एक वानस्पतिक त्वचा देखभाल सामग्री चुनने में एक आकर्षक पौधे की कहानी ढूंढने से कहीं अधिक शामिल होना चाहिए। त्वचा देखभाल ब्रांड, अनुबंध निर्माता, या घटक वितरक के लिए, अधिक उपयोगी प्रश्न हैं:

अर्क में कौन से यौगिक मौजूद हैं?

निर्माता अपनी सांद्रता को कितनी लगातार नियंत्रित कर सकता है?

कौन से प्रयोग प्रस्तावित अनुप्रयोग का समर्थन करते हैं?

क्या साक्ष्य खरीदी जा रही वास्तविक सामग्री पर लागू होता है?

किसी तैयार उत्पाद को लॉन्च करने से पहले किस अतिरिक्त परीक्षण की आवश्यकता है?

इस आलेख में जांचे गए तकनीकी दस्तावेज़ पर ध्यान केंद्रित किया गया हैसिस्टैंच से प्राप्त वर्बास्कोसाइडऔर त्वचा-लिपिड उत्पादन, जलयोजन और बाधा-संबंधी अनुसंधान में इसके प्रस्तावित अनुप्रयोग।

यह शुद्धिकरण प्रक्रिया और प्रयोगशाला प्रयोगों दोनों का वर्णन करता है, जिसमें शुद्ध किए गए वर्बास्कोसाइड की तुलना कई सिस्टैंच अर्क और अन्य अवयवों से की जाती है।

 

 

16% वर्बास्कोसाइड सिस्टैंच अर्क

केंद्रीय वाणिज्यिक पाठ सीधा है: एक सामान्य सिस्टैंच अर्क और एक अत्यधिक शुद्ध सिस्टैंच-व्युत्पन्न यौगिक को विनिमेय सामग्री के रूप में नहीं माना जाना चाहिए।

साक्ष्य नोट:नीचे दिए गए शोध निष्कर्ष अनुवाद के लिए आपूर्ति किए गए चीनी पेटेंट पाठ में बताए गए हैं। आपूर्ति की गई सामग्री में मूल आंकड़े, संपूर्ण संख्यात्मक डेटासेट, पेटेंट प्रकाशन विवरण या मानव नैदानिक ​​​​अध्ययन शामिल नहीं हैं। इसलिए इसे तकनीकी प्रकटीकरण के रूप में पढ़ा जाना चाहिए, न कि तैयार उत्पाद की प्रभावकारिता या नियामक अनुमोदन की स्वतंत्र पुष्टि के रूप में।

 

1. वर्बस्कोसाइड क्या है?

वर्बास्कोसाइड के नाम से भी जाना जाता हैacteoside. ये दो अलग-अलग सक्रिय अवयवों के बजाय एक ही रासायनिक पदार्थ के नाम हैं। एफडीए पदार्थ रजिस्ट्री दोनों नामों को एक ही पदार्थ पहचान के तहत सूचीबद्ध करती है। (सटीक.fda.gov)

 

 

आपूर्ति किए गए प्रकटीकरण में, वर्बास्कोसाइड को सिस्टैंच प्रजाति के सूखे मांसल तनों से प्राप्त फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड के रूप में वर्णित किया गया है। नामित प्रमुख वनस्पति स्रोत हैं:

सिस्टैंच डेजर्टिकोला

सिस्टैंच ट्यूबुलोसा

सिस्टैंच साइनेंसिस

सिस्टैंच साल्सा

दस्तावेज़ लिपिड चयापचय, हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन, टाइट-जंक्शन प्रोटीन और सेल माइग्रेशन पर विशेष ध्यान देने के साथ, सामयिक फॉर्मूलेशन के लिए संभावित वनस्पति सक्रिय के रूप में वर्बास्कोसाइड की जांच करता है।

सामग्री खरीदते समय नाम क्यों मायने रखता है?

आपूर्तिकर्ता कोटेशन की तुलना करते समय, इसकी पुष्टि का अनुरोध करें:

वानस्पतिक प्रजातियाँ और पौधे का भाग।

क्या सामग्री संपूर्ण अर्क, मानकीकृत अर्क, या शुद्ध यौगिक है।

मापी गई वर्बास्कोसाइड सामग्री।

विश्लेषणात्मक पद्धति और संदर्भ मानक का उपयोग किया गया।

क्या बताया गया प्रतिशत द्रव्यमान या क्रोमैटोग्राफ़िक क्षेत्र प्रतिशत द्वारा परख का प्रतिनिधित्व करता है।

अकेले "सिस्टैन्च अर्क" का उद्धरण यह निर्धारित करने के लिए पर्याप्त जानकारी प्रदान नहीं करता है कि यह किसी विशेष प्रयोग में मूल्यांकन की गई सामग्री से मेल खाता है या नहीं।

2. प्रकटीकरण त्वचा बाधा पर ध्यान केंद्रित क्यों करता है?

दस्तावेज़ एक साधारण सतह-नमीकरण दावे के बजाय एक बहु-समाप्ति बिंदु अनुसंधान अवधारणा प्रस्तुत करता है।

इसका प्रस्तावित क्रम है:

एपिडर्मल सेल नवीनीकरण → मजबूत सेल-टू-सेल कनेक्शन → लिपिड सपोर्ट → हायल्यूरोनिक एसिड उत्पादन → मरम्मत-संबंधी गतिविधि

इस अवधारणा की जांच करने के लिए, शोधकर्ताओं ने HaCaT कोशिकाओं का उपयोग किया। HaCaT एक अमर मानव केराटिनोसाइट सेल लाइन है जिसे एपिडर्मल जीव विज्ञान और केराटिनाइजेशन के अध्ययन के लिए एक प्रयोगशाला मॉडल के रूप में स्थापित किया गया है। यह किसी व्यक्ति की त्वचा के भीतर स्वाभाविक रूप से "HaCaT" नामक कोशिका प्रकार नहीं है। (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)

घटक खरीदारों के लिए, यह अंतर मायने रखता है:संवर्धित कोशिकाओं में परिणाम एक शोध प्रारंभिक बिंदु हैं, न कि मानव त्वचा पर तैयार उत्पाद के परीक्षण का विकल्प।

रिपोर्ट किए गए मुख्य समापन बिंदु

अनुसंधान क्षेत्र	आपूर्ति किए गए दस्तावेज़ में वर्णित माप	व्यावहारिक व्याख्या
सेल प्रतिक्रिया	CCK-8 परख	एक स्क्रीनिंग समापन बिंदु; अतिरिक्त तरीके प्रसार के दावे को मजबूत करेंगे
लिपिड से संबंधित गतिविधि	फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि; ACC, FASN, और N-SMase अभिव्यक्ति	लिपिड चयापचय की आगे की जांच का समर्थन करता है, लेकिन सीधे तौर पर संपूर्ण त्वचा-अवरोधक लिपिड प्रोफ़ाइल की मात्रा निर्धारित नहीं करता है
हाईऐल्युरोनिक एसिड	हा सामग्री; HAS2, HAS3, और CD44 अभिव्यक्ति	एचए-संबंधित मार्गों की आगे की जांच का समर्थन करता है
सेल-टू-सेल कनेक्शन	क्लाउडिन-1 और ऑक्लूडिन स्तर	पूर्ण अवरोध कार्य के बजाय चयनित टाइट-जंक्शन प्रोटीन को मापता है
मरम्मत संबंधी गतिविधि	सेल स्क्रैच परख	इन विट्रो गैप-क्लोज़र एंडपॉइंट, क्लिनिकल घाव-हीलिंग परीक्षण नहीं
नमी बनाए रखना	कांच की प्लेटों पर बड़े पैमाने पर प्रतिधारण तैयार करना	एक फॉर्मूलेशन-स्तरीय प्रयोगशाला परीक्षण, त्वचा पर जलयोजन अध्ययन नहीं

ये व्याख्याएँ आपूर्ति किए गए पाठ में वर्णित प्रयोगात्मक तरीकों से अनुसरण करती हैं।

 

3. यह शोध त्वचा देखभाल व्यवसायों के लिए क्या उपयोगी बनाता है?

प्रकटीकरण में यह मानने के बजाय कई सामग्रियों की तुलना की गई है कि प्रत्येक सिस्टैंच-व्युत्पन्न घटक समान प्रतिक्रिया उत्पन्न करता है।

परीक्षण की गई सामग्रियों में शामिल हैं:

एक सिस्टैंच पॉलीसेकेराइड अर्क।

कई फेनिलएथेनॉइड-ग्लाइकोसाइड-युक्त अर्क।

कुल फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड अर्क।

इचिनाकोसाइड।

शुद्ध वर्बास्कोसाइड।

आपूर्ति किए गए दस्तावेज़ के अनुसार, शुद्ध वर्बास्कोसाइड ने कई मापे गए समापन बिंदुओं पर गतिविधि दिखाई। कुछ मिश्रित अर्क ने कुछ परीक्षणों में सक्रियता दिखाई लेकिन अन्य में नहीं।

क्रय टेकअवे

वह विशिष्टता खरीदें जो आपके विकास उद्देश्य से मेल खाती हो-केवल पौधे के नाम से नहीं।

उदाहरण के लिए:

यदि आपका प्रोजेक्ट शुद्ध-वर्बास्कोसाइड प्रयोगों पर आधारित है, तो शुद्ध सामग्री के लिए डेटा का अनुरोध करें।

यदि आपका सूत्रीकरण एक मानकीकृत संपूर्ण अर्क का उपयोग करता है, तो उस अर्क पर परीक्षण का अनुरोध करें।

यदि कोई आपूर्तिकर्ता किसी अन्य निष्कर्षण प्रक्रिया पर शोध का हवाला देता है, तो पूछें कि क्या परीक्षण की गई संरचना पेश की जा रही सामग्री से तुलनीय है।

एक घटक ग्रेड के साक्ष्य को स्वचालित रूप से दूसरे में स्थानांतरित नहीं किया जाना चाहिए।

4. प्रकटीकरण में वर्बस्कोसाइड कैसे तैयार किया जाता है?

वर्णित प्रक्रिया के चार मुख्य चरण हैं:

वानस्पतिक तैयारी:सूखे सिस्तांचे के मांसल तनों को पहले से उपचारित करें और पीस लें।

निष्कर्षण:50%-80% जलीय इथेनॉल का प्रयोग करें।

संवर्धन:AB-8 मैक्रोपोरस सोखना राल का उपयोग करके अंशों को अलग करें।

शुद्धिकरण:सिलिका-जेल क्रोमैटोग्राफी का उपयोग करें, इसके बाद एकाग्रता और फ्रीज-सुखाने का उपयोग करें।

बताई गई अंतिम शुद्धता हैकम से कम 98%, हालांकि आपूर्ति किए गए पाठ में उस विनिर्देश की स्वतंत्र रूप से पुष्टि करने के लिए आवश्यक विश्लेषणात्मक सत्यापन या बैच डेटा शामिल नहीं है।

एक महत्वपूर्ण विनिर्माण प्रश्न: अवशिष्ट सॉल्वैंट्स

प्रकट क्रोमैटोग्राफी चरण का उपयोग करता हैक्लोरोफॉर्म और मेथनॉल.

एक वाणिज्यिक सोर्सिंग परियोजना के लिए, निर्माता से वास्तविक उत्पादन विलायक सूची, विलायक-निष्कासन नियंत्रण और बैच-विशिष्ट अवशिष्ट-विलायक परिणाम के बारे में पूछें। ICH Q3C अवशिष्ट-विलायक जोखिमों के मूल्यांकन के लिए एक फार्मास्युटिकल ढांचा प्रदान करता है; इसे सार्वभौमिक कॉस्मेटिक स्वीकृति मानक के रूप में प्रस्तुत नहीं किया जाना चाहिए। (ema.europa.eu)

यह मत समझिए कि "पौधे से प्राप्त" का अर्थ "केवल पानी और इथेनॉल से बना" है।

 

5. नमी-धारण परीक्षण वास्तव में क्या दिखाता है?

आपूर्ति किया गया दस्तावेज़ इसकी तुलना का वर्णन करता है:

एक सीरम युक्त2% वर्बास्कोसाइड.

एक सीरम युक्त2% इचिनाकोसाइड.

एक सकारात्मक-नियंत्रण सीरम युक्त5% ग्लिसरीन.

नमूने यहां रखे गए थे25 डिग्री और 50% सापेक्ष आर्द्रता, और उनका द्रव्यमान समय के साथ मापा गया।

प्रकटीकरण रिपोर्ट में कहा गया है कि वर्बास्कोसाइड युक्त नमूने ने इन परिस्थितियों में अधिक द्रव्यमान बनाए रखा।

यह एक संभावित रूप से उपयोगी फॉर्मूलेशन-स्क्रीनिंग अवलोकन है। हालाँकि, वर्णित विधि स्थापित नहीं करती है:

मानव त्वचा पर बेहतर जलयोजन।

ट्रांसएपिडर्मल पानी की कमी कम।

ग्लिसरीन पर नैदानिक ​​श्रेष्ठता.

हर फॉर्मूलेशन में बेहतर प्रदर्शन.

देखा गया अंतर केवल नामित सक्रिय से उत्पन्न हुआ, पूरी तरह से मिलान किए गए वाहन तुलना के बिना।

तुलनात्मक दावे की योजना बनाने वाले ब्रांड के लिए, उचित रूप से डिज़ाइन किए गए अध्ययन का उपयोग करके तैयार फॉर्मूलेशन का परीक्षण करें।

 

6. एक व्यावहारिक सिस्टैंच संघटक सोर्सिंग चेकलिस्ट

सिस्टैंच अर्क आपूर्तिकर्ता या शुद्ध वर्बस्कोसाइड निर्माता का मूल्यांकन करते समय निम्नलिखित प्रश्नों का उपयोग करें।

क्रय प्रश्न	अनुरोध करने के लिए दस्तावेज़ीकरण
वानस्पतिक स्रोत क्या है?	प्रजाति की पहचान, पौधे-भाग की घोषणा, और पता लगाने की क्षमता की जानकारी
वास्तव में क्या आपूर्ति की जा रही है?	जहां लागू हो, वाहक, प्रसंस्करण सहायता और सहायक सामग्री सहित पूर्ण संरचना
वर्बास्कोसाइड कितना मौजूद है?	विश्लेषण और परख विधि का बैच-विशिष्ट प्रमाणपत्र
पहचान की पुष्टि कैसे की जाती है?	क्रोमैटोग्राफ़िक पहचान और संदर्भ-मानक जानकारी
कौन से सॉल्वैंट्स का उपयोग किया जाता है?	वास्तविक विनिर्माण विलायक घोषणा और अवशिष्ट-विलायक परीक्षण परिणाम
उत्पादन कितना सुसंगत है?	एकाधिक बैचों से प्रतिनिधि परिणाम
क्या सामग्री इच्छित उपयोग के लिए उपयुक्त है?	इच्छित उपयोग दस्तावेज और एक उपयुक्त सुरक्षा डोजियर
क्या यह चयनित फॉर्मूले में काम करेगा?	घुलनशीलता, अनुकूलता, स्थिरता और पैकेजिंग-विकास डेटा
प्रस्तावित दावों का क्या समर्थन करता है?	समान घटक ग्रेड और, अधिमानतः, तैयार फॉर्मूलेशन के लिए अध्ययन रिपोर्ट

 

सुरक्षा निष्कर्ष के रूप में "प्राकृतिक" का प्रयोग न करें

आपूर्ति किया गया पेटेंट पाठ घटक की वानस्पतिक उत्पत्ति के आधार पर एक अनुकूल सुरक्षा कथन देता है। उस कथन को व्यावसायिक प्रकाशन के लिए योग्यता की आवश्यकता होती है।

एफडीए बताता है कि किसी घटक का स्रोत उसकी सुरक्षा निर्धारित नहीं करता है: पौधों से प्राप्त सामग्रियों में जहरीले या एलर्जी पैदा करने वाले पदार्थ भी हो सकते हैं। उपयोग की इच्छित शर्तों के लिए सुरक्षा का मूल्यांकन किया जाना चाहिए। (fda.gov)

इस कारण से, अकेले आश्वासन के रूप में "प्राकृतिक," "हर्बल," या "उच्च शुद्धता" पर भरोसा करने के बजाय सुरक्षा प्रमाणन का अनुरोध करें।

 

7. किसी ब्रांड को शोध पर कैसे चर्चा करनी चाहिए?

तीन परतें अलग रखें:

खुलासे में क्या दावा है.

रिपोर्ट किए गए प्रयोगों ने क्या मापा।

तैयार उत्पाद को क्या करना दिखाया गया है।

उदाहरण के लिए, "लिपिड-संबंधित गतिविधि के लिए HaCaT कोशिकाओं में जांच" भौतिक रूप से "त्वचा की बाधा को ठीक करने के लिए चिकित्सकीय रूप से सिद्ध" से भिन्न है।

इसी तरह, एक्जिमा के इलाज, एटोपिक जिल्द की सूजन के प्रबंधन, या घावों को ठीक करने के संदर्भों को सीधे सामान्य कॉस्मेटिक उत्पाद दावों में कॉपी नहीं किया जाना चाहिए। संयुक्त राज्य अमेरिका में, बीमारी का इलाज करने या शरीर की संरचना या कार्य को प्रभावित करने के दावों के कारण किसी उत्पाद को दवा के रूप में विनियमित किया जा सकता है। (fda.gov)

एक शोध लेख या पेटेंट संदर्भ, अपने आप में, चिकित्सीय विपणन दावा करने की अनुमति नहीं है।

8. अनुशंसित विकास पथ

सिस्टैंच-व्युत्पन्न वर्बस्कोसाइड पर विचार करने वाले व्यवसाय के लिए, एक उपयोगी विकास क्रम है:

इच्छित उत्पाद श्रेणी और लक्ष्य बाज़ार को परिभाषित करें।

घटक ग्रेड और विश्लेषणात्मक विशिष्टता का चयन करें।

संरचना, संदूषक, अवशिष्ट सॉल्वैंट्स और सुरक्षा दस्तावेज़ीकरण की समीक्षा करें।

एक प्रोटोटाइप विकसित करें और घटक अनुकूलता का आकलन करें।

फॉर्मूलेशन और पैकेजिंग स्थिरता का मूल्यांकन करें।

उचित सूक्ष्मजीवविज्ञानी और सुरक्षा मूल्यांकन करें।

इच्छित प्रदर्शन दावों के विरुद्ध तैयार उत्पाद का परीक्षण करें।

लॉन्च से पहले अंतिम वेबसाइट, लेबल और विज्ञापन भाषा की समीक्षा करें।

प्रकटीकरण में एकाग्रता सीमा-0.01%–5.0%-इसे एक प्रकट सीमा के रूप में माना जाना चाहिए, न कि सार्वभौमिक रूप से मान्य फॉर्मूलेशन अनुशंसा के रूप में।

 

संघटक खरीदारों के लिए अंतिम पंक्ति

प्रदान किया गया शोध सिस्टैंच-व्युत्पन्न वर्बास्कोसाइड को आगे की त्वचा देखभाल के विकास के लिए एक उम्मीदवार बनाता है, विशेष रूप से जलयोजन और बाधा-संबंधित प्रयोगशाला समापन बिंदुओं की खोज करने वाली परियोजनाओं के लिए।

 

सिस्टैंच एक्टेओसाइड सामग्री सूची

 

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इसका सबसे उपयोगी सबक केवल यह नहीं है कि "सिस्टैन्च त्वचा के लिए अच्छा है।" क्या ऐसा हैनिष्कर्षण विधि, सक्रिय-यौगिक सामग्री, घटक पहचान, और साक्ष्य गुणवत्ता सभी प्रभावित करते हैं कि कोई वनस्पति घटक किसी विशिष्ट वाणिज्यिक परियोजना के लिए उपयुक्त है या नहीं।

सिस्टैंच निर्माता से संपर्क करते समय, एक सटीक अनुरोध के साथ शुरुआत करें:

"कृपया हमारी परियोजना के लिए प्रस्तावित घटक ग्रेड के लिए वनस्पति पहचान, वर्बास्कोसाइड विनिर्देश, विश्लेषणात्मक विधि, विश्लेषण के प्रतिनिधि प्रमाण पत्र, अवशिष्ट-विलायक परिणाम, सुरक्षा दस्तावेज़ीकरण और फॉर्मूलेशन मार्गदर्शन प्रदान करें।"

वह अनुरोध हर्बल अर्क पाउडर के लिए सामान्य पूछताछ की तुलना में उत्पाद विकास के लिए अधिक मजबूत आधार तैयार करता है।

 

(54) आविष्कार का शीर्षक

त्वचा लिपिड उत्पादन को बढ़ावा देने के लिए वर्बस्कोसाइड तैयार करने की विधि और इसके अनुप्रयोग की विधि

(57) सार

यह आविष्कार त्वचा देखभाल और सामयिक उत्पादों के तकनीकी क्षेत्र से संबंधित त्वचा लिपिड उत्पादन को बढ़ावा देने के लिए वर्बास्कोसाइड तैयार करने की एक विधि और इसके अनुप्रयोग की एक विधि से संबंधित है।

विधि में निम्नलिखित चरण शामिल हैं:

ओरोबैंचेसी पौधों के सूखे मांसल तनों का चयन करनासिस्टैंच डेजर्टिकोला, सिस्टैंच ट्यूबुलोसा, सिस्टैंच साइनेंसिस, यासिस्टैंच साल्सा; पूर्व उपचार के बाद तनों को चूर्णित करना; उन्हें हर बार एक से तीन घंटे के लिए दो से चार बार 50%-80% जलीय इथेनॉल समाधान के साथ भाटा के तहत निकालना; अर्क का संयोजन; और उन्हें कम दबाव में तब तक सांद्रित किया जाता है जब तक इथेनॉल की कोई गंध न रह जाए, जिससे एक सांद्रित घोल प्राप्त हो जाता है।

सांद्रित घोल को एक AB-8 मैक्रोपोरस सोखना राल स्तंभ से गुजारना; अशुद्धियों को दूर करने के लिए विआयनीकृत पानी और 30%-50% जलीय इथेनॉल समाधान के साथ क्रमिक रूप से निक्षालन; फिर 60%-90% जलीय इथेनॉल समाधान के साथ लक्ष्य घटकों को शुद्ध करना; एलुएट को इकट्ठा करना और उसे कम दबाव में केंद्रित करना; एलुएंट के रूप में 5:1 से 2:1 तक के आयतन अनुपात पर क्लोरोफॉर्म-मेथनॉल का उपयोग करके सिलिका-जेल कॉलम क्रोमैटोग्राफी द्वारा इसे शुद्ध करना; लक्ष्य अंश एकत्रित करना; और शुद्ध वर्बास्कोसाइड प्राप्त करने के लिए उन्हें कम दबाव में केंद्रित किया जाता है, जिसके बाद फ्रीज में सुखाया जाता है।

आविष्कार के लिए बताए गए लाभकारी प्रभाव यह हैं कि वर्बास्कोसाइड त्वचा की रक्षा करता है और उत्पादों में शामिल होने पर बेहतर त्वचा देखभाल गतिविधि प्रदर्शित करता है।

 

दावा

दावा 1

वर्बास्कोसाइड तैयार करने की एक विधि, जिसमें निम्नलिखित चरण शामिल हैं:

ओरोबैंचेसी पौधों के सूखे मांसल तनों का चयन करनासिस्टैंच डेजर्टिकोला, सिस्टैंच ट्यूबुलोसा, सिस्टैंच साइनेंसिस, यासिस्टैंच साल्सा; पूर्व उपचार के बाद उन्हें चूर्णित करना; उन्हें हर बार एक से तीन घंटे के लिए दो से चार बार 50%-80% जलीय इथेनॉल समाधान के साथ भाटा के तहत निकालना; अर्क का संयोजन; और उन्हें कम दबाव में तब तक सांद्रित किया जाता है जब तक इथेनॉल की कोई गंध न रह जाए, जिससे एक सांद्रित घोल प्राप्त हो जाता है।

सांद्रित घोल को एक AB-8 मैक्रोपोरस सोखना राल स्तंभ से गुजारना; अशुद्धियों को दूर करने के लिए विआयनीकृत पानी और 30%-50% जलीय इथेनॉल समाधान के साथ क्रमिक रूप से निक्षालन; फिर 60%-90% जलीय इथेनॉल समाधान के साथ लक्ष्य घटकों को शुद्ध करना; एलुएट को इकट्ठा करना और उसे कम दबाव में केंद्रित करना; एलुएंट के रूप में 5:1 से 2:1 तक के आयतन अनुपात पर क्लोरोफॉर्म-मेथनॉल का उपयोग करके सिलिका-जेल कॉलम क्रोमैटोग्राफी द्वारा इसे शुद्ध करना; लक्ष्य अंश एकत्रित करना; उन्हें कम दबाव में केंद्रित करना; और कम से कम 98% की शुद्धता के साथ शुद्ध वर्बास्कोसाइड प्राप्त करने के लिए उन्हें फ्रीज में सुखाना।

 

दावा 2

दावा 1 के अनुसार वर्बास्कोसाइड तैयार करने की विधि, जिसमें रिफ्लक्स निष्कर्षण के दौरान सामग्री-से-विलायक अनुपात 1:10 से 1:20 तक होता है, और निष्कर्षण तापमान 60 डिग्री से 80 डिग्री तक होता है।

 

दावा 3

दावे 1 के अनुसार वर्बास्कोसाइड तैयार करने की विधि, जिसमें AB-8 मैक्रोपोरस सोखना राल स्तंभ का व्यास-से-ऊंचाई अनुपात 1:8 से 1:15 तक होता है, और निक्षालन प्रवाह दर 1 से 3 बीवी/एच तक होती है।

 

दावा 4

दावे 1 के अनुसार वर्बास्कोसाइड तैयार करने की विधि, जिसमें फ्रीज-सुखाने की स्थिति में -40 डिग्री से -50 डिग्री तक का तापमान, 10 से 30 पीए तक का वैक्यूम दबाव और 12 से 24 घंटे तक का सुखाने का समय शामिल होता है।

 

दावा 5

त्वचा के लिपिड उत्पादन को बढ़ावा देने के लिए वर्बास्कोसाइड लगाने की एक विधि, दावे 1-4 में से किसी एक के अनुसार तैयार किए गए वर्बास्कोसाइड का उपयोग करते हुए, इसकी विशेषता यह है कि आवेदन विधि में शामिल हैं:

एक पूर्व निर्धारित द्रव्यमान अंश पर सामयिक उत्पाद आधार में वर्बास्कोसाइड जोड़ना और एक तैयार उत्पाद तैयार करने के लिए समान रूप से हिलाना; तैयार उत्पाद को दिन में एक या दो बार त्वचा की सतह पर लगाना; एसीसी, एफएएसएन और एन-एसएमएज़ की जीन और प्रोटीन अभिव्यक्ति को विनियमित करने और फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि को बढ़ाने के लिए वर्बास्कोसाइड को एपिडर्मल एचसीएटी कोशिकाओं में प्रवेश करने और कार्य करने की अनुमति देना; और त्वचा के लिपिड संश्लेषण को बढ़ाने के लिए एक से चार सप्ताह तक इसका उपयोग जारी रखें।

वर्बस्कोसाइड HaCaT सेल प्रसार, घाव भरने, टाइट-जंक्शन प्रोटीन अभिव्यक्ति और लिपिड और हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन को बढ़ावा देता है, जिससे बहु-लक्ष्य बाधा-मरम्मत कार्य प्रदान होता है।

इसका उपयोग संपूर्ण त्वचा-अवरोधक रखरखाव श्रृंखला में किया जाता है, जिसमें एपिडर्मल कोशिका नवीकरण, उन्नत अंतरकोशिकीय कनेक्शन, लिपिड मैट्रिक्स की पुनःपूर्ति और प्राकृतिक मॉइस्चराइजिंग कारक के रूप में हयालूरोनिक एसिड का संश्लेषण शामिल है।

 

दावा 6

दावे 5 के अनुसार आवेदन विधि, जिसमें सामयिक उत्पाद में वर्बास्कोसाइड का द्रव्यमान अंश 0.01% से 5.0% तक होता है।

 

दावा 7

दावे 5 के अनुसार आवेदन विधि, जिसमें प्रति आवेदन 0.1-0.5 ग्राम तैयार उत्पाद का उपयोग किया जाता है, इसके बाद अवशोषण को बढ़ावा देने के लिए एक से तीन मिनट तक हल्की मालिश की जाती है।

 

दावा 8

दावा 5 के अनुसार आवेदन विधि, जिसमें सामयिक उत्पाद एक चिकित्सा ड्रेसिंग, एक पोस्ट-प्रक्रिया मरम्मत उत्पाद, एटोपिक जिल्द की सूजन के लिए एक सहायक उपचार उत्पाद, विशेष रूप से संवेदनशील त्वचा के लिए एक त्वचा देखभाल उत्पाद, या एक गहन मॉइस्चराइजिंग और मरम्मत त्वचा देखभाल उत्पाद है।

 

दावा 9

दावे 5 के अनुसार आवेदन विधि, जिसमें वर्बास्कोसाइड के आवेदन के दौरान सहायक पदार्थों को अतिरिक्त रूप से शामिल किया जा सकता है।

 

दावा 10

दावे 9 के अनुसार आवेदन विधि, जिसमें सहायक पदार्थ को एक ह्यूमेक्टेंट, एक इमल्सीफायर, एक परिरक्षक, एक सुगंध, या एक सुखदायक एजेंट से चुना जाता है, और सहायक युक्त संरचना का खुराक रूप एक लोशन, एक क्रीम, एक जेल, एक सीरम, या एक शीट-मास्क समाधान से चुना जाता है।

 

त्वचा लिपिड उत्पादन को बढ़ावा देने के लिए वर्बस्कोसाइड तैयार करने की विधि और इसके अनुप्रयोग की विधि

 

तकनीकी फील्ड

[0001]यह आविष्कार त्वचा देखभाल और सामयिक उत्पादों के तकनीकी क्षेत्र से संबंधित है। विशेष रूप से, यह वर्बास्कोसाइड तैयार करने की एक विधि और त्वचा लिपिड उत्पादन को बढ़ावा देने के लिए इसके अनुप्रयोग की एक विधि से संबंधित है।

अधिक विशेष रूप से, यह त्वचा की सुरक्षा में उपयोग के लिए एपिडर्मल सेल नवीनीकरण → उन्नत इंटरसेल्यूलर तंग जंक्शन → लिपिड-मैट्रिक्स पुनःपूर्ति → हाइलूरोनिक एसिड संश्लेषण → घाव भरने के पूर्ण त्वचा-अवरोधक मरम्मत अनुक्रम पर प्रभाव डालने के उद्देश्य से वर्बास्कोसाइड की तैयारी विधि से संबंधित है।

 

पृष्ठभूमि कला

[0002]एपिडर्मल कोशिका नवीनीकरण, उन्नत अंतरकोशिकीय तंग जंक्शन, लिपिड-मैट्रिक्स पुनःपूर्ति, हाइलूरोनिक एसिड संश्लेषण, और घाव भरने में से प्रत्येक त्वचा-अवरोध होमियोस्टैसिस को बनाए रखने में एक अनिवार्य भूमिका निभाता है।

एपिडर्मल कोशिका नवीनीकरण बाधा निर्माण की नींव है। बेसल केराटिनोसाइट्स के प्रसार और विभेदन को तेज करके, यह सुनिश्चित करता है कि पर्याप्त संख्या में कोशिकाएं व्यवस्थित तरीके से ऊपर की ओर बढ़ती हैं, जिससे बाधा निर्माण के लिए पर्याप्त सेलुलर सामग्री की आपूर्ति होती है।

तंग जंक्शनों और डेसमोसोम सहित अंतरकोशिकीय जंक्शन संरचनाएं, घने, निरंतर भौतिक अवरोध बनाने के लिए नवगठित कोशिकाओं को एक साथ बांधती हैं जो बाहरी उत्तेजनाओं के प्रवेश को प्रभावी ढंग से रोकती हैं।

कोशिकाओं के बीच रिक्त स्थान को भरने वाला लिपिड मैट्रिक्स एक संगठित लैमेलर संरचना बनाता है और उन मार्गों को सील करने का प्रमुख साधन है जिनके माध्यम से पानी खो जाता है।

एपिडर्मिस और डर्मिस में संश्लेषित हयालूरोनिक एसिड एक शक्तिशाली जल-धारण नेटवर्क बनाता है, स्ट्रेटम कॉर्नियम को नमी की आपूर्ति करता है, और सेलुलर होमियोस्टैसिस को बनाए रखता है। यह इन शारीरिक प्रक्रियाओं के लिए उपयुक्त नम वातावरण भी प्रदान कर सकता है और सेलुलर सिग्नल प्रसारित कर सकता है।

घाव भरना इन चार प्रक्रियाओं पर काफी हद तक निर्भर करता है। सबसे पहले, हयालूरोनिक एसिड एक अनंतिम मैट्रिक्स और सिग्नलिंग कार्य प्रदान करता है। घाव को ढकने के लिए एपिडर्मल कोशिका नवीनीकरण की आवश्यकता होती है। नवगठित कोशिकाओं को अवरोध कार्य की बहाली को पूरा करने के लिए तंग जंक्शनों को फिर से स्थापित करना होगा और लिपिड मैट्रिक्स को फिर से भरना होगा।

घाव भरने के दौरान ये पांच प्रक्रियाएं क्रमिक रूप से शुरू की जाती हैं। उनकी परस्पर जुड़ी, समन्वित गतिविधियाँ - कोशिका नवीकरण और संरचनात्मक सुदृढीकरण से लेकर मैट्रिक्स भरने और जल भंडारण तक - सामूहिक रूप से पूरी तरह से स्थिर त्वचा अवरोध की ओर ले जाती हैं।

वे न केवल बाहरी परेशानियों का विरोध करने के लिए आवश्यक शारीरिक शक्ति प्रदान करते हैं, बल्कि आंतरिक जल हानि को रोकने के लिए आवश्यक नमी-धारण क्षमता भी प्रदान करते हैं, जिससे त्वचा को गतिशील संतुलन की स्थिति में दीर्घकालिक स्वास्थ्य बनाए रखने की अनुमति मिलती है।

तदनुसार, सतह की नमी में सुधार करने की तुलना में बहुआयामी, व्यवस्थित पुनर्निर्माण अधिक मौलिक है। यह त्वचा के प्रतिरोध और उसके स्रोत पर नमी बनाए रखने में सुधार कर सकता है, और अधिक टिकाऊ और स्थिर स्वस्थ स्थिति का समर्थन कर सकता है।

[0003]त्वचा का स्वयं का लिपिड और हाइलूरोनिक एसिड का उत्पादन त्वचा के स्वास्थ्य को बनाए रखने, पर्यावरणीय जलन का विरोध करने और युवा स्थिति को बनाए रखने के लिए मौलिक है।

नमी बनाए रखने और सूक्ष्मजीवों और प्रदूषकों से बचाव के माध्यम से, ये पदार्थ त्वचा के सामान्य शारीरिक कार्य को सुनिश्चित करने में मदद करते हैं।

अकेले बाहरी पूरकता की तुलना में, त्वचा के लिपिड और हयालूरोनिक एसिड के स्वयं के उत्पादन को बढ़ावा देना एक अधिक मौलिक और टिकाऊ रणनीति के रूप में वर्णित है जो सीधे इसकी "स्व-मरम्मत क्षमता" और "प्रतिरोध" को मजबूत करती है।

एटोपिक जिल्द की सूजन और एक्जिमा जैसे त्वचा रोगों के लिए, लिपिड और हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन को मजबूत करने को केंद्रीय निवारक और चिकित्सीय महत्व के रूप में वर्णित किया गया है।

सूत्र बताते हैं कि इन स्थितियों में अक्सर आनुवंशिक दोष शामिल होते हैं जो त्वचा की "ईंट-और-मोर्टार" संरचना को कमजोर करते हैं, जिससे एलर्जी और जलन पैदा करने वाले तत्व अधिक आसानी से प्रवेश कर पाते हैं और लगातार प्रतिरक्षा-भड़काऊ चक्र शुरू हो जाता है।

इसलिए, सक्रिय अवयवों की पहचान करना जो प्रमुख लिपिड-संश्लेषण एंजाइमों, जैसे एफएएसएन और एसीसी को सक्रिय करते हैं, या सीधे हयालूरोनिक एसिड उत्पादन को प्रेरित करते हैं, सेलुलर लिपिड और हयालूरोनिक एसिड उत्पादन को सक्रिय रूप से बनाए रख सकते हैं और मरम्मत कर सकते हैं।

प्रकटीकरण के अनुसार, यह रणनीति सूखापन, खुजली और सूजन की घटनाओं को कम कर सकती है, जबकि उनके स्रोत पर बाहरी ट्रिगर को कम कर सकती है, पुनरावृत्ति की आवृत्ति और गंभीरता को कम कर सकती है, और रोग प्रबंधन को निष्क्रिय उपचार से सक्रिय रोकथाम की ओर स्थानांतरित करने में मदद कर सकती है।

 

[0004]वर्बास्कोसाइड एक फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड है और ओरोबैंचेसी पौधों के प्रमुख घटकों में से एक है:

सिस्टैंच डेजर्टिकोलावाईसी मा;

सिस्टैंच ट्यूबुलोसा(शेंक) वाइट;

सिस्टैंच साइनेंसिसबेक; और

सिस्टैंच साल्सा(सीए मे.) बेक।

 

शोध से पता चला है कि वर्बास्कोसाइड एक शक्तिशाली एंटीऑक्सीडेंट है और इसमें एंटी-इंफ्लेमेटरी, न्यूरोप्रोटेक्टिव, हेपेटोप्रोटेक्टिव और एंटी-एजिंग प्रभाव सहित औषधीय गतिविधियां होती हैं।

कई पौधों से त्वचा-सुरक्षात्मक एजेंटों की स्क्रीनिंग के दौरान, आविष्कारकों ने पाया कि वर्बास्कोसाइड न केवल HaCaT सेल प्रसार और टाइट-जंक्शन प्रोटीन अभिव्यक्ति को बढ़ावा देता है, बल्कि फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि को भी नियंत्रित करता है, जिससे त्वचा लिपिड संश्लेषण बढ़ता है।

यह हयालूरोनिक एसिड उत्पादन में शामिल मार्गों को भी सक्रिय करता है और बाद में घाव भरने को बढ़ावा देता है।

इन क्रियाओं में एपिडर्मल कोशिका नवीनीकरण का संपूर्ण त्वचा-अवरोधक रखरखाव और मरम्मत क्रम → उन्नत अंतरकोशिकीय कनेक्शन → लिपिड-मैट्रिक्स पुनःपूर्ति → हायल्यूरोनिक एसिड संश्लेषण → घाव भरना शामिल है।

इसलिए वर्बास्कोसाइड का उपयोग कार्यात्मक त्वचा देखभाल और सामयिक उत्पादों में बहु-लक्ष्य त्वचा-सुरक्षात्मक और मॉइस्चराइजिंग एजेंट के रूप में किया जा सकता है।

उदाहरणों में चिकित्सा ड्रेसिंग और प्रक्रिया-पश्चात मरम्मत उत्पाद शामिल हैं; एटोपिक जिल्द की सूजन या एक्जिमा के लिए सहायक उत्पाद; संवेदनशील त्वचा या रोसैसिया के लिए विशेष रूप से लक्षित त्वचा देखभाल उत्पाद; और दैनिक उपयोग के लिए गहन मॉइस्चराइजिंग और मरम्मत उत्पाद।

 

आविष्कार का सारांश

[0005]यह आविष्कार वर्बास्कोसाइड तैयार करने की एक विधि और त्वचा के लिपिड उत्पादन को बढ़ावा देने के लिए इसके अनुप्रयोग की एक विधि प्रदान करता है।

तैयारी विधि वर्बास्कोसाइड से संबंधित है जिसका उद्देश्य एपिडर्मल सेल नवीनीकरण के पूर्ण त्वचा-अवरोधक मरम्मत अनुक्रम का समर्थन करना है → उन्नत इंटरसेल्यूलर कनेक्शन → लिपिड-मैट्रिक्स पुनःपूर्ति → हाइलूरोनिक एसिड संश्लेषण → घाव भरना।

यह त्वचा देखभाल या सामयिक उत्पादों के लिए बहु-लक्ष्य प्रभाव के साथ एक नया मुख्य सक्रिय घटक प्रदान करने की तकनीकी समस्या का समाधान करता है।

वर्बस्कोसाइड को संपूर्ण त्वचा-अवरोधक मरम्मत श्रृंखला में कार्य करने के लाभ के रूप में वर्णित किया गया है, जिसका प्रभाव मौजूदा एकल-लक्ष्य त्वचा देखभाल सामग्री से बेहतर है, जैसे कि सामग्री जो केवल हयालूरोनिक एसिड संश्लेषण को बढ़ावा देती है, केवल कोशिका प्रसार को बढ़ावा देती है, या अकेले मॉइस्चराइजेशन प्रदान करती है।

[0006]उपरोक्त उद्देश्यों को प्राप्त करने के लिए, आविष्कार निम्नलिखित तकनीकी समाधान अपनाता है।

[0007]वर्बास्कोसाइड तैयार करने की विधि में निम्नलिखित चरण शामिल हैं।

[0008]ओरोबैंचेसी पौधों के सूखे मांसल तनों का चयन करेंसिस्टैंच डेजर्टिकोला, सिस्टैंच ट्यूबुलोसा, सिस्टैंच साइनेंसिस, यासिस्टैंच साल्सा.

ब्लैंचिंग, सुखाने और चूर्णित करने के बाद, रिफ्लक्स के तहत सामग्री को 50% -80% जलीय इथेनॉल समाधान के साथ हर बार एक से तीन घंटे के लिए दो से चार बार निकालें।

अर्क को मिलाएं और उन्हें कम दबाव में तब तक केंद्रित करें जब तक कि कोई इथेनॉल गंध न रह जाए, जिससे एक केंद्रित समाधान प्राप्त हो जाए।

[0009]सांद्रित घोल को एक AB-8 मैक्रोपोरस सोखना राल स्तंभ से गुजारें।

अशुद्धियों को दूर करने के लिए विआयनीकृत पानी और 30%-50% जलीय इथेनॉल घोल को क्रमिक रूप से मिलाएं, इसके बाद लक्ष्य घटकों को साफ करने के लिए 60%-90% जलीय इथेनॉल घोल डालें।

एलुएट इकट्ठा करें और इसे कम दबाव में केंद्रित करें।

एलुएंट के रूप में 5:1 से 2:1 तक के आयतन अनुपात पर क्लोरोफॉर्म-मेथनॉल का उपयोग करके सिलिका-जेल कॉलम क्रोमैटोग्राफी द्वारा सांद्रण को शुद्ध करें।

लक्ष्य अंशों को इकट्ठा करें, उन्हें कम दबाव में केंद्रित करें, और कम से कम 98% की शुद्धता के साथ शुद्ध वर्बास्कोसाइड प्राप्त करने के लिए उन्हें फ्रीज-सूखाएं।

[0010]वैकल्पिक रूप से, रिफ्लक्स निष्कर्षण के दौरान सामग्री-से-विलायक अनुपात 1:10 से 1:20 तक होता है, जिसे जी/एमएल में व्यक्त किया जाता है, और निष्कर्षण तापमान 60 डिग्री से 80 डिग्री तक होता है।

अनुवादक का नोट: स्रोत अतिरिक्त रूप से बताता है कि इस अनुपात का अर्थ है "1 एमएल विलायक में 1 ग्राम कच्चा माल मिलाया जाता है।" वह कथन निर्दिष्ट 1:10-1:20 रेंज के साथ असंगत है, जो कच्चे माल के प्रति ग्राम 10-20 एमएल विलायक से मेल खाता है।

[0011]वैकल्पिक रूप से, AB-8 मैक्रोपोरस सोखना राल स्तंभ का व्यास-से-ऊंचाई अनुपात 1:8 से 1:15 तक होता है, जहां अनुपात स्तंभ व्यास, डी, स्तंभ ऊंचाई, एच है। निक्षालन प्रवाह दर 1 से 3 BV/h तक होती है।

[0012]वैकल्पिक रूप से, फ़्रीज़-सुखाने की स्थिति में -40 डिग्री से -50 डिग्री तक का तापमान, 10 से 30 Pa तक का वैक्यूम दबाव और 12 से 24 घंटे तक का सुखाने का समय शामिल होता है।

[0013]त्वचा में लिपिड उत्पादन को बढ़ावा देने के लिए वर्बास्कोसाइड लगाने की एक विधि इस प्रकार दी गई है।

[0014]एक पूर्व निर्धारित द्रव्यमान अंश पर सामयिक उत्पाद आधार में वर्बास्कोसाइड जोड़ें और एक तैयार उत्पाद तैयार करने के लिए समान रूप से हिलाएं।

तैयार उत्पाद को दिन में एक या दो बार त्वचा की सतह पर लगाएं।

प्रवेश के माध्यम से, वर्बास्कोसाइड कोशिका प्रसार को बढ़ावा देने और तंग जंक्शनों को मजबूत करने के लिए एपिडर्मल HaCaT कोशिकाओं पर कार्य करता है।

साथ ही, यह ACC, FASN, और N-SMase की जीन और प्रोटीन अभिव्यक्ति को बढ़ाता है, फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि को बढ़ाता है, HAS2, HAS3 और CD44 को अपग्रेड करता है, और हयालूरोनिक एसिड सामग्री को बढ़ाता है।

त्वचा की बाधा में समग्र सुधार प्राप्त करने के लिए एक से चार सप्ताह तक उपयोग जारी रखें।

[0015]वैकल्पिक रूप से, सामयिक उत्पाद में वर्बास्कोसाइड का द्रव्यमान अंश 0.01% से 5.0% तक होता है।

[0016]वैकल्पिक रूप से, प्रति आवेदन 0.1-0.5 ग्राम तैयार उत्पाद का उपयोग करें और अवशोषण को बढ़ावा देने के लिए आवेदन के बाद एक से तीन मिनट तक धीरे से मालिश करें।

[0017]वैकल्पिक रूप से, सामयिक उत्पाद एक मेडिकल ड्रेसिंग, प्रक्रिया के बाद की मरम्मत का उत्पाद, एटोपिक जिल्द की सूजन के लिए एक सहायक उपचार उत्पाद, संवेदनशील त्वचा के लिए विशेष रूप से बनाया गया एक त्वचा देखभाल उत्पाद, या एक गहन मॉइस्चराइजिंग और मरम्मत त्वचा देखभाल उत्पाद है।

[0018]वैकल्पिक रूप से, वर्बास्कोसाइड के अनुप्रयोग के दौरान सहायक पदार्थ भी जोड़े जा सकते हैं।

[0019]इसके अलावा, सहायक पदार्थ को ह्यूमेक्टेंट, इमल्सीफायर, प्रिजर्वेटिव, खुशबू या सुखदायक एजेंट से चुना जाता है।

सहायक-युक्त संरचना का खुराक रूप लोशन, क्रीम, जेल, सीरम या शीट-मास्क समाधान से चुना जाता है।

 

आविष्कार के लाभकारी प्रभाव

[0020]आविष्कार के लाभकारी प्रभाव इस प्रकार हैं।

[0021]आविष्कार दर्शाता है कि वर्बास्कोसाइड की मुख्य गतिविधियाँ त्वचा के लिपिड और हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन को बढ़ावा देना है।

यह त्वचा-कोशिका प्रसार को भी बढ़ावा दे सकता है, अंतरकोशिकीय तंग जंक्शनों को मजबूत कर सकता है, और घाव भरने में तेजी ला सकता है, जिससे "कोशिका प्रसार को बढ़ावा देना → अंतरकोशिकीय कनेक्शन को स्थिर करना → लिपिड और हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन को बढ़ाना → मरम्मत और उपचार में तेजी लाना" का एक बंद-लूप तंत्र बनता है।

पिछली कला की तुलना में, आविष्कार को निम्नलिखित फायदे के रूप में वर्णित किया गया है।

[0022]वर्बास्कोसाइड एक प्राकृतिक पौधे से प्राप्त सक्रिय घटक है जिसमें उच्च स्तर की सुरक्षा और स्पष्ट रूप से परिभाषित औषधीय गतिविधि है, जो रासायनिक रूप से संश्लेषित अवयवों से जुड़े संभावित त्वचा-जलन जोखिमों से बचाता है।

संपादकीय योग्यता: यह स्रोत का सुरक्षा दावा है, न कि केवल वानस्पतिक उत्पत्ति द्वारा स्थापित निष्कर्ष।

[0023]वर्बास्कोसाइड की तैयारी दक्षता और उपज में सुधार हुआ है।

[0024]वर्बास्कोसाइड लक्ष्यों की एक विस्तृत श्रृंखला पर कार्य करता है, साथ ही कोशिका प्रसार, टाइट-जंक्शन प्रोटीन अभिव्यक्ति, लिपिड संश्लेषण, हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन और घाव भरने सहित कई प्रमुख प्रक्रियाओं को विनियमित करता है।

इस प्रकार यह एकीकृत तरीके से त्वचा-अवरोधक कार्य में सुधार करता है, जिसका प्रभाव एकल-लक्षित अवयवों से बेहतर बताया गया है।

[0025]इसके अनुप्रयोग व्यापक हैं, जिनमें चिकित्सा मरम्मत, त्वचा रोगों का सहायक उपचार, संवेदनशील त्वचा की देखभाल, और दैनिक मॉइस्चराइजिंग और मरम्मत, विभिन्न आबादी की त्वचा-स्वास्थ्य आवश्यकताओं को पूरा करना शामिल है।

 

रेखाचित्रों का संक्षिप्त विवरण

[0026]आविष्कार या पूर्व कला के अवतारों के तकनीकी समाधानों को अधिक स्पष्ट रूप से समझाने के लिए, अवतारों या पूर्व कला का वर्णन करने के लिए आवश्यक चित्र संक्षेप में नीचे प्रस्तुत किए गए हैं।

नीचे वर्णित चित्र आविष्कार के केवल कुछ निश्चित अवतारों का प्रतिनिधित्व करते हैं। कला में सामान्य कौशल वाला व्यक्ति रचनात्मक प्रयास के बिना उनसे अन्य चित्र प्राप्त कर सकता है।

[0027]चित्र 1 आविष्कार की तैयारी विधि का एक योजनाबद्ध फ़्लोचार्ट है।

[0028]चित्र 2 HaCaT सेल-व्यवहार्यता डेटा प्रस्तुत करता है।

[0029]चित्र 3 फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि डेटा प्रस्तुत करता है।

[0030]चित्र 4 हयालूरोनिक एसिड सामग्री डेटा प्रस्तुत करता है।

[0031]चित्र 5 आविष्कार के लिए HaCaT सेल-व्यवहार्यता डेटा प्रस्तुत करता है।

[0032]चित्र 6 आविष्कार के लिए फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि डेटा प्रस्तुत करता है।

[0033]चित्र 7 फैटी एसिड संश्लेषण से जुड़े जीन की अभिव्यक्ति प्रस्तुत करता है।

[0034]चित्र 8 फैटी एसिड संश्लेषण से जुड़े प्रोटीन की अभिव्यक्ति प्रस्तुत करता है।

[0035]चित्र 9 फैटी एसिड संश्लेषण से जुड़े पश्चिमी धब्बा परिणाम प्रस्तुत करता है।

[0036]चित्र 10 हयालूरोनिक एसिड सामग्री डेटा प्रस्तुत करता है।

[0037]चित्र 11 हयालूरोनिक एसिड संश्लेषण से जुड़े जीन की अभिव्यक्ति प्रस्तुत करता है।

[0038]चित्र 12 हयालूरोनिक एसिड संश्लेषण से जुड़े प्रोटीन की अभिव्यक्ति प्रस्तुत करता है।

[0039]चित्र 13 हयालूरोनिक एसिड से जुड़े पश्चिमी धब्बा परिणाम प्रस्तुत करता है।

[0040]चित्र 14 क्लॉडिन-1 अभिव्यक्ति स्तर प्रस्तुत करता है।

[0041]चित्र 15 अभिव्यक्ति के स्तर को दर्शाता है।

[0042]चित्र 16 घाव-बंद होने की दर प्रस्तुत करता है।

[0043]चित्र 17 सेल स्क्रैच परख से छवियां प्रस्तुत करता है।

[0044]चित्र 18 विभिन्न नमूनों के मॉइस्चराइजिंग प्रदर्शन का मूल्यांकन प्रस्तुत करता है।

 

अवतारों का विस्तृत विवरण

[0045]संलग्न चित्रों के संदर्भ में एप्लिकेशन के अवतारों का नीचे विस्तार से वर्णन किया गया है।

उदाहरण 1: शुद्ध वर्बास्कोसाइड की तैयारी

[0046]उदाहरण 1.

[0047]जैसा कि चित्र 1 में दिखाया गया है, यह उदाहरण वर्बास्कोसाइड तैयार करने की एक विधि प्रदान करता है, जिसे संक्षेप में वेर कहा जाता है, जिसमें निम्नलिखित चरण शामिल हैं।

[0048]के सूखे मांसल तने का चयन करेंसिस्टैंच डेजर्टिकोलायासिस्टैंच ट्यूबुलोसा, दोनों ओरोबैंचेसी परिवार से संबंधित हैं।

सामग्री को टुकड़ों में काटें, इसे 10-25 मिनट के लिए उबलते पानी में ब्लांच करें, और इसे 40 डिग्री -60 डिग्री पर ओवन में सुखाएं, जिससे वर्बस्कोसाइड की मात्रा चार गुना से अधिक बढ़ जाती है।

 

 

टिप्पणी:* बनाम रिक्त नियंत्रण समूह, पी<0.05P < 0.05P<0.05.

 

चूर्णित करने के बाद, भाटा के अंतर्गत सामग्री को 50%-80% जलीय इथेनॉल घोल के साथ हर बार एक से तीन घंटे के लिए दो से चार बार निकालें।

अर्क को मिलाएं और उन्हें कम दबाव में तब तक केंद्रित करें जब तक कि कोई इथेनॉल गंध न रह जाए, जिससे एक केंद्रित समाधान प्राप्त हो जाए।

 

[0049]सांद्रित घोल को एक AB-8 मैक्रोपोरस सोखना रेजिन कॉलम से गुजारें।

अशुद्धियों को दूर करने के लिए विआयनीकृत पानी और 30%-50% जलीय इथेनॉल घोल को क्रमिक रूप से मिलाएं, इसके बाद लक्ष्य घटकों को साफ करने के लिए 60%-90% जलीय इथेनॉल घोल डालें।

एलुएट इकट्ठा करें और इसे कम दबाव में केंद्रित करें।

एलुएंट के रूप में 5:1 से 2:1 तक के आयतन अनुपात पर क्लोरोफॉर्म-मेथनॉल का उपयोग करके सिलिका-जेल कॉलम क्रोमैटोग्राफी द्वारा इसे शुद्ध करें।

लक्ष्य अंशों को इकट्ठा करें, उन्हें कम दबाव में केंद्रित करें, और कम से कम 98% की शुद्धता के साथ शुद्ध वर्बास्कोसाइड प्राप्त करने के लिए उन्हें फ्रीज-सूखाएं।

[0050]विशेष रूप से, रिफ्लक्स निष्कर्षण के दौरान सामग्री-से-विलायक अनुपात 1:10 से 1:20 तक होता है, और निष्कर्षण तापमान 60 डिग्री से 80 डिग्री तक होता है।

[0051]AB-8 मैक्रोपोरस सोखना राल स्तंभ का व्यास-से-ऊंचाई अनुपात 1:8 से 1:15 तक होता है, और निक्षालन प्रवाह दर 1 से 3 बीवी/एच तक होती है।

[0052]फ़्रीज़-सुखाने की स्थिति में -40 डिग्री से -50 डिग्री तक का तापमान, 10 से 30 Pa तक का वैक्यूम दबाव और 12 से 24 घंटे तक का सुखाने का समय शामिल होता है।

 

तालिका 2. विभिन्न नमूनों की जैव सक्रियता का सारांश

अनुक्रमणिका	रिक्त नियंत्रण	सकारात्मक नियंत्रण	सिटे	इच	वर
सेल व्यवहार्यता (%)	100 ± 8.347	/	122.052 ± 8.051*	117.868 ± 7.941*	128.894 ± 9.528*
एफएएस गतिविधि (यू/एमजी प्रोट)	2.712 ± 0.419	18.488 ± 4.56*	2.069 ± 0.27	9.799 ± 1.356*	10.4 ± 0.697*
एचए सामग्री (एनजी/एमएल)	10.908 ± 0.968	19.925 ± 4.306*	21.644 ± 2.037*	13.517 ± 1.653*	18.486 ± 1.341*
क्लॉडिन-1 अभिव्यक्ति (पीजी/एमएल)	414.58 ± 25.05	/	505.556 ± 20.518*	478.937 ± 12.419*	554.057 ± 22.106*
ऑक्लूडिन अभिव्यक्ति (पीजी/एमएल)	3.287 ± 0.683	/	4.285 ± 0.575	4.666 ± 0.582*	7.258 ± 0.774*
24 घंटे घाव भरने की दर (%)	30.581 ± 1.308	70.075 ± 1.781*	40.762 ± 9.68	37.102 ± 7.038	45.173 ± 5.508*
48 घंटे घाव भरने की दर (%)	55.458 ± 6.674	87.545 ± 3.155*	76.47 ± 2.684*	67.883 ± 5.678*	76.704 ± 4.8*

टिप्पणी:* बनाम रिक्त नियंत्रण समूह, पी<0.05P < 0.05P<0.05.

 

उदाहरण 2: सिस्टैंच पॉलीसेकेराइड अर्क तैयार करना

[0053]उदाहरण 2.

[0054]सिस्टैंच को गर्म भाटा के तहत दो बार क्रमशः 20 गुना और 15 गुना मात्रा में पानी के साथ तीन घंटे और दो घंटे के लिए निकालें।

फ़िल्टर करें, निस्पंदों को मिलाएं, और 80 डिग्री -90 डिग्री पर केंद्रित करें।

80% की अंतिम इथेनॉल सांद्रता प्राप्त करने के लिए 95% इथेनॉल का 215 एमएल जोड़ें, और 4 डिग्री पर रात भर छोड़ दें।

अवक्षेप को या तो निस्पंदन द्वारा, फिल्टर केक को बनाए रखते हुए, या 10 मिनट के लिए 4,000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा एकत्र करें।

अवक्षेप को पूर्ण इथेनॉल से तीन बार धोएं और पीओएल नामित सिस्टैंच पॉलीसेकेराइड अर्क प्राप्त करने के लिए इसे 50 डिग्री पर सुखाएं।

 

उदाहरण 3: फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड अर्क तैयार करना

[0055]उदाहरण 3.

[0056]सिस्टैंच को गर्म भाटा के तहत दो बार क्रमशः 20 गुना और 15 गुना मात्रा में पानी के साथ तीन घंटे और दो घंटे के लिए निकालें।

फ़िल्टर करें, निस्पंदों को मिलाएं, और 80 डिग्री -90 डिग्री पर केंद्रित करें।

80% की अंतिम इथेनॉल सांद्रता प्राप्त करने के लिए 95% इथेनॉल का 215 एमएल जोड़ें, और 4 डिग्री पर रात भर छोड़ दें।

10 मिनट के लिए 4,000 आरपीएम पर निस्पंदन द्वारा निस्पंदन या सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा सतह पर तैरनेवाला एकत्र करें।

सिस्टैंच फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड अर्क, जिसे पीओएलएस नामित किया गया है, प्राप्त करने के लिए इसे सांद्रित करें और सुखाएं।

परीक्षण में इचिनाकोसाइड सामग्री 21.8% और वर्बास्कोसाइड सामग्री 1.2% दिखाई दी।

 

उदाहरण 4: अर्क आरई1 की तैयारी

[0057]उदाहरण 4.

[0058]डुबानासिस्टैंच डेजर्टिकोला10 दिनों के लिए कमरे के तापमान पर इसकी छह गुना मात्रा में 52% इथेनॉल डालें।

पौधे के अवशेषों को छानकर रख लें।

सूखने के बाद, अवशेष को रिफ्लक्स के तहत एक बार दो घंटे के लिए 95% इथेनॉल की छह गुना मात्रा के साथ निकालें।

फ़िल्टर करें, फ़िल्ट्रेट को संयोजित करें, 60 डिग्री पर केंद्रित करें, और सिस्टैंच फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड और उनके डेरिवेटिव, जिसे RE1 नामित किया गया है, का अर्क प्राप्त करने के लिए सुखाएं।

अर्क में इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड, आइसोवरबास्कोसाइड और 2′-एसिटाइलवरबास्कोसाइड सहित घटक शामिल हैं।

 

उदाहरण 5: अर्क आरई2 की तैयारी

[0059]उदाहरण 5.

[0060]निकालनासिस्टैंच ट्यूबुलोसाहर बार एक घंटे के लिए 75% इथेनॉल के साथ दो बार।

अवशेषों को छानकर रख लें।

सूखने के बाद, अवशेष को रिफ्लक्स के तहत एक बार दो घंटे के लिए 95% इथेनॉल की छह गुना मात्रा के साथ निकालें।

फ़िल्टर करें, फ़िल्ट्रेट को संयोजित करें, 60 डिग्री पर केंद्रित करें, और सिस्टैंच फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड और उनके डेरिवेटिव, जिसे RE2 नामित किया गया है, का अर्क प्राप्त करने के लिए सुखाएं।

अर्क में इचिनाकोसाइड, वर्बास्कोसाइड, आइसोवरबास्कोसाइड और 2′-एसिटाइलवरबास्कोसाइड सहित घटक शामिल हैं।

 

उदाहरण 6: कुल फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड अर्क तैयार करना

[0061]उदाहरण 6.

[0062]सिस्टैंच को काटें और हर बार 1.5 घंटे के लिए 75% इथेनॉल घोल के साथ दो बार निकालें।

सिस्टैंच फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड अर्क, नामित सीटीई प्राप्त करने के लिए अर्क को मिलाएं, ध्यान केंद्रित करें और सुखाएं।

परीक्षण में इचिनाकोसाइड की मात्रा 22.6% और वर्बास्कोसाइड की मात्रा 4.5% दिखाई दी।

 

उदाहरण 7: आवेदन विधि

[0063]उदाहरण 7.

[0064]उदाहरण 1 के आधार पर, यह उदाहरण एक अनुप्रयोग विधि प्रदान करता है जिसके माध्यम से वर्बास्कोसाइड एपिडर्मल सेल नवीकरण के पूर्ण त्वचा-अवरोधक मरम्मत अनुक्रम पर प्रभाव डालता है → उन्नत अंतरकोशिकीय कनेक्शन → लिपिड-मैट्रिक्स पुनःपूर्ति → हयालूरोनिक एसिड संश्लेषण → घाव भरने।

विशिष्ट अनुप्रयोग विधि इस प्रकार है.

[0065]एक पूर्व निर्धारित द्रव्यमान अंश पर सामयिक उत्पाद आधार में वर्बास्कोसाइड जोड़ें और एक तैयार उत्पाद तैयार करने के लिए समान रूप से हिलाएं।

तैयार उत्पाद को दिन में एक या दो बार त्वचा की सतह पर लगाएं।

प्रवेश के माध्यम से, वर्बास्कोसाइड कोशिका प्रसार को बढ़ावा देने और तंग जंक्शनों को मजबूत करने के लिए एपिडर्मल HaCaT कोशिकाओं पर कार्य करता है।

साथ ही, यह ACC, FASN, और N-SMase की जीन और प्रोटीन अभिव्यक्ति को बढ़ाता है, फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि को बढ़ाता है, HAS2, HAS3 और CD44 को अपग्रेड करता है, और हयालूरोनिक एसिड सामग्री को बढ़ाता है।

त्वचा की बाधा में समग्र सुधार प्राप्त करने के लिए एक से चार सप्ताह तक उपयोग जारी रखें।

[0066]विशेष रूप से, सामयिक उत्पाद में वर्बास्कोसाइड का द्रव्यमान अंश 0.01% से 5.0% तक होता है।

[0067]प्रति अनुप्रयोग 0.1-0.5 ग्राम तैयार उत्पाद का उपयोग करें और अवशोषण को बढ़ावा देने के लिए आवेदन के बाद एक से तीन मिनट तक धीरे से मालिश करें।

[0068]सामयिक उत्पाद एक चिकित्सा ड्रेसिंग, एक प्रक्रिया-पश्चात मरम्मत उत्पाद, एटोपिक जिल्द की सूजन के लिए एक सहायक उपचार उत्पाद, एक त्वचा देखभाल उत्पाद जो विशेष रूप से संवेदनशील त्वचा के लिए है, या एक गहन मॉइस्चराइजिंग और मरम्मत त्वचा देखभाल उत्पाद है।

[0069]वर्बास्कोसाइड के प्रयोग के दौरान सहायक पदार्थ भी मिलाए जा सकते हैं।

इसके अलावा, सहायक पदार्थ को ह्यूमेक्टेंट, इमल्सीफायर, प्रिजर्वेटिव, खुशबू या सुखदायक एजेंट से चुना जाता है।

सहायक-युक्त संरचना का खुराक रूप लोशन, क्रीम, जेल, सीरम या शीट-मास्क समाधान से चुना जाता है।

 

उदाहरण 8: प्रायोगिक सामग्री और उपकरण

[0070]उदाहरण 8.

[0071]उदाहरण 1 और 7 के आधार पर, आविष्कार में प्रयुक्त प्रायोगिक सामग्रियाँ इस प्रकार हैं।

[0072]प्रायोगिक कोशिकाएँ शंघाई याजी बायोटेक्नोलॉजी से खरीदी गई अमर मानव एपिडर्मल HaCaT कोशिकाएँ थीं।

कोशिकाओं को संतृप्त आर्द्रता पर 5% कार्बन डाइऑक्साइड युक्त वातावरण में 37 डिग्री पर 10% भ्रूण गोजातीय सीरम और 1% पेनिसिलिन-स्ट्रेप्टोमाइसिन के साथ उच्च ग्लूकोज डीएमईएम में संवर्धित किया गया था।

[0073]प्रायोगिक सामग्रियाँ थीं:

नेशनल इंस्टीट्यूट फॉर फूड एंड ड्रग कंट्रोल, चीन से इचिनाकोसाइड, जिसे संक्षेप में ईच कहा जाता है।

एक्सेल से भ्रूण गोजातीय सीरम, एफबीएस।

गिब्को से उच्च ग्लूकोज DMEM।

गिब्को से 0.25% ट्रिप्सिन-ईडीटीए।

बीजिंग झोंगशान गोल्डन ब्रिज बायोटेक्नोलॉजी से फॉस्फेट-बफ़र्ड खारा पाउडर।

CCK-8 ट्रांसजेन बायोटेक से सेल प्रसार/साइटोटॉक्सिसिटी परख किट।

वुहान कुसाबियो से ह्यूमन ऑक्लूडिन, ओसीएलएन, एलिसा किट।

वुहान CUSABIO से ह्यूमन क्लॉडिन-1, CLDN1, एलिसा किट।

सोलरबायो से फैटी एसिड सिंथेज़, एफएएस, गतिविधि परख किट।

वुहान CUSABIO से मानव हयालूरोनिक एसिड एलिसा किट।

अनुसंधान एवं विकास प्रणालियों से पुनः संयोजक मानव ईजीएफ प्रोटीन, वाहक-मुक्त।

अमरेस्को से डीईपीसी।

Mei5 बायोटेक्नोलॉजी से M5 HiClear DL2000 डीएनए मार्कर।

एम्बियन से ट्राइज़ोल अभिकर्मक।

एबीएम से 5X ऑल-इन-वन आरटी मास्टरमिक्स।

एवाग्रीन एक्सप्रेस 2एक्स क्यूपीसीआर मास्टरमिक्स-एबीएम से लो आरओएक्स।

ट्रांसजेन बायोटेक से ईज़ी II प्रोटीन क्वांटिटेटिव किट, बीसीए।

बोस्टर से RIPA लाइसिस बफर।

बोस्टर से प्रोटीज़ अवरोधक।

एबकैम से बकरी विरोधी खरगोश आईजीजी एच एंड एल, एचआरपी।

एबकैम से बकरी विरोधी माउस आईजीजी एच एंड एल, एचआरपी।

सोलरबायो से प्रीस्टेड प्रोटीन मार्कर।

-एम्रेस्को से मर्कैप्टोएथेनॉल।

मिलिपोर से पीवीडीएफ स्थानांतरण झिल्ली, 0.45 μm।

सांगोन बायोटेक से ग्लाइसिन।

सांगोन बायोटेक से ग्लिसरॉल।

थर्मो फिशर से सुपरसिग्नल वेस्ट पिको प्लस।

सिनो बायोलॉजिकल से बीटा-एक्टिन लोडिंग कंट्रोल एंटीबॉडी, माउस मोनोक्लोनल।

एफ़िनिटी से ACC1 एंटीबॉडी।

एफ़िनिटी से FASN एंटीबॉडी।

एफ़िनिटी से SMPD2 एंटीबॉडी।

एफ़िनिटी से हयालूरोनन सिंथेज़ 2 एंटीबॉडी, HAS2।

एफ़िनिटी से HAS3 एंटीबॉडी।

एफिनिटी से सीडी44 एंटीबॉडी।

[0074]प्रायोगिक उपकरण में शामिल हैं:

स्मार्टसेल HF-90 कार्बन डाइऑक्साइड सेल-कल्चर इनक्यूबेटर, शंघाई लिशेन साइंटिफिक इक्विपमेंट कं, लिमिटेड [上海力康仪器有限公司]।

एक ही निर्माता से HF1200LC जैविक सुरक्षा कैबिनेट।

DK-80 बेंचटॉप लो-स्पीड सेंट्रीफ्यूज, शंघाई फीगे इंस्ट्रूमेंट कंपनी लिमिटेड।

हेरेअस मल्टीफ्यूज X1R हाई-स्पीड रेफ्रिजरेटेड सेंट्रीफ्यूज, थर्मो फिशर साइंटिफिक।

एक्समार्क माइक्रोप्लेट स्पेक्ट्रोफोटोमीटर, बायो-रेड।

GL-88B भंवर मिक्सर, हैमेन क्विलिन-बेल इंस्ट्रूमेंट मैन्युफैक्चरिंग कंपनी लिमिटेड।

मॉडल 2500 जेल इमेजिंग सिस्टम, शंघाई तियानेंग।

माईसाइक्लर थर्मल साइक्लर पीसीआर उपकरण, बायो-रेड।

7500 फास्ट रियल-टाइम पीसीआर उपकरण, एबीआई।

केमिस्कोप 3000 केमिलुमिनसेंस इमेजिंग सिस्टम, शंघाई क़िनज़ियांग साइंटिफिक इंस्ट्रूमेंट कंपनी लिमिटेड।

मिनी-प्रोटीन टेट्रा सिस्टम प्रोटीन-ट्रांसफर उपकरण, बायो-रेड।

DYCZ-24DN वैद्युतकणसंचलन उपकरण, बीजिंग लियूई।

अनुवादक का नोट: ऊपर दिए गए निर्माता और उपकरण विवरण आपूर्ति किए गए स्रोत का अनुसरण करते हैं; कैटलॉग विवरण स्वतंत्र रूप से सत्यापित नहीं थे।

 

 

 

उदाहरण 9: प्रायोगिक विधियाँ

[0075]उदाहरण 9.

[0076]उदाहरण 1-8 के आधार पर, आविष्कार में प्रयुक्त प्रायोगिक विधियाँ इस प्रकार थीं।

CCK-8 कोशिका प्रसार के लिए परख

[0077]5×1045 \\ गुना 10^45×104 सेल/एमएल के घनत्व पर संपूर्ण कल्चर माध्यम में HaCaT कोशिकाओं का एकल-कोशिका निलंबन तैयार करें।

कोशिकाओं को 96-वेल प्लेट में 100 μL प्रति कुएं पर रखें।

कोशिकाओं को 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री पर 24 घंटे तक संलग्न रहने की अनुमति देने के बाद, संस्कृति माध्यम को हटा दें और विभिन्न परीक्षण पदार्थों को प्रशासित करें। एक रिक्त नियंत्रण समूह शामिल करें, जिसमें n=5n=5n=5.

48 घंटे के उपचार के बाद, माध्यम को हटा दें और प्रत्येक कुएं में 100 μL ताजा तैयार 10% CCK-8 घोल डालें।

एक घंटे के लिए सेल-कल्चर इनक्यूबेटर में इनक्यूबेशन जारी रखें, फिर माइक्रोप्लेट रीडर का उपयोग करके 450 एनएम पर ऑप्टिकल घनत्व को मापें।

फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि परख

[0078]5×1045 \\ गुना 10^45×104 सेल/एमएल के घनत्व पर संपूर्ण कल्चर माध्यम में HaCaT कोशिकाओं का एकल-कोशिका निलंबन तैयार करें और कोशिकाओं को कल्चर फ्लास्क में डालें।

कोशिकाओं को 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री पर 24 घंटे तक संलग्न रहने की अनुमति देने के बाद, संस्कृति माध्यम को हटा दें और विभिन्न परीक्षण पदार्थों को प्रशासित करें।

एक रिक्त नियंत्रण समूह और एक सकारात्मक-नियंत्रण समूह को शामिल करें जिसका उपचार पुनः संयोजक मानव एपिडर्मल वृद्धि कारक, आरएचईजीएफ, 20 एनजी/एमएल, एन =3 एन=3 एन =3. के साथ किया गया हो।

उपचार के 48 घंटों के बाद, कोशिकाओं को इकट्ठा करें और परख-किट निर्देशों के अनुसार फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि को मापें।

हयालूरोनिक एसिड सामग्री परख

[0079]5×1045 \\ गुना 10^45×104 सेल/एमएल के घनत्व पर संपूर्ण कल्चर माध्यम में HaCaT कोशिकाओं का एकल-कोशिका निलंबन तैयार करें और कोशिकाओं को कल्चर फ्लास्क में डालें।

कोशिकाओं को 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री पर 24 घंटे तक संलग्न रहने की अनुमति देने के बाद, संस्कृति माध्यम को हटा दें और विभिन्न परीक्षण पदार्थों को प्रशासित करें।

एक रिक्त नियंत्रण समूह और 20 एनजी/एमएल पर आरएचईजीएफ से उपचारित एक सकारात्मक-नियंत्रण समूह को एन=3एन=3एन=3. के साथ शामिल करें।

उपचार के 48 घंटे के बाद, सेल-कल्चर सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा करें और परख-किट निर्देशों के अनुसार हयालूरोनिक एसिड सामग्री को मापें।

मात्रात्मक रिवर्स-ट्रांसक्रिप्शन पीसीआर

[0080]5×1045 \\ गुना 10^45×104 कोशिकाओं/एमएल के घनत्व पर पूर्ण संस्कृति माध्यम में HaCaT कोशिकाओं का एकल-कोशिका निलंबन तैयार करें और कोशिकाओं को छह-अच्छी प्लेटों में बीज दें।

कोशिकाओं को 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री पर 24 घंटे तक संलग्न रहने की अनुमति देने के बाद, संस्कृति माध्यम को हटा दें और विभिन्न परीक्षण पदार्थों को प्रशासित करें।

एक रिक्त नियंत्रण समूह और 20 एनजी/एमएल पर आरएचईजीएफ से उपचारित एक सकारात्मक-नियंत्रण समूह को एन=3एन=3एन=3. के साथ शामिल करें।

48 घंटों के उपचार के बाद, सतह पर तैरनेवाला हटा दें और कोशिकाओं को अलग करने और लीज़ करने के लिए प्रत्येक कुएं में 1 एमएल ट्राइज़ोल मिलाएं, यह सुनिश्चित करते हुए कि अभिकर्मक कोशिका परत को कवर करता है।

कोशिकाओं के मुक्त होने तक कल्चर पोत को बार-बार हिलाएं, और सामग्री को 1.5 एमएल माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूब में स्थानांतरित करें।

कुल आरएनए निकालें और एसीसी, एफएएसएन, एन-एसएमएएसई, एचएएस2, एचएएस3 और सीडी44 की अभिव्यक्ति निर्धारित करने के लिए क्यूआरटी-पीसीआर का उपयोग करें।

वेस्टर्न ब्लॉटिंग

[0081]5×1045 \\ गुना 10^45×104 सेल/एमएल के घनत्व पर संपूर्ण कल्चर माध्यम में HaCaT कोशिकाओं का एकल-कोशिका निलंबन तैयार करें और कोशिकाओं को कल्चर फ्लास्क में डालें।

कोशिकाओं को 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री पर 24 घंटे तक संलग्न रहने की अनुमति देने के बाद, संस्कृति माध्यम को हटा दें और विभिन्न परीक्षण पदार्थों को प्रशासित करें।

एक रिक्त नियंत्रण समूह और 20 एनजी/एमएल पर आरएचईजीएफ से उपचारित एक सकारात्मक-नियंत्रण समूह को एन=3एन=3एन=3. के साथ शामिल करें।

48 घंटे के उपचार के बाद, कोशिकाओं को इकट्ठा करें।

कुल प्रोटीन निकालें और ACC, FASN, N-SMase, HAS2, HAS3, और CD44 की अभिव्यक्ति निर्धारित करने के लिए वेस्टर्न ब्लॉटिंग का उपयोग करें।

टाइट-जंक्शन प्रोटीन अभिव्यक्ति का आकलन

[0082]5×1045 \\ गुना 10^45×104 सेल/एमएल के घनत्व पर संपूर्ण कल्चर माध्यम में HaCaT कोशिकाओं का एकल-कोशिका निलंबन तैयार करें और कोशिकाओं को कल्चर फ्लास्क में डालें।

कोशिकाओं को 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री पर 24 घंटे तक संलग्न रहने की अनुमति देने के बाद, संस्कृति माध्यम को हटा दें और विभिन्न परीक्षण पदार्थों को प्रशासित करें।

एक रिक्त नियंत्रण समूह शामिल करें, जिसमें n=3n ​​= 3n=3.

उपचार के 48 घंटे के बाद, सेल लाइसेट्स इकट्ठा करें और किट के निर्देशों के अनुसार एलिसा का उपयोग करके ऑक्लूडिन और क्लॉडिन-1 को मापें।

सेल स्क्रैच परख

[0083]5×1055 \\ गुना 10^55×105 सेल/एमएल के घनत्व पर संपूर्ण कल्चर माध्यम में HaCaT कोशिकाओं का एकल-कोशिका निलंबन तैयार करें।

24-वेल प्लेट में प्रति कुएं 500 μL बीज डालें।

सेल अटैचमेंट के बाद, कोशिकाओं को एक खाली नियंत्रण समूह, भ्रूण गोजातीय सीरम के साथ इलाज किए गए एक सकारात्मक-नियंत्रण समूह और परीक्षण-पदार्थ समूहों में विभाजित करके उपचार का प्रबंधन करें।

48 घंटे तक उपचार करें।

उपचार के बाद, पिपेट टिप का उपयोग करके धीरे से एक सीधी खरोंच बनाएं।

सकारात्मक-नियंत्रण समूह को छोड़कर सभी समूहों में माध्यम को सीरम-मुक्त माध्यम से बदलें।

0, 24 और 48 घंटों पर खरोंच वाले क्षेत्रों की तस्वीर लें।

स्क्रैच क्षेत्र की गणना करने और सेल माइग्रेशन क्षमता का आकलन करने के लिए ImageJ का उपयोग करें।

 

उदाहरण 10: नमी-प्रतिधारण मूल्यांकन

[0084]उदाहरण 10.

[0085]Ver, Ech, या ग्लिसरीन युक्त सीरम के मॉइस्चराइजिंग प्रदर्शन का मूल्यांकन करने के लिए इन विट्रो ग्रेविमेट्रिक विधि का उपयोग किया गया था।

पूर्व-उपचारित नमूना 1 की निर्दिष्ट मात्रा का वजन करें, जिसमें 2% वेर शामिल हो; नमूना 2, जिसमें 2% ईसीएच शामिल है; और सकारात्मक नियंत्रण, जिसमें 5% ग्लिसरीन होता है।

नमूनों को स्थिर तापमान, स्थिर आर्द्रता कक्ष में 25 डिग्री और 50% सापेक्ष आर्द्रता पर संग्रहित करें।

नमूनों को अलग-अलग समय बिंदुओं पर तौलें और नमी-अवधारण वक्र बनाएं।

[0086]नमी-धारण दर की गणना इस प्रकार की जाती है:

नमी बनाए रखने की दर (%) (%)=M1​−M0​M2​−M0​×100%

[0087]कहाँ:

[0088]M0M_0M0​ खाली प्लेट का द्रव्यमान ग्राम में है।

[0089]M1M_1M1 नमूना जोड़ने के बाद कांच की प्लेट का द्रव्यमान, ग्राम में है।

[0090]M2M_2M2 एक डेसीकेटर में कई घंटों तक भंडारण के बाद का द्रव्यमान, ग्राम में है।

अनुवादक का नोट: अनुच्छेद [0085] एक नियंत्रित-तापमान, नियंत्रित-आर्द्रता कक्ष में भंडारण का वर्णन करता है, जबकि [0090] एक डेसीकेटर को संदर्भित करता है। दोनों विवरण स्रोत से लिए गए हैं।

 

प्रायोगिक परिणाम

[0091]इस उदाहरण के प्रायोगिक परिणाम इस प्रकार हैं.

HaCaT सेल प्रसार पर प्रभाव

[0092]जैसा कि चित्र 2 में दिखाया गया है, विभिन्न सिस्टैंच अर्क का HaCaT सेल व्यवहार्यता पर अलग-अलग प्रभाव पड़ा।

वेर और पीओएल ने पी के साथ सेल व्यवहार्यता में उल्लेखनीय वृद्धि की<0.05P < 0.05P<0.05, and Ver produced the highest viability.

फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि पर प्रभाव

[0093]जैसा कि चित्र 3 में दिखाया गया है, स्ट्रेटम कॉर्नियम में अंतरकोशिकीय लिपिड त्वचा की "ईंट-और-मोर्टार" संरचना का मुख्य "मोर्टार" घटक हैं।

सेरामाइड्स, कोलेस्ट्रॉल और मुक्त फैटी एसिड विशिष्ट अनुपात में एक घनी लैमेलर बाइलेयर संरचना बनाते हैं।

सामान्य लिपिड संश्लेषण को बनाए रखने से इस संरचना को मजबूत किया जा सकता है, पानी की कमी को रोका जा सकता है, बाहरी क्षति का विरोध किया जा सकता है, त्वचा के माइक्रोबायोम का संतुलन बनाए रखा जा सकता है और आत्म-मरम्मत को बढ़ावा दिया जा सकता है।

इस प्रकार यह उनके स्रोत पर सूखापन, संवेदनशीलता और कम त्वचा-रक्षा क्षमता को संबोधित कर सकता है।

[0094]फैटी एसिड सिंथेज़ को एक कोर दर-सीमित एंजाइम और त्वचा लिपिड संश्लेषण को विनियमित करने वाले एक केंद्रीय आपूर्ति इंजन के रूप में वर्णित किया गया है।

इसका मुख्य कार्य एसिटाइल-सीओए और मैलोनील-सीओए से पामिटिक एसिड, सी16:0 के संश्लेषण को उत्प्रेरित करना है। पामिटिक एसिड को त्वचा में प्रमुख अंतर्जात लंबी-श्रृंखला संतृप्त फैटी एसिड के रूप में वर्णित किया गया है।

पामिटिक एसिड के दो कार्य हैं।

सबसे पहले, एक मौलिक संरचनात्मक निर्माण खंड के रूप में, इसका उपयोग सीधे स्ट्रेटम-कॉर्नियम बैरियर लिपिड के संश्लेषण में किया जाता है, जिसमें सेरामाइड्स और मुक्त फैटी एसिड शामिल हैं, जो लैमेलर बाइलेयर गठन के लिए सामग्री आधार प्रदान करते हैं।

दूसरा, एक महत्वपूर्ण अग्रदूत और सिग्नलिंग अणु के रूप में, इसे ELOVL1 जैसे डाउनस्ट्रीम एलॉन्गेस द्वारा बहुत लंबी-श्रृंखला फैटी एसिड में संसाधित किया जा सकता है। बाधा अखंडता के लिए ये विशिष्ट फैटी एसिड आवश्यक हैं।

तदनुसार, फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि सीधे त्वचा के अवरोध लिपिड के उत्पादन के लिए उपलब्ध कच्चे माल की आपूर्ति निर्धारित करती है।

एपिडर्मल लिपिड संश्लेषण को बढ़ावा देने के लिए इसके कार्य का अपग्रेडेशन एक प्रारंभिक और महत्वपूर्ण कदम है और इस प्रकार भौतिक त्वचा बाधा की मरम्मत और मजबूती होती है, जो अंततः नमी बनाए रखने और सुरक्षा का समर्थन करती है।

[0095]डेटा से पता चला कि सकारात्मक नियंत्रण rhEGF और Ver ने P के साथ फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि में काफी वृद्धि की है<0.05P < 0.05P<0.05.

पीओएल, पीओएलएस, आरई1 और आरई2 ने फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि में वृद्धि नहीं की।

Although RE2 increased fatty acid synthase activity, the difference was not statistically significant, with P>0.05P > 0.05P>0.05.

अनुवादक का नोट: स्रोत पहले उन सामग्रियों में RE2 को शामिल करता है जिनसे गतिविधि में वृद्धि नहीं हुई, फिर RE2 के लिए एक गैर-महत्वपूर्ण वृद्धि की रिपोर्ट करता है। यह विसंगति बरकरार है.

 

हयालूरोनिक एसिड सामग्री पर प्रभाव

[0096]जैसा कि चित्र 4 में दिखाया गया है, हयालूरोनिक एसिड त्वचा में प्राकृतिक रूप से पाया जाने वाला एक पॉलीसेकेराइड है जिसमें मजबूत जल-बाध्यकारी क्षमता होती है, जिसे स्रोत में मुख्य रूप से डर्मिस और स्ट्रेटम कॉर्नियम में मौजूद बताया गया है।

हयालूरोनिक एसिड की मात्रा बढ़ाने से नमी को गहरे स्तर पर बनाए रखा जा सकता है, स्वस्थ त्वचीय संरचना बनाए रखी जा सकती है, एंटीऑक्सीडेंट और सूजन-रोधी प्रभाव प्रदान किया जा सकता है, घाव भरने और मरम्मत को बढ़ावा दिया जा सकता है, और स्ट्रेटम-कॉर्नियम फ़ंक्शन में सुधार किया जा सकता है।

इन प्रभावों को भीतर से जलयोजन, परिपूर्णता और लचीलापन पैदा करने के रूप में वर्णित किया गया है।

[0097]डेटा से पता चला कि सकारात्मक नियंत्रण rhEGF, Ver, और RE2 ने पी के साथ हयालूरोनिक एसिड सामग्री में काफी वृद्धि की है<0.05P < 0.05P<0.05.

पीओएल, पीओएलएस और आरई1 ने हयालूरोनिक एसिड सामग्री में वृद्धि नहीं की।

 

अर्क वर्गों और शुद्ध वर्बस्कोसाइड की तुलना

[0098]सिस्टैंच में मुख्य रूप से फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड और पॉलीसेकेराइड होते हैं।

पॉलीसेकेराइड अर्क, पीओएल की गतिविधियाँ; फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड अर्क, POLS, RE1, और RE2; और वर्बास्कोसाइड, वेर, की तुलना इसलिए की गई।

चित्र 2-4 के परिणाम दर्शाते हैं कि अलग-अलग तरीकों से तैयार किए गए सिस्टैंच फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड अर्क और व्यक्तिगत यौगिक ने HaCaT सेल प्रसार को बढ़ावा देने, फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि को बढ़ाने और हायल्यूरोनिक एसिड सामग्री को बढ़ाने में विभिन्न गतिविधियों का प्रदर्शन किया।

केवल Ver ने तीनों क्षेत्रों में गतिविधि प्रदर्शित की, जैसा कि तालिका 1 में संक्षेपित किया गया है।

[0099]–[0101] ये पैराग्राफ संख्याएँ और तालिका 1 की सामग्री आपूर्ति किए गए स्रोत में मौजूद नहीं थीं। लुप्त सामग्री का कोई अनुवाद या पुनर्निर्माण संभव नहीं है।

तालिका 1. विभिन्न नमूनों की जैव सक्रियता का सारांश

अनुक्रमणिका	रिक्त नियंत्रण	सकारात्मक नियंत्रण	पोल	परास्नातक	1 रुपया	RE2	वर
सेल व्यवहार्यता (%)	100 ± 7.008	/	119.008 ± 7.379*	105.312 ± 6.494	85.851 ± 8.381	95.234 ± 10.065	128.894 ± 9.528*
एफएएस गतिविधि (यू/एमजी प्रोट)	2.712 ± 0.419	18.488 ± 4.56*	3.786 ± 1.715	2.399 ± 0.717	2.145 ± 0.889	9.34 ± 10.756	10.63 ± 2.228*
एचए सामग्री (एनजी/एमएल)	10.908 ± 0.968	19.925 ± 4.306*	6.881 ± 2.411	6.321 ± 1.021	6.53 ± 1.342	16 ± 2.531*	17.86 ± 3.27*

 

सीटीई, इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड की आगे तुलना

[0102]जैसा कि चित्र 5 में दिखाया गया है, सिस्टैंच में प्रमुख फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड में इचिनाकोसाइड और वर्बास्कोसाइड शामिल हैं।

सिस्टैंच टोटल फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड अर्क, सीटीई के प्रभाव, जिसमें 22.6% इचिनाकोसाइड और 4.5% वर्बास्कोसाइड होता है; इचिनाकोसाइड, इच; और HaCaT सेल प्रसार पर वर्बास्कोसाइड, Ver की तुलना आगे की गई।

[0103]डेटा से पता चला कि CTE, Ech, और Ver सभी ने HaCaT सेल प्रसार को बढ़ावा दिया।

सीटीई और वेर ने त्वचा कोशिकाओं पर सुरक्षात्मक प्रभाव का सुझाव देते हुए सबसे मजबूत प्रभाव उत्पन्न किया।

फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि पर आगे के प्रभाव

[0104]जैसा कि चित्र 6 में दिखाया गया है, फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि पर प्रभाव इस प्रकार थे।

[0105]डेटा से पता चला कि सकारात्मक नियंत्रण rhEGF, Ech, और Ver ने P के साथ फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि में काफी वृद्धि की है<0.05P < 0.05P<0.05.

सीटीई ने फैटी एसिड सिंथेज़ गतिविधि में वृद्धि नहीं की।

 

फैटी एसिड संश्लेषण से जुड़े जीन और प्रोटीन की अभिव्यक्ति

[0106]चित्र 7-9 फैटी एसिड संश्लेषण से जुड़े जीन और प्रोटीन की अभिव्यक्ति पर प्रभाव दिखाते हैं।

[0107]एसीसी और एफएएसएन को दर-सीमित एंजाइम और लिपिड उपचय के मुख्य इंजन के रूप में वर्णित किया गया है।

साथ में, वे पामिटिक एसिड सहित लंबी-श्रृंखला फैटी एसिड की पीढ़ी को उत्प्रेरित करते हैं, जो सेरामाइड्स जैसे प्रमुख अवरोधक लिपिड के संश्लेषण के लिए आवश्यक कच्चे माल प्रदान करते हैं।

एन-एसएमएज़ दोहरी भूमिका के साथ लिपिड ब्रेकडाउन और तनाव संकेतन का एक प्रमुख आरंभकर्ता है।

यह चोट के दौरान सक्रिय होता है और सिग्नलिंग सेरामाइड उत्पन्न करने, सूजन और एपोप्टोसिस को ट्रिगर करने और सामान्य लिपिड संश्लेषण को दबाने के लिए स्फिंगोमाइलिन को हाइड्रोलाइज करता है।

हालाँकि, सामान्य कोशिकाओं में, लिपिड चयापचय में इसकी नियामक भूमिका होती है।

[0108]जैसा कि चित्र 7-9 में दिखाया गया है, क्यूपीसीआर और वेस्टर्न ब्लॉट परिणामों ने संकेत दिया कि Ver, rhEGF की तरह, P के साथ ACC, FASN और N-SMase की जीन और प्रोटीन अभिव्यक्ति को महत्वपूर्ण रूप से नियंत्रित करता है।<0.05P < 0.05P<0.05, and the effects were comparable.

नतीजे बताते हैं कि Ver झिल्ली निर्माण, ऊर्जा भंडारण, या स्राव के लिए सेलुलर लिपिड संश्लेषण को विनियमित करने के लिए एसीसी और एफएएसएन को अपग्रेड करता है।

उसी समय, एन-एसएमएज़ का अपग्रेडेशन स्फिंगोलिपिड चयापचय चक्र को सक्रिय कर सकता है।

उत्पादित सेरामाइड्स केवल तनाव संकेत नहीं हैं। सामान्य शारीरिक स्थितियों के तहत, वे अन्य जटिल स्फिंगोलिपिड्स, जैसे ग्लाइकोस्फिंगोलिपिड्स, या गतिशील झिल्ली रीमॉडलिंग के संश्लेषण के लिए भी महत्वपूर्ण अग्रदूत होते हैं।

इस प्रकार, इन तीन जीनों और प्रोटीनों का समन्वित अपग्रेडेशन समग्र सेलुलर एनाबॉलिक गतिविधि और झिल्ली-रीमॉडलिंग क्षमता को बढ़ाता है।

 

हयालूरोनिक एसिड सामग्री पर आगे के प्रभाव

[0109]जैसा कि चित्र 10 में दिखाया गया है, डेटा ने संकेत दिया कि आरएचईजीएफ, सीटीई, ईसीएच और वेर सभी ने पी के साथ हयालूरोनिक एसिड सामग्री में उल्लेखनीय वृद्धि की है।<0.05P < 0.05P<0.05.

प्रभाव का क्रम CTE, उसके बाद Ver, उसके बाद Ech था।

 

हयालूरोनिक एसिड संश्लेषण से जुड़े जीन और प्रोटीन की अभिव्यक्ति

[0110]जैसा कि चित्र 11-13 में दिखाया गया है, HAS2, HAS3, और CD44 HaCaT कोशिकाओं में हयालूरोनिक एसिड चयापचय में एक "संश्लेषण-संवेदन-प्रतिक्रिया" फीडबैक लूप बनाते हैं।

HAS2 और HAS3 मुख्य उत्प्रेरक संश्लेषण एंजाइम हैं।

HAS2 मुख्य रूप से उच्च-आणविक-भार वाले हयालूरोनिक एसिड का उत्पादन करता है और त्वचा के होमियोस्टैसिस और सूजन-रोधी प्रभावों को बनाए रखने से जुड़ा है।

HAS3 कम-आणविक-भार वाले हयालूरोनिक एसिड का उत्पादन करता है और कोशिका प्रवास और प्रसार सहित प्रक्रियाओं में अधिक सीधे भाग लेता है।

CD44 हयालूरोनिक एसिड के लिए प्रमुख कोशिका-सतह रिसेप्टर है।

यह न केवल हयालूरोनिक एसिड से जुड़े इंट्रासेल्युलर और बाह्यकोशिकीय सिग्नल ट्रांसमिशन में मध्यस्थता करता है, बल्कि एंडोसाइटोसिस और रीसाइक्लिंग के माध्यम से हयालूरोनिक एसिड को गतिशील रूप से नियंत्रित करता है और बदले में, HAS2 और HAS3 अभिव्यक्ति और गतिविधि को नियंत्रित करता है।

[0111]जैसा कि चित्र 11-13 में दिखाया गया है, क्यूपीसीआर और वेस्टर्न ब्लॉट परिणामों ने संकेत दिया कि Ver, rhEGF की तरह, P के साथ HAS2, HAS3 और CD44 की जीन और प्रोटीन अभिव्यक्ति को महत्वपूर्ण रूप से नियंत्रित करता है।<0.05P < 0.05P<0.05.

HAS2, HAS3 और CD44 जीन अभिव्यक्ति पर Ver का नियामक प्रभाव rhEGF की तुलना में अधिक था।

परिणामों से संकेत मिलता है कि Ver संपूर्ण हयालूरोनिक एसिड "संश्लेषण-असेंबली-सिग्नल ट्रांसमिशन" प्रक्रिया को नियंत्रित करने के लिए HAS2, HAS3 और CD44 को नियंत्रित करता है, जो एपिडर्मल हाइड्रेशन, मरम्मत और बाधा कार्य में योगदान देता है।

टाइट-जंक्शन प्रोटीन अभिव्यक्ति पर प्रभाव

[0112]त्वचा के लिपिड और हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन को बनाए रखने को HaCaT कोशिकाओं के बीच टाइट-जंक्शन प्रोटीन के लिए मौलिक, सहक्रियात्मक समर्थन और स्थिरीकरण प्रदान करने के रूप में वर्णित किया गया है।

पर्याप्त लिपिड केराटिनोसाइट्स को पूर्ण, संगठित अंतरकोशिकीय लिपिड बाईलेयर बनाने की अनुमति देते हैं।

इन संरचनाओं को न केवल बाधा के भौतिक ढांचे के रूप में वर्णित किया गया है, बल्कि टाइट-जंक्शन प्रोटीन असेंबली और एंकरिंग के लिए एक स्थिर, हाइड्रोफोबिक संरचनात्मक वातावरण भी बताया गया है।

साथ ही, हयालूरोनिक एसिड द्वारा बनाए रखा गया अनुकूल जलयोजन राज्य सामान्य केराटिनोसाइट चयापचय और सिग्नलिंग सुनिश्चित करने में मदद करता है।

CD44 जैसे रिसेप्टर्स से जुड़े मार्गों के माध्यम से, हयालूरोनिक एसिड अप्रत्यक्ष रूप से टाइट-जंक्शन प्रोटीन अभिव्यक्ति और वितरण को भी नियंत्रित करता है।

साथ में, लिपिड और हयालूरोनिक एसिड संरचनात्मक स्थिरता और माइक्रोएन्वायरमेंटल होमियोस्टैसिस के संबंधित दृष्टिकोण से टाइट-जंक्शन गठन और रखरखाव के लिए आवश्यक भौतिक और जैव रासायनिक नींव प्रदान करते हैं।

वे इस प्रकार भौतिक अंतरकोशिकीय कनेक्शन और समग्र बाधा अखंडता को मजबूत करते हैं।

[0113]उपरोक्त परिणामों से संकेत मिलता है कि Ver ने त्वचा के लिपिड और हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन को बढ़ावा देने में सबसे मजबूत गतिविधि प्रदर्शित की है।

अंतरकोशिकीय तंग जंक्शनों पर इसके प्रभावों की आगे की जांच से पता चला कि सीटीई, ईसीएच और वेर सभी ने पी के साथ तंग-जंक्शन प्रोटीन क्लॉडिन -1 की अभिव्यक्ति को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ावा दिया।<0.05P < 0.05P<0.05, as shown in Figure 14.

जैसा कि चित्र 15 में दिखाया गया है, केवल ईच और वेर ने ऑक्लूडिन अभिव्यक्ति को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ावा दिया।

Ver का प्रभाव P के साथ Ech की तुलना में काफी अधिक था<0.05P < 0.05P<0.05.

यह त्वचा के लिपिड और हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन को बढ़ावा देने में वेर की सबसे मजबूत गतिविधि के अनुरूप था।

 

घाव भरने पर प्रभाव

[0114]जैसा कि चित्र 16-17 में दिखाया गया है, HAS3 सेल प्रवास और प्रसार सहित प्रक्रियाओं में सीधे भाग लेता है।

CD44 हयालूरोनिक एसिड से जानकारी को कोशिकाओं में पहुंचाता है और अंततः कोशिका प्रवास, प्रसार और जलयोजन को नियंत्रित करता है, घाव भरने, त्वचा को मॉइस्चराइज करने और बाधा होमियोस्टैसिस में केंद्रीय भूमिका निभाता है।

पिछले प्रयोगों से पता चला है कि वर्बास्कोसाइड ने HAS3 और CD44 अभिव्यक्ति को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ावा दिया है।

इसलिए घाव भरने को बढ़ावा देने की इसकी क्षमता की आगे जांच की गई।

[0115]जैसा कि चित्र 16-17 में दिखाया गया है, परिणामों ने संकेत दिया कि सीटीई, ईसीएच और वेर सभी ने घाव भरने को बढ़ावा दिया।

हालाँकि, केवल Ver ने 24 घंटों में महत्वपूर्ण प्रचार प्रभाव दिखाया।

इसने HAS3 जीन और प्रोटीन अभिव्यक्ति के महत्वपूर्ण प्रचार के अनुरूप, सबसे मजबूत घाव-उपचार-प्रचार गतिविधि का प्रदर्शन किया।

संपादकीय योग्यता: इस परिणाम के लिए प्रदान की गई प्रायोगिक विधि एक सेल स्क्रैच परख है। "घाव भरना" स्रोत में प्रयुक्त शब्दावली है और इसकी व्याख्या यहां प्रदर्शित नैदानिक ​​​​परिणाम के रूप में नहीं की जानी चाहिए।

 

फॉर्मूलेशन का नमी-धारण प्रदर्शन

[0116]जैसा कि चित्र 18 में दिखाया गया है, त्वचा के लिए मॉइस्चराइजिंग प्रदर्शन का मूल्यांकन करने के लिए नमी-प्रतिधारण वक्रों के रुझानों से नमूना नमी-धारण क्षमता का मूल्यांकन किया गया था।

डेटा से पता चला कि नमूना 1 का नमी-धारण वक्र नमूना 2 और सकारात्मक नियंत्रण से ऊपर था।

25 डिग्री और 50% सापेक्ष आर्द्रता की स्थितियों के तहत, नमूना 1 में नमूना 2 और 5% ग्लिसरीन नियंत्रण की तुलना में बेहतर मॉइस्चराइजिंग प्रदर्शन था, जो सबसे मजबूत मॉइस्चराइजिंग प्रदर्शन का संकेत देता है।

नमूना 1 में Ver शामिल है, और नमूना 2 में Ech शामिल है।

स्रोत के अनुसार, इन परिणामों से संकेत मिलता है कि, जब उत्पादों में शामिल किया जाता है, तो Ver में Ech की तुलना में बेहतर एकरूपता और मॉइस्चराइजिंग गतिविधि होती है, जैसा कि तालिका 2 में संक्षेपित किया गया है।

[0117]तालिका 2. विभिन्न नमूनों की गतिविधियों का सारांश।

तालिका सामग्री आपूर्ति किए गए स्रोत में शामिल नहीं थी।

[0118]नोट: [आपूर्ति किए गए पाठ में महत्व प्रतीक को पुन: प्रस्तुत नहीं किया गया था।] रिक्त नियंत्रण समूह की तुलना में, पी<0.05P < 0.05P<0.05.

 

प्रकटीकरण में प्रस्तुत समग्र व्याख्या

[0119]पूर्वगामी परिणामों से संकेत मिलता है कि वर्बास्कोसाइड एक पूर्ण, बंद-लूप त्वचा-अवरोध मरम्मत तंत्र को सटीक रूप से सक्रिय करके उत्कृष्ट मॉइस्चराइजिंग गतिविधि प्रदर्शित करता है।

यह सबसे पहले एपिडर्मल सेल नवीनीकरण और व्यवस्थित भेदभाव में तेजी लाने के लिए बेसल परत पर कार्य करता है, जिससे बाधा निर्माण के लिए पर्याप्त सेलुलर बिल्डिंग ब्लॉक उपलब्ध होते हैं।

इसके बाद यह केराटिनोसाइट्स के बीच तंग जंक्शनों और डेसमोसोमल संरचनाओं को मजबूत करने, कोशिकाओं के बीच भौतिक एंकरिंग को मजबूत करने और बाधा घनत्व और यांत्रिक शक्ति को बढ़ाने को बढ़ावा देता है।

साथ ही, यह लिपिड चयापचय के प्रमुख एंजाइमों को प्रभावी ढंग से सक्रिय करता है और पानी के नुकसान को रोकने के लिए "ईंटों" के बीच "मोर्टार" रिक्त स्थान को भरकर, अंतरकोशिकीय लिपिड मैट्रिक्स को फिर से भर देता है।

अंत में, हयालूरोनिक एसिड सिंथेज़ अभिव्यक्ति को अपग्रेड करके, यह एक साथ डर्मिस और एपिडर्मिस में हयालूरोनिक एसिड सामग्री को बढ़ाता है, पानी की पर्याप्त मात्रा को कैप्चर करता है और बनाए रखता है।

यह स्रोत पर नवीकरण, संरचनात्मक सुदृढीकरण, मैट्रिक्स पुनःपूर्ति और जल भंडारण को शामिल करते हुए एक पूर्ण कार्यात्मक लूप बनाता है।

इस प्रकार यह "कोशिका प्रसार को बढ़ावा देने → भौतिक अंतरकोशिकीय कनेक्शन को मजबूत करने → लिपिड और हाइलूरोनिक एसिड उत्पादन को बढ़ावा देने → घाव भरने को बढ़ावा देने" का एक बंद-लूप अनुक्रम प्राप्त कर सकता है।

स्रोत का निष्कर्ष है कि यह सिस्टैंच के इचिनाकोसाइड और आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले ह्यूमेक्टेंट ग्लिसरीन की तुलना में बेहतर अनुप्रयोग प्रभाव पैदा करता है और इसका उपयोग कार्यात्मक त्वचा देखभाल और सामयिक उत्पादों में त्वचा-सुरक्षात्मक एजेंट के रूप में किया जा सकता है।

[0120]उपरोक्त विवरण केवल आविष्कार के विशिष्ट अवतार हैं।

आविष्कार के संरक्षण का दायरा इन अवतारों तक सीमित नहीं है।

कोई भी परिवर्तन या प्रतिस्थापन जो कला में कुशल व्यक्ति आविष्कार में प्रकट तकनीकी दायरे के भीतर आसानी से सोच सकता है, आविष्कार के संरक्षण के दायरे में आएगा।

तदनुसार, आविष्कार की सुरक्षा का दायरा दावों द्वारा निर्धारित किया जाएगा।