एंटीऑक्सिडेंट और स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर के निरोधात्मक गुण

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सार: अनाज से प्राप्त अधिकांश स्वास्थ्य लाभ उनके बायोएक्टिव यौगिकों के कारण होते हैं। इस अध्ययन ने बायोएक्टिव यौगिकों के स्तर का मूल्यांकन किया औरएंटीऑक्सिडेंटऔर स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंगएंजाइमोंइन विट्रो में छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर (कोडित एएस 1828-1, 4, 6,8, 9, 11) के निरोधात्मक गुण। मक्का के संकरों को नाइजीरिया के इंटरनेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ ट्रॉपिकल एग्रीकल्चर (ITA) में उगाया गया था। जैव सक्रिय यौगिक (कुल फेनोलिक्स, टैनिन,flavonoids, और फाइटेट) स्तर, एंटीऑक्सिडेंट (DPPH" और ABTS मैला ढोने की क्षमता और कम करने की शक्ति), और स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंगएंजाइमों(-amylase और x-glucosidase)मक्का संकरों की निरोधात्मक गतिविधियों को स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा निर्धारित किया गया था। उसी समय, एक रिवर्स-चरण एचपीएलसी प्रणाली का उपयोग करके कैरोटीनॉयड की मात्रा निर्धारित की गई थी। बायोएक्टिव यौगिकों की श्रेणियां थीं:11.25-14.14 मिलीग्राम जीएई/जी (कुल फिनोलिक्स),3.62-4.67 मिलीग्राम क्यूई/जी (कुल फ्लेवोनोइड्स), 3.{{1{ {34}}}.29 मिलीग्राम/जी (टैनिन),3.66-4.31 प्रतिशत (फाइटेट),8.92-12.11ug/g (कुल xanthophylls),2.{{19 }}.89 ug/g (कुल -कैरोटीन), और 3.17-3.77ug/g (कुल प्रोविटामिन ए कैरोटेनॉयड्स)। मक्का संकरों के अर्क DPPH"(SC50: 9. 07-26.35 mg/mL) और ABTS*(2.{{30}}.68 TEACmmol/g), Fe3 प्लस को Fe2 प्लस (0.25±0.64-0 तक कम कर दिया। .43 ± 0.01 मिलीग्राम जीएई/जी), और इनहिबिटेड-एमाइलेज और -ग्लुकोसिडेज, आईसी50 के 26 के रेंज के साथ।28-52.55 मिलीग्राम/एमएल और 47.72-63.98 मिलीग्राम/एमएल, क्रमशः। मक्का संकर के छह क्लोनों में, AS1828-9 में उच्चतम (p .) था<0.05)levels of="" tannins="" and="" phytate="" and="" the="" strongest="">एंटीऑक्सिडेंटऔर स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम निरोधात्मक गतिविधियाँ। कुल फेनोलिक्स और निम्नलिखित के बीच महत्वपूर्ण सहसंबंध देखे गए: ABTS*(p<0.01, r="0.757)," dpph"sc50=""><0.01,r=-0.867), reducing=""><0.05,r=0.633), α-amylase=""><0.01,r=-0.836) and="" α-glucosidase=""><0.05, r="-0.582).Hence," the="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="" hybrids(especially="" as1828-9)="" may="" be="" beneficial="" for="" alleviating="" oxidative="" stress="" and="" postprandial="">

कीवर्ड: कुल फेनोलिक्स; कुल फ्लेवोनोइड्स; टैनिन; कैरोटेनॉयड्स; फ्यतिक एसिड; अल्फा-ग्लूकोसिडेज़ निषेध परख; अल्फा-एमाइलेज निषेध परख

1 परिचय

कुपोषण और इससे जुड़ी बीमारियों से उत्पन्न चुनौतियों से निपटने के लिए उच्च उपज देने वाली, पौष्टिक और स्वस्थ खाद्य फसलों का प्रावधान आवश्यक है। इसलिए, तेजी से बढ़ती वैश्विक आबादी की आहार संबंधी जरूरतों को पूरा करने के लिए विभिन्न व्यवस्थित दृष्टिकोण, जैसे कि उन्नत पोषण गुणवत्ता के साथ रोग-प्रतिरोधी स्टेपल प्रजनन, को पादप प्रजनन अनुसंधान कार्यक्रमों में नियोजित किया गया है। पर्यावरण प्रदूषण, ग्लोबल वार्मिंग और विकास के कारण वैश्विक खाद्य आपूर्ति की मात्रा और गुणवत्ता में भारी कमी को देखते हुए यह और अधिक अनिवार्य हो गया है।

उपन्यास जैव ईंधन स्रोत [1]। उप-सहारा अफ्रीका में, मक्का (ज़िया मेस एल.) को निम्न-आय वाले परिवारों के बीच खाद्य सुरक्षा और गरीबी कम करने में योगदान करने के लिए दिखाया गया है [2]।

पीले-नारंगी मक्का के जीनोटाइप अपने उत्कृष्ट पोषण और स्वास्थ्य को बढ़ावा देने वाले गुणों के लिए जाने जाते हैं, क्योंकि इनमें कैरोटेनॉयड्स, पॉलीफेनोलिक यौगिक, फाइटिक एसिड [3-5] और टोकोफेरोल [6] शामिल हैं। हालांकि, उप-सहारा अफ्रीका में मक्के के उत्पादन में वृद्धि के माध्यम से खाद्य सुरक्षा और बेहतर पोषण की संभावना को रूट हेमीपैरासिटिक प्लांट, स्ट्रिगा हर्मोन्थिका (डेल।) बेंथ से खतरा है, जिससे पानी की हानि के कारण गंभीर संक्रमण के तहत 100 प्रतिशत तक उपज का नुकसान होता है। और परजीवीवाद के माध्यम से पोषक तत्व [7,8]। नतीजतन, एस. हर्मोन्थिका उप-सहारा अफ्रीका में मक्के के उत्पादन के लिए एक अजैविक सीमा प्रस्तुत करता है, जो अनाज की खेती की पारंपरिक प्रणाली से एक प्रतिमान बदलाव से उत्पन्न होता है जिसमें विस्तारित परती अवधि शामिल होती है। अनाज की खेती की ऐसी पारंपरिक प्रणाली ने सुनिश्चित किया कि मिट्टी में स्ट्रिगा बीज बैंक का स्तर पौधों के लिए सहनीय था। मक्के की उपज और गुणवत्ता में होने वाले नुकसान को कम करने के लिए S.hermonthica infestation, सबसे अच्छा नियंत्रण तरीका स्ट्रिगा-प्रतिरोधी मक्का जीनोटाइप को रोपण करना है। यह रणनीति आसानी से अनुकूलनीय है, विशेष रूप से अन्य प्रबंधन प्रथाओं के संयोजन में [10]।

हमारे हाल के अध्ययन से पता चला है कि स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर में कैरोटीनॉयड, पॉलीफेनोल्स और फाइटिक एसिड [3] होते हैं। इन बायोएक्टिव यौगिकों को एंटीऑक्सिडेंट के रूप में कार्य करने के लिए जाना जाता है और अन्य स्वास्थ्य लाभों [4,5,11,12] के बीच पोस्टप्रांडियल हाइपरग्लाइसेमिया को दबाते हैं। नारंगी मक्का के दाने में बायोएक्टिव यौगिकों में, एंटीऑक्सिडेंट [13,14] और पाचन एंजाइमों की निरोधात्मक गतिविधियों [15] को फेनोलिक यौगिकों पर निर्भर होने की सूचना मिली थी, जो मुख्य रूप से बाध्य रूप में मौजूद हैं। इसके अलावा, फेनोलिक यौगिकों को कई अन्य जैवसक्रियताओं के लिए जाना जाता है जैसे कि ज़ैंथिन ऑक्सीडेज और एंजियोटेंसिन 1-परिवर्तित एंजाइमों का निषेध, जो क्रमशः गाउट और रेनिन-निर्भर उच्च रक्तचाप के रोगजनन में निहित हैं, और विरोधी- अन्य जैविक गतिविधियों के बीच भड़काऊ, रोगाणुरोधी, कैंसर रोधी, अल्जाइमर रोधी और एलर्जी रोधी गुण [16]। इसलिए, आहार स्रोतों से फेनोलिक यौगिक मानव स्वास्थ्य के लिए अपने लाभों के कारण वैज्ञानिकों और उपभोक्ताओं दोनों का बहुत ध्यान आकर्षित कर रहे हैं [16]।

इस अध्ययन का उद्देश्य बायोएक्टिव यौगिकों के स्तर का मूल्यांकन करना था, और इन विट्रो में छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर के एंटीऑक्सीडेंट और स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम अवरोधक गुणों का मूल्यांकन करना था। अध्ययन ने जैव सक्रिय घटकों के बीच संघों का भी परीक्षण किया, औरएंटीऑक्सिडेंटऔर स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर की निरोधात्मक गतिविधियाँ।

2. परिणाम और चर्चा

2.1. छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर में बायोएक्टीओ घटक

छह पाइपलाइनों में निर्धारित बायोएक्टिव घटक स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर (एएस 1828-1 (एएस 1), एएस 1828-4 (एएस 4), एएस 1828-6 (एएस 6), एएस {{ 8}} (AS8), AS1828-9(AS9), AS1828-11(AS11)) इस अध्ययन में कुल फेनोलिक्स शामिल थे,flavonoids, टैनिन, कैरोटीनॉयड और फाइटिक एसिड। कुल फेनोलिक्स, कुल फ्लेवोनोइड्स, टैनिन और फाइटिक एसिड के स्तर तालिका 1 में प्रस्तुत किए गए हैं। कुल फेनोलिक्स क्रमशः एएस4 और एएस9 में 11.25 से 14.14 मिलीग्राम जीएई/जी के बीच थे; AS11 और AS6 में कुल फ्लेवोनोइड्स क्रमशः 3.62 से 4.67 mg QE/g तक थे; टैनिन की मात्रा क्रमशः AS1 और AS9 में 3.64 से 6.29 mg/g के बीच थी; और फाइटिक एसिड सामग्री AS6 में 3.66 प्रतिशत से लेकर AS1 में 4.47 प्रतिशत तक थी।

इस प्रकार, AS9 में उच्चतम (p .)<0.05)total phenolics="" and="" tannin="" levels,="" while="" as6="" had="" the="" highest="" total="" flavonoids="" content.="" the="" total="" phenolic="" concentrations="" detected="" in="" the="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="" hybrids="" are="" higher="" than="" the="" values="" previously="" reported="" in="" yellow="" maize="" hybrids,="" including="" 2.15="" mg="" gae/g[15]and="" 2.08="" mg="" gae/g[17].="" similarly,="" the="" levels="" of="" total="" flavonoids="" detected="" in="" the="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="" hybrids="" in="" this="" study="" are="" higher="" than="" the="" 0.93±="" 0.03="" mg="" oqe/g="" recently="" reported="" in="" provitamin="" a="" yellow="" maize="" flour="" [17].="" although="" the="" tannin="" levels="" are="" within="" the="" range(2.1-7.3="" mg/g)previously="" reported="" in="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="" hybrids="" [3],="" the="" values="">

पिगमेंटेड मक्का जीनोटाइप [13] में रिपोर्ट किए गए संघनित टैनिन (33.7 0 से 158.55 मिलीग्राम/100 ग्राम, 0.34 से 1.59 मिलीग्राम/जी के बराबर) की सीमा से तुलनात्मक रूप से अधिक है।

छह पाइपलाइनों में देखे गए कुल फेनोलिक्स, कुल फ्लेवोनोइड्स और टैनिन के उच्च स्तर, गैर-स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले मक्का जीनोटाइप में इन पॉलीफेनोलिक्स के लिए मौजूदा साहित्य में मूल्यों के सापेक्ष स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकरों को संभव से जोड़ा जा सकता है। उनके आनुवंशिक बनावट में अंतर [3]। यह सर्वविदित है कि पॉलीफेनोलिक्स और अन्य प्लांट सेकेंडरी मेटाबोलाइट्स का जैवसंश्लेषण प्रतिकूल परिस्थितियों का सामना करने के लिए संयंत्र द्वारा सेलुलर रक्षा और / या अनुकूली तंत्र के रूप में तनाव की उपस्थिति में बढ़ता है [16,18]। इसके अलावा, मक्के के पौधे की जड़ों में स्ट्रिगोलैक्टोन (पौधे के हार्मोन) के उत्पादन से स्ट्रिगा बीज का अंकुरण उत्तेजित होता है, जिसे पौधा तनाव में छोड़ता है [19]। इस प्रकार, यह संभव है कि एस. हर्मोन्थिका के प्रतिरोध के गुण ने परजीवी का सामना करने के लिए मक्का में पॉलीफेनोलिक यौगिकों के जैवसंश्लेषण को विनियमित किया हो। यह एक पहले की रिपोर्ट द्वारा समर्थित है कि एस। हेर्मोंथिका के लिए पोस्ट-अटैचमेंट प्रतिरोध में प्लांट सेल की दीवार का मोटा होना और कई छोटे रिक्तिकाएं और फेनोलिक जमा का संचय शामिल है जो प्लांट सेल [20] के भीतर घनी दागदार हैं।

फेनोलिक यौगिक अपने रेडॉक्स गुणों के कारण उनकी एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि के लिए उल्लेखनीय हैं, जो उन्हें सिंगलेट ऑक्सीजन के शमन, हाइड्रोजन के दाताओं और कम करने वाले एजेंटों के रूप में कार्य करने में सक्षम बनाता है [21]। इसके अलावा, फेनोलिक यौगिकों को व्यक्तिगत एंजाइमों के लिए गैर-विशिष्ट बंधन के माध्यम से अग्नाशयी लाइपेस, -एमाइलेज और ए-ग्लूकोसिडेज़ सहित पाचन एंजाइमों को निष्क्रिय करने के लिए भी सूचित किया गया था [22]। जैसा कि पहले विलिगर एट अल द्वारा रिपोर्ट किया गया था। [23] फेनोलिक यौगिकों में हाइड्रोजन और हाइड्रोफोबिक बॉन्डिंग के माध्यम से प्रोटीन के लिए एक उच्च संबंध होता है, जो प्रोटीन के विकृतीकरण द्वारा -एमाइलेज और -ग्लूकोसिडेज़ जैसे एंजाइमों को बाधित करने की उनकी क्षमता को बढ़ाता है।

The phytic acid contents were comparable (p>0.05)छह पाइपलाइनों में से स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर। यह रेंज स्ट्रिगा प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर [3] की फाइटिक एसिड सामग्री पर हमारी पिछली रिपोर्ट से सहमत है। फाइटिक एसिड में एंटीऑक्सिडेंट गतिविधि होती है, इसके अलावा गुर्दे की पथरी [24] के विकास के खिलाफ इसके निरोधात्मक प्रभाव के साथ-साथ कैंसर विरोधी गुण [25] भी होते हैं। स्ट्रिगा प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर में बायोएक्टिव घटकों, विशेष रूप से फेनोलिक घटकों (फ्लेवोनोइड्स और टैनिन) के एंटीऑक्सीडेंट गुण, मक्का में कुछ अंतर्जात पोषक तत्वों के ऑक्सीडेटिव गिरावट को रोक सकते हैं और/या कम कर सकते हैं जो अत्यधिक प्रवण हैं। ऑक्सीकरण, जैसे असंतृप्त वसा अम्ल और विटामिन [16]। इसके अलावा, स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर में जैव सक्रिय घटक उस दर को कम कर सकते हैं जिस पर कुछ जहरीले ऑक्सीडेटिव उत्पाद बनते हैं, इस प्रकार पोषण की गुणवत्ता को बनाए रखते हैं और उनसे बने खाद्य उत्पादों [26] के शेल्फ जीवन का विस्तार करते हैं।

The carotenoid content in the Striga-resistant yellow-orange maize hybrids is presented in Table 2. Total β-carotene (9-cis-β-carotene + 13-cis-β-carotene + all-trans-β-carotene) ranged from 2.42 to 2.89ug/g; total xanthophylls (lutein+zeaxanthin) ranged from8.92 to 12.11l ug/g; and total provitamin A carotenoids(β-cryptoxanthin+β-carotene+α-carotene） ranged from 3.17 to 3.77 μg/g,in AS6 and AS9,respectively. There were no significant differences(p>0.05) स्ट्रिगा प्रतिरोधी पीले-नारंगी की कैरोटीनॉयड सामग्री में

मक्का संकर। इस अध्ययन में प्राप्त कैरोटेनॉयड्स की श्रेणियां उन लोगों की पुष्टि करती हैं जो पहले अलामू एट अल द्वारा रिपोर्ट किए गए थे। प्रोविटामिन ए बायोफोर्टिफाइड पीले मक्का संकर [27] के लिए। इसके अलावा, स्ट्रिगा प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर में कुल प्रोविटामिन ए कैरोटेनॉयड्स की तुलना में कुल ज़ैंथोफिल मूल्य में अधिक थे, ऑर्टिज़ एट अल के निष्कर्षों की पुष्टि करते हुए। [28]।

कैरोटेनॉयड्स ने उनकी रिपोर्ट की गई जैव-सक्रियताओं के अनुसार, स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकरों में फेनोलिक यौगिकों की एंटीऑक्सिडेंट और स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम निरोधात्मक गतिविधियों को पूरक किया हो सकता है। उदाहरण के लिए, कैरोटेनॉयड्स को उनके स्वास्थ्य लाभ [29] के मुख्य तंत्र के रूप में एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि रखने की सूचना मिली है। वे कैंसर [30] और हृदय रोगों [31] जैसी गैर-संचारी पुरानी बीमारियों के खिलाफ सुरक्षात्मक प्रभाव भी प्रदान करते हैं। इसके अलावा, -क्रिप्टोक्सैंथिन को टाइप 2 मधुमेह (T2D) के जोखिम को काफी कम करने और इंसुलिन प्रतिरोध को कम करने के लिए सूचित किया गया था [32,33]।

2.2. छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि

स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर (तालिका 3) की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि से पता चला है कि छह पाइपलाइन क्लोनों ने मुक्त कणों (एबीटीएस डिग्री प्लस और डीपीपीएच *) को साफ करके और फेरिक आयनों (Fe3 प्लस) को फेरस आयनों में कम करके एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि प्रदर्शित की है। (Fe2 प्लस)। एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि महत्वपूर्ण रूप से भिन्न होती है (पी<0.05) among="" the="" hybrids,="" with="" as9="" having="" the="" strongest=""><0.05) free="" radicals="" scavenging="" abilities(7.28="" teac="" mmol/g="" and="" sc50,="" 9.07±="" 0.27="" mg/ml="" for="" abts+="" and="" dpph,="" respectively)and="" ferric-reducing="" power="" (0.43="" mg="" gae/g).="" it="" is="" pertinent="" to="" recall="" that="" as9-9="" also="" had="" the="" highest="" level="" of="" total="" phenolics="" and="" tannins,="" as="" presented="" earlier="" in="" table="" 1.="" the="" dpph°scavenging="" abilities="" of="" the="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="" hybrids="" obtained="" in="" this="" study="" (sc50:="" 9.07="" to="" 26.35="" mg/ml)="" are="" more="" potent="" than="" those="" reported="" by="" rodriguez-salinas="" et="" al.="" [13]="" for="" pigmented="" maize="" genotypes(ic50:="" 31="" to="" 52="" mg/ml)="" since="" a="" lower="" sc50="" or="" ic50="" is="" indicative="" of="" a="" stronger="" activity="" [34].="" however,="" vitamin="" c,="" a="" standard="" antioxidant="" with="" a="" lower="" sc50(4.63±0.28="" mg/ml),="" had="" a="" stronger="" dpph*scavenging="" activity="" than="" all="" of="" the="" six="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="" hybrids.="" similarly,="" the="" abts·+="" scavenging="" activity="" of="" the="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="" hybrids="" (2.65-7.68="" teac="" mmol/g)is="" higher="" than="" the="" value="" (294.81±="" 2.23="" umol="" teac/g)reported="" by="" irondi="" et="" al.[17]="" for="" provitamin="" a="" yellow="" maize="" flour.="" the="" stronger="" antioxidant="" activity="" of="" the="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="" hybrids="" over="" the="" non-striga-resistant="" pigmented="" maize="" genotypes="" may="" be="" attributed="" to="" the="" increased="" deposition="" of="" polyphenolic="" compounds="" in="" their="" defense="" against="" s.="" hermonthica="" [20],="" which="" may="" have,="" consequently,="" enhanced="" the="" antioxidant="" capacity="" of="" the="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="">

स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकरों की मुक्त कणों की मैला ढोने की क्षमता और फेरिक-कम करने की शक्ति से पता चलता है कि वे शरीर को मुक्त कणों और प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों द्वारा उपजी ऑक्सीडेटिव हमलों से बचाने में फायदेमंद हो सकते हैं। इस प्रकार, स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर का शरीर में बायोमोलेक्यूल्स के ऑक्सीडेटिव क्षति के खिलाफ सुरक्षात्मक प्रभाव हो सकता है, जिसमें न्यूक्लिक एसिड, प्रोटीन, लिपिड और कार्बोहाइड्रेट शामिल हैं [35] और ऑक्सीडेटिव तनाव से संबंधित पुरानी बीमारियां [36] .

2.3. स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम सिक्स पाइपलाइन स्ट्रिगा-रेसिस्टेंट बायोफोर्टिफाइड येलो-ऑरेंज मक्का हाइब्रिड की निरोधात्मक गतिविधियाँ

स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम (-एमाइलेज और -ग्लूकोसिडेज़) छह पाइपलाइनों की निरोधात्मक गतिविधि स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर, जिसे IC50 के रूप में व्यक्त किया जाता है (एक्सट्रैक्ट एकाग्रता जो एंजाइम गतिविधि को 50 प्रतिशत तक रोकता है), तालिका 4 में प्रस्तुत किया गया है। IC50 एमाइलेज और -ग्लूकोसिडेस पर स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकरों का मान क्रमशः एएस9 और एएस4 में 26.28 से 52.55 मिलीग्राम/एमएल और 47.72 से 63.98 मिलीग्राम/एमएल के बीच था। इस प्रकार, छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकरों में से, AS9 -एमाइलेज और -ग्लूकोसिडेज़ दोनों के लिए सबसे कम IC50 मानों के साथ, सबसे मजबूत (p) प्रदर्शित किया।<0.05)inhibitory activity="" on="" these="" two="" enzymes.="" interestingly,="" there="" was="" no="" significant="" (p="">0.05) एमाइलेज पर AS9 और एकरबोज (एक मानक मधुमेहरोधी दवा) के IC50 मूल्यों में अंतर, यह दर्शाता है कि AS9 और एकरबोज की -एमाइलेज निरोधात्मक क्षमता तुलनीय थी। हालांकि, AS9 की -एमाइलेज निरोधात्मक क्षमता को छोड़कर, जो कि एकरबोस के साथ तुलनीय थी, -एमाइलेज और -ग्लूकोसिडेज़ की निरोधात्मक गतिविधियाँ एकरबोज़ की स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकरों की तुलना में अधिक मजबूत थीं। स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम (-ग्लूकोसिडेज़) गतिविधि को बाधित करने के लिए विभिन्न रंजित (पीले, बैंगनी, लाल और काले) मक्का जीनोटाइप की क्षमता फैबिला-गार्सिया एट अल द्वारा रिपोर्ट की गई थी। [15]। उनके निष्कर्षों से पता चला कि पीले मकई के अर्क में सबसे अधिक -ग्लूकोसिडेस अवरोधक गतिविधि थी, जिसे मक्का जीनोटाइप के बीच प्रतिशत (69.8 प्रतिशत) के रूप में व्यक्त किया गया था। इसके अलावा, आयरनडी एट अल। [17] हाल ही में प्रोविटामिन ए पीले मक्के के आटे के लिए ओ-एमाइलेज और -ग्लूकोसिडेस IC50 मान क्रमशः 237.12 ± 2.60 और 157.18 ± 1.05 ug/mL की सूचना दी। मकई रेशम निकालने के सापेक्ष, जिसे [37] क्रमशः 218.4 और 221.4 ug/mL के औसत IC50 मूल्यों के साथ a-amylase और -glucosidase को बाधित करने के लिए सूचित किया गया था, छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर का कमजोर निरोधात्मक प्रभाव था। सी-एमाइलेज और एक्स-ग्लूकोसिडेज पर।

सी-एमाइलेज और ओ-ग्लूकोसिडेज दोनों ही आहार कार्बोहाइड्रेट के पाचन में शामिल होते हैं। जबकि - छोटी आंत में एमाइलेज स्टार्च को हाइड्रोलाइज करता है -1, 4 बॉन्ड ऑलिगोसेकेराइड्स और डिसैकराइड्स को रिलीज करने के लिए, -ग्लूकोसिडेज छोटी आंत के ब्रश बॉर्डर में ऑलिगोसेकेराइड्स और डिसैकराइड्स को हाइड्रोलाइज करके पाचन को पूरा करता है, जिससे ग्लूकोज सहित अवशोषित मोनोसैकेराइड्स का उत्पादन होता है। और फ्रुक्टोज [38]। इसलिए, इन दो पाचक एंजाइमों का निषेध T2D प्रबंधन में पोस्टप्रांडियल हाइपरग्लेसेमिया को कम करने के लिए एक अच्छी तरह से स्थापित चिकित्सीय दृष्टिकोण है और कार्रवाई का एक प्रमुख तंत्र है।

कई मधुमेह विरोधी एजेंटों [39], जिनमें दवाएं, प्राकृतिक उत्पाद और कार्यात्मक खाद्य पदार्थ शामिल हैं। इसके अलावा, स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकरों का ऑन-ग्लूकोसिडेज की तुलना में -एमाइलेज पर अधिक पर्याप्त निरोधात्मक प्रभाव था। स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम निषेध के इस पैटर्न के लाभकारी चिकित्सीय प्रभाव हैं और पिछले अध्ययनों [17, ए 0] में बताए गए पैटर्न से सहमत हैं। इस प्रकार, छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर, विशेष रूप से AS9, पोस्टप्रांडियल हाइपरग्लाइसेमिया को नियंत्रित करने में कुछ लाभ हो सकते हैं।

2.4. बायोएक्टिव घटकों, एंटीऑक्सिडेंट और स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइमों के बीच संबंध छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर की निरोधात्मक गतिविधियां

बायोएक्टिव घटकों में, कुल फेनोलिक्स एबीटीएस · प्लस (पी .) के साथ महत्वपूर्ण रूप से सहसंबद्ध हैं<><0.01,r=-0.867), reducing=""><0.05,r=0.633), α-amylase="" ic50=""><0.01,r=-0.836)and α-glucosidase="" ic50=""><0.05,r=-0.582) (table="" 5).="" as="" earlier="" stated,="" lower="" dpph"="" scs0="" and="" enzyme="" ics0="" values="" are="" indicative="" of="" stronger="" scavenging="" and="" inhibitory="" activities="" of="" a="" given="" sample="" on="" dpph*="" and="" enzymes,="" respectively="" [34].="" thus,="" when="" taken="" together,="" the="" negative="" correlations="" between="" total="" phenolics="" and="" dpph·sc50,="" α-amylase="" ic50="" and="" α-glucosidase="" ic50,="" as="" well="" as="" the="" positive="" correlations="" between="" total="" phenolics="" and="" abts="" scavenging="" ability="" and="" reducing="" power,="" suggest="" that="" phenolic="" compounds="" may="" have="" contributed="" majorly="" to="" the="" observed="" antioxidant="" and="" starch-hydrolyzing="" enzymes="" inhibitory="" activities="" of="" the="" striga-resistant="" yellow-orange="" maize="">

3. सामग्री और तरीके

3.1. रसायन और अभिकर्मक

ट्रोलॉक्स, क्वेरसेटिन, एल-एस्कॉर्बिक एसिड, गैलिक एसिड, एबीटीएस (2,2'-एज़िनो-बीआईएस- (3-एथिलबेन्ज़थियाज़ोलिन-6-सल्फ़ोनिक एसिड)), डीपीपीएच(2,2-डिपेनिल -2-picrylhydrazyl), -बैसिलस स्टीयरोथर्मोफिलस से ग्लूकोसिडेज़, p-nitrophenylglucopyranoside (PNPG), -amylase, घुलनशील स्टार्च, और acarbose को सिग्मा (सेंट लुइस) से खरीदा गया था। अन्य सभी रसायनों और सॉल्वैंट्स के विश्लेषणात्मक ग्रेड का उपयोग किया गया था।

3.2. नमूना संग्रह

छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर (कोडित एएस1828-1,4,6,8,9,11) के सूखे बीज के नमूने सभी समिनाका (8 डिग्री 39'ई, 10 में उगाए गए हैं। डिग्री 34' एन; 760 मीटर की ऊंचाई; 1149 मिमी की वार्षिक वर्षा; 18 का तापमान 1-37.3 डिग्री; मिट्टी का प्रकार, डायस्ट्रिक नाइटोसोल) और ज़ारिया (7 डिग्री 45'ई, 11 डिग्री 8'एन ; 622 मीटर की ऊंचाई; 1076 मिमी की वार्षिक वर्षा; औसत तापमान 13.9-35.5 डिग्री; मिट्टी के प्रकार, फेरिक लुविसोल) को इंटरनेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ ट्रॉपिकल एग्रीकल्चर (आईआईटीए) के मक्का सुधार कार्यक्रम से एकत्र किया गया था। इबादान, नाइजीरिया। संकर मई में दो मौसमों के लिए, बरसात के मौसम के दौरान, तीन प्रतिकृतियों में एक यादृच्छिक पूर्ण ब्लॉक डिजाइन में लगाए गए थे। नमूनों को पर्टन लेबोरेटरी हैमर मिल (3102, यूएसए) के साथ आटा (0.50 मिमी चलनी आकार) में मिलाया गया था और आगे के प्रयोगशाला विश्लेषण के लिए अपारदर्शी नमूना बैग में पैक किया गया था।

3.3. नमूने के अर्क की तैयारी1

स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर आटे से एक अर्क तैयार करने के लिए, आटे के 1 ग्राम को 10 एमएल मेथनॉल में रात भर (12 घंटे) के लिए एक ढके हुए 50 एमएल सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में आंतरायिक झटकों के साथ भिगोया गया था। इसके बाद, मिश्रण को 10 मिनट के लिए 3000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया गया, और फिर सतह पर तैरनेवाला (मेथनॉलिक अर्क) एकत्र किया गया और विश्लेषण [41] तक -4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया।

3.4. कुल फेनोलिक्स सामग्री का निर्धारण

सिंगलटन एट अल द्वारा वर्णित फोलिन-सियोकाल्टू विधि। [42] स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर के आटे के अर्क की कुल फेनोलिक्स सामग्री को निर्धारित करने के लिए अपनाया गया था, अर्क के एक हिस्से (300 यूएल) को एक टेस्ट ट्यूब (तीन प्रतियों में) में भेज दिया गया था। बाद में, 1.5 एमएल फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक (स्टॉक फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक आसुत जल के साथ 10 गुना पतला) और 1.2 एमएल Na2CO3 समाधान (7.5 प्रतिशत w / v) जोड़ा गया, और मिश्रण को 30 मिनट के लिए अंधेरे में ऊष्मायन किया गया। कमरे का तापमान। उसके बाद, रिक्त स्थान के विरुद्ध 765 एनएम पर अवशोषण पढ़ा गया। कुल फेनोलिक सामग्री की गणना गैलिक एसिड कैलिब्रेशन वक्र का उपयोग करके की गई थी और इसे मिलीग्राम / जी नमूने में गैलिक एसिड समकक्ष (जीएई) के रूप में व्यक्त किया गया था।

3.5. कुल Flavonoids सामग्री का निर्धारण

काले एट अल द्वारा वर्णित प्रोटोकॉल । [43] स्ट्रिगा प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर के आटे के अर्क की कुल फ्लेवोनोइड सामग्री को निर्धारित करने के लिए नियोजित किया गया था। संक्षेप में, 0.5 मिली अर्क को टेस्ट ट्यूब में भेज दिया गया था; इसके बाद 1.5 एमएल मेथनॉल, 0.1 मिली एल्युमिनियम क्लोराइड (10 प्रतिशत), 0.1 एमएल 1 एम पोटेशियम एसीटेट, और 2.8 एमएल डिस्टिल्ड वॉटर मिलाया गया। प्रतिक्रिया मिश्रण 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर भंवर और ऊष्मायन किया गया था, जिसके बाद अवशोषण 514 एनएम पर पढ़ा गया था। अर्क की कुल फ्लेवोनोइड सामग्री को मिलीग्राम / जी नमूने में क्वेरसेटिन समकक्ष (क्यूई) के रूप में व्यक्त किया गया था।

3.6. Tan1nin सामग्री का निर्धारण

स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर के आटे के अर्क की टैनिन सामग्री को थोड़े संशोधन के साथ, जोसलिन [44] द्वारा पहले वर्णित वर्णमिति विधि द्वारा निर्धारित किया गया था। नमूने का एक हिस्सा (0.5 ग्राम) मेथनॉल में 1 प्रतिशत एचसीएल के 5 एमएल में फैलाया गया और 15 मिनट के लिए छोड़ दिया गया। बाद में, मिश्रण को 10 मिनट के लिए 3 {{1 0}} 0 0 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया गया। सतह पर तैरनेवाला के 0.1 एमएल के एक हिस्से को 7.5 एमएल आसुत जल युक्त टेस्ट ट्यूब में भेज दिया गया था, जिसके बाद 0.5 एमएल फोलिन-डेनिस अभिकर्मक और 1 एमएल का Na2CO3 (35 प्रतिशत) समाधान जोड़ा गया था, और मात्रा को बनाया गया था 0.9 एमएल आसुत जल के साथ 10 एमएल मिश्रण के बाद, प्रतिक्रिया मिश्रण को कमरे के तापमान पर 30 मिनट के लिए ऊष्मायन किया गया था, और अवशोषण 760 एनएम पर पढ़ा गया था। टैनिन सामग्री, जिसे मिलीग्राम / जी नमूने में टैनिक एसिड समकक्ष (टीएई) के रूप में व्यक्त किया गया था, की गणना टैनिक एसिड मानक वक्र से की गई थी।

3.7. नमूने की कैरोटीनॉयड सामग्री की मात्रा

स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर के आटे की कैरोटेनॉयड सामग्री हॉवे और तनुमिहार्डजो [45] द्वारा वर्णित विधि को अपनाकर निर्धारित की गई थी। 6 एमएल इथेनॉल (0.1 प्रतिशत ब्यूटाइलेटेड हाइड्रॉक्सिल टोल्यूनि युक्त) के साथ नमूने के 0.6 ग्राम को मिलाकर आटे से कैरोटेनॉयड्स निकाले गए। मिश्रण को 5 मिनट के लिए 85 डिग्री पर पानी के स्नान में रखा गया था। इसके बाद, मिश्रण में हस्तक्षेप करने वाले तेल को 5 मिनट के लिए पानी के स्नान में पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड (80 प्रतिशत w/v) के साथ 85 डिग्री पर साबुनीकृत किया गया। निलंबन को फिर एक भंवर मशीन का उपयोग करके मिलाया गया और एक और 5 मिनट के लिए पानी के स्नान में लौटा दिया गया। इसे तुरंत बर्फ के स्नान में स्थानांतरित कर दिया गया था, और 3 एमएल ठंडे विआयनीकृत पानी को जोड़ा गया था मिश्रण से कैरोटीनॉयड सामग्री को लगातार तीन बार एन-हेक्सेन के 3 एमएल के साथ 1000 आरपीएम पर 10 एस के लिए सेंट्रीफ्यूज करके अलग किया गया था। मिश्रण की ऊपरी परत को 50 एमएल सांद्रक ट्यूब में भेज दिया गया था। संयुक्त हेक्सेन अंश को तीन बार विआयनीकृत पानी से धोया गया, भंवर में डाला गया, और 1000 आरपीएम पर 10 एस के लिए सेंट्रीफ्यूज किया गया। n-हेक्सेन अंश को 25 मिनट के लिए नाइट्रोजन गैस के तहत एक TurboVap (LIV) सांद्रक का उपयोग करके सुखाया गया था। सूखे अर्क को मेथनॉल/डाइक्लोरोमेथेन (1 एमएल, 50:50 वी/वी) के साथ पुनर्गठित किया गया था, और कैरोटेनॉयड्स की मात्रा निर्धारित करने के लिए एचपीएलसी सिस्टम में 100 μL विभाज्य इंजेक्ट किया गया था। एचपीएलसी प्रणाली (वाटर कॉर्पोरेशन, मिलफोर्ड, एमए, यूएसए) में एक गार्ड कॉलम, C30 YMC कैरोटेनॉइड कॉलम（4.6×250 मिमी, 3 μM）, बाइनरी एचपीएलसी पंप（वाटर्स 626）, ऑटो-सैंपलर (वाटर्स 717), और ए फोटोडायोड सरणी डिटेक्टर (पानी 2996)। सिस्टम एम्पावर 1 सॉफ्टवेयर (वाटर्स कॉर्पोरेशन) के साथ संचालित होता है। मोबाइल चरण में सॉल्वेंट ए होता है, जिसमें मेथनॉल होता है: पानी (92: 8 वी / वी) 10 मिमीोल / एल अमोनियम एसीटेट के साथ, और सॉल्वेंट बी, जिसमें 100 प्रतिशत मिथाइल तृतीयक-ब्यूटाइल ईथर होता है। निम्न स्थितियों के तहत 1 एमएल / मिनट की प्रवाह दर पर ग्रेडियेंट रेफरेंस किया गया था: 83 प्रतिशत से 59 प्रतिशत ए तक रैखिक ढाल के 29 मिनट; रैखिक ढाल के 6 मिनट 59 प्रतिशत से 30 प्रतिशत ए; 30 पर 1 मिनट की पकड़ प्रतिशत A; 4 मिनट की रैखिक ढाल 30 प्रतिशत से 83 प्रतिशत A तक और एक 4-मिनट की होल्ड 83 प्रतिशत पर। कैरोटीनॉयड के क्रोमैटोग्राम 450 एनएम पर उत्पन्न हुए थे, और विशिष्ट कैरोटीनॉयड की पहचान की गई थी और शुद्ध मानकों से अंशांकन वक्र के आधार पर बाहरी मानकों की विधि का उपयोग करके और अवशोषण स्पेक्ट्रम की तुलना और मानक कैरोटीनॉयड के साथ सह-क्षालन किया गया था।

3.8. फाइटिक एसिड सामग्री का निर्धारण

आटे की फाइटिक एसिड सामग्री को निर्धारित करने के लिए व्हीलर और फेरेल [46] की विधि को नियोजित किया गया था। 1 घंटे के लिए 1 ग्राम आटा और 25 एमएल 3 प्रतिशत ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड (टीसीए) के मिश्रण को यंत्रवत् रूप से मिलाते हुए निष्कर्षण किया गया था और निलंबन को 15 मिनट के लिए 35 0 0 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया गया था। सतह पर तैरनेवाला के 10 एमएल विभाज्य को 4 एमएल फेरिक क्लोराइड समाधान के साथ मिलाया गया था, और मिश्रण को उबलते पानी के स्नान में 45 मिनट के लिए गर्म किया गया था। परिणामी निलंबन को 15 मिनट के लिए 3500 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया गया था और सतह पर तैरनेवाला सावधानी से हटा दिया गया था। इसके बाद, अवक्षेप को 3 प्रतिशत टीसीए के 25 एमएल में फैलाकर दो बार धोया गया, 10 मिनट के लिए उबलते पानी के स्नान में गर्म किया गया, और 10 मिनट के लिए 3500 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया गया। आसुत जल के साथ अवक्षेप की मात्रा 30 एमएल तक बनाई गई थी, और मिश्रण को 30 मिनट के लिए उबलते पानी के स्नान में गरम किया गया था। गर्म निलंबन को व्हाटमैन फिल्टर पेपर (नंबर 2) की सहायता से फ़िल्टर किया गया था, और पूर्ण निस्पंदन सुनिश्चित करने के लिए अवक्षेप को 60 एमएल गर्म आसुत जल से धोया गया था। इसके बाद, फिल्टर पेपर पर बनाए गए अवक्षेप को 40 एमएल गर्म 3.2 एम एचएनओ 3 के साथ 100 एमएल वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में भंग कर दिया गया था। एक 0.5 एमएल विभाज्य को एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में स्थानांतरित किया गया था और 7 एमएल आसुत जल के साथ पतला किया गया था, जिसके बाद 1.5 एम केएससीएन के 2 एमएल को जोड़ा गया था, और 0.5 एमएल आसुत जल के साथ मात्रा 10 एमएल की गई थी। अवशोषण (1 मिनट के भीतर) 480 एनएम पर पढ़ा गया था। आटे की फाइटिक एसिड सामग्री की गणना Fe/P परमाणु अनुपात 4:6 का उपयोग करके की गई थी।

3.9. 2,2-अजीनोबिस(3-एथिल-बेंजोथियाजोलिन-6-सल्फोनिक एसिड) रेडिकल केशन (ABTS· प्लस) स्कैओन्गिंग परख/

रीट अल द्वारा रिपोर्ट की गई प्रक्रिया को अपनाकर स्ट्रीगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर के आटे के अर्क की ABTS को छानने की क्षमता की जांच की गई। ABTS प्लस (7 मिलीमोल/ली) और K2S2Os (2.45 मिलीमोल/ली) और इनक्यूबेटिंग मिश्रण

16 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर एक अंधेरे अलमारी में। बाद में, अभिकर्मक के अवशोषण को 0.70±0.02 इथेनॉल (95 प्रतिशत) के साथ 734 एनएम पर समायोजित किया गया। फिर 0.2 मिली अर्क और 2.0 एमएल एबीटीएस * अभिकर्मक को टेस्ट ट्यूब में मिलाया गया, अच्छी तरह मिलाया गया, और एक अंधेरी स्थिति में 15 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर ऊष्मायन किया गया। अंत में, अवशोषण को यूवी-विजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (मिल्टन रॉय कंपनी, यूएसए) में 734 एनएम पर पढ़ा गया। आटे के अर्क की एबीटीएसई प्लस मैला ढोने की क्षमता की गणना बाद में ट्रोलॉक्स मानक वक्र से की गई और इसे ट्रोलॉक्स समकक्ष एंटीऑक्सीडेंट क्षमता (टीईएसी) के रूप में व्यक्त किया गया।

3.10. 2,2-डिपेनिल-2-पिक्रिलहाइड्राजाइल रेडिकल (DPPH") मैला ढोने वाला परख

Cervato et al द्वारा रिपोर्ट किया गया प्रोटोकॉल । [48] ​​एक संदर्भ एंटीऑक्सीडेंट के रूप में विटामिन सी (एस्कॉर्बिक एसिड) का उपयोग करते हुए, डीपीपीएच को परिमार्जन करने के लिए आटे के अर्क की क्षमता को निर्धारित करने के लिए नियोजित किया गया था। संक्षेप में, एक प्रतिक्रिया मिश्रण जिसमें 1.0 विभिन्न सांद्रता (8, 16) का एमएल होता है। , 24, 32 मिलीग्राम/एमएल अर्क या विटामिन सी） और 3.0 मिलीलीटर डीपीपीएच डिग्री समाधान 60 μM） को कमरे के तापमान पर 30 मिनट के लिए एक अंधेरी स्थिति में ऊष्मायन किया गया था। इसके बाद, अवशोषण 517 एनएम पर पढ़ा गया था, और डीपीपीएच "अर्कों की सफाई क्षमता (प्रतिशत) की गणना की गई थी और निकालने की एकाग्रता के रूप में व्यक्त की गई थी जो डीपीपीएच के 50 प्रतिशत को साफ करती थी" (एससी 50)।

3.11. शक्ति परख को कम करना

Fe3 प्लस को Fe2 प्लस तक कम करने के लिए आटे के अर्क की क्षमता का परीक्षण Oyaizu [49] द्वारा वर्णित प्रोटोकॉल को अपनाकर किया गया था। संक्षेप में, अर्क (2.5 एमएल), 2 0 0 मिमी सोडियम फॉस्फेट बफर (पीएच 6.6) (2.5 एमएल), और 1 प्रतिशत पोटेशियम फेरिकैनाइड (2.5 एमएल) का मिश्रण 50 डिग्री पर 20 मिनट के लिए ऊष्मायन किया गया था। , जिसके बाद 10 प्रतिशत ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड का 2.5 एमएल मिलाया गया। इसके बाद, मिश्रण को 10 मिनट के लिए 650 × g पर सेंट्रीफ्यूज किया गया। सतह पर तैरनेवाला के 2.5 एमएल के एक हिस्से को एक परखनली में डाला गया था, और 2.5 एमएल आसुत जल और 1 एमएल 0.1 प्रतिशत फेरिकक्लोराइड मिलाया गया था और अच्छी तरह मिलाया गया था, और अवशोषण 700 एनएम पर पढ़ा गया था। अंत में, अर्क की कम करने की शक्ति की गणना की गई और प्रति ग्राम नमूने के बराबर मिलीग्राम गैलिक एसिड में व्यक्त की गई।

3.12. अल्फा-एमाइलेज निषेध परख

Kwon et al द्वारा वर्णित प्रक्रिया को अपनाकर अल्फा-एमाइलेज निषेध परख की गई। [50]। इस परख में पोर्सिन अग्न्याशय-एमाइलेज (ईसी3.2.1.1) और घुलनशील स्टार्च (सब्सट्रेट) का उपयोग किया गया था। आटे के अर्क के विभिन्न तनुकरण, कुल 500μL, और 500μL 0.02 M सोडियम फॉस्फेट बफर (pH6.9) 0.006 एम NaCl के साथ) 0.5 मिलीग्राम/एमएल-एमाइलेज समाधान युक्त मिश्रित और 10 मिनट के लिए 37 डिग्री पर ऊष्मायन किया गया था। इसके बाद, 0.02 एम सोडियम फॉस्फेट बफर में 1 प्रतिशत स्टार्च समाधान का 500 μL जोड़ा गया, और प्रतिक्रिया मिश्रण को 15 मिनट के लिए 37 डिग्री पर ऊष्मायन किया गया। इसके बाद, स्टार्च के -एमाइलेज-उत्प्रेरित हाइड्रोलिसिस को 1.0 एमएल डीएनएसए रंग अभिकर्मक (1 प्रतिशत 35- डाइनिट्रो सैलिसिलिक एसिड, और 0.4 एम NaOH में 12 प्रतिशत सोडियम पोटेशियम टार्ट्रेट) जोड़कर समाप्त कर दिया गया। प्रतिक्रिया मिश्रण को बाद में उबलते पानी के स्नान में 5 मिनट के लिए ऊष्मायन किया गया, कमरे के तापमान तक ठंडा किया गया, और 10 एमएल आसुत जल से पतला किया गया। मिश्रण का अवशोषण 540 एनएम पर पढ़ा गया था। एक संदर्भ परीक्षण जिसमें आटे के अर्क को शामिल नहीं किया गया था, प्रयोग में शामिल किया गया था। उसके बाद, प्रतिशत-एमाइलेज निषेध की गणना निम्नानुसार की गई:

(A540R - A540S) × 100 प्रतिशत निषेध =A540R

जहाँ A540R संदर्भ का अवशोषण पठन है; A540S नमूने का अवशोषण पठन है।

3.13. अल्फा-ग्लूकोसिडेज़ निषेध परख

Alpha-glucosidase inhibitory activity of the flours extracts was conducted by adopting the procedure reported by Kim et al. [39], using Bacillus stearothermophillus α-glucosidase (EC3.2.1.20) and para-nitrophenylglucopyranoside (PNPG) as the substrate. Five (5)units of an aliquot of α-glucosidase were incubated with 20 μg/mL of the extract for 15 min. The hydrolytic reaction was initiated by adding 3 mM PNPG prepared in 20 mM phosphate buffer, pH6.9, which served as a substrate. The hydrolytic reaction was allowed to proceed for 20 min at37°C, after which 2 mL of 0.1 M Na>सीओ: प्रतिक्रिया को समाप्त करने के लिए जोड़ा गया था। प्रयोग में आटा निकालने के बिना एक संदर्भ परीक्षण शामिल किया गया था। पीएनपीजी के -ग्लूकोसिडेज-उत्प्रेरित हाइड्रोलिसिस से जारी पीले पी-नाइट्रोफेनॉल का अवशोषण 400 एनएम पर पढ़ा गया था और प्रतिशत ओ-ग्लूकोसिडेज अवरोध की गणना इस प्रकार की गई थी:

(A400R - A400S) × 100 प्रतिशत निषेध =A400R

जहां A400R संदर्भ का अवशोषण पठन है; A400Sis नमूने का अवशोषण पठन।

3.14. डेटा विश्लेषण

इस अध्ययन में प्राप्त डेटा (तीन प्रतियों के निर्धारण से) को माध्य मान ± मानक विचलन (एसडी) के रूप में व्यक्त किया गया था। SPSS सांख्यिकीय सॉफ्टवेयर पैकेज (16 वें संस्करण) का उपयोग करते हुए, डेटा पर विचरण (ANOVA) का एक-तरफ़ा विश्लेषण किया गया था, और माध्य मानों की तुलना p पर Tukey के पोस्ट हॉक टेस्ट का उपयोग करके की गई थी।<0.05. the="" associations="" between="" the="" bioactive="" components,="" the="" antioxidant,="" and="" the="" starch-hydrolyzing="" enzymes="" inhibitory="" activities="" were="" calculated="" using="" the="" pearson="" correlation="" test.="" column="" representations="" of="" the="" mean="" values="" were="" done="" using="" graphpad="" prism="" (5th="">

4। निष्कर्ष

छह पाइपलाइन स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर में महत्वपूर्ण जैव सक्रिय घटक (कुल फेनोलिक्स, कुल फ्लेवोनोइड्स, टैनिन, फाइटिक एसिड और कैरोटेनॉइड) शामिल थे। उनके अर्क ने मजबूत एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का प्रदर्शन किया और स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम (-एमाइलेज और -ग्लूकोसिडेज़) को बाधित किया। स्ट्रिगा प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकरों में, एएस 1828-9 में सबसे शक्तिशाली एंटीऑक्सीडेंट और स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइम अवरोधक गतिविधियां थीं। स्ट्रिगा प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकरों की कुल फेनोलिक सामग्री और एबीटीएस* प्लस, डीपीपीएच डिग्री मैला ढोने की क्षमता, कम करने की शक्ति, -एमाइलेज, और -ग्लूकोसिडेस निरोधात्मक गतिविधि के बीच महत्वपूर्ण संबंध देखे गए। एंटीऑक्सिडेंट और स्टार्च-हाइड्रोलाइजिंग एंजाइमों की निरोधात्मक गतिविधियों से पता चलता है कि स्ट्रिगा-प्रतिरोधी पीले-नारंगी मक्का संकर (विशेष रूप से एएस 1828-9) ऑक्सीडेटिव तनाव और पोस्टप्रैन्डियल हाइपरग्लाइसेमिया को रोकने और / या कम करने में फायदेमंद हो सकते हैं।