कोरोना वायरस रोग 19 (कोविड‑19) के विरुद्ध न्यूक्लिक एसिड आधारित वैक्सीन प्लेटफार्म

अमूर्त

कोरोना वायरस बीमारी 2019 (कोविड-19) महामारी ने आज तक वैश्विक स्तर पर 673,010,496 मरीजों को संक्रमित किया है और 6,854,959 लोगों की मौत हुई है। मौलिक रूप से अलग-अलग कोविड वैक्सीन प्लेटफॉर्म विकसित करने के लिए भारी प्रयास किए गए हैं। एमआरएनए और डीएनए टीकों (तीसरी पीढ़ी के टीके) से युक्त न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीके तेजी से और सुविधाजनक उत्पादन और सीओवीआईडी ​​​​के खिलाफ प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं के कुशल उत्तेजना के मामले में आशाजनक रहे हैं। कई डीएनए-आधारित (ZyCoV-D, INO-4800, AG0302-कोविड19, और GX{17}}N) और mRNA-आधारित (BNT162b2, mRNA-1273, और ARCoV) अनुमोदित वैक्सीन प्लेटफार्मों का उपयोग COVID रोकथाम के लिए किया गया है। COVID रोकथाम के लिए mRNA टीके सभी प्लेटफार्मों में सबसे आगे हैं। हालाँकि, इन टीकों में कम स्थिरता होती है, जबकि प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को उत्तेजित करने के लिए उच्च खुराक के साथ डीएनए टीकों की आवश्यकता होती है। न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीकों की इंट्रासेल्युलर डिलीवरी और उनकी प्रतिकूल घटनाओं पर और अधिक शोध की आवश्यकता है। चिंता के COVID वेरिएंट के फिर से उभरने को ध्यान में रखते हुए, प्रभावी संक्रमण की रोकथाम के लिए वैक्सीन का पुनर्मूल्यांकन और पॉलीवैलेंट वैक्सीन या पैन-कोरोनावायरस रणनीतियों का विकास आवश्यक है।

सिस्टैंच अनुपूरक लाभ-प्रतिरक्षा प्रणाली को कैसे मजबूत करें

सिस्टैंच एन्हांस इम्युनिटी उत्पादों को देखने के लिए यहां क्लिक करें

【अधिक के लिए पूछें】 ईमेल:cindy.xue@wecistanche.com / व्हाट्स ऐप: 0086 18599088692 / वीचैट: 18599088692

कीवर्ड

कोरोना वायरस रोग 19 · न्यूक्लिक एसिड-बेस टीके · प्रतिरक्षा · सुरक्षा

पृष्ठभूमि

2019 के अंत में, चीन के वुहान में एक नया बीटा कोरोनोवायरस उभरा और तेजी से दुनिया भर में फैल गया। वैश्विक स्तर पर उच्च मृत्यु दर के साथ उच्च संक्रामक दर (शर्मा एट अल. 2020; सु एट अल. 2020; विबावा 2021) के कारण कोरोना वायरस रोग 2019 (कोविड-19) में महामारी की उच्च संभावना है। इसलिए, बीमारी के खिलाफ प्रभावी टीके या उपचार विकसित करने के लिए पर्याप्त प्रयासों की आवश्यकता है (सु एट अल 2020)। कोविड बीमारी के लक्षण अलग-अलग होते हैं, जिनमें हल्के फू जैसे लक्षण, निमोनिया, तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम (एआरडीएस), और घातक परिणाम शामिल हैं। कैंसर, मधुमेह, हृदय रोगों, वृद्ध वयस्कों और यहां तक ​​​​कि आनुवंशिक रूप से पूर्वनिर्धारित व्यक्तियों के रोगियों को COVID की गंभीरता का सबसे अधिक खतरा होता है (शर्मा एट अल. 2020; सु एट अल. 2020; विबावा 2021; वकील एट अल। 2022). विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ) की सिफारिशों के अनुसार, दुनिया भर में कोविड महामारी को नियंत्रित करने के लिए मास्क पहनना, एंटीवायरल दवाओं का उपयोग करना, सामाजिक दूरी बनाना और टीकाकरण प्रक्रियाओं का पालन करना महत्वपूर्ण व्यवहार हैं (शर्मा एट अल. 2020)। आक्रामक रोगजनकों के खिलाफ कुशल टीकों के विकास की दिशा में वैज्ञानिक प्रयास कई साल पहले से चल रहे हैं (देब एट अल. 2020; झांग एट अल. 2020; विबावा 2021)। ये वैक्सीन प्लेटफॉर्म रोगजनक बैक्टीरिया के खिलाफ भी डिजाइन किए गए हैं (फरहानी एट अल. 2019; जाफरी और महमूदी 2021)। इस संबंध में, एक कुशल, सुरक्षात्मक और सुरक्षित वैक्सीन विकसित करना गंभीर तीव्र श्वसन सिंड्रोम कोरोनावायरस 2 (SARS-CoV-2) के प्रसार को रोकने के लिए एक महत्वपूर्ण निवारक दृष्टिकोण माना जाता है (मूर और क्लासे 2020)। इसलिए, दुनिया भर में विभिन्न फार्मास्युटिकल कंपनियों और अनुसंधान टीमों ने अंतरराष्ट्रीय समुदाय के उपयोग के लिए COVID के खिलाफ एक सुरक्षित और कुशल टीका पेश करने के लिए प्रतिस्पर्धा की। इन प्रयासों ने प्रीक्लिनिकल और क्लिनिकल परीक्षणों में प्रवेश करने के लिए अन्य वैक्सीन प्लेटफ़ॉर्म विकसित किए हैं और उनमें से कुछ को मंजूरी दे दी गई है (चेन एट अल। 2021), जिसमें अगली पीढ़ी के टीकों के रूप में पारंपरिक टीके जैसे जीवित या निष्क्रिय, सबयूनिट और न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीके शामिल हैं। (मूर और क्लासे 2020)। वैज्ञानिक प्रमाणों के आधार पर, जीवित-क्षीण टीके दीर्घकालिक प्रतिरक्षा के साथ टोल-जैसे रिसेप्टर्स (टीएलआर) को प्रेरित करके जन्मजात, सेलुलर और हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को उत्तेजित करते हैं और अतिसंवेदनशीलता विकसित कर सकते हैं। इन टीकों का मुख्य दोष उनकी महंगी सुरक्षा और प्रभावकारिता आकलन है। निष्क्रिय वायरल टीके सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को खराब तरीके से उत्तेजित करते हैं जो उनकी प्रभावकारिता को कम कर देता है। अप्रैल 2020 में, सिनोवैक और वुहान इंस्टीट्यूट ऑफ बायोलॉजिकल प्रोडक्ट्स (सिनोफार्म) (मूर और क्लासे 2020; सु एट अल 2020) द्वारा एक निष्क्रिय COVID -19 वैक्सीन का निर्माण किया गया था। कम इम्यूनोजेनेसिटी, बूस्टर या सहायक आवश्यकता और उच्च लागत (कोइराला एट अल. 2020; सु एट अल. 2020) सहित कुछ दोषों के साथ सबयूनिट टीके सुरक्षित हैं। न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीके अनुक्रम जानकारी के आधार पर विकसित किए गए हैं। इनमें एंटीजन के डीएनए या एमआरएनए अनुक्रम शामिल होते हैं जो विभिन्न खुराकों में सेलुलर और ह्यूमरल प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को दृढ़ता से उत्तेजित करते हैं। उनके फायदों के कारण, जैसे कि तेजी से उत्पादन, और नैदानिक ​​​​परीक्षणों में सबसे शुरुआती COVID -19 टीके, डीएनए-आधारित टीकों का एक उल्लेखनीय लाभ विभिन्न भंडारण स्थितियों में उनकी स्थिरता है (सिलवेरा एट अल। 2020; वैन रील और डी) बुद्धि 2020). आरएनए-आधारित टीकों पर फाइजर/बायोटेक और मॉडर्ना जैसी दवा कंपनियों का अधिक ध्यान गया। डीएनए टीकों के विपरीत, वे सहायक के बिना टीएलआर लिगैंड के रूप में प्रभावी हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को उत्तेजित करते हैं, और उनके अनुक्रम को एमआरएनए क्षरण को रोकने के लिए संशोधित किया जाता है (मूर और क्लासे 2020; वैन रील और डी विट 2020; सोइज़ा एट अल। 2021)। इस समीक्षा का उद्देश्य न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीकों में हाल के विकास का आकलन करना है, जिसमें COVID के खिलाफ mRNA और DNA टीके शामिल हैं।

मुख्य पाठ

कोरोना वायरस संक्रमण और प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आणविक तंत्र

सिस्टैंच पौधा-बढ़ाने वाली प्रतिरक्षा प्रणाली

COVID-19 जीनोम एक सकारात्मक एकल-फंसे हुए आरएनए है जो चार मुख्य संरचनात्मक प्रोटीनों को एन्कोड करता है जिसमें लिफाफा (ई), स्पाइक (एस), झिल्ली (एम), और न्यूक्लियोकैप्सिड (एन) (स्टैडलर और रैपुओली 2005) शामिल हैं। जैसा कि चित्र 1ए में दर्शाया गया है। मानव SARS-CoV में आवरण के एक भाग के रूप में स्पाइक (S) ग्लाइकोप्रोटीन शामिल होता है। मेजबान कोशिकाओं में वायरस का समावेश स्पाइक प्रोटीन द्वारा किया जाता है जिसमें S1 और S2 सबयूनिट होते हैं। वे संक्रमण की शुरुआत के लिए एंजियोटेंसिन-कनवर्टिंग एंजाइम II (ACE2) के रूप में जाने जाने वाले मेजबान सेल रिसेप्टर्स के साथ जुड़ाव में एक आवश्यक भूमिका निभाते हैं (चित्र 1 बी)। उच्च आत्मीयता के साथ ACE2 से जुड़ने वाले S1 डोमेन का मध्य क्षेत्र एक रिसेप्टर-बाइंडिंग डोमेन (RBD) है। इस संबंध में, मानव कोशिका संक्रमण की शुरुआत के लिए RBD और ACE2 के बीच परस्पर क्रिया आवश्यक है (He et al. 2020)। इसके अलावा, मेजबान कोशिकाओं में वायरल प्रवेश के लिए एस प्रोटीन ट्रंकेशन आवश्यक है; ACE2 के साथ RBD क्षेत्र के जुड़ाव के बाद, एक होस्ट प्रोटीज़ जिसे TM प्रोटीज़ सेरीन 2 (TMPRSS2) के रूप में जाना जाता है, S प्रोटीन को S1 और S2 डोमेन में विभाजित करता है, जिससे होस्ट सेल में S2 डोमेन फ़्यूज़न होता है (हुआंग एट अल। 2020)। हालाँकि मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएँ COVID, अतिसंवेदनशीलता और साइटोकिन तूफान (ज्यादातर इंटरल्यूकिन, IL, IL, GM-CSF, इंटरफेरॉन, IFN -, नेक्रोसिस फैक्टर) के खिलाफ प्रभावी हैं। TNF -, IL-10-, IL-2- और IL{32}}संचालित प्रतिक्रियाएँ) को प्रतिबंधित किया जाना चाहिए (चौधरी एट अल. 2020)। वायरल लगाव (स्पाइक-एसीई2 इंटरेक्शन) और श्वसन कोशिकाओं में प्रवेश के बाद, फागोसाइटिक वायुकोशीय मैक्रोफेज और डेंड्राइटिक कोशिकाएं (डीसी) टी कोशिकाओं में वायरल एंटीजन पेश करती हैं और टी सीडी 4+ (सहायक टी सेल) और टी सीडी {{37) को सक्रिय करती हैं। }}(साइटोटॉक्सिक टी सेल)। इसके बाद, वायरस का सामना करने के लिए IL6, IL12, TNF और IFN आदि जैसे प्रिनफ्लेमेटरी साइटोकिन्स जारी किए जाते हैं। हालाँकि, साइटोकिन तूफान के कारण साइटोकिन उत्पादन का उच्च स्तर फेफड़ों को नुकसान पहुंचाता है (होसैनी एट अल। 2020)। वैज्ञानिक प्रमाणों के अनुसार, सहायक टी कोशिकाएं वायरल संक्रमण को खत्म करने, एंटीबॉडी का उत्पादन करने के लिए बी कोशिकाओं को शामिल करने और साइटोटॉक्सिक टी कोशिकाओं को उत्तेजित करने के लिए आवश्यक हैं (शर्मा एट अल 2020)। COVID‑19 एंटीजेनिक लक्ष्य किसी रोगजनक जीव के खिलाफ एक सुरक्षित और सुरक्षात्मक टीका विकसित करने में, सर्वोत्तम इम्युनोजेनिक लक्ष्यों की पहचान करना आवश्यक है (लू एट अल. 2020बी)। सेलुलर और ह्यूमरल प्रतिरक्षा को ठीक से प्रेरित करने के लिए टी सेल और बी सेल एपिटोप्स को उत्तेजित करने के लिए संभावित एंटीजेनिक लक्ष्यों को अपनाना महत्वपूर्ण है (रुएकर्ट और गुज़मैन 2012)। वायरल एस प्रोटीन एक आवश्यक लिगैंड के रूप में आरबीडी डोमेन के माध्यम से मेजबान कोशिकाओं के साथ संपर्क करता है। आरबीडी डोमेन कोविड के खिलाफ निष्क्रिय एंटीबॉडी उत्पादन और टी-सेल प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को प्रेरित कर सकता है। साथ ही, एस प्रोटीन की इम्युनोजेनेसिटी की पुष्टि की गई है (पुष्पराजाह एट अल. 2021)। अन्य वायरल प्रोटीन की तुलना में एन प्रोटीन का अनुक्रम छोटा और अत्यधिक संरक्षित होता है। एन प्रोटीन वायरस संक्रमण के दौरान अत्यधिक व्यक्त होता है, जिससे रोगियों में सीओवीआईडी ​​​​के खिलाफ एक महत्वपूर्ण संबद्ध हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया होती है। इसके अतिरिक्त, एन प्रोटीन के खिलाफ सेलुलर प्रतिक्रियाओं के साथ, इसे वैक्सीन डिजाइन में एक उचित उम्मीदवार एंटीजन माना जा सकता है (दत्ता एट अल. 2020)। इसके अलावा, एम प्रोटीन और ई प्रोटीन टी सीडी को उत्तेजित करते हैं (वांग एट अल. 2005; अब्देलमगेद एट अल. 2020; डोंग एट अल. 2020)। एस प्रोटीन के खिलाफ मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्राप्त करना निर्णायक और आवश्यक है (बुखोल्ज़ एट अल 2004)। एस प्रोटीन में सबसे अधिक इम्युनोजेनिक टी सेल और बी सेल एपिटोप्स शामिल हैं जिन्हें सीओवीआईडी ​​​​के खिलाफ टीका विकास में पसंदीदा लक्ष्य के रूप में जाना जाता है। इसे फाइजर/बायोएनटेक और मॉडर्ना वैक्सीन जैसे सभी विकसित एमआरएनए प्लेटफॉर्म टीकों में लागू किया गया है।

चित्र 1 a SARS-CoV-2 विषाणु संरचना; कोविड वायरस के प्रमुख सतह प्रोटीनों में स्पाइक (एस) ग्लाइकोप्रोटीन, मेम्ब्रेन (एम), और एनवेलप (ई) प्रोटीन शामिल हैं। एस प्रोटीन मुख्य टीका और चिकित्सीय लक्ष्य है जो संक्रमण की शुरुआत के लिए एंजियोटेंसिन-परिवर्तित एंजाइम II (एसीई2) रिसेप्टर के साथ बातचीत करता है। बी स्पाइक प्रोटीन के डोमेन; एस प्रोटीन में एस1 (एनटीडी या गैर-अनुवादित डोमेन और आरबीडी या रिसेप्टर बाइंडिंग डोमेन) और एस2 सबयूनिट शामिल हैं

न्यूक्लिक एसिड-आधारित दवाओं का इतिहास

ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स को 30 साल से भी पहले नैदानिक ​​​​परीक्षणों में शामिल किया गया था। न्यूक्लिक एसिड-आधारित चिकित्सीय दृष्टिकोण का उपयोग करने का इतिहास 1977 का है जब पैटर्सन एट अल। जीन अभिव्यक्ति को संतुलित करने के लिए न्यूक्लिक एसिड का उपयोग किया गया (पैटर्सन एट अल. 1977)। वर्तमान में, उन्हें अधिक तवज्जो मिली है। न्यूक्लिक एसिड-आधारित दवाओं को विभिन्न श्रेणियों में विभाजित किया गया है, जिनमें एंटीसेंस फॉर्म, राइबोजाइम, एमआरएनए और डीएनए-आधारित टीके (शर्मा एट अल 2014) शामिल हैं। एक सिंथेटिक ऑलिगोडॉक्सीन्यूक्लियोटाइड ने रोस सार्कोमा वायरस (आरएसवी) की प्रतिकृति को रोक दिया, जो आरएसवी एमआरएनए का पूरक था और इसे एंटीसेंस (ज़ेमेकनिक और स्टीफेंसन 1978) के रूप में जाना जाता था। साइटोमेगालोवायरस (सीएमवी) के खिलाफ क्लिनिक में पहला एंटीसेन्स दर्ज किया गया था (मुलाम्बा एट अल. 1998)। छोटे हस्तक्षेप करने वाले आरएनए (siRNA) में जीन अभिव्यक्ति को बाधित करने की क्षमता होती है और, पहली बार, 1998 में रिपोर्ट किया गया था। छोटे गैर-कोडिंग आरएनए के एक अन्य समूह में माइक्रोआरएनए (miRNAs) शामिल हैं, जो जीन अभिव्यक्ति के नियमन में अपरिहार्य भूमिका निभाते हैं। siRNA और चिकित्सीय क्षमता के समान कार्य करता है (उस्मान और ब्लैट 2000; शर्मा एट अल. 2014)। जैसा कि उल्लेख किया गया है, आरएनए अणुओं का राइबोजाइम वर्ग एंजाइम के रूप में कार्य करता है जो प्रतिलेखन को लक्षित करता है। राइबोजाइम ने कैंसर और कुछ वायरल संक्रमण जैसे ह्यूमन इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस (एचआईवी) (उस्मान और ब्लैट 2000; अबेरा एट अल. 2012) के खिलाफ नैदानिक ​​​​परीक्षणों में प्रवेश किया। एमआरएनए- और डीएनए-आधारित टीकों के अलावा, उन्हें 1990 में शुरू की गई न्यूक्लिक एसिड-आधारित दवाओं में वर्गीकृत किया गया है और सीओवीआईडी ​​​​से निपटने के लिए टीकों के विकास में अधिक ध्यान दिया गया है। (ले एट अल। 2020; झांग एट अल) .2020). टीकों के इन समूहों के प्रमुख लाभों में उनका तेजी से उत्पादन और संबंधित लक्ष्य एंटीजन के खिलाफ उच्च विशिष्टता शामिल है (Le et al. 2020)।

सिस्टैंच ट्यूबुलोसा-प्रतिरक्षा प्रणाली में सुधार

एमआरएनए-आधारित टीके

मेजबान कोशिकाओं में एमआरएनए अणुओं की प्रारंभिक डिलीवरी में एक धनायनित लिपिड (पार्क एट अल. 2021) का उपयोग करके फ़ाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं में एमआरएनए अभिकर्मक शामिल था। एमआरएनए टीकों में रोगज़नक़ एंटीजन एमआरएनए शामिल होते हैं जो मानव कोशिकाओं द्वारा एंटीजेनिक प्रोटीन का उत्पादन करते हैं। एमआरएनए टीकों के कई फायदों में एक सरल उत्पादन प्रक्रिया, कुशल और सुरक्षात्मक प्रतिरक्षा, सुविधाजनक हेरफेर और औद्योगीकरण, और COVID वेरिएंट पर प्रतिक्रिया करने के लिए लचीलापन शामिल है (कॉफमैन एट अल. 2016; फैंग एट अल. 2022)। कुछ दृष्टिकोण, जैसे कि 5ʹ-कैप और कोज़क अनुक्रमों को जोड़ना, 3ʹ-पॉली-ए अनुक्रमों और एमआरएनए न्यूक्लियोसाइड्स के संशोधन (बोरा एट अल 2021) का उपयोग करके लागू किया जाता है। एमआरएनए टीकों को मेजबान साइटोसोल में अनुवादित किया जाता है। इसलिए, होस्ट जीनोम सम्मिलन में कोई जोखिम नहीं है, जिसे उनके मुख्य लाभ के रूप में जाना जाता है। इस संबंध में, एमआरएनए-आधारित टीकों ने हाल ही में कैंसर और संक्रामक रोगों के खिलाफ एक सुरक्षित निवारक दृष्टिकोण के रूप में अधिक ध्यान आकर्षित किया है (कौर और गुप्ता 2020)। एमआरएनए टीकों की क्रिया का प्राथमिक तंत्र चित्र 2 में दर्शाया गया है।

डीएनए आधारित टीके

डीएनए टीकों में कई जीन शामिल होते हैं जो प्लास्मिड वैक्टर द्वारा व्यक्त वायरल एंटीजेनिक पेप्टाइड्स को एन्कोड करते हैं और इलेक्ट्रोपोरेशन (ईपी) के माध्यम से कोशिकाओं तक प्रेषित होते हैं। अन्य वैक्सीन प्लेटफार्मों की तुलना में, डीएनए वैक्सीन टीके विकसित करने के लिए एक लचीला और तेज़ प्लेटफ़ॉर्म प्रस्तावित करता है, जो इसे COVID जैसी विकासशील महामारी से लड़ने के लिए एक आकर्षक तकनीक बनाता है। इसके अलावा, डीएनए वैक्सीन एंटीजन का उत्पादन लक्ष्य कोशिकाओं में होता है, जो वायरल एंटीजन की प्राकृतिक संरचना और पोस्ट-ट्रांसलेशनल संशोधन को पुन: व्यवस्थित करने में सहायता करता है। डीएनए टीकों का मुख्य नुकसान उनकी प्रतिबंधित इम्यूनोजेनेसिटी है। इसलिए, सहायक या प्राइम-बूस्ट आहार के उपयोग जैसी रणनीतियों पर विचार करना महत्वपूर्ण है जो डीएनए वैक्सीन की क्षमता को बढ़ा सकते हैं। इसके अलावा, मेजबान डीएनए में न्यूक्लिक एसिड को एकीकृत करना एक और जैव सुरक्षा चिंता का विषय है जिसके परिणामस्वरूप ऑन्कोजेनेसिस और उत्परिवर्तन होता है (राउच एट अल। 2018)। हालांकि पूर्व अध्ययनों के अनुसार, डीएनए वैक्सीन सम्मिलन का जोखिम नगण्य है, डब्ल्यूएचओ और एफडीए एकीकरण के लिए डीएनए वैक्सीन सुरक्षा के कार्यान्वयन की सिफारिश करते हैं (वांग एट अल. 2004; शल्क एट अल. 2006)। डीएनए टीके कोरोना वायरस जीन को मानव कोशिकाओं में स्थानांतरित करते हैं। टीकाकरण का सिद्धांत कोशिका नाभिक में डीएनए वितरण पर निर्भर करता है जैसे कि एंटीजन प्रतिलेखन शुरू किया जाता है और उसके बाद अनुवाद किया जाता है। डीएनए टीके आमतौर पर प्लास्मिड को वैक्टर के रूप में उपयोग करते हैं। वैक्सीन प्रशासन मार्ग के आधार पर, मायोसाइट्स और केराटिनोसाइट्स दोनों को संबोधित किया जाता है। हालाँकि, इंजेक्शन स्थल के पास एंटीजन-प्रस्तुत करने वाली कोशिकाओं को डीएनए टीकों का उपयोग करके सीधे भी ट्रांसफ़ेक्ट किया जा सकता है। ऐसे उदाहरणों में, क्रॉस-प्राइमिंग प्रक्रिया दोनों प्रमुख हिस्टोकम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स (एमएचसी-I/II) अणुओं (होबरनिक और ब्रोस 2018) का उपयोग करके एंटीजन का प्रतिनिधित्व करती है। उत्पन्न एंटीजन को एपोप्टोटिक निकायों या एक्सोसोम का उपयोग करके जारी किया जाता है जिसके परिणामस्वरूप एंटीजन-प्रस्तुत करने वाली कोशिकाओं द्वारा उनकी पहचान की जाती है, जो बदले में सेलुलर और ह्यूमरल प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को उत्तेजित करती है। एक मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया उत्पन्न करने के लिए विविध वितरण रणनीतियों का उपयोग किया जाता है (डोनेली एट अल. 2005; ली और पेत्रोव्स्की 2016; स्ट्रिज़ोवा एट अल. 2021)। कोविड संक्रमण के दौरान प्रतिरक्षा विनियमन के संबंध में, यह पता चला है कि गलत पूर्वानुमान के साथ पेरीकार्डियल इफ्यूजन के जोखिम वाले मरीज़ बढ़ी हुई सीडी 3+ सीडी 8+ टी कोशिकाओं और कम सीडी का संकेत देते हैं। 18}}एचएलए-डीआर और टी नियामक (ट्रेग) कोशिकाएं (डुएर एट अल. 2020)। ये परिणाम दर्शाते हैं कि गंभीर संक्रमण असंतुलित प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के कारण होता है जो रोग की स्थिति को बढ़ा देता है (टाय एट अल. 2020)। कोविड वैक्सीन की प्रगति का लक्ष्य इस तरह के असंतुलन की प्रगति के बिना एक प्रभावी और उचित प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया (दोनों भुजाओं सहित) विकसित करना है (होबरनिक और ब्रोस 2018)। जबकि डीएनए टीकों द्वारा मानव नैदानिक ​​​​परीक्षणों ने कुल प्रतिक्रियाएं शुरू कीं, ये प्रतिक्रियाएं स्वीकार्य नैदानिक ​​​​लाभों को प्रेरित करने के लिए अक्सर अपर्याप्त होती हैं। इसके अतिरिक्त, प्लास्मिड डीएनए के बुनियादी घटक, उदाहरण के लिए, अनमेथिलेटेड सीपीजी अनुक्रम, जन्मजात प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं के सक्रियण का कारण बन सकते हैं, जिससे व्यक्त एंटीजन के खिलाफ अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं बढ़ सकती हैं। इस प्रकार, डीएनए टीके पशु चिकित्सा में अधिक लागू होते हैं (कोबन एट अल. 2013; सिल्वेरा एट अल. 2017; होबरनिक एंड ब्रोस 2018)। इस खामी के कारण, कुछ शोध लाइनें डीएनए टीकों के अनुकूलन और वितरण पर ध्यान केंद्रित करती हैं, जिसमें कोडन अनुकूलन, प्रमोटर डिजाइन, आणविक सहायक, ईपी एप्लिकेशन, प्राइम-बूस्ट टीकाकरण, या उन्नत वैक्सीन डिजाइन के लिए "ओमिक्स" तरीके शामिल हैं (ली एट अल)। 2012; सिलवीरा एट अल. 2020)। चित्र 3 प्रभावी प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं में डीएनए वैक्सीन तंत्र के मुख्य चरणों को दर्शाता है।

चित्र 2 एमआरएनए वैक्सीन निर्माण, प्रशासन, और प्रतिरक्षा उत्तेजना के तंत्र: लिपिड नैनोकण (एलएनपी) के साथ एक एमआरएनए फॉर्मूलेशन अनुक्रम स्थिरता को बनाए रखता है और बढ़ाता है। बी एमआरएनए-एलएनपी वैक्सीन का खारा घोल इंट्रामस्क्युलर मार्ग से प्रशासित किया जाता है। सी एलएनपी युक्त एमआरएनए को एन्डोसाइटोसिस के माध्यम से एंटीजन-प्रेजेंटिंग कोशिकाओं (एपीसी) में ट्रांसफ़ेक्ट किया जाता है। एमआरएनए को साइटोप्लाज्म में छोड़ा जाता है और वायरल प्रोटीन में परिवर्तित किया जाता है, फिर उन्हें प्रोटीसोम द्वारा लीज किया जाता है और एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम की सतह पर प्रमुख हिस्टोकम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स I (एमएचसी-आई) से बांध दिया जाता है और टी साइटोटॉक्सिक (टीसी) कोशिकाओं में प्रस्तुत किया जाता है।

एमआरएनए- और डीएनए-आधारित टीकों की क्षमता

एमआरएनए-स्तरीय वैक्सीन संरचना में 3′ यूटीआर, कोडिंग अनुक्रम, 5′यूटीआर, 5′ कैप और पॉली (ए) टेल (लियू 2019) सहित स्थिरता और प्रोटीन अभिव्यक्ति को ठीक करने वाले तत्व शामिल हैं। वायरल या यूकेरियोटिक जीन से प्राप्त कोडिंग अनुक्रम के किनारे 5′ और 3′ यूटीआर तत्व संरचनात्मक स्थिरता को बढ़ाते हैं और एमआरएनए के अनुवाद में सुधार करते हैं जो टीकों के लिए आवश्यक कारक हैं (रॉस और सुलिवन 1985; होल्टकैंप एट अल। 2006)। एमआरएनए से कुशल प्रोटीन अनुवाद के लिए, 5' कैप संरचना की आवश्यकता होती है (मार्टिन एट अल. 1975; रॉस और सुलिवन 1985)। एमआरएनए पॉली (ए) टेल की एमआरएनए स्थिरता और अनुवाद में भी नियामक भूमिका होती है (होल्टकैंप एट अल. 2006)। इसके अलावा, प्रोटीन अनुवाद में कोडन के उपयोग की महत्वपूर्ण भूमिका है। इस संबंध में, एमआरएनए से प्रोटीन अनुवाद को बढ़ाने के लिए, दुर्लभ कोडन को प्रयुक्त पर्यायवाची कोडन से बदल दिया जाता है, जिनमें साइटोसोल में प्रचुर मात्रा में संज्ञानात्मक टीआरएनए होता है (स्टेपिंस्की एट अल। 2001)। अनुक्रम अनुकूलन के लिए एक अन्य दृष्टिकोण जी: सी सामग्री का संवर्धन है। हाल के वर्षों में कई तरीकों से कुशल और सुरक्षित उम्मीदवार डीएनए टीके विकसित किए गए हैं। डीएनए-आधारित वैक्सीन प्लेटफ़ॉर्म में, मेजबान कोशिकाओं के भीतर उन वांछित एंटीजन को व्यक्त करने के लिए बैक्टीरिया-व्युत्पन्न प्लास्मिड वैक्टर लागू किए जाते हैं। जीवाणु प्लास्मिड को यूकेरियोटिक कोशिकाओं में प्रवेश किया जाना चाहिए और नाभिक में स्थानांतरित किया जाना चाहिए। फिर डीएनए को क्रमशः मेजबान कोशिका के नाभिक और साइटोप्लाज्म में विदेशी जीन से प्रतिलेखित और अनुवादित किया जाता है। इसलिए, एक शक्तिशाली डीएनए वैक्सीन तक पहुंचने के लिए उच्च अभिकर्मक दक्षता और प्रोटीन अभिव्यक्ति के साथ एक उचित प्लास्मिड डिजाइन करना आवश्यक है (मैलोन एट अल. 1989)। यूकेरियोटिक क्षेत्र का अनुक्रम (डीएनए टीके प्लास्मिड में), सम्मिलित जीन का अपस्ट्रीम, एक प्रमोटर और एक पॉली ए सिग्नल (पॉलीए) (एएयू एएए) से बना होता है जो एंटीजेनिक अनुक्रम के 3′ छोर पर स्थित होता है (शान एट अल) . 2011). प्रमोटर डीएनए वैक्सीन प्लास्मिड में आवश्यक महत्वपूर्ण तत्व हैं जो मेजबान कोशिकाओं में वांछित एंटीजन के उच्च अभिव्यक्ति स्तर को उत्तेजित करते हैं (बेकर एट अल। 2008) और परिणामस्वरूप सम्मिलित जीन से एमआरएनए प्रतिलेखन होता है। डीएनए टीकों में सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले प्रमोटर में मानव साइटोमेगालोवायरस (सीएमवी) प्रमोटर शामिल है। पॉलीए अनुक्रम संकेत एमआरएनए स्थिरता और स्थानांतरण और यूकेरियोटिक जीन अभिव्यक्ति को कुशलता से उत्पन्न करता है। एक अन्य महत्वपूर्ण तत्व कोज़क अनुक्रम (एसीसीएटीजीजी) है जिसकी यूकेरियोटिक राइबोसोम द्वारा अनुवाद में महत्वपूर्ण भूमिका है। इसके अलावा, मेजबान कोशिका में डाले गए जीन के गलत अनुवाद से बचने के लिए एक या दो स्टॉप-कोडन अनुक्रम जोड़ना आवश्यक है (बेकर एट अल. 2008; विलियम्स 2013)। डीएनए और एमआरएनए वैक्सीन प्लेटफार्मों की तुलना हालांकि डीएनए और एमआरएनए टीके 1990 के दशक से विकास के अधीन हैं और हाल के विकास और विभिन्न पशु चिकित्सा डीएनए टीकों के लाइसेंस के कारण, काफी उत्साह एमआरएनए में बदल गया है। दोनों को प्लास्मिड डीएनए और एमआरएनए में सीधे हेरफेर करके या इम्युनोमोड्यूलेटर या सहायक और फॉर्मूलेशन और डिलीवरी सिस्टम (लियू 2019) जोड़कर अपनी एंटीजेनेसिटी, स्थिरता और प्रभावकारिता को बढ़ाने के प्रयासों की आवश्यकता है। एमआरएनए की स्थिरता अवधि प्लास्मिड डीएनए की तुलना में कम है। यह पता चला है कि डीएनए टीके तेजी से एन्कोडेड प्रोटीन उत्पन्न करते हैं, उच्च आंतरिक प्लास्मिड डीएनए स्थिरता के कारण एमआरएनए टीकों की तुलना में अधिक मात्रा में होते हैं। यह पाया गया है कि प्लास्मिड डीएनए गैर-एकीकृत मोड में 6 महीने तक मांसपेशियों में बना रहता है (लेडविथ एट अल. 2000)। हालाँकि डीएनए और एमआरएनए टीकों को पसंदीदा प्रोटीन के लिए एक अभिव्यक्ति प्रणाली माना जाता है, लेकिन कोई भी प्रतिरक्षात्मक रूप से निष्क्रिय नहीं है। इसके अलावा, डीएनए प्लास्मिड और एमआरएनए जन्मजात प्रतिरक्षा को उत्तेजित करते हैं (कैंपबेल 2017)। डीएनए और एमआरएनए-आधारित वैक्सीन तकनीक पूरी तरह से सामान्य नहीं हो सकती है। डिलीवरी, स्थिरता और एमआरएनए की आंतरिक इम्युनोस्टिम्युलेटरी गतिविधि को नियंत्रित करने की आवश्यकता के लिए संशोधित न्यूक्लियोसाइड और फॉर्मूलेशन के कारण एमआरएनए प्लास्मिड डीएनए से अधिक जटिल है। फिर भी, यह उस उत्पादन को लाभ पहुंचाता है जो प्रत्येक सेलुलर या पशु उत्पाद की मांग से बचता है। वादा यह है कि नैदानिक ​​​​उपलब्धियाँ तब संभव होंगी जब प्लास्मिड डीएनए और एमआरएनए वैक्सीन चुनौतियों को विशेष रूप से बीमारियों की रोकथाम और उपचार के लिए उन्नत प्रौद्योगिकियों को लागू करके हल किया जाएगा (लियू 2019)।

चित्र 3 एंटीजन-प्रस्तुत करने वाली कोशिकाओं (डेंड्राइटिक कोशिकाओं या डीसी) में डीएनए वैक्सीन अभिव्यक्ति की प्रक्रिया। प्लास्मिड डीएनए डीसी नाभिक में प्रवेश करता है और विवो में एंटीजन को व्यक्त करता है (1) फिर, एंटीजन को एमएचसी-I और एमएचसी-II दोनों अणुओं के माध्यम से टी कोशिकाओं (टी सेल रिसेप्टर्स या टीसीआर) में प्रस्तुत किया जाता है। एंटीजन प्रस्तुति MHC-I-TCR के साथ DC CD80/86 अणुओं और CD{8}T सेल CD28 अणुओं के माध्यम से और DC CD40 और CD{13}}T सेल CD40L के माध्यम से भी होती है। एमएचसी-II-टीसीआर इंटरैक्शन (2ए, 3 और 4) सीडी 8+टी कोशिकाओं के सक्रियण और प्रसार और साइटोकिन्स की रिहाई से मैक्रोफेज सक्रियण (2बी) जैसी प्रभावी प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं होती हैं। इसके अतिरिक्त, सीडी का सक्रियण 4+टी कोशिकाएं डीसी से जुड़ती हैं और साइटोकिन्स का प्रभाव बी कोशिकाओं के सक्रियण, प्रसार और एंटीबॉडी के स्राव से जुड़ा होता है (5)

डीएनए और एमआरएनए वैक्सीन वितरण में प्रगति

यूकेरियोटिक कोशिकाओं द्वारा विदेशी डीएनए और आरएनए का ग्रहण वायरल वैक्टर की तुलना में कुशल नहीं है। सेलुलर ग्रहण क्षमता को बढ़ाने के लिए कई भौतिक वितरण दृष्टिकोण स्थापित किए गए हैं (मेलोट एट अल 2013)। जीन ट्रांसफ़ेक्शन के भौतिक तरीकों में ईपी और प्रोजेक्टर डिवाइस (गुलस-इज़ और सग्लाम-मेटिनर 2019) सहित यांत्रिक प्रक्रियाओं के माध्यम से आनुवंशिक सामग्री को स्थानांतरित करने वाली डिलीवरी प्रणालियाँ शामिल हैं। बायोजेक्टर डिवाइस सुई की आवश्यकता के बिना आईएम (इंट्रामस्क्यूलर), आईडी (इंट्राडर्मल), और एससी (सबक्यूटेनियस) प्रशासन के माध्यम से चिकित्सीय परिवहन के लिए सीओ 2 दबाव का उपयोग करते हैं (जोरिट्स्मा एट अल। 2016), पारंपरिक सुई इंजेक्शन पर काफी लाभ देते हैं, जिसमें शमन भी शामिल है। प्रतिकूल प्रभाव, सुई क्रॉस-संदूषण, और सुई-छड़ी क्षति (झांग एट अल 2015)। प्रासंगिक रूप से, पहले चरण के परीक्षण में जीका वायरस के खिलाफ दो डीएनए टीकों का मूल्यांकन किया गया है, जो सुई के उपयोग की तुलना में सुई-मुक्त प्रशासन के बाद बढ़ी हुई सेलुलर प्रतिक्रियाओं को प्रदर्शित करता है (गौडिंस्की एट अल। 2018)। इसके अलावा, रेबीज के खिलाफ एक एमआरएनए वैक्सीन डिलीवरी प्लेटफॉर्म ने प्रोजेक्टर का उपयोग करके उन्नत एंटीबॉडी प्रतिक्रियाओं का खुलासा किया (अल्बेरर एट अल. 2017)। जेट इंजेक्शन के माध्यम से बढ़ी हुई वैक्सीन दक्षता को टीकों के व्यापक वितरण के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है, जिसके परिणामस्वरूप एपीसी (विलियम्स एट अल। 2000; अल्बेरर एट अल। 2017) का उपयोग करके उच्च उठाव होता है। वर्तमान में, ईपी के बाद आईडी या आईएम इंजेक्शन का उपयोग आमतौर पर नैदानिक ​​​​अध्ययनों में डीएनए वैक्सीन वितरण के लिए किया जाता है (सरदेसाई और वेनर 2011)। ईपी में इलेक्ट्रिक पल्स (पुष्परजा एट अल 2021) का उपयोग करके आनुवंशिक सामग्री के सेलुलर अवशोषण को बढ़ाने के लिए त्वचा कोशिकाओं के भीतर छिद्रों का निर्माण शामिल है। आईएम ईपी विधि मुख्य रूप से 1998 में लागू की गई थी (एहारा 1998) डीएनए टीकों की डिलीवरी के लिए मांसपेशियों की कोशिकाओं की भेदन क्षमता को बढ़ाती है (रिज़ुटो एट अल। 1999; डुपुइस एट अल। 2000; सोकोलोव्स्का और ब्लाचनियो-ज़बील्स्का 2019)। कई रिपोर्टों ने ईपी (यान एट अल. 2008; यान एट अल. 2009) का उपयोग करके विवो में बेहतर एंटीजन अभिव्यक्ति और बढ़ी हुई एंटीजन-विशिष्ट प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं का खुलासा किया है। यह बताया गया है कि एक एचआईवी डीएनए वैक्सीन, ADVAX, ने IM प्रशासन (वासन एट अल. 2010) की तुलना में ईपी (वासन एट अल. 2011) के माध्यम से स्थानांतरण के बाद इम्युनोजेनेसिटी में वृद्धि की है। फिर भी, ईपी दृष्टिकोण उच्च वोल्टेज (गुलसे-इज़ और सग्लाम-मेटिनर 2019) के उपयोग के कारण कोशिका मृत्यु जोखिम से ग्रस्त है। आरएनए वैक्सीन डिलीवरी के लिए ईपी जैसे नवीन डिलीवरी दृष्टिकोण की अभी भी जांच चल रही है।

पुरुषों के लिए सिस्टैंच के फायदे - प्रतिरक्षा प्रणाली को मजबूत करें

स्व-प्रवर्धित वैक्सीन वितरण के लिए ईपी प्रभावकारिता चूहों में जीन अभिव्यक्ति और प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं के संदर्भ में प्लास्मिड डीएनए टीकों के समान है (सीयू एट अल। 2013)। हालाँकि, ईपी ने पारंपरिक गैर-प्रतिकृति आरएनए टीकों (जोहानसन एट अल 2012) की वितरण प्रभावकारिता को नहीं बढ़ाया है, जिससे संभवतः आरएनए वैक्टर की नकल करने में इसकी प्रभावशीलता कम हो गई है। तदनुसार, ईपी और बायो इंजेक्टर कोविड डीएनए/आरएनए टीकों के पैरेंट्रल इंजेक्शन के लिए फायदेमंद हैं। ये दृष्टिकोण डीएनए वैक्सीन उम्मीदवारों के उच्च उत्पादन और वितरण में योगदान करते हैं और परिणामों में उल्लेखनीय सुधार करते हैं (पुष्पराजाह एट अल. 2021)।

न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीकों के लाभ और सीमाएं

टीकाकरण के नए और आशाजनक तरीकों के रूप में, न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीके सुरक्षित और सुरक्षात्मक टीकाकरण (चोई और चांग 2013) विकसित करने में अंतर्दृष्टि प्रदान करते हैं, जैसा कि लाखों लोगों ने कोविड महामारी के दौरान प्रदर्शित किया है। न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीकों का विकास चक्र छोटा होता है, जिससे महामारी के दौरान तेजी से वितरण की सुविधा मिलती है। पुनः संयोजक डीएनए टीकों के उपयोग के लिए डीएनए वेक्टर को नाभिक में कुशल स्थानांतरण, प्रतिलेखन और फिर वांछित एंटीजन में अनुवाद की आवश्यकता होती है (लीटनर एट अल 1999)। सुविधाजनक हेरफेर और कम लागत वाले उत्पादन के कारण, नग्न प्लास्मिड डीएनए एंटीजन प्रस्तुत करने के लिए एक आकर्षक वेक्टर है (विलियम्स 2013)। आमतौर पर, प्लास्मिड डीएनए में बुनियादी आनुवंशिक तत्व शामिल होते हैं, जिसमें एंटीजन-एन्कोडिंग जीन, एक प्रमोटर, एन्हांसर और ट्रांसक्रिप्शन समाप्ति/पॉलीएडेनाइलेशन अनुक्रम (वोगेल और सरवर 1995) शामिल हैं। प्लास्मिड डीएनए प्लेटफॉर्म एक आशाजनक जैव-फार्मास्युटिकल निर्माण है जिसे सस्ती प्रोकैरियोटिक कोशिकाओं के भीतर उच्च स्तर पर दोहराया जाता है, हालांकि शुद्धिकरण की आवश्यकता होती है (प्रेजेरेस एट अल. 1999; फरेरा एट अल. 2000; सुशाक एट अल. 2017)। आरएनए टीके एमआरएनए अणुओं से बने होते हैं जिनमें एक एंटीजन आरएनए होता है जो 3′, पॉली-ए टेल और 5′ टर्मिनी से घिरा होता है और इसमें प्रतिलेखन की आवश्यकता नहीं होती है। (झांग एट अल. 2019)। कई आरएनए टीके स्व-प्रवर्धन से गुजरते हैं जिन्हें विकास के तहत नई तकनीक के रूप में जाना जाता है। तदनुसार, नग्न आरएनए अस्थिरता की संभावना के बावजूद, आरएनए अणु को प्रसव के बाद मेजबान में दोहराया और अनुवादित किया जा सकता है, इस प्रकार इम्युनोजेनिक पेप्टाइड्स की अभिव्यक्ति बढ़ जाती है (पारडी एट अल। 2018; झांग एट अल। 2019; वाधवा एट अल। 2020) . एमआरएनए सर्वव्यापी राइबोन्यूक्लिज़ एंजाइमों (वाधवा एट अल. 2020; जू एट अल. 2020) द्वारा क्षीण हो जाता है। साइटोसोल में एमआरएनए की स्थिरता और अनुवाद को बढ़ाने और अनुवाद करने के लिए 3′ पॉली-ए टेल और 5′–7-मिथाइलगुआनोसिन कैप को जोड़ना महत्वपूर्ण है (गैली 1991; श्लेक एट अल. 2012)। टीके की मात्रा और अभिव्यक्ति को बढ़ाने की रणनीतियों का मूल्यांकन मुख्य रूप से आरएनए टीकों की तुलना में डीएनए टीकों के लिए किया गया है, क्योंकि डीएनए को केंद्रक तक पहुंचने के लिए दो कोशिका झिल्लियों को पार करने की आवश्यकता होती है। इसके विपरीत, आरएनए एक झिल्ली के माध्यम से साइटोप्लाज्म में प्रवेश करता है (राउच एट अल. 2018)। डीएनए संरचना में तुलनात्मक रूप से उच्च स्थिरता है। 7 वर्षों में, यह पाया गया कि प्लास्मिड डीएनए -20 डिग्री पर रखे गए नए प्रदान किए गए डीएनए के साथ बिना किसी अंतर के बरकरार रहा (वाल्थर एट अल. 2013; पुष्पाराजा एट अल. 2021)। डीएनए की अखंडता को लंबे समय तक बनाए रखने के लिए कम पीएच और तापमान महत्वपूर्ण हैं। इसके विपरीत, आरएनए अत्यधिक तापमान-संवेदनशील है और इसके आधे जीवन को बढ़ाने के लिए इसे एंजाइम-मुक्त माध्यम में -70 डिग्री पर रखा जाना चाहिए (जोन्स एट अल। 2007)।

न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीके विकसित करने में चुनौतियाँ

यह सर्वविदित है कि कोविड के टीके पर्याप्त रूप से कुशल और सुरक्षात्मक होने चाहिए (ग्राहम 2020) और लंबे समय तक प्रतिरक्षा प्रदान करने वाले होने चाहिए। हालाँकि, वार्षिक फ्लू वैक्सीन अनुभवों (रैंडोल्फ और बैरेइरो 2020; वैन रील और डी विट 2020) के आधार पर वार्षिक टीकाकरण संभव हो सकता है। नए प्लेटफार्मों के साथ भी कोविड का टीका विकसित करना चुनौतीपूर्ण है। कोरोना वायरस स्पाइक प्रोटीन वैक्सीन की उच्च इम्युनोजेनेसिटी और सुरक्षा के बावजूद, उत्परिवर्तन की घटना चिंता का विषय है और वायरस का फिर से उभरना चिंता का विषय है। इसलिए, लक्ष्य प्रोटीन अनुक्रम को सटीक रूप से अपनाने के साथ-साथ रोग के उभरने के समय और स्थान का पूर्वानुमान विकास प्रक्रिया का सबसे महत्वपूर्ण चरण है, जिसके लिए नैदानिक ​​​​परीक्षणों के उचित कार्यान्वयन की आवश्यकता होती है (लूरी एट अल 2020)। डीएनए टीकों की मुख्य चुनौती छोटे पशु प्रणालियों की तुलना में मनुष्यों और बड़े जानवरों में अपेक्षाकृत कम प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्राप्त करना है (ग्रुनवाल्ड और उल्बर्ट 2015; सुस्चाक एट अल। 2017)। ध्यान देने योग्य बात यह है कि, सुरक्षा स्थायित्व, विशिष्ट उपसमूहों में प्रभावशीलता, वायरल संचरण को रोकना, और सार्वजनिक स्वीकृति (पुष्पराजाह एट अल 2021) जैसी सुरक्षा स्थायित्व, प्रभावशीलता जैसी COVID टीकों के संबंध में आगे की चुनौतियों का समाधान किया जाना बाकी है। स्व-प्रवर्धित एमआरएनए टीकों में विलंबित एंटीजन अभिव्यक्ति इन टीकों की प्रभावकारिता को सीमित कर सकती है। हालाँकि, यह प्लेटफ़ॉर्म अधिक पैदावार देता है और इस प्रकार काफी कम खुराक पर समान सुरक्षा प्रदान करता है (वोगेल एट अल. 2018; स्ट्रिज़ोवा एट अल. 2021)।

COVID‑19 DNA और mRNA टीकों में हालिया प्रगति

कोविड के विरुद्ध टीका विकास में, कई अध्ययनों ने एमआरएनए वैक्सीन प्लेटफार्मों (वेरबेके एट अल 2{87}}21) पर ध्यान केंद्रित किया है, जिससे कई टीकों (विटिएलो और फेरारा 2) को मंजूरी मिली है। 94}}21) जैसे कि मॉडर्ना और फाइजर/बायोएनटेक कंपनियां। मॉडर्ना वैक्सीन में COVID-19 स्पाइक ग्लाइकोप्रोटीन mRNA की संपूर्ण एन्कोडिंग शामिल है, जबकि Pfizer/BioNtech में RBD mRNA अनुक्रम (ब्रूसो 2020) शामिल है। फाइजर/बायोएनटेक और मॉडर्ना टीकों की प्रभावकारिता का स्तर क्रमशः 95% और 94.5% है (राउच एट अल. 2021; विज एट अल. 2021)। मॉडर्ना वैक्सीन का भंडारण तापमान -25 डिग्री और -15 डिग्री के बीच है, जबकि पीएफज़र वैक्सीन का भंडारण तापमान -80 डिग्री और -60 डिग्री (मेओ एट अल. 2021; राउच एट अल. 2021) के बीच है। मॉडर्ना वैक्सीन की तुलना में, फाइजर/बायोएनटेक वैक्सीन की लागत और दुष्प्रभाव कम हैं (राउच एट अल. 2021)। चीनी शोधकर्ताओं द्वारा COVID के खिलाफ एक और mRNA वैक्सीन विकसित की गई थी और इसमें थर्मोस्टेबल (कम से कम एक सप्ताह 25 डिग्री पर) RBD-एन्कोडिंग mRNA (ब्रूसो 2020) का उपयोग किया गया था। एक अन्य सर्वेक्षण में, CureVac का उपयोग प्रोटीन स्थिरता में सुधार के लिए दो प्रोलाइन अवशेषों में विकल्प के साथ COVID वैक्सीन विकास के लिए इंजीनियर्ड फुल-लेंथ S प्रोटीन mRNA प्लेटफॉर्म के रूप में किया गया है (रॉच एट अल. 2021)। रुक्लन्थी डी अलविस एट अल। (2021) ने पूर्ण-लंबाई एस प्रोटीन और एक प्रतिकृति (डी एल्विस एट अल 2021) का उपयोग करके एक प्रभावी और सुरक्षित एकल-खुराक वैक्सीन के रूप में आवेदन की क्षमता के साथ एक स्व-प्रतिलेखन और प्रतिकृति एमआरएनए वैक्सीन विकसित की है। COVID का मुकाबला करने के लिए- 19 (डी एल्विस एट अल. 2021)। इसी तरह, एक लिपिड नैनोकण (एलएनपी) के भीतर संपुटित कोविड एस प्रोटीन को एन्कोडिंग करने वाले एक स्व-प्रवर्धित आरएनए को नियोजित किया गया था और एंटीबॉडी और सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं (मैकके एट अल 2020) के उच्च अनुमापांक को रेखांकित किया गया था। SARS-CoV के लिए कुछ डीएनए वैक्सीन उम्मीदवार जैसे S, N और M प्रोटीन-आधारित टीके विकसित किए गए हैं। इनमें से, एस प्रोटीन-आधारित डीएनए वैक्सीन ने प्रभावी ढंग से COVID संक्रमण के खिलाफ सुरक्षात्मक प्रभाव उत्पन्न किया है, संभवतः रिसेप्टर बाइंडिंग में एस प्रोटीन की महत्वपूर्ण भूमिका के कारण (झाओ एट अल 2020)। INO-4800 एक COVID-19 डीएनए वैक्सीन उम्मीदवार है जो COVID-19 S प्रोटीन को एन्कोडिंग करता है (सरवर एट अल. 2020; स्मिथ एट अल. 2020)। चूहों और गिनी सूअरों में पूर्व-नैदानिक ​​​​परिणामों ने हास्य और सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं का प्रदर्शन किया। चरण I नैदानिक ​​​​अध्ययन में, INO की दो खुराकें आईडी पथ के माध्यम से इंजेक्ट की गईं, CELLECTRA®2000 इनोवियो फार्मास्युटिकल (Diehl et al. 2013; Amante et al. 2015) के माध्यम से EP के साथ पूरक किया गया। उनके चरण I नैदानिक ​​​​परीक्षण में 36 प्रतिभागियों में से 34 में एंटीबॉडी और सेलुलर प्रतिक्रियाओं के आधार पर एक पूर्ण प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की व्याख्या की गई थी। रिपोर्ट किए गए दस प्रतिकूल प्रभाव (एई) बिना किसी गंभीर प्रतिकूल घटना (एसएई) (चरण) के देखे गए। INO की प्रतिरक्षाजनन क्षमता, सुरक्षा और सहनशीलता का मूल्यांकन करने के लिए एक चरण I/II नैदानिक ​​परीक्षण शुरू किया गया था (टेबस एट अल 2019)। INO-4800 में भंडारण की स्थिति समान है (स्मिथ एट अल. 2020), जिससे वैक्सीन वितरण आसान होने की उम्मीद है। इसके अलावा, कुछ अन्य समूहों के COVID-19 DNA टीकों ने परीक्षण शुरू कर दिए हैं। जून 2020 में, GX के लिए चरण I और IIa क्लिनिकल परीक्षण के लिए भर्ती शुरू की गई। ओसाका विश्वविद्यालय (जापान), ताकारो बायो और एंजेस के सहकारी प्रयासों द्वारा निर्मित एक डीएनए वैक्सीन, एजी {59}कोविड-19 ने मूल्यांकन के लिए जुलाई 2020 में चरण I और II नैदानिक ​​​​परीक्षणों के लिए भर्ती शुरू की। इसकी इम्युनोजेनेसिटी और सुरक्षा (स्पीज़र और बैचमैन 2020)। ZyCoV-D की तीन खुराकों की इम्युनोजेनेसिटी और सुरक्षा का मूल्यांकन करने के लिए चरण I और II नैदानिक ​​​​परीक्षण किए गए (कुमार एट अल। 2021)। यह मौखिक टीका प्लास्मिड डीएनए में स्पाइक प्रोटीन को एन्कोड करता है, जो जीवित बिफीडोबैक्टीरियम लोंगम में गतिशील रूप से प्रवर्धित होता है, जो एक अच्छी तरह से मान्यता प्राप्त आंतों का प्रोबायोटिक जीवाणु है। स्पाइक प्रोटीन को एन्कोड करने वाले डीएनए वैक्सीन CORVax12 का आकलन करने के लिए एक और चरण I नैदानिक ​​​​परीक्षण शुरू किया गया था। इलेक्ट्रोपोरेटेड CORVax12 की अकेले या किसी अन्य प्लास्मिड एन्कोडिंग इंटरल्यूकिन 12 (IL-12) के संयोजन में दक्षता की जांच की गई। विभिन्न प्रकार के कोविड एमआरएनए टीके विकास के अधीन हैं और उनके आशाजनक परिणाम सामने आए हैं (लीटनर एट अल. 1999; क्रोयल एट अल. 2001)। आरक्यू वीएलपी (एस, ई और एम प्रोटीन एन्कोडिंग) विकसित करने के लिए एक विविध दृष्टिकोण एमआरएनए कॉकटेल का उपयोग करके विवो में कुशल था। इस एमआरएनए वैक्सीन को परिवर्तित न्यूक्लियोसाइड के साथ एकीकृत किया गया और फिर एलएनपी में पैक किया गया और चूहों में मजबूत सेलुलर और ह्यूमरल प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्राप्त करने की क्षमता को उजागर किया गया (ले एट अल. 2020; लू एट अल. 2020ए)। इलेक्ट्रोपोरेशन का उपयोग करके 60 माइक्रोग्राम की दो खुराक में एक इंजीनियर्ड आर्जिनिल-ग्लाइसील-एसपारटिक एसिड (आरजीडी) डोमेन डीएनए वैक्सीन ने BALB/cJ चूहों (गुओ एट अल. 2021) में प्रभाव में सुधार किया। एकल खुराक (0.2 मिलीग्राम) में डीएनए वैक्सीन का आईएम + जेट इंजेक्शन सीरियाई हैम्स्टर्स को प्रतिरक्षित कर सकता है (ब्रोकाटो एट अल. 2021)। तीन खुराक में एस प्रोटीन का उपयोग करने वाले एक अन्य डीएनए वैक्सीन ने रीसस मकाक (यादव एट अल. 2021) की रक्षा की। C57BL/6 चूहों में तीन खुराक (सप्ताह 0, 2, और 4) के लिए हेपेटाइटिस बी वायरस प्रीएस1 एमिनो-टर्मिनल और आईएम इंजेक्शन के साथ आरबीडी के संलयन ने हास्य और सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को उकसाया (जियोंग एट अल। 2021)। इसके अतिरिक्त, रीसस मकाक में 0, 2 और 8 सप्ताह में तीन खुराक में एस प्रोटीन प्लास्मिड डीएनए और एस 1 सबयूनिट (पुनः संयोजक प्रोटीन) के आईएम इंजेक्शन ने न्यूट्रलाइजिंग एंटीबॉडीज को उत्तेजित किया (प्रोम्पेटचरा एट अल। 2021)। आईसीआर चूहों में तीन खुराक (सप्ताह 0, 2, और 4) में एस प्रोटीन के आईएम + ईपी इंजेक्शन ने हास्य और सेलुलर प्रतिक्रियाओं को उत्तेजित किया (ली एट अल। 2021)। नैदानिक ​​​​परीक्षणों में अन्य डीएनए टीकों में जून 2022 में चरण I/II में एस प्रोटीन शामिल है (एनसीटी04445389, 18-50 वर्ष की आयु के वयस्कों में आईएम मार्ग), जुलाई 2021 (एनसीटी04463472, 20-60 वर्ष की आयु के वयस्कों में आईएम मार्ग), सितंबर 2021 (एनसीटी04527081, 20-65 साल के वयस्कों में आईएम मार्ग), और चरण I (एनसीटी04336410, 18 साल और उससे अधिक उम्र के वयस्कों में आईडी मार्ग), फरवरी 2022 (एनसीटी04334980, 18 साल और उससे अधिक उम्र के वयस्कों में मौखिक) और जून 2021 ( NCT04591184, 18-84 वर्ष के वयस्कों में आईएम मार्ग)। इसके अतिरिक्त, नैदानिक ​​​​परीक्षणों में एमआरएनए टीकों में नवंबर 2021 में चरण II (एनसीटी04515147, आईएम, 18-60 वर्ष पुराना), दिसंबर 2022 में चरण II-III (एनसीटी04368728, 18-85 वर्ष के वयस्कों में आईएम), और चरण I शामिल थे। जून 2021 में (एनसीटी04566276, 18-75 वर्ष के वयस्कों में आईएम)। COVID-eVax एक RBD-आधारित वैक्सीन थी जिसने 38 दिनों के बाद चूहों, फेरेट्स और चूहों में पर्याप्त प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्राप्त की (Conforti et al. 2022)। स्पाइक और न्यूक्लियोकैप्सिड प्रोटीन को एन्कोड करने वाले दो (X-19 और GX-19N) डीएनए टीकों का मूल्यांकन 19-49 वर्ष की आयु के वयस्कों के बीच चरण I परीक्षणों में किया गया था और टीकाकरण की दूसरी खुराक में बाध्यकारी एंटीबॉडी का पता लगाया गया था। इन टीकों की सुरक्षा और सहनशीलता की पुष्टि की गई, जहां GX-19N ने टी कोशिकाओं और एंटीबॉडी प्रतिक्रियाओं के उच्च स्तर को प्रेरित किया (Ahn et al. 2022)। एक Xcl1-SARS-CoV-2 स्पाइक फ्यूजन डीएनए वैक्सीन ने अकेले इन विट्रो और इन विवो (क्यूई एट अल) में प्लास्मिड युक्त स्पाइक जीन की तुलना में एंटीबॉडी और टी सेल-मध्यस्थ प्रतिक्रियाओं की उच्च दर प्राप्त की। 2022). हाल ही में बनाया गया बैकुलोवायरल COVID-19 डेल्टा DNA वैक्सीन 100% चूहों को COVID से बचा सकता है-19 (Jang et al. 2023)। SARS-CoV-2 RBD (Lin-CovideVax) को एन्कोड करने वाला एक रैखिक डीएनए (linDNA) एंटीबॉडी और टी सेल प्रतिक्रिया प्राप्त करने और सुरक्षा प्रदान करने में सक्षम था और इसमें कोई प्रतिकूल प्रभाव नहीं था (Conforti et al. 2023)। तालिका 1 नैदानिक ​​​​परीक्षणों और COVID के विरुद्ध स्वीकृत न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीकों को दर्शाती है। अद्यतन आंकड़ों के अनुसार, दुनिया भर में 229,820,324 व्यक्तियों को कोविड के टीके मिले हैं, जिनमें से अफ्रीकी देशों के लोगों में टीकाकरण की दर कम है (https://www.usnews.com/news/coronavirus-and -वैक्सीन-न्यूज़, https://www.bloomberg.com/graph ics/covid-vaccine-tracker-global-distribution/)। तदनुसार, टीकाकरण दर विभिन्न क्षेत्रों/इलाकों की आर्थिक स्थितियों से जुड़ी है।

COVID‑19 टीकों के लिए संभावित सुरक्षा चिंताएँ

प्रत्येक विकसित निवारक या रोगनिरोधी टीके में सुरक्षा की निगरानी आवश्यक पहलुओं में से एक है। एमआरएनए वैक्सीन उत्पादन प्रक्रियाओं में जहरीले रसायनों या सेल कल्चर के उपयोग की आवश्यकता नहीं होती है, इसलिए इसे एक सुरक्षित प्लेटफॉर्म के रूप में जाना जाता है। कम विनिर्माण समय सूक्ष्मजीवों द्वारा संदूषण के जोखिम को भी कम करता है (वांग एट अल. 2020)। सबसे आम तौर पर बताए गए प्रभावों में सिरदर्द, थकान और अन्य प्रणालीगत गंभीर घटनाएं शामिल हैं, जैसे बुखार, ठंड लगना, मायलगिया, उल्टी, पेट दर्द और दुर्लभ दस्त की रिपोर्ट। हालाँकि, एमआरएनए वैक्सीन प्राप्तकर्ताओं में कोई मृत्यु नहीं देखी गई है (चैपिन-बार्डेल्स एट अल. 2021; स्कोव्रोन्स्की और डी सेरेस 2021)। कुछ प्रणालीगत दुष्प्रभाव, जैसे एनाफिलेक्सिस, आमतौर पर एलर्जी के इतिहास वाले व्यक्तियों में रिपोर्ट किए जाते हैं और प्रति मिलियन खुराक पर 2.5-11.1 मामले होने का अनुमान है (शिमाबुकुरो एट अल। 2021)। दूसरों की तुलना में कम उम्र के लोगों में मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया उच्च प्रणालीगत घटनाओं को जन्म दे सकती है और पहली खुराक की तुलना में दूसरी वैक्सीन खुराक के इंजेक्शन के बाद अधिक दुष्प्रभाव सामने आते हैं (पुरुष 2021; स्कोव्रोन्स्की और डी सेरेस 2021)। इसके अलावा, इंजेक्शन स्थल पर दर्द, लालिमा और सूजन को सबसे स्थानीय दुष्प्रभाव (आनंद और स्टैहेल 2021) के रूप में बताया गया है। फाइजर/बायोएनटेक और मॉडर्ना सहित स्वीकृत एमआरएनए टीकों के पर्याप्त सबूतों के आधार पर, गर्भावस्था में गर्भपात का कोई जोखिम नहीं (दर=0%) प्रदर्शित किया गया है (पुरुष 2021)। उल्लेखनीय रूप से, डीएनए टीके काफी सुरक्षित हैं, लेकिन हमेशा प्रतिरक्षात्मक नहीं होते हैं; इसलिए पर्याप्त प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए अतिरिक्त खुराक की आवश्यकता होती है। ह्यूमरल प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया मानव परीक्षणों में सुसंगत नहीं रही है, जबकि सेलुलर प्रतिरक्षा अधिक सामान्य लगती है। तदनुसार, वृद्ध और युवा आबादी के बीच डीएनए टीकों की सुरक्षा अधिक अनुकूल है (लेजरवुड एट अल. 2011; हाउसर एट अल. 2018; कार्टर एट अल. 2019)। सुरक्षा संबंधी चिंताएं मेजबान की जर्मलाइन और दैहिक कोशिकाओं में ट्रांसफ़ेक्टेड डीएनए के संभावित एकीकरण का संकेत देती हैं। इन मामलों में, जीन अभिव्यक्ति का विनियमन संभवतः कई महत्वपूर्ण उत्परिवर्तनों के साथ होता है। फिर भी, केवल एक्स्ट्राक्रोमोसोमल और कमी वाले क्रोमोसोमल एकीकरण प्लास्मिड का उपयोग आमतौर पर डीएनए वैक्सीन विकास में किया जाता है। इसके अलावा, अधिकांश प्लास्मिड प्रशासन स्थल पर रहते हैं (शाल्क एट अल. 2006)। हाल ही में एक व्यवस्थित समीक्षा और मेटा-विश्लेषण से पता चला है कि एमआरएनए टीके अन्य प्लेटफार्मों (कौहपायेह और अंसारी 2022) की तुलना में उच्च प्रतिकूल घटनाओं से जुड़े हैं। हाल ही में, एक 23 साल की महिला में BNT162b2 mRNA वैक्सीन से जुड़े मायोसिटिस का एक दुर्लभ मामला देखा गया (मैगन एट अल. 2022)। डीएनए मिथाइलेशन और संबंधित एपिजेनेटिक परिवर्तन भी डीएनए और एमआरएनए टीकों की प्रभावकारिता को बिगाड़ते हैं (पैंग एट अल. 2022)। उल्लेखनीय रूप से, कई अनुमोदित न्यूक्लिक एसिड टीके (ZyCoV-D, डीएनए प्लास्मिड वैक्सीन इंट्राडर्मली उपयोग किया जाता है, भारत), BNT162b2 (mRNA, 2 खुराक, जर्मनी), mRNA - 1273 (मॉडर्ना, यूएसए, 2 खुराक), ARCoV (WALVAX, चीन) और क्लिनिकल परीक्षण जिनमें 302-कोविड19 (डीएनए प्लास्मिड वैक्सीन, चरण II/III इंट्रामस्क्युलर, जापान), आईएनओ-4800 (डीएनए प्लास्मिड, चरण II/III, इंट्राडर्मल, चीन), जीएक्स{{36) शामिल हैं। }}एन (डीएनए वैक्सीन, जेनेक्सिन, चरण II/III), कोविजेनिक्स वैक्स-001 (डीएनए वैक्सीन, एंटोस फार्मास्यूटिकल्स, चरण I/II, इंट्रामस्क्युलर), सीओवीआईडी-ईवैक्स (डीएनए वैक्सीन, चरण I/II, इंट्रामस्क्युलर) , रोम) और बीएसीटीआरएल-स्पाइक (डीएनए वैक्सीन, चरण I, मौखिक, सिम्विवो) विकसित किए गए हैं (शेरिडन 2021; लियू और ये 2022ए)। इन टीकों ने GX{{42}N और AG{{43} न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीकों के कुछ प्रतिकूल प्रभावों में दर्द, लिम्फैडेनोपैथी, एरिथेमा, लालिमा, सूजन, मतली, थकान, आर्थ्राल्जिया, मायलगिया, बुखार, कार्डियोरेस्पिरेटरी अरेस्ट, स्ट्रोक, अतिसंवेदनशीलता प्रतिक्रिया, अल्कोहलिक यकृत रोग, बेल्स पाल्सी शामिल हैं। , पैरॉक्सिस्मल वेंट्रिकुलर अतालता और मृत्यु (नॉरक्विस्ट एट अल. 2012; मैकनील और डेस्टेफ़ानो 2018; बैडेन एट अल. 2021; मोमिन एट अल. 2021; लियू और ये 2022बी, 2022ए)।

फेनिलथेनॉल ग्लाइकोसाइड सिस्टैंच डेजर्टिकोला का मुख्य सक्रिय घटक है

निष्कर्ष

तेजी से बढ़ रही कोविड महामारी ने इस बीमारी को रोकने के लिए कुशल टीके विकसित करने की आवश्यकता को पूरा नहीं किया है। यद्यपि जानवरों में डीएनए टीकों की प्रतिरक्षात्मकता स्वीकार्य है, मनुष्यों में नैदानिक ​​​​सत्यापन आवश्यक है। आरएनए टीके डीएनए टीकों की तुलना में उचित प्रतिरक्षाविज्ञानी विशेषताएं और काफी लाभ प्रदान कर सकते हैं। आरएनए की अस्थिर प्रकृति की समस्याओं को इसके क्षरण को रोकने के लिए उचित भंडारण दृष्टिकोण और फॉर्मूलेशन का उपयोग करके संबोधित किया गया है। टीके की सुरक्षा भी महत्वपूर्ण है और अधिक दक्षता के लिए इससे समझौता नहीं किया जा सकता। कोविड प्रसार को नियंत्रित करने के लिए न्यूक्लिक एसिड-आधारित टीके स्वीकृत हैं। प्रतिभागियों का फॉलो-अप जारी रखा जाना चाहिए। न्यूक्लिक एसिड-आधारित कोविड वैक्सीन के दुष्प्रभावों के बारे में सीखने की आवश्यकता है। इसके अलावा, चिंता के नए वेरिएंट के फिर से उभरने को देखते हुए वैक्सीन पुनर्मूल्यांकन और पॉलीवैलेंट वैक्सीन विकास, या पैन-कोरोनावायरस रणनीतियाँ आशाजनक हैं।

तालिका 1 क्लिनिकल परीक्षण और स्वीकृत कोविड टीके और उनकी विशेषताएं

संदर्भ

अब्देलमगेद एमआई एट अल (2020) मानव सीओवीआईडी ​​​​के ई प्रोटीन के खिलाफ मल्टीएपिटोप-आधारित पेप्टाइड वैक्सीन का डिजाइन -19: एक इम्यूनो सूचना विज्ञान दृष्टिकोण। इंट जे बायोमेड क्लिन गुदा। https://doi.org/ 10.1155/2020/2683286

अबेरा जी, बरहानु जी, टेकेवे ए (2012) राइबोजाइम: संभावित फार्मास्युटिकल अनुप्रयोगों के साथ न्यूक्लिक एसिड एंजाइम: एक समीक्षा। फार्माकोफोर 3:164-178

एएचएन जेवाई एट अल (2022) स्पाइक या स्पाइक और न्यूक्लियोकैप्सिड प्रोटीन के कोडिंग क्षेत्रों वाले दो पुनः संयोजक डीएनए सीओवीआईडी ​​-19 टीकों की सुरक्षा और प्रतिरक्षात्मकता: दो ओपन-लेबल, गैर-यादृच्छिक, चरण 1 परीक्षणों का एक अंतरिम विश्लेषण स्वस्थ वयस्कों में. लैंसेट माइक्रोब 3:e173–e183. https://doi.org/10.1016/ एस2666-5247(21)00358-X

ऐहारा एच (1998) मियाज़ाकी जे. विवो में इलेक्ट्रोपो राशन द्वारा मांसपेशियों में जीन स्थानांतरण। नेट बायोटेक्नोल 16:867–870. https://doi.org/10. 1038/एनबीटी0998-867

अल्बर्टर एम एट अल (2017) स्वस्थ वयस्कों में एमआरएनए रेबीज वैक्सीन की सुरक्षा और प्रतिरक्षात्मकता: एक ओपन-लेबल, गैर-यादृच्छिक, संभावित, मानव चरण 1 नैदानिक ​​​​परीक्षण। द लांसेट 390:1511-1520।https://doi.org/10.1016/s0140-6736(17)31665-3

अमांटे डीएच एट अल (2015) सेलेक्ट्रा {{2}पी, एक पोर्टेबल अगली पीढ़ी के त्वचीय इलेक्ट्रोपोरेशन डिवाइस का उपयोग करके इलेक्ट्रोपोरेशन-एन्हांस्ड प्लास्मिड डिलीवरी के त्वचा ट्रांसफेक्शन पैटर्न और अभिव्यक्ति कैनेटीक्स। मानव जीन थेरेपी विधियाँ 26:134-146। https:// doi.org/10.1089/hgtb.2015.020

आनंद पी, स्टेहेल वीपी (2021) कोविड की सुरक्षा की समीक्षा करें -19 एमआरएनए वैक्सीन सिने: एक समीक्षा। रोगी सैफ सर्जन 15:20. https://doi.org/10.1186/ s13037-021-00291-9

बैडेन एलआर एट अल (2021) एमआरएनए -1273 SARS CoV -2 वैक्सीन की प्रभावकारिता और सुरक्षा। एन इंग्लिश जे मेड 384:403-416। https://doi.org/10. 1056/एनईजेएमओए2035389

बेकर पीडी, नोएर्डर एम, गुज़मैन सीए (2008) आनुवंशिक टीकाकरण: डीएनए वैक्सीन वितरण वाहनों के रूप में बैक्टीरिया। हम वैक्सीन 4:189-202।https://doi.org/10.4161/hv.4.3.6314

बोराह पी एट अल (2021) सीओवीआईडी ​​​​के लिए आरएनए वैक्सीन उम्मीदवारों पर परिप्रेक्ष्य -19। फ्रंट मोल बायोसि. https://doi.org/10.3389/fmolb। 2021.635245

ब्रोकाटो आरएल एट अल (2021) जंगली प्रकार और इम्यूनोसप्रेस्ड सीरियाई हैम्स्टर्स में SARS-CoV -2 डीएनए वैक्सीन की सुरक्षात्मक प्रभावकारिता। एनपीजे टीके 6:1-7.https://doi.org/10.1038/s41541-020-00279-z

ब्रूसो एच (2020) एक कोविड वैक्सीन की दिशा में प्रयास। एनवायरन माइक्रोबायोल 22:4071-4084। https://doi.org/10.1111/1462-2920. 15225

बुचोलज़ यूजे एट अल (2004) सुरक्षात्मक प्रतिरक्षा के लिए गंभीर तीव्र श्वसन सिंड्रोम कोरोनोवायरस के संरचनात्मक प्रोटीन का योगदान। प्रोक नेटल एकेड साइंस 101:9804-9809। https://doi.org/ 10.1073/pnas.0403492101

कैम्पबेल जेडी (2017) सीपीजी सहायक 1018 का विकास: एक केस अध्ययन। वैक्सीन एडजुव. https://doi.org/10.1007/ 978-1-4939-6445-1-2

कार्टर सी एट अल (2019) जांच मौसमी इन्फ्यूएंजा हेमाग्लगुटिनिन डीएनए वैक्सीन की सुरक्षा और इम्युनोजेनेसिटी, इसके बाद स्वस्थ वयस्कों में इंट्राडर्मली या इंट्रा मस्कुलर रूप से प्रशासित त्रि-वैलेंट निष्क्रिय टीका: एक ओपन-लेबल यादृच्छिक चरण 1 नैदानिक ​​​​परीक्षण। प्लस वन 14:e0222178. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0222178

चैपिन-बार्डेल्स जे, जी जे, मायर्स टी (2021) एमआरएनए-आधारित सीओवीआईडी-19 टीकों की प्राप्ति के बाद रिएक्टोजेनेसिटी। जामा. https://doi. org/10.1001/jama.2021.5374

चेन वाई, चेंग एल, लियान आर, सोंग जेड, तियान जे (2021) कोविड -19 वैक्सीन अनुसंधान सुरक्षा, प्रभावकारिता, इम्यूनोइन्फॉर्मेटिक्स और वैक्सीन उत्पादन और वितरण पर केंद्रित है: वीओएसव्यूअर पर आधारित एक ग्रंथ सूची विश्लेषण। बायोसाइंस रुझान। https://doi.org/10.5582/bst.2021। 01061

चोई वाई, चांग जे (2013) वैक्सीन अनुप्रयोगों के लिए वायरल वैक्टर। क्लिन एक्सप वैक्सीन रेस 2:97।https://doi.org/10.7774/cevr.2013.2.2.97

चौधरी एमए, हुसैन एन, काशेम एमए, शाहिद एमए, आलम ए (2020) सीओवीआईडी ​​​​में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया -19: एक समीक्षा। जे सार्वजनिक स्वास्थ्य को संक्रमित करता है। https://doi.org/10.1016/j.jiph.2020.07.001

कोबन सी, कोबियामा के, जौनाई एन, तोज़ुका एम, इशी केजे (2013) डीएनए वैक्सीन सिने: एक साधारण डीएनए सेंसिंग मामला? हम वैक्सीन इम्यूनोथर 9:2216-2221।https://doi.org/10.4161/hv.25893

कॉनफोर्टी ए एट अल (2022) सीओवीआईडी-ईवैक्स, एक इलेक्ट्रोपोरेटेड डीएनए वैक्सीन उम्मीदवार जो सार्स-सीओवी -2 आरबीडी को एन्कोडिंग करता है, पशु मॉडल में सुरक्षात्मक प्रतिक्रिया प्राप्त करता है। मोल थेर 30:311-326. https://doi. org/10.1016/j.ymthe.2021.09.011

कॉनफोर्टी ए, सांचेज़ ई, साल्वाटोरी ई, लियोन एल, कॉम्पैग्नोन एम, पिंटो ई एट अल (2023) एक रैखिक डीएनए वैक्सीन उम्मीदवार जो SARS CoV -2 रिसेप्टर बाइंडिंग डोमेन को एन्कोड करता है, घरेलू बिल्लियों में शक्तिशाली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और निष्क्रिय एंटीबॉडी प्राप्त करता है। मोल थेर-मेथो क्लिनिक देव 28:238-248। https://doi.org/10.1016/j.omtm.2022। 12.015

क्रोयल एम, चेंग एक्स, विल्सन जे (2001) ऐसे फॉर्मूलेशन का विकास जो जीन थेरेपी के लिए वायरल वैक्टर की भौतिक स्थिरता को बढ़ाते हैं। जीन थेर 8:1281-1290।https://doi.org/10.1038/sj.gt.3301527

सीयू वाई एट अल (2013) इलेक्ट्रोपोरेशन इन सीटू द्वारा स्व-प्रवर्धित एमआरएनए टीकों की उन्नत डिलीवरी और क्षमता। टीके 1:367-383. https://doi.org/10.3390/vaccines1030367