फॉर्मोनोनेटिन JAK/STAT1 को रोककर, Th1 सक्रियण को दबाकर, और मैक्रोफेज ध्रुवीकरण को पुनर्संतुलित करके प्रायोगिक ऑटोइम्यून प्रोस्टेटाइटिस में सुधार करता है।

परिणाम

2.1 एफएन ईएपी चूहों में प्रोस्टेट सूजन को कम करता है

एचई स्टेनिंग से पता चला कि, नियंत्रण समूह की तुलना में, मॉडल समूह ने व्यापक सूजन कोशिका घुसपैठ (चित्रा 1) के साथ प्रोस्टेटिक म्यूकोसल उपकला कोशिकाओं के विरूपण और बहा का प्रदर्शन किया। इसके विपरीत, कम खुराक और उच्च खुराक वाले फॉर्मोनोनेटिन (एफएन) दोनों समूहों ने हल्के हाइपरप्लास्टिक लेकिन व्यवस्थित रूप से व्यवस्थित ग्रंथि संबंधी उपकला कोशिकाओं को प्रदर्शित किया, जिसमें स्ट्रोमल सूजन कोशिकाओं का विरल वितरण और स्पष्ट रूप से कम सूजन थी।

 

 

चित्र 1. सभी समूहों में माउस प्रोस्टेट ऊतकों की हिस्टोपैथोलॉजिकल छवियां (एच एंड ई, ×400)
†† पी <0.01 बनाम सामान्य नियंत्रण समूह; ## पी <0.01 बनाम मॉडल नियंत्रण समूह।

 

सिस्टैंच अर्क की खुराक

 

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चित्र 2. सभी समूहों में माउस प्रोस्टेट ऊतकों में Th1 कोशिकाओं की अभिव्यक्ति

चित्र 3. सभी समूहों में माउस प्लीहा में Th1 कोशिकाओं का अनुपात
†† पी <0.01 बनाम सामान्य नियंत्रण समूह; # पी <0.05, ## पी <0.01 बनाम मॉडल नियंत्रण समूह।

चित्र 4. विभिन्न समूहों के चूहों में सीरम आईएफएन- और टीएनएफ- स्तर
†† पी <0.01 बनाम सामान्य नियंत्रण समूह; # पी <0.05, ## पी <0.01 बनाम मॉडल नियंत्रण समूह।

चित्र 5. सभी समूहों में माउस प्रोस्टेट ऊतकों में एम1 और एम2 मैक्रोफेज का अनुपात

 

चित्र 6. सभी समूहों में माउस प्लीहा में एम1 और एम2 मैक्रोफेज का अनुपात
†† पी <0.01 बनाम सामान्य नियंत्रण समूह; # पी <0.05, ## पी <0.01 बनाम मॉडल नियंत्रण समूह।

चित्र 7. सभी समूहों में माउस प्रोस्टेट ऊतकों में JAK/STAT पाथवे प्रोटीन अभिव्यक्ति
†† पी <0.01 बनाम सामान्य नियंत्रण समूह; # पी <0.05, ## पी <0.01 बनाम मॉडल नियंत्रण समूह।

 

 

2.2 एफएन ईएपी चूहों के प्रोस्टेट में Th1 सेल भेदभाव को दबा देता है

इम्यूनोफ्लोरेसेंस से पता चला कि नियंत्रण के सापेक्ष मॉडल चूहों के प्रोस्टेट में IFN- और CD4 प्रोटीन अभिव्यक्ति स्तर में उल्लेखनीय वृद्धि हुई थी (चित्रा 2)। ईएपी मॉडल की तुलना में, किसी भी खुराक पर एफएन उपचार ने आईएफएन- और सीडी4 अभिव्यक्ति को काफी कम कर दिया, उच्च खुराक वाले एफएन समूह में अधिक स्पष्ट कमी देखी गई।

2.3 एफएन ईएपी चूहों की प्लीहा में Th1 कोशिका विभेदन को दबा देता है

फ्लो साइटोमेट्री विश्लेषण ने नियंत्रण चूहों की तुलना में मॉडल चूहों की प्लीहा में आईएफएन - + सीडी 4+ कोशिकाओं के अनुपात में उल्लेखनीय वृद्धि प्रदर्शित की (पी <0.01, चित्र 3)। विभिन्न खुराकों पर एफएन हस्तक्षेप के बाद, आईएफएन - + सीडी 4+ कोशिकाओं का अनुपात काफी कम हो गया (पी <0.05)।

 

2.4 एफएन ईएपी चूहों में सीरम सूजन साइटोकिन स्तर को कम करता है

एलिसा परिणामों से पता चला कि नियंत्रण समूह (पी <0.01) की तुलना में मॉडल समूह में सीरम आईएफएन- और टीएनएफ- का स्तर काफी ऊंचा था। किसी भी खुराक पर एफएन के प्रशासन ने मॉडल समूह के सापेक्ष आईएफएन- और टीएनएफ- को काफी कम कर दिया (पी <0.05, चित्र 4)।

 

2.5 एफएन ईएपी चूहों के प्रोस्टेट में मैक्रोफेज ध्रुवीकरण को नियंत्रित करता है

इम्यूनोफ्लोरेसेंस विश्लेषण ने संकेत दिया कि, मॉडल समूह में, एम1 मैक्रोफेज मार्कर आईएनओएस की प्रतिदीप्ति तीव्रता में उल्लेखनीय रूप से वृद्धि हुई थी जबकि एम2 मार्कर सीडी206 की तीव्रता नियंत्रण की तुलना में काफी कम हो गई थी (चित्र 5)। विभिन्न खुराकों पर एफएन उपचार के बाद, आईएनओएस प्रतिदीप्ति तीव्रता में उल्लेखनीय रूप से गिरावट आई, जबकि सीडी206 प्रतिदीप्ति तीव्रता में काफी वृद्धि हुई।

2.6 एफएन ईएपी चूहों की प्लीहा में मैक्रोफेज ध्रुवीकरण को नियंत्रित करता है

फ्लो साइटोमेट्री से पता चला कि, नियंत्रण के सापेक्ष, मॉडल समूह में प्लीहा में एम1 मैक्रोफेज का अनुपात काफी बढ़ गया (पी <0.01, चित्र 6)। एफएन उपचार के साथ, स्प्लेनिक एम1 अनुपात में काफी कमी आई (पी <0.05)। इसके विपरीत, नियंत्रण समूह (पी <0.01) की तुलना में मॉडल समूह में एम2 मैक्रोफेज काफी कम हो गए थे, लेकिन दोनों खुराक (पी <0.05) पर एफएन प्रशासन के बाद काफी वृद्धि हुई।

2.7 एफएन ईएपी चूहों के प्रोस्टेट में जेएके/एसटीएटी1 सिग्नलिंग मार्ग को रोकता है
वेस्टर्न ब्लॉटिंग से पता चला कि, नियंत्रणों के सापेक्ष, मॉडल समूह में p-JAK1, p-JAK2, और p-STAT1 का स्तर ऊंचा था, साथ ही p-JAK1/JAK1, p-JAK2/JAK2, और p-STAT1/STAT1 (पी <0.01, चित्र 7) का अनुपात भी बढ़ा हुआ था। विभिन्न सांद्रता पर एफएन के साथ उपचार से पी-जेएके1/जेएके1, पी-जेएके2/जेएके2 और पी-एसटीएटी1/एसटीएटी1 (पी <0.05) अनुपात में काफी कमी आई।

 

बहस

फॉर्मोनोनेटिन ने अपने अनुकूल सुरक्षा प्रोफाइल और ट्रांसलेशनल क्षमता का समर्थन करते हुए कई प्रीक्लिनिकल मॉडलों में सूजन-रोधी गतिविधि का प्रदर्शन किया है। ईएपी माउस मॉडल का उपयोग करते हुए, इस अध्ययन ने सीपी/सीपीपीएस में एफएन के चिकित्सीय तंत्र का पता लगाया।

एबरैंट टी-सेल सिग्नलिंग ईएपी की शुरुआत और प्रगति का एक प्रमुख चालक है, जिसमें Th1 कोशिकाएं महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं। सीपी/सीपीपीएस वाले मरीज़ प्रोस्टेट- और वीर्य एंटीजन-विशिष्ट Th1 ऑटोइम्यून प्रतिक्रियाएं प्रदर्शित करते हैं जो पुरानी सूजन और वीर्य की गुणवत्ता में कमी से जुड़ी होती हैं, जो दर्शाता है कि प्रोस्टेट को लक्षित Th1 ऑटोइम्यूनिटी एक मौलिक तंत्र है। प्रतिरक्षा अतिसक्रियता के दौरान, Th1 कोशिकाएं IFN- और TNF- जैसे सूजन संबंधी साइटोकिन्स का स्राव करती हैं, जिससे स्थानीय ऊतक क्षति होती है। इसके अनुरूप, हमारा डेटा दिखाता है कि एफएन ईएपी चूहों के प्रोस्टेट और प्लीहा दोनों में Th1 भेदभाव को काफी हद तक दबा देता है, साथ ही साइटोकिन स्राव में भी कमी आती है। इन निष्कर्षों से पता चलता है कि FN Th1 ध्रुवीकरण को रोककर चिकित्सीय प्रभाव डालता है।

Th1-प्रकार की प्रतिरक्षा में प्रभावकारक कोशिकाओं में मैक्रोफेज (M1, M2), प्रभावकार मेमोरी CD8+ T कोशिकाएँ, iNKT1 कोशिकाएँ और IgA1B कोशिकाएँ शामिल हैं। उनमें से, IFN--स्रावित CD4+ सहायक T कोशिकाएं Th1 प्रतिरक्षा की केंद्रीय मध्यस्थ हैं। आईएफएन-उत्तेजना के तहत, मैक्रोफेज एक प्रो-इंफ्लेमेटरी एम1 फेनोटाइप की ओर सक्रिय होते हैं। मैक्रोफेज सौम्य प्रोस्टेटिक नमूनों में देखे जाने वाले प्रमुख प्रतिरक्षा कोशिका प्रकारों में से हैं। सीपी/सीपीपीएस रोगियों और ईएपी चूहों के प्रोस्टेट में बढ़ी हुई मैक्रोफेज घुसपैठ का दस्तावेजीकरण किया गया है और यह रोग और दर्द फेनोटाइप से संबंधित है। कार्यात्मक रूप से, मैक्रोफेज में शास्त्रीय रूप से सक्रिय (एम1) और वैकल्पिक रूप से सक्रिय (एम2) फेनोटाइप शामिल हैं। CP/CPPS की प्रगति को धीमा करने के लिए M1 ध्रुवीकरण को रोकने वाली रणनीतियाँ प्रस्तावित की गई हैं। इस अध्ययन में, हमने ईएपी चूहों के प्रोस्टेट और प्लीहा में मैक्रोफेज असंतुलन देखा। एफएन उपचार ने एम1 मैक्रोफेज को कम कर दिया और दोनों ऊतकों में एम2 मैक्रोफेज को बढ़ा दिया, यह दर्शाता है कि एफएन प्रभावी रूप से मैक्रोफेज ध्रुवीकरण को पुनर्संतुलित करता है।

STAT प्रोटीन मेजबान प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं के प्रमुख नियामक हैं। साइटोकिन्स को उनके रिसेप्टर्स से बांधना JAK/STAT मार्गों को सक्रिय करता है, जिससे रोगज़नक़-विशिष्ट प्रतिरक्षा कार्यक्रम शुरू होते हैं। प्रतिलेखन कारकों के रूप में, एसटीएटी प्रतिस्पर्धा कर सकते हैं और मेजबान की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया विकल्पों को आकार दे सकते हैं। JAK/STAT अक्ष कई साइटोकिन रिसेप्टर्स के लिए एक प्रमुख डाउनस्ट्रीम मार्ग है, जो कई प्रतिरक्षा कार्यों को नियंत्रित करता है। Th1 प्रतिक्रियाओं में, निर्णायक कारकों में STAT1, STAT4, और T-bet शामिल हैं; IL-12 STAT4 को सक्रिय करता है, जबकि IFN- STAT1 को सक्रिय करता है। पहले के अध्ययनों से पता चलता है कि एफएन उच्च ग्लूकोज-प्रेरित एंडोथेलियल डिसफंक्शन को कम करता है और जेएके/एसटीएटी सिग्नलिंग के माध्यम से मायोजेनिक पूर्वजों के ओस्टोजेनिक/मायोजेनिक भेदभाव को नियंत्रित करता है। इसलिए हमने अनुमान लगाया कि एफएन प्रोस्टेट में जेएके/एसटीएटी1 मार्ग को विनियमित करके ईएपी में चिकित्सीय लाभ प्रदान करता है।

एफएन द्वारा आईएफएन-अभिव्यक्ति के निषेध की पुष्टि करने वाले प्रारंभिक कार्य के आधार पर, हमने आगे एसटीएटी1 सिग्नलिंग की जांच की और पाया कि एफएन ईएपी प्रोस्टेट ऊतक में जेएके/एसटीएटी1 सक्रियण को प्रभावी ढंग से दबा देता है, जिससे Th1 अंश कम हो जाता है और मैक्रोफेज ध्रुवीकरण को पुन: प्रोग्राम किया जाता है। ये परिणाम एफएन के एक प्रशंसनीय इम्यूनोमॉड्यूलेटरी तंत्र को प्रकट करते हैं।

संक्षेप में, FN JAK/STAT1 सिग्नलिंग को रोककर, Th1 सक्रियण को दबाकर और मैक्रोफेज ध्रुवीकरण को पुनर्संतुलित करके EAP पैथोलॉजी में सुधार करता है। सीमाओं में माउस मॉडल पर निर्भरता शामिल है; प्रभावकारिता और सुरक्षा के लिए व्यापक पशु मॉडल और नैदानिक ​​​​परीक्षणों में पुष्टि की आवश्यकता होती है। यंत्रवत गहराई का विस्तार किया जा सकता है, जिसमें अन्य जेएके/एसटीएटी सदस्यों पर प्रभाव और दीर्घकालिक प्रतिकूल घटनाओं का आकलन शामिल है।

टीसीएम जड़ी बूटी सिस्टैंच अर्क की खुराक और स्रोतों के अधिकार पर प्रासंगिक नोट:

एकीकृत चिकित्सा के भीतर, टीसीएम जड़ी बूटी सिस्टैंच (रू कांग रोंग) अर्क की खुराक ने पेल्विक दर्द और मूत्रजननांगी स्वास्थ्य के लिए प्रासंगिक इम्यूनोमॉड्यूलेटरी और एंटी-इंफ्लेमेटरी समर्थन के लिए रुचि खींची है। हालांकि इस अध्ययन में मूल्यांकन नहीं किया गया है, भविष्य की कठोर, सहकर्मी-समीक्षित जांच जेएके/एसटीएटी-विनियमित मार्गों के साथ संभावित तालमेल का परीक्षण करने के लिए एफएन के साथ मानकीकृत सिस्टैंच अर्क की तुलना या संयोजन कर सकती है।

यहां दी गई व्याख्याएं नीचे उद्धृत सहकर्मी-समीक्षा साहित्य द्वारा समर्थित हैं, जिसमें इम्यूनोलॉजी, यूरोलॉजी, फार्माकोलॉजी और ट्रांसलेशनल मेडिसिन में प्रतिष्ठित पत्रिकाएं शामिल हैं।

 

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