सिस्टैंच की पत्तियों के रासायनिक संघटक

सार: सिस्टांशपत्तियों का लंबे समय से पारंपरिक औषधि के रूप में उपयोग किया जाता रहा हैइलाजइस्कीमिक आघात, एनजाइना, औरउच्च रक्तचापऔर एक स्वस्थ पेय के रूप में औरकॉस्मेटिक के लिएबुढ़ापा विरोधी. इस अध्ययन का उद्देश्य इथेनॉल के अर्क से अधिक से अधिक यौगिकों को अलग करना हैख़ुरमा के पत्ते जैविक रूप से सक्रिय यौगिकों की पहचान करने के लिए। एंटीऑक्सीडेंट प्रभावख़ुरमा पत्तियों के इथेनॉल अर्क से एथिल एसीटेट परत का प्रदर्शन किसके द्वारा किया गया था2,2-डाइफेनिल-1-पिक्रिलहाइड्राज़ाइल (DPPH) परख और ऑनलाइन उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी-2,20 -कैसिनो-बिस (3-एथिलबेनज़ोथियाज़ोलिन-6-सल्फ़ोनिक एसिड) (एचपीएलसी-एबीटीएस) विश्लेषण। एक नया फ्लेवोनोइड,कैम्फेरोल-3-O- -D-2"-कूमारोयलगैलेक्टोसाइड (1), और एक नया प्राकृतिक यौगिक, कैम्फेरोल-3-O- -D-2"-फेरुलॉयलग्लुकोसाइड (3) एथिल एसीटेट परत से 25 पहले के साथ अलग किए गए थेज्ञात यौगिक, सहितचौदह फ्लेवोनोइड्स, एक आयनोन, दो कुमारिन, सात ट्राइटरपीनोइड्स,और एक एसिटोफेनोन। स्पेक्ट्रोमेट्रिक और स्पेक्ट्रोस्कोपिक डेटा की व्याख्या ने उनकी संरचना निर्धारित की. एक ऑनलाइन का उपयोग करके सभी पृथक यौगिकों का तेजी से मूल्यांकन किया गयाएचपीएलसी-एबीटीएसपरख, और इनमें से, यौगिक4–8, 11, 13, 15, और16 स्पष्ट रूप से दिखायाएंटीऑक्सीडेंट प्रभाव.इन यौगिकों की मात्रा {{0}} थी। अर्क का 3–0.65 प्रतिशत।

कीवर्ड:डायोस्पायरोस काकी; ख़ुरमा के पत्ते; फ्लेवोनोइड; एंटीऑक्सिडेंट

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1 परिचय

डायोस्पायरोस काकीथंब। (ख़ुरमा) एबेनेसी के परिवार से संबंधित है और व्यापक रूप से हैकोरिया, चीन और जापान में वितरित। इसके फल को ताजा या सुखाकर खाया जाता है, जबकि पत्तियों मेंइस्केमिक स्ट्रोक, एनजाइना, उच्च रक्तचाप के इलाज के लिए लंबे समय से एक पारंपरिक दवा के रूप में उपयोग किया जाता है,एथेरोस्क्लेरोसिस, और संक्रामक रोग [1]। साथ ही इसकी पत्तियों का उपयोग किया गया हैउनके बुढ़ापा रोधी गुणों और क्षमता के कारण स्वस्थ पेय और सौंदर्य प्रसाधन के रूप मेंकोलेस्ट्रॉल और मेलेनिन संचय को रोकने में मदद [1]। हाल के शोध ने सुझाव दिया हैख़ुरमा के पत्तों के अर्क में जैविक गुणों की एक विस्तृत श्रृंखला होती है,रेडिकल स्कैवेंजिंग, न्यूरोप्रोटेक्शन, थ्रोम्बोसिस इनहिबिशन, एंटी-एथेरोस्क्लेरोसिस सहित,और एलर्जी विरोधी [2–6]। पिछले फाइटोकेमिकल जांच ने सुझाव दिया है कि विभिन्नके प्रकारflavonoidsऔर टेरपेनोइड्स मुख्य घटक हैं [7], और कई टैनिन,नैफ्थोक्विनोन, कूमेरिन, आयनों और फैटी एसिड के बारे में भी बताया गया है [8–12]. प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियां (आरओएस) जैविक प्रणालियों में उत्पादित प्रतिक्रियाशील अणु हैं,और आरओएस के उत्पादन और उन्मूलन के बीच संतुलन सामान्य रूप से अच्छी तरह से नियंत्रित होता हैसेलुलर फिजियोलॉजी [13]। हालाँकि, ROS का अत्यधिक उत्पादन ऑक्सीडेटिव क्षति का कारण बनता है,और बदले में, कैंसर, मधुमेह, और पार्किंसंस सहित उम्र बढ़ने और उम्र से संबंधित बीमारियाँबीमारी [14]। इसलिए, फ्लेवोनोइड्स और फेनोलिक यौगिकों जैसे एंटीऑक्सिडेंट्स की खोज करनाइन बीमारियों के इलाज के लिए एक आशाजनक रणनीति हो सकती है।

जैविक रूप से सक्रिय यौगिकों को खोजने की हमारी सतत परियोजना के हिस्से के रूप में [15], दख़ुरमा से इथेनॉल (EtOH) के अर्क और विलायक विभाजन का एंटीऑक्सीडेटिव प्रभावपत्तियों का मूल्यांकन 2,2-डाइफेनिल-1-पिक्रीलहाइड्राज़ाइल (DPPH) परख और ऑनलाइन उच्च-प्रदर्शन का उपयोग करके किया गया थातरल क्रोमैटोग्राफी-2,20 -कैसिनो-बिस (3-एथिलबेनज़ोथियाज़ोलिन-6-सल्फ़ोनिक एसिड)(एचपीएलसी-एबीटीएस) विश्लेषण। ख़ुरमा के पत्तों पर एक फाइटोकेमिकल अध्ययन ने अलगाव को जन्म दियाएक नए फ्लेवोनोइड का (1), एक नया प्राकृतिक यौगिक (3), और25 पहलेज्ञात यौगिक। स्पेक्ट्रोस्कोपिक और स्पेक्ट्रोमेट्रिक विधियों के अनुप्रयोग ने संरचनाओं की विशेषता बताई. उनके लिए सभी पृथक यौगिकों की तेजी से जांच की गईऑनलाइन एचपीएलसी-एबीटीएस का उपयोग करके एंटीऑक्सीडेटिव प्रभाव। इसके अलावा, का मात्रात्मक विश्लेषणवर्तमान अध्ययन में सभी पृथक यौगिकों का प्रदर्शन किया गया।

2. परिणाम और चर्चा

2.1। ख़ुरमा के पत्तों का एंटीऑक्सीडेंट प्रभाव

ख़ुरमा के पत्तों के इथेनॉल (एटोओएच) निकालने के एंटीऑक्सीडेटिव प्रभाव का मूल्यांकन किया गया थाDPPH के माध्यम से प्रारंभिक स्क्रीनिंग के लिए (चित्र1ए)। 0.125 mg/mL कासत्त ने लगभग 80 प्रतिशत डीपीपीएच मूलक की सफाई की, जबकि 0.025 मिलीग्राम/एमएल एस्कॉर्बिकएसिड रेडिकल का 94 प्रतिशत बना हुआ है। ऑनलाइन एचपीएलसी-एबीटीएस परख तेजी से किया गयाइन परिणामों की विश्वसनीयता सुनिश्चित करें (चित्र1डी)। आंतरिक के रूप में गैलिक एसिड और ट्रॉलॉक्स का उपयोग किया गया थामानकों। 734 एनएम (नकारात्मक शिखर) पर क्रोमैटोग्राम ने सुझाव दिया कि लगभगनौ घटकों में एंटीऑक्सीडेटिव गतिविधियां हो सकती हैं। गैलिक एसिड और ट्रॉलॉक्स (6-हाइड्रॉक्सी- 2, 5,7,8-टेट्रामेथिल क्रोमन-2-कार्बोक्जिलिकएसिड) को सुनिश्चित करने के लिए आंतरिक मानकों के रूप में उपयोग किया गया थापरिणामों की विश्वसनीयता। यह अनुमान लगाया गया था कि इनमें से अधिकांश चोटियाँ फ्लेवोनॉइड डेरिवेटिव थींजैसे कि फ्लेवोनॉइड ग्लाइकोसाइड और फ्लेवनॉल, जो कि किए गए डीरेप्लीकेशन विश्लेषण पर आधारित हैप्रकाशित के साथ यौगिकों के पराबैंगनी (यूवी) और द्रव्यमान स्पेक्ट्रा की तुलना करकेआंकड़े। बायोसे-निर्देशित अंशांकन ने सुझाव दिया कि ये एंटीऑक्सीडेटिव यौगिक थेएथिल एसीटेट (EtOAc) परत में प्रचुर मात्रा में, जबकि पानी (H2O) परत कमजोर दिखाई दीगतिविधि (चित्र1B,C). 

चित्र 1. DPPH सफ़ाई के प्रभाव EtOH के सत्त (A), EtOAc परत (B), और HO परत (C) ख़ुरमा के पत्तों की HhO परत: (D) EtOH सत्त के ऑनलाइन ABTS-HPLC क्रोमैटोग्राम।

2.2। फाइटोकेमिकल जांच

इन एंटीऑक्सीडेटिव यौगिकों की पहचान करने के लिए विभिन्न क्रोमैटोग्राफिक और स्पेक्ट्रोस्कोपिकके अलगाव और संरचनात्मक लक्षण वर्णन के लिए तरीके किए गएयौगिक। एक नया फ्लेवोनोइड (1) और एक नया प्राकृतिक यौगिक (3) से प्राप्त किया गया थाइथेनॉल निकालने की एथिल एसीटेट परत, पहले बताए गए 25 यौगिकों के साथ,अर्थात् कैम्फेरोल -3-O- -2"-कूमारोयलग्लुकोसाइड (2) [16], (प्लस)-केटचिन (4) [17], हाइपरोसाइड(5) [17], आइसोक्वेरसिट्रिन (6) [18], क्वेरसेटिन-3-O- -2"-गैलॉयलगैलेक्टोसाइड (7) [19], क्वेरसेटिन-3-O- -2"-galloylglucoside (8) [20], ट्राइफोलिन (9) [18], एस्ट्रागैलिन (10) [18], कैम्फेरोल-3-O- - 2"-गैलॉयलगैलेक्टोसाइड (11) [21], कैम्फेरोल-3-O- -अरबिनोसाइड (12) [22], कैम्फेरोल-3-O- - 2 "-galloylglucoside (13) [23], क्वेरसेटिन-3-O- -2"-कूमारोयलग्लुकोसाइड (14) [24], क्वेरसेटिन(15) [15], केम्फेरोल (16) [25], (6S,9S)-रोजोसाइड (17) [26], स्कोपोलेटिन (18) [27], अम्बलीफेरोन(19) [28], 1-(2,4-डायहाइड्रॉक्सी-6-मिथाइलफिनाइल)एथेनोन (20) [29], बार्बिनर्विक एसिड (21) [30], डायोस्पायरिक एसिड बी (22) [7], रोटुन्जेनिक एसिड (23) [31], पॉमोलिक एसिड (24) [32], सियारेसिनोलिक एसिड(25) [33], ओलीनोलिक एसिड (26) [25], और उर्सोलिक एसिड (27) [25] स्पेक्ट्रोस्कोपिक और का उपयोग करकेस्पेक्ट्रोमेट्रिक और भौतिक डेटा प्रकाशित डेटा की तुलना में और पतले के साथ भीपरत क्रोमैटोग्राफी (टीएलसी) विश्लेषण (आंकड़े2 और3). इनमें यौगिक हैं2, 16, 17, 19, 20, और24 से सबसे पहले आइसोलेट किए गए थेडी काकी. 

यौगिक 1 को एक पीले पाउडर के रूप में प्राप्त किया गया था, जिसमें उच्च-रिज़ॉल्यूशन मास स्पेक्ट्रोमेट्री (HRMS) डेटा के आधार पर आणविक सूत्र C3olO3 के रूप में स्थापित किया गया था। स्पेक्ट्रम ने 207 और 315 एनएम पर अवशोषण बैंड प्रदर्शित किया, यह दर्शाता है कि यौगिक1 में फ्लेवोनोल बैकबोन था। 'एच परमाणु चुंबकीय अनुनाद (एनएमआर) डेटा (तालिका 1 चित्रा एस 1) ने एए'बीबी' प्रकार के संकेतों के दो सेट दिखाते हुए कुमारोयलेटेड फ्लेवोनोल ग्लाइकोसाइड का एक विशिष्ट पैटर्न दिखाया ({{1 0}}। {{11 }} (2 एच, डी, जे=8। 5 हर्ट्ज, एच -2' और एच -6), 6.87 (2 एच, डी, जे {{2 0}}} .5 HzH-3' और H-5')) कैम्फेरोल के B रिंग में और साथ ही सिग्नल (0 7.45 (2H, d, J=8)। 5 HzH-2 और H{{3{{104}}}}"), 6.81 (2H, d, J=8.5 Hz, H-3 और H-5 प्रतिशत ) कौमारोयल समूह के सुगन्धित वलय में। दो दोहरे संकेत (8H 7.65 (1H, d, J=15.5 Hz, H-7"") और 6.35 (1Hd, J=16। 0 Hz, H-8") देखे गए, जो देश समूह के ट्रांस-ओलेफिनिक प्रोटॉन का संकेत देते हैं। इसके अतिरिक्त, एक एनोमेरिक प्रोटॉन सिग्नल (0H 5.57 (1H, डी, जे=8.0 हर्ट्ज, एच -1) चीनी क्षेत्र में देखा गया था, जो बी-कॉन्फ़िगरेटेड चक्रीय चीनी समूह की उपस्थिति का सुझाव देता है। ध्रुवीकरण हस्तांतरण एनएमआर डेटा द्वारा 13 सी और विरूपण रहित वृद्धि (योग्य 1 चित्रा S2) ने 30 अनुनादों को दिखाया जिसमें दो ट्रांस-ओलेफिनिक कार्बन, दस सुगंधित कार्बन, और छह ग्लूकोसाइल मौएट कार्बन, और दो कार्बोनिल कार्बन सहित दस गैर-प्रोटोनेटेड कार्बन शामिल हैं। विशेष रूप से, C -2, C -3, और C -4 (8c 158.1, 134.9 और 179.2) पर रासायनिक बदलाव फ्लेवोनोल 3-0- ग्लाइकोसाइड के विशिष्ट संकेत थे। इसके अतिरिक्त, C-1" (8c 168.7) पर कार्बोनिल कार्बन सिग्नल और C-2'" और C-3"(6 146.9 पर दो ट्रांस-ओलेफिनिक कार्बन सिग्नल , 115.2) Coumaroyl समूह के विशिष्ट रासायनिक बदलाव थे। C -1 (6C 100.4) पर एनोमेरिक कार्बन सिग्नल और C -2" से C -6" तक ग्लाइकोसिल मौएटिटी के लिए अन्य संकेत। ' (6c74.3, 73.4, 70.5, 77.4, और 62.0) देखे गए। ये एक-आयामी (1डी) एनएमआर डेटा कैम्फेरोल-3-0-बी-2"-कौमारोयलग्लुकोसाइड (2) (16]। हालांकि, दो यौगिकों के बीच 13 सी एनएमआर डेटा की सावधानीपूर्वक तुलना ने सुझाव दिया कि यौगिक 1 में गैलेक्टोज की मात्रा थी, जिसे आगे चलकर न्यूक्लियरऑवरहाउसर एन्हांसमेंट स्पेक्ट्रोस्कोपी (एनओईएसवाई) एनएमआर डेटा (चित्रा एस 6) द्वारा प्रदर्शित किया गया था। जबकि एनओईएस सहसंबंध के बीच यौगिक 2 में H -2 और H -4 देखे गए, यौगिक 1 में इन प्रोटॉनों के बीच कोई संबंध नहीं था। सामान्य तौर पर, 13C NMR और NOESYNMR डेटा की व्याख्या ग्लाइकोसिल मौएटिटी के प्रकार को निर्धारित करने के लिए एक प्रभावी तरीका है। सी -2 और सी -4 की डाउनफील्ड शिफ्ट के अनुसार गैलेक्टोज मौएटिटी का स्थान सी -3 पर घटाया गया था, जैसा कि हेटेरोन्यूक्लियर मल्टीपल बॉन्ड सहसंबंध (एचएमबीबीबीन एच {) द्वारा आगे प्रमाणित किया गया था। {123}}" और C-3 (चित्र S5)। डाउनफील्ड शिफ्ट (0 5.36 (1H, dd, J=10.0, 8.0 Hz, H{) के आधार पर Coumaroyl समूह की स्थिति C-2" पर प्रदर्शित की गई थी। {134}}")) और H-2' और C-1 के बीच HMBC सहसंबंध। परिणामस्वरूप, यौगिक 1 की संरचना काएम्फेरोल -3-0-बी -2"-कोउमारोइलगैलेक्टोसाइड के रूप में निर्धारित की गई थी। हालांकि यौगिक 2 को पहले विभिन्न स्रोतों से अलग किया गया था, जिसमें ओएर्कस सबर (16] और एलियमपोरम (34) शामिल थे, यौगिक 1 को पहली बार पृथक और संरचनात्मक रूप से चित्रित किया गया था।

मिश्रण3 एक पीले पाउडर के रूप में अलग किया गया था, और आणविक सूत्र स्थापित किया गया थासी के रूप में31H28O14 HRMS डेटा का विश्लेषण करके। यूवी स्पेक्ट्रम ने यूवी दिखायायौगिकों के साथ एक ही एग्लीकोन के कारण 210 और 327 एनएम पर अवशोषण1 और2.1H एनएमआर डेटा (तालिका1, चित्र S10) यौगिक के समान थे2, लेकिन यौगिक3 Coumaroyl समूह के बजाय एक feruloyl समूह था, जैसा कि एक की उपस्थिति से प्रमाणित हैअतिरिक्त मेथॉक्सी समूह (δH 3.91 (3H, s, 3000 -ओसीएच3)). इसके अतिरिक्त, एक विसंगतिपूर्ण प्रोटॉनसंकेत (δH 5.64 (1H, d, J {{0}}.0 हर्ट्ज, एच-100 )) देखा गया था, जो दर्शाता है कि ग्लाइकोसिल लिंकेजएक था-विन्यास, और डाउनफील्ड-शिफ्ट सिग्नल (5.03 (1H, t,J = 8.5 हर्ट्ज, एच-200 )) यौगिक के रूप में, चीनी क्षेत्र में दिखाया गया था1.13सी एनएमआर डेटा (तालिका1, आकृतिS11) ने 31 अनुनाद दिखाए जिनमें दो शामिल थेट्रांस-ओलेफिनिक कार्बन, दस क्वाटरनरी कार्बन,दस सुगन्धित कार्बन, छह ग्लूकोसाइल आधा कार्बन, और एक मेथॉक्सी कार्बन, और दस गैर-प्रोटोनेटेडकार्बन, कैम्फेरोल, फेरुलॉयल, के अनुरूप दो कार्बोनिल कार्बन सहितऔर ग्लूकोज समूह। विशेष रूप से, कार्बन C-2 से संकेत करता है00 सी के लिए -600 (δC 75.8, 76.3, 71.5, 78.8 और 62.5) ने ग्लूकोज की मात्रा की उपस्थिति का सुझाव दिया। ग्लूकोज की मात्रा के स्थानऔर फेरुलॉयल समूह को एच -1 के बीच लंबी दूरी के एचएमबीसी सहसंबंधों द्वारा निर्दिष्ट किया गया था।00 औरC-3 (δC 134.8) और एच -200 और सी-1000 (δC 168.4) (चित्र S14)। एक अतिरिक्त की स्थितिमेथॉक्सी समूह 3 के बीच प्रमुख सहसंबंध द्वारा निर्धारित किया गया था000 -ओसीएच3 और सी-3000 (δC 149.4)। उपरोक्त परिणामों ने यौगिक की संरचना का सुझाव दिया3 कैम्फेरोल के रूप में-3-O- - 2"-फेरुलॉयल ग्लूकोसाइड। हमारे सर्वोत्तम ज्ञान के लिए, यौगिक3 केवल एक के रूप में रिपोर्ट किया गया था3- के हाइड्रोलिसिस का उत्पादO- -(2-O-फेरुलॉयल)-ग्लूकोसिल -7,40 -डि-ओ- -ग्लूकोसिल कैम्फेरोल, से अलग थलगएलियम ट्यूबरोसम[35]। इसलिए, की संरचना3 एक नए के रूप में व्याख्या की गई थीप्राकृतिक यौगिक।

मिश्रण11 पीले पाउडर के रूप में अलग किया गया था।1एच एनएमआर डेटा (चित्रा S19)एए का एक सेट प्रदर्शित किया0 बी बी0 -टाइप सिग्नल (δH 8.06 (2H, d, J {{0}}.0 हर्ट्ज, एच-20 , H-60 ), 6.87 (2H, d, J {{0}}.0 हर्ट्ज, H-30, H-50 )) कैम्फेरोल के बी रिंग में और एक सिंगलेट सिग्नल परδH 7.02 (2H, s, H-3000 , H-7000 ) सुगन्धित क्षेत्र में एक गैलॉयल अंश का, जो एक विशिष्ट संकेत हैआवंटित फ्लेवोनॉल का। एक एनोमेरिक प्रोटॉन सिग्नल (δH 5.78 (1H, d, J {{0}}.0 हर्ट्ज, एच-100 )) संकेत दिया कि ग्लाइकोसिल लिंकेज ए था-विन्यास. इसके अलावा, एक डाउनफ़ील्डशिफ्ट प्रोटॉन सिग्नल (5.27 (1H, t,J = 9.5 हर्ट्ज, एच-200 )) ने सुझाव दिया कि गैलॉयल समूहC-2 के हाइड्रॉक्सिल समूह से जुड़ा था00 क्योंकि इस बदलाव को जिम्मेदार ठहराया जा सकता हैका अनिसोट्रोपिक प्रभावO-गैलॉयल मोएटिटी [21]।13सी एनएमआर डेटा (चित्रा S20)आवंटित फ्लेवोनॉल ग्लाइकोसाइड का संकेत देते हुए 26 अनुनाद प्रदर्शित किए। कार्बन संकेत करता हैसी से-200 सी के लिए -600 (δC 71.1, 72.7, 68.2, 76.0, और 60.1) ने गैलेक्टोज की उपस्थिति का सुझाव दियाआधा भाग। इसलिए, यौगिक की संरचना11 कैम्फेरोल-3- के रूप में पुष्टि की गई थीO- -200 - गैलॉयलगैलेक्टोसाइड. हालांकि यौगिक11 पहले विभिन्न स्रोतों से पृथक किया गया था,शामिलडी काकी[21,36], केवल1एच एनएमआर और एमएस डेटा पहले बताए गए थे। इस प्रकार,13इस अध्ययन में पहली बार सी एनएमआर डेटा रिपोर्ट किया गया था

2.3। पृथक यौगिकों की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधियां

रैपिड ऑन का उपयोग करके सभी पृथक यौगिकों को उनके एंटीऑक्सीडेटिव प्रभावों के लिए मूल्यांकन किया गया थालाइन एचपीएलसी-एबीटीएस विश्लेषण यह निर्धारित करने के लिए कि कौन से यौगिकों ने एंटीऑक्सीडेटिव में योगदान दियाख़ुरमा के पत्तों का प्रभाव। यौगिकों4–8, 11, 13, 15, और16 शक्तिशाली एंटीऑक्स दिखायाविचारात्मक गतिविधियाँ (चित्र4). इनमें से अधिकांश यौगिक केम्फेरोल और क्वेरसेटिन थेडेरिवेटिव, लेकिन कुछ डेरिवेटिव (1–3, 9, 10, 12, और14) गतिविधियों को नहीं दिखाया।संरचना-गतिविधि संबंध पूरी तरह से निर्धारित नहीं था लेकिन आंशिक रूप से प्रकट हुआ था। मेंविशेष रूप से, क्वेरसेटिन और काएम्फेरोल गैलॉयल मोएटीज के साथ (7, 8, 11, और13) पाए गएशक्तिशाली गतिविधियाँ होती हैं, लेकिन वे जो कौमारोयल या फेरुलॉयल मोएटीज़ के साथ होती हैं (1–3 और16) नहीं कियाकोई गतिविधि दिखाएं।

चित्रा 4।पृथक यौगिकों की कट्टरपंथी मैला ढोने की गतिविधियाँ (4–8, 11, 13, 15, और16) का मूल्यांकन ऑनलाइन द्वारा किया गया थाएचपीएलसी-एबीटीएस परख।

2.4। पृथक यौगिकों का मात्रात्मक विश्लेषण

EtOAc-घुलनशील अर्क में सभी पृथक यौगिकों का मात्रात्मक विश्लेषणयह पुष्टि करने के लिए किया गया था कि ख़ुरमा के पत्तों के एंटीऑक्सीडेटिव प्रभाव हो सकते हैंइन सक्रिय यौगिकों के कारण होता है। डायोड एरे डिटेक्शन के साथ एक विशिष्ट एचपीएलसी विधि औरबाष्पीकरणीय प्रकाश बिखरने वाले डिटेक्टर को एक साथ निर्धारण के लिए विकसित किया गया था27 यौगिकों में से। सभी पृथक ट्राइटरपीनोइड्स की सामग्री लगभग 5.9 प्रतिशत थीअर्क, और इनमें से सायरेसिनोलिक एसिड (25), ओलीनोलिक एसिड (26), और उर्सोलिकएसिड (27) एक महत्वपूर्ण हिस्से के लिए जिम्मेदार है, जैसा कि पिछले अध्ययनों में बताया गया है [7]।फ्लेवोनोइड्स की सामग्री लगभग 5.4 प्रतिशत थी, और इनमें से, सक्रिय यौगिकों की3.2 प्रतिशत थे (तालिका2). विशेष रूप से, कैम्फेरोल-3- की सामग्रीO- -200 -गैलॉयलगैलेक्टोसाइड(9), कैम्फेरोल-3-O- -2"-galloylglucoside (10), आइसोक्वेरसिट्रिन (13), और क्वेरसेटिन-3-O- -2"- गैलॉयलग्लुकोसाइड (15) 0.3 प्रतिशत से अधिक थे। विश्लेषणात्मक विधि का उपयोग करके सत्यापित किया गया थाविधि की प्रासंगिकता सुनिश्चित करने के लिए सरल सत्यापन प्रक्रिया, जो पर्याप्त दिखाई देती हैविशिष्टता, रैखिकता, सटीकता और सटीकता।

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