच विवो में थकान की गतिविधियाँ। इन सभी परिणामों से पता चला कि भिंडी के बीज भिंडी की फली का थकान-विरोधी हिस्सा थे, और पॉलीफेनोल्स और फ्लेवोनोइड सक्रिय घटक थे। भिंडी में थकान-रोधी गतिविधियों के संभावित तंत्रों का भी अध्ययन किया गया।
2. प्रायोगिक खंड
2.1. संयंत्र सामग्री और निष्कर्षण
ताजा भिंडी की फली जुलाई 2013 में एक बाजार (सान्या, हैनान प्रांत, चीन) से खरीदी गई थी। पौधे को प्रोफेसर बेंगांग झांग, इंस्टीट्यूट ऑफ मेडिसिनल प्लांट, चाइनीज एकेडमी ऑफ मेडिकल साइंसेज और पेकिंग यूनियन मेडिकल कॉलेज, बीजिंग द्वारा प्रमाणित किया गया था। चीन, जहां वाउचर के नमूने (नंबर 20130705) संस्थान के हर्बेरियम में जमा किए गए हैं। 2.5 किलो भिंडी की ताजी फली के दो भाग तैयार किए गए। सूखे भिंडी की फली (251.3 ग्राम) प्राप्त करने के लिए एक भाग को सीधे लियोफिलाइज़ किया गया था। दूसरे भाग को भिंडी के बीज और भिंडी की खाल में विभाजित किया गया था, क्रमशः सूखे भिंडी के बीज (50.1 ग्राम) और सूखे भिंडी की खाल (200.5 ग्राम) प्राप्त करने के लिए लियोफिलाइज्ड। भिंडी की फली, बीज और खाल को अच्छी तरह से पिसा जाता है और 1500 एमएल उबलते पानी में से प्रत्येक को 1 घंटे (3 बार) के लिए अलग से निकाला जाता है। प्रत्येक फ़िल्टर किए गए तरल को क्रमशः भिंडी की फली (ओपीडी, 105.4 ग्राम), भिंडी के बीज (ओएसडी, 20.5 ग्राम), और भिंडी की खाल (ओएसके, 84.1 ग्राम) के अवशेषों को प्राप्त करने के लिए वैक्यूम के तहत संयुक्त और केंद्रित किया गया था। इसलिए, ओपीडी:ओएसके: ओएसडी के अर्क का अनुपात लगभग 5:4:1 है। बाद के रासायनिक विश्लेषण और पशु प्रयोगों तक सभी नमूनों को 20 C पर संग्रहीत किया गया था।

2.2. रसायन और अभिकर्मक
2.3. जानवरों
नर ICR चूहों (20–22 g) को वाइटल रिवर लेबोरेटरीज (योग्य संख्या: SCXK 2012-0001, बीजिंग, चीन) से खरीदा गया था। चूहों को एक स्थिर तापमान (23 C 2 C) और आर्द्रता (50 प्रतिशत 10 प्रतिशत) के तहत 12/12- घंटे के प्रकाश/अंधेरे चक्र (रोशनी पर) के तहत 6 जानवरों के समूहों में प्रति पिंजरे में रखा गया था। सुबह 8:00 से 8:00 बजे तक)। जानवरों को एसपीएफ़ (विशिष्ट रोगज़नक़ मुक्त) पशु घर में एक मानक चाउ आहार और निष्फल पेयजल तक मुफ्त पहुंच थी। सभी प्रायोगिक प्रक्रियाएं औषधीय पादप विकास संस्थान के प्रायोगिक पशु केंद्र अकादमी की देखरेख और अनुमोदन के तहत और प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए NIH गाइड (आठवें संस्करण) के अनुसार सख्ती से आयोजित की गईं [37]।
2.4. ओएसडी और ओएसके का रासायनिक विश्लेषण
2.4.1. कुल Flavonoid (TF) सामग्री का निर्धारण

2.4.2. कुल पॉलीफेनोल (टीपी) सामग्री का निर्धारण
टीपी सामग्री को मामूली संशोधन [38] के साथ फोलिन-द सिओकैटू पद्धति का उपयोग करके निर्धारित किया गया था। संक्षेप में, 50 मिलीग्राम के नमूने को 25 एमएल 50 प्रतिशत मेथनॉल समाधान के साथ मिलाया गया था, फिर 0.5 एमएल नमूना समाधान, 0.3 एमएल फोलिन-सियोकेतु के अभिकर्मक और 10 एमएल सोडियम कार्बोनेट (10 प्रतिशत) पर्याप्त थे। मिश्रित, और फिर मात्रा को आसुत जल के साथ 25 एमएल तक समायोजित किया गया। मिश्रण को 1 घंटे के लिए अंधेरे में 50 डिग्री सेल्सियस पर खड़े होने की अनुमति दी गई थी। अवशोषण 765 एनएम मापा गया था। गैलिक एसिड का अंशांकन वक्र तैयार किया गया था। परिणाम प्रति मिलीग्राम नमूनों में मिलीग्राम गैलिक एसिड समकक्ष के रूप में व्यक्त किए गए थे।
2.4.3. Isoquercitrin और Quercetin का निर्धारण-3-O-Gentiobiose
2.4.4. कुल पॉलीसेकेराइड (टीपीएस) सामग्री का निर्धारण
टीपीएस सामग्री को फिनोल-सल्फ्यूरिक एसिड विधि [39,40] के साथ निर्धारित किया गया था। संक्षेप में, 8 0 मिलीग्राम का नमूना 50 एमएल आसुत जल में भंग कर दिया गया था, और फिर प्रोटीन को सैवेज विधि (नमूना समाधान: क्लोरोफॉर्म: एन-ब्यूटाइल अल्कोहल=20: 4: 1) से हटा दिया गया था। फिर, कच्चे पॉलीसेकेराइड निकालने के लिए परिणामी चिपचिपा समाधान में इथेनॉल की चार गुना मात्रा जोड़ा गया था। अवक्षेप प्राप्त करने के लिए इथेनॉल समाधान को 30 मिनट के लिए 617.4 g पर सेंट्रीफ्यूज किया गया था। अवक्षेप को इथेनॉल, एसीटोन और ईथर से क्रमिक रूप से धोया गया और 250 एमएल आसुत जल में घोल दिया गया। फिर, 0.1 एमएल पॉलीसेकेराइड घोल को 0.9 एमएल डिस्टिल्ड वॉटर, 1 एमएल 5 प्रतिशत फिनोल घोल और 5 एमएल सल्फ्यूरिक एसिड के साथ एक टेस्ट ट्यूब में मिलाया गया और 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर रखा गया। यूनिको -2012 यूवी-विज़ स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (शंघाई, चीन) के साथ अवशोषण को 490 एनएम पर मापा गया था। ग्लूकोज का एक अंशांकन वक्र स्थापित किया गया था, और टीपीएस सामग्री को अंशांकन वक्र के प्रतिगमन समीकरण से निर्धारित किया गया था। परिणाम प्रति मिलीग्राम नमूनों में मिलीग्राम ग्लूकोज समकक्ष के रूप में व्यक्त किए गए थे।
2.5. इन विट्रो एंटीऑक्सीडेंट assays
ओपीडी, ओएसके, और ओएसडी की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता का पता तीन तरीकों से लगाया गया, जिनमें {0}}डिपेनिल-2-पिक्रिलहाइड्राज़िल (डीपीपीएच) मैला ढोना, फेरिक कम करने वाली एंटीऑक्सीडेंट शक्ति (एफआरएपी), और कम करने की शक्ति शामिल है। साहित्य के अनुसार [19,41] थोड़े संशोधन के साथ। ट्रोलॉक्स का उपयोग सकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था, और परिणाम ट्रोलॉक्स समकक्ष एंटीऑक्सीडेंट क्षमता के रूप में व्यक्त किए गए थे। चूंकि ओपीडी में ओएसके और ओएसडी शामिल थे, ओकरा पॉड्स के सक्रिय घटकों को रोशन करने के लिए, ओएसके और ओएसडी की एकाग्रता को ओपीडी समकक्ष के रूप में इस्तेमाल किया गया था। प्रारंभिक परीक्षणों के अनुसार, ओपीडी, ओडीएस, ओएसके की सांद्रता रेंज 0 थी।0{{10}}4–0.8, {{17 }}.0{{20}}32–0.64 और 0.0008 -{{40}}.16 mg/mL DPPH परख के लिए; 1.0-4.0, 0.8–3.2 और {{50}}.2–0.8 mg/mL FRAP परख के लिए; और 0.1-4, 0.08-3.2 और 0.02-0.8 मिलीग्राम/एमएल शक्ति परख को कम करने के लिए, क्रमशः डीपीपीएच परख के लिए, एक आनुपातिक रेंज के साथ नमूना समाधान (50 µ एल) (0.004-0.8 मिलीग्राम ओपीडी/एमएल, 0.0032-0.64 मिलीग्राम ओएसके/ एमएल और 0.0008–0.16 मिलीग्राम ओएसडी/एमएल) को डीपीपीएच समाधान (100 µ एल, 1.28 ˆ 10´4 मोल/ली) के साथ मिश्रित किया गया था ताकि नियंत्रण के लिए फ्री रेडिकल-स्कैवेंजिंग गतिविधि (ए1) और 95 प्रतिशत इथेनॉल (100 µ एल) का मापन किया जा सके। (ए 2)। आसुत जल (50 µ l) को रिक्त (A0) के लिए DPPH समाधान (100 µ l) के साथ मिलाया गया था। समाधान मिश्रित होने और 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर रखने के बाद अवशोषण को 517 एनएम पर मापा गया था। डीपीपीएच रेडिकल को परिमार्जन करने की क्षमता की गणना निम्नलिखित समीकरण का उपयोग करके की गई थी:

मैला ढोने की गतिविधि (प्रतिशत){{0}}[ 1-(A1-A2/{A0]* 100 प्रतिशत। (1)
तीन नमूना समाधानों का FRAP (1.0–4.0 mg OPD/mL, 0.8–3.2 mg OSK/mL, और 0.2– बायोटाइम इंस्टीट्यूट ऑफ बायोटेक्नोलॉजी के निर्देश के अनुसार {{10}}.8 मिलीग्राम ओएसडी/एमएल) का पता लगाया गया। पतला नमूना समाधान (5 μL) FRAP कार्य समाधान (18 0 μL) के साथ मिलाया गया था और 37 डिग्री सेल्सियस पर 5 मिनट के लिए रखा गया था। प्रतिक्रिया मिश्रण का अवशोषण तब 593 एनएम दर्ज किया गया था। 0.15 से 1.5 मिमी तक FeSO4 का उपयोग करके मानक वक्र तैयार किया गया था। शक्ति निर्धारण को कम करने में, नमूना समाधान (0.5 एमएल के लिए 0.1-4 मिलीग्राम ओपीडी/एमएल, 0।08–3.2 मिलीग्राम ओएसके/एमएल और 0.02–{{50}}.8 mg OSD/mL) को समान मात्रा में PBS (0.2 mol/L) के साथ मिलाया गया था। , पीएच 6.6) और पोटेशियम फेरिकैनाइड समाधान (1 प्रतिशत, w/v), और ऊष्मायन 50 C पर 20 मिनट के लिए किया गया था। मिश्रण में ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड (0.5 एमएल, 10 प्रतिशत, डब्ल्यू/वी) मिलाया गया, जिसे 10 मिनट के लिए 201.6 ग्राम पर सेंट्रीफ्यूज किया गया। इसके बाद, घोल की ऊपरी परत (0.5 mL) को आसुत जल (0.5 mL) से पतला किया गया और फिर इसमें फेरिक क्लोराइड (0.1 mL, 0.1 प्रतिशत, w/v) मिलाया गया। अवशोषण 700 एनएम पर मापा गया था।
2.6. ओपीडी, ओएसके और ओएसडी और जैव रासायनिक विश्लेषण के थकान-विरोधी प्रभाव
2.6.1. ओपन-फील्ड टेस्ट
लोकोमोटर गतिविधियों पर ओपीडी, ओएसके और ओएसडी के प्रभावों को सत्यापित करने के लिए, चूहों का मूल्यांकन हमारे द्वारा विकसित एक खुले क्षेत्र के कंप्यूटर-सहायता प्राप्त नियंत्रण प्रणाली का उपयोग करके स्वचालित रूप से किया गया था [42,43]। उपकरण में चार धातु टैंक (30 सेमी व्यास, 40 सेमी ऊंचाई) होते हैं, जिसके शीर्ष पर एक वीडियो कैमरा लगा होता है। प्रयोग एक शांत कमरे में किए गए थे, और छत पर 120 लक्स के प्रकाश स्रोत द्वारा उपकरण को रोशन किया गया था। खुराक के एक घंटे बाद, प्रत्येक माउस को धातु टैंक के केंद्र में रखा गया था और 2 मिनट के लिए स्वतंत्र रूप से पता लगाने की अनुमति दी गई थी और 4 मिनट में यात्रा की गई दूरी, जो कि लोकोमोटर गतिविधि का एक सूचकांक है, की गणना सॉफ्टवेयर का उपयोग करके की गई थी। एक साथ चार चूहों का परीक्षण किया गया।

2.6.2. भार-भारित तैराकी परीक्षण (WLST)
WLST को पहले वर्णित पद्धति के अनुसार थकान को प्रेरित करने के लिए मामूली संशोधन [19,44,45] के साथ किया गया था। खुराक के एक घंटे बाद, चूहों को सीसा की चादरों से भरा गया था जो उनकी पूंछ की समान स्थिति से जुड़ी हुई थीं और उनका वजन उनके शरीर के वजन का लगभग 3 प्रतिशत था। तब भार-भारित चूहों को व्यक्तिगत रूप से बेलनाकार प्राप्तकर्ताओं (व्यास 40 सेमी) में तैरने के लिए मजबूर किया गया था, जो 30 सेमी की गहराई तक पानी (25 1 C) से भरे हुए थे। थकावट को समन्वित आंदोलनों के नुकसान और 10 एस के भीतर सतह पर उठने में विफलता के रूप में वर्गीकृत किया गया था, और तैराकी का समय तुरंत दर्ज किया गया था। प्रत्येक सत्र के बाद पूल के पानी को बदल दिया गया था।
2.6.3. थकान से संबंधित जैव रासायनिक मापदंडों का विश्लेषण
2.7. सांख्यिकीय विश्लेषण
3। परिणाम
3.1. ओएसके और ओएसडी का रासायनिक विश्लेषण
जैसा कि तालिका 1 में दिखाया गया है, ओएसडी में टीएफ और टीपी की सामग्री ओएसके की तुलना में बहुत अधिक थी, इस बीच, ओएसडी में टीपीएस की सामग्री ओएसके की तुलना में बहुत कम थी। isoquercitrin और quercetin-3-O-gentiobiose के यौगिकों को केवल OSD में HPLC का उपयोग करके खोजा गया था (चित्र 1 में दिखाया गया है)।


3.2. ओपीडी, ओएसके और ओएसडी की इन विट्रो एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि में
जैसा कि तालिका 2 में दिखाया गया है, ओपीडी और ओएसडी की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि डीपीपीएच, एफआरएपी, और कम करने वाली शक्ति परख द्वारा सिद्ध की गई थी, और ओएसडी ने ओपीडी की तुलना में बेहतर एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि दिखाई। हालांकि, OSK ने शक्ति परख को कम करने में कमजोर प्रभाव दिखाया और DPPH और FRAP परीक्षणों में कोई प्रभाव नहीं दिखाया। इसलिए, ओएसडी एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि के लिए भिंडी की फली का सक्रिय हिस्सा था

3.3. ओपीडी, ओएसके और ओएसडी की लोकोमोटर गतिविधि पर प्रभाव
ओएसडी से उपचार के बाद 20वें दिन चूहों की गतिमान गतिविधियों का परीक्षण किया गया। जैसा कि चित्र 2 में दिखाया गया है, OSD समूहों (0.6 g/kg) की एक उच्च खुराक ने नियंत्रण समूह (p=0 की तुलना में उपन्यास वातावरण में चूहों की कुल दूरी को काफी कम कर दिया। 04)। हालांकि, कुल दूरी पर अन्य समूहों के लिए कोई महत्वपूर्ण प्रभाव नहीं देखा गया। इन परिणामों से पता चला कि भिंडी की फली और बीजों का केंद्रीय तंत्रिका तंत्र पर कोई उत्तेजक प्रभाव नहीं था। इसके अलावा, यह अनुमान लगाया जा सकता है कि उच्च खुराक (0.6 ग्राम/किग्रा) पर ओएसडी का हल्का शामक प्रभाव हो सकता है।

3.4. ओपीडी, ओएसके और ओएसडी (डब्ल्यूएलएसटी) के तैराकी के संपूर्ण समय पर प्रभाव
जैसा कि चित्र 3 में दिखाया गया है, 21 दिनों के लिए ओपीडी, ओएसके और ओएसडी के पूरक के बाद, ओपीडी (3 ग्राम/किलोग्राम) और ओएसडी (0.3 और 0.6 ग्राम/किलोग्राम) उपचार हो सकता है। चूहों के तैरने के समय को स्पष्ट रूप से लम्बा करें, जो 57.84 12.37, 46.51 5.82 और 7 0 तक फैला हुआ है। 0 5 12. 0 7 मिनट (पी < 0="" .05,="" p="">< 0.05="" और="" p="">< 0.{{70}}1),="" क्रमशः,="" उससे="" कहीं="" अधिक="" लंबा="" नियंत्रण="" समूह="" में="" (15.20="" 1.49="" मिनट)।="" इस="" बीच,="" ओपीडी="" (0.75="" और="" 1.5="" ग्राम/किलोग्राम),="" ओएसडी="" (0.15="" ग्राम/किलोग्राम)="" और="" ओएसके="" (0.6,="" 1.2="" और="" 2.4="" ग्राम/किलोग्राम)="" उपचार="" ने="" चूहों="" में="" तैराकी="" के="" समय="" में="" उल्लेखनीय="" वृद्धि="" नहीं="" दिखाई="" (="" 14.73="" ˘="" 1.28,="" 23.96="" ˘="" 3.70="" और="" 27.34="" ˘="" 5.72="" मिनट,="" क्रमशः)="" नियंत्रण="" समूह="" की="" तुलना="" में="" (पी="0.897," पी="0.398" और="" पी="0.268," क्रमशः="" ),="" लेकिन="" ओएसडी="" (0.15="" ग्राम/किलोग्राम)="" ने="" तैराकी="" के="" समय="" में="" वृद्धि="" की="" प्रवृत्ति="" दिखाई,="" लेकिन="" एक="" महत्वपूर्ण="" अंतर="" (पी="0.225)" प्रकट="" नहीं="" किया।="" इसके="" अलावा,="" वन-वे="" एनोवा="" ने="" समूहों="" (एफ="" (3,="" 40)="12.839," पी=""><0.001) के="" बीच="" चूहों="" के="" तैराकी="" संपूर्ण="" समय="" पर="" महत्वपूर्ण="" अंतर="" प्रदर्शित="" किया।="" osd="" समूह="" (0.6="" g/kg)="" की="" उच्च="" खुराक="" के="" तैरने="" के="" समय="" में="" मध्यम="" खुराक="" समूह="" (0.3="" g/kg)="" (p="0.019)" की="" तुलना="" में="" एक="" उल्लेखनीय="" अंतर="" दिखा,="" और="" वही="" परिणाम="" देखा="" गया।="" 0.3-g/kg="" और="" 0.15-g/kg="" समूहों="" (p="0.034)" के="" बीच,="" osd="" का="" प्रदर्शन="" खुराक="" पर="" निर्भर="" तरीके="" से="" संपूर्ण="" तैराकी="" समय="" को="" लम्बा="" खींच="" सकता="">0.001)>

3.5. भार-भारित तैराकी परीक्षण के बाद चूहों में जैव रासायनिक मापदंडों पर ओएसडी का प्रभाव
3.5.1. बीएलए, बुन और एचजी पर ओएसडी का प्रभाव
समूहों के बीच बीएलए, बीयूएन और एचजी सामग्री का अंतर महत्वपूर्ण था (बीएलए: एफ (3, 40)=8.257, पी < {{10}}।{{="" 20}}01;="" बुन:="" एफ="" (3,="" 40)="8.596," पी="">< 0।{{3{{32="" }}}}01;="" एचजी:="" एफ="" (3,="" 36)="6.960," पी="">< 0.{{40}}="" 01)।="" जैसा="" कि="" तालिका="" 3="" में="" दिखाया="" गया="" है,="" ओएसडी="" समूहों="" में="" बीएलए="" और="" बीयूएन="" का="" स्तर="" भार="" भारित="" तैराकी="" परीक्षण="" (बीएलए:="" पी=""><{46}}। 05,="" पी="" के="" बाद="" नियंत्रण="" समूह="" 24="" घंटे="" की="" तुलना="" में="" काफी="" कम="" था।="">{46}}।>< 0.05="" और="" पी=""><0.01 क्रमशः="" 0.15,="" 0.3="" और="" 0.6="" ग्राम/किलोग्राम="" के="" लिए;="" बुन:="" पी="">0.01><0.01 0.15,="" 0.3="" और="" 0.6="" ग्राम/किलोग्राम="" के="" लिए)।="" ओएसडी="" समूहों="" में="" एचजी="" का="" स्तर="" नियंत्रण="" समूह="" (पी="">0.01><0.05, पी="">0.05,><0.01 और="" पी="">0.01><0.01 के="" लिए="" क्रमशः="" 0.15,="" 0.3="" और="" 0.6="" ग्राम="" किग्रा)="" की="" तुलना="" में="" काफी="" अधिक="">0.01>

3.5.2. OSD का GSH-PX, MDA और SOD पर प्रभाव
समूहों के बीच एसओडी, जीएसएच-पीएक्स गतिविधियों और एमडीए समकक्ष के अंतर महत्वपूर्ण थे (एमडीए: एफ (3, 4 0)=8 .355, पी < 0।="" {{18}="" }01;="" एसओडी:="" एफ="" (3,="" 42)="9.876," पी="">< 0।001;="" जीएसएच-पीएक्स:="" एफ="" (="" 3,="" 40)="7.959," पी="">< 0.001)।="" जैसा="" कि="" तालिका="" 4="" में="" दिखाया="" गया="" है,="" भार="" भारित="" तैराकी="" परीक्षण="" (p=""><0.01, p="">0.01,>< 0="" के="" बाद="" osd="" समूहों="" में="" एमडीए="" समकक्ष="" नियंत्रण="" समूह="" की="" तुलना="" में="" काफी="" कम="" था।="" {="" {45}}1="" और="" p="">< 0.01="" 0.15,="" 0.3="" और="" 0.6="" ग्राम/किलोग्राम,="" के="" लिए)।="" इसके="" अलावा,="" ओएसडी="" समूहों="" में="" एसओडी="" और="" जीएसएच-पीएक्स="" का="" स्तर="" नियंत्रण="" समूह="" (एसओडी:="" पी=""><0.01, पी="">0.01,><0.01 और="" पी="">0.01><0.01; जीएसएच-पीएक्स:="" पी="">0.01;><0.05, पी="">0.05,><0.01 और="" पी="">0.01><) की="" तुलना="" में="" काफी="" अधिक="" था।="" 0.01="" के="" लिए="" 0.15,="" 0.3="" और="" 0.6="" ग्राम/किग्रा,="">)>

4। चर्चा
अपरिपक्व भिंडी की फली एक स्वस्थ सब्जी है जिसका सेवन दुनिया के अधिकांश क्षेत्रों में किया जाता है। पिछले अध्ययनों ने बताया है कि अपरिपक्व भिंडी की फली में एंटीऑक्सिडेंट और थकान-रोधी प्रभाव [25,46] थे, लेकिन इसके सक्रिय घटक और संभावित तंत्र स्पष्ट नहीं थे। भिंडी की फली की एंटीऑक्सीडेंट और थकान-रोधी गतिविधियों की जांच करने के लिए, हमने ताजा भिंडी की फली को बीज और खाल में विभाजित किया और एक निष्कर्षण प्रक्रिया के माध्यम से ओएसडी, ओएसके और ओपीडी प्राप्त किया, फिर ओएसडी, ओएसके, और इन विट्रो में एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि। ओपीडी को डीपीपीएच, एफआरएपी और कम करने की शक्ति के साथ पाया गया था और ओएसडी, ओएसके और ओपीडी के विवो में थकान-विरोधी प्रभाव का वजन-भारित तैराकी परीक्षण का उपयोग करके अध्ययन किया गया था। हमारे परिणामों से पता चला कि ओएसडी में न केवल इन विट्रो में एक अच्छी एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि थी, बल्कि नियंत्रण समूह की तुलना में चूहों के तैरने के समय को भी काफी लंबा कर दिया, जबकि ओएसके ने दोनों में कोई प्रभाव नहीं दिखाया। तैराकी का संपूर्ण समय एक प्रत्यक्ष माप है जो शरीर के व्यायाम सहनशक्ति को निष्पक्ष रूप से दर्शाता है [47], और व्यायाम सहनशक्ति को बढ़ावा देना लंबे तैराकी समय से संबंधित है। इसलिए ओपीडी के एंटीऑक्सीडेंट और थकान रोधी हिस्से को इसके बीज के रूप में निकाला जाना चाहिए। इसके अलावा, इस अध्ययन में, ओएसडी (0.3 {{1 0}}, 0.60 ग्राम/किग्रा) चूहों के तैरने के समय को स्पष्ट रूप से लम्बा खींच सकता है, और भिंडी के बीजों की मानव समकक्ष खुराक 0.9 हो सकती है। ~1.8 ग्राम/किलोग्राम (भिंडी की फली के लिए 4.5~8.9 ग्राम/किलोग्राम) शरीर के सतह क्षेत्र के अनुसार [48]। इन खुराक तक सब्जी की सेवा करने वाले मानव द्वारा पहुंचा जा सकता है। हालांकि, ओकरा के सक्रिय घटक अभी भी स्पष्ट नहीं हैं। वर्तमान अध्ययन में रासायनिक विश्लेषण के परिणामों से पता चला है कि ओएसडी में पॉलीफेनोल्स की सामग्री ओएसके की तुलना में लगभग 24 गुना अधिक है, लेकिन ओएसडी में पॉलीसेकेराइड की सामग्री ओएसके (तालिका 1) की तुलना में बहुत कम है।
Moreover, total flavonoids content and two compounds of isoquercitrin and quercetin-3-O-gentiobiose were only detected in OSD and were not detected in OSK (Table 1). It has been proven that okra seeds contained epigallocatechin oligomers, catechin, and its oligomers, isoquercitrin, quercetin-3-O-gentiobiose, and other catechin and quercetin derivatives [27–29]. Furthermore, previous studies have reported that polyphenols like catechin and flavonoids like quercetin possess anti-fatigue activity due to their antioxidant activity [35,36,49–51]. Therefore, we deduced that polyphenols and flavonoids of OSD might be the antioxidant and anti-fatigue constituents. As for the reason that the effect of OPD was less than the effect of OSD, it might be that the high content of mucilaginous polysaccharides can affect the assimilation of polyphenols and flavonoids in OPD, which needs to be researched in the future. When it comes to the anti-fatigue mechanism of OSD, an open-field test showed that OSD had no central nerve stimulation in mice, which proved that the anti-fatigue of OSD was not through central excitation. Apart from this, it was likely that OSD possessed a slight sedative effect in high doses (>0.6 ग्राम/किलोग्राम)। इसे साबित करने के लिए अधिक डेटा की आवश्यकता है क्योंकि हरकत में छोटी कमी का पता लगाने के लिए कम प्रेरणा या संभावित एंगोजेनिक प्रभाव का परिणाम भी हो सकता है। हालांकि, इस शोध में, इस संभावना को बाहर करने के लिए ओपन-फील्ड परीक्षण का उपयोग किया गया था कि ओएसडी ने केंद्रीय तंत्रिका तंत्र पर एक उत्तेजक प्रभाव द्वारा थकान-विरोधी गतिविधि का प्रदर्शन किया, और ओएसडी के शामक प्रभाव को प्रदर्शित करने के लिए अधिक डेटा मौजूद नहीं था। इसके अलावा, संपूर्ण व्यायाम के दौरान उत्पन्न अत्यधिक प्रतिक्रियाशील ऑक्साइड प्रजातियां (आरओएस) शारीरिक थकान का प्रमुख घटक साबित हुई हैं। अत्यधिक आरओएस, एमडीए का उत्पादन करने के लिए पॉलीअनसेचुरेटेड फैटी एसिड पर हमला करके और बायोफिल्म्स [13,52] की शिथिलता को जन्म देकर विभिन्न चयापचय और एंजाइमेटिक प्रक्रियाओं को प्रभावित कर सकता है।
इस वजह से, आरओएस न केवल ऊर्जा आपूर्ति और उत्तेजना-संकुचन युग्मन प्रक्रियाओं के दौरान एंजाइमेटिक गतिविधि को सीधे प्रभावित करता है बल्कि बीएलए और बीयूएन सहित कचरे के संचय को भी तेज करता है। इसके अलावा, ऊतकों में पीएच कम होने के कारण बीएलए का बढ़ता स्तर थकान का एक महत्वपूर्ण कारण है, और बीयूएन की एक उच्च सामग्री कम व्यायाम सहनशक्ति को इंगित करती है। इसलिए, यह न केवल व्यायाम सहनशक्ति को बढ़ा सकता है बल्कि शारीरिक थकान को भी कम कर सकता है और एसओडी और जीएसएच-पीएक्स सहित एंजाइमेटिक एंटीऑक्सीडेंट सिस्टम की गतिविधि को बढ़ावा देकर वसूली को बढ़ावा देता है, या सीधे एंटीऑक्सीडेंट पूरक करता है। वर्तमान अध्ययन में, तैराकी परीक्षण के 24 घंटे बाद किए गए जैव रासायनिक मापदंडों का निर्धारण इंगित करता है कि ओएसडी उपचार ने रक्त में बीएलए और बीयूएन के स्तर, यकृत में एमडीए के स्तर को काफी कम कर दिया है, और एचजी, एसओडी और जीएसएच के स्तर में वृद्धि की है। थकान ठीक होने के दौरान लीवर, जिसने साबित किया कि ओएसडी शारीरिक थकान को कम कर सकता है और रिकवरी को बढ़ावा दे सकता है। हमारे शोध में इन विट्रो में एंटीऑक्सिडेंट एसेज़ के परिणामों को ध्यान में रखते हुए, यह निष्कर्ष निकाला जा सकता है कि ओएसडी ने न केवल मुक्त कणों को सीधे परिमार्जन करके बल्कि एसओडी और जीएसएच-पीएक्स सहित एंटीऑक्सिडेंट एंजाइमों की गतिविधियों को बढ़ावा देकर भी थकान-विरोधी प्रभाव खेला।
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5। निष्कर्ष
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