मात्रात्मक एचपीटीएलसी विश्लेषण के साथ मैकलुरा पोमीफेरा (राफिन) श्नाइडर 80 प्रतिशत मेथनॉल अर्क का इन विट्रो एंटी-एजिंग संभावित मूल्यांकन
Jun 12, 2023
अमूर्त
उद्देश्य:मैकलुरा पोमीफेरा (राफिन.) श्नाइडर दुनिया भर में एक व्यापक प्रजाति है, जिसे अक्सर सजावटी उद्देश्यों के लिए भी पाला जाता है। पिछले अध्ययनों से पता चला है कि एम. पोमीफेरा फल प्रीनाइलेटेड आइसोफ्लेवोनोइड्स से भरपूर होते हैं, उल्लेखनीय जैविक गतिविधियों का प्रदर्शन करते हैं, और संभावित लाभ होते हैं, खासकर, जब शीर्ष पर लगाया जाता है। यह ध्यान में रखते हुए कि फेनोलिक यौगिक एंटीएजिंग कॉस्मेटिक उत्पादों के विकास में आवश्यक स्रोत हैं, इस अध्ययन ने एंटीऑक्सिडेंट और बाह्य मैट्रिक्स-डिग्रेडिंग एंजाइमों की गतिविधि को बाधित करने का मूल्यांकन करके एम. पोमीफेरा 80 प्रतिशत मेथनॉलिक अर्क (एमपीएम) की एंटी-एजिंग क्षमता की जांच की।
सिस्टैंच का ग्लाइकोसाइड हृदय और यकृत के ऊतकों में एसओडी की गतिविधि को भी बढ़ा सकता है, और प्रत्येक ऊतक में लिपोफसिन और एमडीए की सामग्री को काफी कम कर सकता है, विभिन्न प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन रेडिकल्स (ओएच-, एच₂ओ₂, आदि) को प्रभावी ढंग से हटा सकता है और डीएनए क्षति से बचा सकता है। ओएच-रेडिकल्स द्वारा। सिस्टैंच फेनिलएथेनॉइड ग्लाइकोसाइड्स में मुक्त कणों की एक मजबूत सफाई क्षमता होती है, विटामिन सी की तुलना में उच्च कम करने की क्षमता होती है, शुक्राणु निलंबन में एसओडी की गतिविधि में सुधार होता है, एमडीए की सामग्री कम होती है, और शुक्राणु झिल्ली समारोह पर एक निश्चित सुरक्षात्मक प्रभाव पड़ता है। सिस्टैंच पॉलीसेकेराइड डी-गैलेक्टोज के कारण प्रयोगात्मक रूप से वृद्ध चूहों के एरिथ्रोसाइट्स और फेफड़ों के ऊतकों में एसओडी और जीएसएच-पीएक्स की गतिविधि को बढ़ा सकते हैं, साथ ही फेफड़ों और प्लाज्मा में एमडीए और कोलेजन की सामग्री को कम कर सकते हैं और इलास्टिन की सामग्री को बढ़ा सकते हैं। डीपीपीएच पर एक अच्छा सफाई प्रभाव, वृद्ध चूहों में हाइपोक्सिया का समय बढ़ाना, सीरम में एसओडी की गतिविधि में सुधार करना, और प्रयोगात्मक रूप से वृद्ध चूहों में फेफड़ों के शारीरिक अध: पतन में देरी करना, सेलुलर रूपात्मक अध: पतन के साथ, प्रयोगों से पता चला है कि सिस्टैंच में अच्छी एंटीऑक्सीडेंट क्षमता है और त्वचा की उम्र बढ़ने वाली बीमारियों को रोकने और उनका इलाज करने के लिए एक दवा बनने की क्षमता रखती है। साथ ही, सिस्टैंच में इचिनाकोसाइड में डीपीपीएच मुक्त कणों को साफ़ करने की एक महत्वपूर्ण क्षमता है और प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों को साफ़ करने और मुक्त कट्टरपंथी-प्रेरित कोलेजन गिरावट को रोकने की क्षमता है, और थाइमिन मुक्त कट्टरपंथी आयन क्षति पर भी अच्छा मरम्मत प्रभाव पड़ता है।

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सामग्री और तरीके:इस अध्ययन के लिए, उम्र बढ़ने की प्रक्रिया से जुड़े विभिन्न एंजाइमों के खिलाफ 80 प्रतिशत एमपीएम की निरोधात्मक क्षमता का मूल्यांकन किया गया था। उम्र बढ़ने में ऑक्सीडेटिव तनाव की स्पष्ट भूमिका को देखते हुए, इन विट्रो एंटीऑक्सीडेंट परीक्षणों को भी नियोजित किया गया था। इसके अलावा, उच्च-प्रदर्शन पतली परत क्रोमैटोग्राफी विश्लेषण द्वारा ओसाजिन को नमूने के प्रमुख बायोएक्टिव आइसोफ्लेवोनॉइड के रूप में निर्धारित किया गया था।
परिणाम:यंत्रवत् भिन्न एंटीऑक्सीडेंट परीक्षण के परिणामों ने अर्क की महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट क्षमता प्रदर्शित की। हयालूरोनिडेज़, कोलेजनेज़ और इलास्टेज एंजाइमों के खिलाफ एमपीएम की निषेध क्षमता की जांच की गई, जो उम्र बढ़ने की प्रक्रिया के त्वरण से सीधे जुड़े हुए हैं और परिणामों से पता चला कि एमपीएम स्पष्ट रूप से उपरोक्त एंजाइमों को रोकता है। एमपीएम में अद्वितीय फेनोलिक और फ्लेवोनोइड सामग्री थी; 113.92 ± 2.26 मिलीग्राम गैलिक एसिड समकक्ष/जी और 66.41 ± 0.74 मिलीग्राम क्यूई/जी, क्रमशः। जब कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता परख पर विचार किया गया, तो यह सुझाव देना संभव है कि एमपीएम एक आशाजनक एंटी-एजिंग एजेंट है।
निष्कर्ष:परिणामस्वरूप, इस अध्ययन से पता चलता है कि एम. पोमीफेरा के फलों के अर्क में महत्वपूर्ण एंटी-एजिंग क्षमता होती है और इसका उपयोग इस उद्देश्य के लिए किया जा सकता है।
कीवर्ड:मैकलुरा पोमीफेरा, एंटी-एजिंग, एंटीऑक्सीडेंट, एचपीटीएलसी, ओसाजिन
परिचय
इसी तरह, मानव त्वचा सहित सभी अंगों में बढ़ती उम्र के साथ विभिन्न शारीरिक परिवर्तन होते हैं। उम्र बढ़ने की दो श्रेणियां मौजूद हैं: आंतरिक उम्र बढ़ने को आनुवंशिकी द्वारा नियंत्रित किया जाता है और बाहरी उम्र बढ़ना पराबैंगनी (यूवी) जैसे पर्यावरणीय कारकों के हानिकारक प्रभावों के कारण होने वाले शारीरिक परिवर्तनों का प्राकृतिक परिणाम है। ) विकिरण, रासायनिक विषाक्त पदार्थ, और धूम्रपान।1,2 संवहनी और ग्रंथियों की संरचना में गिरावट, रेशेदार ऊतक हानि, और कोशिका पुनर्जनन में कमी उम्र बढ़ने के मूलभूत कारक हैं,3 जो ऊतक अध: पतन, झुर्रियों में वृद्धि और बाह्य कोशिकीय मैट्रिक्स (ईसीएम) में कमी का कारण बनते हैं। .4
सबसे बड़े अंग के रूप में, त्वचा की कई भूमिकाएँ होती हैं जैसे सुरक्षा, शरीर के तापमान का नियमन और इंद्रियों का पता लगाना।5 त्वचा में एपिडर्मिस, डर्मिस और चमड़े के नीचे के ऊतक होते हैं और यह मानव शरीर और बाहरी के बीच पहली बाधा है। पर्यावरण.6,7 ईसीएम डर्मिस की सबसे बड़ी इकाई है और एक संरचनात्मक ढांचा पेश करके विकास और लोच का समर्थन करता है। 8 कोलेजन, इलास्टिन और फ़ाइब्रोनेक्टिन, जो त्वचीय फ़ाइब्रोब्लास्ट द्वारा बनते हैं, ईसीएम का गठन करते हैं और प्रोटीयोग्लाइकेन्स के साथ जुड़े होते हैं। 5 कोलेजन है एक मूल प्रोटीन जिसमें शरीर में सभी प्रोटीन सामग्री का लगभग {{5%) प्रतिशत होता है और यह विभिन्न प्रकार के जानवरों के संयोजी ऊतकों के बाह्यकोशिकीय स्थान में पाया जाता है। त्वचा की उम्र बढ़ने और झुर्रियों के गठन का एक प्रमुख कारण कोलेजन में परिवर्तन है संरचना.1 इलास्टिन एक प्रोटीन है, जो त्वचा को एक अद्वितीय शारीरिक लोच प्रदान करता है और कई संयोजी ऊतकों में मौजूद होता है।6 त्वचा का जलयोजन, और त्वचा को चिकना, नम और चिकना बनाए रखना महत्वपूर्ण कारक हैं जो त्वचा की उम्र बढ़ने से रोकते हैं, और एक प्रमुख ग्लाइकोसामिनोग्लाइकेन (जीएजी), हयालूरोनिक एसिड, इन गतिविधियों में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है।8 इन महत्वपूर्ण घटकों को हयालूरोनिडेज़, कोलेजनेज़ और इलास्टेज एंजाइमों द्वारा नष्ट कर दिया जाता है, जिससे त्वचा की उम्र बढ़ने में तेजी आती है। इसके अलावा, सूक्ष्मजीवों, प्रदूषण, आयनीकरण विकिरण, रसायनों और विषाक्त पदार्थों के संपर्क से प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) का निर्माण होता है और इसके हानिकारक परिणाम त्वचा की उम्र बढ़ने में तेजी लाते हैं। आरओएस जटिल आणविक मार्ग शुरू कर सकता है और परिणामस्वरूप, कोलेजनेज़, इलास्टेज , और हाइलूरोनिडेज़ गतिविधि बढ़ सकती है, जिससे पता लगाने योग्य ईसीएम टूटना और त्वचा की बनावट में संशोधन हो सकता है।10 उल्लिखित कारणों के लिए, नए प्राकृतिक एजेंट, जो आरओएस गठन को कम करते हैं और ईसीएम को ख़राब करने वाले प्रोटीज को रोकते हैं, त्वचा की उम्र बढ़ने की प्रक्रिया में देरी कर सकते हैं।11
मैकलुरा पोमीफेरा (राफिन) श्नाइडर मोरेसी या शहतूत परिवार से संबंधित है और इसे ओसेज ऑरेंज पेड़ के रूप में भी जाना जाता है, जिसकी खेती लगभग दुनिया भर में की जाती है।12 एम. पोमीफेरा में कई जैविक गतिविधियां होती हैं जैसे कि जीवाणुरोधी, एंटीफंगल, एंटीवायरल, साइटोटॉक्सिक, एंटीट्यूमर, एस्ट्रोजेनिक, और मलेरिया-रोधी13 इसके प्रीनाइलेटेड आइसोफ्लेवोन्स, यानी ओसाजिन और पोमीफेरिन के कारण, जो फलों के प्रमुख मेटाबोलाइट्स माने जाते हैं।14 एंटी-एजिंग कॉस्मेटिक उत्पादन में, फेनोलिक यौगिक महत्वपूर्ण प्राकृतिक स्रोत हैं। इस प्रकार, ऐसी गतिविधियों के लिए एम. पोमीफेरा जैसे फेनोलिक यौगिक-समृद्ध पौधों का अध्ययन करने में रुचि बढ़ रही है। पिछले अध्ययनों में पाया गया कि मैक्लुरा के आइसोफ्लेवोन्स कोलेजन, इलास्टिन और फ़ाइब्रिलिन के अभिव्यक्ति स्तर को रेटिनॉल के समकक्ष सांद्रता से तुलनीय या बेहतर बढ़ाते हैं। इसलिए, यह माना जा सकता है कि मैक्लुरा आइसोफ्लेवोन्स शक्तिशाली ईसीएम प्रोटीन उत्तेजक हैं।15 इन आंकड़ों को ध्यान में रखते हुए, इस अध्ययन का उद्देश्य एंटीऑक्सिडेंट बायोएक्टिविटी और अवरोधक के लिए इसकी क्षमता की खोज करके एम. पोमीफेरा 80 प्रतिशत मेथनॉलिक अर्क (एमपीएम) की एंटी-एजिंग क्षमता की जांच करना है। ईसीएम डिग्रेडिंग एंजाइम। इसके अतिरिक्त, अर्क के प्रमुख बायोएक्टिव घटक, ओसाजिन का मात्रात्मक विश्लेषण उच्च-प्रदर्शन पतली परत क्रोमैटोग्राफी (एचपीटीएलसी) द्वारा मापा गया था, और फेनोलिक प्रोफाइल की अधिक सटीक समझ के लिए कुल फेनोलिक सामग्री और कुल फ्लेवोनोइड सामग्री परख आयोजित की गई थी। नतीजे बताते हैं कि एम. पोमीफेरा एंटी-एजिंग उत्पादों का एक मूल्यवान स्रोत हो सकता है।
सामग्री और तरीके
रसायन
सिग्मा केमिकल कंपनी (सेंट लुइस, एमओ, यूएसए) ने परीक्षणों में नियोजित सभी एंजाइमों, रसायनों और संदर्भों का खर्च वहन किया। सभी रसायनों की गुणवत्ता विश्लेषणात्मक श्रेणी की थी।

संयंत्र के लिए सामग्री
एम. पोमीफेरा के फल मई 2020 में उसाक, तुर्किये से एकत्र किए गए थे। डॉ. हिलाल बर्दाकी ने पौधे के नमूनों की वानस्पतिक पहचान प्रक्रिया को अंजाम दिया। पौधे का एक वाउचर नमूना फार्मेसी संकाय के हर्बेरियम (एसीयूपीएच 00002) के एकिबेडेम विश्वविद्यालय में जमा किया गया था।
अर्क की तैयारी
फलों को छोटे-छोटे टुकड़ों में अलग किया गया और ब्लेंडर से गुजारा गया। फलों (6.45 किलोग्राम) को एक अंधेरी जगह में कमरे के तापमान पर तीन दिनों के लिए हिलाने वाले उपकरण का उपयोग करके 3125 एमएल 80 प्रतिशत मेथनॉल (MeOH) के साथ मिलाया गया। मैकरेट को फ़िल्टर किया गया और इस प्रक्रिया को दो बार दोहराया गया। प्राप्त निस्पंदों को एक साथ इकट्ठा किया गया और फिर, मेथनॉल को एक रोटरी बाष्पीकरणकर्ता में वाष्पित किया गया। कच्चे मेथनॉलिक अर्क को लियोफिलाइज़ किया गया (उपज 204.37 ग्राम, 3.16 प्रतिशत थी) और -20 डिग्री (एमपीएम) पर संग्रहीत किया गया।
एचपीटीएलसी द्वारा प्रमुख बायोएक्टिव यौगिकों की मात्रा निर्धारण प्रक्रिया
उपयोग किए गए सभी रसायन और अभिकर्मक विश्लेषणात्मक ग्रेड के थे। क्लोरोफॉर्म (CHCl3) और एथिल एसीटेट (EtOAc) सिग्मा-एल्ड्रिच से खरीदे गए थे। ओसाजिन का एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध मानक सिग्मा-एल्ड्रिच (एसएमबी {{10}}0092) से खरीदा गया था। एचपीटीएलसी विश्लेषण 20 सेमी × 10 सेमी ग्लास एचपीटीएलसी सिलिका जेल 60 एफ254 प्लेट्स (मर्क, डार्मस्टेड, जर्मनी) पर किया गया था। MPM में ओसाजिन सामग्री CAMAG HPTLC विश्लेषणात्मक प्रणाली द्वारा निर्धारित की गई थी। वर्तमान अध्ययन में प्रयुक्त मोबाइल चरण का वर्णन पहले बोज़कर्ट एट अल.16 द्वारा एम. पोमीफेरा के सक्रिय सिद्धांतों के अलगाव के दौरान किया गया था। विश्लेषण परीक्षण समाधान के रूप में 10 मिलीग्राम/एमएल MeOH अर्क का उपयोग किया गया था। 2 एमएल एसीटोन का उपयोग करके ओसाजिन का एक मानक स्टॉक समाधान (0.5 मिलीग्राम/एमएल) तैयार किया गया था। स्टॉक घोल से एसीटोन को पतला करके मानक यौगिक की 50 μg/mL सांद्रता वाला एक कार्यशील घोल तैयार किया गया था। प्रत्येक नमूने को 0.45 µm सिरिंज फ़िल्टर के माध्यम से फ़िल्टर किया गया था। अर्क के 10 μL को मानक समाधान (3.3-4.7 μL) की कम से कम पांच अलग-अलग सांद्रता के साथ CAMAG स्वचालित के साथ सिलिका जेल ग्लास एचपीटीएलसी प्लेट्स 60 F254 पर 8 मिमी लंबाई के बैंड के रूप में लागू किया गया था। टीएलसी सैम्पलर IV. विकास CAMAG ऑटोमैटिक डेवलपिंग चैंबर -2 (ADC- 2) में किए गए और मोबाइल चरण CHCl3: EtOAc [8:2 (v/v)] था। चैंबर को 10 मिनट के लिए संतृप्त किया गया था और प्लेट को विकास से पहले 5 मिनट के लिए प्रीकंडिशन किया गया था। आर्द्रता को 10 मिनट के लिए MgCl2 (33 प्रतिशत RH) का उपयोग करके ADC-2 द्वारा नियंत्रित किया गया था। डेन्सिटोमेट्रिक मूल्यांकन प्रतिदीप्ति मोड में CAMAG TLC स्कैनर IV का उपयोग करके किया गया था। स्लिट आयाम 5 × 0.2 मिमी, माइक्रो पर बनाए रखा गया था, और स्कैनिंग गति 20 मिमी/सेकेंड पर सेट की गई थी। 280 एनएम पर मानकों के अंशांकन वक्र के साथ रिसीवर ऑपरेटिंग विशेषता वक्र (एयूसी) के तहत क्षेत्र की तुलना करके मानक सामग्री प्राप्त की गई थी। अर्क में मानकों की उपस्थिति का आश्वासन दोनों प्रतिधारण कारकों (आरएफ) की तुलना और प्रत्येक अर्क और मानक के यूवी स्पेक्ट्रा को ओवरले करके किया गया था। ओसाजिन की मात्रा मानक यौगिक के साथ अर्क और अंशों से व्यापक रूप से परावर्तित प्रकाश की तीव्रता की तुलना करके निर्धारित की गई थी।
कच्चे पौधे के अर्क में ओसाजिन सामग्री को एचपीटीएलसी-डेंसिटोमेट्री का उपयोग करके मापा गया था। ओसाजिन मानक का Rf मान 0.556 पाया गया। परीक्षण नमूनों में ओसाजिन की घटना को उनके आरएफ मूल्यों की तुलना और उनके यूवी स्पेक्ट्रा (चित्र 1) को ओवरलैप करके सत्यापित किया गया था। मानक यौगिक ओसाजिन का उपयोग करके प्राप्त अंशांकन वक्र के साथ नमूनों के एयूसी की तुलना करके मात्रा का निर्धारण किया गया था। अंशांकन फ़ंक्शन y=2.268*10-8x था। सहसंबंध गुणांक (आर) और अंशांकन फ़ंक्शन की भिन्नता का गुणांक क्रमशः 0.998 प्रतिशत और 1.06 प्रतिशत था। एचपीटीएलसी विश्लेषण से पता चला कि एमपीएम में 0.22 प्रतिशत (w/w) ओसाजिन होता है। एचपीटीएलसी अध्ययन के परिणाम तालिका 1 में दिए गए हैं।
फेनोलिक प्रोफ़ाइल परख
कुल फेनोलिक सामग्री परख
नमूनों की कुल फेनोलिक सामग्री का मूल्यांकन करने के लिए फोलिन-सियोकाल्टेउ की विधि का उपयोग किया गया था, जैसा कि पहले कर्ट-सेलेप एट अल द्वारा उपयोग किया गया था। 17 20 μL ताजा पतला नमूना समाधान 75 μL Na2 CO3 (20 प्रतिशत) के साथ मिलाया गया था ), और 100 μL FCR (फोलिन-सियोकाल्टु अभिकर्मक) H2 O (1:9) के साथ पतला। 45 डिग्री पर 30 मिनट तक ऊष्मायन के बाद, मिश्रण के अवशोषण को 765 एनएम पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिकल रूप से पढ़ा गया। परिणाम प्रति ग्राम अर्क के मिलीग्राम गैलिक एसिड समकक्ष (जीएई) के रूप में व्यक्त किए गए थे।
कुल फ्लेवोनोइड सामग्री परख
अंशों की कुल फ्लेवोनोइड सामग्री का मापन बर्दकसी एट अल द्वारा पहले बताई गई विधि के अनुसार किया गया था। 18 संक्षेप में, ताजा तैयार 1 एम सीएच3 सीओओएनए और 10 प्रतिशत अलसीएल3 को नमूनों के साथ मिलाया गया था। फिर, मिश्रण का 30 मिनट तक कमरे के तापमान पर और अंधेरे में ऊष्मायन किया गया। ऊष्मायन प्रक्रिया के बाद, अवशोषण की गणना 415 एनएम पर की गई। नमूने के 1 ग्राम में परिणाम एमजी क्वेरसेटिन समकक्ष (क्यूई) के रूप में घोषित किए गए थे।
इन विट्रो एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का निर्धारण
2,2-डिफेनिल-1-पिक्रिलहाइड्राजाइल (डीपीपीएच) रेडिकल स्केवेंजिंग गतिविधि परीक्षण
डीपीपीएच रेडिकल स्केवेंजिंग गतिविधि को निर्धारित करने के लिए, ताजा पतला नमूना समाधान (1 मिलीग्राम/एमएल स्टॉक समाधान से तैयार विभिन्न सांद्रता) और मेथनॉलिक डीपीपीएच समाधान (100 मिमी) का संयोजन किया गया था। 45 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर ऊष्मायन अंतराल के बाद, अवशोषण 517 एनएम पर पढ़ा गया था। अंशांकन वक्र प्राप्त करने के लिए ब्यूटाइलेटेड हाइड्रॉक्सीटोल्यूइन (बीएचटी) का उपयोग संदर्भ यौगिक के रूप में किया गया था। परिणामों का IC50 मान µg/mL.19 बताया गया

फेरिक रिड्यूसिंग एंटीऑक्सीडेंट पावर (एफआरएपी) परीक्षण
एफआरएपी अभिकर्मक प्राप्त करने के लिए, 25 एमएल 3{26}}0 एमएम एसीटेट बफर (पीएच 3.6), 2.5 एमएल टीपीटीजेड [2,4,{8}}ट्रिस ({{9%)पाइरिडाइल)-एस-ट्रायज़िन] , और 2.5 एमएल FeCl3 .6H2 O (20 mM) मिलाया गया। उसके बाद, नमूने का 10 एमएल 260 एमएल एफआरएपी अभिकर्मक में जोड़ा गया और 96 वेल-प्लेट में आसुत जल के साथ 300 एमएल तक पतला किया गया। 37 डिग्री पर 30 मिनट तक इनक्यूबेट करने के बाद, अवशोषण का माप 593 एनएम पर किया गया। BHT का उपयोग संदर्भ यौगिक के रूप में किया गया था। एक मानक वक्र प्राप्त करने के लिए फेरस क्लोराइड समाधान (0.252 मिमी) का उपयोग किया गया था और परिणाम 1 ग्राम सूखे अर्क में मिमी FeSO4 के रूप में दिए गए थे।20
क्यूप्रिक-कम करने वाली एंटीऑक्सीडेंट क्षमता (CUPRAC) परीक्षण
CUPRAC परीक्षण का अनुमान बराक एट अल द्वारा पहले वर्णित विधि के अनुसार लगाया गया था। 21 10 मिमी CuSO4, नियोक्यूप्रेन और अमोनियम एसीटेट बफर (85 एमएल) की समान मात्रा को एक 96-वेल प्लेट में मिलाया गया था। उसके बाद, मिश्रण में क्रमशः 51 एमएल आसुत जल और 43 एमएल नमूना समाधान मिलाया गया। 20 मिनट तक ऊष्मायन के बाद, अवशोषण 450 एनएम पर पढ़ा गया था। परिणाम 1 ग्राम सूखे अर्क में मिलीग्राम एस्कॉर्बिक एसिड के बराबर बताए गए थे।
कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता (टीओएसी) परीक्षण का निर्धारण
कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता परीक्षण की गणना बराक एट अल द्वारा पहले बताई गई फॉस्फोमोलिब्डेनम विधि के अनुसार की गई थी। सबसे पहले, टीओएसी समाधान प्राप्त करने के लिए; 28 एमएम सोडियम फॉस्फेट मोनोबैसिक, 4 एमएम अमोनियम मोलिब्डेट और 600 एमएम एच2 एसओ4 मिलाया गया। फिर, 96 स्वस्थ प्लेट में 300 µL TOAC समाधान को 30 µL नमूना समाधान के साथ मिलाया गया। 90 मिनट के लिए 95 डिग्री पर ऊष्मायन अवधि के बाद, अवशोषण 695 एनएम पर पढ़ा गया था। मानक वक्र प्राप्त करने के लिए एस्कॉर्बिक एसिड का उपयोग किया गया था और परिणामों की गणना 1 ग्राम सूखे अर्क में मिलीग्राम ट्रॉलोक्स समकक्ष के रूप में की गई थी।
त्वचा की उम्र बढ़ने से संबंधित एंजाइमों पर निरोधात्मक गतिविधि
एंटी-कोलेजेनेज़ गतिविधि
एमपीएम की एंटी-कोलेजनेज़ गतिविधि को मापने के लिए, एक 50 एमएम ट्राइसिन बफर समाधान (पीएच: 7.5) तैयार किया गया था (40{{27%) एमएम NaCl और 10 एमएम CaCl2)। क्लोस्ट्रीडियम हिस्टोलिटिकम (ChC - EC. 3.4.23.3) का उपयोग कोलेजनेज़ के स्रोत के रूप में किया गया था, जिसे 0.8 U/mL की प्रारंभिक सांद्रता प्राप्त करने के लिए 50 मिमी ट्राइसीन बफर समाधान में भंग कर दिया गया था। ट्राइसिन बफर में घुले 2 एमएम एन-[3-(2-फ्यूरील) एक्रिलॉयल]-लेउ-ग्लाइ-प्रो-अला (एफएएलजीपीए) को सब्सट्रेट के रूप में इस्तेमाल किया गया था। प्रतिक्रिया शुरू करने के लिए सब्सट्रेट जोड़ने से पहले अर्क को 15 मिनट के लिए बफर समाधान में कोलेजनेज़ एंजाइम के साथ ऊष्मायन किया गया था। अंतिम प्रतिक्रिया मिश्रण में 150 µL की कुल मात्रा शामिल थी; ट्राइसिन बफर, 0.8 एमएम FALGPA, ChC की 0.1 इकाइयाँ, और 25 μL एमपीएम। खाली नतीजों के लिए पानी का इस्तेमाल किया गया. सब्सट्रेट जोड़ने के बाद, अवशोषण का माप तुरंत किया गया था। सकारात्मक नियंत्रण ने एपिगैलोकैटेचिन गैलेट (ईजीसीजी) का प्रदर्शन किया।23
एंटी-इलास्टेज गतिविधि
एंटी-इलास्टेज गतिविधि के लिए एमपीएम का मूल्यांकन 0.2 एमएम ट्रिस-एचसीएल बफर समाधान (पीएच: 8.0) का उपयोग करके किया गया था। पोर्सिन अग्न्याशय से प्राप्त इलास्टेज (पीई, ईसी 3.4.21.36) का एक स्टॉक समाधान 3.33 मिलीग्राम/एमएल की एकाग्रता पर आसुत जल के साथ तैयार किया गया था। सब्सट्रेट के रूप में उपयोग किए जाने वाले N-Succinyl-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN) को एक बफर समाधान (1.6 मिमी) में भंग कर दिया गया था। एमपीएम अर्क को सब्सट्रेट जोड़ने से पहले 37 डिग्री पर 15 मिनट के लिए पीई के 1 माइक्रोग्राम/एमएल के साथ इनक्यूबेट किया गया था। 15 मिनट पूर्व-ऊष्मायन के अंत में, 1 मिलीग्राम/एमएल पौधे के अर्क वाले एंजाइम मिश्रण में 8 मिमी AAAPVN सब्सट्रेट जोड़ा गया था, और 37 डिग्री पर 15 मिनट के लिए फिर से ऊष्मायन किया गया था। सकारात्मक नियंत्रण के रूप में 0.25 मिलीग्राम/एमएल ईजीसीजी का उपयोग करते समय, इस परीक्षण नमूने में एमपीएम के बजाय ईजीसीजी की समान मात्रा होती है, और परीक्षण सेटअप दोहराया गया था। ऊष्मायन अवधि के बाद, थर्मो साइंटिफिक मल्टीस्कैन स्काईहाई माइक्रोप्लेट स्पेक्ट्रोफोटोमीटर द्वारा 365 एनएम उत्तेजना और 410 एनएम उत्सर्जन पर 5 से 30 मिनट के लिए 4 अलग-अलग समय बिंदुओं पर माप लिया गया।24, 25

एंटी-हायलूरोनिडेज़ गतिविधि
कोलायली एट अल.26 और ली एट अल.3 द्वारा वर्णित विधि को संशोधित करके एंटी-हायलूरोनिडेज़ गतिविधि की गई थी। सबसे पहले, व्यावसायिक रूप से खरीदे गए हाइलूरोनिडेज़ (ईसी 3.2.1.35, सिग्मा-एल्ड्रिच) को 0 में भंग कर दिया गया था। 02 एम फॉस्फेट बफर (पीएच: 3.5) जिसमें NaCl और गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन होता है। फिर, हयालूरोनिक एसिड, एंजाइम का एक उपयुक्त सब्सट्रेट, एसीटेट बफर (0.1 एम, पीएच: 3.5) में तैयार किया गया और उपयोग के लिए तैयार किया गया। 1 मिलीग्राम/एमएल की सांद्रता पर एमपीएम के 20 μL, हाइलूरोनिडेज़ के 10 μL और 0.1 एम एसीटेट बफर के 60 μL से युक्त परख मिश्रण को 37 डिग्री पर 20 मिनट के लिए प्री-इनक्यूबेट किया गया था। ऊष्मायन समय के बाद, मिश्रण में 10 μL हयालूरोनिक एसिड मिलाया गया और 20 मिनट के लिए 37 डिग्री पर फिर से ऊष्मायन किया गया। कुल ऊष्मायन समय के अंत में, थर्मो साइंटिफिक मल्टीस्कैन स्काईहाई माइक्रोप्लेट स्पेक्ट्रोफोटोमीटर द्वारा 600 एनएम पर अलग-अलग समय बिंदुओं पर माप किए गए। प्रायोगिक सेटअप में खाली समूह में एंजाइम नहीं थे, जबकि नियंत्रण समूह में अर्क नहीं था। एंटी-हायलूरोनिडेज़ गतिविधि के प्रतिशत की गणना निम्नलिखित समीकरण का उपयोग करके की गई थी:
बुढ़ापा रोधी गतिविधियाँ (प्रतिशत )= [(नियंत्रण के एब्स - नमूने के एब्स)/ नियंत्रण के एब्स] × 100
सांख्यिकीय विश्लेषण
इस अध्ययन में शामिल एंटी-इलास्टेस, एंटी-कोलेजेनेज़ और एंटी-हायलूरोनिडेज़ गतिविधि प्रयोगों को स्वतंत्र रूप से तीन बार दोहराया गया था। सांख्यिकीय अंतर का विश्लेषण ग्राफपैड प्रिज्म 8 सॉफ़्टवेयर के टी-टेस्ट (पी 0.05 से कम या उसके बराबर) का उपयोग करके किया गया था।
परिणाम और चर्चा
बुढ़ापा रोधी क्षमता का निर्धारण
इलास्टिन, कोलेजन और हाइलूरोनिक एसिड ईसीएम की ज्ञात सामग्री हैं, जिनकी त्वचा की युवा उपस्थिति में महत्वपूर्ण भूमिका होती है। इलास्टिन त्वचा के लचीले गुणों को बनाए रखने के लिए एक महत्वपूर्ण प्रोटीन है, परिणामस्वरूप, ईसीएम में इलास्टिन की कमी से उम्र बढ़ने की प्रक्रिया में तेजी आती है।27 पिछला साहित्य इलास्टिन की कम मात्रा के साथ त्वचा की झुर्रियों और उम्र बढ़ने के बीच सीधा संबंध बताता है।28 हयालूरोनिक एसिड एक हाइड्रोफोबिक जीएजी अणु है, जिसे हयालूरोनिडेज़ के माध्यम से डीपोलाइमराइज़ किया जाता है। त्वचा की चिकनाई और नमी को स्थिर रखने के लिए हयालूरोनिक एसिड महत्वपूर्ण है; इसलिए, यह दिखाया गया है कि अत्यधिक टूटने से त्वचा सूख जाती है और झुर्रियाँ पड़ जाती हैं।29 समय के साथ उम्र बढ़ने की प्रक्रिया के माध्यम से, कोलेजन के कम स्तर के कारण त्वचा पर पतलापन आ जाता है, जिसे सूक्ष्म परीक्षण के तहत एक विशिष्ट संकेत माना जाता है।3{{23 }} यह स्पष्ट रूप से संकेत दिया गया था कि कोलेजनेज़ अवरोधकों के माध्यम से कोलेजन के टूटने में देरी करने से त्वचा की संरचना में झुर्रियाँ और उम्र बढ़ने में अंतराल होता है। 5 इस जानकारी को ध्यान में रखते हुए, जो पदार्थ इलास्टेज, कोलेजनेज़ और हाइलूरोनिडेज़ को रोकते हैं, उनमें एंटी-एजिंग उत्पादों के लिए उल्लेखनीय क्षमता होती है। पिछले अध्ययनों से पता चला है कि विभिन्न आइसोफ्लेवोनॉइड्स उपरोक्त एंजाइमों के खिलाफ महत्वपूर्ण निरोधात्मक जैव सक्रियता प्रदर्शित करते हैं। Addotey et al.31 ने दिखाया कि चार अलग-अलग आइसोफ्लेवोनोइड्स 61.2 प्रतिशत तक हयालूरोनिडेज़ को रोकते हैं। किम एट अल.32 ने दिखाया है कि ग्लाइसीराइज़ा यूरालेंसिस फिश से पृथक आइसोफ्लेवोनॉइड, लिकोरिसिडीन में महत्वपूर्ण इलास्टेज निरोधात्मक गतिविधि होती है। लिकोरिस के IC50 मान की गणना 61.2 ± 4.2 µM के रूप में की गई थी जबकि ओलीनोलिक एसिड की गणना संदर्भ यौगिक के रूप में 131.4 ± 11.4 के रूप में की गई थी। परिणामों से संकेत मिला कि आइसोफ्लेवोनॉइड्स इलास्टेज एंजाइम को रोक सकता है। उपरोक्त अध्ययन के अनुरूप, किम एट अल.33 ने नौ अलग-अलग प्रीनिलेटेड आइसोफ्लेवोनोइड्स का अध्ययन किया, जो फ्लेमिंगिया फिलिपिनेंसिस मेर की जड़ों से अलग किए गए ओसाजिन से अत्यधिक संबंधित संरचनाएं हैं। और रॉल्फ. शोधकर्ताओं ने बताया कि प्रीनाइलेटेड आइसोफ्लेवोन्स में से पांच में न्यूट्रोफिल इलास्टेज के खिलाफ शक्तिशाली अवरोधक गतिविधि थी, IC50 मान 1.{22}}.0 µM के बीच विविध था, जबकि ओलीनोलिक एसिड का IC50 मान 28.4 µM था। एक अन्य अध्ययन में, एर्गेन ओज़ एट अल। 34 में हाइलूरोनिडेज़, कोलेजनेज़ और इलास्टेज के खिलाफ ओनोनिस स्पिनोज़ा एल की जड़ों से अलग किए गए पांच आइसोफ्लेवोनोइड्स की इन विट्रो निरोधात्मक गतिविधि की जांच की गई। आइसोफ्लेवोन्स की हयालूरोनिडेज़ निरोधात्मक गतिविधि 22.58 प्रतिशत के बीच बताई गई थी, जबकि, उसी एकाग्रता पर, टैनिक एसिड ने 88.32 प्रतिशत निषेध दिखाया था। कोलेजनेज़ निषेध परिणामों की गणना 20.41- 28.49 प्रतिशत के बीच की गई और इलास्टेज निषेध 20.47-46.88 प्रतिशत के रूप में मापा गया। ईजीसीजी का उपयोग दोनों परीक्षणों के लिए एक संदर्भ के रूप में किया गया था और समान एकाग्रता पर निषेध गतिविधियों को क्रमशः 41.18 प्रतिशत और 84.64 प्रतिशत मापा गया था। एक अन्य अध्ययन में एम. पोमीफेरा से सीधे पृथक किए गए पोमीफेरिन के सामयिक उपचारों की जांच की गई। 15 पोमीफेरिन एक प्रीनिलेटेड आइसोफ्लेवोनॉइड है, जो एम. पोमीफेरा फलों में पाया जा सकता है और इसकी आणविक संरचना ओसाजिन से काफी मिलती जुलती है। जांचकर्ताओं ने बताया कि पोमीफेरिन ने कोलेजन और इलास्टिन को बढ़ाकर शक्तिशाली ईसीएम प्रोटीन उत्तेजना गतिविधि प्रदर्शित की है जो संदर्भ यौगिक, रेटिनॉल से बेहतर या समकक्ष है। उल्लिखित सभी अध्ययनों से पता चला है कि आइसोफ्लेवोन्स इन एंजाइमों के मध्यम से शक्तिशाली अवरोधक हैं और प्राकृतिक एंटी-एजिंग सामग्री के रूप में महत्वपूर्ण क्षमता रखते हैं।

इस अध्ययन में, एंटीएजिंग क्षमता के निर्धारण के लिए एमपीएम की इन विट्रो हयालूरोनिडेज़, कोलेजनेज़ और इलास्टेज निरोधात्मक गतिविधियों की जांच की गई। एमपीएम और संदर्भ यौगिक, ईजीसीजी दोनों के लिए कोलेजनेज़ निषेध परख के लिए दो-समय बिंदुओं, उदाहरण के लिए 20 और 4{36}} मिनट पर एक तुलनात्मक परख आयोजित की गई थी। परिणामों से पता चला कि समय के साथ कोलेजनेज़ निषेध गतिविधि में वृद्धि हुई। 1 मिलीग्राम/एमएल एमपीएम ने 84.55 ± 1.99 प्रतिशत निषेध दिखाया, जबकि 25{{40}} µg/mL ईजीसीजी ने 20 मिनट के ऊष्मायन के बाद 84.66 ± 1.83 प्रतिशत दिखाया। समय के साथ निरोधात्मक जैव सक्रियता बढ़ गई, 40 मिनट के बाद एमपीएम और ईजीसीजी ने कोलेजनेज़ को क्रमशः 94.68 ± 2.42 प्रतिशत और 94.98 ± 2.81 प्रतिशत बाधित किया। साहित्य के अनुरूप, एमपीएम ने इलास्टेज के खिलाफ महत्वपूर्ण निषेध गतिविधि प्रदर्शित की। परिणाम चार-समय बिंदुओं (5, 10, 20, और 30 मिनट) के लिए मापे गए और समय के साथ वृद्धि प्रदर्शित की गई (चित्र 2)। ईजीसीजी (250 µg/mL) का उपयोग एक संदर्भ के रूप में किया गया था और हर समय बिंदु पर निषेध गतिविधि में वृद्धि हुई थी (44.07 ± 0.00 प्रतिशत, 52.19 ± 0.00 प्रतिशत, 64.69 ± 0.{{41) }} प्रतिशत , और 86.21 ± 0.00 प्रतिशत , क्रमशः)। इस बीच 1 मिलीग्राम/एमएल सांद्रता में एमपीएम ने उच्च वृद्धि और निषेध गतिविधि प्रदर्शित की, जो 5 मिनट से 30 मिनट तक 34.70 ± 0.57 प्रतिशत से बढ़कर 97.40 ± 1.04 प्रतिशत हो गई। इसी तरह, 1 मिलीग्राम/एमएल एमपीएम ने 40 मिनट के ऊष्मायन के बाद हाइलूरोनिडेज़ एंजाइम को महत्वपूर्ण रूप से रोक दिया। 40 मिनट के बाद 83.91 ± 2.36 प्रतिशत अवरोध मापा गया, उसके 80 मिनट के ऊष्मायन के बाद, अवरोध दर बढ़कर 97.19 ± 0.45 प्रतिशत हो गई। जब संपूर्ण एंजाइम निषेध परीक्षणों पर विचार किया गया, तो परिणामों ने स्पष्ट रूप से प्रदर्शित किया कि एमपीएम एक मूल्यवान प्राकृतिक एंटी-एजिंग एजेंट हो सकता है और इसका उपयोग विभिन्न एंटी-एजिंग उत्पादों की सामग्री में किया जा सकता है; इस प्रकार, एम. पोमीफेरा को अतिरिक्त आर्थिक महत्व प्राप्त हो सकता है।

एंटीऑक्सीडेंट क्षमता का निर्धारण
कई बहिर्जात और अंतर्जात कारक विभिन्न तंत्रों के माध्यम से त्वचा की उम्र बढ़ने का कारण बनते हैं। इनमें से अधिकांश कारक त्वचा के ईसीएम में आरओएस गठन से प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष रूप से प्रभावित होते हैं।35 चूंकि त्वचा हमारे शरीर के बाहरी हिस्से को कवर करती है, इसलिए इसे दैनिक जीवन में महत्वपूर्ण मात्रा में यूवी विकिरण का सामना करना पड़ता है। इस प्रकार, त्वचा की अधिकांश समस्याएं जैसे सनबर्न, हाइपरपिग्मेंटेशन और त्वचा कार्सिनोजेनेसिस यूवी विकिरण के प्रत्यक्ष प्रभाव से उत्पन्न होती हैं या संबंधित होती हैं। इसी तरह, फोटोएजिंग इसके खतरनाक गुणों का एक अतिरिक्त परिणाम है।36 इसके अलावा, यूवी प्रकाश आरओएस गठन उत्पन्न करता है और, परिणामस्वरूप, त्वचा के ऊतकों में ऑक्सीडेटिव तनाव, जो सबसे महत्वपूर्ण तंत्रों में से एक है जो फोटोएजिंग का कारण बनता है।37 यह अनुमान लगाया गया था कि अत्यधिक होने के बाद से आरओएस के गठन से त्वचा समय से पहले बूढ़ी होने लगती है, महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट क्षमता वाले एजेंट यूवी विकिरण के खतरनाक प्रभावों के खिलाफ एक मूल्यवान उपकरण हो सकते हैं। तदनुसार, नैदानिक अध्ययन से पता चलता है कि सामयिक एंटीऑक्सीडेंट का उपयोग त्वचा पर सुरक्षात्मक प्रभाव डालता है।38
सामयिक एंटीऑक्सीडेंट उपयोग और त्वचा की उम्र बढ़ने में देरी के बीच अंतरसंबंध के बाद, जो पिछले साहित्य में अच्छी तरह से स्थापित है, एमपीएम की इन विट्रो एंटीऑक्सीडेंट क्षमता की जांच करने से मूल्यवान जानकारी मिलती है कि शीर्ष पर लागू होने पर यह एंटी-एजिंग क्षमता है। पहले के साहित्य से पता चला है कि उच्च संख्या में आइसोफ्लेवोनोइड वाले अर्क मूल्यवान एंटीऑक्सीडेंट हो सकते हैं। पिछले अध्ययन में, एफ. मैक्रोफिला अर्क के एक आइसोफ्लेवोनॉइड-समृद्ध अर्क ने आरओएस.39 सैंटोस और सिल्वा4{{10}} को साफ करके यूवीबी-प्रेरित त्वचा की क्षति को कम किया, जिससे संकेत मिलता है कि प्रीनाइलेटेड आइसोफ्लेवोनोइड्स में उनके कारण महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट क्षमता होती है। फ्लेवोनोइड अंश और प्रीनिल साइडचेन का एक योगात्मक प्रभाव। एम. पोमीफेरा के अर्क और आइसोफ्लेवोनोइड्स की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता का मूल्यांकन पिछले अध्ययन में किया गया था। परिणामों से पता चला कि हाइड्रोअल्कोहलिक अर्क और शुद्ध ओसाजिन ने डीपीपीएच, एफआरएपी और टीओएसी परख पर महत्वपूर्ण गतिविधि दिखाई, भले ही पोमीफेरिन और एथिल एसीटेट अंशों ने उच्च गतिविधि दिखाई।41 इस अध्ययन के लिए, डीपीपीएच रेडिकल स्केवेंजिंग गतिविधि, एफआरएपी, सीयूपीआरएसी और टीओएसी परख की गई। एमपीएम की इन विट्रो एंटीऑक्सीडेंट क्षमता के व्यापक निर्धारण के लिए आयोजित (तालिका 2)। एमपीएम ने महत्वपूर्ण डीपीपीएच रेडिकल स्केवेंजिंग गतिविधि का प्रदर्शन किया, जहां IC50 मान 1998 में मापा गया था। FRAP और TOAC परीक्षण के परिणामस्वरूप उल्लेखनीय धातु-घटाने वाली गतिविधि, क्रमशः 0.191 ± 0.01 mM FeSO4 /DE और 114.43 ± 0.02 AAE/g DE प्राप्त हुई। ये निष्कर्ष ओरहान एट अल द्वारा प्रकाशित पिछले अध्ययन के अनुरूप थे। हमारी जानकारी में पहली बार एम. पोमीफेरा फल के अर्क पर CUPRAC परख की गई थी। इसके अनुरूप, एमपीएम ने CUPRAC परख में उल्लेखनीय तांबा-घटाने वाली गतिविधि दिखाई, जहां परिणाम 73.928 ± 0.01 AAE/g DE के रूप में मापा गया। जब कुल एंटीऑक्सीडेंट क्षमता परख पर विचार किया गया, तो यह सुझाव देना संभव है कि एमपीएम एक आशाजनक एंटी-एजिंग एजेंट है।
फेनोलिक प्रोफाइल और एचपीटीएलसी विश्लेषण
आइसोफ्लेवोनोइड्स फेनोलिक पदार्थ हैं, जिन्हें पौधे के घटक के रूप में जाना जाता है जो विभिन्न उल्लेखनीय जैविक गतिविधियों जैसे कि एंटीऑक्सिडेंट, एंटीकैंसर और स्त्री रोग संबंधी समस्याओं के लिए जिम्मेदार हैं।42 पिछले अध्ययनों से पता चला है कि प्रीनिलेटेड आइसोफ्लेवोनोइड्स एम. पोमीफेरा फलों में प्रमुख फेनोलिक यौगिक हैं।43 कई अध्ययनों ने ओसाजिन की पहचान की है और एम. पोमीफेरा फलों के प्रमुख तत्व के रूप में पोमीफेरिन, जो मुख्य रूप से इसके लिए जिम्मेदार हैं, जैविक गतिविधियां हैं।12 ओसाजिन और पोमीफेरिन अत्यधिक समान प्रीनाइलेटेड आइसोफ्लेवोनॉइड हैं जो केवल एक हाइड्रॉक्सिल समूह के साथ भिन्न होते हैं।44 पिछली रिपोर्टों ने ओसाजिन और पोमीफेरिन सामग्री के लिए परस्पर विरोधी परिणाम प्रदर्शित किए हैं। एम. पोमीफेरा फल का। कार्तल एट अल.45 ने एम. पोमीफेरा में ओसाजिन और पोमीफेरिन के निर्धारण के लिए एक एलसी-एमएस विधि विकसित की, जो तुर्किये के अंकारा प्रांत से एकत्र की गई थी। परिणामों से पता चला कि फल के नमूनों के विभिन्न हिस्सों में पोमीफेरिन की मात्रा ओसाजिन की मात्रा से थोड़ी अधिक थी। एक अन्य अध्ययन में, एम. पोमीफेरा फल के नमूने मध्यपश्चिम और दक्षिणी संयुक्त राज्य अमेरिका के विभिन्न क्षेत्रों से एकत्र किए गए थे और ओसाजिन और पोमीफेरिन सामग्री को एक उपन्यास एचपीएलसी विश्लेषण विधि के माध्यम से मापा गया था। परिणामों से पता चला कि भौगोलिक अंतर के कारण नमूनों में आइसोफ्लेवोनॉइड मात्रा में महत्वपूर्ण परिवर्तन होता है।46 त्साओ एट अल.47 ने कनाडा से एकत्र किए गए फलों में ओसाजिन और पोमीफेरिन सामग्री का निर्धारण किया और पाया कि पोमीफेरिन सामग्री ओसाजिन सामग्री से थोड़ी अधिक थी। इसके विपरीत, ह्वांग एट अल.48 ने कई अध्ययनों का सारांश दिया जिसमें पाया गया कि विभिन्न अर्क में ओसाजिन की मात्रा पोमीफेरिन की मात्रा से अधिक है। यह दावा किया जा सकता है कि एम. पोमीफेरा फलों की ओसाजिन और पोमीफेरिन सामग्री उनकी निश्चित रूप से समान रासायनिक संरचना के कारण भौगोलिक अंतर और निष्कर्षण तकनीकों के साथ असाधारण रूप से परिवर्तनशील हैं। इस अध्ययन के लिए, हमारी जानकारी में पहली बार एमपीएम की मात्रा एचपीटीएलसी विश्लेषण के माध्यम से मापी गई थी। विश्लेषण के परिणामों से पता चला कि ओसाजिन एमपीएम का प्रमुख घटक है जिसे उसाक प्रांत, 0 से एकत्र किया गया था। 22 प्रतिशत नमूने में ओसाजिन शामिल था (तालिका 1)। इसके अलावा, एमपीएम के फेनोलिक प्रोफाइल का और अधिक मूल्यांकन प्राप्त करने के लिए, कुल फेनोलिक और कुल फ्लेवोनोइड सामग्री का परीक्षण किया गया। परिणामों से पता चला कि एमपीएम में निम्नलिखित उल्लेखनीय फेनोलिक और फ्लेवोनोइड सामग्री थी; 113.92 ± 2.26 मिलीग्राम जीएई/जी और 66.41 ± 0.74 मिलीग्राम क्यूई/जी, क्रमशः। फेनोलिक प्रोफ़ाइल मूल्यांकन के परिणामों से पता चला कि एमपीएम एक नवीन प्राकृतिक एंटी-एजिंग एजेंट के रूप में एक प्रमुख उम्मीदवार हो सकता है।

निष्कर्ष
भले ही एम. पोमीफेरा फलों के सामयिक कार्यान्वयन की जांच करने वाले अध्ययन अपेक्षाकृत नए हैं, उत्साहजनक रिपोर्टों के साथ इस तरह से ध्यान बढ़ रहा है। इसलिए, इस अध्ययन का उद्देश्य एम. पोमीफेरा फल के अर्क की संभावित एंटी-एजिंग क्षमता का व्यापक मूल्यांकन करना था। हमारी जानकारी में पहली बार आइसोफ्लेवोनॉइड सामग्री के निर्धारण के लिए एम. पोमीफेरा फलों के लिए एचपीटीएलसी विश्लेषण का उपयोग किया गया था, साथ ही कुल फेनोलिक प्रोफ़ाइल निर्धारित करने के लिए इन विट्रो अध्ययन भी किया गया था। परिणामों से पता चला कि ओसाजिन नमूनों का प्रमुख घटक है। इसके अतिरिक्त, अर्क की इन विट्रो एंटीऑक्सीडेंट क्षमता का चार अलग-अलग परीक्षणों के साथ मूल्यांकन किया गया और परिणामों ने एमपीएम की एक महत्वपूर्ण एंटीऑक्सीडेंट क्षमता का प्रदर्शन किया। इसके अतिरिक्त, उम्र बढ़ने की प्रक्रिया से संबंधित एंजाइमों के खिलाफ निरोधात्मक गतिविधि को मापा गया और यह देखा गया कि एमपीएम में उल्लेखनीय एंजाइम अवरोधक गतिविधि थी। निष्कर्ष में, यह अध्ययन जानकारी प्रदान करता है, जिससे नवीन त्वचा देखभाल उत्पादों के उत्पादन को बढ़ावा मिल सकता है।
नीति
आचार समिति की मंजूरी:अध्ययन के लिए आचार समिति की मंजूरी की आवश्यकता नहीं है।
सूचित सहमति:आवश्यक नहीं।
सहकर्मी समीक्षा:बाह्य रूप से सहकर्मी-समीक्षा की गई।
लेखकीय योगदान
अवधारणा: THB, TBŞ., HB, डिज़ाइन: THB, İ.KC, EC, डेटा संग्रह या प्रसंस्करण: THB, İ.KC, HB, विश्लेषण या व्याख्या: THB, İ.KC, साहित्य खोज: THB, TBŞ., लेखन: THB, EC
एक ऐसी स्थिति जिसमें सरकारी अधिकारी का निर्णय उसकी व्यक्तिगत रूचि से प्रभावित हो:लेखकों द्वारा हितों के टकराव की कोई घोषणा नहीं की गई।
वित्तीय प्रकटीकरण:इस अध्ययन को अकिबडेम मेहमत अली आयडिनलर यूनिवर्सिटी कमीशन ऑफ साइंटिफिक प्रोजेक्ट्स (संख्या: 2020/02/07) द्वारा समर्थित किया गया था।
प्रतिक्रिया दें संदर्भ
1. ह्वांग ई, पार्क एसवाई, यिन सीएस, किम एचटी, किम वाईएम, यी टीएच। मानव त्वचीय फ़ाइब्रोब्लास्ट और स्वस्थ मानव त्वचा में पैनाक्स जिनसेंग और क्रैटेगस पिन्नाटिफिडा के मिश्रण का बुढ़ापारोधी प्रभाव। जे जिनसेंग रेस. 2017;41:69-77.
2. गैंसविसीन आर, लियाकौ एआई, थियोडोरिडिस ए, मकरांतोनाकी ई, ज़ौबौलिस सीसी। त्वचा की बुढ़ापा रोधी रणनीतियाँ। डर्मेटोएन्डोक्रिनोल। 2012;4:308-319.
3. ली एच, होंग वाई, ट्रान क्यू, चो एच, किम एम, किम सी, क्वोन एसएच, पार्क एस, पार्क जे, पार्क जे। पराबैंगनी-विकिरणित मानव त्वचीय में माइटोकॉन्ड्रिया फ़ंक्शन के माध्यम से बुढ़ापा रोकने में जिनसैनोसाइड आरजी 3 की एक नई भूमिका फ़ाइब्रोब्लास्ट. जे जिनसेंग रेस. 2019;43:431-441.
4. रूवरैस सी, बैकविले डी, पैट्रिक बी, हाउरे एमजे, डुप्रैट एल, कॉटेंस्यू सी, कैस्टेक्स-रिज्जी एन, डुप्लान एच, मेंग्यूड वी, बेसौ-टौया एस। रेटिनाल्डिहाइड, डेल्टा-टोकोफेरॉल ग्लूकोसाइड और ग्लाइसिलग्लिसिन के एंटीएजिंग गुणों का आकलन ओलेमाइड संयोजन. जे इन्वेस्ट डर्माटोल। 2017;137(सप्ल 2):एस303।
5. ब्रावो के, अल्ज़ेट एफ, ओसोरियो ई. एंटीऑक्सिडेंट और एंटी-एजिंग गतिविधि के साथ संभावित यौगिकों के स्रोत के रूप में चयनित जंगली और खेती वाले एंडियन पौधों के फल। इंडस्ट्रीज़ फसलें उत्पाद. 2016;85:341-352।
6. येपेस ए, ओचोआ-बॉटिस्टा डी, मुरिलो-अरंगो डब्ल्यू, क्विंटरो-साउमेथ जे, ब्रावो के, ओसोरियो ई. पर्पल पैशन फ्रूट सीड्स (पासिफ़्लोरा एडुलिस एफ. एडुलिस सिम्स) त्वचा विरोधी उम्र बढ़ने वाले एजेंटों के एक आशाजनक स्रोत के रूप में: एंजाइमैटिक , एंटीऑक्सीडेंट और बहु-स्तरीय कम्प्यूटेशनल अध्ययन। अरब जे रसायन. 2021;14:102905।
7. रिती एल, फिशर जीजे। यूवी-प्रकाश-प्रेरित सिग्नल कैस्केड और त्वचा की उम्र बढ़ना। एजिंग रेस रेव. 2002;1:705-720.
8. ड्यूक एल, ब्रावो के, ओसोरियो ई. चयनित औषधीय पौधों में लागू एक समग्र एंटी-एजिंग दृष्टिकोण: विभिन्न तंत्रों द्वारा त्वचा की फोटोप्रोटेक्शन का एक दृश्य। इंडस्ट्रीज़ फसलें उत्पाद. 2017;97:431-439.
9. मंजिया एनजे, नजायौ एनएफ, जोशी ए, उपाध्याय के, शिरसाथ के, देवकर वीआर, मौंडीपा एफपी। कैमरून हारुंगाना मेडागास्कैरिएन्सिस लैम में औषधीय पौधों की बुढ़ापा रोधी क्षमता। और Psorospermum aurantiacum Engl. इन विट्रो पराबैंगनी बी प्रकाश से प्रेरित त्वचा क्षति को रोकें। यूरो जे इंटीग्र मेड. 2019;29:100925.
10. पुजिमुलानी डी, सूर्यानी सीएल, सेत्योवती ए, हंडायानी आरएएस, अरुमवर्धना एस, विडोवती डब्ल्यू, मारुफ ए। करकुमा मैंगा वैल की कॉस्मीस्यूटिकल क्षमताएं। एमएमपी1, एमएमपी3 और एमएमपी13 के खिलाफ मानव बीजे फ़ाइब्रोब्लास्ट में अर्क। हेलिओन। 2020;6:e04921.
11. स्टावरोपौलू एमआई, स्टैथोपोलू के, चेइलारी ए, बेनाकी डी, गार्डिकिस के, चिनौ आई, अलीगियनिस एन। ग्रीक प्रोपोलिस नमूनों की एनएमआर चयापचय प्रोफाइलिंग: उनकी फाइटोकेमिकल रचनाओं का तुलनात्मक मूल्यांकन और उनके एंटी-एजिंग और एंटीऑक्सीडेंट गुणों की जांच। जे फार्म बायोमेड गुदा। 2021;194:113814।
12. फ़िलिप एस, जार्मती ज़ेड, लिसिचकोव के, सीसनदी जे, जांकोव आरएम। सुपरक्रिटिकल द्रव निष्कर्षण द्वारा प्राप्त मैक्लुरा (मैकलुरा पोमीफेरा) अर्क का अलगाव और लक्षण वर्णन। इंडस्ट्रीज़ फसलें उत्पाद. 2015;76:995-1000.
13. सलौआ एफ, एडिन एनआई, हेडी जेड। ओसेज ऑरेंज मैकलुरा पोमीफेरा (राफिन) श्नाइडर बीज और बीज तेल की रासायनिक संरचना और प्रोफ़ाइल विशेषताएं। इंडस्ट्रीज़ फसलें उत्पाद. 2009;29:1-8.
14. वेसेला डी, कुबिनोवा आर, मुसेलिक जे, ज़ेम्लिका एम, सुची वी। ओसाजिन और पोमीफेरिन की एंटीऑक्सीडेंट और ईआरओडी गतिविधियां। फिटोटेरेपिया। 2004;75:209-211.
15. ग्रुबर जेवी, होल्त्ज़ आर, सिकिंक एसके, टोबिन डीजे। सामयिक पोमीफेरिन उपचारों की इन विट्रो और पूर्व विवो परीक्षा। फिटोटेरेपिया। 2014;94:164-171.
16. बोज़कर्ट आई, डिलेक ई, एरोल एचएस, काकिर ए, हमज़ाओग्लू ई, कोक एम, केलेस ओएन, हैलिसी एमबी। इंडोमिथैसिन-प्रेरित गैस्ट्रिक अल्सर पर मैक्लुरा पोमीफेरा से पोमीफेरिन के प्रभावों की जांच: चूहों में एक प्रायोगिक अध्ययन। मेड केम रेस. 2017;26:2048-2056.
17. कर्ट-सेलेप İ, सेलेप ई, अक्युज़ एस, इनान वाई, बराक टीएच, अकायदीन जी, टेल्सी डी, येसिलाडा ई. हाइपरिकम ओलंपिक एल. डीएनए क्षति को ठीक करता है और मानव त्वचा में यूवीबी द्वारा प्रेरित एमएमपी -9 सक्रियण को रोकता है। फ़ाइब्रोब्लास्ट. जे एथनोफार्माकोल. 2020;246:112202।
18. बर्दाकी एच, सेविक डी, बराक टीएच, गोज़ेट टी, कान वाई, किर्मिज़िबेकमेज़ एच। साइडराइटिस कंजेस्टा पीएच डेविस एट हब के विभिन्न अर्क के माध्यमिक मेटाबोलाइट्स, फाइटोकेमिकल लक्षण वर्णन और एंटीऑक्सीडेंट गतिविधियां।- मोर। बायोकेम सिस्ट इकोल. 2020;92:104120.
19. सेलेप ई, सेवन एम, अक्युज़ एस, इनान वाई, येसिलाडा ई। एंजाइम अवरोध, फेनोलिक प्रोफाइल और साइडराइटिस ट्रोजन बोर्नम की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता पर निष्कर्षण विधि का प्रभाव। दक्षिण अफ़्रीकी जे बॉट. 2019;121:360-365।
20. बार्डाकसी एच, बराक टीएच, ओज़डेमिर के, सेलेप ई. वाणिज्यिक टिलिया प्लैटिफिलोस स्कोप की पॉलीफेनोलिक संरचना और एंटीऑक्सीडेंट बायोएक्टिविटी पर ब्रूइंग सामग्री और विभिन्न एडिटिव्स का प्रभाव। आसव. जे रेस फार्म. 2020;24:133-141.
21. बराक टीएच, सेलेप ई, इनान वाई, येसिलाडा ई. विबर्नम ऑपुलस एल. (यूरोपीय क्रैनबेरी) फलों के अर्क की फेनोलिक सामग्री और एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि की जैवउपलब्धता पर इन विट्रो मानव पाचन का प्रभाव। इंडस्ट्रीज़ फसलें उत्पाद. 2019;131:62-69.
22. बराक टीएच, सेलेप ई, इनान वाई, येसिलाडा ई. सांबुकस एबुलस एल. फलों के अर्क से फिनोलिक्स की जैवउपलब्धता और एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि का इन विट्रो मानव पाचन सिमुलेशन। खाद्य बायोसाइंस. 2020;37:100711.
23. एर्सॉय ई, एरोग्लू ओज़कान ई, बोगा एम, यिलमाज़ एमए, मैट ए। एलसी-एमएस/एमएस द्वारा फाइटोकेमिकल संरचना पर ध्यान देने के साथ तीन हाइपरिकम प्रजातियों की एंटी-एजिंग क्षमता और एंटी-टायरोसिनेस गतिविधि। इंडस्ट्रीज़ फसलें उत्पाद. 2019;141:111735।
24. ली केके, किम जेएच, चो जेजे, चोई जेडी। इलास्टेज गतिविधि पर 150 पौधों के अर्क के निरोधात्मक प्रभाव और उनके सूजनरोधी प्रभाव। इंट जे कॉस्मेटिक विज्ञान। 1999;21:71-82.
25. इटोह एस, यामागुची एम, शिगेयामा के, साकागुची आई। चेनोमेलेस साइनेंसिस के अर्क की उम्र-रोधी क्षमता। सौंदर्य प्रसाधन 2019;6:21।
26. कोलायली एस, कैन ज़ेड, यिल्डिज़ ओ, साहिन एच, करोग्लू एसए। चेस्टनट (कास्टेनिया सैटिवा मिल.) शहद के विभिन्न यूनिफ्लोरल डिग्री के एंटी हाइलूरोनिडेज़, एंटीफ़्रीज़र, एंटीऑक्सीडेंट, रोगाणुरोधी और भौतिक रासायनिक गुणों का तुलनात्मक अध्ययन। जे एंजाइम इनहिब मेड केम। 2016;31(पूरक 3):96-104।
27. मानव रोगों में चिकित्सीय लक्ष्य के रूप में कोर्कमाज़ बी, होर्विट्ज़ एमएस, जेने डीई, गौथियर एफ. न्यूट्रोफिल इलास्टेज, प्रोटीनेज़ 3, और कैथेप्सिन जी। फ़ार्माकोल रेव. 2010;62:726-759.
28. अकाज़ाकी एस, नाकागावा एच, काज़ामा एच, ओसानाई ओ, कवाई एम, ताकेमा वाई, इमोकावा जी। त्वचा की झुर्रियों में उम्र से संबंधित परिवर्तनों का मूल्यांकन एक उपन्यास त्रि-आयामी मॉर्फोमेट्रिक विश्लेषण द्वारा किया गया। ब्र जे डर्माटोल. 2002;147:689- 695.
29. बारला एफ, हिगाशिजिमा एच, फुनाई एस, सुगिमोटो के, हरदा एन, यामाजी आर, फुजिता टी, नाकानो वाई, इनुई एच। हाइलूरोनिडेज़ और कोलेजनेज़ पर एल्काइल गैलेट्स के निरोधात्मक प्रभाव। बायोस्की बायोटेक्नोल बायोकेम। 2019;73:2335-2337.
30. चुंग जेएच, कांग एस, वरानी जे, लिन जे, फिशर जीजे, वूरहिस जेजे। जीवित मानव त्वचा में बाह्यकोशिकीय-सिग्नल-विनियमित किनेज़ में कमी और तनाव-सक्रिय एमएपी किनेज़ गतिविधियों में वृद्धि। जे इन्वेस्ट डर्माटोल। 2000;115:177-182.
31. एडोटे जेएन, लेंजर्स आई, जोस जे, गैम्पे एन, बेनी एस, पीटरेइट एफ, हेंसल ए। मानव हयालूरोनिडेज़ पर निरोधात्मक प्रभाव के साथ आइसोफ्लेवोनोइड्स -1 और ओनोनिस स्पिनोसा एल रूट अर्क से नॉरनेओलिग्नन क्लिटोरिएनोलैक्टोन बी। फिटोटेरेपिया। 2018;130:169-174.
32. किम केजे, जुआन एसएच, पार्क एसएन। लिकोरिसिडिन, ग्लाइसीराइज़ा यूरालेंसिस फिशर से पृथक एक आइसोफ्लेवोनॉइड, मानव त्वचीय फ़ाइब्रोब्लास्ट की यूवीए-प्रेरित फोटोएजिंग को रोकता है। इंट जे कॉस्मेटिक विज्ञान। 2017;39:133-140.
33. किम जेवाई, वांग वाई, उद्दीन जेड, सॉन्ग वाईएच, ली जेडपी, जेनिस जे, पार्क केएच। फ्लेमिंगिया फिलीपिनेंसिस की जड़ों से प्रतिस्पर्धी न्यूट्रोफिल इलास्टेज निरोधात्मक आइसोफ्लेवोन्स। बायोऑर्ग रसायन. 2018;78:249-257.
34. एर्गीन ओज़ बी, साल्टन इस्कन जी, कुपेली अक्कोल ई, सुंटार आई, बहादिर अचिकरा ओ। ओनोनिडिस रेडिक्स से घाव भरने वाले एजेंट के रूप में आइसोफ्लेवोनोइड्स। जे एथनोफार्माकोल. 2018;211:384-393.
35. अज़ीवेडो मार्टिंस टीई, डी ओलिवेरा पिंटो सीएएस, डी ओलिवेरा एसी, रोबल्स वेलास्को एमवी, गोर्रीटी गुइटिएरेज़ एआर, कोस्किलो राफेल एमएफ, हुआमानी ताराजोना जेपी, रेटुएर्टो-फिगुएरोआ एमजी। स्वस्थ त्वचा बनाए रखने के लिए सामयिक एंटीऑक्सीडेंट का योगदान-एक समीक्षा। विज्ञान फार्म. 2020;88:27.
36. क्रुटमैन जे, श्रोएडर पी. मानव त्वचा की फोटोएजिंग में माइटोकॉन्ड्रिया की भूमिका: दोषपूर्ण पावरहाउस मॉडल। जे इन्वेस्टिग डर्माटोल सिम्प प्रोक। 2009;14:44-49.
37. डोंग केके, दामाघी एन, पिकार्ट एसडी, मार्कोवा एनजी, ओबायाशी के, ओकानो वाई, मसाकी एच, ग्रेथर-बेक एस, क्रुटमैन जे, स्माइल्स केए, यारोश डीबी। यूवी-प्रेरित डीएनए क्षति मानव त्वचा में एमएमपी -1 की रिहाई शुरू करती है। ऍक्स्प डर्माटोल. 2008;17:1037-1044.
38. ओरेसाजो सी, पिल्लई एस, मानको एम, यात्स्केयर एम, मैकडैनियल डी। एंटीऑक्सिडेंट और त्वचा: फॉर्मूलेशन और प्रभावकारिता को समझना। डर्माटोल थेर. 2012;25:252-259.
39. चियांग एचएम, चिउ एचएच, लियाओ एसटी, चेन वाईटी, चांग एचसी, वेन केसी। आइसोफ्लेवोनोइडरिच फ्लेमिंग मैक्रोफिला अर्क प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों को नष्ट करके और एमएपी किनेज़ और एमएमपी अभिव्यक्ति को रोककर यूवीबी-प्रेरित त्वचा क्षति को कम करता है। एविड आधारित परिपूरक वैकल्पिक औषधि। 2013;2013:696879.
40. सैंटोस सीएमएम, सिल्वा एएमएस। प्रेनिलफ्लेवोनोइड्स की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि। अणु. 2020;25:696.
41. ओरहान आईई, सेज़र सेनोल एफ, डेमिरसी बी, ड्वोर्स्का एम, स्मेजकल के, ज़ेम्लिका एम। कुछ प्राकृतिक और अर्ध-सिंथेटिक फ्लेवोनोइड डेरिवेटिव की एंटीऑक्सीडेंट क्षमता और मैकलुरा पोमीफेरा (राफिन) श्नाइडर (ओसेज ऑरेंज) और इसके आवश्यक अर्क तेल संरचना. तुर्की जे बायोकेम। 2016;41:403-411.
42. क्रिसोवा एल, दादाकोवा के, कास्पारोव्स्का जे, कास्पारोवस्की टी. आइसोफ्लेवोन्स। अणु. 2019;24:1076.
43. सु ज़ेड, वांग पी, युआन डब्ल्यू, ग्रांट जी, ली एस. मैक्लुरा पोमीफेरा के फलों से फेनोलिक्स। नेट प्रोड कम्यून. 2017;12:1743-1745.
44. ओरज़बेकोव वाई, इब्राहिम एमए, मोम्बेकोव एस, श्रीवेदव्यासश्री आर, दत्खायेव यू, मखतोव बी, चौरसिया एनडी, टेकवानी बीएल, रॉस एसए। मैक्लुरा पोमीफेरा से प्रीनिलेटेड फ्लेवोनोइड का अलगाव और जैविक मूल्यांकन। एविड आधारित परिपूरक वैकल्पिक औषधि। 2018;2018:1370368.
45. कार्तल एम, अबू-असाकर एम, ड्वोर्स्का एम, ओरहान आई, ज़ेम्लिका एम. पोमीफेरिन और ओसाजिन के विश्लेषण के लिए एलसी-डीएडी-एमएस विधि, मैक्लुरा पोमीफेरा (राफिन) श्नाइडर में प्रमुख आइसोफ्लेवोन्स। क्रोमैटोग्राफ़िया 2009;69:325-329.
46. दार्जी के, मिग्लिस सी, वार्डलो ए, एबोराशेड ईए। मिडवेस्ट और दक्षिणी संयुक्त राज्य अमेरिका से ओसेज ऑरेंज में आइसोफ्लेवोन स्तर का एचपीएलसी निर्धारण। जे एग्रीक फूड केम। 2013;61:6806-6811.
47. त्साओ आर, यांग आर, यंग जेसी। ओसेज ऑरेंज में एंटीऑक्सीडेंट आइसोफ्लेवोन्स, मैकलुरा पोमीफेरा (राफ.) श्नाइड। जे एग्रीक फूड केम। 2003;51:6445-6451.
48. ह्वांग एचएस, विंकलर-मोजर जेके, टिसेराट बी, हैरी‐ओकुरु आरई, बेरहो एमए, लियुन एसएक्स। भंडारण के दौरान सोयाबीन तेल और मछली के तेल में ओसेज संतरे के अर्क की एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि। जे एम ऑयल केम सोसायटी। 2021;98:73-87।
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