एक चूहे के मॉडल में आंत माइक्रोबायोटा और मेटाबोलॉमिक्स के माध्यम से क्रोनिक नॉनबैक्टीरियल प्रोस्टेटाइटिस (सीएनपी) और इसके तंत्र पर सिस्टैंच-आधारित फॉर्मूलेशन के चिकित्सीय प्रभावों की खोज

अमूर्त

एक पर आधारितप्रायोगिक ऑटोइम्यून प्रोस्टेटाइटिस (ईएपी) चूहा मॉडल, यह अध्ययन इसकी जांच करता हैसिस्टैंच-आधारित कैप्सूल (सीबीसी) के चिकित्सीय प्रभाव और अंतर्निहित तंत्रराहत देने मेंक्रोनिक नॉनबैक्टीरियल प्रोस्टेटाइटिस (सीएनपी). इसका उद्देश्य विकास के लिए प्रीक्लिनिकल आधार प्रदान करना हैउन्नत वानस्पतिक औषधियाँके प्रबंधन के लिए विस्तारित संकेतों के साथक्रोनिक प्रोस्टेटाइटिस और पेल्विक दर्द सिंड्रोम.

कार्यप्रणाली:

हिस्टोपैथोलॉजिकल परिवर्तनचूहे में प्रोस्टेट ऊतक का मूल्यांकन किया गयाहेमेटोक्सिलिन-एओसिन (एचई) धुंधला हो जाना.

श्वेत रक्त कोशिका घुसपैठऔरलेसितिण शरीर घनत्वप्रोस्टेट में समरूपता का सूक्ष्मदर्शी मूल्यांकन किया गया।

का सीरम स्तरसुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज़ (एसओडी)औरमैलोंडियलडिहाइड (एमडीए)जैव रासायनिक विश्लेषण का उपयोग करके मापा गया।

सूजन संबंधी साइटोकिन्स(TNF- , iNOS, IL-1 , IL-2, IL-6, IL-8, और IL-10) का उपयोग करके मात्रा निर्धारित की गईएंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा).

16एस आरडीएनए अनुक्रमणमें परिवर्तनों का मूल्यांकन करने के लिए उपयोग किया गया थाआंत माइक्रोबायोटा.

अलक्षित चयापचयस्पष्ट करने के लिए विश्लेषण किया गयासीबीसी से प्रभावित चयापचय मार्ग.

पश्चिमी धब्बा (डब्ल्यूबी)के मॉड्यूलेशन को सत्यापित करने के लिए उपयोग किया गया थाSPHK1/S1P1/PI3K/Akt सिग्नलिंग मार्ग.

परिणाम:

सीबीसी प्रशासन महत्वपूर्ण रूप से:

हिस्टोलॉजिकल क्षति में कमीप्रोस्टेट ऊतकों को;

लेसिथिन शरीर घनत्व में वृद्धिऔरल्यूकोसाइट घुसपैठ में कमी आई;

प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स कम हो गए(TNF- , iNOS, IL-1 , IL-2, IL-6, IL-8);

सूजनरोधी साइटोकाइन को ऊंचा किया गया IL-10;

बेहतर आंत माइक्रोबायोटा संरचना, उल्लेखनीय रूप से बढ़ रहा हैलैक्टोबेसिलसऔरबिफीडोबैक्टीरियम एनिमेलिस, कम करते हुएअवर्गीकृत_f_Prevotellaceiऔरवेइलोनेला;

10 प्रमुख मेटाबोलाइट्स परिवर्तित, शामिलस्फिंगोसिनऔररेटिनॉयल-ग्लुकुरोनाइड, प्रभाव डाल रहा हैस्फिंगोलिपिड चयापचयऔररेटिनोल चयापचय;

डाउनरेगुलेटेड SPHK1 और S1P1 अभिव्यक्ति, और बाधितPI3K और Akt फॉस्फोराइलेशनप्रोस्टेट ऊतक में.

निष्कर्ष:

सिस्टैंच-आधारित कैप्सूल (सीबीसी) प्रभावी ढंग सेसूजन संबंधी चोट में सुधारईएपी चूहों के प्रोस्टेट ऊतक में। तंत्र में शामिल हो सकते हैं:

आंतों के माइक्रोबायोटा डिस्बिओसिस का मॉड्यूलेशन;

चयापचय संबंधी विकारों का सुधार;

SPHK1/S1P1/PI3K/Akt सिग्नलिंग मार्ग का दमन.

ये निष्कर्ष इसकी क्षमता का समर्थन करते हैंसिस्टैंच-व्युत्पन्न हर्बल फॉर्मूलेशनके तौर परप्राकृतिक, बहु-लक्ष्य चिकित्साके लिएक्रोनिक नॉनबैक्टीरियल प्रोस्टेटाइटिसऔर भविष्य के लिए एक आशाजनक दिशा प्रदान करता हैहर्बल दवा नवाचार.

कीवर्ड:

सिस्टैंच-आधारित कैप्सूल; क्रोनिक नॉनबैक्टीरियल प्रोस्टेटाइटिस; आंत माइक्रोबायोटा; चयापचय; SPHK1/S1P1/PI3K/Akt पाथवे; प्रोस्टेटाइटिस के लिए हर्बल उपचार; प्राकृतिक सूजनरोधी चिकित्सा; ईएपी चूहा मॉडल

 

 

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अमूर्त:

क्रोनिक नॉनबैक्टीरियल प्रोस्टेटाइटिस/क्रोनिक पेल्विक पेन सिंड्रोम (सीएनपी/सीपीपीएस), जिसे श्रेणी III प्रोस्टेटाइटिस के रूप में भी जाना जाता है, लगभगप्रोस्टेटाइटिस के सभी मामलों में से 90%. इसकी विशेषता निचले मूत्र पथ की परेशानी, पेल्विक और पेरिनियल दर्द, यौन रोग और अक्सर मनोवैज्ञानिक या तंत्रिका संबंधी लक्षण हैं। पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) में, सीएनपी को "जिंग झूओ" (सेमिनल टर्बिडिटी) के अंतर्गत वर्गीकृत किया गया है, जो अक्सर आंतरिक नमी-गर्मी, प्लीहा की कमी, या ठंडी या कड़वी दवाओं के लंबे समय तक उपयोग से जुड़ा होता है जो प्लीहा के कार्य को ख़राब करता है, जिससे प्रोस्टेट में नमी और गर्मी जमा हो जाती है।

सीएनपी के लिए वर्तमान पश्चिमी औषधीय उपचार, जिनमें एंटीबायोटिक्स, -ब्लॉकर्स और एनएसएआईडी शामिल हैं, मुख्य रूप से लक्षण प्रबंधन पर ध्यान केंद्रित करते हैं और अक्सर दीर्घकालिक प्रभावकारिता की कमी होती है। तेजी से, शोधकर्ता इसकी ओर रुख कर रहे हैंहर्बल चिकित्सा को एक सुरक्षित और अधिक समग्र विकल्प के रूप में.

सिस्टैंच: एक आशाजनक हर्बल उम्मीदवार

Cistanche, एक पारंपरिक चीनी जड़ी बूटी जो इसके लिए जानी जाती हैकिडनी-टोनिफाइंग, एंटी-इंफ्लेमेटरी, इम्यून-मॉड्यूलेटिंग और एंटीऑक्सीडेंटगुणों ने विभिन्न जननांग संबंधी विकारों के इलाज में क्षमता दिखाई है। आधुनिक औषधीय अध्ययन इसकी रिपोर्ट करते हैंसिस्टैंच डेजर्टिकोलासूजन संबंधी साइटोकिन्स को नियंत्रित कर सकता है, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को बढ़ा सकता है, और माइक्रो सर्कुलेशन में सुधार कर सकता हैसीएनपी उपचार के लिए आशाजनक उम्मीदवार.

बढ़ती रुचि के बावजूद, सटीकवे तंत्र जिनके द्वारा सिस्टैंच सीएनपी को कम करता है, कम समझे जाते हैं. हाल के अध्ययन यह सुझाव देते हैंआंत माइक्रोबायोटा डिस्बिओसिससीएनपी के रोगजनन में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। इसलिए, यह अध्ययन ए के चिकित्सीय प्रभावों की जांच करता हैसिस्टैंच-आधारित हर्बल कैप्सूल (सीबीसी)सीएनपी पर प्रायोगिक ऑटोइम्यून प्रोस्टेटाइटिस (ईएपी) के चूहे मॉडल का उपयोग करते हुए, विशेष ध्यान देने के साथआंत माइक्रोबायोटा संरचना और चयापचय परिवर्तन.

 

1. सामग्री और विधियाँ

1.1 पशु

30 एसपीएफ़-ग्रेड नर स्प्रैग-डावले (एसडी) चूहे(300-320 ग्राम) और45 एसपीएफ़-ग्रेड नर एसडी चूहे(180-200 ग्राम) हुबेई बेयंटे बायोलॉजिकल टेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड से प्राप्त किए गए थे।

मानक एसपीएफ़ शर्तों के तहत रखा गया: तापमान 25±1 डिग्री, आर्द्रता 55±5%, 12 घंटे का प्रकाश/अंधेरा चक्र।

पशु नैतिकता अनुमोदन:HUCMS00302159, हुबेई यूनिवर्सिटी ऑफ चाइनीज मेडिसिन की एथिक्स कमेटी द्वारा प्रदान किया गया।

1.2 औषधियाँ और अभिकर्मक

सिस्टैंच-आधारित कैप्सूल (सीबीसी)(बैच: 20221226) एक जीएमपी-प्रमाणित हर्बल फार्मास्युटिकल कंपनी से।

तमसुलोसिन हाइड्रोक्लोराइड कैप्सूल(सकारात्मक नियंत्रण) हांग्जो कोनबा फार्मास्युटिकल कंपनी लिमिटेड से खरीदा गया।

पूर्ण फ्रायंड का सहायक (सीएफए)सिग्मा (जर्मनी) से.

एलिसा किटशंघाई फ़ुशेंग इंडस्ट्रियल कंपनी लिमिटेड से IL-1 , IL-6, IL-8, IL-10, टीएनएफ-, और आईएनओएस के लिए।

ऑक्सीडेटिव तनाव किट(एमडीए, टी-एसओडी) वुहान एलाबसाइंस बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड से।

आंत माइक्रोबायोटा डीएनए निष्कर्षण किटऔरमेटाबोलॉमिक्स अभिकर्मकमीजी बायोटेक्नोलॉजी (शंघाई) से।

1.3 उपकरण

हाई-स्पीड सेंट्रीफ्यूज (एप्पेंडॉर्फ, जर्मनी), यूएचपीएलसी और क्यू-एक्सएक्टिव एचएफ-एक्स मास स्पेक्ट्रोमीटर (थर्मो फिशर साइंटिफिक), और एलिसा, पीसीआर, अनुक्रमण और मेटाबोलॉमिक्स विश्लेषण के लिए अन्य आणविक जीवविज्ञान उपकरण।

2. प्रायोगिक प्रोटोकॉल

2.1 प्रायोगिक ऑटोइम्यून प्रोस्टेटाइटिस (ईएपी) मॉडल का प्रेरण

2.1.1 प्रोस्टेट प्रोटीन-सीएफए इमल्शन की तैयारी

प्रोस्टेट ऊतक को दाता चूहों से निकाला गया, 0.5% ट्राइटनएक्स-100 के साथ बाँझ खारा में समरूप बनाया गया, और 4 डिग्री पर 30 मिनट के लिए 20,000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया गया।

बीसीए परख का उपयोग करके प्रोटीन सांद्रता को 20 मिलीग्राम/एमएल पर समायोजित किया गया।

प्रोटीन अर्क को सीएफए के साथ 1:1 के अनुपात में इमल्सीकृत किया गयासीएनपी एंटीजन इमल्शन.

2.1.2 टीकाकरण प्रक्रिया

45 एसडी चूहों (180±20 ग्राम) को यादृच्छिक रूप से विभाजित किया गया था, जिसमें 10 को सामान्य समूह को सौंपा गया था।

शेष चूहे प्राप्त हुएचमड़े के नीचे बहु-बिंदु इंजेक्शनकमर, भीतरी जांघ और पीठ में सीएनपी एंटीजन इमल्शन का।

बूस्टर टीकाकरण किया गयादिन 15उसी प्रोटोकॉल का पालन कर रहे हैं.

सामान्य नियंत्रण में सेलाइन इंजेक्शन प्राप्त हुए।

2.2 समूहीकरण और उपचार

टीकाकरण के 28वें दिन, हिस्टोलॉजी (एचई स्टेनिंग) के माध्यम से सफल मॉडलिंग की पुष्टि की गई।

चूहों को यादृच्छिक रूप से सौंपा गया था:

सामान्य नियंत्रण समूह

मॉडल समूह

सकारात्मक औषधि समूह: तमसुलोसिन (0.021 मिलीग्राम/किग्रा)

सीबीसी कम खुराक समूह: 0.63 ग्राम/किग्रा (नैदानिक ​​समतुल्य खुराक)

सीबीसी हाई-डोज़ ग्रुप: 1.26 ग्राम/किग्रा

उपचार 30 दिनों तक प्रतिदिन एक बार मौखिक रूप से दिया गया. नियंत्रण और मॉडल समूहों को खारा प्राप्त हुआ।

 

 

2.3 नमूना संग्रह और विश्लेषण

अंतिम खुराक के 24 घंटे बाद चूहों को इच्छामृत्यु दे दी गई।

रक्त उदर महाधमनी के माध्यम से एकत्र किया गया था; सीरम को अलग किया गया और -80 डिग्री पर संग्रहित किया गया।

प्रोस्टेट ऊतकों की कटाई की गई, उनका वजन किया गया और मैक्रोस्कोपिक रूप से जांच की गई।

प्रोस्टेट सूचकांक (पीआई)गणना की गई:
पीआई=प्रोस्टेट गीला वजन / शरीर का वजन

ऊतकों को ऊतक विज्ञान के लिए फॉर्मेलिन में तय किया गया था या साइटोकिन विश्लेषण, वेस्टर्न ब्लॉटिंग, माइक्रोबायोटा डीएनए निष्कर्षण और मेटाबोलॉमिक्स के लिए जमे हुए किया गया था।

निष्कर्ष एवं महत्व

इस अध्ययन का उद्देश्य प्रदान करना हैप्रीक्लिनिकल साक्ष्यके उपयोग के लिएसिस्टैंच-आधारित हर्बल थेरेपीके इलाज मेंक्रोनिक नॉनबैक्टीरियल प्रोस्टेटाइटिस. एकीकृत करकेआंत माइक्रोबायोटा विश्लेषणऔरमेटाबोलॉमिक्स प्रोफाइलिंग, हम इसे उजागर करना चाहते हैंबहु-लक्ष्य तंत्रजिसके माध्यम से सिस्टैंच अपने एंटी-इंफ्लेमेटरी और इम्यूनोमॉड्यूलेटरी प्रभाव डालता है।

ये निष्कर्ष इसका समर्थन करेंगेएक नवीन हर्बल औषधि के रूप में सिस्टैंच का विकाससीएनपी के लिए और संभावित रूप से नेतृत्व करने के लिएनये संकेतइसके नैदानिक ​​अनुप्रयोग के लिए.