Cistanche: Echinacoside मिटोजेन-सक्रिय प्रोटीन किनेज मार्ग के माध्यम से एपोप्टोसिस को प्रेरित करके अग्नाशयी एडेनोकार्सिनोमा कोशिका वृद्धि को दबाता है

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वेई वांग, जिनबिन लुओ, यिंगहुई लिआंग और शिनफेंग लि

सार।

पारंपरिक चीनी चिकित्सा से प्राप्त प्राकृतिक उत्पादों के नैदानिक ​​​​अनुप्रयोग ने कैंसर कीमोथेराप्यूटिक्स में ध्यान आकर्षित किया है।इचिनाकोसाइड(ईसीएच), फेनिलएथेनोइड्स में से एक, के तनों से पृथकसिस्टांचे(एक चीनी हर्बल दवा) केंद्रीय तंत्रिका तंत्र पर ऊतक-सुरक्षात्मक और एपोप्टोटिक विरोधी प्रभाव डालता है। हालांकि, यह काफी हद तक मायावी बना हुआ है कि क्या ईसीएच में ट्यूमर-दमनकारी गतिविधि है। वर्तमान अध्ययन में, यह प्रदर्शित किया गया था कि ईसीएच प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों के उत्पादन और माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता के गड़बड़ी और इस प्रकार एपोप्टोसिस को ट्रिगर करके अग्नाशयी एडेनोकार्सिनोमा कोशिकाओं के प्रसार को स्पष्ट रूप से रोक सकता है। इसके अलावा, यह स्पष्ट किया गया था कि ECH(इचिनाकोसाइड)MAPK गतिविधि को संशोधित करके ट्यूमर सेल की वृद्धि को दबा देता है। अंत में, इस अध्ययन से ECH के एक नए कार्य का पता चलता है (इचिनाकोसाइड) कैंसर के विकास को रोकने में, और इसका तात्पर्य है कि ईसीएच का उपयोग कैंसर के लिए एक संभावित कीमोथेराप्यूटिक रणनीति हो सकती है।

परिचय

ट्यूमर शमनकर्ता के प्रेरण के माध्यम से p53 ट्यूमर शमन मार्ग, ARF ऑन्कोजेनिक E 3- लिगेज माउस डबल मिनट (MDM) 2- की मध्यस्थता p53 गिरावट (3) को कम करता है। यह एक ऑटो-विनियमित, आत्म-सुरक्षात्मक तंत्र है जो कोशिकाओं को घातक परिवर्तन से रोकता है। विशेष रूप से, p53 ट्रांसक्रिप्शनल रूप से सक्रिय करके Myc गतिविधि को दबा सकता है, उदाहरण के लिए, miR-145 जो लक्ष्य करता हैमाइकोट्रांसलेशन साइलेंसिंग (4,5) के लिए mRNA, इस प्रकार एक नकारात्मक प्रतिक्रिया नियामक लूप का निर्माण करता है।

कैंसर के इलाज के लिए सबसे सीधी और प्रभावी रणनीति कैंसर कोशिकाओं को मारना है। आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली एंटीकैंसर दवाएं, जैसे कि सिस्प्लैटिन (6), एक्टिनोमाइसिन डी (7), और एड्रियामाइसिन (8) एपोप्टोसिस को बढ़ावा देकर ट्यूमर के विकास को रोकती हैं। हाल ही में, बढ़ते प्रमाणों ने प्रदर्शित किया है कि पौधों से कई प्राकृतिक उत्पाद और डेरिवेटिव, विशेष रूप से पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) में उपयोग किए जाने वाले औषधीय पौधों से, कैंसर कोशिकाओं के एपोप्टोसिस को प्रेरित करके एक ट्यूमर-दमनकारी कार्य प्रदर्शित करते हैं और नैदानिक ​​​​अनुप्रयोग की क्षमता रखते हैं। कैंसर चिकित्सा में (9)। उदाहरण के लिए, प्राकृतिक एंथ्राक्विनोन इमोडिन कई प्रकार की कैंसर कोशिकाओं (10,11) से अलग है। कैम्पटोथेसिन, चीनी 'हैप्पी ट्री' से निकला है,कैम्पटोथेका नोकीला, एक मूल्यवान प्राकृतिक उत्पाद है जो टोपो I-मध्यस्थ स्ट्रैंड ब्रेक (12) के बाद डीएनए के बंधन को रोकता है। उन्नत स्तन कैंसर वाले कुल 729 रोगियों के एक अन्य पूर्वव्यापी जनसंख्या-आधारित कोहोर्ट अध्ययन में, यह सुझाव दिया गया था कि टीसीएम थेरेपी कैंसर के उपचार में योगदान कर सकती है। इस कॉहोर्ट में से 115 मरीज टीसीएम उपयोगकर्ता थे जबकि 614 मरीज टीसीएम का उपयोग नहीं करते थे। बहुभिन्नरूपी विश्लेषण ने प्रदर्शित किया कि गैर-उपयोगकर्ताओं की तुलना में, टीसीएम का उपयोग सर्व-कारण मृत्यु दर (13) के काफी कम जोखिम से जुड़ा था। उपरोक्त सभी निष्कर्षों ने संकेत दिया कि टीसीएम एक महत्वपूर्ण पूरक और वैकल्पिक दवा है जिसका उपयोग कैंसर के उपचार में किया जा सकता है।

तीव्र फेफड़ों की चोट (16,17) के साथ चूहों। इसके अलावा, ईसीएच(इचिनाकोसाइड)पार्किंसंस रोग (18) के murine मॉडल में तंत्रिका ऊतक पर सुरक्षात्मक प्रभाव और व्यवहार संबंधी विकारों में सुधार दिखाया गया है। विशेष रूप से, यह पाया गया है कि ईसीएच कोशिका प्रसार को बढ़ावा देता है और माउस आंतों के उपकला मोड-के कोशिकाओं (19) में एपोप्टोसिस को रोकता है। हालांकि, अब तक कैंसर की रोकथाम में ईसीएच की संभावित भूमिका पर कम ध्यान दिया गया है।

इस अध्ययन में, यह पता लगाया गया था कि क्या ईसीएच उपचार ट्यूमर सेल के विकास और प्रसार को प्रभावित करता है और क्या ईसीएच(इचिनाकोसाइड)एपोप्टोसिस को प्रेरित करता है, प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) के उत्पादन को बढ़ाता है और माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता (एमएमपी) को कम करता है, और इसके परिणामस्वरूप ट्यूमर सेल की वृद्धि को दबा देता है। इसके अलावा, वर्तमान अध्ययन का उद्देश्य ईसीएच-मध्यस्थता सेल विकास अवरोध के लिए जिम्मेदार आणविक तंत्र की पहचान करना है।

सामग्री तथा तरीकों

कक्ष रेखा, अभिकर्मक, तथा एंटीबॉडी।SW199 0 अग्नाशयी एडेनोकार्सिनोमा कोशिकाओं (एटीसीसी, मानस, वीए, यूएसए) को 10 प्रतिशत भ्रूण गोजातीय सीरम, 50 यू / एमएल पेनिसिलिन और 0.1 मिलीग्राम / एमएल स्ट्रेप्टोमाइसिन के साथ 37 डिग्री सेल्सियस पर डल्बेको के संशोधित ईगल माध्यम में सुसंस्कृत किया गया था। 5 प्रतिशत CO2 आर्द्र वातावरण। ईसीएच(इचिनाकोसाइड)Jrdun बायोटेक्नोलॉजी कार्पोरेशन (शंघाई, चीन) से खरीदा गया था। AKT, P-AKT, ERK, P-ERK, JNK, p-JNK, P38, p-P38, और GAPDH के खिलाफ एंटीबॉडी सेल सिग्नलिंग टेक्नोलॉजी (Danvers, MA, USA) से खरीदे गए थे; एंटी-बैक्स और एंटी-बीसीएल -2 सांता क्रूज़ बायोटेक्नोलॉजी इंक (सांता क्रूज़, सीए, यूएसए) से खरीदे गए थे; और एंटी-कैस्पेज़ -3 को Abcam (शंघाई, चीन) से खरीदा गया था।

कक्ष व्यवहार्यतापरख ट्यूमर सेल के विकास की दर का आकलन करने के लिए, निर्माता के निर्देशों के अनुसार सेल काउंटिंग किट {0}} (CCK-8; Dojindo Molecular Technologies, Rockville, MD, USA) का उपयोग किया गया। सेल सस्पेंशन को 5, 000 कोशिकाओं पर ईसीएच उपचार के साथ 0, 12, 24, 48 या 72 घंटे के लिए 96 -वेल कल्चर प्लेट्स में रखा गया था। सेल विकास अवरोध को प्रत्येक कुएं में 10 प्रतिशत की अंतिम सांद्रता पर CCK‑8 किट से WST -8 अभिकर्मक जोड़कर निर्धारित किया गया था, और नमूनों के अवशोषण को एक माइक्रोप्लेट रीडर (मल्टीस्कैन MK3; थर्मो फिशर साइंटिफिक, इंक।, वॉलथम, एमए, यूएसए)।

हेक्स्ट 33342 धुंधला हो जाना।कोशिकाओं (60 प्रतिशत संगम) का उपचार Hoechst 33342 (बायोटाइम इंस्टीट्यूट ऑफ बायोटेक्नोलॉजी, हैमेन, चीन) के साथ 1 के अंतिम सांद्रण पर किया गया।µजी/एमएल, 37 डिग्री सेल्सियस इनक्यूबेटर में 15 मिनट के लिए इनक्यूबेट किया गया, दो बार फॉस्फेट-बफर खारा से धोया गया, कमरे के तापमान पर 30 मिनट के लिए 4 प्रतिशत पैराफॉर्मलडिहाइड में तय किया गया, और स्लाइड्स पर लगाया गया। सेल नाभिक के रूपात्मक परिवर्तन एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप (ओलिंप BX51, मेलविले, एनवाई, यूएसए) के तहत देखे गए थे। सामान्य नाभिक गोल और हल्के नीले रंग के थे, जबकि एपोप्टोटिक नाभिक सिकुड़े हुए थे और चमकीले नीले रंग के थे।

प्रतिदीप्ति (सक्रिय) कक्ष छंटाई (एफएसीएस) विश्लेषण करता हैएपोप्टोसिस के आकलन के लिए, निर्माता के निर्देशों के अनुसार फ़्लोरेसिन आइसोथियोसाइनेट (FITC) -एनेक्सिन वी एपोप्टोसिस डिटेक्शन किट (बीडी बायोसाइंसेस, शंघाई, चीन) का उपयोग किया गया था। संक्षेप में, 5x1 0 4 कोशिकाओं को बर्फ के ठंडे पीबीएस से धोया गया, 0.1 मिली बाइंडिंग बफर (बायोटाइम इंस्टीट्यूट ऑफ बायोटेक्नोलॉजी) में बदल दिया गया, और एफआईटीसी-संयुग्मित एनेक्सिन वी (10 मिलीग्राम / एमएल) के 10 मिलीलीटर और 10 के साथ दाग दिया गया। एमएल प्रोपीडियम आयोडाइड (पीआई) (50 मिलीग्राम / एमएल)। अंधेरे में कमरे के तापमान पर 15 मिनट के लिए ऊष्मायन और 400 मिलीलीटर बाध्यकारी बफर के अलावा, कोशिकाओं का विश्लेषण एक प्रवाह साइटोमीटर (सी 6; बीडी बायोसाइंसेस, शंघाई, चीन) द्वारा किया गया था।

माप का रिएक्टिव ऑक्सीजन प्रजातियाँ (आरओएस)।आरओएस के उत्पादन का मूल्यांकन करने के लिए, निर्माता के निर्देशों के अनुसार प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजाति परख किट (जोरदार जैव प्रौद्योगिकी, बीजिंग, चीन) का उपयोग किया गया था। संक्षेप में, कोशिकाओं (80 प्रतिशत संगम) को डायहाइड्रोएथिडियम (डीएचई) समाधान (बायोटाइम इंस्टीट्यूट ऑफ बायोटेक्नोलॉजी) के साथ धुंधला होने से पहले पीबीएस से काटा और धोया गया था। कोशिकाओं का विश्लेषण प्रवाह साइटोमेट्रिक विश्लेषण द्वारा किया गया था।

माप का माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली संभावना (एमएमपी)।

एमएमपी में परिवर्तन का पता लगाने के लिए टेट्रामेथिलरोडामाइन मिथाइल एस्टर (टीएमआरएम) परख किट (इम्यूनोकेमिस्ट्री टेक्नोलॉजीज, ब्लूमिंगटन, एमएन, यूएसए) का उपयोग किया गया था। संक्षेप में, कोशिकाओं (80 प्रतिशत संगम) को काटा गया, पीबीएस से धोया गया और 37 डिग्री सेल्सियस इनक्यूबेटर में 15-20 मिनट के लिए टीएमआरएम के साथ दाग दिया गया। कोशिकाओं को एक बार पीबीएस से धोया गया और साइटोमेट्रिक विश्लेषण प्रवाह के अधीन किया गया।

immunoblottingविश्लेषण करता है कोशिकाओं (8 0 प्रतिशत संगम) को 50 मिमी ट्रिस-एचसीएल, पीएच 7.4 से युक्त RIPA बफर (Jrdun जैव प्रौद्योगिकी) में काटा और lysed किया गया था; 150 मिमी NaCl, 1 मिमी EDTA, 1 प्रतिशत NP-40, 1 प्रतिशत सोडियम डीओक्सीकोलिक एसिड और 0.1 प्रतिशत एसडीएस और हौसले से जोड़े गए प्रोटीसम अवरोधक। स्पष्ट सेल लाइसेट की समान मात्रा का उपयोग इम्युनोब्लॉटिंग विश्लेषण के लिए किया गया था जैसा कि पहले (20) में वर्णित है।

सांख्यिकीय विश्लेषण।मात्रात्मक डेटा को माध्य ± मानक विचलन के रूप में व्यक्त किया जाता है। सांख्यिकीय SPSS 15.0 सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके अयुग्मित छात्र के t-परीक्षण द्वारा सांख्यिकीय अंतरों का मूल्यांकन किया गया। पी<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

परिणाम

ईसीएच (इचिनाकोसाइड)दबा फोडा कक्षवृद्धि। हालांकि यह बताया गया है कि ECH(इचिनाकोसाइड)न्यूरोनल और आंतों के उपकला कोशिकाओं (16-19) जैसे दैहिक कोशिकाओं में एपोप्टोसिस और भड़काऊ संकेतों को रोककर एक सुरक्षात्मक भूमिका प्रदर्शित करता है, यह मायावी बना रहता है कि क्या ईसीएच कैंसर कोशिका वृद्धि और प्रसार को नियंत्रित करता है। इसका परीक्षण करने के लिए, एक ग्रेड II अग्नाशयी एडेनोकार्सिनोमा से प्राप्त SW1990 कोशिकाओं का इलाज करके एक सेल अस्तित्व परख का आयोजन किया गया था, जैसा कि चित्र 1 में दिखाया गया है। 5-दिन की संस्कृति अवधि के दौरान निर्भर तरीके (चित्र 1)।ईसीएच ट्रिगर्सएपोप्टोसिस। चूंकि एपोप्टोसिस का नुकसान अग्नाशयी कैंसर कोशिकाओं (21) के अनियंत्रित प्रसार में अंतर्निहित प्रमुख प्रेरक तंत्रों में से एक है, वर्तमान अध्ययन ने यह निर्धारित करने के लिए प्रयोगों का एक सेट किया कि क्या ईसीएच एपोप्टोसिस को ट्रिगर करता है। सबसे पहले, Hoechst 33342 के साथ ट्यूमर कोशिकाओं के नाभिक को धुंधला करके, यह प्रदर्शित किया गया था कि ECH का परिणाम खुराक पर निर्भर तरीके से एपोप्टोसिस होता है (चित्र 2ए)। इसके अतिरिक्त, एफएसीएस विश्लेषण एनेक्सिन वी / पीआई धुंधला का उपयोग करके ty ईसीएच (छवि 2 बी) के एपोप्टोटिक प्रभाव की पुष्टि करने के लिए आयोजित किया गया था। सामान्य संस्कृति स्थितियों के तहत एपोप्टोटिक कोशिकाओं का औसत प्रतिशत 1.1 प्रतिशत था, जबकि खुराक पर निर्भर तरीके से ईसीएच उपचार के जवाब में यह प्रतिशत काफी बढ़कर 10.6, 21.4 और 51.3 प्रतिशत हो गया (चित्र 2सी)। ये परिणाम, अंजीर में दिखाए गए सेल व्यवहार्यता परख के साथ, प्रदर्शित करते हैं कि ईसीएच उपचार एपोप्टोसिस को ट्रिगर करके ट्यूमर कोशिकाओं के प्रसार को दबा देता है।

एथिडियम उत्पन्न करते हैं जो डीएनए के साथ जुड़ता है, इस अध्ययन में आरओएस उत्पादन का मूल्यांकन करने के लिए उपयोग किया गया था। यह पाया गया कि, अन्य एंटीकैंसर दवाओं की तरह, ईसीएच भी खुराक पर निर्भर तरीके से आरओएस उत्पादन को उत्तेजित करता है जैसा कि ईसीएच उपचार (छवि 3) पर उन्नत प्रतिदीप्ति तीव्रता द्वारा दिखाया गया है।

ईसीएच (इचिनाकोसाइड)कम कर देता है एमएमपी।माइटोकॉन्ड्रियल डिसफंक्शन को एपोप्टोसिस के प्रेरण में फंसा हुआ दिखाया गया है। माइटोकॉन्ड्रियल पारगम्यता संक्रमण छिद्र के उद्घाटन को ट्रांसमेम्ब्रेन क्षमता के विध्रुवण और प्रो-एपोप्टोटिक कारकों (23) की रिहाई को प्रेरित करने के लिए प्रदर्शित किया गया है। इसलिए, यह परीक्षण किया गया था कि क्या ईसीएच टीएमआरएम परख करके ट्यूमर कोशिकाओं में एमएमपी के नुकसान को प्रेरित कर सकता है, जो एक अच्छी तरह से स्थापित दृष्टिकोण है, क्योंकि टीएमआरएम प्रतिदीप्ति की तीव्रता झिल्ली क्षमता के समानुपाती होती है। यह प्रदर्शित किया गया कि ईसीएच उपचार खुराक पर निर्भर तरीके से एमएमपी को काफी कम कर देता है (चित्र 4)।ईसीएच नियंत्रण फोडा कक्ष वृद्धि के जरिए माइटोजेन (सक्रिय प्रोटीन)ECH की मध्यस्थता वाले ट्यूमर कोशिका मृत्यु का आणविक आधार, कई महत्वपूर्ण संकेतन पथों की गतिविधि, जैसे MAPK और AKT (24, 25), जो कोशिका के अस्तित्व और मृत्यु को नियंत्रित करते हैं, की जांच की गई। एमएपीके क्रमिक रूप से संरक्षित हैं, प्रोलाइन-निर्देशित सेर / थ्र प्रोटीन किनेसेस, जिसमें बाह्य सिग्नल-विनियमित किनेसेस (ईआरके), सी-जून एनएच 2- टर्मिनल किनेज (जेएनके) और पी 38 परिवार के सदस्य शामिल हैं जो तीन के माध्यम से सक्रिय होते हैं- टियर किनसे सिग्नलिंग कैस्केड (26,27)। इस अध्ययन में, एमएपीके और एकेटी की अभिव्यक्ति के साथ-साथ उनके सक्रिय फॉस्फोराइलेटेड रूपों का मूल्यांकन किया गया था और यह पता चला था कि ईसीएच जेएनके और ईआरके 1/2 गतिविधि को स्पष्ट रूप से दबा देता है, लेकिन पी 38 गतिविधि (छवि 5) को बढ़ाता है। विशेष रूप से, यह प्रदर्शित किया गया था कि AKT गतिविधि, जो सेल प्रसार के लिए भी गंभीर रूप से महत्वपूर्ण है, ECH उपचार (चित्र 5) से प्रभावित नहीं है। इसके अलावा, यह दिखाया गया था कि ईसीएच उपचार बीसीएल -2 अभिव्यक्ति (छवि 5) को कम करते हुए बैक्स और कैस्पासे -3 की अभिव्यक्ति को बढ़ाता है, जो अंजीर के अनुरूप है। 2. इस प्रकार, परिणाम इंगित करते हैं कि ECH MAPK मार्ग के माध्यम से ट्यूमर सेल एपोप्टोसिस को ट्रिगर करता है।

बहस

हमारे ज्ञान का सबसे अच्छा करने के लिए, यह दिखाने के लिए पहला अध्ययन है कि ईसीएच में एपोप्टोसिस (छवि 2) को ट्रिगर करके, आरओएस उत्पादन (छवि 3) को बढ़ावा देने और माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली संभावित विध्रुवण (छवि 4) को प्रेरित करके ट्यूमर-दमनकारी कार्य है। , फलस्वरूप ट्यूमर कोशिका वृद्धि अवरोध (छवि 1) के लिए अग्रणी। इसके अलावा, ईसीएच-मध्यस्थता ट्यूमर कोशिका मृत्यु का आणविक आधार एमएपीके सिग्नलिंग मार्ग (छवि 5) को विनियमित करके होता है। ये निष्कर्ष ट्यूमरजेनिसिस को रोकने में ईसीएच के एक उपन्यास कार्य को प्रदर्शित करते हैं और इस प्रकार यह सुझाव देते हैं कि यह कैंसर चिकित्सा के लिए एक उम्मीदवार एजेंट हो सकता है।

अधिकांश एंटीकैंसर दवाएं ट्यूमर सेल एपोप्टोसिस, सेनेसेंस और/या सेल साइकल अरेस्ट को प्रेरित कर सकती हैं, जो ट्यूमर सेल के विकास और प्रसार को रोकता है। सेल चक्र गिरफ्तारी हल्के तनाव संकेतों के लिए एक सेलुलर प्रतिक्रिया है जो कोशिकाओं को प्रतिकृति डीएनए संश्लेषण या माइटोसिस शुरू करने से पहले क्षतिग्रस्त डीएनए की मरम्मत करने की अनुमति देती है, जबकि एपोप्टोसिस और सेनेसेंस (स्थायी सेल चक्र गिरफ्तारी) तनाव संकेतों के जवाब में होते हैं जो अपरिवर्तनीय या घातक कोशिकाओं को खत्म करते हैं ( 28,29)। इसलिए, इस अध्ययन में ट्यूमर कोशिकाओं पर ईसीएच के केवल एपोप्टोटिक प्रभाव का आकलन किया गया था, क्योंकि कैंसर कोशिकाओं को मारना एक एंटीकैंसर एजेंट की शक्ति का मूल्यांकन करने के लिए एक प्रमुख मानदंड है। विशेष रूप से, यह प्रदर्शित किया गया था कि ECH की अभिव्यक्ति को प्रेरित करता हैबैक्स(अंजीर। 5), एक प्रो-एपोप्टोटिक जीन, ट्यूमर सप्रेसर p53 (30) द्वारा ट्रांसक्रिप्शनल रूप से सक्रिय। इस प्रकार, यह परीक्षण करना सार्थक है कि क्या ECH p53 सिग्नलिंग मार्ग को सक्रिय कर सकता है। यदि ऐसा है, तो ECH भी p53-आश्रित कोशिका चक्र गिरफ्तारी, जीर्णता, एपोप्टोसिस या स्वरभंग को प्राप्त करने में सक्षम हो सकता है। इस अध्ययन में, SW1990 अग्नाशयी एडेनोकार्सिनोमा सेल लाइन में ECH के ट्यूमर-दमनकारी कार्य को स्पष्ट किया गया था। हालांकि, अधिक अग्नाशयी कैंसर सेल लाइनों का अवलोकन करने वाले आगे के अध्ययन की आवश्यकता है। यह दिखाया गया है कि ऑन्कोजेनिक प्रोटीन आरएएस और ट्यूमर सप्रेसर p53 में उत्परिवर्तन अग्नाशय के कैंसर (31) के विकास से जुड़े हैं; हालाँकि, IARC p53 डेटाबेस (//p53.iarc.fr/CellLines.aspx) के अनुसार, SW1990 सेल लाइन किसी भी p53 उत्परिवर्तन को परेशान नहीं करती है। इसलिए, यह जांचना महत्वपूर्ण है कि क्या ECH विभिन्न p53 उत्परिवर्तन के साथ अन्य अग्नाशय के कैंसर सेल लाइनों के विकास और प्रसार को प्रभावित कर सकता है। इसके अतिरिक्त, यह निर्धारित करना दिलचस्प होगा कि क्या ईसीएच एपोप्टोसिस को बढ़ावा देने और अन्य प्रकार के ट्यूमर के विकास को रोकने में सक्षम है।

आरओएस उत्थान और एमएमपी में कमी, जो ईसीएच उपचार के कारण हुई थी, को एपोप्टोसिस इंडक्शन (22) में आवश्यक दिखाया गया है। इसके अलावा, यह पाया गया है कि आरओएस साइटोक्रोम की रिहाई में योगदान करने वाले माइटोकॉन्ड्रियल छिद्रों के ऑक्सीकरण को प्रेरित कर सकता हैcएमएमपी (22) के विघटन के कारण एपोप्टोसिस में एक मध्यवर्ती। इस प्रकार, यह निर्धारित किया जाना बाकी है कि क्या ECH, ROS के शामिल होने के माध्यम से MMP को अप्रत्यक्ष रूप से बाधित करता है। इसके अलावा, आरओएस-एलिसिटेड ऑक्सीडेटिव तनाव को भी सेल-ग्रोथ कंट्रोलिंग सिग्नल के असंख्य को संशोधित करने में शामिल दिखाया गया है, जिसमें p53, NF-κB, HIF और PI3K (32) शामिल हैं। यह निर्धारित किया जाना बाकी है कि क्या और यदि हां, तो ईसीएच इन महत्वपूर्ण सिग्नलिंग मार्गों को कैसे नियंत्रित करता है। विशेष रूप से, ऑक्सीडेटिव तनाव उच्च ऑक्सीजन की खपत, कमजोर एंटीऑक्सीडेटिव सिस्टम और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (33) के टर्मिनल-विभेदन विशेषताओं के कारण विभिन्न न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों का कारण बनता है। हालांकि, कई अध्ययनों से पता चला है कि ईसीएच का तंत्रिका ऊतक पर सुरक्षात्मक और एपोप्टोटिक प्रभाव पड़ता है। इस संबंध में, यह अनुमान लगाना उचित है कि ईसीएच टर्मिनल-विभेदित तंत्रिका कोशिकाओं में आरओएस उत्पादन को कम कर सकता है। इसलिए, यह भी निर्धारित किया जाना बाकी है कि क्या ईसीएच द्वारा आरओएस उत्पादन का विनियमन सेल विभेदन स्थिति पर निर्भर है। इसलिए, अन्य अध्ययनों के साथ वर्तमान परिणाम बताते हैं कि ईसीएच, व्यापक रूप से इस्तेमाल किया जाने वाला टीसीएम, न केवल न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों के उपचार के लिए बल्कि घातक कार्सिनोमा के लिए भी एक महत्वपूर्ण कीमोथेराप्यूटिक रणनीति हो सकती है।

हाल ही में, कैंसर चिकित्सा में टीसीएम के उपयोग ने अधिक ध्यान आकर्षित किया है। टीसीएम में प्रयुक्त औषधीय पौधों से प्राकृतिक उत्पादों की क्षमता को वैज्ञानिक समुदाय ने पश्चिमी दुनिया (9) में भी मान्यता दी है। इन प्राकृतिक उत्पादों की क्रिया के अंतर्निहित तंत्र को स्पष्ट करने के प्रयासों की आवश्यकता है, जो अंततः कैंसर चिकित्सा के लिए कुशल और सुरक्षित दवाओं के विकास की ओर ले जा सकता है।

अंत में, वर्तमान अध्ययन ने ईसीएच के ट्यूमर निरोधात्मक कार्य का प्रदर्शन किया और ईसीएच-मध्यस्थता ट्यूमर दमन के आणविक आधार को भी विस्तृत किया, इस प्रकार कैंसर चिकित्सा में ईसीएच के संभावित नैदानिक ​​​​अनुप्रयोग का सुझाव दिया।

स्वीकृतियाँ

इस अध्ययन को एफएमयू के वैज्ञानिक अनुसंधान के प्रमुख कार्यक्रम (अनुदान संख्या 09ZD014) द्वारा वित्त पोषित और समर्थित किया गया था। लेखक पांडुलिपि को संपादित करने में मदद के लिए बायोमेडवर्ल्ड (शंघाई, चीन) को धन्यवाद देना चाहते हैं।

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