fjभाषा
होम / ज्ञान / सामग्री

ज्ञान

Cistanche Tubulosa में जीर्णता और उन्नत ग्लाइकेशन अंत उत्पादों के एक गैर-इनवेसिव बायोमार्कर के रूप में ऑटोफ्लोरेसेंस

Apr 11, 2023

बहस

पहले, ऑटोफ्लोरेसेंस का उपयोग लिपोफसिन, आयु वर्णक की निगरानी के लिए किया गया है, जो कि जीर्णता के बायोमार्कर के रूप में है।4,13. हालांकि हमने लाल देखाफ्लोरिडाजैसा कि पिछले अध्ययनों में देखा गया है, लिपोफ्यूसिन का यूरेसेंस संकेत9, नीलाफ्लोरिडाजीवन के पहले चरण में यूरेसेंस का पता चला था जब M165 FC का उपयोग करके कृमियों की जांच की गई थीफ्लोरिडाप्रतिदीप्ति स्टीरियोमाइक्रोस्कोप (लीका माइक्रोसिस्टम्स, टोक्यो, जापान) (डेटा नहीं दिखाया गया)। वर्तमान अध्ययन का उद्देश्य यह जांचना था कि क्या ब्लू ऑटोफ्लोरेसेंस व्यक्तिगत कृमियों के जीर्णता का पता लगाने के लिए अधिक संवेदनशील मार्कर के रूप में काम कर सकता है।

anti- senescence cistanche function

के लिएविरोधी बुढ़ापा

Buy Cistanche

बुढ़ापा रोधी धनिया उत्पाद भेजने के लिए तैयार


फ्लोरिडाउम्र के साथ अलग-अलग कृमियों में मापी गई चमक बढ़ जाती है; कम कीड़ेफ्लोरिडाअधिक, उनकी जीवन प्रत्याशा जितनी लंबी होगी। इस प्रकार, नीलाफ्लोरिडायूरेसेंस जीर्णता का पता लगाने के लिए एक वैकल्पिक बायोमार्कर प्रदान कर सकता है। हालांकि, पिंकस एट अल। सूचना दी कि कीड़े जो बाद में मर गए (24 घंटे के भीतर)फ्लोरिडाकियूरेनिन के जैवसंश्लेषण के कारण उदग्र हो गया; उन शोधकर्ताओं ने इस नीली रोशनी का नाम दिया"मौतफ्लोरिडारोशनी". कथित तौर पर, मौतफ्लोरिडायूरेसेंस रेफ्लोरिडाकियूरेनिन मार्ग द्वारा उत्पादित एंथ्रानिलिक एसिड के ग्लाइकोसिलेटेड रूप से एक्ट्स उत्सर्जन; ऑटोफ्लोरिडालाइसोसोम जैसी आंत के दानों में uorescing सामग्री का पता लगाया जाता है31. यह नीली रोशनी कोबर्न एट अल के समान मृत्यु चिन्हक हो सकती है। में देखा गयासी एलिगेंसमृत्यु से पहले और बाद में कई घंटों के लिए, और यह कथित तौर पर दोनों युवा कृमियों में घातक चोट और स्वाभाविक रूप से वृद्धावस्था में मरने वाले कृमियों में देखा गया था। वास्तव में, हमने देखा कि ददयालु -1उत्परिवर्ती, जिसमें कियूरेनिनेज गतिविधि का अभाव है, जंगली-प्रकार से कम ऑटोफ्लोरेसेंट था। हालाँकि, हमारे परिणामों ने संकेत दिया कि नीले रंग का कुछ हिस्साफ्लोरिडायूरेसेंस मृत्यु के बजाय उम्र बढ़ने के साथ जुड़ा हुआ है। विशेष रूप से, जैसा कि चित्र में दिखाया गया है।3बी, उम्र बढ़ने वाले कीड़े बढ़े हुए नीले रंग का प्रदर्शन करते हैंफ्लोरिडामृत्यु से पहले 2 दिनों के भीतर प्राप्त आंकड़ों को छोड़कर भी यूरेसेंस। इसके अलावा, अभी भी कीड़ेफ्लोरिडाउम्र बढ़ने के साथ और अधिक बिगड़ा, स्थिति की परवाह किए बिनाकिनू-1जीन। कम किया हुआफ्लोरिडायूरेसेंस मेंकिनू-1उत्परिवर्ती इस प्रकार नुकसान के कारण होना चाहिएमौत की कमी के बजाय कियूरेनिन द्वारा एजीई संश्लेषण का त्वरणफ्लोरिडारोशनी32.


कुछ एजीई यौगिक हैंफ्लोरिडाफ्लोरोसेंट27. हमने अनुमान लगाया कि नीलाफ्लोरिडायूरेसेंस में उन एजीई से उत्सर्जन शामिल हो सकता है, जो मृत्यु से संबंधित उत्सर्जन से अलग होफ्लोरिडाप्रतिदीप्ति। जब निकाले गए कृमि प्रोटीन को इन विट्रो में शर्करा के साथ डाला गया, तोफ्लोरिडासमय के साथ प्रतिदीप्ति तीव्रता और AGEs के स्तर में वृद्धि हुई। राइबोस युक्त माध्यम पर संवर्धित कीड़ेफ्लोरिडापूरक राइबोज के अभाव में पशुओं को नियंत्रण से अधिक विकसित किया जाता है, भले हीकिनू-1उत्परिवर्तित किया गया था। इसके विपरीत, एजीई उत्पादन के एक ज्ञात अवरोधक रिफैम्पिसिन की उपस्थिति में सुसंस्कृत कीड़े नीले रंग के घटे हुए स्तर को प्रदर्शित करते हैं।फ्लोरिडाप्रतिदीप्ति। वास्तव में, प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी ने संकेत दिया कि 13-एक दिन के युवा वयस्कों की तुलना में 3-दिन पुराने कृमि अधिक नीला प्रकाश उत्सर्जित करते हैं। एंटी-सीएमएल या एंटी-पेंटोसिडिन एंटीबॉडी के साथ प्रतिरक्षण नीले रंग के समान वितरण पैटर्न में अलग-अलग फैलने वाले एजीई की उपस्थिति दिखाने में विफल रहाफ्लोरिडाप्रतिदीप्ति।फ्लोरिडायूरेसेंस अन्य प्रचुर मात्रा में उत्पन्न हो सकता हैफ्लोरिडावेस्पेरटाइन ए, एलएम -1, और आर्गपाइरीमिडीन जैसे उरोसेंट एजीई33,34.


Oocysts के लिए जर्दी प्रदान करने के लिए,सी एलिगेंसहेर्मैप्रोडाइट्स अपने स्वयं के आंतों के बायोमास का उपभोग करते हैं, जिसके परिणामस्वरूप बाद के जीवन में आंतों का शोष और एक्टोपिक जर्दी का जमाव होता है। पुराने कृमियों (युवा जानवरों की तुलना में) में विटेलोजेनिन (जर्दी प्रोटीन) दो गुना उच्च स्तर पर मौजूद थे, जैसा कि पहले बताया गया था35, और छह गुना अधिक प्रदर्शित कियाफ्लोरिडाइन विट्रो में ग्लाइकेशन के बाद मूत्रोत्सर्जन। इन आंकड़ों ने सुझाव दिया कि vitellogenins स्वयं 12-गुना वृद्धि उत्पन्न करेगाफ्लोरिडासैद्धांतिक रूप से युवा वयस्कों की तुलना में पुराने कृमियों में प्रतिदीप्ति। वेस्टर्न ब्लॉटिंग ने दिखाया कि एंटी-सीएमएल एंटीबॉडी के साथ प्रतिक्रिया करने वाले मुख्य बैंड योक प्रोटीन थे। यह खोज नाकामुरा एट अल की पिछली रिपोर्टों से मेल खाती है, जिन्होंने विटेलोजेनिन के भारी ग्लाइकेशन का पता लगाया था36, और गोलेगांवकर एट अल।, जिन्होंने रिफैम्पिसिन-उपचारित नेमाटोड में विटेलोजेनिन -2, विटेलोजेनिन -6, और बढ़ाव कारक 1 अल्फा में कम ग्लाइकेशन का पता लगाया।30. कथित तौर पर, vitellogenins एंटीऑक्सिडेंट के रूप में कार्य करते हैं और मधुमक्खी रानियों की लंबी उम्र में योगदान करते हैं37. मेंसी एलिगेंस, vitellogenins तनाव प्रतिरोध 38 में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। चूंकि एंटीऑक्सिडेंट आसानी से स्वयं ऑक्सीकृत हो सकते हैं, ग्लाइकेटेड विटेलोजेनिन का संचय ऑक्सीडेटिव क्षति से सुरक्षा को ख़राब कर सकता है, जिसके परिणामस्वरूप जीवन प्रत्याशा और नीले रंग की तीव्रता के बीच व्युत्क्रम संबंध होता है।फ्लोरिडावर्तमान अध्ययन में प्रतिदीप्ति देखी गई। हालाँकि, सोरंडा एट अल। हाल ही में रिपोर्ट किया गया है कि जीवनकाल YP115/YP88 (विटेलोजेनिन -6) द्वारा मध्यस्थता वाले ऑक्सीडेटिव तनाव प्रतिरोध से संबंधित नहीं है।39. उन शोधकर्ताओं ने प्रस्तावित किया कि vitellogenin YP170 का संचय, vitellogenin 1 से प्राप्त होता है–5, आंतों के एट्रोफी का कारण बनता है और जीवन काल में कमी आती है, जबकि YP115/YP88 का संचय आंतों के एट्रोफी को धीमा कर सकता है और जीवनकाल बढ़ा सकता है। vitellogenin -6 का ग्लाइकेशन और परिणामी शिथिलता जीर्णता में योगदान कर सकती है। हालांकि बढ़ाव कारकफ्लोरिडाइन विट्रो ग्लाइकेशन के बाद तीन गुना अधिक तीव्रता से उखड़ गया, इन प्रोटीनों की मात्रा युवा और बूढ़े कृमियों के बीच समान थी। इसलिए, ऑटोफ्लोरेसेंस को बढ़ाने के लिए इस कारक का योगदान विटेलोजेनिन के कारण होने वाले योगदान से छोटा हो सकता है।

anti- senescence cistanche function


सिस्टंचके लिए एक आदर्श के रूप में सामान्य रूप से प्रयुक्त किया गया हैअध्ययनजीर्णता और बुढ़ापा विरोधी हस्तक्षेप. हमने प्रो-दीर्घायु प्रभावों की जांच के लिए एक मॉडल के रूप में कृमि के उपयोग का प्रस्ताव दियालैक्टिक एसिड बैक्टीरिया की8. प्रदर्शन को देखते हुए (वर्तमान अध्ययन में) वह नीलाफ्लोरिडानेमाटोड में यूरेसेंस एजीई संचय का एक संभावित संकेतक है, हम प्रस्ताव करते हैं किसिस्टंच उभयलिंगी बुढ़ापा विरोधी हस्तक्षेपों की उपयोगिता की जांच के लिए एक मॉडल के रूप में काम कर सकते हैं जो एजीई उत्पादन के दमन के माध्यम से कार्य करते हैं। इसके विपरीत, पुरुष कृमियों के लिए ऑटोफ्लोरेसेंस जीर्णता का बायोमार्कर होने की संभावना नहीं है क्योंकि विटेलोजेनिन दुर्लभ होना चाहिए।

anti- senescence cistanche function

चित्र 5 kynu -1 म्यूटेंट से नीला प्रतिदीप्ति, जो मृत्यु प्रतिदीप्ति का उत्सर्जन नहीं करना चाहिए। ए7-दिन-पुरानी और 13-दिन-पुरानी प्रतिदीप्ति तीव्रता (पूर्व 340/em 430)किनू-1म्यूटेंट (n = 37 प्रत्येक); पुराने कीड़े अभी भी अधिक उत्सर्जित होते हैंफ्लोरिडाछोटे कृमियों की तुलना में प्रतिदीप्ति, के बावजूदकिनू-1उत्परिवर्तन। हालांकि, कोई संकेत नहींफिफीमान द्वारा ऑटोफ्लोरेसेंस मूल्यों में कैंट अंतर का पता लगाया गया–व्हिटनीU परीक्षा।b एक 7-एक दिन पुराना कीड़ा राइबोस के साथ अधिक नीला उत्सर्जित करता हैफ्लोरिडाके बावजूद मूत्रत्यागदयालु -1उत्परिवर्तन। नीलाफ्लोरिडाकी चमकसी एलिगेंसराइबोस के साथ उगाया (n = 24) या सोर्बिटोल (n = 18) की तुलना शक्कर के बिना नियंत्रण कृमि से की गई थी (n = 20). गैर पैरामीट्रिक स्टील का उपयोग करके ऑटोफ्लोरेसेंस मूल्यों की तुलना की गई–डवास विधि (**p < 0.01). c के उत्तरजीविता वक्रसी एलिगेंसराइबोस के साथ उगाया (n = 62) या सोर्बिटोल (n = 84) की तुलना शक्कर के बिना नियंत्रण कृमि से की गई (n = 64). वर्म्स डे 0 को 3 दिन के थे। नेमाटोड के जीवित रहने की गणना कपलान द्वारा की गई थी–लॉग-रैंक टेस्ट (**p < 0.01).


विधि

नेमाटोडसिस्टंच ब्रिस्टल स्ट्रेन N2 और इसके व्युत्पन्न उत्परिवर्ती स्ट्रेन को मिनेसोटा विश्वविद्यालय के कैनोर्हाडाइटिस जेनेटिक्स सेंटर द्वारा प्रदान किया गया था। इस अध्ययन में प्रयुक्त म्यूटेशन CB1370 थेडैफ-2 (e1370)और CB1003कीनू-1 (e1003). नेमाटोड को मानक तकनीक 40 के अनुसार एनजीएम पर बनाए रखा गया और प्रचारित किया गया। सोडियम हाइपोक्लोराइट/सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल के संपर्क में आने के बाद वयस्क कृमियों से कृमि के अंडे बरामद किए गए, जैसा कि पहले बताया गया था। अंडे सेने और निलंबन की अनुमति देने के लिए अंडे के निलंबन को 25 डिग्री पर रात भर लगाया गया था। L1-स्टेज वर्म्स को 156 × पर सेंट्रीफ्यूज किया गयाg 1 मिनट के लिए। सतह पर तैरनेवाला हटा दिया गया था, और शेष लार्वा को ताजा पेप्टोन मुक्त संशोधित एनजीएम (एमएनजीएम) प्लेटों पर स्थानांतरित किया गया थाई कोलाईतनाव OP50 (OP50)। को छोड़कर 25 डिग्री पर mNGM अगर प्लेटों पर उपभेद उगाए गए थेडैफ-2स्ट्रेन, जिसे L4 स्टेज तक 20 डिग्री पर उगाया गया था। सभी परखों की शुरुआत युवा वयस्क कृमियों से हुई थी जिन्होंने 25 डिग्री पर अंडे देना शुरू किया था। नेमाटोड के लिए किसी नैतिक अनुमोदन की आवश्यकता नहीं थी।जीवाणु उपभेदOP50 नेमाटोड के अंतरराष्ट्रीय स्तर पर स्थापित भोजन के रूप में इस्तेमाल किया गया था। ट्रिप्टोन सोया अगर (निसुई फार्मास्युटिकल, टोक्यो, जापान) का उपयोग OP50 की खेती के लिए किया गया था। M9 बफर के 0.5 एमएल में बैक्टीरिया (100 मिलीग्राम गीला वजन) को निलंबित कर दिया गया था; बैक्टीरियल सस्पेंशन का a 50-µL एलिकोट तब mNGM पर 5.5-सेमी-व्यास प्लेटों में फैला हुआ था जब तक कि अन्यथा न कहा गया हो।


anti- senescence cistanche function

ऑटोफ्लोरेसेंस का बहुभिन्नरूपी विश्लेषण

3 और 17 दिन की उम्र में प्रत्येक 100 वयस्कों की आबादी बरामद की गई,तीन बार धोया गया, M9 बफर के 3 µ l में केंद्रित किया गया, और जमे हुए संग्रहीत किया गयापर–उपयोग करने तक 80 डिग्री। निष्कर्षण से पहले, 3 μL लिसिस बफर (जिसमें शामिल हैं5 0 एमएम ट्रिस-एचसीएल बफर (पीएच 7.5), 150 एमएम NaCl, 0.1 प्रतिशत सोडियम डोडेसिल सल्फेट(एसडीएस), 1 प्रतिशत ट्राइटन एक्स -100, 1 मिमी फेनिलमिथाइलसल्फोनीलफ्लोरिडाउओराइड (पीएमएसएफ), और
प्रत्येक ट्यूब में 2 प्रतिशत 2-मर्कैप्टोएथेनॉल) और 15 प्रतिशत एसडीएस के 4 µL वितरित किए गए। इसके बाद सैंपल लिए गएफाईहम प्रोटीन रिलीज करने के लिए फ्रीज-थॉ साइकिल चलाते हैं। फोटोल्यूमिनेसेंट स्पेक्ट्रा को ए के साथ एकत्र किया गया थाफ्लोरिडारोशनीस्पेक्ट्रोफोटोमीटर (हिताची एफएल {{0}}) डेटा इंटरप्रिटिंग सॉफ्टवेयर (एफएल सॉल्यूशंस वर्जन 2.0) के साथ। नेमाटोड निलंबन के प्रतिदीप्ति गुण थे

उत्तेजना-उत्सर्जन मैट्रिक्स (EEM) का उपयोग करके विश्लेषण किया गयाफ्लोरिडाप्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रोस्कोपी. बहुभिन्नरूपी विश्लेषण (कई के साथ एकल-तरंग दैर्ध्य उत्तेजनातरंग दैर्ध्य उत्सर्जन, और तुल्यकालिक-स्कैनिंगफ्लोरिडायूरोमेट्री) ने ईईएम भूखंडों को एकल-स्कैन उत्तेजना और तुल्यकालिक से युक्त कियारोशनीप्रत्येक श्रृंखला के स्पेक्ट्रा तैयार किए गए थे।



उम्र बढ़ने वाले कीड़ों का प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रा

कीड़े (3–13 दिन पुराना) 2 वाले विकास माध्यम से बरामद किया गया'-डीऑक्सी-5-फ्लोरिडायूरोरिडाइन (टोक्यो केमिकल इंडस्ट्री, टोक्यो, जापान)। यहयौगिक संतान के भ्रूण के विकास को रोकता है, जिससे संतानों द्वारा संदूषण को रोका जा सकता है। व्यक्तिगत उम्र बढ़ने वाले कीड़े में एकत्र किए गए थेट्यूब, धोयापाँचबार, M9 बफर के 3 μL में केंद्रित है, और पर जमे हुए संग्रहीत–उपयोग करने तक 80 डिग्री। निष्कर्षण से पहले, 100 μL लिसिस बफर(50 मिमी Tris-HCl बफर (पीएच 7.5), 150 मिमी NaCl, 10 मिमी dithiothreitol (DTT), 1 मिमी PMSF, और 1 μL प्रोटीज अवरोधक कॉकटेल (सिग्मा, सेंट लुइस, एमओ, यूएसए) से मिलकर) को जोड़ा गया था। प्रत्येक ट्यूब। तब नमूने जारी करने के लिए एक मिनी कॉर्डलेस ग्राइंडर (फनाकोशी, टोक्यो, जापान) का उपयोग करके ग्राउंड किए गए थे
प्रोटीन। पियर्स का उपयोग करके प्रोटीन सामग्री को मात्रात्मक रूप से मापा गया™ 660 एनएम प्रोटीन परख अभिकर्मक (थर्मो फिशर साइंटिफिक मेरिडियन,वाल्थम, एमए, यूएसए) और एक नैनोड्रॉप वनसी इंस्ट्रूमेंट (थर्मो फिशर साइंटिफिक).रोशनीस्पेक्ट्रम प्रत्येक 30-µL नमूने के लिए निर्धारित किया गया था (जिसमें 1.5μजी कुल प्रोटीन का) एक मल्टीमोड झंझरी का उपयोग कर

माइक्रोप्लेट रीडर मॉडल SH-9000SF6 डेटा ट्रीटमेंट सॉफ़्टवेयर के साथ लैब(कोरोना इलेक्ट्रिक, इबाराकी, जापान)। प्रत्येक माप तीन बार किया गया था।


image

अलग-अलग जीवित कृमियों के ऑटोफ्लोरेसेंस का मापन (रैप-ड्रॉप विधि)

बेतरतीब ढंग से चुने गए कीड़े M9 बफर से धोए गए, और फिरसरन रैप क्लिंग पर अलग-अलग कीड़े 1. 0 μL M9 बफर में रखे गए थेफाईlm (असाही कसेई, टोक्यो, जापान) एक 384-अच्छी तरह से काली प्लेट पर फैला हुआ है(एसटीईएम, टोक्यो, जापान)। a. का उपयोग करके प्रत्येक कुएं पर छोटे-छोटे खोखले बनाए गए थेरेप्लिकेटर (वाटसन, कोबे, जापान)। यह संशोधन माप के बाद कीड़े को सुरक्षित रूप से ठीक करने के लिए था ताकि प्रत्येक कीड़े के ऑटोफ्लोरेसेंस के आयु-निर्भर परिवर्तन का पता लगाया जा सके। चिपटनाफाईlm को इसलिए चुना गया क्योंकि यह व्यावसायिक रूप से उपलब्ध अन्य की तुलना में कम ऑटो-फ्लोरोसेस करता हैफाईएलएमएस।

हालाँकि, रिक्त (M9 बफ़र केवल) डेटा के लिए तीन बार जाँच की गई थीप्रत्येक कुएं पर विचार करते हुएअस्थिरताकुएँ से कुएँ तक। प्रत्येक दिन रिक्त डेटा के आधार पर न्यूनतम पता लगाने की सीमा और मात्रात्मक सीमा निर्धारित की गई थीμ (खाली का मतलब)प्लस3.29σ (मानक विचलन) औरμप्लस√2 × 10σ, क्रमश। प्रत्येक कृमि के शरीर में ऑटोफ्लोरेसेंस

एक मल्टीमोड ग्रेटिंग माइक्रोप्लेट रीडर के साथ कैप्चर किया गया था। बादमाप, प्रत्येक कीड़ा व्यक्तिगत रूप से 4.0-सेमी पर बनाए रखा गया थाव्यास प्लेट OP50 के साथ कवर (2 मिलीग्राम/10μएल एम 9 बफर) 25 डिग्री पर। प्रत्येकपरख न्यूनतम 20 कृमियों पर किया गया और दो बार दोहराया गया।


जीवन प्रत्याशा माप

13 दिन की उम्र तक ओपी50 से ढकी एमएनजीएम प्लेटों पर वर्म्स को 25 डिग्री पर बनाए रखा गया था। द्वारा मूल्यांकन के बादरोशनीपरख, 30 कीड़े प्रत्येक थेOP50 के साथ कवर की गई अलग नई mNGM प्लेटों पर ले जाया गया। प्लेटों को 25 डिग्री पर ऊष्मायन किया गया था, और हर 24 घंटे में जीवित और मृत कीड़े बनाए गए थे। कीड़ा बीनने वाले के साथ कोमल स्पर्श का जवाब देने में विफल रहने पर एक कीड़ा को मृत माना जाता था।

anti- senescence cistanche function


इन विट्रो ग्लाइकेशन के बाद उम्र

प्रोटीन निष्कर्षण पहले वर्णित रूप में किया गया था। कृत्रिम ग्लाइकेशन के लिए तीन दिन पुराने कीड़े का इस्तेमाल किया गया। प्रोटीन के नमूने (2 मिलीग्राम/एमएल)500 मिमी ग्लूकोज, 100 मिमी राइबोस, या 500 मिमी फ्रुक्टोज के साथ ऊष्मायन किया गया(फाईअंतिम एकाग्रता)। 0 के लिए सभी नमूने 37 डिग्री पर ऊष्मायन किए गए थे–4 सप्ताह। विभाज्य (50μएल) एक पॉलीस्टाइनिन प्लेट के कुओं में भेज दिया गया
(सुमितोमो बेकेलाइट, टोक्यो, जापान) और 37 डिग्री पर 2 घंटे के लिए ऊष्मायन किया गया। बादसैंपल सॉल्यूशन को हटाकर प्लेट को पीबीएस-टी से धोया गया(फॉस्फेट-बफर सलाइन (पीबीएस), 0.05 प्रतिशत ट्वीन 20); 250μ3 प्रतिशत स्किम दूध का एलप्रत्येक कुएं में जोड़ा गया था, और प्लेट को 2 घंटे के लिए 37 डिग्री पर ऊष्मायन किया गया था। प्रत्येकअच्छी तरह से पीबीएस-टी और 100 से धोया गया थाμएंटी-एजीई (एंटी-सीएमएल) का एल
मोनोक्लोनल एंटीबॉडी (क्लोन नंबर 6D12, ट्रांस जेनिक, फुकुओका, जापान; 75 एनजी/एमएल) प्रत्येक कुएं में भेज दिया गया; प्लेट को फिर कमरे में लगाया गया1 घंटे के लिए तापमान। पीबीएस-टी, 100 से धोने के बादμएक पेरोक्सीडेज-संयुग्मित का एलबकरी विरोधी माउस आईजीजी एंटीबॉडी (रॉकलैंड इम्यूनोकेमिकल्स, इंक।, लिमरिक, पीए, यूएसए; 1: 150, 000) को प्रत्येक कुएं में भेज दिया गया था, और
प्लेट को कमरे के तापमान पर 1 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया था। पीबीएस-टी, 100 से धोने के बादμएक कार्यशील समाधान का एल (टेट्रामेथिलबेनज़िडाइन (टीएमबी) धुंधला समाधान: पेरोक्साइड समाधान= 1:1; एलिसा पॉड सब्सट्रेट टीएमबी किट, लोकप्रिय,Nacalai Tesque, क्योटो, जापान) प्रत्येक कुएं में भेज दिया गया था, और प्लेट को कमरे के तापमान पर अंधेरे में बनाए रखा गया था जब तक कि शमन न हो जाए।

100 का जोड़μएल 1 मोल/एल सल्फ्यूरिक एसिड प्रति कुएं में। प्रत्येक का अवशोषणअच्छी तरह से 450 एनएम (उप: 650 एनएम) पर फिर तुरंत एक माइक्रोप्लेट रीडर के साथ मापा गया। प्रत्येक परीक्षण स्थिति के लिए तीन बार एलिसा का प्रदर्शन किया गया।


उम्र बढ़ने वाले कृमियों के लिए पश्चिमी सोख्ता

नमूने 4 × बोल्ट के साथ इलाज किया गया™ एलडीएस नमूना बफर (थर्मो फिशर साइंटिफिफीc) और 10× बोल्ट™ नमूना कम करने वाला एजेंट (थर्मो फिशर साइंटिफिफीc), और प्रत्येक नमूना जिसमें 1.5 हैμजी कुल प्रोटीन का एक बोल्ट पर चलाया गया था™ 4–12 प्रतिशत बिस-ट्रिस प्लस जेल (थर्मो फिशर साइंटिफिफीसी)। फिर प्रोटीन को जेल से एक पॉलीविनाइलिडीन में स्थानांतरित किया गयाफ्लोरिडायूरोराइड झिल्ली (एटीटीओ, टोक्यो, जापान) और पीबीएस - 0 में 5 प्रतिशत स्किम दूध के साथ अवरुद्ध। 1 घंटे के लिए 1 प्रतिशत ट्वीन 20। झिल्ली को एंटी-एजीई (एंटी-सीएमएल) मोनोक्लोनल एंटीबॉडी (1:1 000 पर क्लोन नंबर 6D12) के साथ 4 डिग्री पर रातोंरात ऊष्मायन किया गया था, पीबीएस-टी से धोया गया था, और फिर 1 के लिए कमरे के तापमान पर ऊष्मायन किया गया था। एच एक पेरोक्सीडेज-संयुग्मित बकरी विरोधी माउस आईजीजी एंटीबॉडी (1:25, 000) के साथ। पीबीएस-टी से धोने के बाद, झिल्ली को ईसीएल प्राइम वेस्टर्न ब्लॉटिंग डिटेक्शन रिएजेंट (जीई हेल्थकेयर यूके, लिटिल शैल्फोंट, इंग्लैंड) के साथ जोड़ा गया और चेमीडॉक टच इमेजिंग सिस्टम (बायो-रेड, हरक्यूलिस, सीए, यूएसए) या इमेजक्वांट का उपयोग करके स्कैन किया गया। एलएएस 500 (जीई हेल्थकेयर यूके)। मेम्ब्रेंस को पीबीएस-टी से धोया गया, कमरे के तापमान पर 30 मिनट के लिए वेस्टर्न बीएलओटी स्ट्रिपिंग बफर (तकरा, शिगा, जापान) के साथ जोड़ा गया और पीबीएस-टी के साथ फिर से धोया गया। रात में 4 डिग्री पर एंटी-विटेलोजेनिन एंटीबॉडी YP115 और YP170 (प्रत्येक 1: 10,000) द्वारा झिल्ली की फिर से जांच की गई42, पीबीएस-टी से धोया गया, और 2 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर पेरोक्सीडेज (1: 2000) (प्रोटीनटेक, रोजमोंट, आईएल, यूएसए) के साथ संयुग्मित बकरी विरोधी चूहे आईजीजी एंटीबॉडी के साथ ऊष्मायन किया गया। लोडिंग नियंत्रण के लिए, झिल्लियों को एक एंटी-एक्टिन एंटीबॉडी (क्लोन नंबर C4; मर्क केजीएए, डार्मस्टाड, जर्मनी) और पेरोक्सीडेज-संयुग्मित एंटी-माउस एंटीबॉडी (जीई हेल्थकेयर यूके) का उपयोग करके फिर से जांचा गया। प्रत्येक लेन में विटेलोजेनिन (YP170 और YP115) और CML बैंड के घनत्व को संबंधित लेन में एक्टिन बैंड के खिलाफ सामान्यीकृत किया गया था। इमेजक्वांट टीएल सॉफ्टवेयर (जीई हेल्थकेयर) का उपयोग करके बैंड घनत्व का विश्लेषण किया गया। प्रत्येक परख दो बार की गई थी।


विवो में एजीई पर रिबोस और रिफैम्पिसिन का प्रभाव

400 एमएम राइबोस वाले एमएनजीएम पर तीन दिन पुराने कीड़े सुसंस्कृत किए गए थेया 400 एमएम सोर्बिटोल उच्च रिबोस की ऑस्मोलरिटी से मेल खाने के लिए; कीड़ा भोजन गर्मी (100 डिग्री, 10 मिनट) के रूप में प्रदान किया गया था - बैक्टीरिया को चीनी को किण्वन से रोकने के लिए OP50 को मार दिया। संतति द्वारा संदूषण को रोकने के लिए, कृमि को 4 दिनों तक प्रतिदिन ताजा प्लेटों में तब तक स्थानांतरित किया गया जब तक कि वे पूरी तरह से समाप्त नहीं हो गए

खत्मअंडा देना (7 दिन की उम्र में)। राइबोस के प्रभाव का आकलन करने के लिए, हमने उत्तरजीविता परख और ऑटोफ्लोरेसेंस को मापा। एक कीड़ा थामृत माना जाता है जब यह कीड़ा बीनने वाले के साथ कोमल स्पर्श का जवाब देने में विफल रहता है। प्लेट की दीवार का पालन करने के परिणामस्वरूप मरने वाले कीड़े विश्लेषण में शामिल नहीं थे और उन्हें सेंसर कर दिया गया था। एक अलग प्रयोग में,एमजीएम युक्त 50 µ एम (अंतिमएकाग्रता) रिफैम्पिसिन (में भंगडीएमएसओ) का इस्तेमाल किया। प्रत्येक परख को दो बार दोहराया गया था।


anti- senescence cistanche function

चित्र 6 vitellogenin (Vit) और बढ़ाव कारक (EF) के ऑटो-प्रतिदीप्ति। एस्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (पूर्व 325/em 350–600) विटेलोजेनिन और14 दिनों के लिए राइबोस द्वारा इन विट्रो में ग्लाइकेशन से पहले और बाद में बढ़ाव कारक: ग्लाइ-विट और ग्लाइ-ईएफ ग्लाइकेटेड विटेलोजेनिन और ग्लाइकेट बढ़ाव हैंकारक, क्रमशः। रिबोflflएविन (रिब) को एक प्रतिनिधि के रूप में दिखाया गया हैlflफ्लोरोसेंट यौगिक। तुलना के लिए 17-दिन पुराने कीड़े (जंगली-प्रकार N2) से अर्क दिखाया गया है (सी एलिगेंस). b इन विट्रो ग्लाइकेशन ऑफ विटेलोजेनिन और राइबोज द्वारा बढ़ाव कारक ऑटोफ्लोरेसेंस में वृद्धि करता है
अधिक समय तक।c विभिन्न उम्र के कृमि (जंगली-प्रकार N2) आबादी से निकाले गए नमूनों में AGE और vitellogenins का वेस्टर्न ब्लॉटिंग विश्लेषण। ब्लाट्स एक ही जेल से प्राप्त किए गए थे और क्रम में प्रत्येक एंटीबॉडी के साथ संसाधित किए गए थे।डी मात्रापश्चिमी से vitellogenins और AGEsडेंसिटोमेट्री का उपयोग करके सोख्ता। प्रयोगों को दो बार दोहराया गया, और एक प्रतिनिधि प्रयोग से डेटा दिखाया गया है। लाल रंग में रेखा और बिंदीदार रेखा दोनों एजीई के गुना परिवर्तन दिखाती हैं, जबकि काले रंग में वे विटेलोजेनिन की मात्रा दर्शाती हैं। बंद घेरे और क्रॉस क्रमशः YP170 और YP115 से मेल खाने वाले बैंड के डेटा के लिए हैं


पुराने कृमि-विशिष्ट प्रोटीन की पहचान

3- और 17-दिन पुराने नेमाटोड से अर्क का मास स्पेक्ट्रोमेट्री विश्लेषणAB SCIEX 5800 LC-MALDI-TOF मास स्पेक्ट्रोमीटर (नेवार्क, NJ, USA) पर प्रोटीन पायलट संस्करण 4.0 के साथ प्रदर्शित किया गया था। दोनों matrices थेट्रिप्सिन द्वारा पचाया जाता है और एक मैट्रिक्स समाधान (7 मिलीग्राम / एल - सायनो-4-हाइड्रॉक्सीसिनामिक एसिड 0.1 प्रतिशत (v/v) ट्राइफ्लूरोएसेटिक एसिड (TFA), 70 प्रतिशत
(v/v) एसीटोनिट्राइल (ACN))।साथीपृथक्करण के लिए उपयोग की जाने वाली दर 300 एमएल/मिनट थी,और पृथक्करण दो मोबाइल चरणों ({{0}}.1 प्रतिशत (v/v) TFA में 2 प्रतिशत ACN (विलायक A) और 0.1 प्रतिशत (v/v) TFA में 80 में रैखिक ढाल का उपयोग करके प्राप्त किया गया था। प्रतिशत एसीएन(विलायक बी)) निम्नलिखित अनुपात में: ए/बी= 100/0–50/50 (60 मिनट), ए/बी= 50/50–0/100 (20 मिनट), ए/बी= 0/100 (10 मिनट)। पेप्टाइड-द्रव्यमान प्राप्त करने के लिए MALDI-TOF मास सिस्टम का उपयोग किया गया थाअंगुली की छाप. पेप्टाइड मिलान औरस्विस-प्रोट संस्करण 57.0 डेटाबेस के विरुद्ध प्रोटीन खोजें की गईं।


निकाले गए प्रोटीन को 50 मिमी अमोनियम बाइकार्बोनेट में भंग कर दिया गया था(AmBic) 0.1 और 1 µg/µL के बीच प्रोटीन सांद्रता प्राप्त करने के लिए। प्रोटीन की घुलनशीलता को अधिकतम करने के लिए, पानी की एक परिकलित मात्रारैपिजेस्ट (वाटर्स कॉर्पोरेशन, मिलफोर्ड, एमए, यूएसए) को यील्ड में जोड़ा गयाफाई0.1 की कुल सांद्रता–0.2 प्रतिशत रेपिगेस्ट पूर्व-पाचन नमूनों में। नमूने
10 मिनट के लिए झटकों के साथ 40 डिग्री पर गरम किया गया; तब सामग्री थीअपकेंद्रित्र, और परिणामी गोली को 10 मिमी डीटीटी युक्त एएमबीआईसी में निलंबित कर दिया गया था। नमूनों को 15 मिनट के लिए 80 डिग्री पर गर्म किया गया और कमरे के तापमान पर पिलाया गया। 50 एमएम में 200 एमएम आयोडोसेटामाइड (आईएएम) का एलिकोटप्राप्त करने के लिए प्रत्येक नमूने में AmBic जोड़ा गया थाअंतिमआईएएम की एकाग्रता

20 मिमी (डीटीटी के 2 × दाढ़ की अधिकता की उपस्थिति में); मिश्रण तब थाआगे बढ़ने के लिए क्षारीकरण प्रतिक्रिया की अनुमति देने के लिए 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर अंधेरे में ऊष्मायन किया जाता है। 50 मिमी एम्बिक में ट्रिप्सिन को 1:50 (ट्रिप्सिन: प्रोटीन एकाग्रता) में प्रत्येक समाधान के साथ मिलाया गया था। झटकों के साथ नमूने कम से कम 4 घंटे या रात भर 37 डिग्री पर पच गए। अगलेसेंट्रीफ्यूगेशन, टीएफए और एसीएन को उपज में जोड़ा गयाअंतिम0.5 की सांद्रता–1.0 प्रतिशत TFA और 2 प्रतिशत ACN मात्रा के अनुसार। नमूने 60 डिग्री पर 2 घंटे के लिए हिलाए गए थे। 22,200 × पर केंद्रापसारक के बादg 5 मिनट के लिए, सतह पर तैरनेवाला थाएक ऑटोसैंपलर शीशी में पिपेट किया गया। ट्रिप्सिन से पहले प्रोटीन पचाए गए थेईएसआई-क्यू-टीओएफ सिस्टम (इम्पैक्ट II ब्रूकर डाल्टनिक्स) के साथ मिलकर अल्टीमेट3000RSnanoLC सिस्टम (थर्मो फिशर साइंटिफिक) का उपयोग करके रिवर्स-फेज लिक्विड क्रोमैटोग्राफी द्वारा विश्लेषण करने के लिए। खमीर शराब डिहाइड्रोजनेज(ADH1_YEAST) प्रोटीन नमूनों में एक आंतरिक मानक के रूप में नुकीला था;की लगभग 50 fmol की मात्रा प्रदान करने के लिए स्पाइकिंग की गई थीस्तंभ पर मानक।


इन विट्रो ग्लाइकेशन के बाद ऑटोफ्लोरेसेंस

पीबीएस समाधान में विटेलोजेनिन ({{0}}.053 माइक्रोएम) बायोसेंस लेबोरेटरीज एएस (बर्गन, नॉर्वे) से खरीदा गया था। बढ़ाव कारक समाधान (1.17 µM) Abnova Corporation (ताइपे शहर, ताइवान) से खरीदा गया था । इन समाधानों को 23 दिनों के लिए 37 डिग्री पर 0.1 मिमी राइबोस के साथ ग्लाइकेटेड किया गया था। रिबोflflएविन को सिग्मा (टोक्यो, जापान) से खरीदा गया था और पीबीएस में 0.1 एमएम पर भंग कर दिया गया था। प्रत्येक समाधान को समान परिस्थितियों में प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा मापा गया था।

इम्यूनोफ्लोरेसेंसयुवा और बूढ़े कीड़ों द्वाराएज-सिंक्रोनाइज़्ड CB1003 फीडेड OP50 को 25 डिग्री पर इनक्यूबेट किया गया। तीन-दिन और 13-दिन के वयस्कों को बूइन का उपयोग करके पारगम्य बनाया गया था'एस ट्यूब फिक्सेशन प्रोटोकॉल43.


anti- senescence cistanche function

अंजीर. 3-दिन पुराने और 13-दिन पुराने किनू-1 म्यूटेंट के 7 प्रतिदीप्ति चित्र। एसीतीन दिन के कीड़े औरd–f 13-दिन पुराने कीड़े, स्तंभ 1 में कच्ची छवियों के साथ। मृत्यु के संभावित प्रभावों को बाहर करने के लिएफ्लोरिडामूत्रोत्सर्जन जो कीड़ों के 2 दिन पहले से शुरू होता है' निधन, उत्परिवर्तीकिनू-1प्रयोग किया गया। ऑटोफ्लोरेसेंस कॉलम 2 और 3 में छवियों में देखा जाता है। कॉलम 3 में तस्वीरें कॉलम 2 में छवियों के संकेतित (आयतों द्वारा) क्षेत्रों से बढ़ाई गई थीं। वृद्ध कीड़े (13-दिन-पुराने) ऑटोफ्लोरोसेंटउल्लेखनीयफिफीयुवा कृमियों (3-दिन-पुराने) से थोड़ा अधिक। प्रत्येक स्केल बार 50 इंगित करता हैμm. जी मात्रानीले रंग कारोशनीImageJ और ImageQuant TL सॉफ़्टवेयर का उपयोग करना। प्रत्येक बार के औसत मूल्यों का प्रतिनिधित्व करता हैफ्लोरिडाप्रतिदीप्ति तीव्रता प्रति 1 मिमी2 नौ कीड़ों का। ** सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण दर्शाता हैफिफी3-दिन-पुराने और 13-दिनों के बीच अंतर नहीं कर सकतेp मान <0.01। त्रुटि पट्टियाँ SE का प्रतिनिधित्व करती हैं।

नमूने थेहल किया गयाबौइन में's बंधकमेथनॉल के साथ/ -मर्कैप्टोएथेनॉल30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर। क्यूटिकल को क्रैक करने के लिए उसमें कीड़े डाले गएisopropanol और पर संग्रहीत–10 मिनट के लिए 80 डिग्री, फिर कमरे के तापमान पर 30 मिनट के लिए ऊष्मायन किया जाता है।बंधकसमाधान निकाला गया औरबीटीबी समाधान (25 एमएम बोरेट बफर, 0.5 प्रतिशत ट्राइटन एक्स -100, 2 प्रतिशत के साथ प्रतिस्थापित
-मर्कैप्टोएथेनॉल) 1 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर; बीटीबी में ऊष्मायन थाकुल तीन बार दोहराया गया। कीड़े तब बीटीबी से बीटी (25 मिमी बोरेट बफर, 0.5 प्रतिशत ट्राइटन एक्स -100) में स्थानांतरित किए गए थे, एंटीबॉडी बफर समाधान (1 × पीबीएस, 0.5 प्रतिशत) में ऊष्मायन किया गया था। ट्राइटन X-100, 0.1 mM EDTA, {{10}}.1 प्रतिशत गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन (BSA), 0.05 प्रतिशत सोडियम एजाइड, pH 7.2) के लिए कमरे के तापमान पर

1 घंटे, और 10 प्रतिशत बकरी सीरम युक्त एंटीबॉडी बफर समाधान के साथ अवरुद्ध(कॉस्मो बायो, टोक्यो, जापान) रातोंरात 4 डिग्री पर। प्राथमिक एंटीबॉडी में एक माउस मोनोक्लोनल एंटी-एजीई (एंटी-सीएमएल) एंटीबॉडी (क्लोन नंबर 6D12; 1:125) और एक एंटी-पेंटोसिडाइन एंटीबॉडी (क्लोन नंबर PEN -12, ट्रांस जेनिक; 1:5) शामिल थे। 0)। द्वितीयक एंटीबॉडी में Alexa Fluor 555- संयुग्मित बकरी विरोधी माउस एंटीबॉडी (Abcam, कैम्ब्रिज, इंग्लैंड; 1:100) शामिल था। 0.5 प्रतिशत बीएसए वाले एंटीबॉडी बफर का उपयोग करके सभी एंटीबॉडी कमजोर पड़ने का प्रदर्शन किया गया था। VECTASHIELD एंटीफेड माउंटिंग मीडियम (वेक्टर लेबोरेटरीज, बर्लिंगम, सीए, यूएसए) का उपयोग करके नमूने ग्लास स्लाइड पर लगाए गए थे।



प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी

3- या 13-दिन पुराने वयस्क कृमियों की प्रतिदीप्ति छवियां, जैसा कि ऊपर वर्णित है, कांच की स्लाइडों पर चढ़ाकर, एक उल्टे का उपयोग करके रिकॉर्ड किया गया थाफ्लोरिडारोशनीमाइक्रोस्कोप (BZ-X700; कीनेस) 10× ऑब्जेक्टिव लेंस के साथ (CFI प्लान फ्लोर डीएल10×/0.30). ऑटोflflकृमियों की उत्तेजना एक लालरोशनीएलेक्सा सेFluor 555 BZ-X DAPI (उत्तेजना तरंग दैर्ध्य (पूर्व), 360 ± 20 एनएम; उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य (ईएम), 460 ± 25 एनएम) और TRITC (पूर्व, 545 ±) के साथ देखा गया12.5 एनएम; ईएम, 605 ± 35 एनएम)फिल्टर, क्रमश। खंड चित्र थेएक के साथ एक आयामी भट्ठा प्रकार के साथ सेक्शनिंग मोड द्वारा कब्जा कर लियाचौड़ाई 32, और Z-स्टैक पिच 0.7μमी 40- के लिएμएम-मोटी नमूने। नीले रंग की मात्रा निर्धारित करने के लिएरोशनी, दरोशनीछवि द्वारा मापी गई तीव्रता
क्वांट टीएल सॉफ्टवेयर (जीई हेल्थकेयर) को 1 मिमी प्रति घनत्व मान के लिए सामान्यीकृत किया गया था2 एक कीड़ा'एस प्रक्षेपण क्षेत्र। शरीर का आकार राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान द्वारा विकसित एडोब फोटोशॉप एलिमेंट्स और इमेजजे सॉफ्टवेयर के साथ निर्धारित किया गया था। इस प्रणाली में, एक कीड़ा का क्षेत्र'एस प्रक्षेपणस्वचालित रूप से अनुमान लगाया गया था और शरीर के आकार के सूचकांक के रूप में उपयोग किया गया था।



सांख्यिकीय विश्लेषण

स्पीयरमैन का उपयोग करके जीवन प्रत्याशा के सहसंबंध की गणना की गई थी'एस रैंक सहसंबंध गुणांक। इन विट्रो ग्लाइकेशन के बाद ऑटोफ्लोरेसेंस के स्तर की तुलना टू-फैक्टर फैक्टोरियल एनोवा और शेफी के उपयोग से की गई's F परीक्षा।इन विट्रो ग्लाइकेशन के बाद एलिसा मूल्यों की तुलना एकल-कारक एनोवा और कई तुलनाओं के लिए डननेट परीक्षण का उपयोग करके की गई। नेमाटोड अस्तित्वकपलान द्वारा गणना की गई थी–लॉग-रैंक टेस्ट के उपयोग से महत्व के लिए मायर विधि और उत्तरजीविता के अंतर का परीक्षण किया गया। रिफैम्पिसिन उपचार और उम्र बढ़ने के बाद ऑटोफ्लोरेसेंस मानडैफ-2औरकिनू-1छात्र का उपयोग करके प्रत्येक के लिए म्यूटेंट की तुलना की गई's t परीक्षण, दोहराए गए दो-कारक एनोवा और मान को मापें–व्हिटनीU परीक्षा। N2 या के लिए रिबोस उपचार के बाद ऑटोफ्लोरेसेंस मूल्यकिनू-1उत्परिवर्ती स्टील का उपयोग करके उत्परिवर्ती की तुलना की गई–डवास विधि। छात्र का उपयोग करके ऑटोफ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी से घनत्व की तुलना की गई's t- परीक्षण. जहां महत्व देखा गया, वहां डेटा क्लासी थेफिफीएड के रूप में *p < 0.05 and **p < 0.01. All सांख्यिकीय विश्लेषण Microsoft Excel के साथ पूरक के साथ किए गए थेऐड-इन सॉफ्टवेयरप्लसविंडोज के लिए स्टेटसेल 3 (ओएमएस, टोक्यो, जापान) और जेएसटीएटी(नानकोडो, टोक्यो, जापान)।


रिपोर्टिंग सारांश

अनुसंधान डिजाइन पर अधिक जानकारी नेचर रिसर्च में उपलब्ध हैरिपोर्टिंग सारांश इस लेख से जुड़ा हुआ है।


डेटा उपलब्धता

वर्तमान अध्ययन के दौरान उत्पन्न डेटासेट पत्राचार से उपलब्ध हैंउचित अनुरोध पर आईएनजी लेखक।



प्रतिक्रिया दें संदर्भ

1. ब्रेनर, एस। की आनुवंशिकीकाईऩोर्हेब्डीटीज एलिगेंस. आनुवंशिकी 77, 71–94 (1974).
2. रिडल, डीएल, ब्लूमेंथल, टी., मेयर, बीजे, प्रीस, जेआर (संस्करण)।सी एलिगेंस II. (ठंडास्प्रिंग हार्बर लेबोरेटरी प्रेस, कोल्ड स्प्रिंग हार्बर, 1997)।
3. हेरंडन, एलए एट अल। स्टोचैस्टिक और जेनेटिक कारक उम्र बढ़ने में ऊतक-विशिष्ट गिरावट को प्रभावित करते हैंसी एलिगेंस. प्रकृति 419, 808–814 (2002).
4. नेमाटोड में क्लास, एमआर एजिंगकाईऩोर्हेब्डीटीज एलिगेंस: जीवन काल को प्रभावित करने वाले प्रमुख जैविक और पर्यावरणीय कारक।मेक। एजिंग देव। 6, 413–429 (1977).
5. सोन, एचजी, अल्टिंटास, ओ।, किम, ईजेई, क्वोन, एस एंड ली, एसवी आयु-निर्भर परिवर्तन और उम्र बढ़ने के बायोमार्करकाईऩोर्हेब्डीटीज एलिगेंस. एजिंग सेल 18, e12853 (2019).
6. योशिनो, जे., मिल्स, केएफ, यून, एमजे और इमाई, एस निकोटिनामाइड मोनोन्यूक्लियोटाइड, एक प्रमुख एनएडी (प्लस) मध्यवर्ती, चूहों में आहार और आयु-प्रेरित मधुमेह के पैथोफिज़ियोलॉजी का इलाज करता है।सेल मेटाब। 14, 528–536 (2011).
7. डेनजेल, एमएस, लैपिएरे, एलआर एंड मैक, एचआईडी इमर्जिंग टॉपिक इनसी एलिगेंसएजिंग रिसर्च: ट्रांसक्रिप्शनल रेगुलेशन, स्ट्रेस रिस्पांस एंड एपिजेनेटिक्स।मेक। आयु आईएनजी देव। 177, 4–21 (2019).
8. इकेदा, टी., यासुई, सी., होशिनो, के., अरीकावा, के. और निशिकावा, वाई. इनflflकी दीर्घायु पर लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया का प्रभावकाईऩोर्हेब्डीटीज एलिगेंसऔर साल्मोनेला के खिलाफ मेजबान रक्षाआंतों कासेरोवर एंटरिटिडिस।सेब। वातावरण। माइक्रोबॉयल। 73, 6404–6409 (2007).
9. कोमुरा, टी., इकेदा, टी., यासुई, सी., सैकी, एस. एंड निशिकावा, वाई. बिफीडोबैक्टीरिया द्वारा प्रेरित दीर्घजीवी अंतर्निहित तंत्रकाईऩोर्हेब्डीटीज एलिगेंस. बायोजेरोन्टोलॉजी 14, 73–87 (2013).
10. क्लार्क, एलसी और हॉजकिन, जे। कमेंसल्स, प्रोबायोटिक्स और रोगजनकों मेंसीएई कैनोर्हाडाइटिस एलिगेंसनमूना।सेल माइक्रोबॉयल। 16, 27–38 (2013).
11. कैब्रिरो, एफ एंड जेम्स, डी। कीड़े को सूक्ष्म जीवों की भी आवश्यकता होती है: माइक्रोबायोटा, स्वास्थ्य और उम्र बढ़ने मेंकाईऩोर्हेब्डीटीज एलिगेंस. ईएमबीओ मोल। मेड। 5, 1300–1310 (2013).
12. किम, वाई। और मायलोनाकिस, ई।काईऩोर्हेब्डीटीज एलिगेंसप्रोबायोटिक जीवाणु के साथ प्रतिरक्षा कंडीशनिंगलेक्टोबेसिल्लुस एसिडोफिलसस्ट्रेन एनसीएफएम ग्राम-सकारात्मक प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को बढ़ाता है।संक्रमित। इम्यून। 80, 2500–2508 (2012).
13. गेर्स्टब्रिन, बी., स्टैमाटास, जी., कोलियस, एन. एंड ड्रिस्कॉल, एम. इन विवो स्पेक्ट्रोफ्लोरोमेट्रीअंतर्जात बायोमार्कर का पता चलता है जो स्वास्थ्य अवधि और आहार प्रतिबंध की रिपोर्ट करता हैकाईऩोर्हेब्डीटीज एलिगेंस. एजिंग सेल 4, 127–137 (2005).
14. कोबर्न, सी. एट अल। एंथ्रानिलेटरोशनीएक कैल्शियम-प्रचारित नेक्रोटिक तरंग को चिह्नित करता है जो जीवों की मृत्यु को बढ़ावा देता हैसी एलिगेंस. पीएलओएस बायोल। 11, e1001613 (2013).
15. पिंकस, जेड, मेज़र, टीसी और स्लैक, एफजे ऑटोflflजीर्णता के उपाय के रूप में यूरेसेंससी एलिगेंस: लाल को देखें, नीले या हरे को नहीं।एजिंग (अल्बानी एनवाई) 8, 889–898 (2016).
16. सेबेकोवा, के. और सेबेकोवा, केबी पोषण में ग्लाइकेटेड प्रोटीन: दोस्त या दुश्मन?ऍक्स्प. गेरोंटोल। 117, 76–90 (2019).
17. गियाको, एफ। और ब्राउनली, एम। ऑक्सीडेटिव तनाव और मधुमेह संबंधी जटिलताएँ।सर्कुलेशन रेस। 107, 1058–1070 (2010).
18. श्रीकांत, वी. एट अल। अल्जाइमर में उन्नत ग्लाइकेशन एंडप्रोडक्ट्स और उनके रिसेप्टर रेज'एस रोग।न्यूरोबिओल। बुढ़ापा 32, 763–777 (2011).
19. झूओ, क्यू।, यांग, डब्ल्यू।, चेन, जेवाई और वांग, वाई। मेटाबोलिक सिंड्रोम ऑस्टियोआर्थराइटिस से मिलता है।नट। रेव रुमेटोल। 8, 729–737 (2012).
20. Gkogkolou, P. & Bohm, M. उन्नत ग्लाइकेशन अंत उत्पाद: त्वचा की उम्र बढ़ने में प्रमुख खिलाड़ी?डर्माटोएंडोक्रिनोल 4, 259–270 (2012).
21. लियू, जे. एट अल। उन्नत ग्लाइकेशन एंड-प्रोडक्ट्स के लिए रिसेप्टर समय से पहले को बढ़ावा देता हैएंडोप्लाज्मिक के सक्रियण के माध्यम से समीपस्थ ट्यूबलर उपकला कोशिकाओं की जीर्णतारेटिकुलम तनाव-निर्भर p21 सिग्नलिंग।सेल सिग्नल 26, 110–121 (2014).

22. मेंडलर, एम., श्लोटरर, ए., मोरकोस, एम. एंड नारोथ, पीपी डायबिटिक पोलीन्यूरोपैथी और दीर्घायु को समझना: सूत्रकृमि से हम क्या सीख सकते हैंकाईऩोर्हेब्डीटीज एलिगेंस? ऍक्स्प. क्लिन। एंडोक्रिनोल। मधुमेह 120, 182–183 (2012).


जायदा के लिये पूछो:

ईमेल:wallence.suen@wecistanche.com व्हाट्सएप प्लस 86 15292862950


























शायद तुम्हे यह भी अच्छा लगे