वाणिज्यिक व्हाइटनिंग क्रीम में हाइड्रोक्विनोन के निर्धारण के लिए अत्यधिक संवेदनशील और पारिस्थितिक रूप से स्थायी उलट-चरण एचपीटीएलसी विधि

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मोहम्मद एच. अलकर्णी 1, प्रवेज आलम 1, फैयाज शकील 2, अहमद आई. फौदाह 1 और सुल्तान अलशहरी 2,*

सार: उदकुनैन(HDQ) एक प्राकृतिक डिपिगमेंटिंग एजेंट है, जो आमतौर पर त्वचा-टोनिंग की तैयारी में उपयोग किया जाता है। पिछले साहित्य में एचडीक्यू परिमाणीकरण के विश्लेषणात्मक तरीकों की सुरक्षा और हरियाली पर विचार नहीं किया गया था। इसलिए, चार अलग-अलग वाणिज्यिक में एचडीक्यू अनुमान के लिए एक अत्यधिक संवेदनशील और पारिस्थितिक रूप से हरियाली उलट-चरण उच्च-प्रदर्शन पतली परत क्रोमैटोग्राफी (आरपी-एचपीटीएलसी) आधारित परख की स्थापना की गई थी।सफेदक्रीम (सीडब्ल्यूसी)। बाइनरी एथेनॉल-वाटर(60:40, v·v−1) मिश्रण का उपयोग ग्रीन सॉल्वेंट सिस्टम के रूप में किया गया था। एचडीक्यू का आकलन 291 एनएम पर किया गया था। वर्तमान RP-HPTLC-आधारित परख 20-2400 एनजी बैंड−1रेंज में रैखिक थी। पता लगाने और परिमाणीकरण डेटा के आधार पर वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति अत्यधिक संवेदनशील थी। अन्य सत्यापन पैरामीटर, जैसे सटीकता, सटीकता और मजबूती, एचडीक्यू के निर्धारण के लिए भी उपयुक्त थे। अधिकतम HDQ मात्रा CWC A (1.23 प्रतिशत w·w−1) और उसके बाद CWC C (0.81 प्रतिशत w·w−1), CWC D (0.43 प्रतिशत w·w−1), और CWC B (0.37 प्रतिशत w·) में प्राप्त की गई थी। डब्ल्यू -1)। वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए विश्लेषणात्मक ग्रीननेस (सहमत) स्कोर 0.91 के रूप में अनुमानित किया गया था, जो वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी परख की उत्कृष्ट हरियाली विशेषताओं को दर्शाता है। इन परिणामों से पता चलता है कि वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति एचडीक्यू की मात्रा के लिए इसके व्यावसायिक फॉर्मूलेशन के लिए अत्यधिक संवेदनशील और पारिस्थितिक रूप से टिकाऊ है।

कीवर्ड:सहमत होना;उदकुनैन; पारिस्थितिक रूप से टिकाऊ आरपी-एचपीटीएलसी; मान्यता

सिस्टैंच का अर्कमुक्त कणों को परिमार्जन कर सकता है और टायरोसिनेस के संचय को रोक सकता है।

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1 परिचय

उदकुनैन(HDQ) एक प्राकृतिक यौगिक है, जो मेलास्मा (मानव त्वचा में मेलेनिन के अत्यधिक संचय के कारण होने वाली बीमारी) के उपचार के लिए कई त्वचा-टोनिंग वाणिज्यिक योगों में मौजूद है [1,2]। यह एक शक्तिशाली डिपिगमेंटिंग एजेंट है और इसका उपयोग टायरोसिनेस [3] के विकल्प के रूप में किया जाता है। यह मानव त्वचा के हाइपरपिग्मेंटेशन [4,5] के उपचार में सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले एजेंटों में से एक है। व्यावसायिक त्वचा-टोनिंग फॉर्मूलेशन में एचडीक्यू की प्रभावी एकाग्रता 1.5 से 2 तक भिन्न होती है। 0 प्रतिशत w·w−1[6]। HDQ की उच्च सांद्रता (5 प्रतिशत w·w-1 से ऊपर) स्थानीय जलन और मानव त्वचा के लिए ल्यूकोडर्मा का कारण बनती है [5,6]। इसके विवादास्पद दुष्प्रभावों के कारण, कई देशों ने एचडीक्यू पर प्रतिबंध लगा दिया हैसफेदसामयिक योगों में एजेंट [7]। फिर भी, कई नैदानिक ​​जांचों ने विभिन्न सुरक्षात्मक प्रभावों का सुझाव दिया हैएचडीक्यूविभिन्न त्वचा के हाइपरपिग्मेंटरी विकारों के प्रबंधन में जैसे कि मेलास्मा, झाईयां, लेंटिगिन्स, आदि। [8,9]। एचडीक्यू के लाभ और जोखिम दोनों पर विचार करके, विभिन्न व्यावसायिक त्वचा-टोनिंग फॉर्मूलेशन में इसका मात्रात्मक विश्लेषण आवश्यक है।

एचडीक्यू के परिमाणीकरण के लिए या तो अकेले या अन्य के साथ संयोजन में विभिन्न फार्मास्युटिकल एसेज़ का उपयोग किया जाता हैसफेदविपणन व्हाइटनिंग क्रीम (सीडब्ल्यूसी) में एजेंट। वाणिज्यिक व्हाइटनिंग उत्पादों (सीडब्ल्यूपी) और फार्मास्यूटिकल तैयारियों में एचडीक्यू के मात्रात्मक विश्लेषण के लिए विभिन्न प्रकार के अल्ट्रा-वायलेट (यूवी) स्पेक्ट्रोमेट्री-आधारित परखों का दस्तावेजीकरण किया गया है [10-13]। उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी)-आधारित परखों की एक विस्तृत श्रृंखला को विभिन्न प्रकार के सीडब्ल्यूसी और सीडब्ल्यूपी [14–23] में इसके ईथर के साथ एचडीक्यू के निर्धारण के लिए प्रलेखित किया गया है। सीडब्ल्यूपी [24-29] में एचडीक्यू और इसके ईथर डेरिवेटिव के एक साथ निर्धारण के लिए विभिन्न वोल्टमैट्रिक विधियां भी स्थापित की गई हैं। कुछ अन्य विश्लेषणात्मक परख जैसे फ्लो-इंजेक्शन इलेक्ट्रोकेमिकल [30], माइक्रेलर इलेक्ट्रोकेनेटिक क्रोमैटोग्राफी [31], केशिका इलेक्ट्रोक्रोमैटोग्राफी [32], और नैनोकम्पोजिट [33] आधारित एसेज़ भी स्थापित किए गए हैं।एचडीक्यूइसके ईथर डेरिवेटिव और अन्य के साथ विश्लेषणसफेदसीडब्ल्यूपी में एजेंट। एचडीक्यू विश्लेषण [34,35] के लिए कुछ इलेक्ट्रोकेमिकल-आधारित नैनोसेंसर भी रिपोर्ट किए गए हैं। हमारे शोध समूह [1] द्वारा सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू के गुणात्मक और मात्रात्मक विश्लेषण के लिए एक सामान्य-चरण-उच्च-प्रदर्शन पतली-परत क्रोमैटोग्राफी (एचपीटीएलसी)-आधारित पद्धति भी लागू की गई थी।

एचडीक्यू विश्लेषण पर रिपोर्ट किए गए निबंधों के विस्तृत विश्लेषण के बाद, यह देखा गया कि साहित्य में फार्मास्युटिकल विधियों की सुरक्षा और पारिस्थितिक स्थिरता का मूल्यांकन या मूल्यांकन के लिए विचार नहीं किया गया है। इसके अलावा, हरे/पारिस्थितिक रूप से टिकाऊ उलट-चरण एचपीटीएलसी (आरपी-एचपीटीएलसी)-आधारित परख का उपयोग अभी तक अनुमान के लिए नहीं किया गया हैएचडीक्यूइसके सीडब्ल्यूसी में। पारिस्थितिक रूप से टिकाऊ / हरी एचपीटीएलसी-आधारित परख सादगी, किफायती, कम संचालन लागत, लघु विश्लेषण समय, कई नमूनों के समानांतर विश्लेषण, स्पष्टता का पता लगाने, और एचपीएलसी और अन्य विश्लेषणात्मक तरीकों [36-39] पर पर्यावरणीय विषाक्तता में कमी जैसे कई लाभ प्रदान करते हैं। तदनुसार, इस अध्ययन के लिए एचडीक्यू के निर्धारण के लिए एक आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति का चयन किया गया था। फार्मास्युटिकल एसेज़ [38-43] के हरेपन प्रोफाइल के आकलन के लिए विभिन्न तरीकों का उपयोग किया जाता है। फिर भी, केवल एनालिटिकल ग्रीननेस (AGREE) मेट्रिक अप्रोच ही ग्रीननेस असेसमेंट [42] के लिए ग्रीनएनालिटिकल केमिस्ट्री (GAC) के सभी 12 सिद्धांतों को लागू करता है।

वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति [42] के हरित मूल्यांकन के लिए सहमत मीट्रिक दृष्टिकोण लागू किया गया था। इसलिए, वर्तमान कार्य के आकलन के लिए एक अत्यधिक संवेदनशील और हरित/पारिस्थितिक रूप से टिकाऊ आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति विकसित करने के लिए किया गया था।एचडीक्यूचार अलग-अलग सीडब्ल्यूसी में। वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति का ग्रीननेस प्रोफाइल AGREE: द एनालिटिकल ग्रीननेस कैलकुलेटर द्वारा प्राप्त किया गया था। एचडीक्यू विश्लेषण के लिए वर्तमान विश्लेषणात्मक परख को इंटरनेशनल काउंसिल फॉर हार्मोनाइजेशन (ICH) Q2 (R1) दिशानिर्देशों [44] के अनुसार मान्य किया गया था।

2। सामग्री और प्रणालियां

2.1. सामग्री

एचडीक्यू (शुद्धता: 99 प्रतिशत) का संदर्भ मानक फ्लुका केमिका (डार्मस्टाड, जर्मनी) से प्राप्त किया गया था। एचपीएलसी-ग्रेड मेथनॉल (MeOH) और इथेनॉल (EtOH) अल्फा एसर (Tewksbury, MA, USA) से प्राप्त किए गए थे। HPLC-ग्रेड पानी (H2O) एक Milli-Q जल शोधक प्रणाली (E-Merck, Darmstadt, जर्मनी) से एकत्र किया गया था। इस्तेमाल किए गए अन्य सॉल्वैंट्स और अभिकर्मक विश्लेषणात्मक ग्रेड के थे। एचडीक्यू के चार अलग-अलग सीडब्ल्यूसी जून 2021 के महीने में अल-खर्ज, सऊदी अरब में फार्मास्युटिकल मार्केट से प्राप्त किए गए थे।एचडीक्यूप्रयोगों की शुरुआत से पहले 22 डिग्री सेल्सियस पर एक ठंडी और अंधेरी जगह में संग्रहीत किया गया था। सीडब्ल्यूसी को प्रयोगों की शुरुआत से लगभग एक महीने पहले संग्रहीत किया गया था।

2.2. क्रोमैटोग्राफी

अपने संदर्भ मानक में एचडीक्यू की आरपी-एचपीटीएलसी डेंसिटोमेट्री मात्रा का ठहराव और चार अलग-अलग सीडब्ल्यूसी एक एचपीटीएलसी उपकरण (सीएएमएजी, मुटेन्ज़, स्विट्जरलैंड) का उपयोग करके आयोजित किया गया था। एचडीक्यू का मात्रात्मक विश्लेषण आरपी सिलिका जेल 60 एफ254एस प्लेट्स (ई-मर्क, डार्मस्टैड, जर्मनी) के साथ पूर्व-लेपित 10 × 20 सेमी2 ग्लास-समर्थित प्लेटों पर किया गया था। टीएलसी प्लेटों पर नमूनों को 6 मिमी बैंड के रूप में देखा गया था। एक स्वचालित नमूना 4 (ATS4) ऐप्लिकेटर (CAMAG, जिनेवा, स्विट्जरलैंड) का उपयोग करना। नमूना एप्लीकेटर एक CAMAG माइक्रोलीटर सिरिंज (हैमिल्टन, बोनाडुज, स्विट्जरलैंड) से सुसज्जित था। के मात्रात्मक विश्लेषण के लिए आवेदन दरएचडीक्यू150 nL s−1 पर स्थिर रखा गया था। प्लेटों को 80 मिमी की दूरी पर एक स्वचालित विकासशील कक्ष 2 (CAMAG, Muttenz, Switzerland) में विकसित किया गया था। HDQ विश्लेषण के लिए हरी विलायक प्रणाली EtOHH2O (60:40, v·v−1) थी। विकासशील कक्ष को पहले मोबाइल चरण के वाष्प के साथ 30 मिनट के लिए 22 डिग्री सेल्सियस पर संतृप्त किया गया था। 291 एनएम पर एचडीक्यू का पता चला था। भट्ठा आयाम 4 × 0.45 मिमी2 थे और स्कैनिंग दर 20 मिमी s−1 थी। प्रत्येक प्रयोग तीन प्रतियों में किया गया था। डेटा प्रोसेसिंग के लिए इस्तेमाल किया जाने वाला सॉफ्टवेयर WinCATs (v. 1.4.3.6336, CAMAG, Muttenz, Switzerland) था।

2.3. एचडीक्यू कैलिब्रेशन वक्र और गुणवत्ता नियंत्रण नमूने तैयार करना

एचडीक्यू (10 मिलीग्राम) की निर्दिष्ट मात्रा को 100 एमएल EtOH-H2O (60:40, v·v−1) ग्रीन सॉल्वेंट सिस्टम में 100 µg mL−1 की सांद्रता के साथ स्टॉक समाधान प्राप्त करने के लिए वितरित किया गया था। स्टॉक समाधानों के विभिन्न संस्करणों को 20-2400 एनजी बैंड−1 रेंज में एचडीक्यू सांद्रता प्राप्त करने के लिए ईटीओएच-एच2ओ (60:40, वी·वी−1) सिस्टम का उपयोग करके और पतला किया गया था। के प्राप्त समाधानएचडीक्यूविभिन्न सांद्रता वाले एचपीटीएलसी प्लेटों पर देखे गए। एचडीक्यू के लिए एचपीटीएलसी शिखर क्षेत्र वर्तमान फार्मास्युटिकल परख का उपयोग करते हुए प्रत्येक एचडीक्यू समाधान के लिए प्राप्त किया गया था। HDQ का अंशांकन वक्र अपने HPTLC क्षेत्र के विरुद्ध HDQ सांद्रता की साजिश रचकर उत्पन्न किया गया था। इसके अलावा, तीन अलग-अलग गुणवत्ता नियंत्रण (क्यूसी) नमूने, जैसे निम्न क्यूसी (एलक्यूसी; 20 एनजी बैंड-1), मध्य क्यूसी (एमक्यूसी; 600 एनजी बैंड-1), और उच्च क्यूसी (एचक्यूसी; 2400 एनजी बैंड-1) नमूने , वर्तमान फार्मास्युटिकल परख के लिए अलग-अलग सत्यापन मापदंडों को निर्धारित करने के लिए अलग से प्राप्त किए गए थे।

2.4. सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू निर्धारण के लिए नमूना प्रसंस्करण

साहित्य में रिपोर्ट की गई प्रक्रिया को अपनाकर एचडीक्यू को चार अलग-अलग सीडब्ल्यूसी से निकाला गया था। ए, बी, सी, और डी सहित चार अलग-अलग सीडब्ल्यूसी की सटीक तौल (5.0 ग्राम) मात्रा को अलग-अलग फ़नल में स्थानांतरित कर दिया गया था। प्रत्येक CWC को 22 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट की अवधि के लिए MeOH (3 × 70 mL) के साथ अलग करने वाले फ़नल में हिलाया गया था। प्रत्येक CWC से MeOH के अर्क को एक रोटरी वैक्यूम बाष्पीकरण का उपयोग करके कम दबाव में सूखापन के लिए अलग से वाष्पित किया गया था। प्राप्त अवशेषों को 10 एमएल मेओएच के साथ पुनर्गठित किया गया और आगे के मूल्यांकन तक एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया गया। प्राप्त नमूनों को 291 एनएम पर वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति का उपयोग करते हुए एचडीक्यू विश्लेषण के अधीन किया गया था।

2.5. सत्यापन पैरामीटर

HDQ विश्लेषण के लिए वर्तमान RP-HPTLC परख ICH-Q2 (R1) दिशानिर्देशों [44] का पालन करके विभिन्न सत्यापन मापदंडों के लिए मान्य किया गया था।एचडीक्यूइसके मापा शिखर क्षेत्र के खिलाफ एचडीक्यू सांद्रता की साजिश रचकर रैखिकता का मूल्यांकन किया गया था। वर्तमान फार्मास्युटिकल परख के लिए 20, 40, 60, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 1200, और 2400 एनजी बैंड-1 के 11 अलग-अलग क्यूसी नमूनों में एचडीक्यू रैखिकता का मूल्यांकन किया गया था। वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए सिस्टम दक्षता मापदंडों का मूल्यांकन मंदता कारक (आरएफ), विषमता कारक (एएस), और सैद्धांतिक प्लेटों की संख्या प्रति मीटर (एन एम -1) के संदर्भ में किया गया था। Rf, As, andN m−1 को MCQ (600 एनजी बैंड−1) में प्राप्त किया गया था, जैसा कि पहले साहित्य [45] में बताया गया था।

वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति की सटीकता को प्रतिशत रिकवरी के रूप में निर्धारित किया गया था। प्रतिशत रिकवरी एलक्यूसी (20 एनजी बैंड -1), एमक्यूसी (600 एनजी बैंड -1), और एचक्यूसी (2400 एनजी बैंड -1) पर प्राप्त की गई थी। वर्तमान विश्लेषणात्मक विधि।

वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए सटीकता का मूल्यांकन इंट्रा / इंटरडे प्रेसिजन के रूप में किया गया था। वर्तमान विश्लेषणात्मक परख के लिए उसी दिन एलक्यूसी, एमक्यूसी, और एचक्यूसी में एचडीक्यू के विश्लेषण द्वारा इंट्राडे परिशुद्धता निर्धारित की गई थी। वर्तमान विश्लेषणात्मक परख [44] के लिए तीन अलग-अलग दिनों में एलक्यूसी, एमक्यूसी, और एचक्यूसी में एचडीक्यू के विश्लेषण द्वारा इंटरडे परिशुद्धता निर्धारित की गई थी। प्रत्येक परिशुद्धता को छह बार (n=6) मापा गया।

वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति के लिए ग्रीन सॉल्वैंट्स सिस्टम में कुछ छोटे बदलावों को पेश करके मजबूती का मूल्यांकन किया गया था। मजबूती मूल्यांकन के लिए, मूल EtOH H2O (60:40, v·v−1) विलायक प्रणाली को EtOH-H2O (62:38, v·v−1) और EtOHH2O (58:42, v·v−1 में बदल दिया गया था। सॉल्वेंट सिस्टम, और विशिष्ट एचपीटीएलसी प्रतिक्रिया और आरएफ मान दर्ज किए गए और व्याख्या की गई [44]।

वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए संवेदनशीलता का मूल्यांकन मानक विचलन पद्धति का उपयोग करके पता लगाने (एलओडी) और परिमाणीकरण (एलओक्यू) सीमा के रूप में किया गया था। वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए एचडीक्यू के एलओडी और एलओक्यू की गणना की गई, जैसा कि साहित्य [44,45] में बताया गया है।

वर्तमान फार्मास्युटिकल परख के लिए मानक एचडीक्यू के साथ सीडब्ल्यूसी ए, बी, सी, और डी में एचडीक्यू के आरएफ मूल्यों और यूवीस्पेक्ट्रा की तुलना करके शिखर शुद्धता / विशिष्टता का मूल्यांकन किया गया था।

2.6. सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू का मात्रात्मक विश्लेषण

सीडब्ल्यूसी ए, बी, सी, और डी के प्राप्त नमूनों को एचपीटीएलसी प्लेटों पर देखा गया था, और उनकी टीएलसी प्रतिक्रियाओं को नोट किया गया था। चोटी के लिए क्षेत्रएचडीक्यूसीडब्ल्यूसी में दर्ज किया गया। सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू सामग्री की गणना वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए एचडीक्यू के अंशांकन वक्र का उपयोग करके की गई थी।

2.7. हरियाली मूल्यांकन

वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए हरे रंग की विशेषताओं को सहमत मीट्रिक दृष्टिकोण [42] का उपयोग करके प्राप्त किया गया था। वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के AGREE स्कोर (0.0–1.0) AGREE: द एनालिटिकल ग्रीननेस कैलकुलेटर (संस्करण0.5, डांस्क यूनिवर्सिटी का उपयोग करके रिकॉर्ड किए गए थे। प्रौद्योगिकी, डांस्क, पोलैंड, 2020)।

3) परिणाम और चर्चा

3.1. विधि विकास

साहित्य विश्लेषणात्मक तरीकों के आधार पर, यह पाया गया है कि वाणिज्यिक सौंदर्य प्रसाधनों में एचडीक्यू के विश्लेषण के लिए पारिस्थितिक रूप से टिकाऊ सक्षम / हरी आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति का अभाव है। इसलिए, वर्तमान अध्ययन तेजी से, अत्यधिक संवेदनशील और पारिस्थितिक रूप से टिकाऊ विकसित करने के लिए किया गया था। सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू विश्लेषण के लिए आरपी-एचपीटीएलसी विधि।

HDQ के RP-HPTLC विश्लेषण के लिए, EtOH और H2O के विभिन्न अनुपात, जिनमें EtOH-H2O (50:50, v·v−1), EtOH-H2O (60:40, v·v−1), EtOH-H2O शामिल हैं। (70:30, v·v−1), EtOH H2O (80:20, v·v−1), और EtOH-H2O (90:10, v·v−1), के लिए हरे विलायक संयोजन के रूप में मूल्यांकन किया गया था। एचडीक्यू विश्लेषण के लिए एक विश्वसनीय बैंड का विकास। विलायक मिश्रण चैम्बर संतृप्ति स्थितियों के तहत विकसित किए गए थे। रिकॉर्ड किए गए डेटा से, यह देखा गया कि EtOH-H2O (50:50, v·v−1), EtOH-H2O (70:30, v·v−1), EtOH-H2O (80:20, v·v− 1), और EtOH-H2O (90:10, v·v−1) हरे विलायक मिश्रणों ने निम्न का खराब क्रोमैटोग्राम प्रस्तुत कियाएचडीक्यूअस्वीकार्य अस मान के साथ ({0}}.29 के रूप में)। हालांकि, EtOH-H2O (60:40, v·v−1) हरे विलायक संयोजन ने HDQ atRf=0.83 ± 0.02 के एक अच्छी तरह से हल किए गए क्रोमैटोग्राम की पेशकश करने के लिए एक स्वीकार्य मूल्य के साथ दिखाया था (जैसा {{ 12}}.03) (चित्र 1)। इसलिए, EtOH H2O (60:40, v·v−1) को CWCs में HDQ विश्लेषण के लिए हरे विलायक मिश्रण के रूप में अनुकूलित किया गया था। वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी विधि के लिए यूवी-स्पेक्ट्रल बैंड घनत्वमितीय रूप से दर्ज किए गए थे, और वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी विधि के लिए अधिकतम एचपीटीएलसी प्रतिक्रिया 291 एनएम पर पाई गई थी। इसलिए, एचडीक्यू का संपूर्ण विश्लेषण 291 एनएम पर किया गया था।

3.2. सत्यापन पैरामीटर

एचडीक्यू क्वांटिटेशन के लिए वर्तमान फार्मास्युटिकल परख को आईसीएच सिफारिशों [44] का पालन करके रैखिकता रेंज, सिस्टम दक्षता मापदंडों, सटीकता, सटीकता, मजबूती, संवेदनशीलता और शिखर शुद्धता / विशिष्टता के लिए मान्य किया गया था। वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी विधि के लिए एचडीक्यू के अंशांकन वक्र के कम से कम वर्ग प्रतिगमन विश्लेषण के परिणाम तालिका 1 में प्रस्तुत किए गए हैं।एचडीक्यूअंशांकन वक्र वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए 0.9997 के निर्धारण गुणांक के साथ 20–2400 एनजी बैंड की सीमा में रैखिक था। इन आंकड़ों ने एचडीक्यू एकाग्रता और इसकी प्रतिक्रिया के बीच अच्छी रैखिकता का सुझाव दिया।

वर्तमान फ़ार्मास्यूटिकल पद्धति के सिस्टम दक्षता मापदंडों का अध्ययन MQC (600 ng band−1) में किया गया था, और परिणाम तालिका 2 में शामिल हैं। Rf, As, और N m−1 के लिए मान वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति की भविष्यवाणी क्रमशः 0.83 ± 0.02, 1.03 ± 0.03, और 4987 ± 2.87 के रूप में की गई थी। इन परिणामों ने संकेत दिया कि सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू विश्लेषण के लिए वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति विश्वसनीय थी।

वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए सटीकता विश्लेषण के परिणाम तालिका 3 में सूचीबद्ध हैं। वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति के लिए एचडीक्यू की प्रतिशत वसूली क्रमशः एलक्यूसी, एमक्यूसी और एचक्यूसी पर 101.80 प्रतिशत, 98.16 प्रतिशत और 99.38 प्रतिशत के रूप में निर्धारित की गई थी। . प्रतिशत वसूली के उच्च मूल्यों ने सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू विश्लेषण के लिए वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति की सटीकता का संकेत दिया।

सटीकता को भिन्नता के गुणांक (प्रतिशत सीवी) के प्रतिशत के रूप में निर्धारित किया गया था, और परिणाम तालिका 4 में दिखाए गए हैं। वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए एचडीक्यू के प्रतिशत सीवी की भविष्यवाणी 0.91, 0 के रूप में की गई थी। 59, और 0.26 प्रतिशत क्रमशः LQC, MQC, और HQC पर, इंट्राडेप्रेसिजन के लिए। वर्तमान RP-HPTLC पद्धति के लिए HDQ के प्रतिशत CV का अनुमान क्रमशः 0.98,{{10}}.69, और 0.32 प्रतिशत LQC, MQC और HQC पर लगाया गया था। इंटरडे परिशुद्धता। प्रतिशत सीवी के निम्न मूल्यों ने सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू विश्लेषण के लिए वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी पद्धति की शुद्धता का संकेत दिया।

वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए मजबूती विश्लेषण के परिणाम तालिका 5 में दिखाए गए हैं। मजबूती विश्लेषण के लिए प्रतिशत सीवी की भविष्यवाणी 0.59–0.66 प्रतिशत के रूप में वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए की गई थी। HDQ के Rf मान 0.82–0.84 रेंज में प्रेजेंटैनालिटिकल मेथड के लिए पाए गए। एचडीक्यू के आरएफ मूल्यों में संकीर्ण परिवर्तन और कम प्रतिशत सीवी ने सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू परिमाणीकरण के लिए वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति की मजबूती को दिखाया।

वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए संवेदनशीलता "LOD और LOQ" के रूप में दर्ज की गई थी, और उनके भौतिक मूल्यों को तालिका 1 में दिखाया गया है। वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए "LOD और LOQ" की भविष्यवाणी 6.91 ± 0.23 और 2 के रूप में की गई थी। 0.73 ± 0.68 एनजी बैंड−1, क्रमशः, के लिएएचडीक्यूपरिमाणीकरण वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए "एलओडी और एलओक्यू" के इन भौतिक मूल्यों ने सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू विश्लेषण के लिए संवेदनशीलता का संकेत दिया।

वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए चरम शुद्धता/विशिष्टता का मूल्यांकन मानक एचडीक्यू के साथ चार अलग-अलग सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू के ओवरलेड यूवी स्पेक्ट्रा की तुलना करके किया गया था। चार अलग-अलग सीडब्ल्यूसी में मानक एचडीक्यू और एचडीक्यू के ओवरलेड यूवी स्पेक्ट्रा को चित्र 2 में दिखाया गया है। मानक एचडीक्यू और अध्ययन किए गए सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू के लिए उच्चतम क्रोमैटोग्राफिक प्रतिक्रिया वर्तमान विश्लेषणात्मक विधि के लिए 291 एनएम पर देखी गई थी। मानक एचडीक्यू और सीडब्ल्यूसी में समान यूवी स्पेक्ट्रा, आरएफ मान और एचडीक्यू की तरंग दैर्ध्य ने वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए चरम शुद्धता/विशिष्टता का संकेत दिया।

3.3. सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू सामग्री का विश्लेषण

वर्तमान विश्लेषणात्मक परख की प्रयोज्यता को सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू के मात्रात्मक आकलन में सत्यापित किया गया था। का क्रोमैटोग्रामएचडीक्यूवर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए मानक HDQ के साथ Rf {{0}}.83 ± 0.02 पर इसके TLC स्थान की तुलना करके CWCs की पहचान की गई थी। वर्तमान विश्लेषणात्मक परख के लिए सीडब्ल्यूसी ए और बी में एचडीक्यू के क्रोमैटोग्राम को चित्र 3 में संक्षेपित किया गया है। सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू के एचपीटीएलसी क्रोमैटोग्राम शुद्ध एचडीक्यू के समान थे। सीडब्ल्यूसी के क्रोमैटोग्राम में कुछ अतिरिक्त चोटियां भी दिखाई दीं, जो सीडब्ल्यूसी में मौजूद विभिन्न अंशों से जुड़ी हो सकती हैं। पारिस्थितिक रूप से टिकाऊ एचपीटीएलसी पद्धति सीडब्ल्यूसी के अन्य अवयवों के हस्तक्षेप के बिना आरएफ=0.83 पर एचडीक्यू विश्लेषण के लिए चयनात्मक थी। CWCs में HDQ का Rf मान (0.83) मानक HDQ ({{20}.83) के समान पाया गया, जो दर्शाता है कि HDQ और HDQ के बीच कोई अंतःक्रिया नहीं थी। सीडब्ल्यूसी सामग्री। इसलिए, एचडीक्यू क्रोमैटोग्राम की गुणवत्ता, एलओडी, और एचडीक्यू विश्लेषण की वर्तमान एचपीटीएलसी पद्धति की दक्षता पर निर्माण सामग्री का कोई प्रभाव नहीं था। सीडब्ल्यूसी के क्रोमैटोग्राम में अतिरिक्त चोटियों की उपस्थिति ने संकेत दिया कि वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी विधि निर्माण सामग्री की उपस्थिति में एचडीक्यू अनुमान के लिए विश्वसनीय थी। सीडब्ल्यूसी की एचडीक्यू सामग्री एचडीक्यू के अंशांकन वक्र से निर्धारित की गई थी, और परिणाम तालिका 6 में शामिल हैं। तालिका 6 एचडीक्यू की लेबल की गई मात्रा और इसके निर्माण सामग्री को भी सारांशित करती है। सीडब्ल्यूसी ए में एचडीक्यू सामग्री उच्चतम थी (1.23 प्रतिशत w·w−1) उसके बाद सीडब्ल्यूसी सी (0.81 प्रतिशत w·w−1), CWC D (0.43 प्रतिशत w·w का स्थान था। -1), और सीडब्ल्यूसी बी (0.37 प्रतिशत w·w−1)। HDQ की रिकॉर्ड की गई सामग्री, अध्ययन किए गए CWCs में HDQ की लेबल की गई राशि (2.{27}} प्रतिशत w·w−1) से बहुत कम थी। साहित्य में सामान्य चरण एचपीटीएलसी पद्धति का उपयोग करते हुए क्रमशः दो अलग-अलग सीडब्ल्यूसी (ए और बी) में एचडीक्यू सामग्री को 0.69 प्रतिशत w·w−1 और 0.34 प्रतिशत w·w-1 के रूप में दर्ज किया गया था। HDQ की रिपोर्ट की गई सामग्री भी साहित्य में HDQ की लेबल की गई राशि (2.{38}} प्रतिशत w·w−1) से बहुत कम थी [1]। कई सीडब्ल्यूसी या सीडब्ल्यूपी को पूरी तरह से प्राकृतिक होने के दावे के तहत विपणन किया जाता है। हालांकि, कुछ सिंथेटिक रसायनों को मिलावटी के रूप में पाया जाना आम बात है जो ऐसे सीडब्ल्यूसी या सीडब्ल्यूपी में धोखाधड़ी के रूप में पाए जाते हैं। इस काम में दर्ज एचडीक्यू की मात्रा और साहित्य में दर्ज किए गए लोगों ने संकेत दिया कि अध्ययन किए गए सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू की मात्रा कम है और लेबल के दावों से मेल नहीं खाती [1]। इसलिए, यह उम्मीद की जाती है कि अध्ययन किए गए सीडब्ल्यूसी में मिलावट के रूप में कुछ सिंथेटिक रसायन होते हैं। कुल मिलाकर, वर्तमान विश्लेषणात्मक परख का उपयोग कॉस्मेटिक और फार्मास्युटिकल तैयारियों में एचडीक्यू विश्लेषण के लिए किया जा सकता है।

3.4. हरियाली आकलन

फार्मास्यूटिकल एसेज़ [38-43] के हरेपन के मूल्यांकन के लिए विभिन्न तरीकों का उपयोग किया जाता है। हालांकि, हरेपन के मूल्यांकन के लिए केवल सहमत दृष्टिकोण जीएसी के सभी 12 सिद्धांतों का उपयोग करता है [42]। इसलिए, AGREE कैलकुलेटर का उपयोग करके वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति की हरियाली प्रोफ़ाइल प्राप्त की गई थी। वर्तमान विश्लेषणात्मक परख के लिए जीएसी के 12 विभिन्न सिद्धांतों का उपयोग करते हुए अनुमानित सहमत स्कोर चित्र 4 में प्रस्तुत किया गया है। जीएसी के विभिन्न सिद्धांतों के लिए सहमत स्कोर निम्नानुसार दर्ज किया गया था: नमूना उपचार: 0.61 विश्लेषणात्मक उपकरण की स्थिति: 1.{{ 9}}नमूना तैयार करने के चरण: 1.00स्वचालन की डिग्री: 0.80व्युत्पत्ति: 1.00कचरे की मात्रा: 1.{{17} }विश्लेषण थ्रूपुट: 1.00ऊर्जा की खपत: 1.00नमूना उपचार: 0.51 अभिकर्मक का स्रोत: 1.00सॉल्वैंट्स की विषाक्तता: 1.00 ऑपरेटर की सुरक्षा: 1.00

वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए समग्र AGREE स्कोर 0.91 के रूप में दर्ज किया गया था, जो इसके लिए उत्कृष्ट हरित विश्लेषणात्मक पद्धति को दर्शाता है।एचडीक्यूपरिमाणीकरण

4। निष्कर्ष

एचडीक्यू के चार अलग-अलग सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू विश्लेषण के लिए आरपी-एचपीटीएलसी-डेंसिटोमेट्री पद्धति विकसित की गई थी। वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी परख को विभिन्न सत्यापन मापदंडों के लिए मान्य किया गया था। वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति अत्यधिक संवेदनशील, तीव्र और पारिस्थितिक रूप से टिकाऊ थीएचडीक्यूविश्लेषण। वर्तमान विश्लेषणात्मक पद्धति के लिए AGREE स्कोर ने HDQ परिमाणीकरण के लिए एक उत्कृष्ट विश्लेषणात्मक परख का सुझाव दिया। वर्तमान आरपी-एचपीटीएलसी विधि चार अलग-अलग सीडब्ल्यूसी में एचडीक्यू विश्लेषण के लिए उपयुक्त थी। इन परिणामों ने संकेत दिया कि वर्तमान विश्लेषणात्मक परख को विभिन्न कॉस्मेटिक और फार्मास्युटिकल तैयारियों में एचडीक्यू विश्लेषण के लिए लागू किया जा सकता है।