स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा बोस्चनियाकिया रोसिका और हर्बा सिस्टांचेस में कुल सैपोनिन सामग्री का निर्धारण Ⅰ

अमूर्त:

उद्देश्य यह मात्रात्मक विधि बोस्नियाकिया रोसिका और में कुल सैपोनिन की स्थापना हैहर्बा सिस्टेन्चेसऔर इसकी सामग्रीकुल सैपोनिन निर्धारित किया जाता है． विधि: सैलिड्रोसाइड को संदर्भ पदार्थ के रूप में चुना गया, वैनिलीन और परक्लोरिक एसिड के साथ रंग प्रतिक्रिया का उपयोग किया गया। फिर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा ५२३ एनएम पर बोस्चनियाकिया रोसिका और हर्बा सिस्टेच में कुल सैपोनिन की मात्रा निर्धारित की गई। परिणाम सैलिड्रोसाइड वक्र 0． 05133 - 0． 2567mg·ml－ 1 की सीमा में रैखिक था, जिसमें 0． 9992 का सहसंबंध था, और रैखिक प्रतिगमन समीकरण Y=1． 611X + 0． 0573 था। बोस्चनियाकिया रोसिका के लिए, सैलिड्रोसाइड की औसत रिकवरी ९९． ६८% थी जिसका Ｒएसडी १． ६८% (एन {{१५}}) था; और हर्बा डिस्टेंस के लिए, सैलिड्रोसाइड की औसत रिकवरी 101． 18% थी, जिसका ＲSD 0． 94% (n=6) था। निष्कर्ष विधि सटीक, सरल और विश्वसनीय है। इसलिए इसका उपयोग बोस्नियाकिया रोसिका और हर्बा सिस्टांचेस में कुल सैपोनिन की मात्रा निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है।

कीवर्ड:बोस्नियाकिया रोसिका;हर्बा सिस्टेन्चेस; कुल सैपोनिन; निर्धारण; स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री; सैलिड्रोसाइड

सिस्टान्चे को काम करने में कितना समय लगता है?

सिस्टांचे डेज़र्टिकोला वाई.सी. मा और बोसनियाकिया रोसिका फेडत्से एट फ्लेरोव ओरोबैंचियासी परिवार से संबंधित परजीवी औषधीय पौधे हैं। सिस्टांचे डेज़र्टिकोला एक परजीवी पौधा है जो हेलोक्सिलॉन एमोडेंड्रोन नामक रेगिस्तानी पेड़ की जड़ों पर रहता है। यह मुख्य रूप से झिंजियांग और अल्क्सा लीग, इनर मंगोलिया में उत्पादित होता है। इसकी कम उपज और उच्च औषधीय मूल्य के कारण इसे "रेगिस्तानी जिनसेंग" के रूप में जाना जाता है। टिड्डा [1] मेरे देश के पूर्वोत्तर में उत्पादित होता है [2]। लोककथाओं के अनुसार, इसमें अमरता का प्रभाव होता है, इसलिए इसे पूर्वोत्तर का "अनन्त आयु घास" नाम दिया गया है। इसका उपयोग गुर्दे की कमी के कारण नपुंसकता, कमर और घुटनों में ठंड के दर्द, आंतों के सूखने और कब्ज के लिए किया जाता है। यह शरीर को पोषण और मजबूत कर सकता है, उम्र बढ़ने में देरी कर सकता है, और पूर्वोत्तर में एक प्रामाणिक औषधीय संसाधन है [3]। दोनों के प्रभाव समान हैं, और दोनों में गुर्दे को मजबूत करने, यांग को मजबूत करने, आंतों को नम करने और रेचक [4] के प्रभाव हैं। मिंग राजवंश के ली शिज़ेन के "मटेरिया मेडिका के संग्रह" में सिस्टांच डेसर्टिकोला के बारे में रिकॉर्ड के अनुसार, "यह पदार्थ टॉनिक है लेकिन कठोर नहीं है, इसलिए इसे शांत कहा जाता है। इसे कांग्रोंग से प्राप्त करना दुर्लभ है, इसलिए यह सिस्टांच डेसर्टिकोला से भरा है।" यह कहना है कि, सिस्टांच डेसर्टिकोला को कभी सिस्टांच डेसर्टिकोला के वैकल्पिक औषधीय पदार्थ के रूप में इस्तेमाल किया जाता था। , आधुनिक शोध से पता चला है कि सिस्टांच डेसर्टिकोला और एस्तेउरी डेसर्टिकोला दोनों में एंटी-एजिंग [5, 6], एंटी-थकान [7, 8], प्रतिरक्षा समारोह में सुधार [9, 10] और याददाश्त बढ़ाने जैसे औषधीय प्रभाव हैं [11-13]।

ग्रासहॉपर और सिस्टांच डेसर्टिकोला में कुल ग्लाइकोसाइड की मात्रा का गहन अध्ययन का महत्व है। दोनों में सैपोनिन, वाष्पशील तेल, शर्करा, अमीनो एसिड और अन्य घटक होते हैं। विद्वानों ने दोनों के वाष्पशील तेल, शर्करा, अमीनो एसिड और अन्य घटकों के घटकों पर तुलनात्मक अध्ययन की रिपोर्ट दी है [४, १४, १५], लेकिन दोनों की कुल ग्लाइकोसाइड सामग्री के निर्धारण के बारे में साहित्य में कोई रिपोर्ट नहीं मिली है। सिस्टांच डेसर्टिकोला के मुख्य घटक फेनिलप्रोपेनॉइड ग्लाइकोसाइड (ग्लूकोसाइड ए, बी, सी, डी, ई, एफ, जी, एच, आई, जे, के की श्रृंखला) हैं [१६], और सिस्टांच डेसर्टिकोला फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड (सिस्टांच डेसर्टिकोला की श्रृंखला) है[17,18], दोनों के सैपोनिन समान हैं, और वे एक समान घटक, सैलिड्रोसाइड साझा करते हैं। हमारा मानना ​​है कि ग्लाइकोसाइड दोनों के महत्वपूर्ण सक्रिय तत्व हैं, और हम कुल ग्लाइकोसाइड की सामग्री निर्धारित करने के लिए स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री के उपयोग का पता लगाते हैं। , इचिनेसिया डेज़र्टिकोला और सिस्टांच डेज़र्टिकोला संसाधनों के आगे के विकास और उपयोग के लिए एक सैद्धांतिक आधार प्रदान करने के लिए।

1 सामग्री और उपकरण

1. 1 सामग्री और अभिकर्मक: चांगबाई पर्वत के आसपास से एकत्रित अमरंथ ऑफिसिनेल, ओरोबेनेसी परिवार के पौधे के रूप में पहचाना गया

ओरोबैंच कोएरूलेसेंस के पूरे पौधे को सुखाएं, नमूने को धो लें, और पानी निकाल दें

अलग करें, 40 डिग्री पर स्थिर तापमान सुखाने वाले बॉक्स में रखें, स्थिर वजन तक सुखाएं, कुचलें, 40 जाल वाली छलनी से गुजारें और तैयार करें

[19]; ​​सिस्टैंच डेज़र्टिकोला, होहोट एनहे ट्रेडिंग कंपनी लिमिटेड, सूचीबद्ध के रूप में पहचानी गई

सिस्टान्चे डेज़र्टिकोला वाई. सी. मा का सूखा मांस

तने, धुले हुए, हवा में सुखाए हुए, स्थिर वजन तक सुखाए हुए, कुचले हुए, जालीदार छलनी से गुजारे हुए, अलग रखे हुए; लाल

क्रैसुसाइड संदर्भ पदार्थ (चीन इंस्टीट्यूट ऑफ फार्मास्यूटिकल एंड बायोलॉजिकल प्रोडक्ट्स द्वारा प्रदान किया गया, बैच संख्या 110818

- 200404, सामग्री निर्धारण के लिए); प्रयुक्त सभी प्रायोगिक अभिकर्मक घरेलू विश्लेषणात्मक ग्रेड के हैं।

1. 2 उपकरण 752N UV-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (शंघाई जिंगके); Tu-1901 जोड़ी

बीम यूवी स्पेक्ट्रोफोटोमीटर (बीजिंग पुक्सी जनरल कंपनी लिमिटेड); इलेक्ट्रॉनिक विश्लेषणात्मक संतुलन

AL104 1/100,000 (मेटलर-टोलेडो इंस्ट्रूमेंट शंघाई कं., लिमिटेड); एफडब्ल्यू-80

उच्च गति सार्वभौमिक कोल्हू (शेडोंग हुआलु इलेक्ट्रिक हीटिंग इंस्ट्रूमेंट कं, लिमिटेड)।

2 विधियाँ

2. 1 संदर्भ समाधान की तैयारी

सैलिड्रोसाइड 15. 40mg को सही तरीके से तौलने के लिए एक विश्लेषणात्मक संतुलन का उपयोग करें, मेथनॉल में घोलें, एक 25-वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित करें, और वॉल्यूम को निशान तक समायोजित करें। प्रति मिलीलीटर 0.0% सैलिड्रोसाइड रखने के लिए तैयार रहें। 616 मिलीग्राम घोल को संदर्भ समाधान के रूप में उपयोग किया जाता है और बाद में उपयोग के लिए रेफ्रिजरेटर में सील कर दिया जाता है।

2. 2 परीक्षण समाधान की तैयारी

ग्रासहॉपर और सिस्टांच डेजर्टीकोला के औषधीय पाउडर को सही ढंग से तौलने के लिए एक विश्लेषणात्मक संतुलन का उपयोग करें। 2. 0 ग्राम, इसे एक गोल-तल वाले फ्लास्क में रखें, 40 मिलीलीटर 90% इथेनॉल मिलाएं, ग्रासहॉपर का एक बार गर्म करें और रिफ्लक्स निष्कर्षण करें, और सिस्टांच डेजर्टीकोला को दो बार गर्म करें और रिफ्लक्स करें, प्रत्येक निष्कर्षण समय 1. 5 घंटे है, चूषण निस्पंदन के बाद, छानने को मिलाएं, पानी के स्नान में सूखने के लिए ध्यान केंद्रित करें, घुलने के लिए 25 मिलीलीटर पानी डालें, पेट्रोलियम ईथर के साथ 3 बार निकालें, प्रत्येक बार 25 मिलीलीटर, ऊपरी परत में पेट्रोलियम ईथर तरल को त्याग दें, और फिर पानी-संतृप्त एन-ब्यूटेनॉल के साथ 3 बार निकालना जारी रखें। 25 मिलीलीटर प्रत्येक बार, तीन एन-ब्यूटेनॉल अर्क को मिलाएं, एक धूआं हुड में पानी के स्नान में एन-ब्यूटेनॉल तरल को वाष्पित करें, इसे 10 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में मेथनॉल के साथ पतला करें, अच्छी तरह से मिलाएं, फिर समाधान के 1 मिलीलीटर को सही ढंग से मापें और इसे 25 मिलीलीटर मात्रा में मेथनॉल के साथ पतला करें। बोतल, अच्छी तरह से मिलाएं, और बाद में उपयोग के लिए एक परीक्षण समाधान के रूप में इसका उपयोग करें।

2. 3. माप तरंगदैर्ध्य का चयन

1. संदर्भ समाधान के 25ml और परीक्षण समाधान को स्टॉपर्स के साथ स्नातक किए गए टेस्ट ट्यूबों में रखें, मेथनॉल विलायक को 60 डिग्री पर एक स्थिर तापमान वाले पानी के स्नान में वाष्पित करें, और 0 जोड़ें। 5% वैनिलीन-ग्लेशियल एसिटिक एसिड समाधान के 2ml और परक्लोरिक एसिड समाधान के 0. 8 मिलीलीटर को 15 मिनट के लिए 60 डिग्री पानी के स्नान में प्रतिक्रिया दी गई थी। टेस्ट ट्यूब को बाहर निकालें और तुरंत इसे 5 मिनट के लिए बर्फ के पानी से ठंडा करें। 5 मिली ग्लेशियल एसिटिक एसिड डालें और अच्छी तरह से हिलाएं [20]। उसी तरह मेथनॉल का उपयोग करके संदर्भ समाधान तैयार करें। रंग विकास के बाद समाधान तरंग दैर्ध्य स्कैनिंग के अधीन था,

2. 4. रैखिक संबंध की जांच: संदर्भ समाधान 0. 5,1. 0, को सटीक रूप से खींचने के लिए पिपेट का उपयोग करें

1. 5,2． 0,2． 5ml को 1 से 5 नंबर वाली स्टॉपर वाली टेस्ट ट्यूब में डाला गया और रंग प्रतिक्रिया "2. 3" में दिए गए चरणों के अनुसार की गई। समानांतर स्थितियों के तहत मेथनॉल के साथ एक खाली प्रयोग किया गया और 523nm की तरंग दैर्ध्य पर अवशोषण को मापा गया। अवशोषण A (Y ) कोटि है, सांद्रता mg·ml-1

(X) भुज है, रैखिक प्रतिगमन किया जाता है, और प्रतिगमन समीकरण Y {{0}}. 611X +0. 0573 (r=0. 9992) है, परिणाम दर्शाता है कि सैलिडोसाइड की द्रव्यमान सांद्रता 0 पर है। रैखिक संबंध 05133-0.2567mg·ml-1 की सीमा के भीतर अच्छा है। परिणाम चित्र 2 में दिखाए गए हैं।

2. 5 स्थिरता परीक्षण

ग्रासहॉपर और सिस्टैंच डेजर्टिकोला के परीक्षण समाधान की उचित मात्रा को ठीक से मापें, "2.3" के तहत विधि के अनुसार रंग विकसित करें, और 30 मिनट के भीतर 6 बार में समान रूप से अवशोषण मूल्य को मापें। इससे पता चलता है कि रंग विकास के 30 मिनट के भीतर, ग्रासहॉपर और सिस्टैंच डेजर्टिकोला परीक्षण समाधान की स्थिरता अपेक्षाकृत अच्छी है। परिणाम तालिका 1 में दिखाए गए हैं।

2. 6 परिशुद्धता परीक्षण

संदर्भ समाधान की उचित मात्रा को सटीक रूप से मापें, ऊपर "2.3" के तहत विधि के अनुसार रंग विकसित करें, और लगातार 6 बार अवशोषण को मापें। परिणाम तालिका 2 में दिखाए गए हैं। परिणाम बताते हैं कि इस प्रायोगिक उपकरण की परिशुद्धता अच्छी है।

चित्र 1 सैलिडोसाइड संदर्भ पदार्थ (ए), ग्रासहॉपर परीक्षण समाधान (बी) और सिस्टान्चे डेज़र्टिकोला परीक्षण समाधान (सी) के पतली परत स्कैनिंग पैटर्न

2. 7. पुनरावर्तनीयता परीक्षण.

टिड्डे और सिस्टेन्चे डेजर्टिकोला पाउडर के 6 भागों का सटीक वजन करें, प्रत्येक भाग में 2. 0g होता है, निर्धारित इष्टतम निष्कर्षण प्रक्रिया का उपयोग करके गर्म करने और रिफ्लक्स निष्कर्षण के बाद, "2. 3" के तहत चरणों का पालन करें और 523nm की तरंग दैर्ध्य पर अवशोषण को मापें। माप परिणाम तालिका 3 और तालिका 4 में दिखाए गए हैं।

2. 8. नमूना पुनर्प्राप्ति दर परीक्षण।

कुल ग्लाइकोसाइड के ज्ञात द्रव्यमान प्रतिशत के साथ ग्रासहॉपर और सिस्टांच डेज़र्टिकोला के 6 नमूनों का सटीक वजन करें। प्रत्येक नमूना 12 मिलीग्राम है। सैलिड्रोसाइड संदर्भ समाधान के 2 मिलीलीटर को सटीक रूप से जोड़ें। "2. 2" आइटम के तहत नमूना निकालें, आइटम "2.3" के अनुसार रंग विकास के बाद कुल ग्लाइकोसाइड सामग्री निर्धारित करें, और नमूने की पुनर्प्राप्ति दर की गणना करें। परिणाम तालिका 5 और तालिका 6 में दिखाए गए हैं।