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एना मेरिनो‑रिबास1,2,3,4 · रिकार्डो अरुजो4 · इओना बैंकु1,2 · फ़्रेडज़िया ग्रेटरोल1,2 · एंड्रिया वेरगारा5 · मार्क नोगुएरा‑जूलियन5 · रोजर पेरेडेस5 · जोर्डी बोनाल2 · बेनेडिटा सैम्पियो‑मैया4,6

प्राप्त: 23 जून 2021 / स्वीकृत: 8 दिसंबर 2021

© लेखक (ओं) 2021

सिस्टैंच किडनी के कार्य में सुधार कर सकता है

सार

उद्देश्य यह साबित हो चुका है कि क्रोनिक के रोगियों में आंत माइक्रोबायोम बदल जाता हैगुर्दाबीमारी। यह पुरानी सूजन में योगदान देता है और कार्डियोवैस्कुलर जोखिम और मृत्यु दर को बढ़ाता है, खासकर हेमोडायलिसिस से गुजरने वालों में। फॉस्फेट बाइंडर्स संभावित रूप से अपने माइक्रोबायोम में परिवर्तन को प्रेरित कर सकते हैं। इस परीक्षण का उद्देश्य कैल्शियम एसीटेट के साथ इलाज किए गए हेमोडायलिसिस रोगियों के आंत माइक्रोबायम में परिवर्तन की तुलना सुक्रोफेरिक ऑक्सीहाइड्रॉक्साइड से इलाज करने वालों के साथ करना है।

तरीके 5 महीने के लिए कैल्शियम एसीटेट या सुक्रोफेरिक ऑक्सीहाइड्रॉक्साइड प्राप्त करने के लिए बारह हेमोडायलिसिस रोगियों को वितरित किया गया था। उपचार शुरू होने के 4, 12 और 20 सप्ताह बाद रक्त के नमूने (जैव रासायनिक विश्लेषण के लिए) और मल के नमूने (माइक्रोबायोम विश्लेषण के लिए) एकत्र किए गए थे। फेकल डीएनए निकाला गया और एक 16S rRNA अनुक्रमण पुस्तकालय का निर्माण V3 और V4 हाइपरवेरिएबल क्षेत्रों को लक्षित करते हुए किया गया।

परिणाम नैदानिक ​​चर और प्रयोगशाला मापदंडों के संबंध में, कैल्शियम एसीटेट या सुक्रोफेरिक ऑक्सीहाइड्रॉक्साइड समूहों के बीच कोई सांख्यिकीय महत्वपूर्ण अंतर नहीं देखा गया। मल के नमूनों का विश्लेषण करते समय, हमने पाया कि सभी रोगी आपस में भिन्न (p=0.001) थे और इन अंतरों को उपचार के 20 सप्ताह के दौरान रखा गया था। माइक्रोबियल प्रोफाइल में क्लस्टरिंग विश्लेषण ने एक ही रोगी के नमूनों को स्वतंत्र रूप से उपचार के बाद और चरण के चरण के रूप में समूहीकृत किया

इलाज।

निष्कर्ष इन परिणामों से पता चलता है कि 5-कैल्शियम एसीटेट या सुक्रोफेरिक ऑक्सीहाइड्रॉक्साइड के साथ एक महीने के उपचार ने हेमोडायलिसिस रोगियों में आधारभूत विविधता या आधारभूत जीवाणु संरचना को संशोधित नहीं किया, साथ ही इन रोगियों में पाए जाने वाले आंत माइक्रोबायोम के उच्च-परिवर्तनशीलता प्रोफाइल के बारे में भी।

कीवर्ड गट माइक्रोबायोम · क्रोनिक किडनी रोग · हेमोडायलिसिस · फॉस्फेट बाइंडर · सुक्रोफेरिक ऑक्सीहाइड्रॉक्साइड ·

कैल्शियम एसीटेट

परिचय

दीर्घकालिकगुर्दारोग (सीकेडी) एक बढ़ती व्यापकता, एक उच्च आर्थिक बोझ और उच्च रुग्णता और मृत्यु दर [1] के साथ एक विश्वव्यापी सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्या है।

सीकेडी रोगियों में, कार्डियोवैस्कुलर पैथोलॉजी एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है। इन रोगियों में हृदय रोग (सीवीडी) विकसित होने का खतरा बढ़ जाता है और हृदय की मृत्यु दर सामान्य जनसंख्या [2] की तुलना में 30 गुना अधिक होती है। पारंपरिक हृदय जोखिम कारकों के अलावा, जो सामान्य आबादी की तुलना में सीकेडी से प्रभावित रोगियों में ज्यादातर समय अधिक प्रचलित हैं, सीकेडी और सीवीडी के बीच अंतर्संबंध को हड्डी और खनिज विकारों, जलयोजन की स्थिति और सूजन की उपस्थिति से समझाया जा सकता है। ताकि हमारे मरीज विकसित हों।

सामान्य परिस्थितियों में, विभिन्न शत्रु उत्तेजनाओं के लिए सूजन एक सुरक्षात्मक और शारीरिक प्रतिक्रिया है। हालांकि, कई दुर्बल विकारों में, जैसे कि सीकेडी, सूजन हानिकारक और लगातार हो जाती है [3]। यह सर्वविदित है कि सीकेडी लगातार भड़काऊ स्थिति [4, 5] के साथ है। सूजन संभावित रूप से एक बहुक्रियात्मक एटियलजि का परिणाम है और कई कारकों के साथ बातचीत करता है जो यूरीमिक विषाक्त पदार्थों के जमा होने पर उभरकर आते हैं और इसे हृदय और कुल मृत्यु दर [6] के भविष्यवक्ता के रूप में वर्णित किया गया है। इसके अलावा, सीकेडी में आंतों के अवरोध की शिथिलता और आंत माइक्रोबायोटा संरचना में परिवर्तन की उपस्थिति का समर्थन करने वाले बढ़ते सबूत हैं, जिन्हें आमतौर पर आंत डिस्बिओसिस [7–9] कहा जाता है। यह डिस्बायोटिक अवस्था सहवर्ती रूप से विषाक्त उप-उत्पाद उत्पन्न करती है और इन रोगियों में ऑक्सीडेटिव तनाव और सूजन की पुरानी स्थिति में योगदान करती है [10-12]।

उन्नत सीकेडी वाले रोगियों में आंत माइक्रोबियल डिस्बिओसिस में कई कारक योगदान करते हैं। शरीर के तरल पदार्थों में यूरिया का संचय और जठरांत्र संबंधी मार्ग में इसके प्रसार से यूरिया युक्त बैक्टीरिया का विस्तार होता है। इसके अलावा, यूरिया का हाइड्रोलिसिस ऐसे उत्पाद उत्पन्न करता है जो उपकला तंग जंक्शन को नीचा दिखाते हैं, जिससे एंडोटॉक्सिन और माइक्रोबियल टुकड़ों के प्रणालीगत परिसंचरण में अनुवाद की सुविधा मिलती है [7, 8, 10, 13-15]। पोटेशियम, फॉस्फेट, सोडियम और प्रोटीन के सीमित सेवन सहित सीकेडी में आहार संबंधी सिफारिशों के परिणामस्वरूप किण्वित कार्बोहाइड्रेट का कम सेवन होता है और इससे प्रोटियोलिटिक प्रजातियों का विस्तार हो सकता है और जीवाणु विषाक्त पदार्थों की एक बढ़ी हुई पीढ़ी हो सकती है [12, 13, 16]. इसके अलावा, सीकेडी के रोगी आमतौर पर अन्य सहवर्ती स्थितियों से जुड़े होते हैं, जैसे कि मधुमेह, ऑटोइम्यून रोग और उच्च रक्तचाप। इन सभी सह-रुग्णताओं के परिणामस्वरूप आंत माइक्रोबायोटा परिवर्तन होते हैं [17, 18]।

एक बहुत ही महत्वपूर्ण कारक जो डिस्बिओसिस का पक्षधर है, वह है दवाएं। यह सर्वविदित है कि उन्नत सीकेडी वाले रोगी आमतौर पर पॉली-मेडिकेटेड होते हैं। हमारे रोगियों में अक्सर उपयोग किए जाने वाले आयरन सप्लीमेंट या एंटीबायोटिक्स, आंत माइक्रोबायोम को बदलने के लिए प्रदर्शित किए गए हैं [19-21]। हालांकि, सीकेडी रोगियों में अन्य व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली दवाओं के आंत माइक्रोबायोम पर प्रभाव अज्ञात रहता है।

अधिकांश हेमोडायलिसिस रोगी हाइपरफॉस्फेटेमिया पेश करते हैं और इस स्थिति को ठीक करने के लिए उन्हें विभिन्न प्रकार के फॉस्फेट बाइंडरों की उच्च खुराक की आवश्यकता होती है। फॉस्फेट बाइंडर्स को कैल्शियम और गैर-कैल्शियम-आधारित फॉस्फेट बाइंडर्स के रूप में वर्गीकृत किया जा सकता है। यह वर्णित किया गया है कि फॉस्फेट-बाध्यकारी एजेंटों के दोनों समूह संभावित रूप से माइक्रोबायोम [22-25] की संरचना में परिवर्तन उत्पन्न कर सकते हैं।

हाल ही में, हेमोडायलिसिस विषयों में हाइपर-फॉस्फेटिमिया के उपचार के लिए नए गैर-कैल्शियम-आधारित फॉस्फेट-बाध्यकारी एजेंटों को मंजूरी दी गई है। इन नए एजेंटों में से कुछ, जैसे कि सुक्रोफेरिक ऑक्सीहाइड्रॉक्साइड (एसएफओ) और फेरिक साइट्रेट, अपनी रचनाओं में लोहा रखते हैं। यह माना जाता है कि, माइक्रोबियल विकास और विषाणु में लोहे की महत्वपूर्ण भूमिका को देखते हुए, इन दवाओं के साथ प्रशासित बड़े लोहे का भार, आंत माइक्रोबायोम संरचना को बदल सकता है [26, 27]। फिर भी, आंत माइक्रोबायोम [25] पर इन नए फॉस्फेट बाइंडरों के प्रभावों के बारे में अभी भी बहुत कम सबूत हैं।

सीकेडी रोगियों में परिवर्तित आंत माइक्रोबायोम के महत्व और उनकी सूजन की स्थिति में इसके योगदान को देखते हुए, और आजकल व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली दवाओं के आंत माइक्रोबायोम पर प्रभावों के बारे में जानकारी की कमी को देखते हुए, हमने आंत माइक्रोबायोम पर परिवर्तनों की निगरानी और तुलना करने का निर्णय लिया। एसएफओ या कैल्शियम-आधारित फॉस्फेट बाइंडर कैल्शियम एसीटेट (सीए) लेने वाले हेमोडायलिसिस से गुजरने वाले रोगियों की संख्या।

सामग्री और तरीके

भर्ती

अस्पताल विश्वविद्यालय में हेमोडायलिसिस पर बारह रोगियों को जर्मन ट्रायस आई पुजोल को 5-माह के अनुवर्ती के साथ हमारे अध्ययन में भाग लेने के लिए आमंत्रित किया गया था। सभी विषयों को स्पेन के बडालोना में अस्पताल यूनिवर्सिटरी जर्मन ट्रायस आई पुजोल के हेमोडायलिसिस विभाग से भर्ती किया गया था। सभी रोगी 18 वर्ष से अधिक आयु के थे और कम से कम 1 वर्ष (4 घंटे सत्र, प्रति सप्ताह 3 सत्र) के लिए हेमोडायलिसिस पर थे। इस अध्ययन को अस्पताल यूनिवर्सिटरी जर्मन ट्रायस आई पुजोल (पीआई -16-169, एनसीटी 5551048) की क्लिनिकल रिसर्च एथिक्स कमेटी द्वारा अनुमोदित किया गया था और हेलसिंकी की घोषणा में उल्लिखित सिद्धांतों के अनुरूप था। अध्ययन प्रोटोकॉल पर विस्तृत जानकारी प्राप्त करने के बाद सभी प्रतिभागियों को स्वेच्छा से भर्ती किया गया था। सभी मरीजों से लिखित सूचित सहमति प्राप्त की गई।

बहिष्करण मानदंड में सूचित सहमति देने में असमर्थता, जठरांत्र संबंधी रोग का इतिहास, अस्पताल में भर्ती होना और पिछले 3 महीनों में एंटीबायोटिक दवाओं का सेवन शामिल है।

आधार रेखा पर प्रत्येक व्यक्ति के लिए प्रासंगिक नैदानिक ​​​​और जनसांख्यिकीय जानकारी एकत्र की गई थी। एकत्र की गई नैदानिक ​​​​विशेषताएं थीं: लिंग, आयु, सीकेडी एटियलजि, उच्च रक्तचाप का इतिहास, मधुमेह मेलेटस, डिस्लिपिडेमिया, हृदय रोग (परिधीय संवहनी रोग, इस्केमिक कार्डियोमायोपैथी या स्ट्रोक), और कैंसर।

हमने अध्ययन की शुरुआत में उनकी संवहनी पहुंच, और उनके पिछले फॉस्फेट-बाइंडर उपचार के बारे में जानकारी एकत्र की (नौ प्राप्त कैल्शियम एसीटेट, एक को कैल्शियम कार्बोनेट प्राप्त हुआ, और दो को पहले हाइपरफोस्फेटेमिया के लिए इलाज नहीं किया गया था)।

हमने रोगियों को दो समूहों में विभाजित किया, और हमने हाइपरफॉस्फेटेमिया के लिए उनके उपचार को बदल दिया: 5 रोगियों को सीए समूह में रखा गया (4 निरंतर सीए थेरेपी और 1 रोगी कैल्शियम कार्बोनेट थेरेपी से बदल रहा था) और 7 को एसएफओ में बदल दिया गया (सीए थेरेपी से 5 बदलते हुए और 2 फॉस्फेट-बाध्यकारी उपचार शुरू करना)।

नमूना संग्रह

फॉस्फेट बाइंडर्स प्राप्त करने वाले 12 हेमोडायलिसिस रोगियों, सीए समूह में 5 और एसएफओ समूह में 7 से फेकल नमूने एकत्र किए गए थे। हम अपनी हेमोडायलिसिस यूनिट में होने वाली नियमित जांच से भी रक्त के नमूने एकत्र करते हैं। नमूने (रक्त और मल के नमूने) एक 5- महीने के अनुवर्ती में एकत्र किए गए थे: उपचार शुरू होने के 4, 12 और 20 सप्ताह बाद बेसलाइन पर।

रक्त के नमूनों में, हमने निम्नलिखित मापदंडों का विश्लेषण किया: हीमोग्लोबिन, फेरिटिन, ट्रांसफ़रिन संतृप्ति सूचकांक, कैल्शियम, फॉस्फेट, पैराथाइरॉइड हार्मोन, सी-रिएक्टिव प्रोटीन, अवसादन वेग और एल्ब्यूमिन।

डीएनए निष्कर्षण, पुस्तकालय निर्माण, और अनुक्रमण

Fecal DNA को Powersoil DNA Isolation Kit MoBio द्वारा निकाला गया था, और V3 और V4 हाइपरवेरिएबल क्षेत्रों को लक्षित करते हुए एक 16S rRNA अनुक्रमण पुस्तकालय का निर्माण किया गया था।

मिसेक प्लेटफॉर्म (2 × 300) पर सीक्वेंसिंग की गई। R संस्करण 3.4.2 का उपयोग करके OTU तालिका निर्माण, टैक्सोनोमिक असाइनमेंट और वर्णनात्मक और सांख्यिकीय विश्लेषण किए गए। और विभिन्न पैकेज (DADA 2, vega, ggplot, phyloseq) और Greengenes rRNA डेटाबेस।

डेटा और सांख्यिकीय विश्लेषण

प्राइमर v7 (PRIMER-e, ऑकलैंड, न्यूजीलैंड) का उपयोग विविधता सूचकांकों की गणना, समानता प्रतिशत (SIMPER) विश्लेषण, और बहुभिन्नरूपी विश्लेषण, मुख्य रूप से समानता के विश्लेषण (ANOSIM) एकतरफा विश्लेषण और विचरण के क्रमिक बहुभिन्नरूपी विश्लेषण के लिए किया गया था। प्रति-मनोवा; बीटा-विविधता के महत्व का परीक्षण करने के लिए स्क्वायर रूट ट्रांसफ़ॉर्म किए गए डेटा, ब्रे-कर्टिस समानताएं और एक कम मॉडल के तहत अवशिष्ट के 4999 क्रमपरिवर्तन) का उपयोग किया जाता है। इन विश्लेषणों के लिए प्रति नमूना OTU डेटा का प्रतिशत उपयोग किया गया था, इसके बाद वर्ग रूट रूपांतरित डेटा, समानता डेटा प्रकारों के समानता मैट्रिसेस, ब्रे-कर्टिस समानता का उपयोग करते हुए, डमी मान जोड़ने और 4999 क्रमपरिवर्तन का परीक्षण किया गया था। STAMP का उपयोग नमूनों के समूहों के बीच टैक्सोनोमिक प्रोफाइल का विश्लेषण करने और सांख्यिकीय अंतरों की गणना के लिए किया गया था [28]।

नैदानिक ​​डेटा के सांख्यिकीय उपचार के लिए, सामाजिक विज्ञान के लिए सांख्यिकीय विश्लेषण सॉफ्टवेयर सांख्यिकीय पैकेज (SPSS) 26. 0 MAC OS के लिए उपयोग किया गया था। श्रेणीबद्ध चरों को सापेक्ष आवृत्तियों (प्रतिशत) के माध्यम से वर्णित किया गया था जबकि निरंतर चर को माध्य ± मानक विचलन (एसडी) का उपयोग करके वर्णित किया गया था। हमने तब लागू किया जब उपयुक्त ची-स्क्वायर स्वतंत्रता परीक्षण श्रेणीबद्ध चर के बारे में परिकल्पनाओं का विश्लेषण करने के लिए और निरंतर चर से संबंधित छात्र के टी-परीक्षण। 0.05 के स्तर को महत्वपूर्ण माना गया।

परिणाम

बेसलाइन (तालिका 1) पर सीए या एसएफओ समूहों को सौंपे गए रोगियों के बीच मुख्य नैदानिक ​​​​मापदंड भिन्न नहीं थे। हमने देखा है कि सीए समूह में, एसएफओ समूह की तुलना में धमनी उच्च रक्तचाप, डिस्लिपिडेमिया, परिधीय संवहनी रोग, स्ट्रोक, इस्केमिक कार्डियोमायोपैथी के इतिहास में वृद्धि हुई थी, लेकिन सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण नहीं थी। एसएफओ समूह को सौंपे गए रोगियों ने संवहनी पहुंच के रूप में कैथेटर की अधिक घटना प्रस्तुत की, लेकिन सांख्यिकीय रूप से भी महत्वपूर्ण नहीं।

बेसलाइन पर, एसएफओ के साथ किसी भी मरीज का इलाज नहीं किया गया था, कुछ का इलाज दोनों समूहों में सीए के साथ किया गया था, और एसएफओ समूह के 2 रोगियों में फॉस्फेट-बाध्यकारी उपचार नहीं है। इस समय, हमें प्रयोगशाला मापदंडों, जैसे हीमोग्लोबिन, फेरिटिन, ट्रांसफ़रिन संतृप्ति सूचकांक, कैल्शियम, फॉस्फेट, पैराथाइरॉइड हार्मोन, सी-रिएक्टिव प्रोटीन, अवसादन वेग और एल्ब्यूमिन (तालिका 2) के संबंध में कोई सांख्यिकीय महत्वपूर्ण अंतर नहीं मिला। सामूहिक रूप से, हमने एसएफओ समूह में बेसलाइन उच्च ट्रांसफ़रिन संतृप्ति अनुक्रमित, और सीए समूह की तुलना में सी-रिएक्टिव प्रोटीन के निम्न मूल्यों का अवलोकन किया, लेकिन वे अंतर सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण नहीं थे। हमने सीए समूह को सौंपे गए रोगियों में, बेसलाइन पर हाइपरफोस्फेटेमिया की बढ़ती प्रवृत्ति पर भी ध्यान दिया, लेकिन यह भी सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण नहीं था।

तालिका 2 में, हम विभिन्न समय बिंदुओं पर प्रयोगशाला मापदंडों के विकास को प्रस्तुत करते हैं। हमने पाया कि सीए समूह में, 20-सप्ताह का कैल्शियम एसएफओ समूह की तुलना में सांख्यिकीय महत्व (पी=0.02) से अधिक था। उपचार के सप्ताह 12 में सीए समूह में अवसादन वेग में वृद्धि हुई थी, जब एसएफओ समूह के साथ तुलना की गई थी

तालिका 1 फॉस्फेट-बाइंडिंग एजेंट के रूप में कैल्शियम एसीटेट (सीए) या सुक्रोफेरिक ऑक्सीहाइड्रॉक्साइड (एसएफओ) से गुजरने वाले रोगियों का नैदानिक ​​​​लक्षण वर्णन

मान ± एसडी या सापेक्ष आवृत्तियों (प्रतिशत) का मतलब है। सीए बनाम एसएफओ के बीच कोई सांख्यिकीय अंतर नहीं पाया गया

तालिका 2 फॉस्फेट-बाइंडिंग एजेंट के रूप में कैल्शियम एसीटेट (सीए) या सुक्रोफेरिक ऑक्सीहाइड्रॉक्साइड (एसएफओ) से गुजरने वाले रोगियों का प्रयोगशाला नैदानिक ​​​​डेटा

मान ± एसडी हैं। *एसएफओ में मान सीए से काफी अलग हैं

सांख्यिकीय महत्व (पी {{0}}.04)। साथ ही, SFO समूह में 20-सप्ताह के उपचार में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण कम एल्ब्यूमिन देखा गया जब हम इसकी तुलना CA समूह (p <0.01) से="" करते="" हैं।="" बेसलाइन="" पर="" और="" 20="" सप्ताह="" के="" उपचार="" के="" बाद="" दोनों="" समूहों="" में="" फेरिटिन="" का="" स्तर="" दो="" समूहों="" में="" उच्च="" था,="" और="" दोनों="" समूहों="" को="" उपचार="" के="" 20="" सप्ताह="" में="" फॉस्फेट="" का="" सामान्य="" स्तर="" मिलता="" है,="" जिसमें="" कोई="" सांख्यिकीय="" महत्वपूर्ण="" अंतर="" नहीं="" होता="" है।="" 20="" सप्ताह="" के="" उपचार="" में="" ट्रांसफ़रिन="" संतृप्ति="" सूचकांक,="" पैराथोर्मोन,="" सी-रिएक्टिव="" प्रोटीन,="" अवसादन="" वेग="" और="" एल्ब्यूमिन="" का="" स्तर="" दोनों="" समूहों="" में="" समान="">

सभी समय बिंदुओं के नमूने (बेसलाइन, सप्ताह 4, सप्ताह 12, और सप्ताह 20) कुल 38 मल और रक्त के नमूनों में कुल बारह व्यक्तियों में से आठ में एकत्र किए गए थे। 12 रोगियों के प्रारंभिक सेट से, रोगी 7 (एसएफओ समूह) बाहर हो गया क्योंकि वह नैदानिक ​​कारणों से दूसरे अस्पताल में आया था और अब हम अध्ययन के लिए प्रासंगिक सभी चरों की निगरानी नहीं कर सकते, रोगी 3 (एसएफओ समूह) ने एक प्राप्त कियागुर्दा20-सप्ताह के नमूनों के संग्रह से पहले प्रत्यारोपण, रोगी 9 (एसएफओ समूह) की मृत्यु 12-सप्ताह के नमूनों के संग्रह से पहले हो गई, और हम केवल सप्ताह 12 और सप्ताह 20 से आंत माइक्रोबायोम के लिए अच्छी गुणवत्ता वाले नमूने प्राप्त कर सके। रोगी 8 (एसएफओ समूह) पर।

38 फेकल नमूनों के सेट में 2 मिलियन से अधिक रीड्स दिखाए गए, फिर ग्रीनजेन्स डेटाबेस का उपयोग करके वर्गीकृत किया गया। परीक्षण किए गए नमूनों में बड़ी संख्या में एएसवी (33,734) पाए गए और उन्हें किंगडम बैक्टीरिया से संबंधित के रूप में वर्गीकृत किया गया। प्रत्येक नमूने में शैनन-विविधता को मापा गया और 38 नमूनों के समूह ने शैनन विविधता के लिए 6.2 से 7.7 तक के मान दिखाए।

दिलचस्प बात यह है कि हमने पाया कि सभी रोगी आपस में बहुत भिन्न थे (p=0। 0 01) जब एक मरीज की तुलना बेसलाइन पर दूसरे रोगी से की जाती है (चित्र 1A)। रोगियों के बीच इन अंतरों को 20 सप्ताह के उपचार के साथ रखा गया था; जब नमूने उपचार के सप्ताह (आधार-रेखा, 4, 12, या 20 सप्ताह) द्वारा समूहीकृत किए गए थे, तो कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं थे (पी> 0.05)। यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि अध्ययन से पहले सीए पर रहने वाले रोगियों में अध्ययन के 20 सप्ताह के दौरान आंत माइक्रोबायोम स्थिर पाया गया था और अध्ययन प्रोटोकॉल के भीतर उस चिकित्सीय को बनाए रखा था, और उन रोगियों में भी जिन्होंने फॉस्फेट-बाइंडिंग थेरेप्यूटिक्स को बदल दिया था (बिना किसी उपचार के) सीए या एसएफओ को सीए या कैल्शियम कार्बोनेट)।

जब हमने सभी समय बिंदुओं पर विचार करते हुए सीए बनाम एसएफओ के साथ इलाज किए गए रोगियों के माइक्रोबियल प्रोफाइल की तुलना की, तो हमें सांख्यिकीय अंतर (छवि 1 बी) मिला; और इन अंतरों की पुष्टि ANOSIM (p=0.002) और PERMANOVA (p=0.001) द्वारा की गई थी। यह सांख्यिकीय विश्लेषण बेसलाइन पर देखे गए अंतरों से स्वतंत्र रूप से किया गया था।

जीवाणु समुदायों का अध्ययन किया गया था और बैक्टीरिया और फर्मिक्यूट्स मल के नमूनों में पाए जाने वाले सबसे आम फ़ाइला थे, इसके बाद प्रोटोबैक्टीरिया, एक्टिनोबैक्टीरिया और वेरुकोमाइक्रोबिया थे। अधिक विशिष्ट संरचनागत अंतरों की तलाश में, हमने इन नमूनों के बीच कई वर्गीकरण स्तरों की तुलना की। जीवाणु का विश्लेषण करते समय

अंजीर। 1 कई रोगियों के लिए माइक्रोबायोम प्रोफाइल का एक प्रमुख समन्वय विश्लेषण (पीसीओ)। बी ड्रग ट्रीटमेंट के लिए माइक्रोबायोम प्रोफाइल का प्रिंसिपल को-ऑर्डिनेट एनालिसिस (पीसीओ) (कैल्शियम एसीटेट बनाम सुक्रोफेरिक ऑक्सीहाइड्रॉक्साइड)

जीनस स्तर पर रचना, बैक्टेरॉइड्स रोगियों के दोनों समूहों में सबसे अधिक प्रचलित थे, स्वतंत्र रूप से यदि उनका इलाज सीए या एसएफओ (छवि 2) के साथ किया गया था। रोगियों के बीच माइक्रोबियल प्रोफाइल बहुत अलग थे और, एक बार फिर, क्लस्टरिंग विश्लेषण ने एक ही रोगी के नमूनों को स्वतंत्र रूप से उपचार के बाद और उपचार के चरण (आधारभूत, 4, 12, या 20 सप्ताह) में समूहीकृत किया।

जब हम सभी समय बिंदुओं (सभी रोगियों और सभी हफ्तों) पर विचार करते हैं, तो लिंग सहित कई चर के लिए नमूनों की तुलना करते समय माइक्रोबियल समुदायों के लिए सांख्यिकीय अंतर (पी <0.05) खोजना="" संभव="" था।="" इस्केमिक="" कार्डियोमायोपैथी,="" संवहनी="" पहुंच="" या="" उम्र="" के="" रूप="" में="" एक="" कैथेटर="" का="" उपयोग="" (मरीजों="" को="" तीन="" समूहों="" में="" व्यवस्थित="" किया="" गया="" था:="" 45="" से="" कम,="" रेंज="" 61-69,="" 71="" से="" ऊपर)।="" जब="" प्रत्येक="" उपचार="" चरण="" (आधार="" रेखा,="" 4,="" 12,="" या="" 20="" सप्ताह)="" पर="" अलग="" से="" विचार="" किया="" गया="" तो="" ऐसे="" सांख्यिकीय="" अंतर="" नहीं="" देखे="" जा="" सकते="" थे;="" इसलिए,="" चर="" लिंग,="" आयु,="" इस्केमिक="" कार्डियोमायोपैथी,="" कैथेटर="" उपयोग="" और="" दवा="" उपचार="" (सीए="" बनाम="" एसएफओ)="" के="" लिए="" कोई="" अंतर="" नहीं="" देखा="">

बहस

सीए बनाम एसएफओ लेने वाले हेमोडायलिसिस रोगियों के आंत माइक्रोबायोम में परिवर्तन की तुलना करने वाला यह पहला अध्ययन है। हमारे अध्ययन में, इन अलग-अलग फॉस्फेट-बाइंडिंग एजेंटों के बीच आंत माइक्रोबायोम की जीवाणु संरचना में कोई सुसंगत अंतर नहीं था। यद्यपि हमें अलग-अलग माइक्रोबायोम प्रोफाइल मिले जब उपचार के दोनों समूहों की तुलना की गई, यह अलग प्रोफाइल पहले से ही बेसलाइन पर मौजूद था, और दीर्घकालिक उपचार ने इस विविधता को दो समूहों में से किसी में भी संशोधित नहीं किया। तो, कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं

अंजीर। 2 इस अध्ययन में विचार किए गए नमूनों के लिए क्लस्टरिंग विश्लेषण और माइक्रोबायोम प्रोफाइल (जीनस स्तर पर)

हेमोडायलिसिस विषयों में अलग-अलग समय बिंदुओं (बेसलाइन, सप्ताह 4, सप्ताह 12, सप्ताह 20) पर देखा गया था कि सीए के साथ इलाज किए गए आंत माइक्रोबायोम बनाम एसएफओ के साथ इलाज किया गया था।

हमारे रोगियों की आंत माइक्रोबायोम पिछली रिपोर्टों के अनुसार है, जिसमें बैक्टीरिया और फर्मिक्यूट्स फ़ाइला का वर्चस्व है, उपनिवेश की दूसरी पंक्ति में एक्टिनोबैक्टीरिया, प्रोटोबैक्टीरिया और वेरुकोमिक्रोबिया हैं [29]। जैसा कि पहले व्यापक रूप से चर्चा की गई थी, सीकेडी रोगियों में कई आंतरिक कारक होते हैं जो फार्माकोलॉजिकल उपचारों के अलावा आंत डिस्बिओसिस को बढ़ावा देते हैं, अर्थात् कॉलोनिक ट्रांजिट को कम करना, पाचन क्षमता में बदलाव, चयापचय एसिडोसिस, आंतों की दीवार शोफ, और सबसे महत्वपूर्ण, उच्च आंतों में से एक। यूरेमिक विषाक्त पदार्थों की उपलब्धता। स्वस्थ नियंत्रण की तुलना में, हेमोडायलिसिस से गुजरने वाले रोगियों में बैक्टीरिया की बहुतायत [30] होती है, जो हमारे अध्ययन के परिणामों से भी पुष्टि करता है।

आंत माइक्रोबायोम [25] पर फॉस्फेट बाइंडरों के प्रभाव के बारे में बहुत कम सबूत हैं। सीकेडी रोगियों पर सीए सहित कैल्शियम-आधारित फॉस्फेट बाइंडर्स के प्रभावों का आकलन करने वाले अध्ययनों में मल के नमूनों का विश्लेषण करने वाले माइक्रोबायोम की कमी है [31]। ट्राउटवेटर एट अल। [32], कैल्शियम कार्बोनेट लेने वाले स्वस्थ व्यक्तियों में फेकल टोटल शॉर्ट-चेन फैटी एसिड और जीनस क्लोस्ट्रीडियम XVIII की एक उच्च सापेक्ष बहुतायत में वृद्धि देखी गई। नवारो-गोंजालेज एट अल। [22], गैर-कैल्शियम-आधारित फॉस्फेट बाइंडर सीवेलमर या कैल्शियम-आधारित फॉस्फेट बाइंडर सीए लिए गए हेमोडायलिसिस रोगियों के सीरम नमूनों का विश्लेषण किया और निष्कर्ष निकाला कि सीवेलमर के साथ उपचार उच्च-संवेदनशील सी-रिएक्टिव प्रोटीन, आईएल में एक महत्वपूर्ण कमी के साथ जुड़ा था। -6, सीरम एंडोटॉक्सिन, और घुलनशील सीडी14 सांद्रता हेमोडायलिसिस रोगियों में मृत्यु दर के स्वतंत्र भविष्यवक्ता।

एसएफओ एक आयरन-आधारित फॉस्फेट बाइंडर है, और डेटा ने सुझाव दिया है कि यौगिक में निहित लोहा आंत माइक्रोबायोटा को बदल सकता है क्योंकि कुछ आंत बैक्टीरिया सापेक्ष बहुतायत [26, 33, 34] को बढ़ाने के लिए लोहे का उपयोग करते हैं। इसके अलावा, यह दिखाया गया है कि बृहदान्त्र तक पहुँचने वाले लोहे की मात्रा में वृद्धि कुछ रोगजनक बैक्टीरिया और एक प्रो-इन्फ्लेमेटरी वातावरण [20, 35] के विषाणु को बढ़ावा दे सकती है। लेकिन इस सबूत के बावजूद, हमारे अध्ययन से पता चलता है कि हेमोडायलिसिस रोगियों में एसएफओ उपचार न तो आंत माइक्रोबायोम को संशोधित करता है, न ही सीए उपचार।

लिंग लाउ एट अल। [27], सीकेडी चूहों (जो 5/6 नेफरेक्टोमी से गुजरे थे) और सामान्य चूहों के बीच सीरम के नमूनों में फेकल माइक्रोबायोम और यूरीमिक टॉक्सिन्स की तुलना में, बेतरतीब ढंग से एक नियमित आहार या 6 सप्ताह के लिए 4 प्रतिशत फेरिक साइट्रेट युक्त आहार दिया गया। उन्होंने देखा कि सीकेडी चूहों में कुछ फर्मिक्यूट्स और लैक्टोबैसिलस की सापेक्ष बहुतायत और सामान्य चूहों की तुलना में कम आंत माइक्रोबियल विविधता थी, लेकिन उन्होंने यह भी वर्णन किया कि सीकेडी चूहों में फेरिक साइट्रेट उपचार ने बैक्टीरिया की विविधता को लगभग नियंत्रण चूहों में देखे गए स्तरों तक बढ़ा दिया और यह उपचार यूरेमिक विषाक्त पदार्थों में वृद्धि नहीं हुई। हाल के एक अध्ययन में, वू एट अल। [36], हेमोडायलिसिस रोगियों की तुलना में या तो कैल्शियम कार्बोनेट या फेरिक साइट्रेट के साथ इलाज किए गए आंत माइक्रोबायोम। उन्होंने फेरिक साइट्रेट के साथ इलाज किए गए समूह में बैक्टीरिया की बढ़ी हुई बहुतायत और फर्मिक्यूट्स की कम बहुतायत के साथ एक महत्वपूर्ण रूप से बढ़ी हुई माइक्रोबियल विविधता देखी।

हमारे ज्ञान के लिए, आंत माइक्रोबायोम पर एसएफओ प्रभाव के संबंध में मनुष्यों में केवल एक अध्ययन किया गया है। इगुची एट अल। [37], हेमोडायलिसिस रोगियों के आंत माइक्रोबायोम और यूरीमिक विषाक्त पदार्थों में 3 महीने के परिवर्तन की तुलना में एसएफओ के साथ इलाज किया गया बनाम हाइपरफॉस्फेटिया के लिए कोई इलाज नहीं। उन्होंने पूरे समय एसएफओ के साथ इलाज करने वाले मरीजों में आंत माइक्रोबायम में कोई बदलाव नहीं पाया। तो, हमारा अध्ययन 5 महीने के लिए एसएफओ के साथ इलाज किए गए हेमोडायलिसिस रोगियों में आंत माइक्रोबायोम की इस दीर्घकालिक स्थिरता की पुष्टि करता है।

चर्चा करने के लिए एक और महत्वपूर्ण बिंदु यह है कि हमारे अध्ययन में, हमने उम्र या लिंग की तुलना में हेमोडायलिसिस रोगियों के आंत माइक्रोबायोम में अंतर देखा, लेकिन जब हम उपचार के समूह (सीए बनाम एसएफओ) द्वारा उनकी तुलना करते हैं तो हमें अंतर नहीं मिला है। तदनुसार, उम्र बढ़ने के कारण आंत माइक्रोबायोम में कुछ परिवर्तनों का प्रदर्शन किया गया है [38]। बुजुर्ग रोगी, विशेष रूप से उच्च कमजोर स्कोर वाले, युवा व्यक्तियों की तुलना में, जब युवा व्यक्तियों की तुलना में, बिफडोबैक्टीरिया, बैक्टेरॉइड्स / प्रीवोटेला, लैक्टोबैसिलस और क्लोस्ट्रीडियम क्लस्टर IV में बैक्टीरिया की प्रबलता, कम माइक्रोबियल विविधता के सापेक्ष अनुपात मौजूद होते हैं, जो अधिक माइक्रोबियल विविधता पेश करते हैं। और फर्मिक्यूट्स के उच्च अनुपात, दूसरों के बीच [39, 40]। इस बात का समर्थन करने वाले बढ़ते सबूत भी हैं कि महिलाओं और पुरुषों की तुलना करने पर आंत माइक्रोबायोम में परिवर्तन होते हैं [41, 42]। हमारे अध्ययन में, लिंग और उम्र के अनुसार आंत माइक्रोबायोम में कुछ अंतर देखे गए, लेकिन प्रत्येक रोगी में पाए जाने वाले अंतर बहुत अधिक स्पष्ट थे।

प्रयोगशाला के निष्कर्षों के संबंध में, जैसा कि अपेक्षित था, कैल्शियम-आधारित फॉस्फेट बाइंडर सीए के साथ इलाज करने वाले रोगियों ने एसएफओ के साथ इलाज किए गए लोगों की तुलना में उच्च कैल्शियम स्तर प्रस्तुत किया। हमने देखा, हालांकि सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण नहीं, एसएफओ समूह की तुलना में सीए समूह में अवसादन वेग, सी-रिएक्टिव प्रोटीन और फेरिटिन जैसे भड़काऊ मापदंडों के स्तर में वृद्धि हुई; कैल्शियम-आधारित बाइंडरों के अलावा कुछ फॉस्फेट बाइंडरों के लिए सूजन को कम करने पर इस तरह के फुफ्फुसीय प्रभाव का वर्णन किया गया था [43]।

यह विचार करना आवश्यक है कि हमारा अध्ययन कुछ सीमाएँ प्रस्तुत करता है। एक ओर, रोगी के नमूने का आकार छोटा है, इसलिए ठोस निष्कर्ष निकालना मुश्किल है, विशेष रूप से विश्लेषण किए गए नैदानिक ​​और जैव रासायनिक चर के प्रभावों पर। हमारे परिणामों को मान्य करने के लिए, रोगियों की बढ़ी हुई संख्या के साथ एक बड़े अध्ययन की आवश्यकता है। दूसरी ओर, हमारे मरीज़ अलग-अलग पृष्ठभूमि प्रदर्शित करते हैं, विशिष्ट सहरुग्णता के साथ जो आंत माइक्रोबायोम को प्रभावित कर सकते हैं। इसलिए, हमारा अध्ययन फॉस्फेट बाइंडर्स प्राप्त करने वाले रोगियों के आंत माइक्रोबायोम पर पाए जाने वाले प्रोफाइल की उच्च परिवर्तनशीलता के बारे में अलर्ट करता है। इस तरह के मतभेद अलग-अलग फॉस्फेट बाइंडर्स प्राप्त करने वाले मरीजों के बीच पाए गए किसी भी अतिरिक्त निष्कर्ष और मतभेदों को सीमित करते हैं।

जैसा कि हमने रिपोर्ट किया, यह पता लगाने के लिए कि क्या कोई विशिष्ट नैदानिक ​​चर इस विभेदित माइक्रोबायोम प्रोफ़ाइल को प्रभावित कर सकता है, हमने अपने रोगियों के आधार रेखा पर मुख्य नैदानिक ​​​​मापदंडों का विश्लेषण किया और हमें उपचार के दोनों समूहों के बीच सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अंतर नहीं मिला। रोगी 5 और 6 थोड़े से क्रम से बाहर थे और यह कहा जा सकता है कि रोगी 5 को 3 सप्ताह के लिए वैनकोमाइसिन और टोब्रामाइसिन प्राप्त हुआ, जबकि रोगी 6 ने बार-बार नकारात्मक संस्कृतियों और एक संभावित बर्बादी सिंड्रोम से जुड़े पुराने दस्त प्रस्तुत किए।

हमारे अध्ययन में, हमने फॉस्फेट बाइंडर से स्वतंत्र रूप से, 20 सप्ताह के उपचार के बाद हमारे हेमोडायलिसिस रोगियों के आंत माइक्रो-बायोम में कोई बदलाव नहीं देखा। फिलहाल, फॉस्फेट बाइंडर चुनते समय, हमें सीरम फॉस्फेट की कमी, गोली के बोझ, संवहनी कैल्सीफिकेशन प्रगति, प्रतिकूल घटनाओं, या गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल टॉलरेंस [44-47] में उनकी शक्ति पर भरोसा करना चाहिए; हालांकि आंत माइक्रोबायोम पर इन फॉस्फेट बाइंडरों के प्रभाव की उम्मीद थी, और अभी भी संभव है, अभी के लिए, इस बात का कोई सबूत नहीं है कि हाइपरफॉस्फेटेमिया का इलाज करते समय इस पहलू को हमारे दृष्टिकोण को प्रभावित करना चाहिए।

निष्कर्ष में, हमारे अध्ययन ने पाया कि 5- सीए या एसएफओ के साथ महीने के उपचार ने हेमोडायलिसिस रोगियों में बेसलाइन विविधता और न ही बेसलाइन जीवाणु संरचना को संशोधित नहीं किया, लेकिन सीकेडी रोगियों के आंत माइक्रोबायोम पर पाए जाने वाले प्रोफाइल की उच्च परिवर्तनशीलता के बारे में अलर्ट किया।

पावती लागू नहीं।

लेखक का योगदान आईबी, एफजी, और जेबी ने अध्ययन डिजाइन में कल्पना की और योगदान दिया; एएमआर, आईबी और एफजी ने रोगी समावेशन और नैदानिक ​​प्रबंधन में योगदान दिया; एएमआर, आईबी और एफजी। नमूनाकरण और डेटा संग्रह में योगदान दिया, AV, MNJ।, RP ने fecal DNA के निष्कर्षण और 16S rRNA के अनुक्रमण में योगदान दिया; RA, AV, MNJ, RP, और BSM ने OTU तालिका के निर्माण, टैक्सोनोमिक असाइनमेंट और डेटा और सांख्यिकीय विश्लेषण में योगदान दिया; एएमआर, आरए, आईबी, एफजी, बीएसएम ने पांडुलिपि के प्रारूपण में योगदान दिया और पांडुलिपि के महत्वपूर्ण संशोधन प्रदान किए। लेखकों के पास डेटा तक पूरी पहुंच थी, और संबंधित लेखक के पास पांडुलिपि को प्रकाशन के लिए जमा करने की अंतिम जिम्मेदारी थी।

फंडिंग इस शोध को FEDER-Fundo Europeu de Desenvolvimento रीजनल फंड्स द्वारा COMPETE 2020- ऑपरेशनल प्रोग्राम फॉर कॉम्पिटिटिवनेस एंड इंटरनेशनलाइजेशन (POCI), पुर्तगाल 2020, और पुर्तगाली फंड्स द्वारा FCT/MCTES के माध्यम से प्रोजेक्ट MicroMOB "POCI{ के ढांचे में फंड किया गया था। {2}} फेडर-029777 / PTDC/MEC-MCI/29777/2017"।

डेटा उपलब्धता वर्तमान अध्ययन के दौरान उपयोग किए गए और/या विश्लेषण किए गए डेटासेट उचित अनुरोध पर संबंधित लेखक से उपलब्ध हैं।

कोड उपलब्धता लागू नहीं है।

घोषणाओं

हितों का टकराव एएमआर, आरए, आईबी, एफजी, एवी, एमएनजे, आरपी, जेबी, बीएसएम घोषित करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है।

नैतिकता अनुमोदन इस अध्ययन को अस्पताल यूनिवर्सिटरी जर्मन ट्रायस आई पुजोल (पीआई-16-169, एनसीटी5551048) की क्लिनिकल रिसर्च एथिक्स कमेटी द्वारा अनुमोदित किया गया था और हेलसिंकी की घोषणा में उल्लिखित सिद्धांतों के अनुरूप था।

भाग लेने के लिए सहमति सभी प्रतिभागियों को अध्ययन प्रोटोकॉल पर विस्तृत जानकारी प्राप्त करने के बाद स्वेच्छा से भर्ती किया गया था। सभी मरीजों से लिखित सूचित सहमति प्राप्त की गई।

प्रकाशन के लिए सहमति लागू नहीं।

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