अमूर्त:किण्वित तिथियों से अलग किए गए कुल 2 0 लैक्टोबैसिलस उपभेदों का उनकी पीएच स्थिरता, कम पीएच के प्रतिरोध और पित्त लवण को सहन करने की क्षमता की तुलना करके उनकी प्रोबायोटिक क्षमता के लिए परीक्षण किया गया था। 20 उपभेदों में से, लैक्टोबैसिलस पेंटोसस KAU001, लैक्टिप्लांटिबैसिलस पेंटोसस KAU002, और लैक्टिप्लांटिबैसिलस प्लांटारम KAU003 नामक 3 उपभेदों में एसिड और पित्त लवण के प्रति उच्च सहनशीलता और आंतों की दीवार से चिपकने की क्षमता थी। इसके अलावा, तीन आइसोलेट्स का उनके एंटी-ऑक्सीडेशन, एंटी-ग्लूकोसिडेज़ अवरोध, कोलेस्ट्रॉल कम करने और सूजन-रोधी गुणों के लिए परीक्षण किया गया। उनमें से, स्ट्रेन KAU001 और KAU002 ने -ग्लूकोसिडेज़ को रोका, कोलेस्ट्रॉल के स्तर को कम किया, नाइट्रिक ऑक्साइड उत्पादन को रोका, और उच्च एंटी-ऑक्सीडेटिव क्षमता दिखाई जो कि स्ट्रेन KAU003 से काफी बेहतर थी। दोनों उपभेदों ने RAW 264.7 मैक्रोफेज (पी <0.001) पर एलपीएस द्वारा प्रेरित टीएनएफ-, आईएल -6, और आईएल -10 जैसे सूजन मध्यस्थों की रिहाई को भी महत्वपूर्ण रूप से रोक दिया। परिणामों ने संकेत दिया कि KAU001 और KAU002 में सबसे अधिक प्रोबायोटिक क्षमता है, जो संभावित रूप से चयापचय स्वास्थ्य को संशोधित करता है और एलर्जी प्रतिक्रियाओं के जवाब में प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स को कम करता है।

सिस्टैंच का ग्लाइकोसाइड हृदय और यकृत के ऊतकों में एसओडी की गतिविधि को भी बढ़ा सकता है, और प्रत्येक ऊतक में लिपोफसिन और एमडीए की सामग्री को काफी कम कर सकता है, विभिन्न प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन रेडिकल्स (ओएच-, एच₂ओ₂, आदि) को प्रभावी ढंग से हटा सकता है और डीएनए क्षति से बचा सकता है। ओएच-रेडिकल्स द्वारा। सिस्टैंच फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स में मुक्त कणों की एक मजबूत सफाई क्षमता होती है, विटामिन सी की तुलना में उच्च कम करने की क्षमता होती है, शुक्राणु निलंबन में एसओडी की गतिविधि में सुधार होता है, एमडीए की सामग्री कम होती है, और शुक्राणु झिल्ली समारोह पर एक निश्चित सुरक्षात्मक प्रभाव पड़ता है। सिस्टैंच पॉलीसेकेराइड डी-गैलेक्टोज के कारण प्रयोगात्मक रूप से वृद्ध चूहों के एरिथ्रोसाइट्स और फेफड़ों के ऊतकों में एसओडी और जीएसएच-पीएक्स की गतिविधि को बढ़ा सकते हैं, साथ ही फेफड़ों और प्लाज्मा में एमडीए और कोलेजन की सामग्री को कम कर सकते हैं और इलास्टिन की सामग्री को बढ़ा सकते हैं। डीपीपीएच पर एक अच्छा सफाई प्रभाव, वृद्ध चूहों में हाइपोक्सिया का समय बढ़ाना, सीरम में एसओडी की गतिविधि में सुधार करना, और प्रयोगात्मक रूप से वृद्ध चूहों में फेफड़ों के शारीरिक अध: पतन में देरी करना, सेलुलर रूपात्मक अध: पतन के साथ, प्रयोगों से पता चला है कि सिस्टैंच में अच्छी एंटीऑक्सीडेंट क्षमता है और त्वचा की उम्र बढ़ने वाली बीमारियों को रोकने और उनका इलाज करने के लिए एक दवा बनने की क्षमता रखती है। साथ ही, सिस्टैंच में इचिनाकोसाइड में डीपीपीएच मुक्त कणों को साफ़ करने की एक महत्वपूर्ण क्षमता है और प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों को साफ़ कर सकती है और मुक्त कट्टरपंथी प्रेरित कोलेजन गिरावट को रोक सकती है, और थाइमिन मुक्त कट्टरपंथी आयन क्षति पर भी अच्छा मरम्मत प्रभाव डालती है।

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कीवर्ड:अजवा; मदीना; प्रोबायोटिक्स; सूजन और जलन; खाद्य पदार्थ

1 परिचय

प्रोबायोटिक्स आहार अनुपूरक हैं जिनमें जीवित माइक्रोबियल उपभेद होते हैं जो मानव स्वास्थ्य में सुधार के लिए जठरांत्र संबंधी मार्ग (स्थायी या क्षणिक रूप से) को उपनिवेशित करने में सक्षम होते हैं [1,2]। जठरांत्र संबंधी मार्ग की मूल वनस्पति बाधित होने पर प्रोबायोटिक्स फायदेमंद होते हैं; बहिर्जात रूप से पूरक प्रोबायोटिक्स अस्थायी रूप से पथ को उपनिवेशित कर सकते हैं, और माइक्रोफ्लोरा संतुलन को स्थिर कर सकते हैं जो अंततः महत्वपूर्ण शारीरिक कार्य को बहाल करता है [1-5]। शब्द "प्रोबायोटिक्स" आम तौर पर जीनस लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया (एलएबी) से संबंधित प्रजातियों तक ही सीमित है, जैसे लैक्टोबैसिलस एसिडोफिलस, लैक्टोबैसिलस रमनोसस, लैक्टोबैसिलस गैसेरी, लैक्टोबैसिलस फेरमेंटम, लैक्टोबैसिलस साकेई और लैक्टोबैसिलस प्लांटारम, उनके तनाव के कारण महत्वपूर्ण प्रोबायोटिक्स के रूप में- विशिष्ट गुण जो स्वास्थ्य के लिए फायदेमंद हैं [6-15]। प्रोबायोटिक्स में वर्तमान शोध से संकेत मिलता है कि जीवाणु प्रजातियों को विशिष्ट आवश्यकताओं को पूरा करना चाहिए, जिसमें उच्च एसिड और पित्त सांद्रता के प्रतिरोध, आंतों के उपकला में आसंजन और स्थापना, रोगाणुरोधी यौगिकों का उत्पादन और प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं का मॉड्यूलेशन शामिल है [1,9,10,14,16 ,17].

बैक्टीरियोसिन सहित विभिन्न रोगाणुरोधी पदार्थों को स्रावित करने की उनकी क्षमता के लिए जाना जाता है, प्रोबायोटिक्स संभावित रोगजनकों से लड़ने, एलर्जी प्रतिक्रियाओं को कम करने, बृहदान्त्र में म्यूकोसल बाधा को सक्रिय करने, कमेंसल माइक्रोफ्लोरा की स्थिरता को बढ़ाने और कम करने के लिए आईजीए के स्राव के माध्यम से प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की सुविधा प्रदान करते हैं। रोगजनकों का आसंजन, साथ ही पुनर्प्राप्ति को बढ़ावा देना [4,5,18-20]। एल गैसेरी द्वारा उत्पादित बैक्टीरियोसिन सबसे प्रसिद्ध हैं जिनमें से एल गैसेरी एलए39 द्वारा उत्पादित गैस सेरिसिन-ए को शिशु के मल से अलग किया जाता है [21]। यह बताया गया है कि वर्डेनेली एट अल ने एक बुजुर्ग इतालवी के मल से एल. रैम्नोसस आईएमसी 501 को अलग किया, जठरांत्र संबंधी मार्ग में उच्च आसंजन प्रदर्शित किया, और रोगजनकों, विशेष रूप से कैंडिडा अल्बिकन्स [22] के विकास को हतोत्साहित किया। कौमिस से अलग किए गए एक अन्य प्रोबायोटिक, एल. केसी झांग में भी उच्च एसिड और पित्त नमक प्रतिरोध, गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल दृढ़ता, रोगाणुरोधी गतिविधि, साथ ही कोलेस्ट्रॉल कम करने वाले गुण पाए गए [23]। व्यापक व्यावसायिक मूल्य और प्रोबायोटिक्स द्वारा योगदान किए गए स्वास्थ्य लाभों के कारण, नए उपभेदों का निरंतर अलगाव और लक्षण वर्णन एक उभरती हुई प्रवृत्ति बन गई है क्योंकि ये लाभकारी बैक्टीरिया वर्तमान में सबसे शक्तिशाली बहुआयामी जैव-चिकित्सीय हैं [1,9,10,14,18,24 -31]।

इस अध्ययन का उद्देश्य किण्वित खजूर से अलग किए गए 20 लैक्टोबैसिलस उपभेदों की प्रोबायोटिक क्षमता का मूल्यांकन करना है, साथ ही उच्च एसिड और पित्त सांद्रता के प्रति उनके प्रतिरोध का मूल्यांकन करना है। इसके अलावा, चयनित आइसोलेट्स की जांच उनके विभिन्न कार्यात्मक गुणों के लिए की गई, जैसे कि आंतों की दीवार से चिपकना, एंटी-ऑक्सीडेशन, ग्लूकोसिडेज़ गतिविधि का निषेध, कोलेस्ट्रॉल कम करना और सूजन-रोधी।

2। सामग्री और विधि

2.1. लैक्टोबैसिलस उपभेदों का अलगाव और पहचान

बीसीपी (ब्रोमोक्रेसोल पर्पल लैक्टोज) एगर का उपयोग करके किण्वित अजवा खजूर से कुल 20 लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया उपभेदों को अलग किया गया था। उपभेदों को आगे एमआरएस अगर (डी मैन, रोगोसा, और शार्प) पर उगाया गया, और शुद्ध कल्चर उपभेदों को −80 ◦C [32] पर 60 प्रतिशत (v/v) ग्लिसरॉल में संग्रहित किया गया। प्रत्येक प्रयोग से पहले, उपयोग से पहले एमआरएस शोरबा में दो बार संवर्धन करके संस्कृतियों को सक्रिय किया गया था। सेल-मुक्त सतह पर तैरनेवाला प्रत्येक एलएबी आइसोलेट को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एमआरएस शोरबे में संवर्धित करके तैयार किया गया था, इसके बाद सेंट्रीफ्यूजेशन (10 मिनट के लिए 10, 000 × जी) और फिल्टर नसबंदी [7,8,18] किया गया था। एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति संवेदनशील उपभेदों को पहचान के लिए 16S rRNA जीन अनुक्रमण के लिए भेजा गया था [8]।

2.2. गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट मॉडल में चयनित आइसोलेट्स के प्रोबायोटिक गुण

उत्तरजीविता गैस्ट्रिक रस और पित्त लवण:

कृत्रिम गैस्ट्रिक रस और पित्त लवण के लिए चयनित एलएबी आइसोलेट्स के प्रतिरोध का परीक्षण हमारे पहले वर्णित प्रोटोकॉल [18] के अनुसार किया गया था। संक्षेप में, 2.5 × 108 सीएफयू/एमएल की सेल सांद्रता वाला एक इनोकुलम तैयार किया गया था और कृत्रिम गैस्ट्रिक रस और पित्त लवण में टीका लगाया गया था। गैस्ट्रिक जूस के लिए, एमआरएस को 3 के अंतिम पीएच पर पेप्सिन (1000 यूनिट/एमएल) के साथ पूरक किया गया था। इसी तरह, एमआरएस में 1 प्रतिशत बैल पित्त के साथ 5 प्रतिशत पैनक्रिएटिन जोड़कर कृत्रिम पित्त तैयार किया गया था और अंतिम पीएच को 7 पर समायोजित किया गया था।

2.3. एचटी -29 आंत की कोशिकाओं से आसंजन 

किम एट अल द्वारा वर्णित विधि का उपयोग करके आंत में चिपकने के लिए चयनित एलएबी आइसोलेट्स की क्षमता निर्धारित करने के लिए एचटी -29 कोशिकाओं का उपयोग किया गया था। [33]. व्यवहार्य कोशिकाओं की संख्या एमआरएस एगर [34] पर स्प्रेड प्लेट विधि का उपयोग करके निर्धारित की गई थी।

2.4. लैक्टोबैसिलस उपभेदों के कार्यात्मक गुणों का इन विट्रो अध्ययन

एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का निर्धारण:

चयनित एलएबी आइसोलेट्स की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधियों को 2, {{2} कैसीनो-बीआईएस (3- एथिलबेनज़ोथियाज़ोलिन -6- सल्फोनिक एसिड) (एबीटीएस) परख, फेरिक का उपयोग करके रेडिकल-स्कैवेंजिंग क्षमता का अनुमान लगाकर निर्धारित किया गया था। -एंटीऑक्सिडेंट पावर को कम करना (एफआरएपी) परख, और 2,2-डिफेनिल- 1-पिक्रिलहाइड्राजाइल (डीपीपीएच) परख। एबीटीएस, एफआरएपी और डीपीपीएच परीक्षण अन्यत्र वर्णित विधि का पालन करके किए गए थे [14,35-37]।

2.5. एन-ग्लूकोसिडेज़ निषेध 

-GLU का निषेध कुछ संशोधनों के साथ Saccharomyces cerevisiae (सिग्मा, सेंट लुइस, MO, यूएसए) से -GLU का उपयोग करके पहले वर्णित विधि [14,32] के अनुसार किया गया था [32]। संक्षेप में, 25 μL -GLU (0.17 U/mL) और 50 μL पोटेशियम फॉस्फेट बफर को परीक्षण नमूने के 10 μL के साथ मिलाया गया था। पीबीएस और एमआरएस का उपयोग नियंत्रण के रूप में किया गया था। फिर, 5 एमएम पीएनपीजी जोड़ा गया और उसके बाद 30 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया गया। अंत में, 0.2 M Na2CO3 का 100 μL जोड़कर एंजाइमेटिक प्रतिक्रिया रोक दी गई। 405 एनएम पर एक माइक्रोप्लेट का उपयोग करके अवशोषण की जांच की गई। प्रत्येक स्ट्रेन के लिए -GLU के प्रतिशत निषेध की गणना निम्नलिखित समीकरण (1) द्वारा की गई थी।

2.6. कोलेस्ट्रॉल कम करने वाली गतिविधि का निर्धारण

ओह एट अल द्वारा वर्णित संशोधित विधि का उपयोग करके कोलेस्ट्रॉल कम करने वाली गतिविधि का मूल्यांकन किया गया था। [35]. निर्माता के प्रोटोकॉल का पालन करते हुए कुल कोलेस्ट्रॉल परख किट का उपयोग करके अवशिष्ट कोलेस्ट्रॉल निर्धारित किया गया था। एक नकारात्मक नियंत्रण के रूप में काम करने के लिए, असंक्रमित बाँझ शोरबा में कोलेस्ट्रॉल का भी विश्लेषण किया गया था।

2.7. रॉ 264.7 मैक्रोफेज कोशिकाओं में लैब आइसोलेट्स की सूजन-रोधी गतिविधि

एक म्यूरिन मैक्रोफेज सेल लाइन, रॉ 264.7, कोरियन सेल लाइन बैंक (सियोल, कोरिया) से खरीदी गई थी और 10 प्रतिशत एफबीएस में 1 प्रतिशत पेनिसिलिन और स्ट्रेप्टोमाइसिन के साथ क्रमशः 100 यू/एमएल और 100 माइक्रोग्राम/एल पर 37 ◦ पर संवर्धित किया गया था। आर्द्र वातावरण में 5 प्रतिशत CO2 के साथ C. कोशिकाओं को उप-संवर्धित किया गया और 80-90 प्रतिशत संगम पर चढ़ाया गया। मूल्यांकन के लिए कोशिकाओं को 18 घंटे के लिए 100 एनजी/एमएल एलपीएस पर उजागर करने से पहले हमने रॉ 264.7 कोशिकाओं (1 × 106 कोशिकाओं/एमएल) को डीएमईएम माध्यम में 12 घंटे तक एंटीबायोटिक दवाओं के बिना एलएबी (7 या 8 लॉग सीएफयू/एमएल) की दो सांद्रता के साथ इलाज किया। उनकी सूजनरोधी गतिविधि। बैक्टीरिया के नमूनों को घोलने के लिए एक माध्यम-कमी-एंटीबायोटिक्स का उपयोग किया गया था, और फिर इसे सीधे सेल कल्चर माध्यम में जोड़ा गया था। ग्रिज़ प्रतिक्रिया का उपयोग करते हुए, NO को LPS से प्रेरित कोशिकाओं में मापा गया। जारी किए गए टीएनएफ-, आईएल -6, और आईएल -10 की एमआरएनए अभिव्यक्ति निर्धारित करने के लिए एक मात्रात्मक वास्तविक समय पीसीआर का उपयोग किया गया था।

2.8. सांख्यिकीय विश्लेषण 

तीन प्रतियों में किए गए स्वतंत्र प्रयोगों के आधार पर, सभी डेटा को साधन प्लस मानक विचलन (एसडी) के रूप में व्यक्त किया जाता है। विचरण के एक-तरफ़ा विश्लेषण (एनोवा) ने डंकन के बहु-श्रेणी परीक्षण का उपयोग करके कई समूहों के बीच सांख्यिकीय अंतर का विश्लेषण किया। अयुग्मित एक-पूंछ वाले छात्र के टी-टेस्ट ने दो समूहों के बीच सांख्यिकीय अंतर का विश्लेषण किया। पी-वैल्यू <{5}}.05 को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना जाता था।

3। परिणाम

3.1. किण्वित अजवा खजूर से जीवाणु उपभेदों की स्क्रीनिंग और अलगाव

अजवा खजूर सऊदी अरब के मदीना के एक स्थानीय बाजार से प्राप्त किया गया था। बीज निकाले गए और पीसकर पाउडर बना लिया गया। फिर, बीज पाउडर को बीज रहित खजूर और बाँझ पानी के साथ 5 प्रतिशत की अंतिम सांद्रता में मिलाया गया और फिर कांच के जार में संग्रहीत किया गया। कंटेनरों को 48 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर रखा गया, इसके बाद किण्वन पूरा करने के लिए 10 दिनों के लिए 10 ◦C पर ऊष्मायन किया गया। पहले बताई गई विधि के अनुसार बीसीपी अगर का उपयोग करके किण्वित खजूर से लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया (एलएबी) के कुल 20 उपभेदों को अलग किया गया था [7,18]। प्रारंभिक जांच के बाद, तीन चयनित एलएबी उपभेदों की पहचान लैक्टोबैसिलस पेंटोसस KAU001, लैक्टिप्लांटिबैसिलस पेंटोस KAU002, और लैक्टिप्लांटिबैसिलस प्लांटारम KAU003 के रूप में की गई थी, और अनुक्रम क्रमशः ON514175, ON514180, और ON514177 परिग्रहण संख्या के साथ जेनबैंक में प्रस्तुत किए गए थे।

3.2. गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट मॉडल में लैक्टोबैसिलस उपभेदों के प्रोबायोटिक गुण

प्रोबायोटिक्स को अपना लाभकारी प्रभाव डालने के लिए जठरांत्र संबंधी मार्ग में जीवित रहना चाहिए। इसलिए, एक पूरक के रूप में, उन्हें पहले जठरांत्र संबंधी मार्ग में उच्च पित्त लवण और एसिड-समृद्ध (कम पीएच) क्षेत्रों से गुजरने से पहले जीवित रहना चाहिए। मनुष्यों और अधिकांश जानवरों में, यकृत कोलेस्ट्रॉल से पित्त एसिड को संश्लेषित करता है, उन्हें पित्ताशय में संग्रहीत करता है, और वसायुक्त भोजन के बाद उन्हें छोटी आंत में स्रावित करता है। प्रोबायोटिक्स के रूप में अर्हता प्राप्त करने के लिए, एक नवीन लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया को आंत में उच्च पित्त लवण और कम पीएच का सामना करने में सक्षम होना चाहिए। ऑक्सगैल पाउडर, गोजातीय पित्त से प्राप्त उत्पाद, मानव पित्त संरचना के समान होने के कारण संभावित प्रोबायोटिक पित्त सहनशीलता क्षमताओं को मापने के लिए मानव पित्त के बजाय आमतौर पर उपयोग किया जाता है। लैक्टोबैसिलस के सभी तीन आइसोलेट्स ने 3. 0 के प्रतिकूल अम्लीय पीएच के प्रति उच्च सहनशीलता दिखाई, KAU002 और KAU003 में जीवित रहने की दर क्रमशः 92 प्रतिशत और 97 प्रतिशत थी (चित्र 1)। इसी तरह, पित्त लवण की 1 प्रतिशत सांद्रता पर, आइसोलेट्स ने 6 घंटे तक ऊष्मायन के बाद 91 प्रतिशत से 97.4 प्रतिशत तक जीवित रहने की दर प्रदर्शित की।

मानव आंत में उपनिवेशण के लिए एक शर्त के रूप में एचटी -29 मानव बृहदान्त्र एडेनोकार्सिनोमा कोशिकाओं का पालन करने के लिए तीन आइसोलेट्स का परीक्षण किया गया था। उपभेदों KAU001 और KAU002 ने मानव बृहदान्त्र कोशिकाओं में उच्च चिपकने वाली क्षमता (80 प्रतिशत से अधिक) प्रदर्शित की। अम्लीय पीएच के प्रति उच्च सहनशीलता, उच्च पित्त नमक सांद्रता में जीवित रहने की क्षमता और बृहदान्त्र कोशिकाओं के लिए उच्च आसंजन दर जैसे गुण आइसोलेट्स को संभावित प्रोबायोटिक लैक्टिक एसिड बैक्टीरियल उपभेदों के रूप में योग्य बनाते हैं।

3.3. लैक्टोबैसिलस उपभेदों की सूजनरोधी गतिविधियाँ

सूजन-रोधी गुणों को निर्धारित करने के लिए, RAW 264.7 मैक्रोफेज कोशिकाओं को उत्तेजित करने के लिए एक सामान्य एंटीजन-लिपोपॉलीसेकेराइड्स (LPS) का उपयोग किया गया था, और इन कोशिकाओं को लैक्टोबैसिलस आइसोलेट्स के साथ टीका लगाया गया था। एमटीटी परीक्षण में रॉ 264.7 कोशिकाओं पर लैक्टोबैसिलस उपभेदों का कोई साइटोटोक्सिक प्रभाव नहीं दिखा (डेटा नहीं दिखाया गया)। बैक्टीरियल आइसोलेट्स (KAU001 और KAU002) दो सांद्रता में - 107 और 108 CFU/mL - नियंत्रण LPS-उत्तेजित कोशिकाओं (चित्र 2) की तुलना में नाइट्रिक ऑक्साइड (NO) के उत्पादन को महत्वपूर्ण रूप से बाधित करते हैं। इसके अलावा, एलपीएस-उत्तेजित रॉ 264.7 में टीएनएफ-, आईएल -6, और आईएल -10 की प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन अभिव्यक्ति की मात्रा को क्यूआरटी-पीसीआर का उपयोग करके निर्धारित किया गया था। लैक्टोबैसिलस उपभेदों KAU001, KAU002, और KAU003 ने एकाग्रता-निर्भर तरीके से प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स की अभिव्यक्ति को काफी कम कर दिया (चित्रा 3)।

4। चर्चा

प्रोबायोटिक्स, जो मुख्य रूप से लैक्टिक एसिड बैक्टीरिया से बने होते हैं, जठरांत्र संबंधी मार्ग के उपनिवेशण के माध्यम से मेजबान को विशिष्ट स्वास्थ्य लाभ प्रदान करने के लिए जाने जाते हैं [38]। इस तरह के जैव-चिकित्सीय प्रभाव डालने के लिए, प्रोबायोटिक उपभेदों को जठरांत्र पथ के माध्यम से जीवित रहना चाहिए और पर्याप्त अवधि के लिए छोटी आंत और बृहदान्त्र में उपनिवेश करना चाहिए [18,38]। KAU001 और KAU003 जैसे उपभेद सबसे अधिक एसिड और पित्त सहनशील थे, और HT{5}} कोशिकाओं के साथ उनका आसंजन काफी अधिक था।

चिकन सीकम से अलग किए गए कुछ लैब 3 घंटे [2,4,39-41] के लिए 2-2.5 पीएच वाले अम्लीय वातावरण के संपर्क में आने के बाद 60 प्रतिशत से 80 प्रतिशत तक सीमित जीवित रहते हैं। इसके विपरीत, इस अध्ययन में जीवित रहने की दर 92.75~97.26 प्रतिशत तक देखी गई। आंत्र पथ में रोगजनकों के खिलाफ प्राकृतिक मानव रक्षा तंत्र हाइड्रोक्लोरिक एसिड के उत्पादन के माध्यम से होता है जो पेट के पीएच को कम करता है। इसलिए, माना जाता है कि एसिड सहनशीलता वाले उपभेद ऊपरी जठरांत्र पथ के माध्यम से पारगमन में जीवित रहते हैं। जबकि छोटी आंत और बृहदान्त्र में, पित्त नमक की उच्च प्रचुरता भी रोगजनक बैक्टीरिया के लगाव को रोकने के लिए एक सुरक्षात्मक बाधा है, इसलिए पित्त में जीवित रहना प्रोबायोटिक्स के लिए आंत को उपनिवेशित करने के लिए एक महत्वपूर्ण कारक माना जाता है [17]। पित्त नमक के हानिकारक प्रभाव का प्रतिकार करने में प्रोबायोटिक्स का तंत्र एंजाइम पित्त नमक हाइड्रॉलेज़ (बीएसएच) के उत्पादन के माध्यम से होता है, जो संयुग्मित पित्त लवण को तोड़ सकता है, जिससे विषाक्तता कम हो सकती है [23,40]। प्रोबायोटिक उपभेदों के लिए एक और महत्वपूर्ण आवश्यकता आंतों के उपकला कोशिकाओं का पालन करने की क्षमता है, जो उन्हें आंत में उपनिवेश बनाने, रोगजनकों के साथ प्रतिस्पर्धा करने और मेजबान को लाभ प्रदान करने में सक्षम बनाती है [42,43]। परीक्षण किए गए सभी उपभेदों में से, KAU001, KAU002, और KAU003 ने जठरांत्र संबंधी मार्ग और बृहदान्त्र कोशिकाओं के पालन में जीवित रहने की उच्च क्षमता को दर्शाया, उन्हें संभावित प्रोबायोटिक उम्मीदवारों के रूप में सम्मानित किया।

KAU001 और KAU002 में महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट क्षमता पाई गई, विशेषकर KAU001 में। ये नतीजे इस बात पर ज़ोर देते हैं कि दोनों एलएबी स्ट्रेन पेरोक्सिल रेडिकल्स को साफ़ करने में अत्यधिक प्रभावी हैं। उच्च एंटीऑक्सीडेंट क्षमता वाले प्रोबायोटिक्स मुक्त कणों से होने वाली ऑक्सीडेटिव क्षति को कम करने में मदद कर सकते हैं, जिससे सेल उम्र बढ़ने को धीमा करने जैसे स्वास्थ्य लाभ को बढ़ावा मिलता है क्योंकि उम्र बढ़ने की प्रक्रिया संचित ऑक्सीडेटिव तनाव से अत्यधिक जुड़ी होती है। इसके अतिरिक्त, KAU001 और KAU002 -ग्लूकोसिडेज़ गतिविधि को रोकते हैं, जो मधुमेह और मोटापे जैसी चयापचय संबंधी बीमारियों में महत्वपूर्ण निर्धारक कारकों में से एक है।

-ग्लूकोसिडेज़ की कमी आंतों में शर्करा के अवशोषण को कम करने में इन उपभेदों की क्षमता का संकेत दे सकती है, जिससे संभावित रूप से मधुमेह का खतरा कम हो जाता है। इसके अलावा, दोनों उपभेदों ने कोलेस्ट्रॉल के स्तर को भी काफी कम कर दिया, जिससे उच्च कोलेस्ट्रॉल स्तर और हृदय रोग के जोखिम को कम करने में मदद मिल सकती है। यह माना गया था कि एलएबी उपभेदों द्वारा उत्पादित बीएसएच पित्त लवण के विघटन के माध्यम से कोलेस्ट्रॉल विरोधी गुणों के लिए जिम्मेदार है। विसंयुग्मित पित्त लवण आंतों द्वारा कम पुन: अवशोषित होते हैं, और वे मल के माध्यम से उत्सर्जित होते हैं, इस प्रकार कोलेस्ट्रॉल से नए पित्त लवण के प्रतिस्थापन से सीरम कोलेस्ट्रॉल का स्तर कम हो जाएगा [30]।

रॉ 264.7 मैक्रोफेज में एलपीएस उत्तेजना के जवाब में, कोशिकाओं ने रोगजनकों से लड़ने के लिए एक विषाक्त रक्षा अणु के रूप में एनओ का उत्पादन किया, और इससे सूजन हुई। लैक्टोबैसिलस उपभेदों के साथ उपचार ने लैक्टोबैसिलस सांद्रता में वृद्धि के समानांतर, एंटीजन-उत्तेजित मैक्रोफेज में एनओ उत्पादन को कम कर दिया। सुसंगत रूप से, KAU001 और KAU002 की बढ़ती सांद्रता के साथ TNF-, IL -6, और IL -10 की अभिव्यक्ति का स्तर भी कम हो गया, जो इन उपभेदों के विरोधी भड़काऊ गुणों को उचित ठहराता है। एलर्जिक राइनाइटिस और एटोपिक डर्मेटाइटिस जैसे एंटीजन द्वारा प्रेरित एलर्जी प्रतिक्रिया में, बार-बार संपर्क में आने से रोग की गंभीरता समय के साथ बढ़ सकती है, और यह अनियंत्रित सूजन का कारण बन सकती है [41]। आमतौर पर, इन बीमारियों को नियंत्रित करने के लिए स्टेरॉयड जैसी सूजन-रोधी दवाओं का उपयोग किया जाता है; हालाँकि, दवाओं के साथ कई दुष्प्रभाव भी होते हैं। प्रोबायोटिक्स इन अतिसंवेदनशीलता समस्याओं का प्रतिकार करने के लिए सुरक्षित विकल्पों में से एक है क्योंकि लाभकारी बैक्टीरिया में उत्कृष्ट सूजन-रोधी गुण होते हैं।

प्र. 5। निष्कर्ष

संक्षेप में, किण्वित तिथियों से अलग किए गए लैक्टोबैसिलस उपभेदों से पता चला कि सभी तीन उपभेद, KAU001, KAU002, और KAU003 जीआई पथ में जीवित रह सकते हैं और आंतों के म्यूकोसा से चिपक सकते हैं। उपभेद KAU001 और KAU002 चयापचय स्वास्थ्य और अतिसंवेदनशीलता प्रतिक्रियाओं के पहलू में एक महत्वपूर्ण स्वास्थ्य-संवर्धन प्रभाव वाले संभावित प्रोबायोटिक्स थे, जो कि एंटी-ऑक्सीडेशन प्रभाव डालने की क्षमता, -ग्लूकोसिडेज़ गतिविधि का निषेध, और कोलेस्ट्रॉल कम करने और एक एंटी-ऑक्सीडेशन प्रभाव डालने की क्षमता के कारण थे। -भड़काऊ प्रभाव. खाद्य और डेयरी उद्योग में आगे लक्षण वर्णन और व्यावसायीकरण के लिए इन पौधे-आधारित उपभेदों पर विचार किया जाना चाहिए

लेखक का योगदान:संकल्पना, आईएआर; कार्यप्रणाली, एएएम, एएफ और एचएमए; सॉफ्टवेयर, एस.-एचवाई और आईएआर; सत्यापन, Y.-HP, IAR और Y.-YH; औपचारिक विश्लेषण, एएएम; जांच, एएएम; संसाधन, AF, HMA, S.-HY, Y.-HP और IAR; डेटा क्यूरेशन, एएएम; लेखन-मूल मसौदा तैयार करना, एएएम, आईएआर और वाई.-वाईएच; लेखन-समीक्षा और संपादन, Y.-HP, Y.-YH और IAR; विज़ुअलाइज़ेशन, वाई.-एचपी; पर्यवेक्षण, आईएआर; परियोजना प्रशासन, एएएम और आईएआर; फंडिंग अधिग्रहण, एएएम और एचएमए सभी लेखकों ने पांडुलिपि के प्रकाशित संस्करण को पढ़ लिया है और उससे सहमत हैं।

अनुदान: इस परियोजना को डीनशिप ऑफ साइंटिफिक रिसर्च (डीएसआर), किंग अब्दुलअज़ीज़ यूनिवर्सिटी, जेद्दा द्वारा अनुदान संख्या (डीएफ-552-130-1441) के तहत वित्त पोषित किया गया था। इसलिए, लेखक कृतज्ञतापूर्वक डीएसआर के तकनीकी और वित्तीय समर्थन को स्वीकार करते हैं।

संस्थागत समीक्षा बोर्ड वक्तव्य:लागू नहीं।

सूचित सहमति वक्तव्य:लागू नहीं।

डेटा उपलब्धता विवरण:उत्पन्न डेटा पांडुलिपि में उद्धृत किया गया है।

हितों का टकराव:ऑथर ने किसी हित संघर्ष की घोषणा नहीं की है।

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【अधिक जानकारी के लिए: david.deng@wecistanche.com / व्हाट्सएप:86 13632399501】