प्राकृतिक एंटी-एजिंग कॉस्मेटिक्स में बायोटेक्नोलॉजिकल सामग्री के रूप में साइनोबैक्टीरिया सेकेंडरी मेटाबोलाइट्स
Aug 24, 2022
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2.3.जैविक गतिविधियां
2.3.1.कट्टरपंथी सफाई गतिविधि
सुपरऑक्साइड आयन रेडिकल मानव शरीर के लिए अत्यधिक महत्व के साथ एक शारीरिक मुक्त कण है। जब एरोबिक श्वसन के दौरान इस आरओएस का अधिक उत्पादन होता है, या जब अंतर्जात विषहरण तंत्र विफल हो जाता है या अपर्याप्त होता है, तो गंभीर हानिकारक प्रभावों के साथ ऑक्सीडेटिव क्षति का खतरा बढ़ जाता है। इस अर्थ में, ओज* के हानिकारक प्रभावों को रोकने के लिए तंत्र खोजना न केवल सौंदर्य प्रसाधनों के क्षेत्र में बल्कि रोगों की एक विस्तृत श्रृंखला के सुधार और रोकथाम पर विचार करने में भी महत्वपूर्ण है। O2 "सायनोबैक्टीरिया के अर्क का मैला ढोने वाला व्यवहार चित्र 1 में प्रदर्शित किया गया है, और IC मानों को तालिका 6 में संक्षेपित किया गया है।


जलीय अर्क ओज़ * में काफी अधिक प्रभावी थे - एसीटोन के अर्क (तालिका 6) की तुलना में मैला ढोना और एक खुराक पर निर्भर गतिविधि (चित्रा 1) प्रस्तुत की, जिसमें मीठे पानी के उपभेद समुद्री उपभेदों से बाहर खड़े थे। सेफलोथोरैक्स लैकस्ट्रिस LEGE 15493 सबसे प्रभावी स्ट्रेन था, जो सबसे कम ICso मान प्रस्तुत करता था (65.5 कुरूप सूखा अर्क/एमएल, पी<0.05), followed="" by="" leptolyngbya="" boryana="" lege="" 15486="" and="" nodosilinea="" nodulosa="" lege="" 06104.="" leptolyngbya="" cf.="" ectocarpi="" lege="" 11479="" was="" the="" only="" strain="" that="" did="" not="" reach="" the="" ic5o="" for="" the="" aqueous="" extract="" (table="" 6).="" on="" the="" other="" hand,="" the="" acetone="" extract="" of="" this="" strain="" was="" the="" most="" effective="" in="" o2*-="">0.05),>

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विभिन्न साइनोबैक्टीरिया के बीच एंटीऑक्सीडेंट क्षमताओं की तुलना लागू विभिन्न तरीकों के कारण चुनौतीपूर्ण है। मोरोन और सहकर्मियों ने विभिन्न साइनोबैक्टीरिया उपभेदों [26] के इथेनॉल (70 प्रतिशत वी/वी) अर्क की कट्टरपंथी मैला ढोने की क्षमता का मूल्यांकन किया, सबसे कम आईसीएसओ मूल्य 822.70 ug/mL Phormidium sp.LEGE 02 05292 के लिए है, जबकि नहीं Nodosilinea nodulosa LEGE 06102 के लिए गतिविधि का पता चला था। Lopes और सहकर्मियों ने Nodosilinea (Leptolynbbya) अंटार्कटिका LEGE13457 और Cuspidothrix issatschenkoi LEGE 03282 एसीटोन के अर्क के लिए O2 मैला ढोने की गतिविधि की सूचना दी, जिसमें 319 और 286 ug के IC25 मान और nobbya- 286 ug के लिए एसीटोन अर्क है। जैसे sp.LEGE 13412 [27]। लेखकों ने इथेनॉल के अर्क की तुलना में एसीटोन के अर्क में उच्च प्रभावशीलता की भी सूचना दी। अमारो और सहकर्मियों द्वारा किए गए एक अन्य अध्ययन में ग्लियोथेस एसपी के लिए 1394 और 826 ug/mL के IC50 मूल्यों का पता चला। और सीनडेसमस ओब्लिकुस (एम2-1), क्रमशः [37]। एसीटोन के अर्क के लिए यहां प्राप्त परिणाम पहले की रिपोर्ट की तुलना में कम आशाजनक प्रतीत होते हैं, भले ही वे परिमाण के समान क्रम के भीतर हों। दूसरी ओर, जलीय अर्क ने त्वचा की उम्र बढ़ने के क्षेत्र में कॉस्मेटिक अनुप्रयोगों के संबंध में और अधिक दोहन के योग्य एक विशाल क्षमता का खुलासा किया।
2.3.2.एंजाइम निषेध
एमएमपी बाह्य कोशिकीय जस्ता-निर्भर एंजाइमों का एक परिवार है, जिसका मुख्य कार्य ईसीएम को फिर से तैयार करना और नीचा दिखाना है, जो कोशिकाओं को एक साथ रखने और पोषक तत्वों और ऑक्सीजन के लिए मार्ग प्रदान करने के लिए आवश्यक एक जेल जैसी सामग्री है [39]। ईसीएम घटकों में परिवर्तन, जैसे कोलेजन और इलास्टिन, एमएमपी द्वारा प्रेरित, त्वचा की क्षति और शिकन गठन का आधार हैं [40]। इन एंजाइमों के साथ, त्वचा की संरचना और शिकन गठन से जुड़े हुए, मेलेनोजेनेसिस में अपनी गतिविधि के कारण उम्र बढ़ने की प्रक्रिया में एक और महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है: टायरोसिनेस। अन्य कारकों में, यूवीआर एक्सपोजर आरओएस उत्पादन में वृद्धि के कारण मेलेनिन की असामान्य मात्रा के संचय का कारण बनता है। ये प्रतिक्रियाशील प्रजातियां मेलानोसाइट्स की गतिविधि को प्रभावित करती हैं, जो ऑक्सीकरण द्वारा टाइरोसिन के मेलेनिन में रूपांतरण को बढ़ाती हैं, जिससे हाइपरपिग्मेंटेशन और अनियमित त्वचा पैच [41] हो जाते हैं।

सिस्टैन्च एंटी-एजिंग कर सकता है
वाणिज्यिक एंटी-एजिंग अवयवों के प्राकृतिक विकल्पों की खोज में, ऊपर वर्णित एंजाइमों पर ध्यान केंद्रित करते हुए, साइनोबैक्टीरिया के अर्क की गतिविधि का पता लगाया गया (चित्र 2)। HAase के संबंध में, केवल तीन उपभेद इस एंजाइम को बाधित करने में सक्षम थे, एक खुराक पर निर्भर तरीके से कार्य करते हुए: लेप्टोलिनग्या cf का जलीय अर्क। ectocarpiLEGE 11479 (IC50=863 ug/mL), और Cephalothrix lacustris LEGE 15493 और Nodosilinea nodulosa LEGE 06104 के एसीटोन अर्क, बाद के दो केवल IC25 (832 और 995 ug/mL, क्रमशः) तक पहुँचते हैं। हालांकि ये मान उच्च प्रतीत होते हैं, उनकी गतिविधि की सीमा संदर्भ दवा डाइ-सोडियम क्रोमोग्लिकेट (डीएससीजी)(आईसी 50=105 ug/mL) के समान थी। इसके अलावा, यह ध्यान देने योग्य है कि, उच्चतम एकाग्रता परीक्षण के लिए (1 मिलीग्राम/एमएल), लेप्टोलिनग्या cf. ectocarpi LEGE 11479 ने इस एंजाइम को 80 प्रतिशत (चित्र 2) में रोक दिया, जो इस अर्क को एक कॉस्मेटिक घटक के रूप में आशाजनक बनाता है।
कुछ अध्ययनों ने सायनोबैक्टीरिया यौगिकों और हाइलूरोनिडेस गतिविधि पर अर्क के संभावित प्रभाव की सूचना दी है, और अर्क की जैविक क्षमता पर किसी भी तुलना को ध्यान में रखना चाहिए कि साइनोबैक्टीरियल चयापचय में खेती की स्थिति के आधार पर महत्वपूर्ण भिन्नता होती है, जो अर्क की रासायनिक संरचना को प्रभावित करती है। मोरोन और सहकर्मियों [26] ने टाइकोनेमा एसपी के इथेनॉल अर्क के प्रभाव का मूल्यांकन किया। लेग 07196 और साइनोबियम सपा। LEGE 07175 को hyaluronidase पर, और एक मजबूत निरोधात्मक गतिविधि मिली, जिसमें ICso मान क्रमशः 182.74 और 208.36 ug/mL है। स्पिरुलिना प्लैटेंसिस के अघुलनशील अंश के लिए इथेनॉल के अर्क की गतिविधि की भी रिपोर्ट की गई है, जिसमें IC5o 150 ug/mL है [42]। यामागुची और कोकेत्सु [19] द्वारा किए गए एक अन्य अध्ययन से पता चला है कि नोस्टोचोप्सिस लोबेटस MAC0804NAN ने उच्च निरोधात्मक प्रभाव (IC50=7.18 ug/mL) के साथ बड़ी मात्रा में पॉलीसेकेराइड का उत्पादन किया। यह भी बताया गया कि एक आर्थ्रोस्पिरा- व्युत्पन्न पेप्टाइड हाइलूरोनिडेस निषेध [4] में शामिल हो सकता है। साथ में, ये परिणाम कॉस्मीक्यूटिकल अनुप्रयोगों के लिए एंटी-एजिंग सामग्री के रूप में साइनोबैक्टीरिया यौगिकों और अर्क की क्षमता का समर्थन करते हैं।

इलास्टेज को ध्यान में रखते हुए, केवल एसीटोन के अर्क ने दिलचस्प जैवसक्रियता प्रस्तुत की। लेप्टोलिन्ग-बाय cf. ectocarpi LEGE 11479 फिर से सबसे अधिक सक्रिय (चित्र 2) था, 391 ug/mL के मान के साथ ICso तक पहुंचने वाला एकमात्र स्ट्रेन था। Nodosilinea nodulosa LEGE 06104, Cephalothrix lacustris LEGE 15493, और Leptolyngbya boryana LEGE 15486 केवल IC25 तक पहुंचे, जिनका मान क्रमशः 126,86, और 99 ug/mL था। हयालूरोनिडेस के लिए, समुद्री उपभेदों ने सबसे अधिक आशाजनक दिखाया है।
हमारे ज्ञान का सबसे अच्छा करने के लिए, यहां खोजे गए उपभेदों के लिए इलास्टेज निरोधात्मक गतिविधि पर कोई पिछली रिपोर्ट नहीं है। अन्य उपभेदों के संबंध में, यह पाया गया कि नोस्टोक मिनुटम ने माइक्रोविरिडिन-प्रकार के पेप्टाइड्स और नोस्टोपेप्टिन का उत्पादन किया, जिसमें ICso =1.3 और 11.0 ug/mL [44,45] शामिल हैं। माइक्रोविरिडिन बी और माइक्रोकिस्टिस एरुगिनोसा से युक्त भी इलास्टेज को प्रभावी ढंग से रोकता है, जिसमें आईसीसो मान 0।044 और 0.084 ug/mL [46] हैं। इलास्टेज निषेध के बारे में उपलब्ध अधिकांश डेटा पृथक यौगिकों पर ध्यान केंद्रित करते हैं, इसलिए हमारे उपभेदों के अर्क के साथ तुलना करना मुश्किल है।

असमान त्वचा रंजकता, उम्र बढ़ने और यूवी जोखिम दोनों से जुड़ी, उम्र बढ़ने वाली आबादी और कॉस्मेटिक उद्योगों की एक प्रमुख चिंता बनी हुई है। उपलब्ध अध्ययनों में से अधिकांश ट्राइफलिंग हैं और एक एंजाइमेटिक मॉडल के रूप में मशरूम टायरोसिनेस का उपयोग करते हैं, जिससे मानव पर्यावरण में परिणामों का अनुवाद करना मुश्किल हो जाता है, फिर भी, इस एंजाइम में मानव टाइरोसिनेस के साथ उच्च समानता और समरूपता है [47]। इस प्रकार, टायरोसिनेस निषेध में साइनोबैक्टीरिया के अर्क की क्षमता का पता लगाने के लिए उसी एंजाइमेटिक मॉडल का उपयोग यहां किया गया था। इलास्टेज के लिए, केवल एसीटोन के अर्क टायरोसिनेस को बाधित करने में सक्षम थे। नोडोसिलिनिया नोडुलोसा लेग 06104 सबसे प्रभावी (चित्र 2) था, जो आईसी # एन (989.26 ± 4.3 यूजी/एमएल) तक पहुंचने वाला एकमात्र स्ट्रेन था। उसके नीचे लेप्टोलिनग्या बोरियाना लेग 15486, आईसी के साथ 25=784 78±4.33 यूजी/ mL, और अंत में Leptolyngbya cf.ectocarpi LEGE 11479, समुद्री उपभेदों के लिए सबसे आशाजनक परिणाम पाए गए।
मोरोन और सहकर्मियों [26] ने पहले एक ही मॉडल में सायनोबैक्टीरिया इथेनॉलिक अर्क की गतिविधि का पता लगाया, लेकिन कोई गतिविधि नहीं मिली। इसका एक दिलचस्प पहलू यह है कि अध्ययन किए गए उपभेदों में से एक नोडोसिलिनिया नोडुलोसा लेग 06102 था, जिसने यहां सबसे अच्छे परिणाम दिखाए, एक बार फिर लक्षित बायोएक्टिव अर्क प्राप्त करने में निष्कर्षण सॉल्वैंट्स के महत्व पर जोर दिया। अन्य एंजाइमों की खोज के लिए, साइनोबैक्टीरिया पर ध्यान केंद्रित करने वाले सर्वेक्षण भी टायरोसिनेस के लिए दुर्लभ हैं। यबुता और उनकी टीम द्वारा किए गए काम [48], यह बताया गया कि नोस्टोचोप्सिस एसपीपी के गर्म पानी का अर्क। tyrosinase गतिविधि (IC 50=250 ug/mL) को महत्वपूर्ण रूप से बाधित किया। यह एक बहुत ही दिलचस्प परिणाम है, यह देखते हुए कि यह एक जलीय अर्क का परिणाम है, जिसके लिए वर्तमान अध्ययन में कोई गतिविधि नहीं पाई गई। लेखक गर्मी उपचार द्वारा पीबीपी से जारी कम आणविक भार यौगिकों के परिणाम का श्रेय देते हैं, अर्थात् एक बाइलिन मौएटिटी जो एक शक्तिशाली पेरोक्सिल रेडिकल मेहतर के रूप में कार्य करता है। एक अन्य अध्ययन ने आर्थ्रोस्पिरा प्लैटेंसिस इथेनॉल (आईसी 50=14, 000 यूजी/एमएल) और पानी (आईसी 50 =72, 000 यूजी/एमएल) के अर्क की निरोधात्मक गतिविधि का मूल्यांकन किया, जहां मूल्यों को इथेनॉल निकालने [49] में फेरिलिक और कैफिक एसिड जैसे फेनोलिक यौगिकों की उपस्थिति के लिए जिम्मेदार ठहराया गया था।
2.3.3.यूवी संरक्षण
भले ही कॉस्मेटिक कंपनियों की बढ़ती संख्या अपने उत्पादों में सन ब्लॉकर्स को शामिल करती है, फिर भी उपभोक्ताओं को समय से पहले त्वचा की उम्र बढ़ने को धीमा करने के लिए अपने दैनिक उपयोग के लाभों के बारे में समझाना मुश्किल है। यदि एक ओर, सन ब्लॉकर्स का दैनिक उपयोग थोड़ी सी आदत है, तो दूसरी ओर, सिंथेटिक पदार्थों के उपयोग में एक निश्चित भय है, उनके अवांछित संबद्ध जोखिमों के कारण [50]। इसके बाद, पिछले कुछ वर्षों में प्राकृतिक फोटोप्रोटेक्शन पर शोध में काफी वृद्धि हुई है, बायोडिग्रेडेबिलिटी और कम विषाक्तता के लिए उनकी क्षमता को देखते हुए, उन्हें मनुष्यों और पर्यावरण के लिए अधिक फायदेमंद बना दिया गया है। इस क्षेत्र में साइनोबैक्टीरिया के अर्क का पता लगाने के लिए, यूवीआर-बी के लिए इन विट्रो में सनस्क्रीन के रूप में कार्य करने की उनकी क्षमता का मूल्यांकन किया गया था, क्योंकि यह सबसे हानिकारक विकिरण है। सायनोबैक्टीरिया जलीय और एसीटोन के अर्क के लिए पाए गए परिणाम तालिका 7 में प्रस्तुत किए गए हैं।

एसीटोन के अर्क के संबंध में, सबसे आशाजनक मूल्य (19.2) लेप्टोलिनग्ब्या बोरियाना लेग 15486 के लिए पाया गया, इसके बाद लेप्टोलिनगब्या cf.ectocarpiLEGE 1479(10.7), दोनों का परीक्षण सबसे कम सांद्रता, 200 ug/mL पर किया गया। एसीटोन के अर्क में नोडोसिलिनिया नोडुलोसा लेज 06104 सबसे कम आशाजनक था। जलीय अर्क में, परीक्षण किए गए उच्चतम सांद्रता के लिए सबसे आशाजनक परिणाम प्राप्त किए गए थे, जिसमें लेप्टोलिनग्ब्या बोरियाना लेग 15486 और सेफलोथ्रिक्स लैकस्ट्रिस लेग 15493 क्रमशः 17.1 और 14.9 के इन विट्रो एसपीएफ़ मूल्यों के साथ बाहर खड़े थे (तालिका 7)।सिस्टैंच जीवन विस्तारइस क्षेत्र में पिछले अध्ययनों पर चर्चा करते हुए, हुसैन और उनकी टीम [51] ने बताया कि सेफलोथ्रिक्स कोमारेकियाना अर्क के लिए एसपीएफ़ मूल्य 2.37 था। एक अन्य समूह ने पाया कि Aphanizomenon flos-aquae के मेथनॉल अर्क का SPF 4 [52] था। हालांकि, लेखकों द्वारा उपयोग किए गए अर्क की एकाग्रता के बारे में जानकारी उपलब्ध नहीं थी, जिससे तुलना करना मुश्किल हो गया।

सौंदर्य प्रसाधनों के क्षेत्र में खोजे गए साइनोबैक्टीरिया उपभेदों की संख्या, विशेष रूप से एसपीएफ़ के संबंध में, इन संसाधनों की संभावनाओं को देखते हुए बहुत कम है। यहां प्रस्तुत किए गए पुन: परिणाम प्रदर्शित करते हैं कि अध्ययन के तहत प्रजातियां जैविक फोटो रक्षक के रूप में अच्छे विकल्प हो सकती हैं, और संभवतः वर्तमान में विपणन किए गए अन्य सनस्क्रीन के लिए बूस्टर के रूप में कार्य करती हैं, जिससे सूत्रों में सिंथेटिक सनस्क्रीन की एकाग्रता में कमी आती है। इसलिए, इन जीवों पर अनुसंधान को बढ़ाना महत्वपूर्ण है, विशेष रूप से उनके बायोएक्टिव अर्क, कि, काफी कम लागत, उच्च उपज, और पृथक यौगिकों की तुलना में तेजी से प्राप्ति अधिक पर्यावरण के अनुकूल और आर्थिक रूप से अधिक आकर्षक हैं।
2.4. पीसीए विश्लेषण द्वारा साइनोबैक्टीरिया अर्क का भेदभाव
हाल के वर्षों में सौंदर्य प्रसाधनों के क्षेत्र में अवयवों के रूप में उपयोग की संभावना के साथ प्राकृतिक स्रोतों से जैव सक्रिय यौगिकों की खोज में वृद्धि हुई है। संभावित रूप से कम विषाक्त और पूरी तरह से बायोडिग्रेडेबल होने के अलावा, साइनोबैक्टीरिया-व्युत्पन्न यौगिक अक्षय स्रोतों से उपलब्ध हैं और नियंत्रित वातावरण में कम लागत पर प्राप्त किए जा सकते हैं।सिस्टैंचे न्ज़ूसंभावित संबंधों को इंगित करने के लिए उनकी रासायनिक संरचना और जैविक गतिविधियों के अनुसार जैव सक्रिय अर्क का वर्गीकरण मूल्यवान हो सकता है। इस संबंध में, प्रमुख घटक विश्लेषण (पीसीए) लागू किया गया था, साइनोबैक्टीरिया के अर्क की रासायनिक संरचना और प्रत्येक परख (चित्रा 3) में परीक्षण किए गए उच्चतम एकाग्रता की जैव-सक्रियता पर विचार करते हुए। जैसा कि देखा जा सकता है, 72.99 प्रतिशत परिवर्तनशीलता को पहले दो आयामों द्वारा समझाया जा सकता है: पीसीएल में 50.41 प्रतिशत विचरण था, जबकि पीसी2 22.58 प्रतिशत के लिए जिम्मेदार था। तीन समूहों को प्रतिष्ठित किया गया था (चित्र 3ए) ): Gl, Leptolyngbya cf.exocarp LEGE 11479 पानी निकालने को शामिल करते हुए; G2, सेफलोथ्रिक्स लैकस्ट्रिस LEGE 15493, लेप्टोलिनग्ब्या बोरियामा LEGE 15486 और नोडोसिलिनिया नोडुलोसा LEGE 06104 पानी के अर्क शामिल हैं; और G3, सभी एसीटोन अर्क को शामिल करते हुए। चित्रा 3बीके अनुसार, पीई सामग्री के कारण जीएल अन्य नमूनों से रासायनिक रूप से अलग है; सेफलोथ्रिक्स लैकस्ट्रिस LEGE 15493, लेप्टोलिनग्ब्या बोरियाना LEGE 15486, और नोडोसिलिनिया नोडुलोसा LEGE 06104 पानी के अर्क को पीसी, एपीसी और कुल प्रोटीन (जी2) में उनकी सामग्री के अनुसार समूहीकृत किया जाता है, जबकि सभी एसीटोन अर्क एक ही समूह (जी3) में पाए जाते हैं। कैरोटीनॉयड, और क्लोरोफिल ए और इसके डेरिवेटिव में उनकी सामग्री के लिए। एंजाइमी गतिविधियों से परे यौगिकों को पीसीएल सकारात्मक अक्ष (चित्रा 3बी) के साथ गठित विमानों के साथ प्रदर्शित किया जाता है। यह देखा जा सकता है कि क्लोरोफिल ए और कैरोटीनॉयड में उच्च सामग्री वाले नमूने इलास्टेज और टायरोसिनेस अवरोध के साथ निकटता से संबंधित हैं। यह कैरोटेनॉयड्स और इलास्टेज (0.725, पी .) के बीच मजबूत सकारात्मक सहसंबंध द्वारा प्रदर्शित किया गया है<0.01) and="" tyrosinase="">0.01)><0.01) inhibition,="" with="" similar="" observations="" between="" chlorophyll="" a="" and="" the="" same="" enzymes="">0.01)><0.01 and="">0.01><0.05,respectively). on="" the="" other="" hand,="" hyaluronidase="" inhibition="" is="" more="" correlated="" vvith="" pe="" content="" (figure="" 3b),="" with="" a="" significant="" positive="" correlation="" between="" the="" values="">0.05,respectively).><0.01).the compounds="" responsible="" for="" the="" radical="" scavenging="" activity="" of="" the="" extracts="" are="" displayed,="" with="" the="" planes="" formed="" with="" the="" pcl="" negative="" axis.="" the="" closest="" correlation="" is="" observed="" for="" tpc="">0.01).the><0.05); other="" compounds="" such="" as="" total="" proteins,="" pc,and="" apc="" also="" contribute="" to="" the="" activity,="" although="" to="" a="" lower="" extent="" (figure="" 3b).regarding="" the="" spf,="" there="" is="" a="" close="" correlation="" between="" the="" activity="" of="" the="" extracts="" and="" their="" pbp="" content,mainly="" apc="">0.05);><0.01)and pc="" (0.838,="" p="" <="" 0.01),="" which="" points="" to="" these="" compounds="" as="" predominantly="" responsible="" for="" blocking="" uv-b="" radiation.="" the="" total="" protein="" content="" also="" contributed="" to="" this="" biological="" activity="" (0.670,="">0.01)and><0.01), with="" the="" lowest="" contribution="" being="" observed="" for="" pe="" (0.210,p="">0.05)। सामान्य तौर पर, पीसीए विश्लेषण ने त्वचा की उम्र बढ़ने के क्षेत्र में प्रदर्शित जैविक गतिविधियों के अनुसार अर्क के समूहन की अनुमति दी, जिससे यह निष्कर्ष निकला कि एसीटोन के अर्क क्षरण के लिए जिम्मेदार एंजाइमों को रोकने में अधिक प्रभावी हैं। त्वचीय मैट्रिक्स और त्वचा की संरचना का नुकसान, जबकि जलीय अर्क मुक्त कणों को साफ करने और यूवी विकिरण के हानिकारक प्रभावों से त्वचा की रक्षा करने में अधिक प्रभावी होते हैं।
जहां तक हम जानते हैं, यह पहली बार है कि इन साइनोबैक्टीरिया उपभेदों से रासायनिक संरचना और अर्क की जैविक गतिविधियों के बीच संबंध स्थापित किया गया है।
3. सामग्री और तरीके
3.1. साइनोबैक्टीरिया बायोमास उत्पादन
ब्राजील के मीठे पानी के पारिस्थितिक तंत्र से चार फिलामेंटस साइनोबैक्टीरियल स्ट्रेन, सेफलोथ्रिक्स लैकस्ट्रिस लेग 15493 और लेप-टोलिनगब्या बोरियाना लेग 15486, और लेप्टोलिनग्ब्या सीएफ। इस अध्ययन में पुर्तगाली समुद्री पारिस्थितिक तंत्र से एक्टोकार्पी लेग 11479 और नोडोसिलिनिया नोडुलोसा लेग 06104 का उपयोग किया गया था। समुद्री और पर्यावरण अनुसंधान के अंतःविषय केंद्र (सीआईआईएमएआर) में ब्लू बायोटेक्नोलॉजी और इकोटॉक्सिकोलॉजी कल्चर कलेक्शन (एलईजीई सीसी) में उपभेदों को बनाए रखा गया था। बायोमास उत्पादन उद्देश्यों के लिए, प्रयोगशाला के तहत 40 एमएल से शुरू होने वाली एक स्केल-अप संस्कृति योजना निर्धारित की गई थी- नियंत्रित परिस्थितियों में, क्रमिक रूप से 4 एल तक बढ़ाया गया। उपभेदों को Z8 माध्यम [53] में उगाया गया, समुद्री उपभेदों के लिए 10 ug/L विटामिन B12 और 25g/LNaCl के साथ पूरक। संस्कृतियों को 25 डिग्री पर बनाए रखा गया था, 10 umol फोटॉन m -2 s -4 की हल्की तीव्रता के साथ, और 14 h प्रकाश की एक photoperiod के साथ: 10 h अंधेरा। ताजा बायोमास विकास के 120 या 150 दिनों के बाद (तनाव के आधार पर) निस्पंदन के माध्यम से एकत्र किया गया था, और जमे हुए, फ्रीज-सूखे, और निकालने की तैयारी तक -20 डिग्री पर संग्रहीत किया गया था।
3.2.अर्क तैयार करना
प्रत्येक स्ट्रेन से क्रमिक रूप से दो अलग-अलग अर्क तैयार किए गए: एसीटोन और जलीय। सबसे पहले, 2 ग्राम सूखे बायोमास का उपयोग करके एसीटोन का अर्क तैयार किया गया था। बायोमास को एसीटोन में निलंबित कर दिया गया था और एक अल्ट्रासोनिक स्नान (फिशरब्रांड [एफबी15053, लॉफबोरो, यूके) में 10 मिनट के लिए निकाला गया था। एसीटोन निष्कर्षण के बाद, परिणामी गोली को धूआं हुड में सूखने के लिए छोड़ दिया गया था, और फिर उसी प्रक्रिया का पालन करते हुए 70 एमएल आसुत जल के साथ निकाला गया था। सेल मलबे को 10, 00 × × g Gs पर 5 मिनट के लिए 4 डिग्री पर सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा हटा दिया गया था, एक HERAEUS MegafugeTM 16R माइक्रोसेंट्रीफ्यूज (थर्मो साइंटिफिकटीएम, वॉलथम, एमए, यूएसए) में। प्रत्येक निष्कर्षण से सतह पर तैरनेवाला वाष्पित हो गया था। दबाव (BUCHIR-210 रोटरी बाष्पीकरणकर्ता) (एसीटोन अर्क), या जमे हुए और लियोफिलाइज्ड (जलीय अर्क)। इसी सतह पर तैरनेवाला के साथ निष्कर्षण 3 बार दोहराया गया था। सूखे अर्क को आगे के रासायनिक और जैविक विश्लेषण तक -20 डिग्री पर रखा गया था।
3.3.सेल परख
3.3.1.कोशिका संस्कृति
मानव केराटिनोसाइट्स एचसीएटी (एटीसीसी), माउस फाइब्रोब्लास्ट्स 3 एल 1 (एटीसीसी), और मानव एंडोथेलियल कोशिकाएं एचसीएमईसी (डॉ. पोकौराउड (आईएनएसईआरएम) द्वारा प्रदान की गई) का उपयोग साइटोटोक्स-आईसीटी मूल्यांकन के लिए किया गया था। सेल लाइनों को Dulbecco के संशोधित ईगल मीडियम (DMEM GlutaMAXTM, Gibco, ग्लासगो, यूके) में संवर्धित किया गया, 1 0 प्रतिशत (v) भ्रूण गोजातीय सीरम (गिब्को), 1 प्रतिशत पेनिसिलिन-स्ट्रेप्टोमाइसिन (पेन-स्ट्रेप 100 IU) के साथ पूरक / एमएल और 10 मिलीग्राम / एमएल, क्रमशः) (गिब्को) और 0.1 प्रतिशत एम्फोटेरिसिन बी (गिब्को)। 5 प्रतिशत CO2 आर्द्र वातावरण में 37 डिग्री पर सेल रखरखाव और assays का प्रदर्शन किया गया था, और संस्कृति माध्यम को हर दो दिनों में नवीनीकृत किया गया था। 80-90 प्रतिशत सेल संगम पर, आसन्न कोशिकाओं को फॉस्फेट-बफर खारा (पीबीएस, गिब्को) से धोया गया था, जो ट्रिप्लेएक्स एक्सप्रेस एंजाइम (1 ×) (गिब्को) से अलग था, रखरखाव के लिए पारित किया गया था, और नियोजित assays के लिए वरीयता दी गई थी।
3.3.2.साइटोटॉक्सिसिटी-एमटीटी परख
सेलुलर व्यवहार्यता का मूल्यांकन {0}}(4,5-डाइमिथाइलथियाज़ोल-2-यल)-2,5-डिपेनहिलटेट्राजोलियम ब्रोमाइड (एमटीआई, सिग्मा-एल्ड्रिच, जर्मनी) परख, जैसा कि पहले पुनः पोर्ट किया गया था [26]। सभी सेल लाइनों (एंडोथेलियल सेल, फ़ाइब्रोब्लास्ट्स, और केराटिनोसाइट्स) को 1.0 × 10 कोशिकाओं / एमएल, 3.3 × 104 कोशिकाओं / एमएल, और 2.5 × 104 कोशिकाओं / एमएल के घनत्व पर 96-वेल प्लेट्स में रखा गया था।लिंग का आकारसेल आसंजन के 24 घंटे के बाद, संस्कृति माध्यम को हटा दिया गया था, और कोशिकाओं को 24 और 48 घंटे के लिए ताजा माध्यम से उजागर किया गया था, जिसमें पांच सीरियल सांद्रता में अलग-अलग साइनोबैक्टीरिया अर्क होते हैं, 12.5 से 200 कुरूप / एमएल। एसीटोन के अर्क के लिए, डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड (डीएमएसओ) (गिब्को) में स्टॉक समाधान तैयार किए गए थे, और कोशिकाओं के प्रदर्शन से पहले डीएमईएम के साथ पतला किया गया था ताकि अधिकतम डीएमएसओ एकाग्रता 1 प्रतिशत से अधिक न हो। पीबीएस में जलीय अर्क तैयार किया गया था और कोशिकाओं के एक्सपो-सुनिश्चित से पहले डीएमईएम के साथ पतला था। नकारात्मक नियंत्रण पीबीएस था, और कोशिका मृत्यु का नियंत्रण डीएमएसओ 20 प्रतिशत था। ऊष्मायन के बाद, एमआईटी साइटोटोक्सिसिटी परख किया गया था। संक्षेप में, एमटीटी समाधान के 20 μL को प्रत्येक कुएं में जोड़ा गया और 3 घंटे के लिए 37 डिग्री पर ऊष्मायन किया गया। ऊष्मायन के बाद, माध्यम को सावधानीपूर्वक हटा दिया गया था, और बैंगनी रंग के फॉर्मेज़ान लवण को डीएमएसओ में भंग कर दिया गया था। GEN51M सॉफ्टवेयर द्वारा संचालित सिनर्जी एचटी मल्टी-डिटेक्शन माइक्रोप्लेट रीडर (बायोरेक, बैड फ्रेडरिकशैल, जर्मनी) के साथ अवशोषण को 550 एनएम पर पढ़ा गया था। परख चौगुनी और औसत में चलाई गई थी। प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता के लिए, प्रत्येक परख को कम से कम तीन बार स्वतंत्र रूप से दोहराया गया था। विलायक नियंत्रण में 100 प्रतिशत व्यवहार्यता पर विचार करते हुए, साइटोटोक्सिसिटी को सेल व्यवहार्यता के प्रतिशत के रूप में व्यक्त किया गया था।
3.4. सायनोबैक्टीरिया के अर्क की रासायनिक रूपरेखा
3.4.1.कुल फेनोलिक सामग्री (टीपीसी)
अर्क के टीपीसी को निर्धारित करने के लिए, एक वर्णमिति परख का उपयोग किया गया था, जो थोड़े संशोधनों के साथ फोलिन-सियोकाल्टू पद्धति [54] पर आधारित था। एसीटोन के अर्क को डीएमएसओ में और जलीय अर्क को पानी में घोल दिया गया। संक्षेप में, प्रत्येक अर्क का 25 μL 10mg/mL) पूरी तरह से 25 μL फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक सिग्मा-एल्ड्रिच)20{{20}} के साथ मिलाया गया था। NagCO3 घोल का μL, और विआयनीकृत पानी का 500 μL। रिक्त स्थान के लिए, Folin-Ciocalteu अभिकर्मक को विआयनीकृत पानी से बदल दिया गया था। GEN51M सॉफ्टवेयर के माध्यम से संचालित सिनर्जी एचटी मल्टी-डिटेक्शन माइक्रोप्लेट रीडर (बायोटेक, बैड फ्रेडरिकशैल, जर्मनी) का उपयोग करके गठित रंगीन उत्पाद का अवशोषण 725 एनएम पर मापा गया था। टीपीसी मात्रा का ठहराव के लिए मानक वक्र गैलिक एसिड (जीए) (0.025 से 0.5 मिलीग्राम/एमएल) के सात सांद्रता का उपयोग करके प्राप्त किए गए थे, जो एक ही विलायक में परीक्षण किए जाने वाले अर्क के रूप में तैयार किए गए थे (y=2.097x+0.01560 R²{{ 22}}.9989, एसीटोन के लिए, और y=2.204x+0.01401,R2=0.9982, पानी के लिए, जहां "y" अवशोषण को संदर्भित करता है और "x" एकाग्रता को संदर्भित करता है) . तीन स्वतंत्र निर्धारण दो प्रतियों में किए गए। कुल फेनोलिक सामग्री को ug GA समकक्ष (GAE) प्रति मिलीग्राम सूखे अर्क के रूप में व्यक्त किया गया था।
3.4.2.कुल प्रोटीन
कुल प्रोटीन सांद्रता बीसीए प्रोटीन परख किट (# 23227, थर्मो-साइंटिफिक) का उपयोग करके निर्धारित की गई थी। जलीय अर्क पानी में तैयार किए गए थे, जबकि एसीटोन एक्स-ट्रैक्ट्स डीएमएसओ में तैयार किए गए थे। संक्षेप में, एक 96-वेल प्लेट में, प्रत्येक अर्क के 25 uL (1 mg/mL) को कार्यशील अभिकर्मक के 200 μL के साथ मिलाया गया था। GEN5IM सॉफ्टवेयर के माध्यम से संचालित सिनर्जी एचटी मल्टी-डिटेक्शन माइक्रोप्लेट रीडर (बायोटेक, बैड फ्रेडरिकशैल, गेर-मैनी) का उपयोग करके अवशोषण को 562 एनएम पर मापा गया था। एक मानक वक्र (y=-126.87x3+547.73.353 -10.017; R2=0.999, और y=162.87x3-248.51x²+932.13x -11। 2000 ug/mL) प्रोटीन की मात्रा निर्धारित करने के लिए। तीन स्वतंत्र प्रयोग तीन प्रतियों में किए गए। कुल प्रोटीन सामग्री को गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन (बीएसए) समकक्ष प्रति मिलीग्राम सूखे अर्क के रूप में व्यक्त किया गया था।
3.4.3. पिगमेंट
जलीय और एसीटोन दोनों के अर्क में मौजूद पिगमेंट को स्पेक-ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से निर्धारित किया गया था। क्लोरोफिल ए और इसके डेरिवेटिव को वाणिज्यिक मानक (सिग्मा-एल्ड्रिच) के साथ प्राप्त अंशांकन वक्र का उपयोग करके निर्धारित किया गया था: y=8।0791x-0।0{{19} }22 (R2=0.996), जहां"y" अवशोषण को संदर्भित करता है और "x" एकाग्रता को संदर्भित करता है। कुल कैरोटेनॉयड्स को -कैरोटीन (सिग्मा-एल्ड्रिच) के रूप में परिमाणित किया गया, इसके अंशांकन वक्र y=17.133x+0.0099 के माध्यम से; R²=0.990, जहां"y" अवशोषण को संदर्भित करता है और "x" एकाग्रता को संदर्भित करता है)। कुल कैरोटीनॉयड एकाग्रता को कुग -कैरोटीन प्रति मिलीग्राम सूखे अर्क के रूप में व्यक्त किया गया था। दोनों मानकों के लिए अंशांकन वक्र पांच अलग-अलग सांद्रता (0.001 से 0.025 मिलीग्राम / एमएल) का उपयोग करके प्राप्त किए गए थे। स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक निर्धारण 96-वेल प्लेट्स में, 450 एनएम पर -कैरोटीन और क्लोरोफिल ए के लिए 663 एनएम पर प्रति-गठन किए गए थे। एक सिनर्जी एचटी मल्टी-डिटेक्शन माइक्रोप्लेट रीडर (बायोटेक, बैड फ्रेडरिकशैल, जर्मनी) जो GEN5TM सॉफ्टवेयर के माध्यम से संचालित होता है।
पीबीपी सामग्री को विभिन्न तरंग दैर्ध्य (562,615, और 645 एनएम) पर जलीय अर्क के अवशोषण को मापकर और संबंधित सूत्रों को लागू करके स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से निर्धारित किया गया था, जैसा कि पहले पगेल्स एट अल द्वारा वर्णित है। [34]: जलीय अर्क को 0.5 मिलीग्राम/एमएल के अंतिम सांद्रण में बदल दिया गया। प्रयोग तीन प्रतियों में किया गया था, और परिणाम कुग/मिलीग्राम सूखे अर्क में व्यक्त किए गए थे। 3.5.जैविक गतिविधियां
3.5.1.सुपरऑक्साइड आयन रेडिकल (O2*-) स्कैवेंजिंग
बारबोसा और सहकर्मियों [55] के अनुसार, मामूली संशोधनों के साथ, सायनोबैक्टीरिया के अर्क की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता का मूल्यांकन करने के लिए ओज़ * - के मुक्त कट्टरपंथी मैला ढोने का प्रदर्शन किया गया था। जलीय अर्क पानी में तैयार किए गए थे, जबकि एसीटोन अर्क डीएमएसओ में तैयार किए गए थे। प्रत्येक अर्क के लिए पांच सीरियल dilutions तैयार किए गए थे और अर्क के व्यवहार और आईसी मूल्यों का मूल्यांकन करने के लिए परीक्षण किया गया था। सभी अभिकर्मकों को फॉस्फेट बफर (19 uM, pH7.4) में भंग कर दिया गया था। प्रत्येक कमजोर पड़ने के 50μL की मात्रा को 96-वेल प्लेट में 166 uM -निकोटिनमाइड एडेनिन डाइन्यूक्लियोटाइड रिड्यूस्ड फॉर्म (NADH) घोल के 50 uL और 43 uM नाइट्रोटेट्राजोलियम ब्लू क्लोराइड (NBT) के 150 uL के साथ मिलाया गया था। 2.7 माइक्रोन फेनाजीन मेथोसल्फेट (पीएमएस) के 50 μL को जोड़ने के बाद, नमूनों की कट्टरपंथी मैला ढोने की गतिविधि की निगरानी एक सिनर्जी एचटी मल्टी-डिटेक्शन माइक्रोप्लेट रीडर (बायोटेक, बैड फ्रेडरिकशैल, जर्मनी) से की गई थी, जो GEN51M सॉफ्टवेयर के माध्यम से काइनेटिक फ़ंक्शन में संचालित होता है। 562 एनएम पर 2 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर। तीन स्वतंत्र assays तीन प्रतियों में किए गए थे। GA का उपयोग सकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था। परिणाम अनुपचारित नियंत्रण की तुलना में कट्टरपंथी मैला ढोने के प्रतिशत के रूप में व्यक्त किए गए थे। परिकलित IC मानों के परिणाम डुप्लिकेट में किए गए कम से कम तीन स्वतंत्र assays के माध्य ± SD (ug/mL) के रूप में व्यक्त किए गए थे। आईसी मान और संबंधित खुराक-प्रतिक्रिया घटता की गणना ग्राफपैड प्रिज्म @ सॉफ्टवेयर (सैन डिएगो, सीए, यूएसए; संस्करण 9, मैकओएस के लिए) के साथ की गई थी।
3.5.2.हयालूरोनिडेस निषेध
हयालूरोनिडेस निषेध परख को फेरेरेस एट अल द्वारा प्रस्तावित से थोड़ा संशोधित किया गया था। 56】। संक्षेप में, प्रत्येक अर्क का 25 μL (9mg/mL),175 μL हयालूरोनिक एसिड HA)(0.7 mg/mL), और 25 μL हयालूरोनिडेस HAase)(90{{ 14}} NaCl में U/mL 0.9 प्रतिशत एक प्रतिक्रिया ट्यूब में मिश्रित थे। जलीय अर्क पानी में तैयार किए गए थे, और एसीटोन अर्क डीएमएसओ में तैयार किए गए थे। 37 डिग्री पर ऊष्मायन के 30 मिनट के बाद, पानी में 25 डिग्री डाय-सोडियम टेट्राबोरेट 0.8 एम के अलावा प्रतिक्रिया को रोक दिया गया था, इसके बाद पानी के स्नान में 90 डिग्री पर 3 मिनट के लिए ऊष्मायन किया गया था। डीएमएबी [4- (डाइमिथाइलैमिनो) बेंजाल्डिहाइड] समाधान के 375 यूएल से पहले प्रतिक्रिया ट्यूबों को कमरे के तापमान पर ठंडा किया गया था। 37 डिग्री पर ऊष्मायन के 20 मिनट के बाद, GEN5IM सॉफ्टवेयर के माध्यम से संचालित एक सिनर्जी, एचटी मल्टी-डिटेक्शन माइक्रोप्लेट रीडर (बायोटेक, बैड फ्रेडरिकशैल, जर्मनी) में गठित रंगीन उत्पाद का अवशोषण 560 एनएम पर मापा गया था। अर्क की अनुपस्थिति में नकारात्मक नियंत्रण किया गया था। डिसोडियम क्रोमोग्लाइकेट (डीएससीजी) का उपयोग सकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था।
तीन स्वतंत्र assays तीन प्रतियों में किए गए थे, और परिणाम अनुपचारित नियंत्रण की तुलना में एंजाइम निषेध के प्रतिशत के रूप में व्यक्त किए गए थे।
3.5.3.इलास्टेज निषेध
थोड़ा संशोधनों के साथ मोटा और सहकर्मियों [57] के अनुसार पोर्सिन अग्नाशयी इलास्टेज निषेध परख किया गया था। जलीय अर्क पानी में तैयार किए गए थे, जबकि एसीटोन के अर्क DMSO में तैयार किए गए थे। संक्षेप में, एक 96-वेल प्लेट में, 50 अर्क का μL 90 uL HEPES बफर (0.1 M) के साथ मिलाया गया था, N-succinyl-Ala-Ala-Ala p-nitroanilide सब्सट्रेट का 10 uL 100 uM), एसीटेट बफर का 70 uL 200 mM), और elastase का 30 μ l (1 U / mL) प्लेट को 37 डिग्री पर इनक्यूबेट किया गया था 10 मिनट, और प्रतिक्रिया उत्पाद के अवशोषण को 405 एनएम पर मापा गया था, एक सिनर्जी एचटी मल्टी-डिटेक्शन माइक्रोप्लेट रीडर (बायोटेक, बैड फ्रेडरिकशैल, जर्मनी) में GEN51M के माध्यम से संचालित किया गया था। अर्क की अनुपस्थिति में नकारात्मक नियंत्रण किया गया था, और एस्कॉर्बिक एसिड का उपयोग सकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था।सिस्टैंच पाउडरतीन स्वतंत्र assays तीन प्रतियों में किए गए थे। परिणाम अनुपचारित नियंत्रण की तुलना में एंजाइम निषेध के प्रतिशत के रूप में व्यक्त किए गए थे।
3.5.4.टायरोसिनेस निषेध
अधिकारी एट अल के अनुसार टायरोसिनेस निषेध परख की गई थी। [58] मामूली संशोधनों के साथ। संक्षेप में, एक 96-वेल प्लेट में, 20 प्रत्येक अर्क का μL 100 tyrosinase के μL 30 U/mL को फॉस्फेट बफर) में मिलाया गया था। जलीय अर्क पानी में तैयार किए गए थे, जबकि एसीटोन अर्क डीएमएसओ में तैयार किए गए थे। मिश्रण को 8 मिनट के लिए 30 डिग्री पर इनक्यूबेट किया गया था। फिर, L-DOPA L-3,4-dihydroxyphenylalanine) समाधान (2.5 mM फॉस्फेट बफर में) का 80 μL जोड़ा गया, और अवशोषण (T0, एक समय में "शून्य") तुरंत था एक सिनर्जी एचटी मल्टी-डिटेक्शन माइक्रोप्लेट रीडर (बायोटेक, बैड फ्रेडरिकशैल, जर्मनी) के साथ मापा जाता है, जो 475 एनएम पर GEN5TM सॉफ्टवेयर के माध्यम से संचालित होता है। T0 पर अवशोषण का निर्धारण (प्रतिक्रिया उत्पाद बनने से पहले) अध्ययन के तहत अर्क के प्राकृतिक रंग के कारण संभावित हस्तक्षेपों को समाप्त करने की अनुमति देता है। 30 डिग्री पर ऊष्मायन के 8 मिनट के बाद, अवशोषण को फिर से मापा गया (T8)। साइनोबैक्टीरिया अर्क की उपस्थिति में टायरोसिनेस निषेध के प्रतिशत की गणना अनुपचारित (नकारात्मक) नियंत्रण की तुलना में की गई थी, जहां अवशोषण (टी {) के बीच का अंतर {21}}T0) एंजाइम गतिविधि के 100 प्रतिशत से मेल खाती है। अर्क की अनुपस्थिति में नकारात्मक नियंत्रण किया गया था, और कोजिक एसिड का उपयोग सकारात्मक नियंत्रण के रूप में किया गया था। तीन स्वतंत्र assays तीन प्रतियों में किए गए थे। परिणाम अनुपचारित नियंत्रण की तुलना में एंजाइम निषेध के प्रतिशत के रूप में व्यक्त किए गए थे।
3.5.5.सन प्रोटेक्शन फैक्टर (एसपीएफ़)
इन विट्रो सन प्रोटेक्टर फैक्टर को रोहर और सहकर्मियों [59] के अनुसार मामूली संशोधनों के साथ निर्धारित किया गया था। जलीय अर्क पानी में तैयार किए गए थे, जबकि एसीटोन एक्स-ट्रैक्ट एसीटोन में तैयार किए गए थे। संक्षेप में, प्रत्येक अर्क के 2mL (20 और 1000 ug/mL) का अवशोषण, एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (290 से 320 एनएम, 5 में 5 एनएम) में मापा गया था। SPF की गणना मंसूर [60] द्वारा प्रस्तावित सूत्र का उपयोग करके की गई थी: जहां EE(A) एरिथेमल प्रभाव स्पेक्ट्रम है, I (A) सौर तीव्रता स्पेक्ट्रम है, Abs(λ) अर्क का अवशोषण है, और CF सुधार है कारक (28) 30 के ज्ञात एसएफपी मान के साथ एक वाणिज्यिक सनस्क्रीन का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है।
3.6.सांख्यिकीय विश्लेषण
सांख्यिकीय विश्लेषण आईबीएम एसपीएसएस सांख्यिकी सॉफ्टवेयर (मैकओएस, आईबीएम कॉर्पोरेशन, न्यूयॉर्क, एनवाई, यूएसए, 2015 के लिए संस्करण 23.0 का उपयोग करके किया गया था। कोलमोगोरोव-स्मिरनोव और लेवेन के द्वारा सामान्यता और भिन्नताओं की एकरूपता के लिए डेटा का विश्लेषण किया गया था। परीक्षण, फिर पोस्ट-डॉक्टर परीक्षण के रूप में, या एक अयुग्मित टी-टेस्ट के लिए तुकी के एचएसडी (ईमानदारी से महत्वपूर्ण अंतर) का उपयोग करके एक-तरफ़ा एनोवा को सबमिट किया गया। एक पियर्सन सहसंबंध परीक्षण का उपयोग सायनोबैक्टीरिया अर्क की रासायनिक प्रोफाइल और जैविक गतिविधियों के बीच सामान्यीकृत अभिव्यक्ति डेटा की तुलना करने के लिए किया गया था।
3.7. प्रमुख घटक विश्लेषण (पीसीए)
पीसीए का उपयोग कई संभावित सहसंबद्ध चरों को कई अपेक्षाकृत स्वतंत्र चरों में बदलने के लिए किया गया था, जो पूरे डेटा सेट की भिन्नता को समझाने में उनके योगदान के आधार पर रैंक करने में सक्षम थे [61]। उच्च-आयामी पैटर्न के अपेक्षाकृत महत्वपूर्ण घटकों को सफलतापूर्वक पहचाना जा सकता है। मूल उच्च-आयामी डेटा को निम्न-आयामी स्थान पर मैप किया जा सकता है, और इसलिए उच्च-आयामी पैटर्न वर्गीकरण समस्या की जटिलता बहुत कम हो जाती है [62]। वर्तमान अध्ययन के लिए, पीसीए पर आधारित पैटर्न की पहचान आईबीएम एसपीएसएस सांख्यिकी सॉफ्टवेयर (संस्करण 23.0 मैकओएस, आईबीएम कॉर्पोरेशन, न्यूयॉर्क, एनवाई, यूएसए, 2015 के लिए) का उपयोग करके की गई थी। डेटा मैट्रिक्स में चार साइनोबैक्टीरिया उपभेदों के जलीय और एसीटोन अर्क में मौजूद मेटाबोलाइट्स शामिल थे, और उनकी गतिविधि का परीक्षण उच्चतम सांद्रता में किया गया था।
4। निष्कर्ष
यहां विश्लेषण किए गए साइनोबैक्टीरिया के अर्क द्वारा प्रदर्शित जैविक गतिविधि स्पष्ट रूप से सहसंबद्ध साबित हुई। बायोएक्टिव पीबीपी की उपस्थिति के अनुसार, जलीय अर्क यूवी संरक्षण के लिए सबसे प्रभावी थे, जो कि उनकी कट्टरपंथी मैला ढोने की क्षमता के साथ, उन्हें बाहरी कारकों द्वारा त्वचा की उम्र बढ़ने को रोकने के उद्देश्य से एंटी-एजिंग फॉर्मूलेशन में उपयोग किए जाने वाले आशाजनक अवयवों के रूप में सुझाते हैं। दूसरी ओर, एसीटोन का अर्क त्वचीय मैट्रिक्स के क्षरण और त्वचा की संरचना के नुकसान के लिए जिम्मेदार एंजाइमों की गतिविधि को रोकने में अधिक प्रभावी साबित हुआ, इस प्रकार यह उम्र से संबंधित त्वचा की उम्र बढ़ने के लिए अधिक उपयुक्त है।सिस्टैंच साल्सा अर्कहमारे द्वारा प्रस्तावित अनुक्रमिक निष्कर्षण योजना फायदेमंद साबित हो सकती है, जिससे साइनोबैक्टीरिया बायोमास के मुद्रीकरण के माध्यम से रासायनिक रूप से विभिन्न जैव सक्रिय अर्क प्राप्त करने की अनुमति मिलती है, जिससे प्रक्रिया अधिक टिकाऊ और आर्थिक रूप से आकर्षक हो जाती है। कुल मिलाकर, साइनोबैक्टीरिया के अर्क त्वचा की उम्र बढ़ने के क्षेत्र में और अधिक शोषण के योग्य साबित हुए, कॉस्मेटिक फॉर्मूलेशन के लिए प्राकृतिक, सुरक्षित और टिकाऊ अवयवों की खोज को लक्षित करते हुए।
यह लेख मार्च ड्रग्स 2022, 20, 183 से निकाला गया है। https://doi.org/10.3390/md20030183 https://www.mdpi.com/journal/marinedrugs






